CN109689102A - Mek抑制剂,pd-1轴抑制剂,和vegf抑制剂的组合疗法 - Google Patents

Mek抑制剂,pd-1轴抑制剂,和vegf抑制剂的组合疗法 Download PDF

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Abstract

提供了包含MEK抑制剂,PD‑1轴抑制剂,和VEGF抑制剂的组合疗法,用于治疗结肠直肠癌和转移性结肠直肠癌。

Description

MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,和VEGF抑制剂的组合疗法
对相关申请的交叉援引
本申请要求2016年8月12日提交的流水号62/374437的美国临时申请的优先权,将其完整收入本文。
发明领域
本发明的领域一般性涉及MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,和VEGF抑制剂的组合的癌症疗法。
发明背景
胃肠肿瘤是全世界癌症相关死亡的常见起因。结肠直肠癌(CRC)分别是男性和女性中第三位和第二位最常诊断的癌症,而且分别是男性和女性中第四位和第三位癌症死亡的首要起因(Torre LA,Bray F,Siegel RL,et al.,Global cancer statistics,2012,CACancer J Clin.2015；65:87-108)。在美国每年诊断有CRC的患者中,约40％诊断有早期疾病,约40％诊断有区域性疾病,且约20％诊断有远端转移,五年存活率分别为90％,70％,和13％,其中大多数患者死于转移性疾病(Alberts SR and Wagman LD.,Chemotherapy forcolorectal cancer liver metastases,Oncologist 2008；13:1063-73；Kennecke H,YuJ,Gill S,et al.,Effect of M1a and M1b Category in Metastatic ColorectalCancer,Oncologist 2014；19:720-6；和American Cancer Society,Estimated Number*ofNew Cancer Cases and Deaths by Sex,US,2013[因特网上的资源；2015年11月12日访问]。
***性细胞毒性化学疗法是用于绝大多数转移性CRC(mCRC)患者的治疗支柱且中值总体存活只有30个月左右。抗血管内皮生长因子(VEGF)疗法,诸如贝伐珠单抗(bevacizumab),雷莫芦单抗(ramucirumab),和ziv-阿柏西普(aflibercept),和抗表皮生长因子受体单克隆抗体(mAb),诸如西妥昔单抗(cetuximab)和帕尼单抗(panitumumab)可以在一线,二线,和三线疗法中与化学疗法组合使用,尽管治疗组合随区域而变化(Petrelli F,Coinu A,Ghilardi M,et al.,Efficacy of Oxaliplatin-basedChemotherapy+Bevacizumab as First-line Treatment for Advanced ColorectalCancer.Am J Clin Oncol 2015；38:227-233)。
尽管有最近的进展,mCRC仍然是一种治愈不了的疾病。具有mCRC的患者的疾病控制期在每个下一线疗法中连续缩短,直至疾病变成不应性的,而且患者屈服于癌症。骨髓遏制,胃肠毒性,乏力/疲劳,周围神经毒性,和皮肤毒性(包括手和足综合征)是在正在接受治疗的具有mCRC的患者中常常观察到的不良事件。这些不良事件可显著影响患者的生活质量。
因此,存在对用于CRC和转移性CRC的改良疗法的需要。
发明概述
本公开文本提供一种治疗具有结肠直肠癌的受试者的方法。该方法包含对所述受试者施用包含(i)治疗有效量的MEK抑制剂,(ii)治疗有效量的PD-1轴抑制剂,和(iii)治疗有效量的VEGF抑制剂的疗法。
本公开文本进一步提供一种用于治疗人受试者中的结肠直肠癌的试剂盒。该试剂盒包含MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,VEGF抑制剂和包含关于使用治疗有效量的该MEK抑制剂,治疗有效量的该PD-1轴抑制剂和治疗有效量的该VEGF抑制剂来治疗该受试者的用法说明书的包装插页。
施用该MEK抑制剂,该PD-1轴抑制剂,和该VEGF抑制剂的次序可以变化。在一些方面,当在同一天施用该PD-1轴抑制剂和该VEGF抑制剂时,在该VEGF抑制剂前至少30分钟施用该PD-1轴抑制剂。
在本发明的一些方面,该MEK抑制剂是考比替尼或其药学可接受盐；该PD-1轴抑制剂是PD-L1抑制剂,且更加特别地是阿特珠单抗；和/或,该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗。
本公开文本进一步提供一种癌症疗法药物组合,其包含:(i)剂量为约20mg至约100mg,约40mg至约80mg,或约80mg的MEK抑制剂；(ii)剂量为约400mg至约1200mg,约600mg至约1000mg,约700mg至约900mg,或约840mg的PD-1轴抑制剂；和(iii)剂量为约5mg/kg至约15mg/kg,约5mg/kg至约10mg/kg,约5mg/kg,约10mg/kg或约15mg/kg的VEGF抑制剂。在本发明的一些特别方面,该MEK抑制剂是考比替尼或其药学可接受盐；该PD-1轴抑制剂是PD-L1抑制剂,且更加特别地是阿特珠单抗；和/或,该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗。
附图简述
图1显示一项临床试验的***(run-in)和扩充队列的研究方案。
图2显示一项临床试验的活检队列的研究方案。
发明详述
本发明涉及用MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂和VEGF抑制剂的组合,更加特别地是MEK抑制剂,PD-L1抑制剂和VEGF抑制剂的组合,且仍然更加特别地是考比替尼或其药学可接受盐,阿特珠单抗和贝伐珠单抗的组合治疗癌症。在一些方面,该癌症是CRC,且更加特别地是转移性CRC(mCRC)。认为同步抑制MEK,VEGF信号传导,和PD-1轴,诸如PD-L1,由此以多因子方式靶向肿瘤会增强具有CRC的患者中的免疫疗法成分的功效。在一些方面,认为组合疗法会增强已经接受至少一个含有氟嘧啶和奥沙利铂或伊立替康的在先线疗法的具有CRC的患者中免疫疗法成分的功效。
进一步认为将贝伐珠单抗添加至考比替尼和阿特珠单抗会给具有CRC的患者提供毒性与基于化学疗法的方案相比降低的积极治疗。
因为本发明的组合疗法的作用机制不同于传统的化学疗法方案,进一步认为进一步的标准疗法的活性不会受到显著影响。这会容许具有进展性疾病的患者继续治疗。
定义
如本文中使用的,“结肠直肠癌”(CRC)指结肠癌,直肠癌,和结肠直肠癌(即结肠和直肠区域二者的癌症)。
如本文中使用的,术语“癌症”指或描述哺乳动物中典型地以不受调节的细胞生长为特征的生理疾患。“肿瘤”包含一个或多个癌性细胞。
如本文中使用的,术语“患者”和“受试者”指动物,诸如哺乳动物,包括但不限于灵长动物(例如人),牛,绵羊,山羊,马,犬,猫,家兔,大鼠,小鼠等等。在某些方面,患者或受试者是人。
如本文中使用的,术语“治疗/处理”指设计用于改变临床病理学过程期间所治疗/处理个体或细胞的自然进程的临床干预。治疗/处理的期望效果包括降低疾病进展速率,改善或减轻疾病状态,和消退或改善的预后。例如,若一种或多种与癌症有关的症状得到减轻或消除,包括但不限于降低癌性细胞的增殖(或破坏癌性细胞),减少/减轻源自疾病的症状,提高罹患疾病的那些的生活质量,降低治疗疾病需要的其它药物的剂量,和/或延长个体的存活,则个体得到成功“治疗”。
如本文中使用的,短语“治疗有效量”指一种或多种药物化合物(i)治疗或预防本文中描述的特定疾病,状况,或病症,(ii)减轻,改善,或消除特定疾病,状况,或病症的一种或多种症状,或(iii)预防或延迟特定疾病,状况,或病症的一种或多种症状的发作的量。在癌症的情况中,治疗有效量的药物可减少癌细胞的数目；缩小肿瘤尺寸；抑制(即一定程度减缓和优选终止)癌细胞浸润入外周器官；抑制(即一定程度减缓和优选终止)肿瘤转移；一定程度抑制肿瘤生长；和/或一定程度缓解一种或多种与癌症有关的症状。就药物可预防癌细胞生长和/或杀伤现有癌细胞的程度而言,它可以是细胞抑制性和/或细胞毒性的。对于癌症疗法,可测量功效,例如通过评估总体响应率(ORR)。本文中的治疗有效量可以随诸如患者的疾病状态,年龄,性别,和重量,及药剂在个体中引发期望的应答的能力等因素而变化。治疗有效量也是治疗有益效果超过治疗的有毒或有害效果的量。为了预防性使用,有益或期望的结果包括如下的结果,诸如消除或降低风险,减轻严重性,或延迟疾病发作,包括疾病的生物化学,组织学和/或行为症状,其并发症和疾病发生期间呈现的中间病理学表型。为了治疗性使用,有益或期望的结果包括如下的临床结果,诸如减少/减轻源自疾病的一种或多种症状,提高罹患疾病的那些的生活质量,降低治疗疾病需要的其它药物的剂量,增强另一种药物的效果(诸如经由靶向),延迟疾病进展,和/或延长存活。在癌症或肿瘤的情况中,治疗有效量的药物在减少癌细胞的数目；降低肿瘤大小；抑制(即在一定程度上减缓或期望停止)癌细胞浸润入外周器官中；抑制(即在一定程度上减缓且期望停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上减轻一种或多种与病症有关的症状中可以具有效果。可以在一次或多次施用中施用治疗有效量。出于本发明的目的,药物,化合物,或药物组合物的治疗有效量是足以直接或间接实现预防性或治疗性处理的量。如在临床背景中理解的,药物,化合物,或药物组合物的治疗有效量可以与或不与另一种药物,化合物,或药物组合物组合实现。如此,可以在施用一种或多种治疗剂的背景中考虑“治疗有效量”,并且若与一种或多种其它药剂组合,可以实现期望的结果或者实现了期望的结果,则可以认为单一药剂是以治疗有效量给予的。
如本文中使用的,“与……组合”指在一种治疗形态以外还施用另一种治疗形态。因而,“与……组合”指在对个体施用一种治疗形态之前,期间,或之后施用另一种治疗形态。
如本文中使用的,术语“药物配制剂”指如下的制备物,其处于允许活性组分的生物学活性有效的形式,且不含另外的对会接受配制剂施用的受试者有不可接受的毒性的成分。此类配制剂是无菌的。“药学可接受”赋形剂(媒介,添加剂)是那些可合理施用于受试者哺乳动物以提供有效剂量的所采用的活性组分的。
如本文中使用的,“免疫组织化学”(IHC)指通过利用抗体特异性结合生物组织中抗原的原理检测组织切片的细胞中的抗原(例如蛋白质)的过程。免疫组织化学染色可用于诊断异常细胞,诸如那些在癌性肿瘤中找到的。特异性分子标志物是特定细胞事件诸如增殖或细胞死亡(凋亡)特征性的。IHC还可用于了解生物标志物和差异表达蛋白质在生物组织的不同部分中的分布和定位。使用对每一种标志物特异性的抗体或抗血清,诸如多克隆抗血清和单克隆抗体来检测表达。抗体可通过直接标记抗体自身来检测,例如用放射性标记物,荧光标记物,半抗原标记物诸如生物素,或酶诸如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶。在一种显现方法中,将抗体缀合至能催化产色反应的酶,诸如过氧化物酶(见免疫过氧化物酶染色)。在另一种显现方法中,也可将抗体带上荧光团标签,诸如荧光素或罗丹明(见免疫荧光)。或者,未标记的一抗与经标记二抗联合使用,后者包含对一抗特异性的抗血清,多克隆抗血清或单克隆抗体。免疫组织化学方案和试剂盒是本领域公知的且可商购的。
如本文中使用的,“抗治疗性抗体评估”(ATA)指使用基于风险的免疫原性策略来表征ATA应答的免疫原性评估,如Rosenberg AS,Worobec AS.,A risk-based approach toimmunogenicity concerns of therapeutic protein products,BioPharm Intl 2004；17:34-42；和Koren E,Smith HW,Shores E,et al.,Recommendations on risk-basedstrategies for detection and characterization of antibodies againstbiotechnology products,J Immuno Methods 2008；333:1-9)中详述的。通过援引将每一篇参考文献完整收入本文。
如本文中使用的,C最大指最大血浆浓度。
如本文中使用的,C最小指最小血浆浓度。
如本文中使用的,“浓度曲线下面积”(AUC)指拟合的血浆浓度对时间曲线下的面积。AUC0-∞指曲线基线-无穷下的面积。AUC0-T是总暴露。
如本文中使用的,“实体瘤中的响应评估标准”(RECIST)v1.1指Eisenhauer,EA,etal.,New response evaluation criteria in solid tumours:Revised RECISTguideline(version 1.1),Eur J Cancer 2009:45:228-247；Topalian SL,et al.,Safety,activity,and immune correlates of anti-PD-L1antibody in cancer,N EnglJ Med 2012:366:2443-54；和Wolchok JD,et al.,Guidelines for the evaluation ofimmunetherapy activity in solid tumors:immune-related response criteria,ClinCan Res 2009；15:7412-20中详述的肿瘤响应标准规范。通过援引将每一篇参考文献完整收入本文。
如本文中使用的,“免疫改良RECIST”(irRC)指自RECIST v1.1规范(Eisenhauer,EA,et al.,(2009))和Nishino M,et al.,Optimizing immune-related tumor responseassessment:does reducing the number of lesions impact response assessment inmelanoma patients treated with ipilimumab,J Immunother Can2014；2:17；和NishinoM,Giobbie-Hurder A,Gargano M et al.,Developing a common language for tumorresponse to immunotherapy:immune-related response criteria usingunidimensional measurements,Clin Can Res2013；19:3936-43中详述的免疫响应标准派生的标准。通过援引将每一篇参考文献完整收入本文。除非另有规定,应用RECIST v1.1规范。
如本文中使用的,“抑制”指目标酶的活性与该酶在抑制剂缺失下的活性相比降低。在一些方面,术语“抑制”意味着活性降低至少约5％,至少约10％,至少约20％,至少约25％,至少约50％,至少约60％,至少约70％,至少约80％,至少约90％,或至少约95％。在其它方面,抑制意味着活性降低约5％至约25％,约25％至约50％,约50％至约75％,或约75％至100％。在一些方面,抑制意味着活性降低约95％至100％,例如活性降低95％,96％,97％,98％,99％,或100％。此类降低可使用本领域技术人员会认识到的多种技术来测量。
如本文中使用的,“无进展存活”(PFS)指疾病的治疗至由调查人员使用RECISTv1.1确定的疾病进展或复发的第一次发生的时间。
如本文中使用的,“总体存活”(OS)指随机化至任何起因的死亡的时间。
如本文中使用的,“部分响应”(PR)指目标损害的直径之和降低至少30％,以基线直径之和作为参照。
如本文中使用的,“延迟疾病进展”意味着推迟,阻碍,减缓,延迟,稳定,和/或延缓疾病(诸如癌症)的发生。根据疾病的历史和/或所治疗的个体,此延迟可以是不同时间长度的。如对于本领域技术人员明显的是,充分或显著的延迟实质上可以涵盖预防,因为个体不发生疾病。例如,可以延迟晚期阶段癌症,诸如转移的发生。
如本文中使用的,“持续应答”指在停止治疗后对降低肿瘤生长的持续影响。例如,与施用阶段开始时的大小相比,肿瘤大小可以保持为相同或更小。在一些方面,持续应答具有与治疗持续时间至少相同的持续时间,治疗持续时间的至少1.5倍,2倍,2.5倍,或3倍长度。
如本文中使用的,“降低或抑制癌症复发”意指降低或抑制肿瘤或癌症复发或肿瘤或癌症进展。如本文中公开的,癌症复发和/或癌症进展包括但不限于癌症转移。
如本文中使用的,“完全响应”(CR)指所有目标损害的消失。任何病理性***(无论目标或非目标)的短轴缩短至小于10mm。
如本文中使用的,“进展性疾病”(PD)指目标损害的直径之和增大至少20％,以研究时的最小和(最低点)作为参照,包括基线和绝对增大至少5mm。一处或多处新损害的出现也认为是进展。
如本文中使用的,“稳定的疾病”(SD)指既没有最够收缩以符合PR,也没有足够增大以符合PD,以作为研究时的最小和参照。
如本文中使用的,“总体响应率”(ORR)指由调查人员使用RECIST v1.1确定的在随机化之后发生且在≥28天后确认的PR或CR的比率。
如本文中使用的,“未经确认的总体响应率”(ORR_uc)指其中不需要确认的,由调查人员使用RECIST v1.1确定的在随机化之后发生的PR或CR的比率。
如本文中使用的,“响应的持续时间”(DOR)指有记录的目标响应的第一次发生的时间至由调查人员使用RECIST v1.1确定的复发的时间或研究期间任何起因的死亡,无论哪种先发生。
如本文中使用的,“国家癌症研究所不良事件通用术语标准”(NCI CTCAE)指由美国卫生与人类服务部,国家卫生研究院,国家癌症研究所于2009年5月28日发表的不良效应通用术语标准,4.0版(v4.03:2010年6月14日)(通过援引完整收录)。
如本文中使用的,“通用癌症疗法功能性评估”(FACT-G)指一种经过验证的且可靠的27项问卷,由测量身体(7项),社会/家庭(7项),情感(6项)和功能健康(7项)的四个分量表构成,而且认为适宜用于具有任何形式的癌症的患者(Cella DF,Tulsky DS,Gray G,Sarafian B,Linn E,Bonomi AE et al.,The Functional Assessment of CancerTherapy scale:development and validation of the general measure,Journal ofClinical Oncology 1993；11(3Suppl.2):570-9；和Webster,K.,Odom,L.,Peterman,A.,Lent,L.,Cella,D.,The Functional Assessment of Chronic Illness Therapy(FACIT)measurement system:Validation of version 4of the core questionnaire,Qualityof Life Research 1999,8(7):604。将每一篇参考文献完整收入本文)。患者以5分量表评估在先前7天中每一种陈述对他们的真实程度(0,完全没有；1,有一点；2,有一些；3,相当多；4,非常多)。
如本文中使用的,术语“MEK抑制剂”指抑制MEK,诸如酶丝裂原活化的蛋白质激酶MEK1(也称作MAP2K1),或MEK2(也称作MAP2K2)的分子。MEK抑制剂可用于影响在一些癌症,诸如CRC中可能过度活跃的MAPK/ERK途径。MEK抑制剂已有广泛综述(S.Price,PutativeAllosteric MEK1and MEK 2inhibitors,Expert Opin.Ther.Patents,2008,18(6):603；J.I.Trujillo,MEK Inhibitors:a patent review 2008-2010,ExpertOpin.Ther.Patents2011,21(7):1045)。
