CN109588377B - 一种蚕卵孵化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种蚕卵孵化方法，具体涉及昆虫养殖技术领域。本发明方法包括以下步骤：a.蚕卵消毒：用消毒液对蚕卵进行消毒；b.蚕卵活化，得活化卵：取消毒后的蚕卵，用8‑12℃的活化液浸渍15‑30分钟，得活化卵；c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用2‑6℃的保护液对着活化卵喷洒2次，然后置于冷库中冷藏72‑120小时，得到冷藏卵；d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，然后升高蚕室温度催青8‑10小时，得到转青卵；e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用荧光灯对转青卵进行感光，孵化得到重量为700‑800μg的蚁蚕。本发明方法的蚕卵一日孵化率高、孵化齐一、蚁体强壮、蚁量充足，使培育的蚕蚕体强健、成活率高，得到的蚕茧产量高、质量稳定。
Description
【技术领域】
本发明涉及昆虫养殖技术领域，具体涉及一种蚕卵孵化方法。
【背景技术】
蚕，是蚕蛾的幼虫，丝绸原料的主要来源，在人类经济生活及文化历史上占有重要地位。养蚕取丝是我国古代劳动人民的伟大发明，现今蚕事业也在不断发展，桑园面积不断扩大，养蚕数量不断增加。
蚕卵孵化既是是蚕养殖的起始环节，也是重要环节，蚕卵的孵化率、蚁蚕的健康状况会直接影响后续小蚕养殖的生长繁育状态和结茧产丝的质量。蚕为适应自然环境变化，进化出了在严酷的环境下产出越年卵或滞育卵，在温和的环境下产出不越年卵或非滞育卵的两种体质特征，不越年卵产出后可马上孵化，而越年卵需经过激烈条件刺激后才能活化孵化，因此，两种类型蚕卵的孵化方法不尽相同。目前，现有技术中公开的蚕卵的孵化研究主要以越年卵为对象，不越年卵研究较少，也缺乏将两种卵采用相同方法进行共同孵化的研究。中国专利公开号为CN107711730A,名为蚕卵的冷藏孵化方法的专利文件中，根据滞育卵冷藏时间的不同，分别采用盐酸浸渍或直接孵化的方法，可按生产需求实现灵活孵化，但由于盐酸为强酸，会对蚕卵造成一定的腐蚀，导致孵化不稳定、一日孵化率低；中国专利公开号为CN107279075A,名为一种春蚕卵孵化方法的专利文件中，滞育蚕卵用溶液浸泡消毒后，置于2-4℃密封储藏至开春取出，然后先后用碳酸氢钠水溶液、含盐酸药液浸泡，最后脱酸风干，进行孵化，提高了蚕卵的孵化成功率和蚁蚕的成活率，但消毒溶液中含有过氧化氢，且药液中含有盐酸，均属于强腐蚀性试剂，会降低蚕卵的生理活性，使孵化不齐、一日孵化率低，蚁蚕体质虚弱、成活率低。
因此，需开发一种蚕卵孵化方法，使不同类型蚕卵能共同孵化，同时提高蚕卵的一日孵化率，增强孵化齐一性，增加蚁蚕的产量和质量稳定性。
【发明内容】
本发明的发明目的在于：针对蚕卵孵化方法不统一、一日孵化率低、孵化不齐，蚁蚕体质虚弱、产量低、质量不稳定的问题，提供一种蚕卵的孵化方法。本发明的蚕卵一日孵化率高，得到的蚁蚕体质强壮，蚁量充足，培育的蚕蚕体强健、成活率高，得到的蚕茧产量高、质量稳定。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种蚕卵孵化方法，包括以下步骤：
a.蚕卵消毒：取装有蚕卵的蚕匾，置于蚕室中，设置蚕室温度为14-18℃、湿度为20％-30％，用消毒液对蚕卵进行消毒，消毒液的温度为16-20℃；所述蚕卵为越年卵和不越年卵，所述越年卵和不越年卵分别置于不同的蚕匾上；
b.蚕卵活化，得活化卵：调节蚕室温度为8-12℃、湿度为25％-35％，然后取消毒后的蚕卵，用8-12℃的活化液浸渍15-30分钟，接着取出，得活化卵；所述活化液包括以下重量份比的原料：凉开水120-130份、桑叶8-10份、橙皮4-6份、竹叶3-5份、西瓜皮2-4份、酸奶2-3份、海藻糖1-2份和酒曲1-2份；
c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用2-6℃的保护液对着活化卵喷洒，待活化卵表面保护液晾干后再次喷洒1次保护液，晾干表面保护液，然后置于冷库中冷藏72-120小时，设置冷库温度为0-4℃，得到冷藏卵；所述保护液包括以下重量份比的原料：山梨醇3-5份、甘油2-4份、环糊精1.2-1.8份、海藻糖0.8-1.4份和乙酸乙酯0.2-0.4份；
d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，设置蚕室温度为8-16℃、湿度为65％-75％，回温时间为1-2小时，然后升高蚕室温度至27-29℃进行催青，催青8-10小时，得到转青卵；
