CN109938045A - 含有极细链格孢激活蛋白和大黄素甲醚的农药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种含有极细链格孢激活蛋白和大黄素甲醚的农药组合物，该组合物所述的组合物包含A和B两种活性组分，其中活性组分A为极细链格孢激活蛋白，活性组分B为大黄素甲醚，两组分之间的重量比为1：40～40：1。本发明还提供了该组合物的制备方法及用途。试验结果表明，本发明提供的上述杀菌组合物增效明显，更重要的是施用量减少，使用成本降低。该杀菌组合物能有效防治作物的某些特定的真菌病害。通过将不同作用机制和作用方式的杀菌剂进行复配，有效降低各单剂的施用量，对于扩大杀菌谱和延缓真菌、真菌抗性以及提高防治效果等方面具有很好的作用。

Description

含有极细链格孢激活蛋白和大黄素甲醚的农药组合物

技术领域

本发明属于农业植物保护领域，特别是涉及一种具有改进性能的杀菌组合物，具体地说是涉及一种包含极细链格孢激活蛋白和大黄素甲醚的农药组合物。

背景技术

极细链格孢激活蛋白(plant activator protein)是经极细链格孢菌发酵、提取的一种具有生物活性的、单一、稳定的蛋白质。该蛋白质是由207个氨基酸组成。极细链格孢激活蛋白是从天然微生物经发酵提取的一种生物活性蛋白质，当接触到植物器官表面后，可以与植物细胞膜上的受体蛋白结合。引起植物体内一系列相关酶活性增加和基因表达量的增强，激发植物体内的一系列代谢调控.促进植物根茎叶生长、提高叶绿素含量，提高作物产量。

大黄素甲醚(Physcion)是高活性植物源杀菌剂，以天然植物大黄为原料，经精心提取其活性成分，加工研制而成，对白粉病、霜霉病、灰霉病、炭疽病等有很好的防治效果。对人畜低毒，对环境友好，特别适合于绿色和有机蔬菜生产。大黄素甲醚是保护性杀菌剂，诱导作物产生保卫反应，抑制病原菌孢子萌发、菌丝的生长、吸器的形成，使得作物免受病原菌的侵害，达到防病的效果。

实际的农药经验已经表明，重复且专一施用一种活性化合物来防治有害病菌在很多情况下将导致菌株的快速选择性，为降低抗性菌株选择性的危险性，目前通常使用不同活性化合物的混合物来防治有害作物病菌。通过将具有不同作用机理的活性化合物进行组合，可延缓抗性产生，降低施用量，减少防治成本。

发明内容

本发明的目的是针对杀菌剂在实际应用中抗性以及土壤残留问题，筛选出不同杀菌原理的杀菌剂进行复配，得到新的一种杀菌剂组合物，以提高杀菌剂防治效果，延缓抗性产生，降低施用量，减少防治成本。

本发明的另一个目的是提供包含两种有效成分A和B的杀菌剂组合物在农业领域防治农作物病害方面的应用。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

一种具有增效作用的杀菌剂组合物，该组合物包含A和B两种活性组分，其中活性组分A为极细链格孢激活蛋白，活性组分B为大黄素甲醚。

发明人通过试验发现，本发明的组合物是用于防治农作物细菌或真菌性病害，防治增效明显，更重要的是施用量减少，降低使用成本。含有组分A与组分B的化合物结构类型不同，作用机制各异，两者复配能够扩大杀菌谱，并且可以在一定程度上延缓病原菌抗性的产生和发展速度，且组分A与组分B之间无交互抗性。

本发明杀菌剂组合物中的两活性组分之间的重量比为1：40～40：1，在一种优选方案中，活性组分A和活性组分B的重量比为1：30～30：1。

在一些具体实施方式中，两种活性组分A和B可选用40:1、39:1、38:1、37:1、36:1、35:1、34:1、33:1、32:1、31:1、30:1、29:1、28:1、27:1、26:1、25:1、24:1、23:1、22:1、21:1、20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、1:20、1:21、1:22、1:23、1:24、1:25、1:26、1:27、1:28、1:29、1:30、1:31、1:32、1:33、1:34、1:35、1:36、1:37、1:38、1:39、1:40等更具体的配比，也可以在以上任意两个配比所组成的范围内进行选择，本发明的配比可以理解为重量与体积的比值，或质量比，或摩尔比。

本发明中，极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚可以理解为包含各自化合物本身的各类其它形式的结构衍生物产品或仅是简单的基团修饰，如各类盐类化合物、酯类化合物。

本发明的组合物可以由活性组分和农药助剂或辅料制成农药上允许的剂型。进一步的，该组合物由0.1～20％重量份的活性组分与99.9～80％重量份的农药助剂或辅料制成农药上允许的剂型。

