CN109793073A - 马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：S1:取马黛茶饮Akg，粉碎，用5‑15倍量的水70‑90℃煎煮2.5‑3.5h，期间不时搅拌，过滤得滤液，重复5‑15倍量的水70‑90℃煎煮2.5‑3.5h，合并滤液后减压浓缩，浸膏用石油醚脱脂两次，弃去石油醚，得马黛茶饮水提物浸膏;S2:用吸附树脂进行分组，依次用30%乙醇、60%乙醇、90%乙醇洗脱，减压浓缩洗脱液，得到马黛茶饮水提取物Y1、30%乙醇部位提取物Y2、60%乙醇部位提取物Y3、90%乙醇部位提取物Y4;S3:浓缩、冷冻干燥，冰箱保存；S4:根据提取物实验结果选取最优的降脂活性部位和降糖活性部位。本发明的有益效果为：降脂活性部位和降糖活性部位的提取过程方便快捷。

Description

马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法

技术领域

本发明涉及一种马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法。

背景技术

饮用茶已经成为了人们生活中的一种习惯，尤其是在古老的中国文化中，茶已经成为了一种文化。随着人们生活质量的提升，对于饮用茶的品质要求也越来越高，如大量的茶偏向保健茶、减肥茶等等，进而通过这些保健茶、减肥茶来改善人们的生活质量。

现有的马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法过程复杂，需要进一步改进。

发明内容

本发明的目的在于提供一种马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法，其提取过程方便。

为实现上述目的，本发明的技术方案是

一种马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1:取马黛茶饮Akg，粉碎，用5-15倍量的水70-90℃煎煮 2.5-3.5h，期间不时搅拌，过滤得滤液，重复5-15倍量的水70-90℃煎煮 2.5-3.5h，合并滤液后减压浓缩，浸膏用石油醚脱脂两次，弃去石油醚，得马黛茶饮水提物浸膏;

S2:用吸附树脂进行分组，依次用 30% 乙醇、60% 乙醇、90% 乙醇洗脱，减压浓缩洗脱液，得到马黛茶饮水提取物Y1、30%乙醇部位提取物Y2、60%乙醇部位提取物Y3、90%乙醇部位提取物Y4;

S3:浓缩、冷冻干燥，冰箱保存；

S4:根据提取物实验结果选取最优的降脂活性部位和降糖活性部位。

优选地，包括如下步骤：

S1:取马黛茶饮20kg，粉碎，用10倍量的水80℃煎煮 3h，期间不时搅拌，过滤得滤液，重复10倍量的水80℃煎煮 3h，合并滤液后减压浓缩，浸膏用石油醚脱脂两次，弃去石油醚，得马黛茶饮水提物浸膏;

S2:用吸附树脂进行分组，依次用水、 30% 乙醇、60% 乙醇、90% 乙醇洗脱，减压浓缩洗脱液，得到马黛茶饮水提取物Y1、30%乙醇部位提取物Y2、60%乙醇部位提取物Y3、90%乙醇部位提取物Y4;

S3:浓缩、冷冻干燥，冰箱保存；

S4:根据提取物实验结果选取最优的降脂活性部位和降糖活性部位。

本发明的有益效果为：降脂活性部位和降糖活性部位的提取过程方便快捷。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。

本发明具体实施的技术方案是：

实施例1

取马黛茶饮 20kg，粉碎，用 10 倍量的水80℃煎煮 3h，期间不时搅拌，过滤得滤液，重复 10 倍量水煮一次，合并滤液后减压浓缩，浸膏用石油醚脱脂两次，弃去石油醚，得马黛茶饮水提物浸膏。后用 D101 型大孔吸附树脂进行粗分，依次用 30% 乙醇、60% 乙醇、90%乙醇洗脱，减压浓缩洗脱液，得到马黛茶饮水提物（Y1）、30%乙醇部位（Y2）、60%乙醇部位（Y3）、90%乙醇部位浸膏（Y4）。浓缩、冷冻干燥，冰箱保存备用。

