CN109939216A

CN109939216A - 一种抗肿瘤药物组合物、制剂及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN109939216A
Application number: CN201910005808.1A
Authority: CN
Inventors: 田从魁; 刘瑞炯; 孟嘉星; 孟青霞; 刘雨
Original assignee: Enshi Xiangyou Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Enshi Xiangyou Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2019-01-03
Filing date: 2019-01-03
Publication date: 2019-06-28

Abstract

本发明公开了一种抗肿瘤药物组合物、制剂及其制备方法和应用。该组合物包括以下原料：药食同源植物和多肽，所述药食同源植物和多肽的质量比为100:(0.5‑5)，药食同源植物包括蒲公英、姜黄、马齿苋、红薯、鱼腥草、薏苡仁、茯苓、人参、金银花、余甘子、桃仁、莲子、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜和蛹虫草中的一种、两种或更多种，多肽选自玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽和小麦肽中的一种、两种或更多种。本发明药物组合物采用的原料均来自“药食同源”的植物或菌类，在抗肿瘤方面有可靠的功效，且副作用很小。

Description

一种抗肿瘤药物组合物、制剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于中医保健领域，具体涉及一种抗肿瘤药物组合物、制剂及其制备方法和应用。

背景技术

目前肿瘤的治疗仍以手术、化疗和放疗为主，加强营养为辅。虽然手术、化疗和放疗能短暂的控制住肿瘤的恶化，但这些方法在***的同时，也给患者带来了很大的副作用，如脱发、恶心呕吐、身体虚弱等，并且这些方法也无法完全控制肿瘤的转移。在治疗成本上，大部分抗肿瘤药物每月的花费动则几千，甚至上万，给我国患者家庭带来了巨大的经济压力。

中医指出：“正气存内，邪不可干；邪之所凑，其气必虚”。这说明人体内正气充足，则邪气无法侵袭人体，而邪气是很多疾病的源头。人体自身的免疫力是识别和抵御邪气的最重要的防线，提高免疫力对各种疾病的治疗都有很大的帮助，特别是在***方面。很多植物既是中药又是食材，即为“药食同源” 植物。“药食同源”的说法开始于20世纪80年代，同样深受中国医学影响的日本在近代也有“医食同源，药食一如”的说法。“药食同源”这一概念实际是中国传统医学中食疗、药膳、养生等方面的思想反映，体现的是中国传统对药物和食物起源上的联系的认识，表现在药物的发现上。

古人对食药区分的认识基于对其性味强弱和厚薄不同。《千金要方》云“夫为医者，当须先洞晓病源，知其所犯，以食治之，食乃不愈，然后命药。药性刚烈，犹若御兵”，强调了药物性味猛烈，食物性味平缓。这种性质的差异也体现了古人认为食物对人体的调节功能和药物不同，药物性质强烈，而食物平和，常具有补益作用，主要体现在“食养”和“治未病”方面。如《千金要方》认为“人体平和，惟须好将养，勿妄服药。药势偏有所助，令人脏气不平，易受外患。夫含气之类，未有不资食以存生，而不知食之有成败，百姓日用而不知，水火至近而难识”，强调了“食养”的重要性，体现了现代保健的思想。

发明内容

本发明提供一种药物组合物，所述组合物可以包括以下原料：药食同源植物和多肽，所述药食同源植物和多肽的质量比可以为100:(0.5-5)；例如，质量比可以为100:(1-4)、100:(1-3)；示例性地，质量比可以为100:1、100:2、 100:3。

根据本发明的组合物，所述药食同源植物可以包括蒲公英、姜黄、马齿苋、红薯、鱼腥草、薏苡仁、茯苓、人参、金银花、余甘子、桃仁、莲子、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜和蛹虫草等中的一种、两种或更多种。优选地，所述药食同源植物包括蒲公英、姜黄、马齿苋、红薯、鱼腥草、薏苡仁、茯苓、人参、金银花、余甘子、桃仁、莲子、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜和蛹虫草。例如，当所述药食同源植物中包括两种或更多种植物时，以其中一种植物的质量为基准，其余任意种植物的质量可以为基准植物质量的0.2-5倍；优选地，可以为0.3-3 倍；示例性地，可以为1/3倍、1倍、3倍。

