CN109770362A - 一种解酒护肝保健品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种解酒护肝保健品及其制备方法。以含有高活性乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶及代谢产物醋酸菌纤维素的醋酸菌提取物为主料，制成颗粒剂、片剂或胶囊剂。本品具有良好的解酒防醉效果，饮酒者在饮酒前服用本品后，可使酒精在胃肠道迅速代谢为乙酸从而被吸收或***，降低过量酒精对人体的伤害，解酒护肝。本品天然安全、方便食用，易于保存携带，具有较大的工业化生产价值。

Description

一种解酒护肝保健品及其制备方法

技术领域

本发明涉及解酒产品，具体涉及一种解酒护肝保健品及其制备方法。

背景技术

长期大量饮酒会导致多种急性和慢性肝脏疾病。研究表明，乙醇进入肝细胞后，经过乙醇脱氢酶、过氧化氢体分解酶以及肝微粒体乙醇氧化酶系三条途径氧化为乙醛。过量饮酒导致大量乙醛堆积在肝脏，对肝细胞产生明显的毒性作用，直接和间接导致肝损伤。长期大量饮酒、酗酒不仅会导致酒精中毒，还会导致酒精性肝病，其中包括：酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化及轻症酒精性肝病。长期摄入酒精诱发肝损伤等系列问题已成为全球最主要的公共健康问题之一，备受学术界的关注，但至今仍没有治疗酒精性肝病(ALD)的特效药物。且进入体内的药物大多数要经过肝脏的转化，若病患肝功能减退，药物进入体内，势必增加肝脏负担。因此，开发天然来源的微生物功能性食品对肝功能损伤的保护具有重要的现实意义。

目前市场上的“解酒”产品主要分为化学制剂类、酶制剂类、中药制剂类。其中化学制剂类多为***、维生素与氨基酸等成分，有一定醒酒作用，但对酒精造成的脏器损害和慢性中毒效果甚微；酶制剂类主要含乙醛脱氢酶，但价格较为昂贵；中药制剂类品类繁多，但功效甚微。经广泛的市场调研和人群试用证明，这些产品的效果均不理想。

醋酸菌是一类能够将酒精氧化成醋酸的微生物的总称，是食醋和果醋生产中的重要微生物。醋酸菌菌体细胞质和细胞膜含有复杂的乙醇脱氢酶及乙醛脱氢酶系。此外，优良醋酸菌菌种具有良好的乙醇代谢能力，较强的抗氧化活性，且发酵周期短，工业化生产技术较为成熟。同时，人们近年来对保健养生的观念日益加深，因此对于具有保健能力的功能性微生物产品的开发，颇具市场潜力。故根据酒精性肝损伤的生理、生化特点，应用醋酸菌的功能特性，针对酒精性肝损伤发明醋酸菌解酒护肝产品对推动肝功能保健及相关产品的开发具有重要的意义。

醋酸菌类微生物主要包括醋酸杆菌属(Acetobaeter)及葡萄糖酸杆菌属Gluconobaceter)的微生物，因为二者均可以氧化乙醇而产生醋酸，所以也称作醋酸菌。制醋工业上最常见的产醋酸杆菌为纹膜醋酸菌(Acetobaete aceti)和恶臭醋酸杆菌(Acetobaete rancence)，葡萄糖酸杆菌属微生物氧化乙醇为醋酸的能力弱于醋酸杆菌，但相对于其他微生物，产生乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的能力也较强，也适合作为这两种酶的提取原料。

醋酸菌对肝功能损伤的研究是功能性食品学、现代微生物学、生物化学、病理学等等学科的高度结合，目前已经报道的与醋酸菌相关的解酒护肝产品主要以功能性原料，例如中草药、香料、蜂蜜、谷类作物种子等为底物，借助醋酸菌、含有醋酸菌的混合菌剂或者直接使用脱氢酶发酵而制成，但制成产品的组分及制备工艺复杂，且制成产品存在解酒慢，及加重肝负担等问题。

