CN109722395A - 一种增强草坪生长能力的微生物制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物制剂技术领域,涉及一种增强草坪生长能力的微生物制剂及其制备方法;微生物制剂包括淀粉60‑70份、微生物菌剂8‑10份、海藻多糖20‑32份;微生物菌剂为经过低海拔和常温驯化的短杆菌Brevibacterium sp.TS22,保藏号为:CGMCC 16576;微生物菌剂还可包括赤霉素产生菌,重量为微生物菌剂的0~20%;微生物制剂的制备步骤如下:将微生物制剂的原材料组分按照重量份数投入到搅拌机中,搅拌反应,得到增强草坪生长能力的微生物制剂;本发明的微生物制剂单独使用或复合农林有机肥使用;本发明操作简便,生产成本低,能有效促进草坪的生长。
Description
技术领域
本发明属于微生物制剂技术领域,具体涉及一种增强草坪生长能力的微生物制剂及其制备方法。
背景技术
草坪建植体系是集生态调控、美化环境和文化娱乐等多种功能为一体的生态工程。作为城市园林绿化的重要组成部分,草坪绿地是衡量经济发展程度的标准之一,也是衡量现代化城市的标准之一,是现代城市社会发展与经济实力的一个有力体现,草坪建植体系的构建对于改善城市投资环境、招商引资、促进旅游等各个方面都起着不可忽略的作用。草坪在带来景观和美化效果的同时,在维系生态***平衡方面也发挥着重要作用。首先,它能够净化空气、杀菌消毒,草坪通过光合作用吸收CO2放出O2保持空气中CO2和O2的平衡,草坪还能稀释、分解、吸收和固定大气中的有毒气体、致癌物质和某些重金属气体等有毒物质,通过光合作用变害为利。其次,草坪能够保持水土、维持生态平衡。草坪能致密覆盖地表的草层,并且密集的根系能有效固着表土,防止地表径流的形成,降低表土被带走的可能性。另外,草坪还可以减缓太阳辐射,有效降低地表温度、增加空气湿度。
植物根植生于土中,吸收维持生命,正常生活所必需的是水分和氮素等无机养分;植物有1/2生存空间在土壤之中,植物的生存、生长发育离不开土壤;同时,光、温(热)、水、空气诸因素直接或间接均与土壤有关。目前科学技术水平,除改良植物的种性外,主要就是改良土壤环境了。从某种意义上讲,栽培养护几乎都是围绕调控与改良土壤环境,使其最大限度地满足作物生长发育的需要;草坪栽培养护中也是如此,所以,应保持“好草坪,好土壤”的良性循环。土壤的特征在于疏松,而特性在于具有肥力。决定土壤肥力的主要因素有土壤质地、土壤有机质与腐殖质、土壤结构、土壤水分与空气、土壤溶液、土壤硬度、土壤微生物等,均与草坪草、草坪的生长发育均有密切关系。草坪生态主要是指草坪与周围环境的关系,每一块草坪实际上就是一块小的生态***,与周围的光照、温度、水分、土壤、生物以及人类等环境因子都发生一系列的联系。其中,生物因子对草坪的影响最大,直接影响草坪的使用寿命。在草坪生长过程中,土壤不仅供给草坪草生命活动所需的水分、养分和根呼吸的氧气,维持着适宜的温度和热量条件,还对草坪草起着机械支撑和固定作用。此外,土壤也是可塑性最大的环境因子;目前通过各种措施,改善土壤的理化性质和肥力水平,使之更适应草坪草的生长,依据改良措施的不同,对于草坪的开发利用可以取得不同的效果。虽然,这些方法对草坪的改良虽然有一定的效果,但是效果不稳定,并且在实践应用中,大量的人力、物力以及财力的投入无形中极大增加了这些措施的成本。
发明内容
针对上述问题,本发明旨在解决所述问题之一,提供一种增强草坪生长能力的微生物制剂及其制备方法,具体技术方案如下:
本发明首先提供一种增强草坪生长能力的微生物制剂,包括以下原材料组分和重量份数,淀粉60-70份、微生物菌剂8-10份、海藻多糖20-32份;
所述微生物菌剂为源于青藏高原的短杆菌(Brevibacterium sp.TS22)经过低海拔和常温驯化而得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC NO. 16576。
所述低海拔和常温驯化的方式为:将分离自青藏高原土壤的短杆菌接种到LB培养基中,于室温条件下反复传代培养;所述LB培养基包括胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠5g/L,pH为7.4。
所述微生物菌剂还包括赤霉素产生菌,所述赤霉素产生菌为芽孢杆菌(Bacillus)、鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas)或伯克氏菌(Burkholderia)。
所述经过低海拔和常温驯化获得的短杆菌以及赤霉素产生菌在使用时,需经过与即将使用区主要环境条件相对应条件的再驯化,再驯化的条件为:将经过低海拔和常温驯化的TS22 菌株接种到LB培养基中,于20-25℃下反复传代培养;LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L,用NaOH调节pH至7.4,121℃高压蒸汽灭菌20min。
所述赤霉素产生菌的重量为微生物菌剂的0-20%。
本发明还提供上述增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,具体步骤如下:
将微生物制剂的原材料组分按照重量份数投入到搅拌机中,设置搅拌机的转速在室温条进行反应,得到增强草坪生长能力的微生物制剂。
所述搅拌机的转速设定为100-300r/min;反应时间为10-30min
所述的微生物制剂还可以与农林有机肥混合使用。
本发明的有益效果
本发明制备的微生物制剂可使植物的出苗率提高30%左右,植物的生物量提高50%以上,能够达到多重持久地增强草坪生长能力的效果;另一方面,本发明操作简便,生产成本低,具有十分重要的理论和实践意义。
具体实施方式
芽孢杆菌(Bacillus)、鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas)或伯克氏菌(Burkholderia)均购买自北京北纳创联生物技术研究院;
短杆菌Brevibacterium sp.TS22,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC NO.16576,保藏日期为:2018年10月12日,保藏地址为:中国北京;
Brevibacterium sp.TS22序列信息:
>CCCCGCCATCGGCTTCGTTCGAATGCCATGCATAGCGACTCGCACGCCAAGCGTG CGTCCCTGAGCCATGATCAAACTCTATGAGTAACACGTGGGCAACCTGCCTATAAGACT GGGATAACTTCGGGAAACCGGAGCTAATACCGGATACGTTCTTTTCTCGCATGAGAGAA GATGGAAAGACGGTTTACGCTGTCACTTATAGATGGGCCCGCGGCGCATTAGCTAGTTG GTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCC GCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAACGAAGAAGGCCTTCGGGTC GTAAAGTTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTACCAGAGTAACTGCTGGTACCTTGACGGT ACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGC AAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGTGGTTCCTTAAGTCTGATG TGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGA AGAGGAAAGTGGAATTCCAAAGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATTTGGAGGAACAC CAGTGGCGAAGGCGACTTTCTGGTCTGTAACTGACACTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGA GCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGAGGGTTTCCGCCCTTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACG GCCGCAAGGCTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGT GGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAACCCT AGAGATAGGGCTTTCCCCTTCGGGGGACAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAG CTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGATCTTAGTTG CCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGG GATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGG TACAAAGGGCTGCAAACCTGCGAAGGTAAGCGAATCCCATAAAGCCATTCTCAGTTCGG ATTGCAGGCTGCAACTCGCCTGCATGAAGCCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAT GCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCC
实施例1:
一种增强草坪生长能力的微生物制剂,包括以下原材料组分和重量份数,淀粉70份、微生物菌剂10份、海藻多糖20份,微生物菌剂还包括芽孢杆菌,重量为微生物菌剂的10%;
