CN110117527A - 一种干细胞代谢废物的强化排出方法 - Google Patents

一种干细胞代谢废物的强化排出方法 Download PDF

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Abstract

一种干细胞代谢废物的强化排出方法，本发明涉及干细胞代谢废物的排出方法。解决现有干细胞的大规模3D培养***中，干细胞代谢废物无法及时排出的问题。方法：一、将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；二、选择膜组件；三、加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中。本发明用于干细胞代谢废物的强化排出方法。

Description

一种干细胞代谢废物的强化排出方法
技术领域
本发明涉及干细胞代谢废物的排出方法。
背景技术
近年来，国际、国内干细胞市场发展迅速，干细胞临床治疗被大众认可与接受，干细胞需求不断提升。干细胞培养从2D向3D发展，努力扩大干细胞的生产量。在干细胞的大规模3D培养***中，为了有效保证干细胞充分生长就必须保证培养体系(干细胞培养器)内的干细胞代谢废物必须及时排出，否则就会影响干细胞生长、甚至造成干细胞死亡。单纯通过更换培养液能够解决干细胞代谢废物的排出，但同时会造成培养液的巨大浪费。
发明内容
本发明要解决现有干细胞的大规模3D培养***中，干细胞代谢废物无法及时排出的问题，而提供一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
一种干细胞代谢废物的强化排出方法是按以下步骤进行：
一、将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；
所述的含有干细胞代谢废物的培养液中，干细胞代谢废物为氨、乳酸类和二氧化碳中的一种或其中几种的混合；
当所述的干细胞代谢废物含氨时，含有干细胞代谢废物的培养液中氨的浓度大于3mmol/L；
当所述的干细胞代谢废物含乳酸类时，含有干细胞代谢废物的培养液中乳酸类的浓度大于24.8mmol/L；
当所述的干细胞代谢废物含二氧化碳时，含有干细胞代谢废物的培养液中二氧化碳的浓度大于40％；
二、选择膜组件；
三、建立加压循环***及干细胞代谢废物的排出***，加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；
四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中，即完成一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
本发明的有益效果是：
利用本发明将含有干细胞代谢废物的培养液置于一个缓冲容器中，利用膜技术将培养液中的干细胞代谢废物选择性移出，再向培养液中补加干细胞培养的营养组分，循环使用干细胞培养液，保证干细胞代谢废物的强化排出，培养液用量减少50％～75％，有效降低干细胞培养成本30％～75％。
本发明用于一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式一种干细胞代谢废物的强化排出方法是按以下步骤进行：
一、将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；
所述的含有干细胞代谢废物的培养液中，干细胞代谢废物为氨、乳酸类和二氧化碳中的一种或其中几种的混合；
当所述的干细胞代谢废物含氨时，含有干细胞代谢废物的培养液中氨的浓度大于3mmol/L；
当所述的干细胞代谢废物含乳酸类时，含有干细胞代谢废物的培养液中乳酸类的浓度大于24.8mmol/L；
当所述的干细胞代谢废物含二氧化碳时，含有干细胞代谢废物的培养液中二氧化碳的浓度大于40％；
二、选择膜组件；
三、建立加压循环***及干细胞代谢废物的排出***，加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；
四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中，即完成一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
本具体实施方式脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，补加营养组分后进入干细胞培养器为干细胞提供营养。
本具体实施方式使用特异性的选择透过膜完成特定干细胞代谢废物的排出。
本具体实施方式干细胞代谢废物的强化排出方法应用于干细胞培养领域。
本具体实施方式利用膜分离技术使干细胞培养液中的干细胞代谢废物选择性地排出，同时保留干细胞培养液中的营养组分(功能组分)循环使用，有效降低干细胞的培养成本；核心是针对干细胞代谢物选择最适宜的分离膜。
本具体实施方式的有益效果是：利用本具体实施方式将含有干细胞代谢废物的培养液置于一个缓冲容器中，利用膜技术将培养液中的干细胞代谢废物选择性移出，再向培养液中补加干细胞培养的营养组分，循环使用干细胞培养液，保证干细胞代谢废物的强化排出，培养液用量减少50％～75％，有效降低干细胞培养成本30％～75％。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤三中所述的特异性选择透过膜为中空纤维膜或卷式膜。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二之一不同的是：步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中氨的浓度小于2mmol/L；步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中乳酸类的浓度小于24.8mmol/L；步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中二氧化碳的浓度小于40％。其它与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：步骤三中所述的加压循环***为控制阀与蠕动泵配合形成的加压循环***。其它与具体实施方式一至三相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是：步骤三中所述的回收装置为装有回收液的回收装置。其它与具体实施方式一至四相同。
采用以下实施例验证本发明的有益效果：
实施例一：
一种干细胞代谢废物的强化排出方法是按以下步骤进行：
一、在无菌的洁净培养环境中，将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；
所述的干细胞代谢废物为氨，含有干细胞代谢废物的培养液中氨的浓度大于3mmol/L；
二、选择膜组件；
三、建立加压循环***及干细胞代谢废物的排出***，加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；
四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中，即完成一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中氨的浓度小于2mmol/L；
步骤三中所述的特异性选择透过膜为脱除氨的中空纤维膜；步骤三中所述的特异性选择透过膜购买于国初科技(厦门)有限公司；
步骤三中所述的加压循环***为控制阀与蠕动泵配合形成的加压循环***。
步骤二中所述的回收装置为装有酸回收液的回收装置。
本实施例方法需要保持***无菌。
本实施例有效提高干细胞培养液的使用效率，常规的干细胞培养液用量从15升/批次降低至4升/批次，有效降低干细胞培养成本，七千万个干细胞的培养成本从大约8万降低至4万。
实施例二：
一、在无菌的洁净培养环境中，将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；
所述的干细胞代谢废物为乳酸，含有干细胞代谢废物的培养液中乳酸的浓度大于30mmol/L；
二、选择膜组件；
三、建立加压循环***及干细胞代谢废物的排出***，加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；
四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中，即完成一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中乳酸类的浓度小于24.8mmol/L；
步骤三中所述的特异性选择透过膜为脱除乳酸的卷式膜；步骤三中所述的特异性选择透过膜购买于国初科技(厦门)有限公司；
步骤三中所述的加压循环***为控制阀与蠕动泵配合形成的加压循环***。
本实施例方法需要保持***无菌。
本实施例有效提高干细胞培养液的使用效率，常规的干细胞培养液用量从14升/批次降低至4升/批次，有效降低干细胞培养成本，七千万个干细胞的培养成本从大约6～8万降低至1.8～2.4万。
实施例三：
一种干细胞代谢废物的强化排出方法是按以下步骤进行：
一、在无菌的洁净培养环境中，将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；
所述的干细胞代谢废物为二氧化碳，含有干细胞代谢废物的培养液中二氧化碳的浓度大于40％；
二、选择膜组件；
三、建立加压循环***及干细胞代谢废物的排出***，加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；
四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中，即完成一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中二氧化碳的浓度小于40％；
步骤三中所述的特异性选择透过膜为脱除二氧化碳的中空纤维膜；步骤三中所述的特异性选择透过膜购买于国初科技(厦门)有限公司；
步骤二中所述的加压循环***为控制阀与蠕动泵配合形成的加压循环***。
步骤三中所述的回收装置为装有碱回收液的回收装置。
本实施例方法需要保持***无菌。
本实施例有效提高干细胞培养液的使用效率，常规的干细胞培养液用量从15升/批次降低至5升/批次，有效降低干细胞培养成本，七千万个干细胞的培养成本从大约6万左右降低至2万左右。
实施例四：
一种干细胞代谢废物的强化排出方法是按以下步骤进行：
一、在无菌的洁净培养环境中，将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；
所述的干细胞代谢废物为氨、乳酸类和二氧化碳的混合，含有干细胞代谢废物的培养液中氨的浓度大于3mmol/L；含有干细胞代谢废物的培养液中乳酸类的浓度大于30mmol/L；含有干细胞代谢废物的培养液中二氧化碳的浓度大于40％；
二、选择膜组件；
三、建立加压循环***及干细胞代谢废物的排出***，加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；
四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中，即完成一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中氨的浓度小于2mmol/L；步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中乳酸类的浓度小于24.8mmol/L；步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中二氧化碳的浓度小于40％；
步骤二中所述的特异性选择透过膜为脱除氨的中空纤维膜、脱除乳酸的卷式膜及脱除二氧化碳的中空纤维膜；步骤二中所述的特异性选择透过膜购买于国初科技(厦门)有限公司；
步骤二中所述的加压循环***为控制阀与蠕动泵配合形成的加压循环***。
步骤三中所述的回收装置为装有碱回收液的回收装置。
本实施例方法需要保持***无菌。
本实施例有效提高干细胞培养液的使用效率，常规的干细胞培养液用量从15升/批次降低至4升/批次，有效降低干细胞培养成本，七千万个干细胞的培养成本从大约6万左右降低至1.7万左右。