本发明提供了包含组分A和组分B的杀菌组合物在农业领域防治农作物病害方面的用途，特别是在防治某些作物的真菌或细菌病害方面的用途。

上述组合物具体可包含农药助剂或辅料，例如载体、溶剂、分散剂、润湿剂、胶粘剂、增稠剂、粘合剂、表面活性剂或肥料等中的一种或几种。在施用的过程中可以混合常用的助剂。

合适的助剂或辅料可以是固体或液体，它们通常是剂型加工过程中常用的物质，例如天然的或再生的矿物质，溶剂、分散剂、润湿剂、胶粘剂、增稠剂、粘合剂。

本发明组合物的施用方法包括将本发明的组合物用于植物生长的地上部分，特别是叶部或叶面。可以选择浸种或涂抹于防治对象表面。施用的频率和施用量取决于病原体的生物学和气候生存条件。可以将植物的生长场所，如稻田，用组合物的液体制剂浸湿，或者将组合物以固体形式施用于土壤中，如以颗粒形式(土壤施用)，组合物可以由土壤经植物根部进入植物体内(内吸作用)。

本发明的组合物可以制备成农药上可接受的各种剂型，包括但不限于乳油、悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、粉剂、粒剂、水剂、水乳剂、微乳剂、毒饵、母液、母粉等，在一种优选方案中，本发明的剂型采用水剂、悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂或微乳剂。根据这些组合物的性质以及施用组合物所要达到的目的和环境情况，可以选择将组合物以喷雾、弥雾、喷粉、撒播或泼浇等之类的方法施用。

可用已知的方法可以将本发明的组合物制备成各种剂型，可以将有效成分与助剂，如溶剂、固体载体，需要时可以与表面活性剂一起均匀混合、研磨，制备成所需要的剂型。

上述的溶剂可选自芳香烃，优选含8-12个碳原子，如二甲苯混合物或取代的苯，酞酸酯类，如酞酸二丁酯或酞酸二辛酸，脂肪烃类，如环已烷或石蜡，醇和乙二醇和它们的醚和酯，如乙醇，乙二醇，乙二醇单甲基；酮类，如环已酮，强极性的溶剂，如N-甲基-2-吡咯烷酮，二甲基亚砜或二甲基甲酰胺，和植物油或植物油，如大豆油。

上述的固体载体，如用于粉剂和可分散剂的通常是天然矿物填料，例如滑石、高岭土，蒙脱石或活性白土。为了管理组合物的物理性能，也可以加入高分散性硅酸或高分散性吸附聚合物载体，例如粒状吸附载体或非吸附载体，合适的粒状吸附载体是多孔型的，如浮石、皂土或膨润土；合适的非吸附载体如方解石或砂。另外，可以使用大量的无机性质或有机性质的预制成粒状的材料作为载体，特别是白云石。

根据本发明的组合物中的有效成分的化学性质，合适的表面活性剂为木质素磺酸、萘磺酸、苯酚磺酸、碱土金属盐或胺盐，烷基芳基磺酸盐，烷基硫酸盐，烷基磺酸盐，脂肪醇硫酸盐，脂肪酸和硫酸化脂肪醇乙二醇醚，还有磺化萘和萘衍生物与甲醛的缩合物，萘或萘磺酸与苯酚和甲醛的缩合物，聚氧乙烯辛基苯基醚，乙氧基化异辛基酚，辛基酚，壬基酚，烷基芳基聚乙二醇醚，三丁基苯聚乙二醇醚，三硬脂基苯基聚乙二醇醚，烷基芳基聚醚醇，乙氧基化蓖麻油，聚氧乙烯烷基醚，氧化乙烯缩合物、乙氧基化聚氧丙烯，月桂酸聚乙二醇醚缩醛，山梨醇酯，木质素亚硫酸盐废液和甲基纤维素。

在制备液体剂型时，可以先将活性组分A溶于碱性物质，形成极细链格孢激活蛋白金属盐，合适的碱性物质包括：碱金属碳酸盐、碱金属氢氧化物(如氢氧化钠、氢氧化钾)、碱金属烷氧基碳酸盐、碱金属醇盐或甲醇镁。

本发明的组合物中两种有效成分表现为增效效果，该组合物的活性比使用单个化合物的活性预期总和，以及单个化合物的单独活性更为显著。增效效果表现为允许施用量减少、更宽的杀真菌控制谱、见效快、更持久的防治效果、通过仅仅一次或少数几次施用更好的控制植物有害真菌、以及加宽了可能的施用间隔时间。这些特性是植物真菌控制实践过程中特别需要的。