微生物菌剂为源于青藏高原的短杆菌(Brevibacterium sp.TS22)经过低海拔和常温驯化而得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCCNO. 16576;低海拔和常温驯化的方式为:将分离自青藏高原土壤的短杆菌接种到LB培养基中,于室温条件下反复传代培养,得到适应低海拔和常温条件的短杆菌;
经过低海拔和常温驯化获得的短杆菌以及赤霉素产生菌在使用时,需经过与即将使用区主要环境条件相对应条件的再驯化,再驯化的条件为:将经过低海拔和常温驯化的短杆菌接种到LB培养基中,于20-25℃下反复传代培养,LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L,用NaOH调节pH至7.4,121℃高压蒸汽灭菌20min。
一种增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,具体步骤如下:
将物料投入到搅拌机进行混匀,搅拌机的转速设定为180r/min,温度为室温,反应时间为22min,制得增强草坪生长能力的微生物制剂。施用时微生物制剂与农林有机肥按重量比为1:99均匀混合。
实施例2:
一种增强草坪生长能力的微生物制剂,包括以下原材料组分和重量份数,淀粉60份、微生物菌剂8份、海藻多糖32份,微生物菌剂还包括鞘氨醇单胞菌,重量为微生物菌剂的20%。;所述微生物菌剂为源于青藏高原的短杆菌(Brevibacterium sp.TS22)经过低海拔和常温驯化而得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC NO. 16576;低海拔和常温驯化的方式为:将分离自青藏高原土壤的短杆菌接种到LB培养基中,于室温条件下反复传代培养,得到适应低海拔和常温条件的短杆菌;
经过低海拔和常温驯化获得的短杆菌以及赤霉素产生菌在使用时,需经过与即将使用区主要环境条件相对应条件的再驯化,再驯化的条件为:将经过低海拔和常温驯化的短杆菌接种到LB培养基中,于20-25℃下反复传代培养,LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L,用NaOH调节pH至7.4,121℃高压蒸汽灭菌20min。
一种增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,具体步骤如下:
将物料投入到搅拌机进行混匀,搅拌机的转速设定为200r/min,温度为室温,反应时间为20min,制得增强草坪生长能力的微生物制剂。施用时微生物制剂与农林有机肥按重量比为2:98均匀混合。
实施例3:
一种增强草坪生长能力的微生物制剂,包括以下原材料组分和重量份数,淀粉68份、微生物菌剂8份、海藻多糖24份,微生物菌剂还包括芽孢杆菌,重量为微生物菌剂的20%;所述微生物菌剂为源于青藏高原的短杆菌(Brevibacterium sp.TS22)经过低海拔和常温驯化而得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCCNO. 16576;低海拔和常温驯化的方式为:将分离自青藏高原土壤的短杆菌接种到LB培养基中,于室温条件下反复传代培养,得到适应低海拔和常温条件的短杆菌;
经过低海拔和常温驯化获得的短杆菌以及赤霉素产生菌在使用时,需经过与即将使用区主要环境条件相对应条件的再驯化,再驯化的条件为:将经过低海拔和常温驯化的短杆菌接种到LB培养基中,于20-25℃下反复传代培养,LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L,用NaOH调节pH至7.4,121℃高压蒸汽灭菌20min。
一种增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,具体步骤如下:
将物料投入到搅拌机进行混匀,搅拌机的转速设定为100r/min,温度为室温,反应时间为30min,制得增强草坪生长能力的微生物制剂。
实施例4
一种增强草坪生长能力的微生物制剂,包括以下原材料组分和重量份数,淀粉65份、微生物菌剂5份、海藻多糖30份,微生物菌剂还包括伯克氏菌,重量为微生物菌剂的10%;所述微生物菌剂为源于青藏高原的短杆菌(Brevibacterium sp.TS22)经过低海拔和常温驯化而得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCCNO. 16576;低海拔和常温驯化的方式为:将分离自青藏高原土壤的短杆菌接种到LB培养基中,于室温条件下反复传代培养,得到适应低海拔和常温条件的短杆菌;
经过低海拔和常温驯化获得的短杆菌以及赤霉素产生菌在使用时,需经过与即将使用区主要环境条件相对应条件的再驯化,再驯化的条件为:将经过低海拔和常温驯化的短杆菌接种到LB培养基中,于20-25℃下反复传代培养,LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L,用NaOH调节pH至7.4,121℃高压蒸汽灭菌20min。
