CN109593666A - 一种复合微生态制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种复合微生态制剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种复合微生态制剂及其制备方法和应用，属于微生态制剂技术领域。本发明的复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌种接入微生物液体培养基中，于32～37℃通气发酵培养至形成芽孢，然后接入酿酒酵母菌菌种在28～32℃通气发酵，待酿酒酵母菌处于稳定期时，同时接入植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种在30～37℃密闭静置发酵，待植物乳杆菌和屎肠球菌同时处于稳定期时，停止发酵，即得。本发明的复合微生态制剂的制备方法，多菌种分段发酵利用不同益生菌利用的营养组分不同对营养底物进行充分利用，节省原料和能源；并且在发酵产物中含有多种益生菌和丰富的代谢产物，各菌种比例天然形成，临床效果更好。

Description

一种复合微生态制剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及一种复合微生态制剂及其制备方法和应用，属于微生态制剂技术领域。
背景技术
微生态制剂作为一类畜禽饲料添加剂能产生多种消化酶、有机酸、维生素等，具有改善动物肠道菌群、提高肠道消化吸收和免疫功能等作用。常见复合微生态制剂的制备方法主要有两种：一种为固态发酵，将多种益生菌种如枯草芽孢杆菌、酵母菌等混合，接种于固体培养基进行发酵，发酵产物中含有多种益生菌及丰富的代谢产物，但是在发酵过程中极易受到杂菌的污染而导致发酵失败。第二种是将单菌种进行液态发酵，发酵完成后将不同种类的发酵液按一定的比例配合，制备复合微生态制剂，其缺点是发酵底物不能被有益菌充分利用，容易造成二次发酵，出现包装瓶胀裂等情况；同时，各菌种的比例为人为配制，难以完全复合微生物的自然生长规律。此外，以不同益生菌菌粉按比例复合而成微生态制剂也是市场上常见的复合微生态制剂；以益生菌粉进行复合时，益生菌的有益代谢产物在菌粉制备过程中被破坏，同时，某些益生菌如乳酸菌、酵母菌在干燥过程中容易死亡，制备的菌粉中有效活菌数较低，最终导致制剂作用效果较差。
发明内容
本发明的目的是提供一种复合微生态制剂的制备方法，制备得到的复合微生态制剂含有多种益生菌和丰富的代谢产物，各菌种比例天然形成，临床效果更好。
本发明还提供了一种采用上述制备方法得到的复合微生态制剂及其应用。
为了实现以上目的，本发明的用于复合微生态制剂的制备方法所采用的技术方案是：
一种复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌种接入微生物液体培养基中，于32～37℃通气发酵培养至形成芽孢，然后接入酿酒酵母菌菌种在28～32℃通气发酵，待酿酒酵母菌处于稳定期时，同时接入植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种在30～37℃密闭静置发酵，待植物乳杆菌和屎肠球菌同时处于稳定期时，停止发酵，即得。
本发明的复合微生态制剂所选用的菌种有以下特性：
枯草芽孢杆菌：属需氧型益生菌，能在有氧的条件下迅速繁殖，进入动物肠道后能快速消耗环境中的氧气造成厌氧环境，胃肠道有益厌氧菌如乳酸菌、双歧杆菌创造良好的生长环境，从而维持乳酸菌、双歧杆菌等肠道菌群的优势地位；发酵过程中产生各种酶类，如蛋白酶、淀粉酶，通过给动物补充外源性消化酶，提高动物的消化功能，进而提高饲料利用率；代谢产物如枯草菌素、杆菌肽对病原微生物有抑制作用，有利于维持肠道菌群平衡；能够减少氨气的产生，改善畜禽生长的环境；对霉菌毒素具有一定的降解作用，能够减轻因饲料发霉给动物机体造成的损害。
酿酒酵母菌：兼性厌氧菌，在有氧的条件下能够迅速繁殖，消耗肠道中的氧气，发挥生物夺氧作用，有助于肠道厌氧环境的形成，同时产生大量的优质菌体蛋白供机体利用；在厌氧条件下能具有发酵作用，产生多种代谢产物如消化酶、氨基酸、维生素等，为机体提供优质的营养。酿酒酵母菌细胞壁中的葡聚糖和甘露聚糖等成分，是良好的免疫刺激物，能够提高动物体的免疫功能，同时还能结合霉菌毒素，促进其排出体外，减轻毒素对机体造成的损伤。
植物乳杆菌、屎肠球菌：属于厌氧型细菌，代谢过程中产生多种有机酸，通过降低胃肠道酸碱度，有助于活化并提高胃蛋白酶的活性；代谢产物中的有机酸和乳酸菌素对大肠杆菌、沙门氏菌等有抑制或杀灭作用，有利于维持肠道菌群平衡；刺激肠道免疫组织的发育，提高肠道免疫功能；植物乳杆菌和屎肠球菌属于乳酸菌，对霉菌毒素如黄曲霉毒素也有一定的降解和吸附作用。
