CN109601370B - 一种适于烟草新品系选育的梯级选择方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种适于烟草新品系选育的梯级选择方法，其包括第一梯级目标性状即抗病性状、第二梯级目标性状即烟株生长和形态性状、第三梯级目标性状即抗逆抗虫耐肥和经济性状和第四梯级目标性状即优质广适和稳定性好，根据4个梯级性状，结合杂种后代材料在各杂种世代的表现特点，对杂种后代材料依次进行梯级选择。采用本方法可大幅减轻育种人员的工作量，节省物力和财力，明显提高烟草杂交育种后代的选择效率和育种效率。

Description

一种适于烟草新品系选育的梯级选择方法

技术领域

本发明属于烟草育种技术领域，具体涉及一种适于烟草新品系选育的梯级选择方法。

背景技术

烟草，作为卷烟的主要原料，是中国的重要经济作物，烟草品种是烟叶生产的基础，因此，培育烟草新品种对烟叶生产具有重要意义。目前，培育烟草新品种的总体目标可以概括为“优质、多抗、适产、高效、广适”，其中每一项都对应着诸多具体的性状，涉及到对不同烟草病虫害的抗性、烟株生长性状、烟株形态性状、经济性状、外观品质、化学成分、物理特性、感官评吸质量、卷烟工业可用性、抗逆性、耐肥性、适应性、稳定性等诸多方面。

实现烟草育种目标的育种方法有***选育、杂交育种、杂种优势利用等，其中杂交育种方法一直以来都是主要方法。杂交育种的选育程序包括育种目标的制定、选择亲本配置杂种(即杂种F1代)、杂种自交形成杂种F2代分离群体，从杂种后代分离群体中选择符合目标的单株形成株系、株系鉴定并在优系中选择优株直到形成稳定品系(一般为F3-F5代)、品系比较、优异品系的多年多点鉴定、优良品系的全国区域试验和审定这几个环节。目前，对杂种后代群体的处理，育种单位的惯常做法是，先在正常地块对杂种后代分离世代群体(一般为F2-F5代)进行农艺性状(包括生长势、株型、株高、叶数、节距等性状)选择，直到性状稳定形成稳定品系后，再通过品系比较试验进行经济性状鉴定，最后再对通过经济性状鉴定筛选出来的优异品系进行抗病性状鉴定和品质性状鉴定，然后将筛选出来的优质抗病品系推荐参加国家区域试验。这种对杂种后代材料的选择方法至少存在以下三个方面的问题：一是抗病性鉴定世代过晚。一般是在杂种后代材料形成稳定的品系后甚至是在对稳定品系进行经济性状鉴定后，才进行抗病性鉴定。抗病性鉴定世代过晚，就会致使长期种植不明抗病性的材料，包袱沉重，最后那些不抗病的材料还避免不了被淘汰，浪费精力、物力和财力。二是忽视了烟株生长性状和形态性状的选择。长期的烟草育种实践表明，烟株生长性状和形态性状不仅与烟株各部位烟叶生长和成熟时所处的温热条件、雨水条件、通风透光状态密切相关，进而影响到新品系的适应性，而且还直接关系到烟叶的易调制性、经济性状和品质性状。遗憾的是，育种单位的技术人员在杂种后代的分离世代，常常是仅对生长势、株型、株高、叶数、节距等少数性状进行简单选择，而对于其它为数众多的烟株生长性状和形态性状则是在较晚世代的品系比较试验中或品系成型后进行观测，以作为新品系的植物学特征来对待，并没有把这些烟株生长性状和形态性状与育种材料的早期选择联系起来。三是包袱重、工作量大。目前，育种单位的技术人员由于没有在杂种后代分离世代的较早世代进行抗病性选择以及大多数烟株生长性状和形态性状的选择，而仅根据烟株生长势、株型、株高、叶数、节距等少数性状的表现在杂种后代分离世代群体(一般为F2-F5代)进行选择，一方面，会导致入选的材料数越来越多，所占用的土地面积也越来越大，工作量也会越来越大；另一方面，由于烟株生长势、株高、叶数、节距等烟草农艺性状属于多基因控制的数量性状遗传，则选择效率也势必低下。杂交育种时间漫长，从组配杂种到生产示范，一般要用9-12年，最长的要花15-16年时间，一旦最终入选的品系因抗病性能不好、经济效能低或者品质不良、适应性差而淘汰，则前功尽弃，10多年的努力就会付之东流。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种适于烟草新品系选育的梯级选择方法，能够明显提高烟草杂交育种后代的选择效率和育种效率。

本发明所述适于烟草新品系选育的梯级选择方法包括：

第一梯级目标性状选择：以杂种F1代自交所得F2代种子为起始材料进行抗病性状选择；所述抗病性状选自黑胫病抗性、青枯病抗性、根黑腐病抗性、根结线虫病抗性、野火病抗性、角斑病抗性、白粉病抗性、气候性斑点病抗性、赤星病抗性、普通花叶病毒病抗性、黄瓜花叶病毒病抗性和马铃薯Y病毒病抗性中的一种或多种；所述抗病性状选择的时长包含至少一个烟草生长季，每一烟草生长季均可鉴定至少一种抗病性状；

