CN109832630B - 一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物及其制备方法，所述组合物以干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌菌代谢物粉体为活性成分。本发明实施例的组合物能够有效的提高燕窝的利用率，增强燕窝的美容效果，具有较好的美容养颜的作用。

Description

一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物制剂技术领域，具体涉及一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物及其制备方法。

背景技术

目前，随时经济的发展，人们的生活节奏也越来越快，人们生活压力和工作压力也越来越大，导致人们生活习惯的改变以及体育活动的减少，人体机能和免疫力下降，造成更多的人处于亚健康的状态。各种疾病的发病率越来越趋向年轻化，人体也加速衰老。

衰老的主要表现是皮肤老化，皮肤出现皱纹和松弛，失去弹性和光泽。皮肤的老化除了与人体自身的原因，例如年龄、饮食、疲劳等造成人体机能下降有关外，还与环境、气候变化相关，例如皮肤长期曝晒在紫外线中，也会导致皮肤的老化和病变针对皮肤的衰老等症状可以通过饮食进行改善，而现有美容养颜的食物，例如燕窝，在吸收率利用率上并不高，而且美容养颜的效果有限。

综上所述，传统的美容养颜的食物在使用上效果并不理想，其存在着明显的不足和缺陷，亟待进一步改进。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物，用以解决现有美容养颜产品效果差，且具有副作用的缺陷。

为实现上述目的，本发明实施例提供一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物，所述组合物以干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌菌代谢物粉体为活性成分。

优选的，所述干酪乳杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为：CCTCCNO：M2018043。

优选的，所述组合物还包括菌粉载体，所述菌粉载体包括微晶纤维素、药用玉米淀粉、菊粉、硬脂酸镁；

其中，所述组合物的原料以质量份数计：干酪乳杆菌菌粉体9-11份、干酪乳杆菌代谢物粉体4-6份、微晶纤维素18-22份、药用玉米淀粉80-120份、菊粉8-12份、硬脂酸镁8-12份。

优选的，所述组合物包括以下质量份数的原料：干酪乳杆菌菌粉体9.5-10.5份、干酪乳杆菌代谢物粉体4.5-5.5份、微晶纤维素19-21份、药用玉米淀粉90-110份、菊粉9-11份、硬脂酸镁9-11份。

本发明实施例还提供一种制备所述的组合物的方法，将所述干酪乳杆菌通过扩大菌种培养、一级种子培养、种子罐培养以及发酵培养获得干酪乳杆菌发酵菌液；

将所述干酪乳杆菌发酵菌液离心分别收集干酪乳杆菌菌泥及离心后的发酵液，并将所述干酪乳杆菌菌泥和离心后的发酵液冷冻干燥粉碎，获得干酪乳杆菌菌粉体以及干酪乳杆菌代谢物粉体；

将所述干酪乳杆菌菌粉体以及干酪乳杆菌代谢物粉体与菌粉载体混合，得到所述组合物。

优选的，所述干酪乳杆菌菌粉体的制备方法具体为：

将所述干酪乳杆菌菌泥、无菌水、脱脂奶粉、低聚果糖、甘油、麦芽糊精以及低聚异麦芽糖混合得到干酪乳杆菌悬菌液，将所述悬菌液冷冻干燥粉碎获得干酪乳杆菌菌粉体。

优选的，所述悬菌液冷冻干燥在-35℃--30℃的条件下预冻2-5小时，-50℃--40℃真空冷冻干燥，粉碎成100目的干酪乳杆菌菌粉。

优选的，所述干酪乳杆菌代谢物粉体的制备方法具体为：

将所述离心后的发酵液先经过低温浓缩至水分含量最多为20％的发酵液浓缩膏，将所述发酵液浓缩膏与药用玉米淀粉以5：1-4：1混合，得到混合物，然后在温度55℃-60℃，干燥时间40-50小时，粉碎得到含水量至多为3％的干酪乳杆菌代谢物粉体。

本发明实施例的组合物在制备具有下述至少一种功能的产品中的应用：

1)提高燕窝在人体中的利用率；

2)提高对人体的美容效果；

3)提高人体的免疫力。

本发明实施例具有如下优点：

本发明实施例的组合物能够有效的提高燕窝的利用率，增强燕窝的美容效果，具有较好的美容养颜的作用。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

本发明实施例提供一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物，其主要提高燕窝利用率并达到美容养颜效果。

