CN110100740A - 一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法。该方法主要包括如下步骤：首先采集生长健壮无病虫害的二岐鹿角蕨叶被的成熟孢子，并灭菌。将灭菌后的孢子接种到启动培养基中培养，待孢子萌发变绿后接种到增殖培养基中，在培养室内培养4～6周，丛生芽生成，选取生长健壮的丛生芽，将其切成单芽转接到生根培养基中，在培养室内培养3～5周，得到生根的二岐鹿角蕨无菌苗。将生长健壮的二岐鹿角蕨无菌苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中培植。该方法中组培所用培养基配方简单，组培流程简便，组培时间缩短，繁殖系数高，成活率高，可为二岐鹿角蕨工厂化育苗及其深加工提供技术支持。

Description

一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法
技术领域
本发明属于二歧鹿角蕨繁殖栽培技术领域，尤其涉及一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法。
背景技术
二歧鹿角蕨(学名：Platycerium bifurcatum(Cav.)C.Chr.)为鹿角蕨科鹿角蕨属下的一个种。叶丛生，下垂，顶端分叉呈凹状深裂，形如“鹿角”，故名。株高40～50cm。叶有营养叶(不育叶、裸叶)和孢子叶(育叶、实叶)两种。不育叶圆形而凸出，边缘波状，新叶绿白色，老叶棕色。主要功能除了抓住支承物之外，还可收集从树上掉下来的碎屑，把它分解成养分，并包裹存根周围，保护蕨根和贮蓄水分。育叶丛生，灰绿色。分叉成窄裂片。孢子囊在凹处下开始上延至裂片的顶端。
二歧鹿角蕨株形奇异，姿态优美，在厅室的阴暗无光处也可生长。它是观赏蕨中姿态最奇特的一类，属附生性观赏蕨。鹿角蕨可布置于公园、植物园、商店、居室、窗台等地方的装饰，贴生于古老枯木或装饰于吊盆，作悬吊式或镶挂式布置，是室内立体绿化的好材料。
目前，二歧鹿角蕨主要通过分株和孢子繁殖，但成活率都不是很高，远不能满足市场的需求。通过组织培养技术进行繁殖，能有效提高其繁殖系数，目前虽有一些对二岐鹿角蕨的研究报道，如专利CN101133704A，但过程大都复杂，组培耗时28周以上，耗时耗力，可操作性不强。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法。
为达上述目的，本发明采用如下的技术方案：
一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法，包括如下步骤：
(1)外植体灭菌：采集生长健壮无病虫害的二岐鹿角蕨叶被的成熟孢子，用称量纸分装包成小纸包，放置在超净工作台上，用无菌ga3溶液浸泡，后用75％酒精和0.1％升汞灭菌，无菌水冲洗；
(2)启动培养：将步骤(1)中灭菌后的孢子接种到启动培养基中，培养4～7周后，孢子萌发变绿；
(3)增殖培养：将步骤(2)中萌发变绿的孢子接种到增殖培养基中，在培养室内培养4～6周后，丛生芽生成，待其达到一定株高可进行下一步操作；
(4)生根培养：选取步骤(3)中生长健壮的丛生芽，将其切成单芽转接到生根培养基中培养，得到生根的二岐鹿角蕨无菌苗；
(5)炼苗移栽：将步骤(4)中生长健壮的二岐鹿角蕨无菌苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床基质中培植。
进一步的，所述步骤(1)中无菌ga3溶液浸泡时间为5min；75％酒精灭菌时间为40～60s；0.1％升汞灭菌时间为6～8min，无菌水冲洗次数为4～6次。
进一步的，所述步骤(2)中培养时间为4～7周；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。
进一步的，所述步骤(2)中启动培养基成分为MS、6-BA 1.5mg/L、NAA0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2。
进一步的，所述步骤(3)中培养时间为4～6周；丛生芽株高需达到1～3cm；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。
进一步的，所述步骤(3)中增殖培养基成分为MS、6-BA 0.5mg/L、NAA0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2。
进一步的，所述步骤(4)中培养时间为3～5周；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。
进一步的，所述步骤(4)中生根培养基成分为1/2MS、IBA 0.2mg/L、蔗糖20g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2。
进一步的，所述步骤(5)中大棚内温度为18～25℃；苗床基质为腐殖质混合珍珠岩，混合比例为2:1。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明提供的二岐鹿角蕨组培快繁方法，使用的培养基配方简单，培养基成本低，而且培养流程简便，组培耗时短，能快速获得遗传性状一致的二岐鹿角蕨无菌苗。
(2)本发明提供的二岐鹿角蕨组培快繁方法，繁殖系数较高为6～10，提高了二岐鹿角蕨的繁殖效率。
附图说明
图1为增殖培养基中生成的丛生芽；
图2为生根培养基中二岐鹿角蕨无菌苗；
图3为生根培养基中二岐鹿角蕨无菌苗的根系；
图4为炼苗移栽的成活苗。
具体实施方式
实施例1
采集生长健壮无病虫害的二岐鹿角蕨叶被的成熟孢子，用称量纸分装包成小纸包，放置在超净工作台上，用无菌ga3溶液浸泡5min，后用75％酒精灭菌40～60s,0.1％升汞灭菌6～8min，无菌水冲洗4～6次。将灭菌后的孢子接种到启动培养基中，培养室培养4～7周后，孢子萌发变绿。将萌发变绿的孢子接种到增殖培养基中，在培养室内培养4～6周，丛生芽生成，如图1所示，株高1～3cm，增殖系数为6～10。选取生长健壮的丛生芽，将其切成单芽转接到生根培养基中，在培养室内培养3～5周，得到生根的二岐鹿角蕨无菌苗，如图2和图3所示。将生长健壮的二岐鹿角蕨无菌苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中，注意遮光降温保湿，控制大棚内温度为18～25℃，成活苗如图4所示，成活率可达90％。
本实施例中所用到的培养基成分、移栽基质成分和培养室培养条件如下：
启动培养基成分为MS、6-BA 1.5mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH5.8～6.2。
增殖培养基成分为MS、6-BA 0.5mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH5.8～6.2。
生根培养基成分为1/2MS、IBA 0.2mg/L、蔗糖20g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2。
培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。
移栽基质为腐殖质混合珍珠岩，混合比例为2:1。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (7)