第二梯级目标性状选择：将第一梯级目标性状选择所得后代种子在烟草生长季节分单株播种育苗，待成苗后分单株将各单株幼苗在大田中种植成株行，进行烟株生长性状和烟株形态性状选择；所述烟株生长性状包括烟株起身快慢、大田生长势、腋芽生长势、団棵期、旺长期、现蕾期、中心花开放期、平顶期、底脚叶成熟期、上部叶成熟期、移栽至打顶天数、大田生育期天数和叶片成熟快慢，所述烟株形态性状包括烟株具有本类型烟草典型特征、株型、株高、茎秆粗细、总叶数、可采叶数、叶片分布均匀性、节间距、叶形、叶片大小、上部叶开片潜力、叶片厚薄、叶色、叶面平滑或皱缩程度、叶肉组织细致或粗糙程度、叶片柔软性、叶片主脉粗细、梗/叶比大小、叶片成熟均匀性、叶片耐熟性、茎叶角度、最上端可采叶着生点距中心花距离和烟杈多少；

第三梯级目标性状选择：将第二梯级目标性状选择所得单株的种子按株行混合成为品系，将各品系种子分成两份，在烟草生长季节分别播种育苗，其中一份种子的烟苗于成苗后移入大田用于繁种，另外一份种子的烟苗于成苗后移栽入大田中进行经济性状选择；所述经济性状包括单叶重、适产性、产值、均价、上等烟比例和上中等烟比例；

第四梯级目标性状选择：将第三梯级目标性状选择所得各品系进行多年多点试验，进而进行品质性状、适应性和稳定性选择；所述品质性状包括调制后烟叶外观质量、化学成分、物理特性、感官评吸质量、卷烟工业可用性，所述适应性包括新品系适应坏境范围和在一定环境范围内的适应程度，所述稳定性包括烟叶品质性状的稳定性和烟叶经济性状的稳定性。

进一步地，所述黑胫病抗性、所述青枯病抗性和所述根黑腐病抗性鉴定中均设置标准感病品种和标准抗病品种作为对照，以标准感病品种和标准抗病品种的抗性表现为参照，将鉴定材料的抗病等级分为免疫、高抗、抗、中抗、中感、感和高感6个级别，入选中抗、抗、高抗和免疫的鉴定材料均进入下一环节的性状选择。

进一步地，当第一梯级目标性状选择中抗病性状鉴定种类多于育种目标所要求种类时，每一烟草生长季所需种子和所需烟苗均需留有备份；当烟苗在鉴定时无相应抗病性状时，则使用备份烟苗进行移栽以继续鉴定其他抗病性状；当烟株因病圃中的病菌侵染而死亡时，则使用当季备份种子继续在下一个生长季节进行其他抗病性状的鉴定。

进一步地，当育种目标所要求种类为全部十二种抗病性状时，第一梯级目标性状选择按照以下步骤进行：

步骤a：将杂种F1代自交所得F2代种子播种于温室苗床，在苗期接种鉴定野火病抗性，之后将筛选出的抗野火病幼苗或备份烟苗移栽到黑胫病病圃中，依次鉴定黑胫病抗性、普通花叶病抗性、气候性斑点病抗性、根结线虫抗性和赤星病抗性鉴定，最后入选的烟株在开花时自交得到杂种F3代种子，并按单株收种；

步骤b：将F3代种子播种于温室苗床，在苗期鉴定角斑病抗性，之后将筛选出的抗角斑病幼苗或备份烟苗移栽到青枯病病圃中，依次鉴定青枯病抗性、黄瓜花叶病抗性、气候性斑点病抗性、根结线虫抗性和赤星病抗性，最后入选的烟株在开花时自交得到杂种F4代种子，并按单株收种；

步骤c：将F4代种子播种于温室苗床，在苗期鉴定白粉病抗性，之后将筛选出的抗白粉病幼苗或备份烟苗移栽到根黑腐病病圃中，依次鉴定根黑腐病抗性、马铃薯Y病抗性、气候性斑点病抗性，最后入选的烟株在开花时自交得到杂种F5代种子，并按单株收种。

进一步地，当第一梯级目标性状选择中育种目标所要求种类为全部十二种抗病性状时，第一梯级目标性状选择中，白粉病抗性、野火病抗性和角斑病抗性采用在苗床上对苗龄8周左右的幼苗喷雾接种鉴定，黑胫病抗性、青枯病抗性和根黑腐病抗性采用病圃鉴定，普通花叶病毒病抗性、黄瓜花叶病毒病抗性和马铃薯Y病毒病抗性采用幼嫩叶片摩擦接毒法鉴定，气候性斑点病抗性采用田间调查自然发病情况方法鉴定，根结线虫抗性和赤星病抗性采用离体叶片法鉴定。

进一步地，直接对各株系的单株进行抗病性状选择。

进一步地，第二梯级目标性状选择中的具有本类型烟草典型特征提前至步骤a中；第二梯级目标性状选择中的叶面平滑或皱缩程度、叶肉组织细致或粗糙程度和叶片主脉粗细和梗/叶比大小性状提前至步骤b或步骤c中；第二梯级目标性状选择中的株型、茎秆粗细、叶片分布均匀性、叶形、叶色、茎叶角度、最上端可采叶着生点距中心花距离、烟株起身快慢、腋芽生长势和烟杈多少性状提前至步骤c中。