本发明实施例首先获得了一株新的菌株，该菌株分离自新鲜的苦瓜表皮中，经初筛、复筛而来，经16S DNA鉴定为干酪乳杆菌HYZQ新9-32(Lactobacillus casei HYZQF新9-32)，菌种序列如SEQ ID NO.1所示，并对其进行了专利程序生物保藏，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国.武汉,武汉大圩，其保藏号为CCTCC NO：M2018043。

实施例1

一、干酪乳杆菌扩大菌种培养

本发明实施例的菌种采用干酪乳杆菌，生产中所使用的设备：菌种培养箱、超净工作台、恒温培养箱、各种试管、三角瓶、种子罐、发酵罐、真空冷冻干燥机、三维搅拌机、低温粉碎机、真空包装机。

菌种培养，对-80℃保存菌种的扩大培养，扩大菌种培养基的配制：葡萄糖20克、蛋白胨8克、牛肉浸粉8克、乙酸钠3克、吐温80 1ml、尿素1克、自来水1000毫升、pH值自然。

将以上配方中的葡萄糖等原料加入到配方中的1000毫升水中，搅拌30min使之溶化，然后分装于18*180的试管中，每只试管装10毫升，胶塞牛皮纸封口，放医用消毒器中0.1-0.12兆帕灭菌25min，扩大菌种培养基灭菌完毕。

在无菌条件下，在超净工作台中打开-80℃保存的盛有干酪乳杆菌的冷冻管，室温融化后，然后再取以上灭好菌的试管培养基1支，将溶化好的-80℃的保存菌液，取1毫升加入试管中，用胶塞、牛皮纸封好管口，用手轻摇匀，放入恒温培养箱中37℃静置培养13小时即可，获得扩大菌种培养菌液。

二、干酪乳杆菌一级种子培养

一级种子培养基配方：葡萄糖20克、蛋白胨8克、牛肉浸粉5克、玉米浆4克、乙酸钠3克、吐温80 1ml、自来水1000毫升、pH值自然。

将上述原料加入到配方中的自来水中，开动搅拌机，搅拌20min，使全部溶化，此称为一级种子培养液。将搅拌溶化好的一级种子培养液按用量加入到三角瓶中，然后用6层纱布外加一层牛皮纸扎好瓶口，放入医用消毒器中灭菌，灭菌前首先打开消毒器上的排气阀门等有少量蒸汽排出时关闭，当消毒器上的压力达到0.05兆帕时，打开消毒器上的排气阀门排气6-8min，然后关闭排气阀门，继续加温，当消毒器中的蒸汽压力达到0.1-0.12兆帕时开始计时，灭菌时间为25min，完毕后离开热源，让其自然降温，当消毒器上的压力表归零时，打开消毒器，取出灭好菌的培养基放入超净工作台中自然降温，当温度降至37℃时，将以上培养好的扩大菌种液移接到三角瓶灭好菌的培养液中，接种量分别是1％，即一级种子培养液100毫升，接入扩大菌种培养菌液为1毫升，完毕后用原有纱布及牛皮纸将瓶口封好，用手稍加摇动使接入的菌种与培养液混合均匀，然后放恒温箱中在37℃的条件下培养13小时即可，获得一级种子培养菌液。

三、干酪乳杆菌种子罐培养

对发酵设备、管道及无菌过滤***的灭菌，首先，打开各进出管道及无菌空气管道的阀门，通入0.12-0.14兆帕的蒸汽，让蒸汽与管道阀门联通并有少量蒸汽排出，通气40min，让管道内的蒸汽压力保持0.12-0.14兆帕，保持40min，然后关闭各进出管道阀门，备用。

种子罐及发酵罐的空罐灭菌，关闭各个阀门，打开罐底部的排污阀及罐夹层的排污阀，打开直接蒸汽阀门向罐内通入0.12-0.14兆帕的蒸汽，当罐内达到121℃时开始计时，灭菌时间为40min，然后关闭罐底部排污阀及夹层排污阀，罐中温度自然降至37℃备用。

种子罐培养基的配方，以培养基各组分的重量百分比计算，包括葡萄糖7％、蛋白胨0.5％、尿素0.5％、磷酸氢二钾1％、玉米浆1％、乙酸钠0.5％、吐温80 0.4％、聚葡萄糖3％、聚醚消泡剂0.1％、自来水85.5％、pH值自然。