1.一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)外植体灭菌：采集生长健壮无病虫害的二岐鹿角蕨叶被的成熟孢子，用称量纸分装包成小纸包，放置在超净工作台上，用无菌ga3溶液浸泡，后用75％酒精和0.1％升汞灭菌，无菌水冲洗；
(2)启动培养：将步骤(1)中灭菌后的孢子接种到启动培养基中，培养室中培养4～7周后，孢子萌发变绿，所述的启动培养基成分为MS、6-BA 1.5mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2；
(3)增殖培养：将步骤(2)中萌发变绿的孢子接种到增殖培养基中，在培养室内培养4～6周后，丛生芽生成，待其达到一定株高可进行下一步操作，所述的增殖培养基成分为MS、6-BA 0.5mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2；
(4)生根培养：选取步骤(3)中生长健壮的丛生芽，将其切成单芽转接到生根培养基中，培养室中培养，得到生根的二岐鹿角蕨无菌苗，所述的生根培养基成分为1/2MS、IBA0.2mg/L、蔗糖20g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2；
(5)炼苗移栽：将步骤(4)中生长健壮的二岐鹿角蕨无菌苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床基质中培植。
2.如权利要求1所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：所述步骤(1)中无菌ga3溶液浸泡时间为5min；75％酒精灭菌时间为40～60s；0.1％升汞灭菌时间为6～8min，无菌水冲洗次数为4～6次。
3.如权利要求1所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：所述步骤(2)中培养时间为4～7周；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。
4.如权利要求1所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：所述步骤(3)中培养时间为4～6周；丛生芽株高需达到1～3cm；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。
5.如权利要求1所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：所述步骤(4)中培养时间为3～5周；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。
6.如权利要求1所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：所述步骤(5)中大棚内温度为18～25℃；苗床基质为腐殖质混合珍珠岩，混合比例2:1。
7.如权利要求1～6任一项所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法在二歧鹿角蕨繁殖栽培技术领域中的应用。
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