Claims (5)

1.一种干细胞代谢废物的强化排出方法，其特征在于一种干细胞代谢废物的强化排出方法是按以下步骤进行：
一、将含有干细胞代谢废物的培养液引入缓冲容器中；
所述的含有干细胞代谢废物的培养液中，干细胞代谢废物为氨、乳酸类和二氧化碳中的一种或其中几种的混合；
当所述的干细胞代谢废物含氨时，含有干细胞代谢废物的培养液中氨的浓度大于3mmol/L；
当所述的干细胞代谢废物含乳酸类时，含有干细胞代谢废物的培养液中乳酸类的浓度大于30mmol/L；
当所述的干细胞代谢废物含二氧化碳时，含有干细胞代谢废物的培养液中二氧化碳的浓度大于40％；
二、选择膜组件；
三、建立加压循环***及干细胞代谢废物的排出***，加压循环***使得含有干细胞代谢废物的培养液通过膜组件中的特异性选择透过膜，然后将脱除干细胞代谢物的培养液返回到缓冲容器中，干细胞代谢废物的排出***将分离出的干细胞代谢废物输送到回收装置中；
四、对脱除干细胞代谢物的培养液补加营养组分，然后进入干细胞培养器中，即完成一种干细胞代谢废物的强化排出方法。
2.根据权利要求1所述的一种干细胞代谢废物的强化排出方法，其特征在于步骤三中所述的特异性选择透过膜为中空纤维膜或卷式膜。
3.根据权利要求1所述的一种干细胞代谢废物的强化排出方法，其特征在于步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中氨的浓度小于2mmol/L；步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中乳酸类的浓度小于24.8mmol/L；步骤三中所述的脱除干细胞代谢物的培养液中二氧化碳的浓度小于40％。
4.根据权利要求1所述的一种干细胞代谢废物的强化排出方法，其特征在于步骤三中所述的加压循环***为控制阀与蠕动泵配合形成的加压循环***。
5.根据权利要求1所述的一种干细胞代谢废物的强化排出方法，其特征在于步骤三中所述的回收装置为装有回收液的回收装置。
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