以上四种益生菌进入动物体内后，相互协同，发挥营养作用、免疫增强作用、促进肠道菌群平衡及降解霉菌毒素等作用，有利于减少动物肠道疾病的发生，提高动物的生产性能。
本发明的复合微生态制剂的制备方法，利用不同益生菌种分段发酵时，由于不同益生菌利用的营养组分不同，多菌种分段发酵能够对营养底物进行充分利用，节省原料和能源；并且得到的发酵产物中含有多种益生菌和丰富的代谢产物，各菌种比例天然形成，更加合理，临床效果更好；最后，发酵过程控制技术含量较高，有利于中小型企业产品核心竞争力的形成。
发酵过程可以在发酵罐中进行，投入发酵罐的微生物液体培养基的体积占发酵罐总体积的40～60％。投入微生物液体培养基后，将发酵罐在115～125℃下灭菌40～60min，然后再接入枯草芽孢杆菌菌种。发酵罐的体积为0.5～2m3。
优选的，所述枯草芽孢杆菌菌种的活菌数为(0.5～1.0)×109CFU/mL，酿酒酵母菌菌种的活菌数为(0.05～1.0)×109CFU/mL，植物乳杆菌菌种的活菌数为(1.0～2.0)×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的活菌数为(1.0～2.0)×109CFU/mL；所述枯草芽孢杆菌菌种的接种量为0.1～0.5％，所述酿酒酵母菌菌种的接种量为0.1～0.5％，所述植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种的接种量均为0.1～0.3％。
进一步优选的，所述枯草芽孢杆菌菌种的规格为1.0×109CFU/mL，酿酒酵母菌菌种的规格为1.0×109CFU/mL，植物乳杆菌菌种的规格为1.0×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的规格为2.0×109CFU/mL。
优选的，所述微生物液体培养基由以下质量分数的组分组成：豆粕粉2～3％、玉米粉1.5～2％、麸皮粉1.5～2％、葡萄糖0.5～1.5％、硫酸铵0.05～0.1％、硫酸镁0.01～0.03％、硫酸锰0.01～0.03％、大豆油0.5～1％，余量为水。所述豆粕粉为80～120目、玉米粉为80～120目、麸皮粉为80～120目。所述80～120目是指过80～120目筛。
进一步优选的，所述微生物液体培养基由以下质量分数的组分组成：豆粕粉2.6％、玉米粉1.7％、麸皮粉1.7％、葡萄糖0.6％、硫酸铵0.08％、硫酸镁0.02％、硫酸锰0.02％、大豆油1％，余量为水。
优选的，将枯草芽孢杆菌接入微生物液体培养基前，调整微生物液体培养基的pH为7.0～8.5。
优选的，所述通气发酵的时间为20～30h；所述密闭静置发酵的时间为20～30h。进一步优选的，所述密闭静置发酵的时间为24～30h。
优选的，所述通气发酵过程中通入的气体的体积与微生物液体培养基的体积比为(1～3):(0.4～0.6)。
优选的，通气发酵和密闭静置发酵的压力均为0.04～0.05MPa。
优选的，通气发酵过程中以110～150r/min的转速对发酵体系进行搅拌。静置发酵过程中不搅拌、不通气。
两次通气发酵的时间、压力以及发酵过程通入的气体的体积、搅拌速率可相同也可不相同。
本发明的复合微生态制剂所采用的技术方案为：
一种上述复合微生态制剂的制备方法得到的复合微生态制剂。
本发明的复合微生态制剂在用作饲料添加剂方面的应用所采用的技术方案为：
一种上述复合微生态制剂作为饲料添加剂的应用。
本发明的复合微生态制剂用作饲料添加剂添加入饲料中时，可用于治疗家禽家畜细菌性腹泻、消化不良，提高家禽家畜生产性能。
本发明的复合微生态制剂用于家禽细菌性腹泻、消化不良等症状，每1mL复合微生态制剂兑1L水，自由饮用，连用5天即可；用于仔猪等家畜细菌性腹泻、消化不良等症，每头每天饮用4mL复合微生态制剂，连用3天即可；用于提高动物生产性能进行预防性添加时，每隔7天用1次，每次连用7天，每1mL复合微生态制剂兑2L水，自由饮用即可。
具体实施方式
以下结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步的说明。
各实施例中采用枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌发酵过程中通入的气体为无菌空气。
实施例1
本实施例的复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在1.5m3的发酵罐中装入发酵罐体积的50％的微生物液体培养基，调整微生物液体培养基的pH为8.0，在125℃灭菌40min，降温；所述微生物液体培养基由以下质量分数的组分组成：豆粕粉2.6％、玉米粉1.7％、麸皮粉1.7％、葡萄糖0.6％、硫酸铵0.08％、硫酸镁0.02％、硫酸锰0.02％、大豆油1％，余量为水；所采用的豆粕粉为120目、玉米粉为100目、麸皮粉为100目；