如本文中使用的,术语“PD-1轴抑制剂”或“结合拮抗剂”指如下的分子,其抑制PD-1轴结合配偶与一种或多种它的结合配偶相互作用,从而去除源自PD-1信号传导轴上的信号传导的T细胞功能障碍–一项结果是恢复或增强T细胞功能(例如增殖,细胞因子生成,靶细胞杀伤)。如本文中使用的,PD-1轴抑制剂包括PD-1抑制剂,PD-L1抑制剂,和PD-L2抑制剂。
如本文中使用的,术语“PD-1抑制剂”或“结合拮抗剂”指如下的分子,其降低,阻断,抑制,消除或干扰源自PD-1与一种或多种它的结合配偶(诸如PD-L1和PD-L2)相互作用的信号转导。在一些实施方案中,PD-1抑制剂是抑制PD-1对一种或多种它的结合配偶的结合的分子。在一个具体的方面,PD-1抑制剂抑制PD-1对PD-L1和/或PD-L2的结合。例如,PD-1抑制剂包括降低,阻断,抑制,消除或干扰源自PD-1与PD-L1和/或PD-L2相互作用的信号转导的抗PD-1抗体,其抗原结合片段,免疫粘附素,融合蛋白,寡肽和其它分子。在一个实施方案中,PD-1抑制剂降低由或经由T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白质介导的负面共刺激信号(经由PD-1介导信号传导),从而使得功能障碍性T细胞不太功能障碍性(例如增强对抗原识别的效应器应答)。在一些实施方案中,PD-1抑制剂是抗PD-1抗体。
如本文中使用的,术语“PD-L1抑制剂”或“结合拮抗剂”指如下的分子,其降低,阻断,抑制,消除或干扰源自PD-L1与一种或多种它的结合配偶(诸如PD-1,B7-1)相互作用的信号转导。在一些实施方案中,PD-L1抑制剂是抑制PD-L1对它的结合配偶的结合的分子。在一个具体的方面,PD-L1抑制剂抑制PD-L1对PD-1和/或B7-1的结合。在一些实施方案中,PD-L1抑制剂包括降低,阻断,抑制,消除或干扰源自PD-L1与一种或多种它的结合配偶(诸如PD-1,B7-1)相互作用的信号转导的抗PD-L1抗体,其抗原结合片段,免疫粘附素,融合蛋白,寡肽和其它分子。在一个实施方案中,PD-L1抑制剂降低由或经由T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白质介导的负面共刺激信号(经由PD-L1介导信号传导),从而使得功能障碍性T细胞不太功能障碍性(例如增强对抗原识别的效应器应答)。在一些实施方案中,PD-L1抑制剂是抗PD-L1抗体。
如本文中使用的,术语“PD-L2抑制剂”或“结合拮抗剂”指如下的分子,其降低,阻断,抑制,消除或干扰源自PD-L2与一种或多种它的结合配偶(诸如PD-1)相互作用的信号转导。在一些实施方案中,PD-L2抑制剂是抑制PD-L2对一种或多种它的结合配偶的结合的分子。在一个具体的方面,PD-L2抑制剂抑制PD-L2对PD-1的结合。在一些实施方案中,PD-L2抑制剂包括降低,阻断,抑制,消除或干扰源自PD-L2与一种或多种它的结合配偶(诸如PD-1)相互作用的信号转导的抗PD-L2抗体,其抗原结合片段,免疫粘附素,融合蛋白,寡肽和其它分子。在一个实施方案中,PD-L2抑制剂降低由或经由T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白质介导的负面共刺激信号(经由PD-L2介导信号传导),从而使得功能障碍性T细胞不太功能障碍性(例如增强对抗原识别的效应器应答)。在一些实施方案中,PD-L2抑制剂是免疫粘附素。
如本文中使用的,术语“功能障碍”在免疫功能障碍的背景中指降低的对抗原性刺激的免疫响应性的状态。该术语包括可以发生抗原识别,但是随后的免疫应答对于控制感染或肿瘤生长无效的耗竭和/或无反应性二者的共同要件。如本文中使用的,术语“功能障碍性”还包括对抗原识别的不感受或不响应,具体地,将抗原识别转化成下游T细胞效应器功能,诸如增殖,细胞因子生成(例如IL-2)和/或靶细胞杀伤的能力受损。
如本文中使用的,术语“无反应性”指源自经由T细胞受体投递的不完全或不充分信号(例如ras激活缺失下细胞内Ca+2的升高)的对抗原刺激的无响应性状态。T细胞无反应性也可以在共刺激缺失下在用抗原刺激后发生,导致细胞变成即使在共刺激的背景中也对随后抗原所致激活变得不感受。无响应性状态常常可以被白介素-2的存在制服。无反应性T细胞不经历克隆扩充和/或获得效应器功能。
如本文中使用的,术语“耗竭”指作为源自在许多慢性感染和癌症期间发生的持续TCR信号传导的T细胞功能障碍状态的T细胞耗竭。它与无反应性的区别在于它并非经由不完全或有缺陷的信号传导,而是由于持续信号传导而发生。它以较差的效应器功能,持续的抑制性受体表达和与功能性效应或记忆T细胞的转录状态不同的转录状态限定。耗竭阻止对感染和肿瘤的最佳控制。耗竭可以源自外在负调节途径(例如免疫调节性细胞因子)及细胞内在负调节(共刺激)途径(PD-1,B7-H3,B7-H4,等)二者。
“增强T细胞功能”意味着诱导,引起或刺激T细胞具有持续或放大的生物学功能,或者更新或再激活耗竭的或无活性的T细胞。增强T细胞功能的例子包括:相对于干预前的此类水平,升高的来自CD8+T细胞的伽马-干扰素分泌,升高的增殖,升高的抗原响应性(例如病毒,病原体,或肿瘤清除)。在一个实施方案中,增强的水平是至少50％,或者60％,70％,80％,90％,100％,120％,150％,200％。本领域普通技术人员知道测量此增强的方式。
“T细胞功能障碍性病症”是以降低的对抗原性刺激的响应性为特征的T细胞病症或状况。在一个特定的实施方案中,T细胞功能障碍性病症是明确与不适当的升高的经由PD-1的信号传导有关的病症。在另一个实施方案中,T细胞功能障碍性病症是如下的病症,其中T细胞是无反应性的或具有降低的分泌细胞因子,增殖,或执行溶胞活性的能力。在一个具体的方面,降低的响应性导致对表达免疫原的病原体或肿瘤的无效控制。以T细胞功能障碍为特征的T细胞功能障碍性病症的例子包括未分辨的急性感染,慢性感染和肿瘤免疫。
如本文中使用的,“VEGF”指165个氨基酸的人血管内皮细胞生长因子及相关的121个,189个,和206个氨基酸的人血管内皮细胞生长因子,如Leung et al.(1989)Science246:1306和Houck et al.(1991)Mol.Endocrin,5:1806所述,及其天然发生等位基因形式和加工形式。术语“VEGF”还指来自非人物种诸如小鼠,大鼠,或灵长动物的VEGF。有时,来自特定物种的VEGF表示如下,hVEGF表示人VEGF,mVEGF表示鼠VEGF,等等。术语“VEGF”还用于指包含165个氨基酸的人血管内皮细胞生长因子的氨基酸第8至109位或第1至109位的截短形式多肽。本申请中可能通过例如“VEGF(8-109)”,“VEGF(1-109)”或“VEGF165”来鉴别任何此类形式VEGF。“截短的”天然VEGF的氨基酸位置如天然VEGF序列中所示编号。例如,截短的天然VEGF中的第17位氨基酸(甲硫氨酸)也是天然VEGF中的第17位(甲硫氨酸)。截短的天然VEGF具有与天然VEGF相当的对KDR和Flt-1受体的结合亲和力。
如本文中使用的,“VEGF拮抗剂”指能够中和,阻断,抑制,消除,降低或干扰VEGF活性(包括它对一种或多种VEGF受体的结合)的分子。VEGF拮抗剂包括抗VEGF抗体及其抗原结合片段,特异性结合VEGF由此使其隔绝与一种或多种受体结合的受体分子和衍生物,抗VEGF受体抗体和VEGF受体拮抗剂诸如VEGFR酪氨酸激酶的小分子抑制剂,和融合蛋白(例如VEGF-Trap(Regeneron)),VEGF121-白树毒素(Peregrine)。VEGF拮抗剂还包括VEGF的拮抗性变体,针对VEGF的反义分子,对VEGF特异性的RNA适体,和针对VEGF或VEGF受体的核酶。VEGF的拮抗剂通过干扰VEGF对细胞受体的结合,通过使已经通过VEGF激活的细胞失能或杀伤已经通过VEGF激活的细胞,或通过干扰VEGF结合至细胞受体之后的血管内皮细胞激活来起作用。VEGF拮抗剂的所有此类干预点应当认为对于此发明的目的是等同的。优选的VEGF拮抗剂是能够抑制VEGF的一种或多种生物学活性,例如它的促有丝***,血管发生或血管通透性活性的抗VEGF拮抗性抗体。抗VEGF拮抗性抗体包括但不限于抗体A4.6.1,rhuMab VEGF(贝伐珠单抗),Y0317(兰尼单抗(ranibizumab)),G6,B20,2C3,和例如WO98/45331,US2003/0190317,美国专利No.6,582,959和6,703,020；WO98/45332；WO 96/30046；WO94/10202；WO2005/044853；EP 0666868B1；和Popkov et al.,Journal of Immunological Methods,288:149-164(2004)中描述的其它。通过援引将每一篇参考文献完整收入本文。更加优选地,本发明的抗VEGF拮抗性抗体是兰尼单抗,它是一种人源化,亲和力成熟的抗人VEGF抗体Fab片段,具有WO98/45331和Chen et al.,J Mol Biol,293:865-881(1999)中描述的Y0317的轻和重链可变域序列,通过援引将其每一篇完整收入本文。
如本文中使用的,术语“包装插页”指通常包括在治疗用产品的商业包装中的用法说明书,其含有关于关注此类治疗用产品的使用的适应征,用法,剂量,施用,禁忌症和/或警告的信息。
术语“药学可接受盐”表示并非生物学或其它方面不想要的盐。药学可接受盐包括酸和碱加成盐二者。短语“药学可接受”表示该物质或组合物与构成配制剂的其它组分和/或正在用其治疗的哺乳动物在化学上和/或毒理学上相容。酸加成盐是那些与无机酸(诸如氢氯酸,氢溴酸,硫酸,硝酸,碳酸,磷酸)和有机酸(选自脂肪族,环脂肪族,芳香族,芳香脂肪族,杂环,羧基,和磺酸基类的有机酸,诸如甲酸,乙酸,丙酸,乙醇酸/羟基乙酸,葡糖酸,乳酸,丙酮酸,草酸,苹果酸,马来酸/顺丁烯二酸,丙二酸,琥珀酸,延胡索酸/反丁烯二酸,酒石酸,柠檬酸,天冬氨酸,抗坏血酸,谷氨酸,氨茴酸,苯甲酸,肉桂酸,扁桃酸,双羟萘酸,苯基乙酸,甲磺酸,乙磺酸,对甲苯磺酸,和水杨酸)形成的。碱加成盐是那些与有机或无机碱形成的。可接受无机碱的例子包括钠,钾,铵,钙,镁,铁,锌,铜,锰,和铝盐。自药学可接受有机无毒碱衍生的盐包括伯,仲,和叔胺,取代的胺(包括天然发生的取代的胺),环胺和碱离子交换树脂(诸如异丙胺,三甲胺,二乙胺,三乙胺,三丙胺,乙醇胺,2-二乙基氨基乙醇,氨基丁三醇,二环己基胺,赖氨酸,精氨酸,组氨酸,咖啡因,普鲁卡因,哈胺,胆碱,甜菜碱,乙二胺,葡糖胺,泛影葡胺,可可碱,嘌呤,哌嗪,哌啶,N-乙基哌啶,和多胺树脂)的盐。
本文中的术语“抗体”以最广义使用,而且明确涵盖单克隆抗体(包括全长单克隆抗体),多克隆抗体,多特异性抗体(例如双特异性抗体),和抗体片段,只要它们展现期望的生物学活性。
“分离的”抗体是已经鉴定且自其天然环境的成分分开和/或回收的抗体。其天然环境的污染性成分指会干扰抗体的研究,诊断或治疗用途的物质,而且可包括酶,激素,和其它蛋白质性质或非蛋白质性质的溶质。在一些实施方案中,将抗体纯化至(1)根据例如Lowry法的测定,抗体重量超过95％,而在一些实施方案中,重量超过99％,(2)足以通过使用例如转杯式测序仪获得至少15个残基的N端或内部氨基酸序列的程度,或(3)根据还原性或非还原性条件下的SDS-PAGE,使用例如考马斯蓝或银染色,达到同质。既然抗体天然环境的至少一种成分不会存在,那么分离的抗体包括重组细胞内原位的抗体。然而,分离的抗体通常会通过至少一个纯化步骤来制备。
“天然抗体”通常是由两条相同的轻(L)链和两条相同的重(H)链构成的约150,000道尔顿的异四聚体糖蛋白。每条轻链通过一个共价二硫键连接至重链,而二硫化物连接的数目在不同免疫球蛋白同种型的重链间有变化。每条重和轻链还具有间隔规律的链内二硫桥。每条重链在一端具有一个可变域(VH),接着是一些恒定域。每条轻链具有一端的一个可变域(VL)及其另一端的一个恒定域；轻链的恒定域与重链的第一恒定域对齐,而轻链可变域与重链的可变域对齐。认为特定的氨基酸残基形成轻链和重链可变域之间的界面。
术语“恒定域”指免疫球蛋白分子中的如下部分,其相对于免疫球蛋白的其它部分(含有抗原结合位点的可变域)具有更加保守的氨基酸序列。恒定域含有重链的CH1,CH2和CH3域(合称CH)及轻链的CHL(或CL)域。
抗体的“可变区”或“可变域”指抗体的重或轻链的氨基端结构域。重链的可变域可以称为“VH”。轻链的可变域可以称为“VL”。这些结构域一般是抗体的最易变部分且包含抗原结合位点。
术语“可变”指可变域中的某些部分在抗体间序列差异广泛且用于每种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性的实情。然而,变异性并非均匀分布于抗体的整个可变域。它集中于轻链和重链可变域二者中称作高变区(HVR)的三个区段。可变域中更加高度保守的部分称作框架区(FR)。天然重和轻链的可变域每个包含四个FR区,大多采取β-片层构象,通过三个HVR(它们形成连接β-片层结构且在一些情况中形成β-片层结构的一部分的环)连接。每条链中的HVR通过FR区非常接近地保持在一起,并与来自另一条链的HVR一起促成抗体的抗原结合位点的形成(参见Kabat et al.,Sequences of Proteins ofImmunological Interest,Fifth Edition,National Institute of Health,Bethesda,Md.(1991))。恒定域并不直接参与抗体对抗原的结合,但是展现多种效应器功能,诸如抗体在抗体依赖性细胞毒性中的参与。
基于它们的恒定域的氨基酸序列,来自任何哺乳动物物种的抗体(免疫球蛋白)的“轻链”可归至两种明显不同的型之一,称作卡帕(“κ”)和拉姆达(“λ”)。
如本文中使用的,术语IgG“同种型”或“亚类”意指由它们的恒定区的化学和抗原特征定义的任何免疫球蛋白亚类。
根据它们的重链恒定域的氨基酸序列,抗体(免疫球蛋白)可指派至不同的类。有五大类免疫球蛋白:IgA,IgD,IgE,IgG,和IgM,而且这些中的数项可进一步分成亚类(同种型),例如IgG1,IgG2,IgG3,IgG4,IgA1,和IgA2。与不同类的免疫球蛋白对应的重链恒定域分别称作α,δ,ε,γ,和μ。不同类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构造是公知的且一般性描述于例如Abbas et al.,Cellular and Mol.Immunology,4th ed.(W.B.Saunders,Co.,2000)。抗体可以是通过抗体与一种或多种其它蛋白质或肽共价或非共价联合而形成的更大融合分子的一部分。
术语“全长抗体”,“完整抗体”和“全抗体”在本文中可互换使用,指基本上完整形式的抗体,而非下文定义的抗体片段。该术语特别指重链包含Fc区的抗体。
为了本文中的目的,“裸抗体”指未缀合至细胞毒性模块或放射性标记物的抗体。
“抗体片段”包含完整抗体的一部分,优选包含其抗原结合区。在一些实施方案中,本文所述抗体片段是抗原结合片段。抗体片段的例子包括Fab,Fab',F(ab')2,和Fv片段；双抗体；线性抗体；单链抗体分子；和自抗体片段形成的多特异性抗体。
抗体的木瓜蛋白酶消化产生两个相同的抗原结合片段,称作“Fab”片段,每个具有一个抗原结合位点,和一个剩余的“Fc”片段,其名称反映了它易于结晶的能力。胃蛋白酶处理产生一个F(ab')2片段,其具有两个抗原结合位点且仍然能够交联抗原。
“Fv”是包含完整抗原结合位点的最小抗体片段。在一个实施方案中,双链Fv种类由紧密,非共价联合的一个重链可变域和一个轻链可变域的二聚体组成。在单链Fv(scFv)种类中,一个重链可变域和一个轻链可变域可以通过柔性肽接头共价连接,使得轻和重链能以在与双链Fv种类中的类似的“二聚体”结构联合。正是在这种构造中,每个可变域的三个HVR相互作用,在VH-VL二聚体的表面上限定一个抗原结合位点。六个HVR一起赋予抗体以抗原结合特异性。然而,即使是单个可变域(或是只包含对抗原特异性的三个HVR的半个Fv)也具有识别和结合抗原的能力,尽管亲和力比完整结合位点要低。
Fab片段包含重和轻链可变域,而且还包含轻链的恒定域和重链的第一恒定域(CH1)。Fab'片段与Fab片段的不同之处在于重链CH1域的羧基端添加少数残基,包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab'-SH是本文中对其中恒定域半胱氨酸残基携带游离硫醇基的Fab'的称谓。F(ab')2抗体片段最初是作为具有Fab'片段之间的铰链半胱氨酸的成对Fab'片段生成的。还知道抗体片段的其它化学偶联。
“单链Fv”或“scFv”抗体片段包含抗体的VH和VL域,其中这些域存在于一条多肽链中。一般地,scFv多肽进一步包含VH和VL域之间的多肽接头,其使得scFv能够形成抗原结合期望的结构。关于scFv的综述参见例如Pluckthün,于《The Pharmacology of MonoclonalAntibodies》,第113卷,Rosenburg和Moore编,Springer-Verlag,New York,1994,第269-315页。
术语“双抗体”指具有两个抗原结合位点的抗体片段,该片段包含同一条多肽链(VH-VL)中连接的重链可变域(VH)和轻链可变域(VL)。通过使用过短的接头使得同一条链上的两个域之间不能配对,迫使这些域与另一条链的互补域配对并产生两个抗原结合位点。双抗体可以是二价的或双特异性的。双抗体更加完整地描述于例如EP 404,097；WO1993/01161；Hudson et al.,Nat.Med.9:129-134(2003)；和Hollinger et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:6444-6448(1993)。三抗体和四抗体也描述于Hudson etal.,Nat.Med.9:129-134(2003)。
如本文中使用的,术语“单克隆抗体”指从一群基本上同质的抗体获得的抗体,例如构成群体的抗体个体相同,除了可能以极小量存在的可能的突变,例如天然发生突变。如此,修饰语“单克隆”指示抗体并非分立的抗体的混合物的特征。在某些实施方案中,此类单克隆抗体典型地包括包含结合靶物的多肽序列的抗体,其中靶物结合多肽序列是通过包括从众多多肽序列中选择单一靶物结合多肽序列在内的过程得到的。例如,选择过程可以是从众多克隆,诸如杂交瘤克隆,噬菌体克隆,或重组DNA克隆的集合中选择独特克隆。应当理解,所选择的靶物结合序列可进一步改变,例如为了改善对靶物的亲和力,将靶物结合序列人源化,改善其在细胞培养物中的生成,降低其在体内的免疫原性,创建多特异性抗体,等,而且包含改变后的靶物结合序列的抗体也是本发明的单克隆抗体。与典型地包含针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制备物形成对比,单克隆抗体制备物的每个单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。在它们的特异性以外,单克隆抗体制备物的优势还在于它们通常未受到其它免疫球蛋白的污染。