根据本发明的组合物，所述多肽可以选自玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽和小麦肽等中的一种、两种或更多种。优选地，所述多肽选自玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽和小麦肽的混合物。例如，当所述多肽中包括两种或更多种多肽时，以其中一种多肽的质量为基准，其余任意一种多肽的质量可以为基准多肽质量的0.5-2倍；优选地，可以为0.8-1.6倍；示例性地，可以为1倍、 1.2倍。

根据本发明的组合物，所述药物组合物的剂型可以是口服剂的形式，例如片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒剂、悬浮剂、糖浆剂、液体剂等；示例性地，所述药物组合物的剂型可以为颗粒剂、液体剂。

根据本发明的组合物，所述药物组合物还可任选地包含至少一种药学上可接受的辅料。例如，所述药学上可接受的辅料是制药领域中常用或已知的各种辅料，包括但不限于：稀释剂、粘合剂、抗氧化剂、pH调节剂、防腐剂、润滑剂、崩解剂等。例如，所述稀释剂选自乳糖、淀粉、纤维素衍生物、无机钙盐、山梨醇等。所述粘合剂例如：淀粉、明胶、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮等。例如，所述抗氧化剂选自维生素E、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、丁羟基茴香醚等。例如，所述pH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、柠檬酸、酒石酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)、乙酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠等。例如，所述防腐剂选自对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、间甲酚、苯扎氯铵等。例如，所述润滑剂选自硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉等。例如，所述崩解剂选自淀粉、甲基纤维素、黄原胶、交联羧甲基纤维素钠等。

本发明还提供一种复方颗粒剂，所述颗粒剂由包括上述药物组合物的原料制备得到。

根据本发明的复方颗粒剂，所述复方颗粒剂的粒度为50-150目，例如80-120 目；示例性地，所述粒度为100目。

根据本发明的复方颗粒剂，所述复方颗粒剂中总多糖的含量可以为 400-500mg/g；例如400-450mg/g，410-430mg/g；示例性地，所述总多糖的含量可以为418.0mg/g、418.5mg/g、419.2mg/g。

根据本发明的复方颗粒剂，所述复方颗粒剂中氨基酸的含量可以为 18.0-25.0mg/g；例如20.0-22.0mg/g；示例性地，所述氨基酸的含量可以为20.6 mg/g、20.8mg/g、21.1mg/g。

根据本发明的复方颗粒剂，每100g所述复方颗粒剂中含有能量 1500-2200kJ；例如1550-2000kJ、1600-1800kJ；示例性地，含有能量1600kJ。

根据本发明的复方颗粒剂，每100g所述复方颗粒剂中含有脂肪1.1-1.8g，例如1.2-1.7g、1.3-1.6g；示例性地，含有脂肪1.5g。

根据本发明的复方颗粒剂，每100g所述复方颗粒剂中含有碳水化合物 80-110g，例如85-105g、90-100g；示例性地，含有碳水化合物95.5g。

根据本发明的复方颗粒剂，每100g所述复方颗粒剂中含有钠110-140mg，例如115-135mg、120-130mg；示例性地，含有钠130mg。

根据本发明的复方颗粒剂，所述复方颗粒剂的规格可以为5-100mg，例如 20-75mg、25-50mg。

根据本发明的复方颗粒剂，所述复方颗粒剂还包括包装袋，所述包装袋的材质可以为食品级塑料。

本发明还提供上述复方颗粒剂的制备方法，所述方法包括以下步骤：

(S1)所述药食同源植物的提取物粉末和所述多肽混合，制成软材；

(S2)所述软材过筛后，得到软颗粒；所述软颗粒烘干后，得到所述复方颗粒冲剂。

根据本发明的制备方法，(S1)步骤中，所述药食同源植物的提取物粉末的制备过程包括：干燥的药食同源植物经提取溶剂提取，得到提取液，所述提取液浓缩后，干燥得到所述提取物粉末。