进一步地，所述第三梯级目标性状选择还包括进行抗逆性状、抗虫性状和耐肥性状的选择，所述抗逆性状包括抗倒伏性、抗涝性、抗旱性和抗寒性，所述抗虫性包括抗烟蚜性、抗烟粉虱性和抗烟青虫性。

进一步地，所述杂种F1代可来源于单交、三交、双交或复合杂交。

本发明的有益效果：

(1)本发明所述适于烟草新品系选育的梯级选择方法依据各具体育种目标性状的遗传特点及其实现的难易程度，将其分解为依次实现的4个梯级性状，首先对杂种后代材料进行第一梯级目标性状即抗病性状的选择，在第一梯级目标性状选择的过程中，利用病害胁迫的选择压力，能够大幅减少杂种后代中后期世代的入选材料数，接着对入选的杂种后代材料进行第二梯级目标性状即烟株生长性状和形态性状的选择，而烟株生长性状和形态性状不仅与烟株各部位烟叶生长和成熟时所处的温热条件、雨水条件、通风透光状态密切相关，进而影响到新品系的适应性，而且还直接关系到烟叶的易调制性、经济性状和品质性状，通过烟株生长性状和形态性状的选择，又可以淘汰掉大量的明显不具有育成品种前景的材料，进一步大幅减少了杂种后代中后期世代的入选材料数。因此，本发明方法可大幅减轻育种人员中后期世代的工作量，并大幅减少了育种材料所占用的试验土地面积，大幅节省了人力、物力和财力。

(2)本发明所述适于烟草新品系选育的梯级选择方法依据各具体育种目标性状的遗传特点及其实现的难易程度，将其分解为依次实现的4个梯级性状，结合烟草杂交育种中杂种后代材料在各杂种世代的表现特点，对杂种后代材料依次进行梯级选择，通过第一梯级目标性状的选择能够获得一批抗不同病害的材料，通过第二梯级目标性状的选择能够获得一批烟株生长适宜、株型理想的具有育成品种潜力的抗病材料，通过第三梯级目标性状的选择能够获得一批抗逆、抗虫、耐肥或适产的经济性状突出的且生育期适宜、株型理想的抗病品系，通过第四梯级目标性状的选择能够获得优质、广适且稳定性好的综合农艺性状和经济性状突出的明显具有育成品种前景的抗性品系。因此，本发明方法可确保每一阶段的选择都能实现育种目标中的部分指标，以逐步实现整个育种目标，且每个选择阶段入选的材料均能作为育种中间材料使用，保证多年心血不至于白费，能够明显提高烟草杂交育种后代的选择效率和育种效率。

具体实施方式

通过以下实施例对本发明作进一步的说明，它们不构成对本发明的限定，仅作举例而已。以下实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法。

本发明所述适于烟草新品系选育的梯级选择方法采用常规杂交育种方法培育新品系，采用以下原则对杂种后代群体进行选择：

(1)对于比较容易实现的目标性状尽量安排在杂种后代的较早世代选择，而对于实现难度较大的目标性状则安排在杂种后代的较晚世代选择；(2)对于由单基因、少基因或主效基因控制的目标性状即遗传力较强的目标性状如抗病性状等尽量安排在杂种后代的较早世代选择，而对于微效多基因控制的目标性状即遗传力较弱的目标性状如品质性状等安排在杂种后代的较晚世代选择；(3)对于只需要田间简单测量和观察而不必经过调制就能检测的目标性状如烟株生长性状和形态性状尽量安排在杂种后代的较早世代选择，而对于需要一定规模群体和经过调制才能检测的目标性状如经济性状安排在杂种后代的较晚世代选择；(4)对于通过单点试验就能鉴定评价的目标性状尽量安排在杂种后代的较早世代选择，而对于必须通过多点试验才能鉴定评价的目标性状安排在后期进行选择。

根据上述原则，将育种目标涉及到的具体性状，依据各具体性状的遗传特点及其实现的难易程度进行梯级化，即分解成下列先后实现顺序的4个梯级性状：

第一梯级目标性状：主要是抗病性状，包括根茎类病害抗性、叶面病害抗性和病毒病抗性，所述根茎类病害具体包括黑胫病、青枯病、根结线虫病、根黑腐病，所述叶面病害具体包括赤星病、白粉病、野火病、角斑病、气候性斑点病，所述病毒病具体包括普通花叶病毒(TMV)病、黄瓜花叶病毒(CMV)病、马铃薯Y病毒(PVY)病。

第二梯级目标性状：包括烟株生长性状和烟株形态性状，所述烟株生长性状具体包括烟株起身快慢、大田生长势、腋芽生长势、団棵期、旺长期、现蕾期、中心花开放期、平顶期、底脚叶成熟期、上部叶成熟期、移栽至打顶天数、大田生育期天数、叶片成熟快慢，所述烟株形态性状具体包括烟株具有本类型烟草的典型特征、株型、株高、茎秆粗细、总叶数、可采叶数、叶片分布均匀性、节间距、叶形、叶片大小、上部叶开片潜力、叶片厚薄、叶色、叶面平滑或皱缩程度、叶肉组织细致或粗糙程度、叶片柔软性、叶片主脉粗细、梗/叶比大小、叶片成熟均匀性、叶片耐熟性、茎叶角度、最上端可采叶着生点距中心花距离、烟杈多少。