修饰语“单克隆”指示抗体从基本上同质的抗体群体获得的特征,而且不要解释为要求通过任何特定方法来生成抗体。例如,要依照本发明使用的单克隆抗体可通过多种技术来生成,包括例如杂交瘤法(例如Kohler and Milstein,Nature 256:495-97(1975)；Hongo et al.,Hybridoma 14(3):253-260(1995)；Harlow et al.,Antibodies:ALaboratory Manual,(Cold Spring Harbor Laboratory Press,2nd ed.1988)；Hammerling et al.,in:Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563-681(Elsevier,N.Y.,1981)),重组DNA法(参见例如美国专利No.4,816,567),噬菌体展示技术(参见例如Clackson et al.,Nature 352:624-628(1991)；Marks et al.,J.Mol.Biol.222:581-597(1992)；Sidhu et al.,J.Mol.Biol.338(2):299-310(2004)；Leeet al.,J.Mol.Biol.340(5):1073-1093(2004)；Fellouse,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101(34):12467-12472(2004)；和Lee et al.,J.Immunol.Methods 284(1-2):119-132(2004)),和用于在具有部分或整个人免疫球蛋白基因座或编码人免疫球蛋白序列的基因的动物中生成人或人样抗体的技术(参见例如WO 1998/24893；WO 1996/34096；WO 1996/33735；WO 1991/10741；Jakobovits et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:2551(1993)；Jakobovits et al.,Nature 362:255-258(1993)；Bruggemann et al.,Year inImmuno.7:33(1993)；美国专利No.5,545,807；5,545,806；5,569,825；5,625,126；5,633,425；和5,661,016；Marks et al.,Bio/Technology 10:779-783(1992)；Lonberg et al.,Nature 368:856-859(1994)；Morrison,Nature 368:812-813(1994)；Fishwild et al.,Nature Biotechnol.14:845-851(1996)；Neuberger,Nature Biotechnol.14:826(1996)；和Lonberg and Huszar,Intern.Rev.Immunol.13:65-93(1995))。
单克隆抗体在本文中明确包括“嵌合”抗体,其中重和/或轻链的一部分与衍生自特定物种或属于特定抗体类或亚类的抗体中的相应序列相同或同源,而链的剩余部分与衍生自另一物种或属于另一抗体类或亚类的抗体中的相应序列相同或同源,以及此类抗体的片段,只要它们展现期望的生物学活性(参见例如美国专利No.4,816,567；和Morrison etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:6851-6855(1984))。嵌合抗体包括抗体,其中抗体的抗原结合区衍生自通过例如用感兴趣抗原免疫猕猴而生成的抗体。
“人源化”形式的非人(例如鼠)抗体指最低限度包含衍生自非人免疫球蛋白的序列的嵌合抗体。在一个实施方案中,人源化抗体指如下的人免疫球蛋白(受体抗体),其中来自受体HVR的残基用来自具有期望特异性,亲和力,和/或能力的非人物种(供体抗体)(诸如小鼠,大鼠,家兔,或非人灵长动物)HVR的残基替换。在一些情况中,人免疫球蛋白的FR残基用相应的非人残基替换。而且,人源化抗体可包含在受体抗体中或在供体抗体中没有找到的残基。可以进行这些修饰来进一步改进抗体的性能。一般而言,人源化抗体会包含至少一个,通常两个基本上整个如下可变域,其中所有或基本上所有高变环对应于非人免疫球蛋白的那些,而且所有或基本上所有FR是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体任选还会包含至少部分免疫球蛋白恒定区(Fc),通常是人免疫球蛋白的。别的细节参见例如Jones etal.,Nature 321:522-525(1986)；Riechmann et al.,Nature 332:323-329(1988)；和Presta,Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596(1992)。还可参见例如Vaswani and Hamilton,Ann.Allergy,Asthma&Immunol.1:105-115(1998)；Harris,Biochem.Soc.Transactions23:1035-1038(1995)；Hurle and Gross,Curr.Op.Biotech.5:428-433(1994)；和美国专利No.6,982,321和7,087,409。
“人抗体”指拥有与由人生成的抗体的氨基酸序列对应的氨基酸序列和/或使用本文中公开的用于生成人抗体的任何技术生成的抗体。人抗体的这种定义明确排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。人抗体可使用本领域已知的多种技术来生成,包括噬菌体展示文库(Hoogenboom and Winter,J.Mol.Biol.227:381(1991)；Marks et al.,J.Mol.Biol.222:581(1991))。Cole et al.,Monoclonal Antibodies and CancerTherapy,Alan R.Liss,p.77(1985)；Boerner et al.,J.Immunol.147(1):86-95(1991)中描述的方法也可用于制备人单克隆抗体。还可参见van Dijk and van de Winkel,Curr.Opin.Pharmacol.5:368-74(2001)。人抗体可通过对经过修饰以响应抗原性攻击而生成此类抗体但其内源基因组已经失能的转基因动物,例如经过免疫的异种小鼠(xenomice)施用抗原来制备(参见例如美国专利No.6,075,181和6,150,584,关于XENOMOUSETM技术)。还可参见例如Li et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103:3557-3562(2006),关于经人B细胞杂交瘤技术生成的人抗体。
“物种依赖性抗体”指如下的抗体,其具有的对来自第一哺乳动物物种的抗原的结合亲和力比它具有的对来自第二哺乳动物物种的该抗原的同系物的结合亲和力要强。正常情况下,物种依赖性抗体“特异性结合”人抗原(例如具有不超过约1x 10-7M,优选不超过约1x 10-8M,且优选不超过约1x 10-9M的结合亲和力(Kd)值),但是对来自第二非人哺乳动物物种的该抗原的同系物的结合亲和力比它对人抗原的结合亲和力弱至少约50倍,或至少约500倍,或至少约1000倍。物种依赖性抗体可以是上文定义的各种类型的抗体中的任一种,但是优选人源化或人抗体。
在本文中使用时,术语“高变区”,“HVR”,或“HV”指抗体可变域中序列上高度可变和/或形成结构上定义的环的区域。通常,抗体包含六个HVR:三个在VH中(H1,H2,H3),三个在VL中(L1,L2,L3)。在天然抗体中,H3和L3展示六个HVR的最大多样性,而且特别认为H3在赋予抗体以精密特异性中发挥独特作用。参见例如Xu et al.,Immunity 13:37-45(2000)；Johnson and Wu,in:Methods in Molecular Biology 248:1-25(Lo,ed.,Human Press,Totowa,NJ,2003)。确实,仅仅由重链组成的天然发生骆驼(camelid)抗体在轻链缺失下是有功能的且稳定的。参见例如Hamers-Casterman et al.,Nature 363:446-448(1993)；Sheriff et al.,Nature Struct.Biol.3:733-736(1996)。
本文中使用且涵盖许多HVR叙述。Kabat互补决定区(CDR)基于序列变异性且最常用(Kabat et al.,Sequences of Proteins of Immunological Interest,5th Ed.PublicHealth Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1991))。Chothia改为指结构环的定位(Chothia and Lesk,J.Mol.Biol.196:901-917(1987))。AbM HVR代表Kabat HVR和Chothia结构环之间的折衷,而且得到Oxford Molecular的AbM抗体建模软件的使用。“接触”HVR基于可获得的复合物晶体结构的分析。下文记录了来自这些HVR中每一个的残基。
HVR可包括如下“延伸的HVR”:VL中的24-36或24-34(L1),46-56或50-56(L2)和89-97或89-96(L3)及VH中的26-35(H1),50-65或49-65(H2)和93-102,94-102,或95-102(H3)。对于这些定义中的每一个,可变域残基是依照Kabat等,见上文编号的。
“框架”或“FR”残基指除本文中定义的HVR残基以外的那些可变域残基。
术语“如Kabat中的可变域残基编号方式”或“如Kabat中的氨基酸位置编号方式”及其变化形式指Kabat et al.,见上文中用于抗体编辑的重链可变域或轻链可变域编号***。使用此编号***,实际的线性氨基酸序列可包含较少或另外的氨基酸,对应于可变域FR或HVR的缩短或***。例如,重链可变域可包含H2残基52后的单一氨基酸***(依照Kabat的残基52a)和重链FR残基82后的***残基(例如依照Kabat的残基82a,82b,和82c,等)。给定抗体的Kabat残基编号方式可通过在同源区比对抗体的序列与“标准”Kabat编号序列来确定。
Kabat编号***一般在提及可变域中的残基(大约轻链残基1-107和重链残基1-113)时使用(例如Kabat et al.,Sequences of Immunological Interest.5th Ed.PublicHealth Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1991))。“EU编号***”或“EU索引”一般在提及免疫球蛋白重链恒定区中的残基时使用(例如Kabat et al.,见上文中报告的EU索引)。“如Kabat中的EU索引”指人IgG1EU抗体的残基编号方式。
表述“线性抗体”指Zapata et al.(1995)Protein Eng.8(10):1057-1062中描述的抗体。简言之,这些抗体包含一对串联的Fd区段(VH-CH1-VH-CH1),它们与互补的轻链多肽一起形成一对抗原结合区。线性抗体可以是双特异性的或单特异性的。
如本文中使用的,术语“结合”,“特异性结合”或“对……特异性的”指可测量且可再现的相互作用,诸如靶物和抗体之间的结合,其确定在分子(包括生物学分子)的异质群体存在下靶物的存在。例如,结合或特异性结合靶物(其可以是表位)的抗体是以比它结合其它靶物要大的亲和力,亲合力,更容易,和/或以更大的持续时间结合此靶物的抗体。在一个实施方案中,抗体结合无关靶物的程度小于抗体对靶物的结合的约10％,如例如通过放射性免疫测定法(RIA)测量的。在某些实施方案中,特异性结合靶物的抗体具有≤1μM,≤100nM,≤10nM,≤1nM,或≤0.1nM的解离常数(Kd)。在某些实施方案中,抗体特异性结合蛋白质上在来自不同物种的蛋白质间保守的表位。在另一个实施方案中,特异性结合可以包括但不要求排他性结合。
术语“检测”包括任何检测手段,包括直接和间接检测。
如本文中使用的,术语“生物标志物”指能在样品中检测的指示物,例如预测性,诊断性,和/或预后性的。生物标志物可充当以特定,分子,病理学,组织学,和/或临床特征为特征的疾病或病症(例如癌症)的特定亚型的指示物。在一些实施方案中,生物标志物是基因。生物标志物包括但不限于多核苷酸(例如DNA和/或RNA),多核苷酸拷贝数改变(例如DNA拷贝数),多肽,多肽和多核苷酸修饰(例如翻译后修饰),碳水化合物,和/或基于糖脂的分子标志物。
治疗性药剂
本公开文本使用MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,和VEGF抑制剂的组合来治疗受试者中的CRC。在一些方面,该MEK抑制剂是考比替尼或其药学可接受盐；该PD-1轴抑制剂是PD-L1抑制剂,且更加特别地该PD-L1抑制剂是阿特珠单抗；和/或,该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗。在一些其它方面,考比替尼是阿特珠单抗是和/或贝伐珠单抗是
当前公开的化合物可以以本领域已知的任何合适方式施用。在一些方面,该化合物可以静脉内,肌肉内,皮下,表面,口服,经皮,腹膜内,框内,通过植入,通过吸入,鞘内,室内,肿瘤内,或鼻内施用。
理解的是活性化合物的适宜剂量取决于普通熟练医师知识内的多种因子。活性化合物的剂量会变化,例如取决于受试者的年龄,体重,一般健康,性别,和饮食,施用的时间,施用的路径,***的速率,和任何药物组合。
还会领会的是本公开文本的化合物,或其药学可接受盐,前体药物,代谢物,或衍生物用于治疗的有效剂量可以在特定治疗的过程里升高或降低。剂量变化可源自诊断测定法的结果和变成明显。
MEK抑制剂
本公开文本的范围内的MEK抑制剂的例子包括考比替尼,trametinib,binimetinib,selumetinib,pimasertinib,refametinib,PD-0325901和BI-847325,或其药学可接受盐。
在本公开文本的一些特别方面,该MEK抑制剂是考比替尼或其药学可接受盐(例如),其具有化学名称(S)[3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基氨基)苯基][3-羟基-3-(哌啶-2-基]氮杂环丁-1-基)甲酮,且具有下面的结构:
是考比替尼的反丁烯二酸盐。考比替尼描述于美国专利No.7,803,839和8,362,002,通过援引完整收录其每一篇。考比替尼是一种可逆的,有力的,且高度选择性的MEK1和MEK2(RAS/RAF/MEK/ERK(MAPK)的中心成分)途径的抑制剂且具有多种人癌症模型中的单一药剂抗肿瘤活性。
考比替尼经由抑制MEK1和MEK2抑制多种人肿瘤细胞系的增殖。另外,考比替尼抑制异种移植物肿瘤模型中的ERK磷酸化且刺激凋亡。考比替尼在肿瘤异种移植物中积累且在血浆浓度已经下降之后在肿瘤中保持高浓度。考比替尼抑制ERK1磷酸化的活性与它在肿瘤组织中的浓度比在血浆中更加密切相关；一般而言,在降低的ERK1磷酸化和肿瘤异种移植物模型中的功效之间有较好的关联。已经在数种人肿瘤异种移植物模型中观察到肿瘤消退。这种消退是剂量依赖性的,在测试的最高剂量有高至100％消退。所研究的模型包括CRC,恶性黑素瘤,乳腺癌,和肺癌。
已经在Ia期剂量放大研究MEK4592g中在一次和多次给药之后在遵循口服施用的癌症患者中表征作为单一药剂施用的考比替尼的药动学(PK),该研究包括在包含BRAF,NRAS,或KRAS突变的患者中评估考比替尼剂量60mg每天。总共6名患者(他们均具有黑素瘤；6.2％)具有经过确认的部分响应(PR),28名患者(28.9％)具有稳定的疾病(SD),且40名患者(41.2％)具有进展性疾病。在14名结肠直肠癌(CRC)患者中,所有患者经历进展性疾病(PD)。在研究MEK4592g的阶段III中,积累了18名患者,并对18名患者中的14人评估最好的总体响应。4名患者(22.2％)具有SD作为他们最好的总体响应,且2名患者(11.1％)具有未经确认的肿瘤响应。
考比替尼具有中等吸收速率(1至3小时的中值最大浓度前时间[t最大])和48.8小时(范围为23.1至80小时)的均值终末半衰期(t1/2)。考比替尼以浓度不依赖性方式结合血浆蛋白质(95％)。考比替尼在0.05mg/kg(大约3.5mg/kg,对于70kg成人而言)至80mg的剂量范围中展现线性药动学且绝对生物利用度在研究MEK4952g中在健康受试者中测定为45.9％(90％CI:39.74％,53.06％)。在健康受试者中考比替尼药动学在进食状态中施用时与禁食状态中的施用相比没有改变。既然食物不改变考比替尼药动学,那么考比替尼可以在有或无食物的情况下施用。与在禁食状态中单独施用考比替尼相比,无论在高脂肪餐存在还是缺失下施用,质子泵抑制剂雷贝拉唑(rabeprazole)看来对考比替尼药动学具有最小限度的影响。因而,胃pH的升高不改变考比替尼药动学,指示它对胃pH的改变不敏感。
考比替尼盐,晶体形式和前体药物在本公开文本的范围内。考比替尼,制备方法,和治疗用途公开于国际公开文本No.WO 2007/044515,WO 2007/044615,WO 2014/027056和WO 2014/059422,通过援引将其每一篇完整收入本文。例如,在本公开文本的一些方面,该MEK抑制剂是晶体半反丁烯二酸考比替尼多形体A型。
本公开文本的范围内的MEK抑制剂(例如考比替尼)剂量是约20mg至约100mg,约40mg至约80mg,或约60mg该MEK抑制剂每天。在特别的实施方案中,该MEK抑制剂是考比替尼,且以约60mg,约40mg或约20mg给药。
该MEK抑制剂恰当地每天一次施用。在一些方面,该MEK抑制剂以28天治疗周期的连续21天每天一次施用。在一些方面,该MEK抑制剂在28天治疗周期的第1至21天每天一次施用。在一些方面,该MEK抑制剂在28天治疗周期的第3至23天每天一次施用。
PD-1轴抑制剂
依照本公开文本,PD-1轴抑制剂可更加特别地称作PD-1抑制剂,PD-L1抑制剂,或PD-L2抑制剂。“PD-1”的备选名称包括CD279和SLEB2。“PD-L1”的备选名称包括B7-H1,B7-4,CD274,和B7-H。“PD-L2”的备选名称包括B7-DC,Btdc,和CD273。在一些实施方案中,PD-1,PD-L1,和PD-L2是人PD-1,PD-L1和PD-L2。
在一些实施方案中,该PD-1抑制剂是抑制PD-1对它的配体结合配偶的结合的分子。在一个具体方面,该PD-1配体结合配偶是PD-L1和/或PD-L2。在另一个实施方案中,PD-L1抑制剂是抑制PD-L1对它的结合配偶的结合的分子。在一个具体方面,PD-L1结合配偶是PD-1和/或B7-1。在另一个实施方案中,该PD-L2抑制剂是抑制PD-L2对它的结合配偶的结合的分子。在一个具体方面,PD-L2结合配偶是PD-1。该抑制剂可以是抗体,其抗原结合片段,免疫粘附素,融合蛋白,或寡糖。
在一些实施方案中,该PD-1抑制剂是抗PD-1抗体(例如人抗体,人源化抗体,或嵌合抗体)。在一些实施方案中,该抗PD-1抗体选自由纳武单抗(nivolumab),派姆单抗(pembrolizumab),lambrolizumab,和CT-011组成的组。在一些实施方案中,该PD-1抑制剂是免疫粘附素(例如包含与恒定区(例如免疫球蛋白序列的Fc区)融合的PD-L1或PD-L2的细胞外或PD-1结合部分的免疫粘附素)。在一些实施方案中,该PD-1抑制剂是AMP-224。纳武单抗,也称作MDX-1106-04,MDX-1106,ONO-4538,BMS-936558,和是一种描述于WO2006/121168的抗PD-1抗体。派姆单抗,也称作MK-3475,Merck3475,lambrolizumab,和SCH-900475,是一种描述于WO2009/114335的抗PD-1抗体。CT-011,也称作hBAT或hBAT-1,是一种描述于WO2009/101611的抗PD-1抗体。AMP-224,也称作B7-DCIg,是描述于WO2010/027827和WO2011/066342的PD-L2-Fc融合可溶性受体。
在一些实施方案中,该抗PD-1抗体是纳武单抗(CAS注册号:946414-94-4)。在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链可变区和/或轻链可变区的抗PD-1抗体,该重链可变区包含来自SEQ ID NO:1的重链可变区氨基酸序列,而该轻链可变区包含来自SEQ ID NO:2的轻链可变区氨基酸序列。在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链和/或轻链序列的抗PD-1抗体,其中:
(a)该重链序列与下述重链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％或100％序列同一性:
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQ IDNO:1),或
(b)该轻链序列与下述轻链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％或100％序列同一性:
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:2)。
在一些实施方案中,该抗PD-1抗体是派姆单抗(CAS注册号:1374853-91-4)。在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链可变区和/或轻链可变区的抗PD-1抗体,该重链可变区包含来自SEQ ID NO:3的重链可变区氨基酸序列,而该轻链可变区包含来自SEQ ID NO:4的轻链可变区氨基酸序列。在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链和/或轻链序列的抗PD-1抗体,其中:
(a)该重链序列与下述重链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％或100％序列同一性:
QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQ ID NO:3),或
(b)该轻链序列与下述轻链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％或100％序列同一性:
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:4)。
在一些实施方案中,该PD-L1抑制剂是抗PD-L1抗体。在一些实施方案中,该抗PD-L1抑制剂选自由YW243.55.S70,MPDL3280A(阿特珠单抗),MDX-1105,和MEDI4736组成的组。MDX-1105,也称作BMS-936559,是一种描述于WO2007/005874的抗PD-L1抗体。抗体YW243.55.S70(重和轻链可变区序列分别在SEQ ID NO.5和6中显示)是一种描述于WO2010/077634 A1的抗PD-L1。MEDI4736是一种描述于WO2011/066389和US2013/034559的抗PD-L1抗体。
对此发明的方法有用的抗PD-L1抗体的例子,和用于生成其的方法描述于PCT专利申请WO 2010/077634 A1和美国专利No.8,217,149,通过援引将其收入本文。
在一些实施方案中,该PD-1轴抑制剂是抗PD-L1抗体。在一些实施方案中,该抗PD-L1抗体能够抑制PD-L1和PD-1之间的和/或PD-L1和B7-1之间的结合。在一些实施方案中,该抗PD-L1抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中,该抗PD-L1抗体是选自由Fab,Fab’-SH,Fv,scFv,和(Fab’)2片段组成的组的抗体片段。在一些实施方案中,该抗PD-L1抗体是人源化抗体。在一些实施方案中,该抗PD-L1抗体是人抗体。
在此发明中有用的抗PD-L1抗体,包括含有此类抗体的组合物,诸如那些描述于WO2010/077634 A1的。在一些实施方案中,该抗PD-L1抗体包含重链可变区和轻链可变区,该重链可变区包含SEQ ID NO:7或8(下文)的氨基酸序列,该轻链可变区包含SEQ ID NO:9(下文)的氨基酸序列。
在一个实施方案中,该抗PD-L1抗体含有包含HVR-H1,HVR-H2和HVR-H3序列的重链可变区多肽,其中:
(a)该HVR-H1序列是GFTFSX1SWIH(SEQ ID NO:10)；
(b)该HVR-H2序列是AWIX2PYGGSX3YYADSVKG(SEQ ID NO:11)；
(c)该HVR-H3序列是RHWPGGFDY(SEQ ID NO:12)；
进一步地其中:X1是D或G；X2是S或L；X3是T或S。
在一个具体方面,X1是D；X2是S和X3是T。在另一个方面,该多肽进一步包含依照下式在HVR之间并置的可变区重链框架序列:(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)。在还有另一个方面,该框架序列衍生自人共有框架序列。在又一个方面,该框架序列是VH亚组III共有框架。在仍有又一个方面,该框架序列中至少一种是下述:
HC-FR1是EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID NO:13)
HC-FR2是WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:14)
HC-FR3是RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID NO:15)
HC-FR4是WGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:16)。
在仍有又一个方面,该重链多肽进一步与包含HVR-L1,HVR-L2和HVR-L3的可变区轻链组合,其中:
(a)该HVR-L1序列是RASQX4X5X6TX7X8A(SEQ ID NO:17)；
(b)该HVR-L2序列是SASX9LX10S(SEQ ID NO:18)；
(c)该HVR-L3序列是QQX11X12X13X14PX15T(SEQ ID NO:19)；
进一步地其中:X4是D或V；X5是V或I；X6是S或N；X7是A或F；X8是V或L；X9是F或T；X10是Y或A；X11是Y,G,F,或S；X12是L,Y,F或W；X13是Y,N,A,T,G,F或I；X14是H,V,P,T或I；X15是A,W,R,P或T。
在仍有又一个方面,X4是D；X5是V；X6是S；X7是A；X8是V；X9是F；X10是Y；X11是Y；X12是L；X13是Y；X14是H；X15是A。在仍有又一个方面,该轻链进一步包含依照下式在HVR之间并置的可变区轻链框架序列:(LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。在仍有又一个方面,该框架序列衍生自人共有框架序列。在仍有又一个方面,该框架序列是VL卡帕I共有框架。在仍有又一个方面,该框架序列中至少一种是下述:
LC-FR1是DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:20)
LC-FR2是WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:21)
LC-FR3是GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO:22)
LC-FR4是FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:23)。
在另一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链和轻链可变区序列的抗PD-L1抗体或抗原结合片段,其中:
该重链包含HVR-H1,HVR-H2和HVR-H3,其中进一步地:
(i)该HVR-H1序列是GFTFSX1SWIH(SEQ ID NO:10)
(ii)该HVR-H2序列是AWIX2PYGGSX3YYADSVKG(SEQ ID NO:11)
(iii)该HVR-H3序列是RHWPGGFDY(SEQ ID NO:12),且
该轻链包含HVR-L1,HVR-L2和HVR-L3,其中进一步地:
(i)该HVR-L1序列是RASQX4X5X6TX7X8A(SEQ ID NO:17)
(ii)该HVR-L2序列是SASX9LX10S(SEQ ID NO:18)且
(iii)该HVR-L3序列是QQX11X12X13X14PX15T(SEQ ID NO:19),
进一步地其中:X1是D或G；X2是S或L；X3是T或S；X4是D或V；X5是V或I；X6是S或N；X7是A或F；X8是V或L；X9是F或T；X10是Y或A；X11是Y,G,F,或S；X12是L,Y,F或W；X13是Y,N,A,T,G,F或I；X14是H,V,P,T或I；X15是A,W,R,P或T。
在一个具体方面,X1是D；X2是S且X3是T。在另一个方面,X4是D；X5是V；X6是S；X7是A；X8是V；X9是F；X10是Y；X11是Y；X12是L；X13是Y；X14是H；X15是A。在还有另一个方面,X1是D；X2是S和X3是T,X4是D；X5是V；X6是S；X7是A；X8是V；X9是F；X10是Y；X11是Y；X12是L；X13是Y；X14是H且X15是A。
在又一个方面,该重链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4),且该轻链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。在仍有又一个方面,该框架序列衍生自人共有框架序列。在仍有又一个方面,该重链框架序列衍生自Kabat亚组I,II,或III序列。在仍有又一个方面,该重链框架序列是VH亚组III共有框架。在仍有又一个方面,该重链框架序列中一种或多种是下述:
HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID NO:13)
HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:14)
HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID NO:15)
HC-FR4 WGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:16)。
在仍有又一个方面,该轻链框架序列衍生自Kabat卡帕I,II,II或IV亚组序列。在仍有又一个方面,该轻链框架序列是VL卡帕I共有框架。在仍有又一个方面,该轻链框架序列中一种或多种是下述:
LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:20)
LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:21)
LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO:22)
LC-FR4 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:23)。
在仍有又一个具体方面,该抗体进一步包含人或鼠恒定区。在仍有又一个方面,该人恒定区选自由IgG1,IgG2,IgG2,IgG3,IgG4组成的组。在仍有又一个具体方面,该人恒定区是IgG1。在仍有又一个方面,该鼠恒定区选自由IgG1,IgG2A,IgG2B,IgG3组成的组。在仍有又一个方面,该鼠恒定区是IgG2A。在仍有又一个具体方面,该抗体具有降低的或最小限度的效应器功能。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自“效应器较小(effector-less)Fc突变”或无糖基化(aglycosylation)。在仍有又一个实施方案中,该效应器较小Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A替代。
在还有另一个实施方案中,提供的是一种包含重链和轻链可变区序列的抗PD-L1抗体,其中:
(a)该重链进一步包含分别与GFTFSDSWIH(SEQ ID NO:24),AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID NO:25)和RHWPGGFDY(SEQ ID NO:12)具有至少85％序列同一性的HVR-H1,HVR-H2和HVR-H3序列,或(b)该轻链进一步包含分别与RASQDVSTAVA(SEQ ID NO:26),SASFLYS(SEQID NO:27)和QQYLYHPAT(SEQ ID NO:28)具有至少85％序列同一性的HVR-L1,HVR-L2和HVR-L3序列。
在一个具体方面,该序列同一性是86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％。在另一个方面,该重链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4),且该轻链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。在还有另一个方面,该框架序列衍生自人共有框架序列。在仍有又一个方面,该重链框架序列衍生自Kabat亚组I,II,或III序列。在仍有又一个方面,该重链框架序列是VH亚组III共有框架。在仍有又一个方面,该重链框架序列中一种或多种是下述:
HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID NO:13)
HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:14)
HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID NO:15)HC-FR4WGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:16)。
在仍有又一个方面,该轻链框架序列衍生自Kabat卡帕I,II,II或IV亚组序列。在仍有又一个方面,该轻链框架序列是VL卡帕I共有框架。在仍有又一个方面,该轻链框架序列中一种或多种是下述:
LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:20)
LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:21)
LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO:22)
LC-FR4 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:23)。
在仍有又一个具体方面,该抗体进一步包含人或鼠恒定区。在仍有又一个方面,该人恒定区选自由IgG1,IgG2,IgG2,IgG3,IgG4组成的组。在仍有又一个具体方面,该人恒定区是IgG1。在仍有又一个方面,该鼠恒定区选自由IgG1,IgG2A,IgG2B,IgG3组成的组。在仍有又一个方面,该鼠恒定区是IgG2A。在仍有又一个具体方面,该抗体具有降低的或最小限度的效应器功能。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自“效应器较小Fc突变”或无糖基化。在仍有又一个实施方案中,该效应器较小Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A替代。
在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链和轻链可变区序列的抗PD-L1抗体,其中:
(a)该重链序列与下述重链序列具有至少85％序列同一性:EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:29),或
(b)该轻链序列与下述轻链序列具有至少85％序列同一性:DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:9)。
在一个具体方面,该序列同一性是86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％。在另一个方面,该重链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4),且该轻链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。在还有另一个方面,该框架序列衍生自人共有框架序列。在又一个方面,该重链框架序列衍生自Kabat亚组I,II,或III序列。在仍有又一个方面,该重链框架序列是VH亚组III共有框架。在仍有又一个方面,该重链框架序列中一种或多种是下述:
HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID NO:13)
HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:14)
HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID NO:15)HC-FR4WGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:16)。
在仍有又一个方面,该轻链框架序列衍生自Kabat卡帕I,II,II或IV亚组序列。在仍有又一个方面,该轻链框架序列是VL卡帕I共有框架。在仍有又一个方面,该轻链框架序列中一种或多种是下述:
LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:20)
LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:21)
LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO:22)LC-FR4FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:23)。
在仍有又一个具体方面,该抗体进一步包含人或鼠恒定区。在仍有又一个方面,该人恒定区选自由IgG1,IgG2,IgG2,IgG3,IgG4组成的组。在仍有又一个具体方面,该人恒定区是IgG1。在仍有又一个方面,该鼠恒定区选自由IgG1,IgG2A,IgG2B,IgG3组成的组。在仍有又一个方面,该鼠恒定区是IgG2A。在仍有又一个具体方面,该抗体具有降低的或最小限度的效应器功能。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自原核细胞中的生成。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自“效应器较小Fc突变”或无糖基化。在仍有又一个实施方案中,该效应器较小Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A替代。
在另一个又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链和轻链可变区序列的抗PD-L1抗体,其中:
(a)该重链序列与下述重链序列具有至少85％序列同一性:
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:7),或
(b)该轻链序列与下述轻链序列具有至少85％序列同一性:
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:9)。
在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链和轻链可变区序列的抗PD-L1抗体,其中:
(a)该重链序列与下述重链序列具有至少85％序列同一性:
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTK(SEQ ID NO:8),或