例如，所述提取溶剂与所述药食同源植物的体积质量比(L/g)可以为 (10-50)：1，例如可以为(20-45)：1；示例性地，可以为30:1、40:1。

例如，所述提取溶剂可以为乙醇和/水，优选为乙醇和水的混合溶剂。当所述提取溶剂为乙醇和水的混合溶剂时，所述乙醇的质量分数可以为45-95％，例如50-80％、60-70％；示例性地，所述乙醇的质量分数为70％、80％。

例如，所述提取的温度可以为20-100℃；例如40-90℃、60-80℃；示例性地，所述温度可以为80℃、90℃。

例如，所述提取的时间可以为0.5～5小时；例如1-4小时、2-3小时；示例性地，所述提取的时间可以为2小时。

例如，所述提取的次数可以重复1-5次，例如重复2-3次。

例如，所述提取可以使用超声波辅助提取。

例如，浓缩至提取液呈黏稠状后，进行干燥。例如，所述干燥的方式可以选自喷雾干燥方式、鼓风干燥方式和真空干燥方式中的一种、两种或三种。又如，所述干燥可以为先将黏稠状的提取液鼓风干燥得到浸膏，再将浸膏真空干燥成浸膏块。优选地，所述干燥的温度可以为45-75℃，例如50-70℃；所述鼓风干燥的时间可以为6-12h，例如8-10h；所述真空干燥的时间可以为20-60h，例如24-50h。优选地，所述干燥完成后，还可以对浸膏块进行粉碎，得到提取物粉末。进一步地，所述提取物粉末的粒度可以为100-200目。

根据本发明的制备方法，(S1)步骤中，所述药食同源植物及其用量，以及所述多肽及其用量，均具有如上文所述的含义。

根据本发明的制备方法，(S1)步骤中，所述软材的制备过程包括：所述药食同源植物的提取物粉末和所述多肽混合后，向混合物中加入溶剂，制成软材。其中，所述混合物与溶剂的质量体积比(g/mL)可以为1:(0.2-1)，例如 1:(0.4-0.9)；示例性地，可以为1:0.5、1:0.6、1:0.7。其中，所述溶剂可以为乙醇和/水，优选为乙醇和水的混合溶剂。当所述溶剂为乙醇和水的混合溶剂时，所述乙醇的质量分数可以为45-95％，例如50-80％、60-70％；示例性地，所述乙醇的质量分数为75％、80％。

根据本发明的制备方法，(S2)步骤中，所述过筛可以为过30-100目筛，例如过40-80目筛；示例性地，过50目筛、60目筛。

根据本发明的制备方法，(S2)步骤中，所述烘干的温度可以为40-60℃，例如50℃、60℃；所述烘干的时间可以为8-30小时，例如10小时、18小时、24小时。

根据本发明的制备方法，步骤(2)中所述软颗粒烘干后，还可以对烘干后的软颗粒进行包装，得到所述复方颗粒剂。

本发明还提供一种复方液体制剂，所述液体制剂包括上述药物组合物的原料提取液。

根据本发明的复方液体制剂，所述液体制剂的浓度可以为0.3-3g/mL；例如 0.5-2g/mL；示例性地，浓度可以为0.5g/mL、1g/mL、1.5g/mL。

根据本发明的复方液体制剂，所述液体制剂的规格可以为50-300mL，例如 50mL、60mL、70mL、80mL、100mL、150mL、200mL、250mL。