第三梯级目标性状：包括抗逆性、抗虫性、耐肥性、经济性状。考虑到育种目标并没有要求品种具有抗逆性、抗虫性和耐肥性，因此，在本育种方案中，第三梯级目标性状主要指经济性状。所述经济性状具体包括单叶重、适产性、产值、均价、上等烟比例、上中等烟比例。

第四梯级目标性状：包括品质性状、适应性、稳定性，所述品质性状具体包括调制后烟叶外观质量、化学成分、物理特性、感官评吸质量、卷烟工业可用性，所述适应性具体包括新品系适应坏境范围和在一定环境范围内的适应程度，所述稳定性具体包括烟叶品质性状的稳定性和烟叶经济性状的稳定性。

根据上述4个梯级的具体育种目标性状，结合烟草杂交育种中杂种后代材料在各杂种世代的表现特点，将烟草育种具体目标性状分为4个实现阶段对杂种F2代群体及以后世代的杂种后代材料进行选择，即实行梯级选择。

实施例1：烤烟新品系HB1604的选育

1、制定育种目标：

针对湖北烟区生态和生产条件，以克服烤烟生产上使用的K326易感TMV为重点，选育品质优良、兼抗黑胫病、青枯病和普通花叶病毒病(TMV)、经济性状和稳产性好，适宜湖北烟区大面积种植的烤烟新品种。

2、选择亲本：

根据育种目标选择如下2个亲本参与杂交，其特征特性如下：

优质亲本K326：引自美国优质品种，该品种品质优良，植株筒形,打顶株高99.7cm,有效叶数23片,节距4.3cm,茎围8cm,腰叶长椭圆形,叶面较皱，大田生育期110天，耐肥易烤，亩产150千克左右，中抗黑胫病、青枯病和根结线虫，易感普通花叶病、赤星病和气候斑点病。

抗性亲本Coker176：引自美国品种，烟叶品质一般，株式塔型，打顶株高

102.7cm，有效叶数20片，节距6.0cm，茎围10cm，腰叶长椭圆形，叶面较皱。大田生育期121天。烟叶耐熟易烘烤。对TMV免疫，中抗黑胫病、青枯病和气候斑点病，感CMV和PVY。

3、配制杂交组合：

2012年2月，于湖北省利川市湖北省烟草科学研究院试验基地，以优质品种K326为母本，以抗性种质Coker176为父本，配制杂交组合K326×Coker176，得到单交组合F1代种子。同年冬季，在海南省三亚市湖北省烟草科学研究院南繁基地，将单交组合K326×Coker176的F1代种子种植20株，开花时，选择长势强单株2-3株自交，得到单交组合F2代种子，将各株种子混合，作为下一季选择用种。

4、梯级选择：

(1)第一梯级目标性状选择

由于本方案育种目标只要求培育出的新品系具有部分病害抗性，即只要抗黑胫病、青枯病和TMV即可，因此，为了节省时间和工作量，根据育种目标要求以及不同病害抗性性状的重要程度和遗传特点，安排各个病害抗性鉴定的顺序。

2013年3月，将单交组合K326×Coker176的F2代种子在湖北省烟草科学研究院试验基地温室苗床播种育苗500株，成苗后移栽到黑胫病病圃中鉴定黑胫病抗性，同时种植感病对照品种红花大金元和抗病对照品种云烟317，于开花期前调查发病情况。为了有利于抗病基因的继续充分重组，宜适当放宽选择强度，以感病品种和抗病品种的抗性表现为参照，将杂种后代烟株的抗病等级粗分为免疫、高抗、抗、中抗、中感、感和高感6个级别，选出中抗到高抗或免疫烟株共308株。同时，在移栽4周后，用TMV病毒汁液采用幼嫩叶片摩擦接毒法鉴定普通花叶病毒病抗性，5周后观察病变情况，选出抗普通花叶病毒病烟株324株。入选同时抗黑胫病和普通花叶病毒病烟株127株。对入选的127株烟株于开花时自交得到杂种F3代种子，并按单株收种。

2014年2月，将127株F3代种子在试验基地温室苗床分单株播种育苗，每个单株育苗30株。成苗后移栽到青枯病病圃中鉴定青枯病抗性，同时种植感病对照品种长勃黄和抗病对照品种DB101，于开花期前调查发病情况。以感病品种和抗病品种的抗性表现为参照，将F3代烟株的抗病等级粗分为免疫、高抗、抗、中抗、中感、感和高感6个级别，选出中抗到高抗或免疫烟株共1084株。同时，在移栽4周后，再次用TMV病毒汁液采用幼嫩叶片摩擦接毒法鉴定普通花叶病毒病抗性，5周后观察病变情况，选出抗普通花叶病毒病烟株2951株。入选同时抗青枯病和普通花叶病毒病的烟株共672株，对入选的672株烟株于开花时自交得到杂种F4代种子，并按单株收种。