1材料与仪器

1.1实验动物：昆明雄性小鼠，体重22±2g。

1.2药品与试剂

马黛茶饮不同部位粉末自制，Y1、Y2、Y3、Y4，辛伐他丁。小鼠总胆固醇（TC）试剂盒，小鼠甘油三酯（TG）试剂盒，小鼠高密度脂蛋白（HDL-C）试剂盒，小鼠低密度脂蛋白（LDL-C）试剂盒，小鼠超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒。乙醇（分析纯），乙腈（色谱纯），甲醇（色谱纯），甲酸（分析纯）。

1.3主要仪器

电子分析天平、高速冷冻离心机、冷冻干燥机、旋转蒸发仪、可调式电热板、半自动生化分析仪、奥林巴斯倒置显微镜。

2、方法

2.1模型与分组

选取高脂饲料喂养法建立实验性高脂血症小鼠模型。KM雄性小鼠预喂养 3d，实验时随机挑选出 10 只小鼠作为空白对照组（K），以正常饲料喂养，其余小鼠用高脂饲料喂养 2w建立实验性小鼠高脂血症模型，给予高脂饲料的第 14d 尾静脉取血测定造模小鼠空腹血清血脂四项水平。取造模成功的高脂血症小鼠60只，随机分成 6 组，每组 10只。依次为模型对照组（M）、辛伐他汀阳性对照组（X）、马黛茶饮水部位组（Y1）、马黛茶饮 30%乙醇部位组（Y2）、马黛茶饮 60%乙醇部位组（Y3）、马黛茶饮 90%乙醇部位组（Y4）。各组小鼠分笼喂养，自由饮食，12 小时交替照明，温度 23～25℃，湿度 40%～70%。实验期间，每 4 天称量各组小鼠体重，观察各组小鼠饮食量，饮水量及活动情况。

2.2给药方式及喂养

除空白组外，辛伐他汀组按小鼠体质量 40mg/kg给药，马黛茶饮各部位组按小鼠体质量1.67/kg给药，模型组给予同体积 0.9%生理盐水，连续给药 4w。于最后一次给药后两小时麻醉处死所有小鼠，眼球取血 1ml。血液静置 2h，5000r/min离心 10min 取血清，-80℃低温冰箱存储血清。取血后，解剖各组小鼠，迅速摘取各组小鼠的肝脏、肾脏、脾脏等进行病理学检查，保存于-80℃低温冰箱备用。同时取部分肝脏用通用型组织固定液固定，常规脱水，石蜡包埋，制成切片，HE 染色，倒置显微镜下观察。

2.3检测

实验期间观察各组小鼠精神状态、活动情况、毛色状况、进食量和饮

水量、分泌物、***物、体重情况等。

生化试剂盒测定小鼠血清中的 TC、LDL-C、TG、HDL-C、SOD 的含量。

采用统计软件对各组数据进行单因素方差分析，组间对比采用 t 检验，实验结果均用 mean±SD 表示，p<0.05 为有显著性差异，具有统计学意义。

组织病理学检查和HE肝脏病理切片观察。

2.4经数据分析与病理结果得出马黛茶饮某部位（X）降血脂功效最优。

实施例2

取马黛茶饮 20kg，粉碎，用 10 倍量的水80℃煎煮 3h，期间不时搅拌，过滤得滤液，重复 10 倍量水煮一次，合并滤液后减压浓缩，浸膏用石油醚脱脂两次，弃去石油醚，得马黛茶饮水提物浸膏。后用 D101 型大孔吸附树脂进行粗分，依次用 30% 乙醇、60% 乙醇、90%乙醇洗脱，减压浓缩洗脱液，得到马黛茶饮水提物（Y1）、30%乙醇部位（Y2）、60%乙醇部位（Y3）、90%乙醇部位浸膏（Y4）。浓缩、冷冻干燥，冰箱保存备用。