醋酸菌纤维素(Bacterial Cellulose，BC)是由醋杆菌等细菌异养产生的凝胶膜状物。与植物纤维素和动物纤维素相比，它是一种“超纯净”的纤维素，不掺杂其他多糖，具有许多优良特性，在功能性食品生产领域具有良好的开发前景。但尚未见到利用醋酸菌纤维素提高醋酸菌或其酶制剂的解酒、护肝功效的报道，主要原因在于：现有工艺一般在发酵后进行过滤工序，导致醋酸菌纤维素被分离去除。

发明内容

为解决现有解酒产品的不足，本发明提供了一种解酒护肝保健品及其制备方法。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种解酒护肝保健品，该保健品包括主料，所述主料包括组分A及组分B，组分A选自醋酸菌类微生物菌体、醋酸菌类微生物菌体裂解物、乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶中的一种或多种，组分B为醋酸菌纤维素(BC)。

优选的，所述主料是将醋酸菌类微生物通过物理措施(例如，对醋酸菌类微生物发酵液匀浆)进行菌体裂解(裂解物含有乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶)，并与该醋酸菌类微生物的代谢产物醋酸菌纤维素混合后，经冷冻干燥而制成的醋酸菌提取物(冻干粉)，即主料中含有的乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶主要来源于醋酸菌类微生物，为了控制酶的含量标准，可以采用少量商品化乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶制剂作为补充。

优选的，所述乙醇脱氢酶的含量标准为≥1.2U/mg，乙醛脱氢酶的含量标准为≥1.2U/mg，醋酸菌纤维素的含量标准为≥0.30mg/mg。

优选的，所述醋酸菌类微生物选自木葡糖醋杆菌，其在发酵阶段，细胞膜中及代谢产物醋酸菌纤维素上存在高活性的乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶。

优选的，所述主料还包括酶稳定剂，酶稳定剂选自Mg²⁺、Fe²⁺或Fe³⁺，在冷冻干燥之前(即在匀浆后)加入，酶稳定剂的用量按照在匀浆所得体系(裂解液)中的终浓度为0.1～10mM计算。

优选的，所述保健品还包括辅料，辅料与主料的质量比为0.1～10:1，辅料选自硬脂酸镁、玉米淀粉中的一种或两种。

优选的，所述保健品还包括具有保肝作用的天然来源(例如，槲皮素、陈皮、菊花、葛根花的提取物等)或合成的活性物质，活性物质与主料(醋酸菌提取物)的质量比为1:0.5～3。

一种解酒护肝保健品的制备方法，包括以下步骤：

将上述醋酸菌类微生物进行发酵培养得菌体发酵液，将菌体发酵液匀浆，使得菌体裂解并与发酵培养中菌体产生的代谢产物混匀，得到含乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶及醋酸菌纤维素的裂解液；向所述裂解液中加入酶稳定剂；然后冷冻干燥，得到冻干粉(即上述醋酸菌提取物)。

优选的，所述发酵培养具体包括以下步骤：将醋酸菌类微生物(例如，木葡糖醋杆菌)接种于液体培养基，28～32℃培养，振荡周期150～180rpm，培养70～72小时，得到菌体发酵液。

优选的，所述匀浆具体包括以下步骤：向所述菌体发酵液中加入8～10倍体积量的pH＝6～7的0.05M磷酸缓冲液，然后于25～30℃、8000～12000rpm匀浆3～5分钟，得裂解液。

优选的，所述酶稳定剂选自Mg²⁺、Fe²⁺或Fe³⁺，在裂解液中的终浓度为0.1～10mM。

优选的，所述冷冻干燥的条件包括：菌体裂解液厚度6～8mm，-20℃到-30℃常压预冻8～10h，然后于10～100pa下，-40到-60℃干燥24h。

优选的，还包括以下步骤：将所述醋酸菌提取物与上述辅料混合后制成颗粒剂、片剂或胶囊剂等剂型；或者，将所述醋酸菌提取物与上述辅料及具有保肝作用的天然来源或合成的活性物质混合后制成颗粒剂、片剂或胶囊剂等剂型。

上述醋酸菌提取物在制备解酒护肝保健品、药品中的应用，该醋酸菌提取物包括醋酸菌纤维素、乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶。