根据本发明的复方液体制剂，所述液体制剂可以封装于塑料容器或者玻璃容器中。

根据本发明的复方液体制剂，所述液体制剂为灰色至黑色液体。

进一步地，本发明还提供上述复方液体制剂的制备方法，所述制备方法包括将上述药物组合物的各组分提取液混合、浓缩，得到所述液体制剂。

根据本发明的液体制剂的制备方法，所述药物组合物的各组分提取液的制备过程包括：干燥的药食同源植物以及多肽分别经提取溶剂提取得到各自的提取液。

例如，所述提取的时间可以为0.5-5小时；例如1-4小时、2-3小时；示例性地，所述提取的时间可以为2小时。

例如，所述提取的次数可以重复1-5次，例如重复2-3次。

例如，所述提取可以使用超声波辅助提取。

根据本发明的液体制剂的制备方法，所述提取液合并前，还可以对所述提取液进行过滤；优选地，可以选用5-8层纱布过滤；示例性地，选用6层纱布过滤。

根据本发明的液体制剂的制备方法，所述浓缩后，还可以对浓缩液进行包装、存放，得到所述液体制剂。例如，所述浓缩液可以冷藏存放，如冷藏存放于3-5℃冰箱中。

进一步地，本发明还提供上述药物组合物、复方颗粒制剂和复方液体制剂在抗肿瘤细胞方面的应用。

例如，所述肿瘤细胞包括人癌细胞和小鼠癌细胞。所述人癌细胞可以包括但不限于：人肝癌细胞SMMC-7721、人肝癌细胞HepG2、人肝癌细胞Bel-7402、人肝癌细胞Huh7721、人胃癌细胞SGG-7901、人结直肠癌细胞LoVo、人结直肠癌细胞RKO、人结直肠癌细胞SW480、人肺癌细胞A549、人肺癌细胞H1299、人肺癌细胞SPCA-1、人上皮***细胞HeLa、人乳腺癌细胞MCF-7、人慢性髓性白血病细胞k562、人食管癌细胞KYSE150、人食管癌细胞KYSE450或人食管癌细胞KYSE510。优选地，所述人癌细胞可以选自人肝癌细胞 SMMC-7721、人胃癌细胞SGG-7901和人肺癌细胞A549中的至少一种。所述小鼠癌细胞可以包括但不限于：小鼠肝癌细胞H22、小鼠肝癌细胞Hepa 1-6、小鼠红白血病细胞MEL、小鼠肾癌细胞Renca、小鼠淋巴瘤细胞EL-4、小鼠肺癌细胞Lewis、小鼠乳腺癌细胞4T1。

根据本发明的应用，所述药物组合物、复方颗粒制剂和液体制剂可以抑制所述肿瘤细胞的活性；优选地，可以通过提升基体免疫因子的调节能力来抑制所述肿瘤细胞的活性；例如，所述免疫因子可以为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和干扰素-γ(INF-γ)中的至少一种。

根据本发明的应用，所述药物组合物、复方颗粒制剂和复方液体制剂可以抑制所述肿瘤细胞的增殖。

本发明还提供一种***的方法，包括将上述药物组合物或复方颗粒制剂或复方液体制剂施用于有需要的受体。

本发明的有益效果：

本发明的药物组合物由包括药食同源的植物和多肽的原料复配得到，其具有增强机体免疫力和抑制肿瘤的作用，尤其是可以通过调节人体免疫因子，对人体肝癌细胞、胃癌细胞和肺癌细胞等产生抑制作用。该药物组合物保健功效明显可靠，对脏器副作用很小。

该药物组合物可以制成颗粒剂型和液体制剂，更加便于储存和携带。且颗粒剂和液体制剂的制备方法简单易行，操作性强。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。此外，应理解，在阅读了本发明所公开的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本发明所限定的保护范围之内。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

仪器信息：

膜浓缩仪器：上海昊清环保科技有限公司，型号2540。

鼓风干燥箱：北京市永光明医疗仪器有限公司，型号101-2ABS。

真空干燥箱：上海一恒科学仪器有限公司，型号BPZ-6120-2B。

制粒机：旭朗机械设备有限公司，型号ZL-600。

细胞来源：人体肝癌细胞SMMC-7721、人体胃癌细胞SGC-7901和人体肺癌细胞A549，均来自北京协和医学院药物研究所。

白细胞介素-6试剂盒、肿瘤坏死因子-α试剂盒、干扰素-γ试剂盒，均购自上海仁捷生物科技有限公司，型号48T。

实施例1

(1a)准备新鲜的蒲公英、姜黄、马齿苋、红薯、鱼腥草、薏苡仁、茯苓、人参、金银花、余甘子、桃仁、莲子、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜、蛹虫草各100g，清洗干净并干燥；