本发明的杀菌剂组合物可应用于农业领域防治农作物病害方面，所针对的具体病症包括但不限于水稻细菌性角斑病、水稻白叶枯病、水稻纹枯病、黄瓜霜霉病、黄瓜细菌性角斑病、西瓜枯萎病、葡萄霜霉病、水稻稻曲病、辣椒炭疽病、葡萄炭疽病、柑橘细菌性疮痂病、黄瓜炭疽病、芹菜斑枯病、莲藕立枯病、草莓白粉病、水稻黄矮病、莴苣霜霉病、芹菜灰霉病、洋葱霜霉病等。

本发明的杀菌组合物的表现出的其它特点主要表现为：1、本发明的组合物混配具有明显的增效作用；2、由于本组合物的两个单剂化学结构差异很大，作用机理完全不同，不存在交互抗性，可延缓两单剂单独使用所产生的抗性问题；3、本发明的组合物对作物安全、防效好。经试验证明，本发明杀菌剂组合物化学性质稳定，增效显著，对防治对象表现出明显的增效以及互补作用。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明，凡在本发明的精神和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

以下实施例所有配方中百分比均为重量百分比。本发明组合物各种制剂的加工工艺均为现有技术，根据不同情况可以有所变化。

一、剂型制备实施例

(一)可湿性粉剂的加工及实施例

将活性成分A与B活性成分与各种助剂及填料等按比例充分混合，与水溶解后制得水剂。

实施例1:5.125％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚水剂

极细链格孢激活蛋白5％，大黄素甲醚0.125％，烷基多糖苷4％，N-甲基吡咯烷酮3％，去离子水补足至100％。

实施例2:2.1％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚水剂

极细链格孢激活蛋白0.1％，大黄素甲醚2％，聚丙烯酸酯3％，异丙二醇0.9％，甲基叔丁基醚11％，去离子水补足至100％。

实施例3:7.2％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚水剂

极细链格孢激活蛋白6％，大黄素甲醚1.2％，烷基糖苷7％，丙二醇1％，有机硅1％，去离子水补足至100％。

实施例4:2.2％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚水剂

极细链格孢激活蛋白0.2％，大黄素甲醚2％，N-甲基吡咯烷酮3％，烷基磺酸盐2％，异丙醇2％，去离子水补足至100％。

实施例5:6.2％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚水剂

极细链格孢激活蛋白6％，大黄素甲醚0.2％，丙二醇2％，N-甲基吡咯烷酮4％，苯甲酸钠2％，有机硅2％，去离子水补足至100％。

(二)悬浮剂的加工及实施例

将活性成分活性分组A与活性组分B，与分散剂、润湿剂、增稠剂和水等各组分按配方的比例混合均匀，经砂磨和/或高速剪切后，得到半成品，分析后补加水混合均匀过滤即得成品。