(2)第二梯级目标性状选择

2015年2月，将672株F4代种子在试验基地温室苗床分单株播种育苗，每个单株每份烟苗15株。待成苗后将672个单株的幼苗在大田中种植成672个株行(即株系)，全面鉴定烟株生长性状和形态性状，筛选出烟株生长性状和形态性状适宜的株系37个，然后在每个入选株系内选择烟株生长性状和形态性状更为理想的单株2-3株，于开花时自交，按株系混收入选单株种子，成为品系；

(3)第三梯级目标性状选择

2016年3月，将37个品系的种子分成2份，在试验基地温室苗床分别播种育苗，其中1份种子的烟苗于成苗后移入大田用于繁种，另1份种子的烟苗于成苗后移栽入大田中，3次重复，以生产上普遍种植品种云烟87为对照，进行各品系的经济性状鉴定比较试验，结果表明，有5个品系产量适宜、其它经济性状指标综合评价超过对照品种云烟87，分别给予代号HB1601、HB1602、HB1603、HB1604和HB1605，并在繁种田中对相应品系自交留种。

(4)第四梯级目标性状选择

2017年和2018年，分别在湖北省宣恩、利川、巴东、兴山、竹山和保康，设置新品系HB1601、HB1602、HB1603、HB1604和HB1605的比较试验，以生产上普遍种植品种云烟87为经济性状和适应性对照，以优质品种K326为烟叶品质对照，进行各品系的品质性状、适应性和稳定性鉴定，每年每点取烤后烟样进行外观质量、化学成分、物理特性和感官评吸质量鉴定，并统计分析各品系的适应性以及烟叶品质性状和经济性状的稳定性。通过综合评价，筛选出品质性状突出、适应性广和稳定性好的品系HB1604，拟于2019年提升参加国家烟草品种区域试验。

4、育成新品系HB1604的特征特性

新品系HB1604植株塔型,打顶株高112.9cm,有效叶数22片,节距5.7cm,茎围10.2cm,腰叶长椭圆形,叶面较皱，叶肉细致，大田生育期114天；烟叶耐熟易烤，亩产量158.2千克，产量适宜，均价、上等烟比例、亩产值均高于对照云烟87，经济性状突出；烤后烟叶多为桔黄色，厚薄适中，油分多，光泽强，组织疏松；各种化学成分含量适宜，比例协调，评吸质量档次为中偏上；高抗普通花叶病毒病，抗黑胫病和青枯病。

实施例2烤烟新品系HB1618的选育

1、制定育种目标：

针对湖北烟区生态和生产条件，以克服烤烟生产上使用的云烟87易感青枯病和TMV为重点，选育品质优良、兼抗黑胫病、青枯病和普通花叶病毒病(TMV)、经济性状和稳产性好，适宜湖北烟区大面积种植的烤烟新品种。

2、选择亲本：

根据育种目标选择如下3个亲本参与杂交，其特征特性如下：

优质亲本Coker371Gold：引自美国优质品种，该品种品质优良，植株塔型,打顶株高101.7cm,有效叶数17片,节距5.6cm,茎围9cm,腰叶长椭圆形,叶面较皱，移栽至中心花开54天,全生育期178天，烟叶易烤，产量偏低，抗黑胫病,感青枯病，易感根结线虫、烟草普通花叶病和赤星病。

适应性亲本云烟87：由中国烟草育种研究(南方)中心选育而成，为生产上普遍栽培使用品种，适应性广，烟叶品质中等偏上，株式筒型，打顶株高114厘米，大田着生叶片数26片，有效叶数19片；腰叶长椭圆形，叶面皱，叶色深绿，花枝少，节距6.0cm，叶片上下分布均匀；大田生育期113天，适产，烟叶耐熟易烤，经济性状突出，中抗黑胫病和根结线虫，感青枯病、赤星病、普通花叶病毒病。

抗性亲本蓝玉1号：由福建省烟草公司选育而成，烟叶品质一般，株式筒形，打顶株高94.8cm，茎围9.78cm，节距4.36cm，有效叶数20片，腰叶为长椭圆，叶色浅绿，大田生育期121天。烟叶较耐熟、易烘烤。耐涝耐寒性强，高抗TMV或免疫，抗黑胫病和青枯病，感CMV、PVY和气候斑点病。

3、配制杂交组合：

2010年，于湖北省利川市湖北省烟草科学研究院试验基地，以优质品种Coker371Gold为母本，以抗性种质蓝玉1号为父本，配制杂交组合Coker371Gold×蓝玉1号。同年冬季，在海南省三亚市湖北省烟草科学研究院南繁基地，以杂交组合Coker371Gold×蓝玉1号为母本，以广适品种云烟87为父本，配制三交组合(Coker371Gold×蓝玉1号)×云烟87，得到三交组合F1代种子。

2011年，将三交组合(Coker371Gold×蓝玉1号)×云烟87播种育苗，成苗后在湖北省利川市湖北省烟草科学研究院试验基地种植300株，开花时，选择2/3的长势好的烟株套袋自交，得到三交组合F2代种子，每株取一个硕果脱粒混合，作为下一季选择用种。