(2a)将(1a)中的干燥材料分别用5升70wt％乙醇加热80℃，保持沸腾 2小时后，用纱布过滤，将药渣继续提取，共提取3次，合并提取液；

(3a)用膜过滤仪器分别浓缩每种药材提取液，浓缩至粘稠状，用鼓风烘箱50℃干燥10小时得到浸膏，继续用真空干燥箱在50℃干燥48小时成块状，粉碎成100目的浸膏粉末。

(4a)将(3a)中各种药材粉末混合，添加1％(以药材粉末混合物的质量计)玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽、小麦肽后混合均匀，按粉末混合物：溶液＝1:0.5的质量体积比例(g/mL)加入75wt％乙醇溶液制成软材；

(5a)将(4a)中的软材过50目筛制粒机，制成湿颗粒；

(6a)将(5a)中的湿颗粒在鼓风烘箱中50℃下干燥24小时，制成颗粒。

实施例2

(1a)准备新鲜的蒲公英、姜黄、马齿苋、红薯、鱼腥草、薏苡仁、茯苓、人参、金银花、余甘子、桃仁、莲子、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜、蛹虫草各200g，清洗干净并干燥；

(2a)将(1a)中的干燥材料分别用5升80wt％乙醇加热90℃，保持沸腾 2小时后，用纱布过滤，将药渣继续提取，共提取3次，合并提取液；

(3a)用膜过滤仪器分别浓缩每种药材提取液，浓缩至粘稠状，用鼓风烘箱60℃干燥8小时得到浸膏，继续用真空干燥箱在60℃干燥36小时成块状，粉碎成100目的浸膏粉末。

(4a)将(3a)中各种药材粉末混合，添加2％(以药材粉末混合物的质量计)玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽、小麦肽后混合均匀，按粉末混合物：溶液＝1:0.6的质量体积比例(g/mL)加入75wt％乙醇溶液制成软材；

(5a)将(4a)中的软材过60目筛制粒机，制成湿颗粒；

(6a)将(5a)中的湿颗粒在鼓风烘箱中60℃下干燥18小时，制成颗粒；

实施例3

(1a)准备新鲜的蒲公英、姜黄、马齿苋、红薯、鱼腥草、薏苡仁、茯苓、人参、金银花、余甘子、桃仁、莲子、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜、蛹虫草各300g，清洗干净并干燥；

(2a)将(1a)中的干燥材料分别用10升70wt％乙醇加热90℃，保持沸腾2小时后，用纱布过滤，将药渣继续提取，共提取3次，合并提取液；

(3a)用膜过滤仪器分别浓缩每种药材提取液，浓缩至粘稠状，用鼓风烘箱60℃干燥10小时得到浸膏，继续用真空干燥箱在70℃干燥24小时成块状，粉碎成100目的浸膏粉末。

(4a)将(3a)中各种药材粉末混合，添加3％(以药材粉末混合物的质量计)玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽、小麦肽后混合均匀，按粉末混合物：溶液＝1:0.7的质量体积比例(g/mL)加入80wt％乙醇溶液制成软材；

(5a)将(4a)中的软材过50目筛制粒机，制成湿颗粒；

(6a)将(5a)中的湿颗粒在鼓风烘箱中60℃下干燥10小时，制成颗粒。

对比例1

(1a)准备新鲜的蒲公英、姜黄、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜、蛹虫草各200g，清洗干净并干燥；

(4a)将(3a)中各种药材粉末混合，按粉末混合物：溶液＝1:0.6的质量体积比例(g/mL)，加入75wt％乙醇溶液制成软材；

(5a)将(4a)中的软材过60目筛制粒机，制成湿颗粒；

(6a)将(5a)中的湿颗粒在鼓风烘箱中60℃下干燥18小时，制成颗粒。

对比例2

玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽和小麦肽混合均匀，按粉末混合物：溶液＝1:0.7的质量体积比例(g/mL)，加入80wt％乙醇溶液制成软材；

将上述软材过50目筛制粒机，制成湿颗粒；

将上述湿颗粒在鼓风烘箱中60℃下干燥10小时，制成颗粒。

实施例4颗粒营养检测

目的与要求：产品营养成分检测是指向消费者提供食物营养特性的一种描述，是食品类产品生产销售的组成部分，营养成分检测要求具有国家资质的检测机构按照《预包装食品营养标签通则》(GB28050-2011)中相关规定进行检测对比。