首先，将自来水投入到已空罐灭菌的种子罐中，开动搅拌机，分别加入配方中所需的原料，然后在不停的搅拌中通入蒸汽加温，首先，利用罐夹层蒸汽加热到95℃时，再改用直接蒸汽加热，当罐中温度达到121℃时保持30min即可达到灭菌的效果，然后关闭蒸汽，开始通过罐夹层的自来水冷却降温，当罐内温度达到37℃时，备用，此称为种子罐培养基。然后，将以上培养好的一级菌种培养菌液，在无菌条件下接种到种子罐中，接种量分别是罐内培养基的1％，即100kg种子罐培养基分别接入一级菌种液1kg即可。然后，盖好罐上的接种帽，开始搅拌培养，培养条件：温度37℃，PH值自然，搅拌转速80转/min，罐压0.05兆帕，培养时间18小时即可达到要求，如果罐压降低，可通入无菌空气保持罐压，罐压过高可用罐顶的放气阀调整，获得种子罐培养菌种。

四、干酪乳杆菌发酵培养

发酵培养基各组分的重量百分比：葡萄糖12％，蛋白胨2％、聚葡萄糖2％、低聚异麦芽糖10％、乙酸钠1％、吐温80 0.2％、马铃薯淀粉2％、共轭亚油酸0.4％、无水氯化钙0.2％、硫酸镁0.5％，玉米浆2％，聚醚消泡剂0.1％，自来水67.6％，共100kg。

首先，将配方中所使用的自来水投入到已空罐灭菌的发酵罐中去，开动搅拌机，向发酵罐中投入配方中所使用的原料，然后通入蒸汽加热。首先，利用夹层蒸汽加热到95℃，然后再改用直接蒸汽加热，当罐中温度达到121℃时开始计时，保持30min即可达到灭菌效果，然后通过夹层的自来水冷却降温，当罐中的温度降到37℃时开始接入菌种，接种前，首先提高种子罐的罐压力达到0.1兆帕，发酵罐的罐压保持0.05兆帕，然后，打开接种管道阀门，将种子罐培养好的种子通过压差的方式输送到发酵罐中去，然后关闭接种管道阀门。

接种量是每100kg发酵罐中的培养基接入种子罐培养的菌种3kg，培养条件为发酵温度37℃，搅拌转速120转/min，发酵时间16小时即可，罐压保持0.05兆帕，pH值自然，如果罐压降低可通入无菌空气保持罐压，罐压过高可用罐顶的排气阀调整，此为发酵液。

五、干酪乳杆菌的冷冻干燥

发酵完毕后将发酵液抽入到贮罐中，为了保证发酵液中菌体的完整性，选择离心转速非常重要。开动管式离心机，调整转速12000转/min，以每min进料15kg的进料速度进行离心，离心完毕后收集湿菌泥，将离心收集的湿菌泥进行冷冻干燥，离心后的发酵液可进行低温真空浓缩加入载体，真空干燥后复配成品用。本发明实施例中的低温，是指0-10℃范围左右，使得生物物质保持生物活性的温度范围。

1、悬菌液的制备，取湿菌泥1000克，加入无菌蒸馏水3000毫升，脱脂奶粉300克，低聚果糖200克，98％的甘油100ml，麦芽糊精50克，低聚异麦芽糖300克。首先，取配方中的水1500毫升加热至50℃-55℃，在搅拌下加入麦芽糊精，溶化后再加入配方中余下的水，然后再加入配方中其它的原料。充分搅拌30min(25℃-35℃的条件下搅拌)。获得悬菌液，然后将该悬菌液放入30℃的恒温室或箱中恒温30min进行预冻。

冷冻干燥前的预冻，将恒温30min的悬菌液分装于冻干盘中，然后放入冷冻干燥机的预冻室内在零下30℃-35℃的条件下预冻3小时，冻结后进行抽真空干燥。真空干燥条件为：将预冻好的料盘放入真空干燥室开始抽真空干燥，干燥条件为：真空度为2-5帕，温度-45℃，干燥室温度28℃，干燥时间45小时。冻干完毕后收集冻干料用无菌粉碎机粉碎成细度为100目的菌粉密封包装备用，获得干酪乳杆菌菌粉体。