实施例6：3.1％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚悬浮剂

极细链格孢激活蛋白0.1％，大黄素甲醚3％，白炭黑2％，脂肪醇聚氧乙烯醚磷酸酯5％，异丙二醇1％，水补足至100％。

实施例7：2.87％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚悬浮剂

极细链格孢激活蛋白2.8％，大黄素甲醚0.07％，甲基萘磺酸钠甲醛缩合物2％,木质素磺酸钠4％，丙三醇5％，苯甲酸钠3％，水补足至100％。

实施例8：5％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚悬浮剂

极细链格孢激活蛋白2.5％，大黄素甲醚2.5％，膨润土4％，苯甲酸钠4％,乙二醇5％，黄原胶2％，水补足至100％。

实施例9：6.3％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚悬浮剂

极细链格孢激活蛋白6％，大黄素甲醚0.3％，甲基萘磺酸钠甲醛缩合物6％,丙二醇4％，木质素磺酸钠4％，膨润土3％，水补足至100％。

(三)水分散粒剂的加工及实施例

将活性成分活性分组A与活性组分B，与助剂和填料按配方的比例混合均匀，经气流粉碎成可湿性粉剂，再加入一定量的水混合挤压造粒，经干燥筛分后制得水分散粒剂产品。

实施例10：0.6％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚水分散粒剂

极细链格孢激活蛋白0.1％，大黄素甲醚0.5％，十二烷基硫酸钠3％，木质素磺酸钠5％,甲基萘磺酸钠甲醛缩合物2％，白炭黑补足至100％。

实施例11：5.5％极细链格孢激活蛋白·大黄素甲醚水分散粒剂

极细链格孢激活蛋白5％，大黄素甲醚0.5％，十二烷基磺酸钠3％，甲基萘磺酸钠甲醛缩合物3％，硫酸铵5％，硅藻土补足至100％。

二、药效验证试验

(一)生物测定实施例

在田间选择有典型莴苣病斑的叶片，对其病斑形状、大小、颜色进行观察测量。采集病叶在实验室内用组织分离法对病原菌进行分离。之后选择纯化之后的菌落，挑取病菌菌丝对分生孢子梗以及分生孢子观察其形态特征。试验用含毒培养基生长速率法来进行毒力测定。用灭菌三角瓶盛取各种不同浓度的药液，并做好药剂名称、浓度的标记。每种药剂的设置4个重复。加热融化100m L培养基，冷却至50～55℃时，加入l mL供试药剂，充分摇匀，迅速倒入培养皿中，此时供试药剂浓度相当于母液浓度稀释了100倍，到凝固后，标记各皿药剂名称及浓度，对照组加1m L无菌水。

以无菌操作，用切种环切取一块纯培养的菌种，将菌种接种至各个含有药剂的培养皿中，将培养皿置于恒温培养箱内培养，培养温度为26～28℃。在药后的72h后，分别检查各处理的菌落生长情况，测量菌落大小，以菌落直径长度表示，按十字交叉法测量菌落的直径(cm)，并计算抑制率。

将防治效果换算成几率值(y)，药液浓度(μg/ml)转换成对数值(x)，以最小二乘法计算毒力方程和抑制中浓度EC50，依孙云沛法计算药剂的毒力指数及共毒系数(CTC)。

实测毒力指数(ATI)＝(标准药剂EC50/供试药剂EC50)*100

理论毒力指数(TTI)＝A药剂毒力指数*混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数*混剂中B的百分含量

共毒系数(CTC)＝[混剂实测毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)]*100

CTC≤80,组合物表现为拮抗作用,80＜CTC＜120，组合物表现为相加作用,CTC≥120，组合物表现为增效作用。

1、极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚复配对莴苣霜霉病毒力测定试验

表1.极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚复配对莴苣腐败病毒力测定结果分析

结果(表1)表明，极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚在1：40～40：1时，对莴苣腐败病的防治效果显著提高，说明在此范围内，二者复配对莴苣腐败病防治有显著的增效作用。

(二)田间药效验证试验

试验方法：在生姜叶枯病发病初期，立即进行第一次喷雾，7天后进行第二次施药，每个处理4个小区，每个小区20平米。于药前和第二次药后11天调查统计发病情况，每个小区5点随机取样，每点调查5株作物，调查整株上每叶片的病斑面积占叶片面积的百分率并分级，计算病情指数和防治效果。

预期防效(％)＝X+Y-XY/100(其中，X，Y为单剂防效)

分级标准：

0级：无病斑；

1级：叶片病斑少于5个，长度小于1cm；

3级：叶片病斑6-10个，部分病斑长度大于1cm；

5级：叶片病斑11-25个，部分病斑连成片，病斑面积占叶面积的10-25％；

7级：叶片病斑26个以上，病斑连成片，病斑面积占叶面积的26-50％；

9级：病斑连成片，病斑面积占叶面积的50％以上或全叶枯死。

1、极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚复配田间药效实验

表2极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚混配对生姜叶枯病防治效果

测定结果(表2)表明，极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚混配对生姜叶枯病的防效明显提高，尤其是极细链格孢激活蛋白与大黄素甲醚在1：40～40：1时，防效出现协同增效作用，说明二者复配对生姜叶枯病有显著的增效作用。

Claims (7)

1.一种杀菌剂组合物，其特征在于所述的组合物包含A和B两种活性组分，其中活性组分A为极细链格孢激活蛋白，活性组分B为大黄素甲醚，两组分之间的重量比为1：40～40：1。

2.根据权利要求1所述的杀菌剂组合物，其特征在于活性组分A和活性组分B的重量比为1：30～30：1。

3.根据权利要求1或2所述的杀菌剂组合物，其特征在于该组合物由活性组分和农药助剂或辅料制成农药上允许的剂型。

4.根据权利要求3所述的杀菌剂组合物，其特征在于该组合物由0.1～20％重量份的活性组分与99.9～80％重量份的农药助剂或辅料制成农药上允许的剂型。

5.根据权利要求3或4所述的杀菌剂组合物，其特征在于所述的剂型为水剂、悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂或微乳剂。

6.根据权利要求3或4所述的杀菌剂组合物，其特征在于所述农药助剂或辅料选自载体、溶剂、分散剂、润湿剂、胶粘剂、增稠剂、粘合剂、表面活性剂或肥料中的一种或几种。

7.权利要求1～6中任意一项所述的杀菌剂组合物在农业领域防治农作物病害方面的用途。