(b)该轻链序列与下述轻链序列具有至少85％序列同一性:
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:9)。
在一个具体方面,该序列同一性是86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％。在另一个方面,该重链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4),且该轻链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。在还有另一个方面,该框架序列衍生自人共有框架序列。在又一个方面,该重链框架序列衍生自Kabat亚组I,II,或III序列。在仍有又一个方面,该重链框架序列是VH亚组III共有框架。在仍有又一个方面,该重链框架序列中一种或多种是下述:
HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID NO:13)
HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:14)
HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID NO:15)
HC-FR4 WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:30)。
在仍有又一个方面,该轻链框架序列衍生自Kabat卡帕I,II,II或IV亚组序列。在仍有又一个方面,该轻链框架序列是VL卡帕I共有框架。在仍有又一个方面,该轻链框架序列中一种或多种是下述:
LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:20)
LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:21)
LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO:22)
LC-FR4 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:23)。
在仍有又一个具体方面,该抗体进一步包含人或鼠恒定区。在仍有又一个方面,该人恒定区选自由IgG1,IgG2,IgG2,IgG3,IgG4组成的组。在仍有又一个具体方面,该人恒定区是IgG1。在仍有又一个方面,该鼠恒定区选自由IgG1,IgG2A,IgG2B,IgG3组成的组。在仍有又一个方面,该鼠恒定区是IgG2A。在仍有又一个具体方面,该抗体具有降低的或最小限度的效应器功能。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自原核细胞中的生成。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自“效应器较小Fc突变”或无糖基化。在仍有又一个实施方案中,该效应器较小Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A替代。
在还有另一个实施方案中,该抗PD-L1抗体是阿特珠单抗,或MPDL3280A(CAS注册号:1422185-06-5)。在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链可变区和轻链可变区的抗PD-L1抗体,该重链可变区包含来自
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:7)或
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTK(SEQ ID NO:8)的重链可变区氨基酸序列,该轻链可变区包含
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列。在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的包含重链和/或轻链序列的抗PD-L1抗体,其中:
(a)该重链序列与下述重链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％或100％序列同一性:
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO:31),和/或
(b)该轻链序列与下述轻链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％或100％序列同一性:
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:32)。
在仍有又一个实施方案中,提供的是一种分离的编码抗PD-L1抗体的轻链或重链可变区序列的核酸,其中:
(a)该重链进一步包含分别与GFTFSDSWIH(SEQ ID NO:24),AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID NO:25)和RHWPGGFDY(SEQ ID NO:12)具有至少85％序列同一性的HVR-H1,HVR-H2和HVR-H3序列,且(b)该轻链进一步包含分别与RASQDVSTAVA(SEQ ID NO:26),SASFLYS(SEQID NO:27)和QQYLYHPAT(SEQ ID NO:28)具有至少85％序列同一性的HVR-L1,HVR-L2和HVR-L3序列。
在一个具体方面,该序列同一性是86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％。在一个方面,该重链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4),且该轻链可变区包含如下在HVR之间并置的一种或多种框架序列:(LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。在还有另一个方面,该框架序列衍生自人共有框架序列。在又一个方面,该重链框架序列衍生自Kabat亚组I,II,或III序列。在仍有又一个方面,该重链框架序列是VH亚组III共有框架。在仍有又一个方面,该重链框架序列中一种或多种是下述:
HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID NO:13)
HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:14)
HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID NO:15)
HC-FR4 WGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:16)。
在仍有又一个方面,该轻链框架序列衍生自Kabat卡帕I,II,II或IV亚组序列。在仍有又一个方面,该轻链框架序列是VL卡帕I共有框架。在仍有又一个方面,该轻链框架序列中一种或多种是下述:
LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:20)
LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:21)
LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO:22)
LC-FR4 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:23)。
在仍有又一个具体方面,本文中描述的抗体(诸如抗PD-1抗体,抗PD-L1抗体,或抗PD-L2抗体)进一步包含人或鼠恒定区。在仍有又一个方面,该人恒定区选自由IgG1,IgG2,IgG2,IgG3,IgG4组成的组。在仍有又一个具体方面,该人恒定区是IgG1。在仍有又一个方面,该鼠恒定区选自由IgG1,IgG2A,IgG2B,IgG3组成的组。在仍有又一个方面,该鼠恒定区是IgG2A。在仍有又一个具体方面,该抗体具有降低的或最小限度的效应器功能。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自原核细胞中的生成。在仍有又一个具体方面,该最小限度的效应器功能源自“效应器较小Fc突变”或无糖基化。在仍有又一个方面,该效应器较小Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A替代。
在仍有又一个方面,本文中提供的是编码本文中描述的任何抗体的核酸。在一些实施方案中,该核酸进一步包含适合于表达编码任何先前描述的抗PD-L1,抗PD-1,或抗PD-L2抗体的核酸的载体。在仍有又一个具体方面,该载体进一步包含适合于表达该核酸的宿主细胞。在仍有又一个具体方面,该宿主细胞是真核细胞或原核细胞。在仍有又一个具体方面,该真核细胞是哺乳动物细胞,诸如中国仓鼠卵巢(CHO)。
该抗体或其抗原结合片段可使用本领域已知方法来生成,例如通过包含在适合于生成此类抗体或片段的条件下培养含有处于适合于表达的形式的编码任何先前描述的抗PD-L1,抗PD-1,或抗PD-L2抗体或抗原结合片段的核酸的宿主细胞,和回收该抗体或片段的工艺。
在一些实施方案中,该分离的抗PD-L1抗体是无糖基化的。抗体的糖基化典型地或是N连接的或是O连接的。N连接的指碳水化合物模块附着至天冬酰胺残基的侧链。三肽序列天冬酰胺-X-丝氨酸和天冬酰胺-X-苏氨酸,其中X是除了脯氨酸以外的任何氨基酸,是碳水化合物模块酶促附着至天冬酰胺侧链的识别序列。如此,这些三肽序列任一在多肽中的存在创建潜在的糖基化位点。O连接的糖基化指糖N-乙酰基半乳糖胺,半乳糖,或木糖之一附着至羟基氨基酸,最常见丝氨酸或苏氨酸,尽管也可使用5-羟基脯氨酸或5-羟基赖氨酸。通过改变氨基酸序列,使得去除上文描述的三肽序列(用于N连接的糖基化位点)之一,方便地实现自抗体去除糖基化位点。可以通过将糖基化位点内的天冬酰胺,丝氨酸或苏氨酸残基用另一种氨基酸残基(例如甘氨酸,丙氨酸或保守替代)替代来进行改变。
在这点上要注意的是作为单一药剂施用的阿特珠单抗的药动学已经基于来自研究PCD4989g的临床数据表征且与当前正在进行的TNBC的一线治疗中III期研究WO29522一致。已经在1至20mg/kg的剂量上观察到阿特珠单抗抗肿瘤活性。总之,对于≥1mg/kg每三周(q3w)的剂量,阿特珠单抗展现它的线性的且与典型的IgG1抗体一致的药动学。药动学数据(Bai S,Jorga K,Xin Y,et al.,A guide to rational dosing of monoclonalantibodies,Clin Pharmacokinet 2012；51:119-35,通过援引完整收入本文)并不提示在固定剂量或为体重调整的剂量后的暴露方面任何临床上有意义的差异。已经测试了阿特珠单抗给药进度表q3w和q2w。固定剂量阿特珠单抗800mg每两周(q2w)(等同于基于体重的剂量10mg/kg q2w)导致与III期剂量每三周(q3w)施用1200mg等同的暴露。q3w进度表正在用于阿特珠单抗单药疗法在多种肿瘤类型中的多项III期研究而q2w主要与化学疗法方案组合使用。在研究PCD4989g中,Kaplan-Meier估算的总体24周无进展存活(PFS)率是33％(95％ CI:12％,53％)。
本公开文本的PD-1轴抑制剂剂量合适地是约400mg至约1200mg,约600mg至约1000mg,约700mg至约900mg,或约840mg。在一些方面,该PD-1轴抑制剂是PD-L1抑制剂,而且更加特别地是阿特珠单抗,以约840mg的剂量施用。
在特别的实施方案中,PD-1轴抑制剂,或更加特别地PD-L1抑制剂,以28天治疗周期的每14天静脉内施用。在一些方面,在28天治疗周期的第1和15天用PD-1轴抑制剂,而且更加特别地PD-L1抑制剂治疗受试者。
VEGF抑制剂
本公开文本的范围内的VEGF抑制剂包括pazopanibbevacizumabsorafenibsunitinibaxitinibponatinibregorafenibcabozantinibvendetanibramucirumablenvatinib和ziv-aflibercept
在一些方面,VEGF抑制剂药物是贝伐珠单抗。贝伐珠单抗已经得到FDA批准,与化学疗法方案组合治疗转移性结肠直肠癌(CRC)和非小细胞肺癌(NSCLC)。贝伐珠单抗描述于美国专利No.6,054,297和6,884,879,通过援引将其内容收入本文,且是一种结合VEGF且通过阻止VEGF与它的受体相互作用来中和VEGF的生物学活性的重组人源化IgG1单抗。
在本公开文本的这个或另一个方面,该VEGF抑制剂是包含如下重链可变区和/或轻链可变区的抗体,该重链可变区包含来自SEQ ID NO:33的重链可变区氨基酸序列,且该轻链可变区包含来自SEQ ID NO:34的轻链可变区氨基酸序列。在本公开文本的仍有又一个方面,提供了一种分离的包含重链和/或轻链序列的VEGF抑制性抗体,其中:
(a)该重链序列与下述重链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％,或100％序列同一性:
EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTYAADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS(SEQ IDNO:33)；或
(b)该轻链序列与下述重链序列具有至少85％,至少90％,至少91％,至少92％,至少93％,至少94％,至少95％,至少96％,至少97％,至少98％,至少99％,或100％序列同一性:
DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPSRFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR(SEQ ID NO:34)。
在本公开文本的这个或还有另一个方面,该VEGF抑制剂是一种包含重链和/或轻链可变区序列的抗体,其中:
(a)该重链进一步包含分别与GYTFTNYGMN(SEQ ID NO:35),WINTYTGEPTYAADFKR(SEQ ID NO:36),和YPHYYGSSHWYFDV(SEQ ID NO:37)具有至少85％序列同一性的HVR-H1,HVR-H2和HVR-H3序列；或(b)该轻链进一步包含分别与SASQDISNYLN(SEQ ID NO:38),FTSSLHS(SEQ ID NO:39),和QQYSTVPWT(SEQ ID NO:40)具有至少85％序列同一性的HVR-L1,HVR-L2和HVR-L3序列。
依照本公开文本,该VEGF抑制剂剂量是约0.1至约15mg/kg/周,约0.5至约15mg/kg/周,约1至约15mg/kg/周,约5至约15mg/kg/周,约5至约10mg/kg/周,诸如约5mg/kg/周,约10mg/kg/周或约15mg/kg/周。在一些方面,该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗。在一些方面,贝伐珠单抗每周施用,而且更加特别地以约5mg/kg/周的剂量施用。
结肠直肠癌
在一个方面,本文中提供的是一种用于治疗有需要的受试者中的结肠直肠癌的方法,其包含对该受试者施用治疗有效量的MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,和VEGF抑制剂的组合。mCRC特别适合于本文中描述的组合疗法。
在本公开文本的一些方面,该治疗导致延迟受试者中CRC的进展。在一些其它方面,该治疗导致受试者中的完全响应。在一些其它方面,响应在治疗停止之后持续。在仍有其它方面,与接受包含(i)治疗有效量的PD-1轴抑制剂和治疗有效量的MEK抑制剂且不施用VEGF抑制剂,(ii)治疗有效量的PD-1轴抑制剂和治疗有效量的VEGF抑制剂且不施用MEK抑制剂,和/或(iii)治疗有效量的MEK抑制剂和治疗有效量的VEGF抑制剂且不施用PD-1轴抑制剂的疗法的CRC受试者相比,该治疗延长中值无进展存活时间。
组合疗法
认为MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,和VEGF抑制剂的三重组合(i)靶向癌症的标志(即增殖性信号传导,免疫逃避,和血管发生),(ii)基于复杂的相互作用和这些药剂展现的活性会引起协同性抗肿瘤活性,和/或(iii)会提供具有CRC的患者中实质性临床益处的潜力。
仍然进一步认为与接受包含(i)治疗有效量的PD-1轴抑制剂和治疗有效量的MEK抑制剂且不施用VEGF抑制剂,(ii)治疗有效量的PD-1轴抑制剂和治疗有效量的VEGF抑制剂且不施用MEK抑制剂,和/或(iii)治疗有效量的MEK抑制剂和治疗有效量的VEGF抑制剂且不施用PD-1轴抑制剂的疗法的具有CRC的受试者相比,本公开文本的三重组合治疗可延长具有CRC的受试者的中值无进展存活时间。
药物组合
在本公开文本的一些方面,提供了一种癌症疗法药物组合,其包含:(i)剂量为约20mg至约100mg,约40mg至约80mg,或约80mg的MEK抑制剂；(ii)剂量为约400mg至约1200mg,约600mg至约1000mg,约700mg至约900mg,或约840mg的PD-1轴抑制剂；和(iii)剂量为约5mg/kg至约15mg/kg,约5mg/kg至约10mg/kg,约5mg/kg,约10mg/kg或约15mg/kg的VEGF抑制剂。在一个特别方面,该MEK抑制剂是考比替尼,该PD-L1抑制剂是阿特珠单抗,且该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗。在一些方面,该组合可以每两周施用。例如,该组合可以在28天治疗周期的第1和15天施用。
在这点上要注意可以在不背离本公开文本的预定范围的情况下使用所述组合成分的所述剂量范围的任何组合。当在同一天对受试者施用药物组合(即MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂和VEGF抑制剂)时,可以以任何次序施用药物。例如,(i)药物可以以任何次序分开施用,或者,(ii)可以在同一时间或时间间隔紧密地施用第一药物和第二药物且可以在施用第一和第二药物之前或之后施用第三药物。药物组合的每一种药物的施用可以分开一些时间段,诸如0.5小时,1小时,2小时,3小时或4小时。在一些特别方面,考比替尼可以口服施用,阿特珠单抗可以静脉内施用,而贝伐珠单抗可以在阿特珠单抗施用之后至少0.5小时胃肠外或静脉内施用。在此类方面,考比替尼可以在阿特珠单抗之前或之后施用。在一些方面,MEK抑制剂和PD-1轴抑制剂每一种在28天治疗周期的第1和15天施用,而考比替尼在28天治疗周期的第1至21天施用。
试剂盒
在本公开文本的一些方面,提供了一种用于治疗人受试者中的CRC的试剂盒。该试剂盒包含MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,VEGF抑制剂和包含关于使用治疗有效量的该MEK抑制剂,治疗有效量的该PD-1轴抑制剂和治疗有效量的该VEGF抑制剂来治疗该受试者的用法说明书的包装插页。在一些方面,该MEK抑制剂是考比替尼,该PD-1轴抑制剂是阿特珠单抗,且该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗。
与接受包含(i)治疗有效量的PD-1轴抑制剂和治疗有效量的MEK抑制剂且不施用VEGF抑制剂,(ii)治疗有效量的PD-1轴抑制剂和治疗有效量的VEGF抑制剂且不施用MEK抑制剂,和/或(iii)治疗有效量的MEK抑制剂和治疗有效量的VEGF抑制剂且不施用PD-1轴抑制剂的疗法的CRC受试者相比,本公开文本的试剂盒延长中值无进展存活时间。
实施例