(1)样品总糖测量：采用紫外-可见分光光度法对实施例1-实施例3所得颗粒进行检测，检测波长为487nm；显色剂为为苯酚-浓硫酸。准确称取颗粒0.25g，加入50mL超纯水超声提取。其中提取参数为：温度45℃；超声时间 30min。后过滤，将滤液加超纯水定容至100mL。以葡萄糖为对照物，计算总糖含量，结果见表1。

(2)氨基酸含量测定：采用药典中凯氏定氮法对实施例1-实施例3所得颗粒进行检测，结果见表1。

(3)其他成分检测如下：

检测单位：恩施州食品药品检验检测中心。

检测标准：按照国家标准要求，分别以GB5009.5-2016第一法、 GB5009.6-2016、GB28050-2011、GB28050-2011与GB5009.91-2017第二法。

检测结果及说明：指标均按照国家标准《预包装食品营养标签通则》 (GB28050-2011)进行检测，结果见表2。

表1.复方颗粒中多糖和氨基酸含量

表2.复方颗粒的食品营养素检查

上表中脂肪含量为3％，钠含量为7％，说明本产品是低脂低钠产品。

实施例5口味和感官评价

评价样品：500克实施例1样品。

调查范围：湖北民族学院。

调查人员：从湖北民族学院学生中随机抽取50人作为调查对象。

评价方法：问卷调查方式，主要调查外观、气味和溶解度。

调查时间：2018年6月10日-2018年6月12日。

实施例1样品颗粒外观为灰色；气味平和，无刺激性。溶解度检测：取10g 颗粒，加入100mL、60℃热水，在3分钟内全部溶解。

调查结果：对外观可以接受的人数有45人，达到了90％；对气味可以接受的人数有42人，达到了84％；对溶解度可以接受的人数有47人，达到了94％，对口感可以接受的人数有40人，达到了80％。在口感方面，部分学生觉得偏淡，这可能与个人生活习惯有关。综上，颗粒的性能基本可以被接受。

实施例6药理学实验

(1)细胞实验：

①试验对象

选择人体肝癌细胞SMMC-7721、人体胃癌细胞SGC-7901和人体肺癌细胞 A549为实验对象。

②受试药物

实施例1提取浓缩液

实施例1中各味药材按照复方比例进行称重，采用实施例1的提取方法，提取3次，水煎液用6层纱布过滤，合并水煎液旋转蒸发浓缩至浓度为0.5g/mL，取浓缩液20mL，为10天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

实施例2提取浓缩液

将实施例2中各味药材按照复方比例进行称重，采用实施例2的提取方法，提取3次，水煎液用6层纱布过滤，合并水煎液旋转蒸发浓缩至浓度为1g/mL，取浓缩液20mL，为10天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

实施例3提取浓缩液

将实施例3中各味药材按照复方比例进行称重，采用实施例3的提取方法，提取3次，水煎液用6层纱布过滤，合并水煎液旋转蒸发浓缩至浓度为1.5g/mL，取浓缩液20mL，为10天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

在96孔板每孔加入密度为2×10⁴/mL的细胞200μL，置于37℃、5％的CO₂培养箱内培养24h。在每孔中加入实施例1-3的提取浓缩液样品2μL，每个真菌样品设3组空白对照。加样后的细胞继续在37℃下培养48h。培养结束后，先用光学显微镜观察细胞形态，并用MTT法初步检测样品有无抗肿瘤活性。检测结果见表3。

将受试液分别加入到96孔板中，在每孔中加入样品液2μL，每个受试样品设3组空白对照。加样后的细胞继续在37℃下培养48h。培养结束后，先用光学显微镜观察细胞形态，初步判断样品有无抗肿瘤活性。并检测免疫因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)含量。检测方法如下：

白细胞介素-6(IL-6)