4、梯级选择：

(1)第一梯级目标性状选择

尽管本方案育种目标只要求培育出的新品系具有部分病害抗性，即只要抗黑胫病、青枯病和普通花叶病，但选育时通常会在育种目标病害抗性的基础上尽量兼顾其它常见病害的抗性，因此，为了避免因非育种目标病害致使烟苗或烟株全部死亡而影响其他病害抗性的鉴定，本方案在每个病害抗性鉴定季节，均将每份杂种后代材料培育两份烟苗，同时，根据育种目标要求以及不同病害抗性性状的重要程度和遗传特点，安排各个病害抗性鉴定的顺序。

2012年2月，将三交组合(Coker371Gold×蓝玉1号)×云烟87的F2代种子在湖北省烟草科学研究院试验基地温室苗床播种育苗两份，每份500株，其中一份烟苗用于苗期接种鉴定，另一份烟苗备用。待苗龄8周左右将其中一份烟苗接种鉴定野火病抗性，采用浓度为1×10⁶cfu/mL的野火病菌液对幼苗喷雾接种，10天后调查叶片病斑面积，根据调查结果筛选出抗野火病的幼苗351株。将筛选出的351株抗野火病的幼苗移栽到黑胫病病圃中鉴定黑胫病抗性，同时种植感病对照品种红花大金元和抗病对照品种云烟317，于开花期前调查发病情况。为了有利于抗病基因的继续充分重组，宜适当放宽选择强度，以感病品种和抗病品种的抗性表现为参照，将杂种后代烟株的抗病等级粗分为免疫、高抗、抗、中抗、中感、感和高感6个级别，选出中抗到高抗和免疫烟株共289株。同时，在移栽4周后，用普通花叶病毒汁液采用幼嫩叶片摩擦接毒法鉴定全部烟株的普通花叶病抗性，5周后观察病变情况，选出抗普通花叶病毒病烟株183株。田间调查气候性斑点病抗性，选出未发病烟株317株。对抗黑胫病、普通花叶病毒病和气候性斑点病的烟株，利用离体叶片法鉴定根结线虫和赤星病抗性。利用农杆菌LBA4404/PVX:pND108-NIB菌液或农杆菌GV3101/PVX:pND108-NIB菌液浸染离体叶片，1周左右观察烟草叶片上是否表现出过敏性坏死反应(斑点)，据此判定根结线虫抗性，筛选出抗根结线虫烟株167株。采用浓度为1×10⁶cfu/mL的赤星病菌液对离体叶片喷雾接种，10天后调查叶片病斑面积，未发现抗赤星病烟株。通过病害抗性鉴定，筛选出兼抗野火病、黑胫病、普通花叶病、气候斑点病和根结线虫的烟株共154株，根据烟株田间表现，淘汰不具有烤烟典型特征的烟株21株，对入选的133株烟株于开花时自交得到杂种F3代种子，并按单株收种。

2013年3月，将133株F3代种子在试验基地温室苗床分单株播种育苗两份，每个单株每份烟苗50株。待苗龄8周左右将其中一份烟苗接种鉴定角斑病抗性，采用浓度为1×10⁶cfu/mL的角斑病菌液对幼苗喷雾接种，10天后调查叶片病斑面积，根据调查结果筛选出抗角斑病的幼苗1116株。将筛选出的1116株抗角斑病的幼苗移栽到青枯病病圃中鉴定青枯病抗性，同时种植感病对照品种长勃黄和抗病对照品种DB101，于开花期前调查发病情况。以感病品种和抗病品种的抗性表现为参照，将F3代烟株的抗病等级粗分为免疫、高抗、抗、中抗、中感、感和高感6个级别，选出中抗到高抗或免疫烟株共957株。同时，在移栽4周后，用CMV病毒汁液采用幼嫩叶片摩擦接毒法鉴定全部烟株的黄瓜花叶病毒病抗性，5周后观察病变情况，未发现抗黄瓜花叶病毒病烟株。田间调查气候性斑点病抗性，选出未发病烟株514株。对抗青枯病和气候性斑点病的烟株，利用离体叶片法再次鉴定根结线虫和赤星病抗性以确保离体鉴定根结线虫和赤星病抗性鉴定结果的准确性，筛选出抗根结线虫烟株718株，但未发现抗赤星病烟株。通过病害抗性鉴定，筛选出兼抗青枯病、气候斑点病和根结线虫的烟株共581株，根据烟株叶片的叶面平滑或皱缩程度、叶肉组织细致或粗糙程度、叶片主脉粗细和梗/叶比大小性状的田间表现，淘汰这些性状表现不理想的烟株194株，对入选的387株烟株于开花时自交得到杂种F4代种子，并按单株收种。