2、离心发酵液的低温浓缩：浓缩条件，真空度0.06兆帕，温度55℃-65℃，浓缩至膏状，固形物含量80％，水分含量20％为止，然后加入药用玉米淀粉为载体，混匀后进行真空干燥。取浓缩膏1000克，加入药用玉米淀粉200克混匀放真空干燥箱中干燥，干燥条件为：真空度0.06兆帕，温度55℃-60℃，干燥时间45小时，水分含量3％为合格，然后将其粉碎至100目的粉，密封包装备用，获得干酪乳杆菌代谢物粉体。

本发明实施例提高燕窝美容效果的益生菌组合物成品的复配：取100目的干酪乳杆菌菌粉体5克、干酪乳杆菌代谢物粉体3克、微晶纤维素10克、药用玉米淀粉20克，菊粉5克、硬脂酸镁5克，其中，微晶纤维素、药用玉米淀粉，菊粉、硬脂酸镁为菌粉载体。

将以上各物料放入固体搅拌混合机中混合均匀，然后在无菌条件下分装入胶囊中，装瓶或压片即为成品。

实施例2

本发明实施例提高燕窝美容效果的益生菌组合物成品的复配：取100目的干酪乳杆菌菌粉体9克、干酪乳杆菌代谢物粉体6克、微晶纤维素22克、药用玉米淀粉120克，菊粉12克、硬脂酸镁12克。

其中，干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体均为实施例1中方法中制备的干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体。

实施例3

本发明实施例提高燕窝美容效果的益生菌组合物成品的复配：取100目的干酪乳杆菌菌粉体9克、干酪乳杆菌代谢物粉体4克、微晶纤维素22克、药用玉米淀粉120克，菊粉8克、硬脂酸镁8克。

其中，干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体均为实施例1中方法中制备的干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体。

实施例4

本发明实施例提高燕窝美容效果的益生菌组合物成品的复配：取100目的干酪乳杆菌菌粉体11克、干酪乳杆菌代谢物粉体6克、微晶纤维素18克、药用玉米淀粉80克，菊粉8克、硬脂酸镁8克。

其中，干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体均为实施例1中方法中制备的干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体。

实施例5

本发明实施例提高燕窝美容效果的益生菌组合物的复配：取100目的干酪乳杆菌菌粉体11克、干酪乳杆菌代谢物粉体6克、微晶纤维素18克、药用玉米淀粉80克，菊粉12克、硬脂酸镁12克。

其中，干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体均为实施例1中方法中制备的干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌代谢物粉体。

实施例6

表1为实施例1至实施例5中的提高燕窝美容效果的益生菌组合物提高燕窝利用率美容养颜的应用效果

表1本发明实施例提高燕窝美容效果的益生菌组合物提高燕窝利用率美容养颜的应用效果

表1

有表1可知，女性1组和女性2组食用燕窝频率、份量、品质均相同。其中，女性1组100人燕窝与干酪乳杆菌同时服用，15天开始统计效果，同时服用15天，其中，有22人感觉脸色有所变化；同时服用30天，有52人感觉脸色改善，肤色变白，便秘缓解；服用60天，有78人感觉脸色明显改善，光滑，有弹性，便秘改善明显；燕窝与干酪乳杆菌同时服用90天，有89人感觉脸色变化明显，细腻有光泽，皱纹减少，便秘得到明显改善。试验期间有11人同时服用燕窝及干酪乳杆菌在美容养颜方面未有变化。

女性2组100人只食用燕窝，15天开始统计效果，服用15天，有9人感觉脸色有变化；服用30天，有26人感觉脸色改善；服用60天，有37人感觉脸色得到改善；服用90天有43人感觉脸色明显改善，皱纹有所变淡。试验期间有57人服用燕窝在美容养颜方面未有变化。

综上，可知，同时服用燕窝和干酪乳杆菌具有更好的美容效果。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