实施例涉及一项两阶段,开放标签,多中心,单臂,Ib期研究,设计用于评估考比替尼,阿特珠单抗和贝伐珠单抗的组合在为了晚期疾病已经接受至少一个含有氟嘧啶和奥沙利铂或伊立替康的在先线疗法且进展的具有mCRC的患者中的安全性,耐受性和药动学。
阶段1会是一项安全性***。阶段2会是一项剂量扩充及一个扩充队列和一个活检队列。患者首先会计入安全性***期。一旦确定治疗方案的安全性和耐受性,研究会行进至扩充阶段。如果来自安全性***阶段的结果要求考比替尼的剂量降低,那么会开放一个另外的阶段1队列。在扩充阶段内患者可登记治疗或活检队列任一,取决于患者经历连续肿瘤活检的适合性和意愿。当已经跟踪登记的所有患者直至死亡,撤回同意,失去随访,或发起人决定结束试验时,无论哪种先发生,研究会结束。
研究的主要目标包括评估考比替尼加贝伐珠单抗加阿特珠单抗的安全性和耐受性和确认建议的剂量方案用于进一步临床开发。评估标准和终点包括:(i)不良事件的发生率,性质和严重程度,依照国家癌症研究所不良事件的常用术语标准(NCI CTCAE)v4分级；(ii)实验室数据；和(iii)≥3级不良事件,包括特别感兴趣的不良事件和引起治疗中止的不良事件。
探索性功效目标包括评估考比替尼加贝伐珠单抗加阿特珠单抗的功效。评估标准和终点包括:(i)调查人员评估的经过确认的总体响应率,由实体瘤的响应评估标准(RECIST)v1.1定义；(ii)无进展存活,由周期1第1天至由调查人员使用RECIST v1.1确定的疾病进展的第一次发生或研究期间任何起因的死亡的时间定义,无论哪种先发生；和(iii)响应的持续时间,由有记录的客观响应的第一次发生至由调查人员使用RECIST v1.1确定的疾病进展的时间或研究期间任何起因的死亡的时间定义,无论哪种先发生。
研究治疗会包含21/7进度表上60mg剂量的考比替尼,840mg每2周(q2w)进度表上的阿特珠单抗,和5mg/kg q2w进度表上的贝伐珠单抗。安全性***中的和扩充队列中的患者会自第1天起接受考比替尼,阿特珠单抗,和贝伐珠单抗。扩充阶段中的活检队列中的患者会在第1天开始贝伐珠单抗,继以第14天(±2天窗口)的肿瘤活检和第15天开始考比替尼,继以第28天(±2天窗口)的肿瘤活检和第29天(即周期2第1天)开始阿特珠单抗,继以任选的第56天(±2天窗口)的肿瘤活检。分别会在启动考比替尼和阿特珠单抗之前实施活检。自这个点起向前,活检队列中的患者会遵循与安全性***和治疗扩充队列中的那些相同的治疗方案。
会对所有患者要求治疗前活检且会是***固定,石蜡包埋的组织。存档活检可用于治疗前活检,只要它们是在筛选前不超过3个月收集的。新鲜样品对于活检队列中的患者是优选的。如上文描述的,只会对活检队列中的患者安排其余活检。
会在疗法的所有周期期间,在研究治疗结束拜访时,和在随访时段期间对所有患者密切监测安全性和耐受性。会使用NCI CTCAE v4.0来表征所有患者的研究治疗的毒性概况。
两个阶段中的患者均会继续接受研究疗法直至依照RECISTv1.1的疾病进展,不可接受的毒性,死亡,患者或医师决定退出,或妊娠,无论哪种先发生。任何可评估和可测量的疾病会在筛选时记录并在每次后续肿瘤评估时重评估。调查人员会以8周间隔评估肿瘤响应,不管任何给药延长。
治疗会继续直至患者具有依照RECIST v1.1的疾病进展,不可接受的毒性,死亡,患者或医师决定退出,或妊娠,无论哪种先发生。单独的正在升高的癌胚抗原水平不会认为是疾病进展。如果满足某些条件的话,会容许患者接受研究治疗超出疾病进展。
研究准入的患者纳入标准包括下述。年龄至少18岁。东部协作肿瘤学小组性能状态0或1。组织学确认的不可切除的转移性结肠直肠腺癌。在用于不可切除的转移性结肠直肠腺癌的含有氟嘧啶和奥沙利铂或伊立替康的在先线疗法上进展。容许辅助或新辅助化学疗法,前提是它在研究治疗开始之前至少12个月完成。依照RECIST v1.1的可测量疾病。注意:意图要活检的损害不应是目标损害。足够的血液学和终末器官功能,由下面的在第一剂研究药物治疗前14天内获得的实验室结果定义:(i)WBC≥2.5且≤15.0×109/L；(ii)ANC≥1.5×109/L；(iii)血小板计数≥100×109/L；(iv)血红蛋白≥9g/dL；(v)清蛋白≥9g/dL；血清胆红素≤1.5×正常上限(ULN)(具有已知的吉耳伯特氏病的患者可具有胆红素≤3.0×ULN)；(vi)INR和PTT≤1.5×ULN；(vii)淀粉酶和脂肪酶≤1.5×ULN；(viii)AST,ALT,和碱性磷酸酶(ALP)≤3×ULN,有下面的例外:具有有记录的肝转移的患者(AST和/或ALT≤5×ULN)和具有有记录的肝或骨转移的患者(ALP≤5×ULN)；(ix)肌酸清除≥30mL/min。
研究准入的患者除斥标准包括下述。在登记前60天内的手术规程(包括开放活检,手术切除,伤口修正或任何其它主要手术)或重大外伤性损伤,或预期研究过程期间需要主要手术规程。在研究周期1第1天15天内的次要手术规程(包括放置血管通路装置)。未治疗的CNS转移。通过手术或放射技术的脑转移的治疗会在启动研究治疗前至少4周完成。在登记这项研究(周期1第1天)前28天或两个调查性药剂半衰期(以更长者为准)内的任何调查性药剂或已批准的疗法的治疗。在周期1第1天前5年内除了结肠直肠癌以外的恶性,例外是那些以预期治愈结局治疗的具有可忽略的转移或死亡风险的(例如预期5年总体存活＞90％)(诸如恰当治疗的原位***,基或鳞状细胞皮肤癌,以治愈意图手术治疗的局限性***癌,以治愈意图手术治疗的原位导管癌。在研究周期1第1天前30天内的在先放射疗法和/或持久的放射相关不良效应。过去为了另一种恶性的在先同种异基因骨髓移植或实体器官移植物。用手术和/或放射未明确治疗的脊髓受压。需要反复引流规程的未受控制的胸腔积液,心包积液,或腹水。
涉及研究药疗的研究准入的患者除斥标准包括下述。当前或最近(在研究登记10天内)使用乙酰水杨酸(＞325mg/天),氯吡格雷(＞75mg/天)或当前或最近(在第一剂贝伐珠单抗10天内)为了治疗性目的使用治疗性口服或胃肠外抗凝药或溶栓剂。严重的对嵌合或人源化抗体或融合蛋白的变应性,过敏性,或其它超敏感性反应的历史。已知的对在中国仓鼠卵巢细胞中生产的生物药品或考比替尼,阿特珠单抗,或贝伐珠单抗配制剂的任何成分的超敏感性或变应性。用CD137激动剂或免疫检查点阻断疗法,抗编程性死亡-1,抗程序性死亡配体1,MEK抑制剂的在先治疗。
涉及器官功能和医学历史的研究准入的患者除斥标准包括下述。临床重大心或肺功能障碍的历史。严重的不愈合的伤口,活动性溃疡或未治疗的骨折。在周期1第1天前6个月内腹瘘或胃肠穿孔的历史。咯血(≥1/2茶匙鲜红血液每次发作)的历史,或任何其它严重出血或出血风险(胃肠出血的历史,胃肠溃疡,等)。在周期1第1天前7天内INR＞1.5且aPTT＞1.5×ULN。有出血风险的重大凝血病或遗传性出血素质的历史或证据。生命预期＜12周。任何先前≥3级静脉血栓栓塞。筛选时的蛋白尿,通过尿试纸≥2+或24小时蛋白尿＞1.0g证明。左心室射血分数低于制度正常下限。未控制的严重医学或精神病学病。未控制的肿瘤疼痛；在筛选期间需要***疼痛药疗的患者应当在周期1第1天前处于稳定的给药方案。妊娠或哺乳,或意图在研究期间变成妊娠。不是绝经后(闭经≥连续12个月,没有鉴定出除了绝经以外的起因)或手术绝育的女性必须具有在周期1第1天前14天内的阴性血清妊娠测试。特发性肺纤维化,机化性肺炎(例如梗阻性细支气管炎),药物诱发的肺炎,特发性肺炎的历史,或筛选胸部CT扫描时活动性肺炎的证据。认为是感觉神经视网膜剥离/中心性浆液性脉络膜视网膜病变,视网膜静脉闭塞或新血管黄斑变性的风险因子的眼科检查上的视网膜病的历史或证据。基于传染性疾病的除斥标准包括:在筛选时需要IV抗生素的活动性感染；具有活动性乙型肝炎(慢性或急性)的患者；具有过去的乙型肝炎病毒(HBV)感染或已解决的HBV感染的患者；具有活动性丙型肝炎的患者；和已知的HIV感染。基于自身免疫状况的除斥标准包括:自身免疫性疾病的历史,包括但不限于重症肌无力,肌炎,自身免疫性肝炎,***性红斑狼疮,类风湿性关节炎,炎性肠病,与抗磷脂综合征有关的血管血栓形成,韦格纳氏肉芽肿病,斯耶格伦氏综合征,格-巴二氏综合征,多发性硬化,血管炎,或肾小球肾炎。
包括在活检队列中的患者纳入标准包括:满足研究准入的所有纳入标准；和未接受贝伐珠单抗或在周期1第1天前至少12个月接受最后一次贝伐珠单抗治疗。
考比替尼会以60mg考比替尼(三片各20mg的片剂)的剂量口服每天一次在28天周期的第1-21天施用。
阿特珠单抗会以840mg的剂量通过IV输注在每个28天周期的第1和15天施用。阿特珠单抗会先施用,继以贝伐珠单抗,给药之间最少30分钟。
贝伐珠单抗会以5mg/kg的剂量通过IV输注在每个28天周期的第1和15天施用。
存档的和/或新鲜的肿瘤标本的收集,和生物标志物评估
扩充的RAS状态牵涉mCRC中的治疗和预后(Karapetis CS,Khambata-Ford S,Jonker DJ,et al.,K-ras Mutations and Benefit from Cetuximab in AdvancedColorectal Cancer,N Engl J Med 2008；359:1757-65；De Roock W,Claes B,BernasoniD,et al.,Effects of KRAS,BRAF,NRAS,and PIK3CA mutations on the efficacy ofcetuximab plus chemotherapy in chemotherapy refractory metastatic colorectalcancer:a restrospective consortium analysis,The Lancet 2010；11:753-62；SorichMJ,Wise MD,Rowland A,et al.,Extended RAS mutations and anti-EGFR monocloncalantibody survival benefit in metastatic colorectal cancer:a meta analysis ofrandomized controlled trials,Ann Oncol2015；26:13-21；和Allegra CJ,Rumble RB,Hamilton SR,et al.,Extended RAS Gene Mutation Testing in MetastaticColorectal Carcinoma to Predict Response to Anti-Epidermal Growth FactorReceptor Monoclonal Antibody Therapy:American Society of Clinical OncologyProvisional Clinical Opinion Update2015,J Clin Oncol 2016；34:179-85。通过援引将每一篇参考文献完整收入本文)。数项研究证明RAS突变携带与RAS野生型队列相比更差的PFS和总体存活预后(Sorbye H,Dragomir A,M,et al.,High BRAF MutationFrequency and Marked Survival Differences in Subgroups According to KRAS/BRAFMutation Status and Tumor Tissue Availability in a Prospective Population-Based Metastatic Colorectal Cancer Cohort,PLoS One2015；10:e0131046；Sorich etal.2015；和Vincenzi B,Cremolini C,Sartore-Bianchi A,et al.,Prognosticsignificance of K-Ras mutation rate in metastatic colorectal cancer patients,Oncotarget 2015；6:31604-12)。Ib期研究GP28363(在具有局部晚期或转移性肿瘤的患者中与阿特珠单抗一起施用考比替尼)在KRAS突变型mCRC中以及在包括多种实体瘤的活检队列中评估安全性和功效。与本公开文本有关,不管扩充的RAS状态评估了这种方案在所有mCRC患者中的功效和安全性,因为作用机制不会预测差异效果。然而,鉴于基于RAS状态的差异预后,会对存档/基线肿瘤组织进行扩充的RAS状态的测试。
CRC中的MSI状态也牵涉mCRC中的治疗和预后二者(Goldstein J,Tran B,EnsorJ,et al.,Multicenter retrospective analysis of metastatic colorectal cancer(CRC)with high-level microsatellite instability(MSI-H),Annals ofOncology2014；25:1032-8,通过援引完整收入本文)。它具有与检查点抑制剂,诸如PD-L1和PD-1拮抗剂相比不同的ORR和响应持续时间(DOR)率(Li J,Qin S,Xu R,et al.,Regorafenib plus best supportive care versus placebo plus best supportivecare in Asian patients with previously treated metastatic colorectal cancer(CONCUR):a randomised,double-blind,placebo-controlled,phase 3trial,LancetOncol 2015；16:619-29；和Oh DY,Venook AP,Fong L.,On the Verge:Immunotherapy forColorectal Carcinoma,J Natl Comp Canc Netw 2015；13:970-8)。认为PD-L1抗体阿特珠单抗可能在MSI高CRC患者中是有效的,与其它检查点抑制剂相似,但是取决于MSI状态,可能有差异效应。因而,会自存档/基线组织评估MSI状态以区分这种方案在这些不同群体中的功效。
会在基线时收集肿瘤组织样品,用于DNA和/或RNA提取,从而能够进行下一代测序(NGS)以鉴定体细胞突变,增加调查人员对疾病病理生物学的了解。越来越多地建议基于基因的CRC分类作为分化各种亚型的CRC的一种方式且可能对治疗和预后二者具有深刻影响。这些亚型已经显示具有不同免疫调控影响且可能影响这种方案的功效(Guinney J,Dienstmann R,Wang X,et al.,The consensus molecular subtypes of colorectalcancer,Nat Med 2015；21:1350-6；Kocarnik JM,Shiovitz S,Phipps AI,Molecularphenotypes of colorectal cancer and potential clinical applications,Gastroenterol Rep(Oxf)2015；3:269-76；和Lal N,Beggs AD,Willcox BE,Middleton GW,An immunogenomic stratification of colorectal cancer:Implications fordevelopment of targeted immunotherapy,Oncoimmunology 2015；4:e976052)。因为这些生物标志物可能还具有预后价值,所以还还探索它们与疾病进展的潜在关联。会实施存档/基线肿瘤分析和不同CRC亚型的分类以进一步评估这种可能的相关性。
其中安排了治疗前,用与考比替尼组合的贝伐珠单抗治疗时,和与阿特珠单抗的三重组合时的肿瘤活检的一个独立(stand-alone)队列。交错治疗时的活检之间生物标志物的比较会进一步阐明这种组合的可能的作用机制。生物标志物分析会聚焦于CD8阳性T细胞浸润物,PD-L1表达,和增强的免疫应答,MAPK抑制,和牵涉凋亡或发炎的其它的生物标志物的评估。
阶段1:安全性***队列
I期研究GP28363已经探索与阿特珠单抗一起施用的考比替尼的放大剂量。与阿特珠单抗一起施用的考比替尼已经显示是安全且可耐受的。在这项研究中将贝伐珠单抗添加至考比替尼及阿特珠单抗的方案。虽然贝伐珠单抗之前已经与阿特珠单抗一起施用,但是因为贝伐珠单抗先前尚未连同考比替尼和阿特珠单抗一起施用于患者,所以这项研究会以安全性***队列开始。贝伐珠单抗具有一些与考比替尼和阿特珠单抗交叠的毒性。
安全性***队列中的患者会自第1天起接受考比替尼,阿特珠单抗,和贝伐珠单抗。图1中描绘为安全性***和扩充队列提供的研究方案。
在安全性***队列中,会评估28天给药周期,其中会对患者施用:(i)头21天的60mg考比替尼,继以没有考比替尼疗法的7天休息期；(ii)在28天周期的第1和15天的840mg阿特珠单抗输注；和(iii)在28天周期的第1和15天的5mg/kg贝伐珠单抗输注。
在安全性***阶段中的患者已经完成至少一个28天周期的治疗之后,会审查临床数据以确定测试剂量的安全性和耐受性。认为这会需要数月来完成这个组的登记；因此,安全性审查应当含有在安全性评估之时已经接受该方案达数个周期的患者的数据。如果确定60mg考比替尼剂量在安全性***阶段是不可耐受的,那么研究队伍会登记处于降低的考比替尼剂量40mg QD(21/7)的另外的队列的患者。在此类降低的考比替尼剂量评估中,在该另外的队列已经完成一个周期的治疗之后,会进行临床数据审查以确定是否能以这种更低剂量的考比替尼启动扩充阶段。
如果任何下述情形发生且由调查人员评估为相关的话,研究治疗会对患者个体立即停止,而且会进行彻底的调查和安全性分析:(i)≥3级高血压(≥180mmHg收缩或≥110mmHg舒张)；(ii)≥3级出血(症状和指示≤2个单位包装RBC的输血)；(iii)≥3级肺炎(有症状的,干扰ADL；指示氧)；(iv)≥3级左心室功能障碍(有症状的CHF,响应干预)；(v)≥3级腹泻,不响应止泻剂(相对于基线增加≥7次大便每天；失禁；IV流体≥24小时；住院)；或(vi)ALT或AST>5x ULN,组合有总胆红素>2x ULN。如果任何下述情形发生,那么进一步的登记和研究治疗会立即停止直至已经进行彻底的调查和安全性分析:(i)任何受试者因评估为与研究治疗有关的AE(由调查人员和/或发起人进行)而经历死亡,会导致待定研究临时暂停,由研究队伍审查；或(ii)超过30％的患者满足上文限定的个体停止规则。
阶段2:扩充和活检队列
扩充队列中的患者会自第1天起接受考比替尼,阿特珠单抗,和贝伐珠单抗。
扩充阶段中的活检队列中的患者会在第1天开始贝伐珠单抗,继以第14天(±2天窗口)的肿瘤活检和第15天开始考比替尼,继以第28天(±2天窗口)的肿瘤活检和第29天(即周期2第1天)开始阿特珠单抗,继以任选的第56天(±2天窗口)的肿瘤活检。分别会在启动考比替尼和阿特珠单抗前收集活检。自这个点起向前,活检队列中的患者会遵循与安全性***和治疗扩充队列中的那些相同的治疗方案。
图2中描绘活检队列的研究方案。
会依照RECIST v1.1评估肿瘤响应。任何可评估和可测量的疾病会在筛选时记录并在每次后续肿瘤评估时重评估。基线肿瘤评估会在周期1第1天之前≤28天实施且如下文概述依照RECIST v 1.1评估。贯穿研究会使用在基线时用于评估疾病位点的相同规程(例如用于CT扫描或MRI扫描的相同对比方案)。
会每8周±1周(不管患者在治疗周期中何处)记录遵从RECIST v1.1的肿瘤响应评估直至有记录的,调查人员确定的,进展性疾病,失去临床益处,撤回同意,死亡,或由发起人终止研究,无论哪种先发生。肿瘤评估的进度表不依赖于研究治疗施用进度表的任何变化(例如给药延迟)且取决于周期的长度可以在周期中发生。如果不得不提前或推后实施肿瘤评估的话,后续评估应当基于第一次研究药物施用的日期(周期1,第1天)依照原始进度表进行。会不早于自研究进入起28天进行响应(PR或完全响应[CR])的确认。在SD的情况中,测量必须在研究进入之后以不少于6周的最少间隔至少一次满足SD标准。因除了疾病进展以外的任何原因而中止研究治疗的患者会继续经历肿瘤响应评估(大约每8周)直至进展性疾病。在进展的放射学证据缺失下升高的肿瘤标志物(例如CEA)不认为是进展性疾病。