2014年2月，将387株F4代种子在试验基地温室苗床分单株播种育苗两份，每个单株每份烟苗20株。待苗龄8周左右将其中一份烟苗接种鉴定白粉病抗性，采用浓度为1×10⁶cfu/mL的白粉病菌液对幼苗喷雾接种，10天后调查叶片发病面积，未发现抗白粉病烟株。将另一份备用烟苗移栽到根黑腐病病圃中鉴定根黑腐病抗性，同时种植感病对照品种红花大金元和抗病对照品种TI448A，于开花期前调查发病情况。以感病品种和抗病品种的抗性表现为参照，将F4代烟株的抗病等级分为免疫、高抗、抗、中抗、中感、感和高感6个级别，选出中抗到高抗或免疫烟株共2988株。同时，在移栽4周后，用PVY病毒汁液采用幼嫩叶片摩擦接毒法鉴定全部烟株的马铃薯Y病毒病抗性，5周后观察病变情况，未发现抗马铃薯Y病毒病烟株。田间调查气候性斑点病抗性，选出未发病烟株1548株。通过病害抗性鉴定，筛选出兼抗根黑腐病和气候斑点病烟株共1037株，根据烟株株型、茎秆粗细、叶片分布均匀性、叶形、叶色、茎叶角度、最上端可采叶着生点距中心花距离、烟株起身快慢、腋芽生长势和烟杈多少性状的田间表现，淘汰这些性状表现不理想的烟株521株，对入选的516株烟株于开花时自交得到杂种F5代种子，并按单株收种。

(2)第二梯级目标性状选择

2015年2月，将516株F5代种子在试验基地温室苗床分单株播种育苗，每个单株每份烟苗15株。待成苗后将516个单株的幼苗在大田中种植成516个株行(即株系)，全面鉴定烟株生长性状和形态性状，筛选出烟株生长性状和形态性状适宜的株系52个，然后在每个入选株系内选择烟株生长性状和形态性状更为理想的单株2-3株，于开花时自交，按株系混收入选单株种子，成为品系。

(3)第三梯级目标性状选择

2016年3月，将52个品系的种子分成2份，在试验基地温室苗床分别播种育苗，其中1份种子的烟苗于成苗后移入大田用于繁种，另1份种子的烟苗于成苗后移栽入大田中，3次重复，以生产上普遍种植品种云烟87为对照，进行各品系的经济性状鉴定比较试验，结果表明，有8个品系产量适宜、其它经济性状指标综合评价超过对照品种云烟87，分别给予代号HB1606、HB1607、HB1608、HB1609、HB1610、HB1611、HB1618和HB1619，并在繁种田中对相应品系自交留种。

(4)第四梯级目标性状选择

2017年和2018年，分别在湖北省宣恩、利川、巴东、兴山、竹山和保康，设置新品系HB1606、HB1607、HB1608、HB1609、HB1610、HB1611、HB1618和HB1619的比较试验，以生产上普遍种植品种云烟87为经济性状和适应性对照，以优质品种K326为烟叶品质对照，进行各品系的品质性状、适应性和稳定性鉴定，每年每点取烤后烟样进行外观质量、化学成分、物理特性和感官评吸质量鉴定，并统计分析各品系的适应性以及烟叶品质性状和经济性状的稳定性。通过综合评价，筛选出品质性状突出、适应性广和稳定性好的品系HB1607，拟于2019年提升参加国家烟草品种区域试验。

5、育成新品系HB1618的特征特性

新品系HB1607植株筒形,打顶株高115.7cm,有效叶数20片,节距5.8cm,茎围9.2cm,腰叶长椭圆形,叶面较皱，叶肉细致，大田生育期118天；烟叶耐熟易烤，亩产量165.2千克，产量适宜，均价、上等烟比例、亩产值均高于对照云烟87，经济性状突出；烤后烟叶多为桔黄色，厚薄适中，油分多，光泽强，组织疏松；各种化学成分含量适宜，比例协调，评吸质量档次为中偏上；高抗普通花叶病毒病，抗黑胫病、青枯病和根黑腐病，中抗根结线虫、气候性斑点病、野火病和角斑病，感赤星病、白粉病、黄瓜花叶病毒病和马铃薯Y病毒病。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。

Claims (6)

1.一种适于烟草新品系选育的梯级选择方法，其特征在于：包括：

第一梯级目标性状选择：以杂种F1代自交所得F2代种子为起始材料进行抗病性状选择；所述抗病性状选自黑胫病抗性、青枯病抗性、根黑腐病抗性、根结线虫病抗性、野火病抗性、角斑病抗性、白粉病抗性、气候性斑点病抗性、赤星病抗性、普通花叶病毒病抗性、黄瓜花叶病毒病抗性和马铃薯Y病毒病抗性中的至少两种；所述抗病性状选择的时间跨度包含至少一个烟草生长季，每一烟草生长季均可鉴定至少一种抗病性状；

第二梯级目标性状选择：将第一梯级目标性状选择所得后代种子在烟草生长季节分单株播种育苗，待成苗后分单株将各单株幼苗在大田中种植成株行，进行烟株生长性状和烟株形态性状选择；所述烟株生长性状包括烟株起身快慢、大田生长势、腋芽生长势、団棵期、旺长期、现蕾期、中心花开放期、平顶期、底脚叶成熟期、上部叶成熟期、移栽至打顶天数、大田生育期天数和叶片成熟快慢，所述烟株形态性状包括烟株具有本类型烟草典型特征、株型、株高、茎秆粗细、总叶数、可采叶数、叶片分布均匀性、节间距、叶形、叶片大小、上部叶开片潜力、叶片厚薄、叶色、叶面平滑或皱缩程度、叶肉组织细致或粗糙程度、叶片柔软性、叶片主脉粗细、梗/叶比大小、叶片成熟均匀性、叶片耐熟性、茎叶角度、最上端可采叶着生点距中心花距离和烟杈多少；