按照试剂盒中提供的相关使用说明，将细胞等所用样品、试剂等按要求配制。先绘制标准曲线，在96孔板加入标准液恒温37℃，湿润的环境下孵化2h。取出后倒掉孔中多余液体，用350μL的洗液洗涤，共洗3次，并除去洗液。加入100μL的已稀释好的抗体检测溶液。密封，在37℃的潮湿环境下孵化1h后，除去孔中液体，洗液洗涤3.次。每孔再加入100μL的已稀释过的HRP(辣根过氧化物酶)，在37℃湿润环境下孵化40min，其后重复上述步骤进行洗板。每孔加入100μL的TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)，避光37℃的条件下孵化20min后每孔加入100μL的停止液，37℃避光下孵化20min之后，在450nm与630nm 下采用酶标仪读取吸光度(A)。并在同等条件下，测试细胞中白细胞介素-6 的含量，并做空白对照。

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)

按照试剂盒中提供的相关使用说明，将细胞等所用样品、试剂等按要求配制，稀释。先绘制标准曲线，按照要求进行加样，加入50μL的混合型抗体。盖膜，室温下孵化1h。取出后，弃去液体后，用洗液洗板3次，每次每孔350μL，最后一次洗板后，倒扣培养板，用纸吸取多余液体。每孔加入100μL的显色液，避光常温孵化20min。再加入100μL的终止液，振摇1min后，在450nm下进行检测，读取吸光度(A)。在相同条件下检测细胞中肿瘤坏死因子-α的含量，并做空白对照。

干扰素-γ(INF-γ)

按试剂盒中提供的相关使用说明，配制相关试剂及样品。按照要求在96孔板依次加入标品、样品。盖好膜后在室温下孵化2.5h。弃去液体，用洗液洗涤 4次，每孔每次使用300μL的洗液，其后，除尽孔中洗液。每孔均加入100μL 的配制后的抗体溶液，盖膜，室温下培养1h后，弃去液体并洗涤，洗涤方式同上。其后，每孔加入100μL的HRP，在室温轻摇条件下培养45min，重复上述步骤进行洗板。洗板后，每孔加入100μL的TMB，避光、室温、轻摇条件下孵化30min后每孔加入100μL的停止液后立即在450nm下采用酶标仪读取吸光度 (A)。并在相同条件下检测细胞中干扰素-γ的含量，并做空白对照。

免疫因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ) 含量的检测结果见表4。

表3.复方颗粒对肿瘤细胞的抑制活性检测结果

表4.复方颗粒对免疫因子的调节的检测结果

(2)小鼠实验

根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)中有关要求，选择正常 BALB/c小鼠为本研究实验动物及模型。

雄性BALB/c小鼠，16-24g，30只。由中国医学科学院药用植物研究所动物实验中心提供，许可证编号：SYXK(京)2013-0023。在中国医学科学院药用植物研究所动物房饲养，实验期间自然光照，自由饮食，温度23～26℃，湿度 45％～65％。

小鼠采购到货后，首先在中国医学科学院药用植物研究所实验动物中心动物房中适应性喂养3天，3天后，小鼠称重，将小鼠按照体重随机分组，每组 10只，分别为空白对照组、各配方处理组。其中空白对照组为不给药组，每天灌胃相同剂量(体积)的蒸馏水。所有组均每天灌胃1次，连续灌胃30天，各组均正常饮食饮水。第31天取相关脏器，测定相关指标。配方处理组给药剂量：按小鼠体重计算，给药10mg/kg。

免疫相关指标的选择与检测方法

免疫指标的选择：根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)中对免疫调节功能产品检测指标的指导及建议，选取体重、脏器指数(脾脏指数、胸腺指数)。

免疫指标检测方法：小鼠连续给药30天后，称量小鼠重量，脱颈处死，取脾脏、胸腺。

a.体重

灌胃，禁食12h后，测小鼠体重。

b.脏器指数

小鼠采取脱颈的方法处死，摘取脾脏及胸腺，用生理盐水洗去血液，滤纸吸干多余生理盐水后称重，计算脏器指数。

脏器指数＝脏器重量(mg)/体重(g)。

测试结果如表5所示。表5表明：与对比照组相比，采用实施例1-3配方提取浓缩液处理小鼠后，小鼠体重基本保持不变，小鼠脾脏指数和小鼠胸腺指数均有较为明显地提升，说明实施例1-3配方提取浓缩液可以增强小鼠免疫力，且对小鼠脏器的副作用小。