2)以0.5％的接种量在发酵罐中的微生物液体培养基中接入枯草芽孢杆菌菌种，在35℃发酵24h，得到枯草芽孢杆菌发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.05MPa并不断通入气体、不断采用转速为150r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积2倍；所采用的枯草芽孢杆菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL；
3)以0.3％的接种量在步骤1)中得到的枯草芽孢杆菌发酵液中接入酿酒酵母菌菌种，在30℃发酵20h，得到复合发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.05MPa并不断通入气体、不断采用转速为120r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积；所采用的酿酒酵母菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL；
4)分别以0.1％的接种量同时在步骤3)中得到的复合发酵液中接入植物乳杆菌和屎肠球菌菌种，在35℃发酵30h，即得；发酵过程不通气、不搅拌，且保持发酵罐内压力为0.04MPa；所采用的植物乳杆菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的活菌数为2.0×109CFU/mL。
本实施例的复合微生态制剂采用上述制备方法制得。
本实施例的复合微生态制剂用作饲料添加剂时，用于家禽细菌性腹泻、消化不良等症，每1mL复合微生态制剂兑1L水，自由饮用，连用5天即可；用于仔猪细菌性腹泻、消化不良等症，每头每天饮用4mL复合微生态制剂，连用3天即可；用于提高动物生产性能进行预防性添加时，每隔7天用1次，每次连用7天，每1mL复合微生态制剂兑2L水，自由饮用即可。
实施例2
本实施例的复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在0.5m3的发酵罐中装入发酵罐体积的60％的微生物液体培养基，调整微生物液体培养基的pH为7.5，在115℃灭菌60min，降温；所述微生物液体培养液由以下质量百分比的组分组成：豆粕粉3％、玉米粉1.5％、麸皮粉1.5％、葡萄糖1.5％、硫酸铵0.05％、硫酸镁0.01％、硫酸锰0.03％、大豆油1％，余量为水；所采用的豆粕粉为120目、玉米粉为80目、麸皮粉为80目；
2)以0.1％的接种量在发酵罐中的微生物液体培养基中接入枯草芽孢杆菌菌种，在37℃发酵30h，得到枯草芽孢杆菌发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.04MPa并不断通入气体、不断采用转速为140r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积3倍；所采用的枯草芽孢杆菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL；
3)以0.5％的接种量在步骤1)中得到的枯草芽孢杆菌发酵液中接入酿酒酵母菌菌种，在28℃发酵30h，得到复合发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.04MPa并不断通入气体、不断采用转速为150r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积的3倍；所采用的酿酒酵母菌菌种的活菌数为0.05×109CFU/mL；
4)分别以0.1％的接种量同时在步骤3)中得到的复合发酵液中接入植物乳杆菌和屎肠球菌菌种，在37℃发酵30h，即得；发酵过程不通气、不搅拌，且保持发酵罐内压力为0.04MPa；所采用的植物乳杆菌菌种的活菌数为2.0×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的活菌数为2.0×109CFU/mL。
本实施例的复合微生态制剂采用上述制备方法制得。
本实施例的复合微生态制剂用作饲料添加剂时，用于家禽细菌性腹泻、消化不良等症，每1mL复合微生态制剂兑1L水，自由饮用，连用5天即可；用于仔猪细菌性腹泻、消化不良等症，每头每天饮用4mL复合微生态制剂，连用3天即可；用于提高动物生产性能进行预防性添加时，每隔7天用1次，每次连用7天，每1mL复合微生态制剂兑2L水，自由饮用即可。
实施例3