一种增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,具体步骤如下:
将物料投入到搅拌机进行混匀,搅拌机的转速设定为250r/min,温度为室温,反应时间为15min,制得增强草坪生长能力的微生物制剂。
实施例5
一种增强草坪生长能力的微生物制剂,包括以下原材料组分和重量份数,淀粉63份、微生物菌剂9份、海藻多糖28份;所述微生物菌剂为源于青藏高原的短杆菌(Brevibacterium sp. TS22)经过低海拔和常温驯化而得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC NO. 16576;低海拔和常温驯化的方式为:将分离自青藏高原土壤的短杆菌接种到LB培养基中,于室温条件下反复传代培养,得到适应低海拔和常温条件的短杆菌;
经过低海拔和常温驯化获得的短杆菌以及赤霉素产生菌在使用时,需经过与即将使用区主要环境条件相对应条件的再驯化,再驯化的条件为:将经过低海拔和常温驯化的短杆菌接种到LB培养基中,于20-25℃下反复传代培养,LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L,用NaOH调节pH至7.4,121℃高压蒸汽灭菌20min。
一种增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,具体步骤如下:
将物料投入到搅拌机进行混匀,搅拌机的转速设定为280r/min,温度为室温,反应时间为12min,制得增强草坪生长能力的微生物制剂。
实施例效果:
田间试验对肥料功能验证:
于江苏镇江选取试验田,分割成18个1米×1米地块,按上述5个实施实例和空白对照各三个重复设计,实验地块各实施实例分别使用相同份量(即100克)均匀混入土中,播种籽粒饱满、大小均匀的多年生高羊茅(Festuca arundinacea L.)种子各200粒,种子浸泡24小时后均匀播于基质表层,首先黑暗处理一周,充分浇水保证萌发,之后进行光照培养,光照强度为400-650μ5ol·m-2·s-1,期间早晚定期浇一次水,相对湿度为45-55%,温度为18℃-22℃。对照组不添加微生物制剂和农林有机肥处理,其余步骤相同。
出苗后统计出苗率,再10天后间苗,各留50株;再30天后收获随机选择各20株测株高、称总重。统计结果如下表1所述。
表1实施例效果统计表
从上述表1中可以看出,实施例1-5的效果明显优于对照组的效果;添加微生物制剂处理后,植物的出苗率提高30%左右,植物的生物量提高50%以上,这说明在本发明制备的微生物制剂能够有效增强草坪生长能力。另外,从表1结果也可以发现适当添加农林有机肥可以明显提高植物促生效果。
说明:以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述的技术方案;因此,尽管本说明书参照上述的各个实施例对本发明已进行了详细的说明,但是本领域的普通技术人员应当理解,仍然可以对本发明进行修改或等同替换;而一切不脱离本发明的精神和范围的技术方案及其改进,其均应涵盖在本发明的权利要求范围内。
序列表
<110> 江苏大学
<120> 一种增强草坪生长能力的微生物制剂及其制备方法
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 2
<211> 1384
<212> DNA
<213> 短杆菌(Brevibacterium sp. )
<400> 2
ccccgccatc ggcttcgttc gaatgccatg catagcgact cgcacgccaa gcgtgcgtcc 60
ctgagccatg atcaaactct atgagtaaca cgtgggcaac ctgcctataa gactgggata 120
acttcgggaa accggagcta ataccggata cgttcttttc tcgcatgaga gaagatggaa 180
agacggttta cgctgtcact tatagatggg cccgcggcgc attagctagt tggtgaggta 240
atggctcacc aaggcgacga tgcgtagccg acctgagagg gtgatcggcc acactgggac 300
tgagacacgg cccagactcc tacgggaggc agcagtaggg aatcttccgc aatggacgaa 360
agtctgacgg agcaacgccg cgtgaacgaa gaaggccttc gggtcgtaaa gttctgttgt 420
tagggaagaa caagtaccag agtaactgct ggtaccttga cggtacctaa ccagaaagcc 480
acggctaact acgtgccagc agccgcggta atacgtaggt ggcaagcgtt gtccggaatt 540
attgggcgta aagcgcgcgc aggtggttcc ttaagtctga tgtgaaagcc cacggctcaa 600