1、材料与仪器

1.1实验动物：昆明雄性小鼠，体重22±2g。

1.2药品与试剂

马黛茶饮不同部位粉末自制，Y1、Y2、Y3、Y4，链脲佐菌素（STZ），二甲双胍，乙腈（色谱纯），甲醇（色谱纯），其余试剂为分析纯。

1.3主要仪器

电子分析天平、血糖检测仪、八导生理记录仪、照相机。

2.方法

2.1模型与分组

STZ 临用前于冰浴中以0.1mol/L枸橼酸钠缓冲液配制，微孔滤膜滤过，灭菌， ip给予大鼠60 mg/kg1 次，72 h后取尾血测定血糖水平，血糖值≥16.5 mmol/L 作为糖尿病大鼠成模的标准。将造模成功的 60 只糖尿病大鼠随机分为 6 组：模型组（M），二甲双胍阳性对照组（G）、马黛茶饮水部位组（Y1）、马黛茶饮 30%乙醇部位组（Y2）、马黛茶饮 60%乙醇部位组（Y3）、马黛茶饮 90%乙醇部位组（Y4），另取正常大鼠 10 只作为空白对照组(K)。

2.2给药方式及喂养

各给药组大鼠均ig 给药，二甲双胍阳性对照组（0.15g/kg），其余马黛茶饮各部位组（1g/kg），每天 1 次，持续 11周，空白组和模型组给予等量蒸馏水。于给药第 6、 11 周测定 24 h 尿糖和血糖水平。采集 24 h 收集的尿样，采用专业试纸测定尿糖值。 大鼠尾静脉取血，血糖仪及试纸检测血糖水平。给药 11 周后大鼠 ip 戊巴比妥钠 25 mg/kg 麻醉，仰位固定，分离暴露右侧颈总动脉，结扎远心端，近心端用动脉夹夹闭，将压力传感器***左心室，连接 八 导 生 理 记 录 仪 ， 检测 左 心 室 平 均 收 缩 压（LVSP）、左心室平均舒张末压（LVEDP）、平均左心室内压最大上升速率（+dp/dtmax）及最大下降速率（-dp/dtmax），并同步记录心率。

2.3检测

实验期间观察各组小鼠精神状态、活动情况、毛色状况、进食量和饮

水量、分泌物、***物、体重情况等。

采用统计软件对各组数据进行单因素方差分析，组间对比采用 t 检验，实验结果均用 mean±SD 表示，p<0.05 为有显著性差异，具有统计学意义。

2.4经数据分析与病理结果得出马黛茶饮某部位（X）降糖功效最优。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (2)

1.一种马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1:取马黛茶饮Akg，粉碎，用5-15倍量的水70-90℃煎煮 2.5-3.5h，期间不时搅拌，过滤得滤液，重复5-15倍量的水70-90℃煎煮 2.5-3.5h，合并滤液后减压浓缩，浸膏用石油醚脱脂两次，弃去石油醚，得马黛茶饮水提物浸膏;

S2:用吸附树脂进行分组，依次用 30% 乙醇、60% 乙醇、90% 乙醇洗脱，减压浓缩洗脱液，得到马黛茶饮水提取物Y1、30%乙醇部位提取物Y2、60%乙醇部位提取物Y3、90%乙醇部位提取物Y4;

S3:浓缩、冷冻干燥，冰箱保存；

S4:根据提取物实验结果选取最优的降脂活性部位和降糖活性部位。

2.根据权利要求1所述的马黛茶饮降脂活性部位和降糖活性部位的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1:取马黛茶饮20kg，粉碎，用10倍量的水80℃煎煮 3h，期间不时搅拌，过滤得滤液，重复10倍量的水80℃煎煮 3h，合并滤液后减压浓缩，浸膏用石油醚脱脂两次，弃去石油醚，得马黛茶饮水提物浸膏;

S2:用吸附树脂进行分组，依次用水、 30% 乙醇、60% 乙醇、90% 乙醇洗脱，减压浓缩洗脱液，得到马黛茶饮水提取物Y1、30%乙醇部位提取物Y2、60%乙醇部位提取物Y3、90%乙醇部位提取物Y4;

S3:浓缩、冷冻干燥，冰箱保存；

S4:根据提取物实验结果选取最优的降脂活性部位和降糖活性部位。