序列表

<110> 山东环亿生物科技有限公司

<120> 一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物及其制备方法

<130> GG18158552A

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1392

<212> DNA

<213> Lactobacillus casei

<400> 1

ccccggcttc gggtgttaca aactctcatg gtgtgacggg cggtgtgtac aaggcccggg 60

aacgtattca ccgcggcgtg ctgatccgcg attactagcg attccgactt cgtgtaggcg 120

agttgcagcc tacagtccga actgagaatg gctttaagag attagcttga cctcgcggtc 180

tcgcaactcg ttgtaccatc cattgtagca cgtgtgtagc ccaggtcata aggggcatga 240

tgatttgacg tcatccccac cttcctccgg tttgtcaccg gcagtcttac tagagtgccc 300

aactaaatgc tggcaactag tcataagggt tgcgctcgtt gcgggactta acccaacatc 360

tcacgacacg agctgacgac aaccatgcac cacctgtcat tttgcccccg aaggggaaac 420

ctgatctctc aggtgatcaa aagatgtcaa gacctggtaa ggttcttcgc gttgcttcga 480

attaaaccac atgctccacc gcttgtgcgg gcccccgtca attcctttga gtttcaacct 540

tgcggtcgta ctccccaggc ggaatgctta atgcgttagc tgcggcactg aagggcggaa 600

accctccaca cctagcattc atcgtttacg gcatggacta ccagggtatc taatcctgtt 660

cgctacccat gctttcgagc ctcagcgtca gttacagacc agacagccgc cttcgccact 720

ggtgttcttc catatatcta cgcatttcac gctacacatg gagttccact gtcctcttct 780

gcactcaagt ttcccagttc cgatgcgctt cctcggttaa gccgagggct ttcacatcag 840

acttaaaaaa ccgcctgcgc tcgctttacg cccaataaat ccggataacg cttgccacct 900

acgtattacc gcggctgctg gcacgtagtt agccgtggct ttctggttgg ataccgtcac 960

gccgacaaca gttactctgc cgaccattct tctccaacaa cagagtttta cgacccgaaa 1020

gccttcttca ctcacgcggc gttgctccat cagacttgcg tccattgtgg aagattccct 1080

actgctgcct cccgtaggag tttgggccgt gtctcagtcc caatgtggcc gatcaacctc 1140

tcagttcggc tacgtatcat cgccttggtg agccattacc tcaccaacta gctaatacgc 1200

cgcgggtcca tccaaaagcg atagcttacg ccatctttca gccaagaacc atgcggttct 1260

tggatctatg cggtattagc atctgtttcc aaatgttatc ccccacttaa gggcaggtta 1320

cccacgtgtt actcacccgt ccgccactcg ttccatgttg aatctcggtg caagcaccga 1380

tcatcaacga gc 1392

Claims (6)

1.一种提高燕窝美容效果的益生菌组合物，其特征在于，所述组合物以干酪乳杆菌菌粉体和干酪乳杆菌菌代谢物粉体为活性成分；所述干酪乳杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为：CCTCCNO：M2018043；所述组合物还包括菌粉载体，所述菌粉载体包括微晶纤维素、药用玉米淀粉、菊粉、硬脂酸镁；其中，所述组合物的原料以质量份数计：干酪乳杆菌菌粉体9-11份、干酪乳杆菌代谢物粉体4-6份、微晶纤维素18-22份、药用玉米淀粉80-120份、菊粉8-12份、硬脂酸镁8-12份。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下质量份数的原料：干酪乳杆菌菌粉体9.5-10.5份、干酪乳杆菌代谢物粉体4.5-5.5份、微晶纤维素19-21份、药用玉米淀粉90-110份、菊粉9-11份、硬脂酸镁9-11份。

3.一种制备权利要求1或2所述的组合物的方法，其特征在于，

将所述干酪乳杆菌通过扩大菌种培养、一级种子培养、种子罐培养以及发酵培养获得干酪乳杆菌发酵菌液；

将所述干酪乳杆菌发酵菌液离心，分别收集干酪乳杆菌菌泥及离心后的发酵液，并将所述干酪乳杆菌菌泥和离心后的发酵液分别冷冻干燥粉碎和浓缩干燥粉碎获得干酪乳杆菌菌粉体以及干酪乳杆菌代谢物粉体；

将所述干酪乳杆菌菌粉体以及干酪乳杆菌代谢物粉体与菌粉载体混合，得到所述组合物。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述干酪乳杆菌菌粉体的制备方法具体为：将所述干酪乳杆菌菌泥、无菌水、脱脂奶粉、低聚果糖、甘油、麦芽糊精以及低聚异麦芽糖混合得到干酪乳杆菌悬菌液，将所述悬菌液冷冻干燥粉碎获得干酪乳杆菌菌粉体。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述悬菌液冷冻干燥在所述悬菌液冷冻干燥在-35℃至-30℃的条件下预冻2-5小时，-50℃至-40℃真空冷冻干燥，粉碎成100目的干酪乳杆菌菌粉。

6.权利要求3所述的方法制备的组合物，在制备具有下述至少一种功能的产品中的应用：1）提高燕窝在人体中的利用率；2）提高对人体的美容效果；3）提高人体的免疫力。