ccgtggaggg tcattggaaa ctggggaact tgagtgcaga agaggaaagt ggaattccaa 660
agtgtagcgg tgaaatgcgt agagatttgg aggaacacca gtggcgaagg cgactttctg 720
gtctgtaact gacactgagg cgcgaaagcg tggggagcaa acaggattag ataccctggt 780
agtccacgcc gtaaacgatg agtgctaagt gttagagggt ttccgccctt tagtgctgca 840
gctaacgcat taagcactcc gcctggggag tacggccgca aggctgaaac tcaaaggaat 900
tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat gtggtttaat tcgaagcaac gcgaagaacc 960
ttaccaggtc ttgacatcct ctgacaaccc tagagatagg gctttcccct tcgggggaca 1020
gagtgacagg tggtgcatgg ttgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc 1080
gcaacgagcg caacccttga tcttagttgc cagcattcag ttgggcactc taaggtgact 1140
gccggtgaca aaccggagga aggtggggat gacgtcaaat catcatgccc cttatgacct 1200
gggctacaca cgtgctacaa tggatggtac aaagggctgc aaacctgcga aggtaagcga 1260
atcccataaa gccattctca gttcggattg caggctgcaa ctcgcctgca tgaagccgga 1320
atcgctagta atcgcggatc agcatgccgc ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac 1380
cgcc 1384
Claims (9)
1.一种增强草坪生长能力的微生物制剂,其特征在于,包括以下原材料组分和重量份数,淀粉60-70份、微生物菌剂8-10份、海藻多糖20-32份;所述微生物菌剂为源于青藏高原的短杆菌Brevibacterium sp.TS22,经过低海拔和常温驯化而得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC 16576。
2.根据权利要求1所述的一种增强草坪生长能力的微生物制剂,其特征在于,所述低海拔和常温驯化的条件为:将短杆菌Brevibacterium sp.TS22接种到LB培养基中,于室温条件下反复传代培养;所述LB培养基包括胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠5g/L,pH为7.4。
3.根据权利要求1所述的一种增强草坪生长能力的微生物制剂,其特征在于,所述微生物菌剂还包括赤霉素产生菌,所述赤霉素产生菌的重量为微生物菌剂的0-20%。
4.根据权利要求3所述的一种增强草坪生长能力的微生物制剂,其特征在于,所述赤霉素产生菌为芽孢杆菌、鞘氨醇单胞菌或伯克氏菌。
5.根据权利要求2或3所述的一种增强草坪生长能力的微生物制剂,其特征在于,所述经过低海拔和常温驯化获得的短杆菌以及赤霉素产生菌在使用时,需经过与即将使用区主要环境条件相对应条件的再驯化,再驯化的步骤为:将经过低海拔和常温驯化的短杆菌以及赤霉素产生菌,分别接种到LB培养基中,于20-25℃下反复传代培养;LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L,用NaOH调节pH至7.4,121℃高压蒸汽灭菌20min。
6.根据权利要求1所述的一种增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:将微生物制剂的原材料组分按照重量份数投入到搅拌机中,设置搅拌机的转速在室温条进行反应,得到增强草坪生长的微生物制剂。
7.根据权利要求6所述的一种增强草坪生长能力的微生物制剂的制备方法,其特征在于,所述搅拌机的转速设定为100-300r/min;反应时间为10-30min。
8.将权利要求1所述的一种增强草坪生长能力的微生物制剂用于增强草坪生长能力的用途,其特征在于,所述增强草坪生长能力的微生物制剂单独使用或复合农林有机肥使用。
9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述增强草坪生长能力的微生物制剂复合农林有机肥使用时,增强草坪生长能力的微生物制剂和农林有机肥的质量比为1-2:98-99。
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