第三梯级目标性状选择：将第二梯级目标性状选择所得单株的种子按株行混合成为品系，将各品系种子分成两份，在烟草生长季节分别播种育苗，其中一份种子的烟苗于成苗后移入大田用于繁种，另外一份种子的烟苗于成苗后移栽入大田中进行经济性状选择；所述经济性状包括单叶重、适产性、产值、均价、上等烟比例和上中等烟比例；

第四梯级目标性状选择：将第三梯级目标性状选择所得各品系进行多年多点试验，进而进行品质性状、适应性和稳定性选择；所述品质性状包括调制后烟叶外观质量、化学成分、物理特性、感官评吸质量、卷烟工业可用性，所述适应性包括新品系适应坏境范围和在一定环境范围内的适应程度，所述稳定性包括烟叶品质性状的稳定性和烟叶经济性状的稳定性；

所述黑胫病抗性、所述青枯病抗性和所述根黑腐病抗性鉴定中均设置标准感病品种和标准抗病品种作为对照，以标准感病品种和标准抗病品种的抗性表现为参照，将鉴定材料的抗病等级分为免疫、高抗、抗、中抗、中感、感和高感6个级别，入选中抗、抗、高抗和免疫的鉴定材料均进入下一环节的性状选择；

当第一梯级目标性状选择中抗病性状鉴定种类多于育种目标所要求种类时，每一烟草生长季所需种子和所需烟苗均需留有备份；当烟苗在鉴定中死亡时，则使用备份烟苗进行移栽以继续鉴定其他抗病性状；当烟株在鉴定中死亡时，则使用当季备份种子继续在下一个生长季节进行其他抗病性状的鉴定。

2.根据权利要求1所述的适于烟草新品系选育的梯级选择方法，其特征在于：当第一梯级目标性状选择中抗病性状鉴定种类为全部十二种抗病性状时，第一梯级目标性状选择按照以下步骤进行：

步骤a：将杂种F1代自交所得F2代种子播种于温室苗床，在苗期接种鉴定野火病抗性，之后将筛选出的抗野火病幼苗或备份烟苗移栽到黑胫病病圃中，依次鉴定黑胫病抗性、普通花叶病抗性、气候性斑点病抗性、根结线虫抗性和赤星病抗性鉴定，最后入选的烟株在开花时自交得到杂种F3代种子，并按单株收种；

步骤b：将F3代种子播种于温室苗床，在苗期鉴定角斑病抗性，之后将筛选出的抗角斑病幼苗或备份烟苗移栽到青枯病病圃中，依次鉴定青枯病抗性、黄瓜花叶病抗性、气候性斑点病抗性、根结线虫抗性和赤星病抗性，最后入选的烟株在开花时自交得到杂种F4代种子，并按单株收种；

步骤c：将F4代种子播种于温室苗床，在苗期鉴定白粉病抗性，之后将筛选出的抗白粉病幼苗或备份烟苗移栽到根黑腐病病圃中，依次鉴定根黑腐病抗性、马铃薯Y病抗性、气候性斑点病抗性，最后入选的烟株在开花时自交得到杂种F5代种子，并按单株收种；

当第一梯级目标性状选择中育种目标所要求种类为全部十二种抗病性状时，第一梯级目标性状选择中，白粉病抗性、野火病抗性和角斑病抗性采用在苗床上对苗龄8周左右的幼苗喷雾接种鉴定，黑胫病抗性、青枯病抗性和根黑腐病抗性采用病圃鉴定，普通花叶病毒病抗性、黄瓜花叶病毒病抗性和马铃薯Y病毒病抗性采用幼嫩叶片摩擦接毒法鉴定，气候性斑点病抗性采用田间调查自然发病情况方法鉴定，根结线虫抗性和赤星病抗性采用离体叶片法鉴定。

3.根据权利要求2所述的适于烟草新品系选育的梯级选择方法，其特征在于：直接对各株系的单株进行抗病性状选择。

4.根据权利要求3所述的适于烟草新品系选育的梯级选择方法，其特征在于：第二梯级目标性状选择中的具有本类型烟草典型特征提前至步骤a中；第二梯级目标性状选择中的叶面平滑或皱缩程度、叶肉组织细致或粗糙程度和叶片主脉粗细和梗/叶比大小性状提前至步骤b或步骤c中；第二梯级目标性状选择中的株型、茎秆粗细、叶片分布均匀性、叶形、叶色、茎叶角度、最上端可采叶着生点距中心花距离、烟株起身快慢、腋芽生长势和烟杈多少性状提前至步骤c中。

5.根据权利要求4所述的适于烟草新品系选育的梯级选择方法，其特征在于：所述第三梯级目标性状选择还包括进行抗逆性状、抗虫性状和耐肥性状的选择，所述抗逆性状包括抗倒伏性、抗涝性、抗旱性和抗寒性，所述抗虫性包括抗烟蚜性、抗烟粉虱性和抗烟青虫性。

6.根据权利要求4或5所述的适于烟草新品系选育的梯级选择方法，其特征在于：所述杂种F1代可来源于单交、三交、双交或复合杂交。