本发明的有益效果体现在：

本发明提供的护肝解酒保健品主要以醋酸菌类微生物及其代谢产物醋酸菌纤维素为原料制备而成，利用醋酸菌纤维素促进醋酸菌类微生物所含乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶的作用，有效地加快肠胃内酒精代谢，降低肝脏负担，具有显著的解酒护肝的功效及保肝、护肝作用，方便食用，易于保存携带，具有较大的市场推广价值。

进一步的，本发明通过添加一定的活性物质(例如，槲皮素、陈皮、菊花、葛根花的提取物等)，改善肝脏功能，增加肝脏的解毒作用。

本发明提供的护肝解酒保健品，其制备工艺简单，原料易得、安全、成本低，有较大的工业化生产价值，且保健品原料(醋酸菌提取物)中乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶、醋酸菌纤维素组分配比合理，能提供显著的解酒护肝的功效。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案进行进一步描述。下述实施例仅用于解释本发明，而非对本发明保护范围的限制。

(一)解酒护肝保健品的制备

本发明提供的解酒机制，采用以乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶为主要活性成分的解酒配方，通过口服由醋酸菌菌体及其代谢物醋酸菌纤维素制成的含高活性乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的醋酸菌提取物，使得乙醇在胃肠道中被分解为乙酸。对于醋酸菌类微生物而言，其醋酸的产生途经和乙醇在人体内的代谢途径基本一致，通过首过代谢将乙醇分解为乙酸，而乙酸对人体的毒害作用很小，所以可有效减少乙醇吸收，达到解酒防醉的效果。

解酒护肝保健品的制备过程如下：将原料(例如，取自发酵液)醋酸菌类微生物细胞体及醋酸菌纤维素，通过高速匀浆进行菌体裂解并与醋酸菌纤维素混匀；加入酶稳定剂Mg²⁺、Fe²⁺或Fe³⁺，使其终浓度为0.1～10mM；然后冷冻干燥，制成冻干粉，即得到白色粉末状的醋酸菌提取物；以醋酸菌提取物为主料，加入制剂辅料，制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。

由于从醋酸菌类微生物中，能够获取较多量的乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶，故以醋酸菌类微生物为原料。以具有高乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性的菌株，例如，分离自食用柿子醋中的木葡糖醋杆菌，接种于液体培养基，培养得到菌体发酵液。培养完成时，发酵液菌体数量达到2×10⁹CFUs/mL，通过ADH及ALDH试剂盒进行活性测定，乙醇脱氢酶活力达到0.15～0.20U/mL，乙醛脱氢酶活力达到0.12～0.18U/mL。同时，扫描电镜下可见发酵液中醋酸菌纤维素为胞外产物，测得醋酸菌纤维素湿膜重为25.36g/100mL，冷冻干燥后醋酸菌纤维素干重为0.37g/100mL。

裂解及混匀工艺：向菌体发酵液中加入磷酸缓冲液，室温下高速匀浆器中匀浆。

以醋酸菌提取物为主要活性物质，与合适的辅料(硬脂酸镁、玉米淀粉等)相混合，按照需要做成片剂、胶囊、颗粒剂(即保健品)等服用(在液体制剂中，乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶容易发生变化导致活性丧失)。也可添加具有保肝作用的相关成分作为辅助活性物质，如槲皮素、陈皮、菊花、葛根花的提取物(加入量与醋酸菌提取物的比例为1:0.5～3)。其中，槲皮素对肝癌细胞显示出较强的细胞毒作用，能有效抑制肝癌细胞的生长；对肝损伤具有良好的保护作用及一定的抗肝纤维化的作用，有显著的护肝效果。

(二)解酒护肝保健品的功效实验

急毒试验显示：醋酸菌提取物对小鼠的最大耐受量为30g/kg。

药效试验结果证明：醋酸菌提取物显示了较强的乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性，可以有效地预防小鼠醉酒，延长小鼠醉酒时间、降低醉酒率、缩短醒酒时间。