本实施例的复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在2.0m3的发酵罐中装入发酵罐体积的45％的微生物液体培养基，调整微生物液体培养基的pH为8.5，在120℃灭菌50min，降温；所述微生物液体培养基由以下质量分数的组分组成：豆粕粉2％、玉米粉2％、麸皮粉2％、葡萄糖0.5％、硫酸铵0.1％、硫酸镁0.03％、硫酸锰0.01％、大豆油0.5％，余量为水；所采用的豆粕粉为80目、玉米粉为120目、麸皮粉为120目；
2)以0.5％的接种量在发酵罐中的微生物液体培养基中接入枯草芽孢杆菌菌种，在32℃发酵24h，得到枯草芽孢杆菌发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.05MPa并不断通入气体、不断采用转速为130r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积；所采用的枯草芽孢杆菌菌种的活菌数为0.5×109CFU/mL；
3)以0.1％的接种量在步骤1)中得到的枯草芽孢杆菌发酵液中接入酿酒酵母菌菌种，在32℃发酵20h，得到复合发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.04MPa并不断通入气体、不断采用转速为110r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积的2倍；所采用的酿酒酵母菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL；
4)分别以0.3％的接种量同时在步骤3)中得到的复合发酵液中接入植物乳杆菌和屎肠球菌菌种，在30℃发酵24h，即得；发酵过程不通气、不搅拌，且保持发酵罐内压力为0.05MPa；所采用的植物乳杆菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL。
本实施例的复合微生态制剂采用上述制备方法制得。
本实施例的复合微生态制剂用作饲料添加剂时，用于家禽细菌性腹泻、消化不良等症，每1mL复合微生态制剂兑1L水，自由饮用，连用5天即可；用于仔猪细菌性腹泻、消化不良等症，每头每天饮用4mL复合微生态制剂，连用3天即可；用于提高动物生产性能进行预防性添加时，每隔7天用1次，每次连用7天，每1mL复合微生态制剂兑2L水，自由饮用即可。
实施例4
本实施例的复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在1.0m3的发酵罐中装入发酵罐体积的55％的微生物液体培养基，调整微生物液体培养基的pH为7.0，在115℃灭菌50min，降温；所述微生物液体培养基由以下质量分数的组分组成：豆粕粉2.3％、玉米粉1.8％、麸皮粉1.8％、葡萄糖1.0％、硫酸铵0.08％、硫酸镁0.02％、硫酸锰0.02％、大豆油0.8％，余量为水；所采用的豆粕粉为100目、玉米粉为100目、麸皮粉为120目；
2)以0.3％的接种量在发酵罐中的微生物液体培养基中接入枯草芽孢杆菌菌种，在35℃发酵20h，得到枯草芽孢杆菌发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.04MPa并不断通入气体、不断采用转速为110r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积2倍；所采用的枯草芽孢杆菌菌种的活菌数规格为0.8×109CFU/mL；
3)以0.1％的接种量在步骤1)中得到的枯草芽孢杆菌发酵液中接入酿酒酵母菌菌种，在30℃发酵24h，得到复合发酵液；发酵过程中保持罐内的压力为0.05MPa并不断通入气体、不断采用转速为130r/min的搅拌机进行搅拌，通入气体的总体积为罐体体积；所采用的酿酒酵母菌菌种的活菌数为0.8×109CFU/mL；
4)分别以0.2％的接种量同时在步骤3)中得到的复合发酵液中接入植物乳杆菌和屎肠球菌菌种，在35℃发酵30h，即得；发酵过程不通气、不搅拌，且保持发酵罐内压力为0.05MPa；所采用的植物乳杆菌菌种的活菌数为1.5×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的活菌数为1.5×109CFU/mL。
本实施例的复合微生态制剂采用上述制备方法制得。
本实施例的复合微生态制剂用作饲料添加剂时，用于家禽细菌性腹泻、消化不良等症，每1mL复合微生态制剂兑1L水，自由饮用，连用5天即可；用于仔猪细菌性腹泻、消化不良等症，每头每天饮用4mL复合微生态制剂，连用3天即可；用于提高动物生产性能进行预防性添加时，每隔7天用1次，每次连用7天，每1mL复合微生态制剂兑2L水，自由饮用即可。
对比例