实体瘤中的响应评估
在基线时,肿瘤损害/***会如下归类为可测量的或不可测量的。肿瘤损害会测量至少一个维度(要记录测量平面的最长直径),具有下述最小尺寸:(i)通过计算机体层摄影术(CT)或磁共振成像(MRI)扫描的10mm(CT/MRI扫描层面厚度/间距不大于5mm)；(ii)通过临床检查的10mm测径器测量(不能用测径器精确测量的损害应当记录为不可测量)；或(iii)通过胸部X射线的20mm。恶性***会认为是当通过CT扫描评估时短轴≥15mm的病理性增大的且可测量的***(CT扫描层面厚度推荐不大于5mm)。在基线时和在随访中,只会测量和跟踪短轴。不可测量的肿瘤损害涵盖小损害(最长直径<10mm或短轴≥10且≤15mm的病理性***),以及真正不可测量的损害。认为是真正不可测量的损害包括通过体检鉴定的,通过可再现的成像技术不可测量的软脑膜疾病,腹水,胸腔或心包积液,炎性***疾病,皮肤或肺的***累及,腹膜扩散,和腹部肿块/腹部器官巨大症。
与骨损害有关,骨扫描,正电子发射断层摄影术(PET)扫描,或平片不认为是足以测量骨损害的成像技术。然而,可使用这些技术来确认骨损害的存在或消失。如果软组织成分满足上文描述的可测量的定义的话,可通过横断层面成像技术诸如CT或MRI评估的具有可鉴定的软组织成分的溶解性骨损害或混合型溶解性-成骨性损害可认为是可测量的损害。成骨性骨损害是不可测量的。与囊性损害有关,满足放射学定义的单纯性囊肿的标准的损害不应认为是恶性损害(既不是可测量的又不是不可测量的),因为它们根据定义是单纯性囊肿。如果它们满足上文描述的可测量的定义的话,认为代表囊性转移的囊性损害可以认为是可测量的损害。然而,如果同一患者中存在非囊性损害的话,这些对于作为目标损害的选择是优选的。位于先前照射的区域或经受其它局部区域疗法的区域中的肿瘤损害通常不认为是可测量的,除非该损害中已经有有记录的进展。研究方案应当详述此类损害会认为是可测量的条件。
如果使用测径器临床评估的话,会以公制表示法记录损害测量。会尽可能接近治疗开始且从未在开始治疗之前超过4周实施所有基线评估。会在基线时和在研究期间使用相同的评估方法和相同的技术来表征每个鉴定的和报告的损害。优选基于成像的评估。
临床损害只有在它们是浅表的且使用测径器评估直径≥10mm(例如皮肤小结)时才会认为是可测量的。对于皮肤损害的情况,优选通过彩色摄影(包括尺)的记录来评估损害的尺寸。
优选胸部CT胜过胸部X射线,特别是当进展是一项重要终点时,因为CT比X射线更加灵敏,特别是在鉴定新损害中。然而,如果它们清楚限定且被充气的肺包围的话,胸部X射线上的损害可认为是可测量的。对于测量为响应评估选择的损害,CT是当前可用的最好的可再现的方法。这种指引基于CT层面厚度是5mm或更小的假设来定义CT扫描上的损害的可测量性。当CT扫描具有大于5mm的层面厚度时,可测量损害的最小尺寸应当是层面厚度的两倍。MRI也是可接受的。如果在登记前已知患者因变应性或肾机能不全而不能经受具有静脉内(IV)对比剂的CT扫描的话,关于是否会在基线时和在研究期间使用无对比CT或MRI(没有IV对比剂)来评估患者的决定应当受调查中的肿瘤类型和疾病的解剖学位置指引。对于在进行基线对比CT之后发生对比剂的禁忌症的患者,关于是否会实施无对比CT或MRI(增强型或非增强型)的决定也应当基于肿瘤类型和疾病的解剖学位置且应当优化以容许如果可能的话与在先研究比较。
肿瘤响应的评估牵涉基线时的总体肿瘤负荷的评估及使用这作为后续测量的比较者。可测量的疾病由至少一处如上文详述的可测量的损害的存在来定义。当基线时存在超过一处可测量损害时,代表所有牵涉器官的多至总共最多五处损害(和每个器官最多两处损害)的所有损害应当鉴定为目标损害且会在基线时记录和测量。这在患者只具有一个或两个器官位点受牵涉的情况中意味着会记录最多两处损害(一个位点)和四处损害(两个位点)。会作为不可测量的损害(即使通过CT扫描的尺寸>10mm)记录那些器官中的其它损害(尽管可测量的)。目标损害应当基于它们的尺寸来选择(具有最长直径的损害)且代表所有牵涉的器官,但是另外应当自身是可再现重复测量的。具有<10mm的短轴的***认为是非病理性的且不应记录或跟踪。会计算所有目标损害的直径(非结损害的最长的,结损害的短轴)之和并作为基线直径和报告。如果***要包括在和之中,那么,如上所述,仅仅将短轴加入和之中。会使用基线直径和作为参照来进一步表征疾病的可测量维度的任何客观肿瘤消退。
下文表1中提供了在基线时具有可测量疾病的患者在每个时间点时的总体响应状态计算的汇总。下文表2中提供了总体响应计算的汇总,其中需要响应的确认。
表1:时间点响应--具有目标损害(有或无非目标损害)的患者
目标损害 非目标损害 新损害 总体响应
CR CR 否 CR
CR 非CR/非PD 否 PR
CR 未评估 否 PR
PR 非PD或未全部评估 否 PR
SD 非PD或未全部评估 否 SD
未全部评估 非PD 否 不可评估
PD 任何 是或否 PD
任何 PD 是或否 PD
任何 任何 是 PD
表2:最好的总体响应(当需要确认时)
a如果在第一时间点时真正满足CR的话,相对于基线在后续时间点时看到的任何疾病,甚至满足PR标准的疾病有资格成为该时间点时的PD(因为疾病必须在CR之后再出现)。最好的响应会取决于是否满足SD的最小持续时间。然而,有时当后续扫描提示小损害很可能仍然存在且事实上患者在第一时间点时具有PR而非CR时可宣称CR。在这些情形下,原始CR应当改变成PR且最好的响应是PR。
实验室,生物标志物,和其它生物学样品和评估
用于下述实验室测试的样品会发送至一个或数个中心实验室进行分析。对于显示免疫介导的毒性的证据的患者,可收集并分析另外的样品,包括:(i)抗核抗体；(ii)抗双链DNA；(iii)循环抗嗜中性细胞胞质抗体；和(iv)核周抗中性粒细胞胞质抗体。药动学测定法会包括:(i)遵循下文表3中的进度表使用经过验证的免疫测定法测定阿特珠单抗和贝伐珠单抗浓度的血清样品；和(ii)遵循下文表3中的进度表使用经过验证的液体层析与串联质谱方法组合测量考比替尼浓度的血浆样品。会依照表3中的进度表自所有适格患者收集血液样品并分析生物标志物,包括但不限于涉及CRC或肿瘤免疫生物学的生物标志物。会加工样品以获得血浆,用于测定表4中列出的基于血液的建议生物标志物。
表3:药动学,免疫原性,和生物标志物样品的进度表
a中止研究药物的患者会在最后一剂研究药物之后30(±7)天返回诊所进行治疗中止拜访。可使用响应评估显示进展性疾病的拜访作为治疗中止拜访。
表4:探索性研究的建议生物标志物
肿瘤组织样品
会提交具有相关病理学报告的石蜡块中的代表性肿瘤标本(优选的)或至少20片连续切割,未染色载玻片用于测定RAS状态和MSI状态。
扩充的RAS突变定义为KRAS和NRAS基因外显子2的密码子12和13；外显子3的密码子59和61；和外显子4的密码子117和146中发生的突变(Allegra et al.,2016)。会接受当地RAS测试结果,以结果和解读的拷贝作为筛选过程的一部分,需要中心确认。
MSI状态可通过数种方法以展现不同尺寸的重复的MSI基因座的分数来定义,诸如hMLH1和hMSH2基因产物的IHC检测,NGS测试,或PCR测试(Lindor NM,Burgart LJ,Leontovich O,et al.,Immunohistochemistry versus microsatellite instabilitytesting in phenotyping colorectal tumors,J Clin Oncol2002；20:1043-8；SalipanteSJ,Scroggins SM,Hampel HL,et al.,Microsatellite instability detection by nextgeneration sequencing.,Clin Chem 2014；60:1192-9。通过援引将每一篇参考文献完整收入本文)。会接受当地MSI测试结果,以结果和解读的拷贝作为筛选过程的一部分,需要中心确认。
另外,可评估关于非遗传性(或肿瘤特异性)生物标志物(包括但不限于癌症相关基因和与常见分子途径有关的生物标志物)和探索性生物标志物(包括但不限于与免疫,MAP激酶途径,或CRC生物学有关的标志物,诸如T细胞标志物或肿瘤突变状态)的探索性研究的NGS。
此说明书使用实施例来公开发明。发明的可专利范围由权利要求书限定,而且可包括本领域技术人员想到的其它实施例。如果它们具有与权利要求的字面语言没有差异的结构要件的话,或者它们包括与权利要求的字面语言有非实质差异的等同结构要件的话,此类其它实施例意图在权利要求的范围内。
序列表
<110> 基因泰克公司（Genentech, Inc.）
<120> MEK抑制剂, PD-1轴抑制剂, 和VEGF抑制剂的组合疗法
<130> P33774 (33988-58)
<150> US 62/374437
<151> 2016-08-12
<160> 40
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 440
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 1
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser
115 120 125
Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp
130 135 140
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr
145 150 155 160
Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr
165 170 175
Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys
180 185 190
Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
195 200 205
Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala
210 215 220
Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
225 230 235 240
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
245 250 255
Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val
260 265 270
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
275 280 285
Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
290 295 300
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly
305 310 315 320
Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
325 330 335
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr
340 345 350
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
355 360 365
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
370 375 380
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
385 390 395 400
Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe
405 410 415
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
420 425 430
Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440
<210> 2
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 2
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 3
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 3
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 4
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 4
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg
85 90 95
Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115 120 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130 135 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145 150 155 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180 185 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 5
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 5
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 6
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 6
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 8
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 8
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
115 120
<210> 9
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 9
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 10
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> 修饰残基
<222> (6)..(6)
<223> Asp 或 Gly
<400> 10
Gly Phe Thr Phe Ser Xaa Ser Trp Ile His
1 5 10
<210> 11
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> 修饰残基
<222> (4)..(4)
<223> Ser 或 Leu
<220>
<221> 修饰残基
<222> (10)..(10)
<223> Thr 或 Ser
<400> 11
Ala Trp Ile Xaa Pro Tyr Gly Gly Ser Xaa Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
1 5 10 15
Lys Gly
<210> 12
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 12
Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr
1 5
<210> 13
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 14
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 14
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
1 5 10
<210> 15
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 15
Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln
1 5 10 15
Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
20 25 30
<210> 16
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 16
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
1 5 10
<210> 17
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> 修饰残基
<222> (5)..(5)
<223> Asp 或 Val
<220>
<221> 修饰残基
<222> (6)..(6)
<223> Val 或 Ile
<220>
<221> 修饰残基
<222> (7)..(7)
<223> Ser 或 Asn
<220>
<221> 修饰残基
<222> (9)..(9)
<223> Ala 或 Phe
<220>
<221> 修饰残基
<222> (10)..(10)
<223> Val 或 Leu
<400> 17
Arg Ala Ser Gln Xaa Xaa Xaa Thr Xaa Xaa Ala
1 5 10
<210> 18
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> 修饰残基
<222> (4)..(4)
<223> Phe 或 Thr
<220>
<221> 修饰残基
<222> (6)..(6)
<223> Tyr 或 Ala
<400> 18
Ser Ala Ser Xaa Leu Xaa Ser
1 5
<210> 19
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> 修饰残基
<222> (3)..(3)
<223> Tyr, Gly, Phe, 或 Ser
<220>
<221> 修饰残基
<222> (4)..(4)
<223> Leu, Tyr, Phe 或 Trp
<220>
<221> 修饰残基
<222> (5)..(5)
<223> Tyr, Asn, Ala, Thr, Gly, Phe, 或 Ile
<220>
<221> 修饰残基
<222> (6)..(6)
<223> His, Val, Pro, Thr, 或 Ile
<220>
<221> 修饰残基
<222> (8)..(8)
<223> Ala, Trp, Arg, Pro, 或 Thr
<400> 19
Gln Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr
1 5
<210> 20
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 20
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys
20
<210> 21