参照醋酸菌提取物中乙醇脱氢酶活力进行对比实验：结果表明，与单独使用乙醇脱氢酶酶制剂比较，联合使用醋酸菌纤维素与乙醇脱氢酶酶制剂可延长小鼠醉酒时间，解酒功效更显著。

本保健品通过口服，经胃肠道而起作用，在饮酒前半小时左右服用。在饮酒前服用本保健品，可使酒精在胃肠道迅速代谢为乙酸而被吸收或***，从而降低过量酒精对人体的伤害。

(三)制剂实例

实例1

以制备胶囊剂1000粒为例：

木葡糖醋杆菌(CGMCC 3917，参考文献：Dehui Lin,Patricia Lopez-Sanchez,RuiLi,Zhixi Li*.Production of bacterialcellulose by GluconacetobacterhanseniiCGMCC 3917using only waste beer yeast asnutrient source,BioresourceTechnology,2014,151C:113-119.)接种于液体培养基(培养基组成：葡萄糖20g、酵母膏5g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁15g、蒸馏水1L、无水乙醇20mL)，30℃培养，振荡周期150rpm，培养72小时后，加入10倍量pH＝6.5的0.05M磷酸缓冲液，高速匀浆器中12000rpm匀浆5分钟，加入酶稳定剂(如硫酸铁，终浓度0.1mM)经冷冻干燥(冷冻干燥条件：菌体裂解液厚度6mm，-20℃预冻10h，30Pa下、-50℃干燥24h)，得到白色粉末状的醋酸菌提取物干粉。

所得提取物干粉直接装胶囊，每粒重约0.03g，每粒含醋酸菌提取物干粉30mg(其中乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性均≥40U，含醋酸菌纤维素12mg)

用法用量：口服，每次1～2粒，饮酒前10～30℃温水服用。

实例2

以制备胶囊剂1000粒为例：

实例1中的木葡糖醋杆菌接种于液体培养基(培养基组成：葡萄糖20g、酵母膏5g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁15g、蒸馏水1L、无水乙醇20mL)，30℃培养，振荡周期150rpm，培养72小时后，加入10倍量pH＝6.5的0.05M磷酸缓冲液，高速匀浆器中12000rpm匀浆5分钟，加入酶稳定剂(如硫酸铁，终浓度0.1mM)经冷冻干燥(冷冻干燥条件：菌体裂解液厚度6mm，-20℃预冻10h，30Pa下、-50℃干燥24h)，得到白色粉末状的醋酸菌提取物干粉。

所得提取物干粉与辅料按以下比例充分混匀：

醋酸菌提取物干粉(主料) 30g

玉米淀粉(辅料) 35g

硬脂酸镁(辅料) 5g

按制剂学胶囊剂的工艺进行制剂，每粒重约0.07g，每粒含醋酸菌提取物干粉30mg(其中乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性均≥40U，含醋酸菌纤维素12mg)

用法用量：口服，每次1～2粒，饮酒前10～30℃温水服用。

实例3

以制备胶囊剂1000粒为例：

实例1中的木葡糖醋杆菌接种于液体培养基(培养基组成：葡萄糖20g、酵母膏5g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁15g、蒸馏水1L、无水乙醇20mL)，30℃培养，振荡周期150rpm，培养72小时后，加入10倍量pH＝6.5的0.05M磷酸缓冲液，高速匀浆器中12000rpm匀浆5分钟，加入酶稳定剂(如硫酸铁，终浓度0.1mM)经冷冻干燥(冷冻干燥条件：菌体裂解液厚度6mm，-20℃预冻10h，30Pa下、-50℃干燥24h)，得到白色粉末状的醋酸菌提取物干粉。

所得提取物干粉与辅料(玉米淀粉和硬脂酸镁)，及槲皮素按以下比例充分混匀。

按制剂学胶囊剂的工艺进行制剂，每粒重约0.07g，每粒含醋酸菌提取物干粉30mg(其中乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性均≥40U，含醋酸菌纤维素12mg)，含槲皮素15mg。