对比例的复合微生态制剂采用的微生物液体培养基同实施例1，枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌发酵过程中通入的气体为无菌空气。
对比例的复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)制备无菌发酵培养基
分别在编号为1#～3#、体积均为1.5m3的发酵罐中装入发酵罐体积的50％的微生物液体培养基，调整微生物液体培养基的pH为8.0，然后在125℃灭菌40min，降温；
2)进行枯草芽孢杆菌发酵、酿酒酵母菌发酵、植物乳杆菌和屎肠球菌发酵
A)枯草芽孢杆菌发酵
以0.5％的接种量在1#发酵罐中的微生物液体培养基中接入枯草芽孢杆菌菌种，在35℃发酵24h，得到枯草芽孢杆菌发酵液；发酵过程中保持罐压为0.05MPa并在不断搅拌的条件下通入气体；搅拌采用的搅拌机的转速为150r/min，通入气体的总体积为罐体体积2倍；所采用的枯草芽孢杆菌的菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL；
B)酿酒酵母菌发酵
以0.3％的接种量在2#发酵罐中的微生物液体培养基中接入酿酒酵母菌菌种，在30℃发酵20h，得到酿酒酵母菌发酵液；发酵过程中保持罐压为0.05MPa并在不断搅拌的条件下通入气体；搅拌采用的搅拌机的转速为120r/min，通入的气体的总体积为发酵罐体积；所采用的酿酒酵母菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL；
C)植物乳杆菌和屎肠球菌发酵
分别以0.1％的接种量同时在3#发酵罐中的微生物液体培养基中接入植物乳杆菌和屎肠球菌，然后在35℃发酵30h，得到植物乳杆菌和屎肠球菌复合发酵液；发酵过程中不搅拌、不通气且保持罐压为0.04MPa，所采用的植物乳杆菌菌种的活菌数为1.0×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的活菌数为2.0×109CFU/mL；
3)用平板菌落计数法测定实施例1中每毫升复合微生态制剂中枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌和屎肠球菌的活菌数，计算各类活菌的比例；分别用平板菌落计数法测定对比例中各发酵液中的活菌数，并按照实施例1中的各类活菌的比例配制复合益生菌发酵液，即得对比例的复合微生态制剂。
对比例的复合微生态制剂，在临床应用时，用法及用量同实施例1。
实验例1
本实验例考察不同实施例的复合微生态制剂在治疗肉仔鸡肠道菌群紊乱和消化不良是的作用效果。
1)实验材料
实验试剂：实施例1～4以及对比例制得的复合微生态制剂；
实验动物：因消化不良、病原细菌感染发生腹泻的6日龄肉雏鸡，由河南省鹤壁市某肉鸡场提供。
2)实验方法
实验采取单因素完全随机设计，共设6个组，每组100只发病鸡。其中实验组1～4分别喂食含实施例1～4的复合微生态制剂的饮水；组5为对照组，喂食含对比例复合微生态制剂的饮水，使用方法与组1～4的相同；组6为空白组，喂食不含任何药物的饮水。
实施例1～4及对比例的复合微生态制剂的投喂方法：每1mL复合微生态制剂兑1L水，自由饮用，连用5天，临床治疗效果见表1。
表1各组用药后的治疗效果
(注：死亡率降低值为组1～5的死亡率与组6的死亡率之差的绝对值)
复合微生态制剂临床效果：由表1可知，组1～4中病鸡在用药第3、5天的恢复率均明显高于组5和组6，第5天第1～5组总死亡率分别比第6组降低21、20、20、21、12％，第5天第1～4组总死亡率分别比第5组降低9、8、8、9％。结果表明，本发明的复合微生态制剂在治疗肉雏鸡因消化不良、病原细菌感染发生腹泻时，作用效果理想。
实验例2
本实验例考察不同实施例的复合微生态制剂在治疗仔猪肠道菌群紊乱和消化不良时的作用效果。
1)实验材料
实验制剂：实施例1～4以及对比例制得的复合微生态制剂；
实验动物：因消化不良、病原细菌感染发生腹泻的2日龄仔猪，由河南省通许县某猪场提供。
2)实验方法
实验采取单因素完全随机设计，共设6个组，每组20头发病仔猪。其中试验组1～4分别灌服实施例1～4的复合微生态制剂；组5为对照组，灌服对比例复合微生态制剂，使用方法与组1～4的相同；组6为空白组，不投喂任何药物。
实施例1～4及对比例的复合微生态制剂的投喂方法：4mL/头/天，连用3天，临床治疗效果见表2。
表2各组用药后的治疗效果
(注：死亡率降低值为组1～5组的死亡率与组6的死亡率之差的绝对值)
临床效果：由表2可知，组1～4中腹泻仔猪在使用本发明的复合微生态制剂3天后，全部恢复正常，第5组(对比例制剂)恢复率80％，第6组(空白对照)恢复率70％；给发病仔猪投喂本发明及对比例复合微生态制剂3天后，与第6组相比，1～5组的死亡率分别降低20％、20％、20％、20％、10％，恢复率分别提高30％、30％、30％、30％、10％。结果表明，本发明的复合微生态制剂在治疗仔猪因消化不良、病原细菌感染发生腹泻时，作用效果理想。