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 21
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
1 5 10 15
<210> 22
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 22
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 23
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 23
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
1 5 10
<210> 24
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 24
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser Trp Ile His
1 5 10
<210> 25
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 25
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
1 5 10 15
Lys Gly
<210> 26
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 26
Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 27
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 27
Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
1 5
<210> 28
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 28
Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala Thr
1 5
<210> 29
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 29
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 30
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 30
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 31
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 31
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115 120 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130 135 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145 150 155 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165 170 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180 185 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195 200 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210 215 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser
225 230 235 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245 250 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
260 265 270
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275 280 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val
290 295 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305 310 315 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
325 330 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340 345 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355 360 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370 375 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385 390 395 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405 410 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420 425 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
<210> 32
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 32
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 33
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 33
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Ala Asp Phe
50 55 60
Lys Arg Arg Phe Thr Phe Ser Leu Asp Thr Ser Lys Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Tyr Pro His Tyr Tyr Gly Ser Ser His Trp Tyr Phe Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 34
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 34
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Phe Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Thr Val Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 35
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 35
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met Asn
1 5 10
<210> 36
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 36
Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Ala Asp Phe Lys
1 5 10 15
Arg
<210> 37
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 37
Tyr Pro His Tyr Tyr Gly Ser Ser His Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 38
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 38
Ser Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 39
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 39
Phe Thr Ser Ser Leu His Ser
1 5
<210> 40
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 40
Gln Gln Tyr Ser Thr Val Pro Trp Thr
1 5

Claims (30)

1.一种治疗具有结肠直肠癌的受试者的方法,该方法包含对所述受试者施用包含(i)治疗有效量的MEK抑制剂,(ii)治疗有效量的PD-1轴抑制剂,和(iii)治疗有效量的VEGF抑制剂的疗法。
2.权利要求1的方法,其中该受试者具有转移性结肠直肠癌。
3.权利要求1或权利要求2的方法,其中该MEK抑制剂是考比替尼(cobimetinib)或其药学可接受盐。
4.权利要求1至3任一项的方法,其中该PD-1轴抑制剂是PD-L1抑制剂。
5.权利要求4的方法,其中该PD-L1抑制剂是包含如下重链和轻链的抗体,该重链包含GFTFSDSWIH(SEQ ID NO:24)的HVR-H1序列,AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID NO:25)的HVR-H2序列,和RHWPGGFDY(SEQ ID NO:12)的HVR-H3序列且该轻链包含RASQDVSTAVA(SEQ ID NO:26)的HVR-L1序列,SASFLYS(SEQ ID NO:27)的HVR-L2序列,和QQYLYHPAT(SEQ ID NO:28)的HVR-L3序列。
6.权利要求4的方法,其中该PD-L1抑制剂是包含如下重链可变区和轻链可变区的抗体,
该重链可变区包含EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS DSWIHWVRQA PGKGLEWVAWISPYGGSTYY ADSVKGRFTI SADTSKNTAY LQMNSLRAED TAVYYCARRH WPGGFDYWGQ GTLVTVSS(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列且
该轻链可变区包含
DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDVS TAVAWYQQKP GKAPKLLIYS ASFLYSGVPSRFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YLYHPATFGQ GTKVEIKR(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列。
7.权利要求1至6任一项的方法,其中该PD-L1抑制剂是阿特珠单抗(atezolizumab)。
8.权利要求1至7任一项的方法,其中该VEGF抑制剂是包含如下重链和轻链的抗体,该重链包含GYTFTNYGMN(SEQ ID NO:35)的HVR-H1序列,WINTYTGEPTYAADFKR(SEQ ID NO:36)的HVR-H2序列,和YPHYYGSSHWYFDV(SEQ ID NO:37)的HVR-H3序列且该轻链包含SASQDISNYLN(SEQ ID NO:38)的HVR-L1序列,FTSSLHS(SEQ ID NO:39)的HVR-L2序列,和QQYSTVPWT(SEQ ID NO:40)的HVR-L3序列。
9.权利要求1至7任一项的方法,其中该VEGF抑制剂是包含如下重链可变区和轻链可变区的抗体,
该重链可变区包含EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGWINTYTGEPTY AADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:33)的氨基酸序列且
该轻链可变区包含DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYFTSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR(SEQ ID NO:34)的氨基酸序列。
10.权利要求1至9任一项的方法,其中该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗(bevacizumab)。
11.权利要求1至10任一项的方法,其中用约20mg至约100mg,约40mg至约80mg,或约60mg该MEK抑制剂每天治疗该受试者。
12.权利要求11的方法,其中该MEK抑制剂是考比替尼或其药学可接受盐,且进一步地其中用约60mg,约40mg,或约20mg治疗该受试者。
13.权利要求1至12任一项的方法,其中28天治疗周期的连续21天每天一次施用该MEK抑制剂。
14.权利要求13的方法,其中在该28天治疗周期的第3至23天施用该MEK抑制剂。
15.权利要求1至14任一项的方法,其中28天治疗周期的每14天静脉内用约400mg至约1200mg,约600mg至约1000mg,约700mg至约900mg,或约840mg该PD-1轴抑制剂治疗该受试者。
16.权利要求15的方法,其中该PD-1轴抑制剂是阿特珠单抗,且进一步地其中用约840mg治疗该受试者。
17.权利要求15或权利要求16的方法,其中在该28天治疗周期的第1和15天用该PD-1轴抑制剂治疗该受试者。
18.权利要求1至17任一项的方法,其中28天治疗周期的每14天用约3mg每kg体重至约7mg每kg体重,约4mg每kg体重至约6mg每kg体重,或约5mg每kg体重该VEGF抑制剂治疗该受试者。
19.权利要求18的方法,其中该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗,且进一步地其中用约5mg每kg体重治疗该受试者。
20.权利要求18或权利要求19的方法,其中在该28天治疗周期第1和15天用该VEGF抑制剂治疗该受试者。
21.权利要求1至20任一项的方法,其中在28天治疗周期的第1天和第15天施用该MEK抑制剂,该PD-1轴抑制剂和该VEGF抑制剂每一种。
22.权利要求1至21任一项的方法,其中该结肠直肠癌是微卫星稳定的结肠直肠癌。
23.权利要求1至22任一项的方法,其中在28天治疗周期的第1和15天施用该PD-1轴抑制剂和该VEGF抑制剂每一种且其中在将该VEGF抑制剂施用于该受试者前将该PD-1轴抑制剂施用于该受试者。
24.权利要求1至23任一项的方法,其中在该28天治疗周期的第1至21天施用该MEK抑制剂。
25.一种治疗具有结肠直肠癌的受试者的方法,该方法包含对所述受试者施用包含下述各项的疗法:
(i)治疗有效量的考比替尼或其药学可接受盐；
(ii)治疗有效量的PD-L1抑制剂,它是包含下述各项的抗体:
(a)包含GFTFSDSWIH(SEQ ID NO:24)的HVR-H1序列,AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID NO:25)的HVR-H2序列,和RHWPGGFDY(SEQ ID NO:12)的HVR-H3序列的重链；和包含RASQDVSTAVA(SEQ ID NO:26)的HVR-L1序列,SASFLYS(SEQ ID NO:27)的HVR-L2序列,和QQYLYHPAT(SEQID NO:28)的HVR-L3序列的轻链,或
(b)包含EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS DSWIHWVRQA PGKGLEWVAW ISPYGGSTYYADSVKGRFTI SADTSKNTAY LQMNSLRAED TAVYYCARRH WPGGFDYWGQ GTLVTVSS(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列的重链可变区和包含DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDVS TAVAWYQQKPGKAPKLLIYS ASFLYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YLYHPATFGQ GTKVEIKR(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的轻链可变区；和
(iii)治疗有效量的VEGF抑制剂,它是包含下述各项的抗体:
(a)包含GYTFTNYGMN(SEQ ID NO:35)的HVR-H1序列,WINTYTGEPTYAADFKR(SEQ ID NO:36)的HVR-H2序列,和YPHYYGSSHWYFDV(SEQ ID NO:37)的HVR-H3序列的重链；和包含SASQDISNYLN(SEQ ID NO:38)的HVR-L1序列,FTSSLHS(SEQ ID NO:39)的HVR-L2序列,和QQYSTVPWT(SEQ ID NO:40)的HVR-L3序列的轻链,或
(b)包含EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTYAADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS(SEQ IDNO:33)的氨基酸序列的重链可变区和包含DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDISNYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQGTKVEIKR.(SEQ ID NO:34)的氨基酸序列的轻链可变区。
26.权利要求25的方法,其中用约60mg考比替尼或其药学可接受盐；约840mg该PD-L1抑制剂；和约5mg每kg体重该VEGF抑制剂治疗该受试者。
27.一种用于治疗人受试者中的结肠直肠癌的试剂盒,该试剂盒包含MEK抑制剂,PD-1轴抑制剂,VEGF抑制剂和包含关于使用治疗有效量的该MEK抑制剂,治疗有效量的该PD-1轴抑制剂和治疗有效量的该VEGF抑制剂来治疗该受试者的用法说明书的包装插页。
28.权利要求27的试剂盒,其中该MEK抑制剂是考比替尼或其药学可接受盐,该PD-1轴抑制剂是PD-L1抑制剂阿特珠单抗,和该VEGF抑制剂是贝伐珠单抗。
29.一种结肠直肠癌疗法药物组合,其包含:
(i)剂量为约20mg至约100mg,约40mg至约80mg,或约80mg的MEK抑制剂；
(ii)剂量为约400mg至约1200mg,约600mg至约1000mg,约700mg至约900mg,或约840mg的PD-1轴抑制剂；和
(iii)剂量为约5mg/kg至约15mg/kg,约5mg/kg至约10mg/kg,约5mg/kg,约10mg/kg或约15mg/kg的VEGF抑制剂。
30.权利要求29的结肠直肠癌疗法药物组合,其中该MEK抑制剂是剂量为约60mg的考比替尼或其药学可接受盐,该PD-1轴抑制剂是剂量为约840mg的PD-LI抑制剂阿特珠单抗,且该VEGF抑制剂是剂量为约5mg每kg体重的贝伐珠单抗。
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