用法用量：口服，每次1～2粒，饮酒前10～30℃温水服用。

实例4

以制备胶囊剂1000粒为例，所用原料重量配比如下：

醋酸菌提取物干粉(与实例1同批次) 30g

槲皮素 20g

玉米淀粉 20g

按制剂学胶囊剂的工艺进行制剂，每粒重约0.07g，每粒含醋酸菌提取物干粉30mg，含槲皮素20mg。

用法用量：口服，每次1～2粒，饮酒前10～30℃温水服用。

实例5

以制备胶囊剂1000粒为例，所用原料重量配比如下：

醋酸菌提取物干粉(与实例1同批次) 30g

槲皮素 50g

玉米淀粉 220g

按制剂学胶囊剂的工艺进行制剂，每粒重约0.30g，每粒含醋酸菌提取物干粉30mg，含槲皮素50mg。

用法用量：口服，每次1～2粒，饮酒前10～30℃温水服用。

总之，本发明将醋酸菌菌体细胞及其代谢产物醋酸菌纤维素通过匀浆、冷冻干燥等步骤制成解酒护肝保健品。本品提高了乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶的活性，能有效地加快酒精代谢，改善肝脏功能，增加肝脏的解毒作用，具有解酒、防醉、护肝的功效，且天然安全、方便食用，易于保存携带，具有较大的工业化生产及市场推广价值。

Claims (10)

1.一种解酒护肝保健品，其特征在于：该保健品包括主料，所述主料包括组分A及组分B，组分A选自醋酸菌类微生物菌体、醋酸菌类微生物菌体裂解物、乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶中的一种或多种，组分B为醋酸菌纤维素。

2.根据权利要求1所述一种解酒护肝保健品，其特征在于：所述主料是将醋酸菌类微生物的培养体系中的一部分或全部菌体进行裂解，并与该醋酸菌类微生物的代谢产物醋酸菌纤维素混合后，经冷冻干燥而制成的醋酸菌提取物。

3.根据权利要求2所述一种解酒护肝保健品，其特征在于：所述醋酸菌提取物中，乙醇脱氢酶的含量为≥1.2U/mg，乙醛脱氢酶的含量为≥1.2U/mg，醋酸菌纤维素的含量为≥0.30mg/mg。

4.根据权利要求1所述一种解酒护肝保健品，其特征在于：所述醋酸菌类微生物选自木葡糖醋杆菌。

5.根据权利要求1所述一种解酒护肝保健品，其特征在于：所述主料还包括酶稳定剂，酶稳定剂选自Mg²⁺、Fe²⁺或Fe³⁺。

6.根据权利要求1所述一种解酒护肝保健品，其特征在于：所述保健品还包括辅料，或者，所述保健品还包括辅料及具有保肝作用的活性物质，辅料与主料的质量比为0.1～10:1，活性物质与主料的质量比为1:0.5～3。

7.一种解酒护肝保健品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

将醋酸菌类微生物进行发酵培养得菌体发酵液，将菌体发酵液匀浆，使得一部分或全部菌体裂解并与发酵培养中菌体产生的代谢产物混匀，得到含乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶及醋酸菌纤维素的裂解液；向所述裂解液中加入酶稳定剂；然后冷冻干燥，得到醋酸菌提取物。

8.根据权利要求7所述一种解酒护肝保健品的制备方法，其特征在于：所述匀浆具体包括以下步骤：向所述菌体发酵液中加入8～10倍体积量的磷酸缓冲液，然后于25～30℃、8000～12000rpm匀浆3～5分钟，得裂解液；所述酶稳定剂选自Mg²⁺、Fe²⁺或Fe³⁺，酶稳定剂在裂解液中的终浓度为0.1～10mM。

9.根据权利要求7所述一种解酒护肝保健品的制备方法，其特征在于：将所述醋酸菌提取物与辅料混合后制成颗粒剂、片剂或胶囊剂；或者，将所述醋酸菌提取物与辅料及具有保肝作用的活性物质混合后制成颗粒剂、片剂或胶囊剂。

10.一种醋酸菌提取物在制备解酒护肝保健品、药品中的应用，其特征在于：该醋酸菌提取物包括醋酸菌纤维素。