实验例3
本实验例考察不同实施例的复合微生态制剂在用于提高断奶仔猪生产性能进行预防性添加时的作用效果。
1)实验材料
实验制剂：实施例1～4及对比例制备的复合微生态制剂；
实验动物：24日龄仔猪，由河南省原阳县某猪场提供。
2)实验方法
实验采取单因素完全随机设计，共设6个组，每组45头断奶仔猪。其中试验组1～4分别添加实施例1～4的复合微生态制剂至仔猪饮水中；组5为对照组，添加对比例复合微生态制剂至仔猪饮水中；组6为空白组，不投喂任何药物。
实施例1～4及对比例的复合微生态制剂的投喂方法：实验期24天，断奶转至保育舍后连用7天，隔7天再连用7天，每1mL复合微生态制剂兑2L水，自由饮用。临床效果见表3。
表3各组用药后对断奶仔猪生产性能效果
临床效果：由表3可知，组1～5的平均末重比组6(空白组)分别提高了14.68％、10.33％、12.44％、12.85％、4.49％，平均总采食量分别提高了15.83％、10.15％、13.21％、15.50％、5.90％，平均总增重分别提高了27.32％、18.58％、23.11％、24.33％、8.80％，料肉比均低于空白组，试验全程组6试验猪只死亡1头，其他试验组均无伤亡。结果表明，本发明的复合微生态制剂用于提高动物生产性能进行预防性添加时，作用效果显著。

Claims (10)

1.一种复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌种接入微生物液体培养基中，于32～37℃通气发酵培养至形成芽孢，然后接入酿酒酵母菌菌种在28～32℃通气发酵，待酿酒酵母菌处于稳定期时，同时接入植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种在30～37℃密闭静置发酵，待植物乳杆菌和屎肠球菌同时处于稳定期时，停止发酵，即得。
2.根据权利要求1所述的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌菌种的活菌数为(0.05～1.0)×109CFU/mL，酿酒酵母菌菌种的活菌数为(0.5～1.0)×109CFU/mL，植物乳杆菌菌种的活菌数为(1.0～2.0)×109CFU/mL，屎肠球菌菌种的活菌数为(1.0～2.0)×109CFU/mL；所述枯草芽孢杆菌菌种的接种量为0.1～0.5％，所述酿酒酵母菌菌种的接种量为0.1～0.5％，所述植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种的接种量均为0.1～0.3％。
3.根据权利要求1或2所述的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述微生物液体培养基由以下质量分数的组分组成：豆粕粉2～3％、玉米粉1.5～2％、麸皮粉1.5～2％、葡萄糖0.5～1.5％、硫酸铵0.05～0.1％、硫酸镁0.01～0.03％、硫酸锰0.01～0.03％、大豆油0.5～1％，余量为水。
4.根据权利要求1或2所述的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：在将枯草芽孢杆菌接入微生物液体培养基前，调整微生物液体培养基的pH为7.0～8.5。
5.根据权利要求1或2所述的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述通气发酵的时间为20～30h；所述密闭静置发酵的时间为20～30h。
6.根据权利要求1或2所述的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述通气发酵过程中通入的气体的体积与微生物液体培养基的体积比为(1～3):(0.4～0.6)。
7.根据权利要求1或2所述的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：通气发酵和密闭静置发酵的压力均为0.04～0.05MPa。
8.根据权利要求1或2所述的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：通气发酵过程中以110～150r/min的转速对发酵体系进行搅拌。
9.一种如权利要求1所述的复合微生态制剂的制备方法得到的复合微生态制剂。
10.一种如权利要求9所述的复合微生态制剂作为饲料添加剂的应用。
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