表5.复方颗粒对小鼠脏器指数的调节结果

样品	小鼠体重(g)	小鼠脾脏指数	小鼠胸腺指数
				实施例1	20.05	6.12	10.25
实施例2	20.09	6.18	10.32
				实施例3	20.10	6.15	10.26
对照组	20.06	5.95	8.36

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种药物组合物，其特征在于，所述组合物包括以下原料：药食同源植物和多肽，所述药食同源植物和多肽的质量比为100:(0.5-5)。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药食同源植物包括蒲公英、姜黄、马齿苋、红薯、鱼腥草、薏苡仁、茯苓、人参、金银花、余甘子、桃仁、莲子、桑葚、黄精、茶树花、玉米须、栀子、枳椇子、山楂、魔芋粉、杜仲雄花、猕猴桃、大枣、洋葱、韭菜和蛹虫草中的一种、两种或更多种；

优选地，当所述药食同源植物中包括两种或更多种植物时，以其中一种植物的质量为基准，其余任意种植物的质量为基准植物质量的0.2-5倍；

优选地，所述多肽选自玉米肽、绿豆肽、核桃肽、大豆肽和小麦肽中的一种、两种或更多种；

优选地，当所述多肽中包括两种或更多种多肽时，以其中一种多肽的质量为基准，其余任意一种多肽的质量为基准多肽质量的0.5-2倍。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型为口服剂的形式；

优选地，所述药物组合物还任选地包含至少一种药学上可接受的辅料。

4.一种复方颗粒剂，其特征在于，所述颗粒剂由包括权利要求1-3任一项所述药物组合物的原料制备得到；

优选地，所述复方颗粒剂的粒度为50-150目；

优选地，所述复方颗粒剂中总多糖的含量为400-500mg/g；

优选地，所述复方颗粒剂中氨基酸的含量为18.0-25.0mg/g；

优选地，每100g所述复方颗粒剂中含有能量1500-2200kJ；

优选地，每100g所述复方颗粒剂中含有脂肪1.1-1.8g；

优选地，每100g所述复方颗粒剂中含有碳水化合物80-110g；

优选地，每100g所述复方颗粒剂中含有钠110-140mg。

5.权利要求4所述的复方颗粒剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(S1)药食同源植物的提取物粉末和多肽混合，制成软材；

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，(S1)步骤中，所述药食同源植物的提取物粉末的制备过程包括：干燥的药食同源植物经提取溶剂提取得到提取液，所述提取液浓缩后，干燥得到所述提取物粉末；

优选地，(S1)步骤中，所述药食同源植物及其用量，以及所述多肽及其用量，均具有如权利要求1或2所述的含义；

优选地，(S1)步骤中，所述软材的制备过程包括：所述药食同源植物的提取物粉末和所述多肽混合后，向混合物中加入溶剂，制成软材；

优选地，(S2)步骤中所述软颗粒烘干后，对烘干后的软颗粒进行包装，得到所述复方颗粒剂。

7.一种复方液体制剂，其特征在于，所述液体制剂包括权利要求1-3任一项所述药物组合物的原料提取液；

优选地，所述液体制剂的浓度为0.3-3g/mL；

优选地，所述液体制剂的规格为50-300mL；

优选地，所述液体制剂封装于塑料容器或者玻璃容器中；

优选地，所述液体制剂为灰色至黑色液体。

8.权利要求7所述的复方液体制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将权利要求1-3任一项所述的药物组合物的各组分提取液混合、浓缩即可；

优选地，所述浓缩后，对浓缩液进行包装、存放，得到所述液体制剂。

9.权利要求1-3任一项所述药物组合物、权利要求4所述复方颗粒制剂或权利要求7所述复方液体制剂作为抗肿瘤细胞药物的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述肿瘤细胞包括人癌细胞和小鼠癌细胞。