e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用光照强度为25-35lux的荧光灯对转青卵进行40-50分钟的感光，保持荧光灯与转青卵的距离在80-90cm之间，孵化得到重量在700μg以上的蚁蚕。
优化的，步骤b中所述活化液的制备方法为：按重量份比，取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，置于真空罐中，然后加入凉开水、酸奶、海藻糖和酒曲，搅拌均匀，接着密封，设置真空罐的真空度为50～60kPa、发酵温度为32-34℃，进行50-60个小时发酵，得到发酵物，然后发酵物用0.1-0.2微米滤膜过滤，收集滤液，得到活化液。
进一步优化的，步骤c中所述保护液的制备方法为：按重量份比，取山梨醇置于甘油中，搅拌均匀，得到混合液，备用；取海藻糖，在6-10℃下加入乙酸乙酯搅拌润湿，然后继续保持6-10℃加入环糊精，混合均匀，接着加入上述混合液，搅拌均匀，得到保护液。
更进一步优化的，步骤a中所述消毒液包括以下重量份比的原料：艾叶5-9份、青蒿3-5份、鱼腥草2-4份、蛇油0.3-0.4份、桉油0.1-0.3份、丙酮40-50份和乙醇水溶液70-80份；所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为54％-60％。
再更进一步优化的，所述消毒液的制备方法为：按重量份比，取艾叶、青蒿和鱼腥草，加入丙酮，在60-70℃回流提取25-35分钟，然后过滤，收集滤渣，接着在滤渣中加入乙醇水溶液，微波萃取30-40分钟后，过滤，收集滤液，得到提取液；接着在提取液中加入蛇油和桉油，混合均匀，得到消毒液。
再更进一步优化的，所述消毒液的使用方法为：取消毒液进行喷洒，喷洒体积为4-5ml/张蚕卵。
再更进一步优化的，所述消毒液的使用方法为：将蚕卵连同蚕匾一起，置于消毒液中浸渍5-7分钟。
再更进一步优化的，步骤a中所述不越年卵在消毒前进行预处理，所述预处理方法为：取不越年卵置于第一催青室中，设置催青室温度为25-28℃、湿度为70％-74％，放置48-72小时。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1.本发明采用同一种孵化方法同时孵化越年卵和不越年卵，使用活化液对蚕卵进行刺激，使其发育速度增快；随后使用保护液对蚕卵进行防冻保护，再进行低温冷藏，使先发育的蚕卵发育变缓或停滞，同时使发育迟缓的卵继续在低温中发育成熟，以促进孵化齐一；最后进行催青和孵化得到蚁蚕。本发明方法的蚕卵孵化齐一、蚁量充足，一日孵化率在97％以上；蚁体强壮、蚁蚕体重在700μg以上，使培育的蚕蚕体强健、成活率高，得到的蚕茧产量高、质量稳定。
2.本发明先将蚕卵进行活化，然后进行防冻保护，再进行低温冷藏。冷藏前活化可以刺激蚕卵，通过活化液中桑叶、橙皮、竹叶和西瓜中提取出的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和各种营养成分，调节蚕卵发育过程中各种生物酶活性按卵的生长规律有序变化，并可以使这两种关键生物酶的活性增强，促进蚕卵的生长发育。冷藏前还采用保护液对蚕卵进行防冻保护，采用具有超低凝固点的山梨醇、甘油和海藻糖，可以降低蚕卵中水分的凝固温度，保护蚕***在低温下不被冻结，且三种物质在多种生物体内被作为能量来源，对细胞无毒害作用，天然、环保；保护液使用时，先对着蚕卵喷洒一层，晾干后，再喷洒一层，可以使保护液在蚕卵表面形成厚度适中的保护膜，既能防冻，有具有良好的透气性。防冻保护后进行低温冷藏，可以使先发育的蚕卵发育变缓或停滞，同时使发育迟缓的卵继续在低温中发育成熟，以促进孵化齐一；由于优先发育的蚕卵中的营养物质已消耗大半，故低温下发育速度会减慢或处于停滞，而迟发育的蚕卵中营养物质积蓄较多，加上活化液中的生物酶和多种营养，仍可保持快速的新陈代谢机能，从而追赶上优先发育蚕卵的发育进程，实现所有蚕卵的发育周期同步，提高孵化齐一性,使一日孵化率在97％以上。
本发明的活化液采用凉开水、酸奶、海藻糖、酒曲为发酵底物，对桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮进行发酵，使这四种植物的细胞壁快速破裂，将植物细胞体中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、氨基酸、维生素、微量元素完整地提取出来，同时海藻糖能保护生物酶空间架构稳定、不被低温破坏，确保了酶类物质和各种营养成分参与到蚕卵的生长发育中，促进蚕卵快速成长，使孵化率得到提高，使孵化出的蚁蚕体质强健。采用真空发酵，可以利用负压，加速植物细胞壁破裂，最大程度提取出生物酶和各种营养物质。
本发明保护液中的海藻糖能够保护蛋白质立体结构和细胞壁的完整性，使低温下细胞仍保持活性，使蚕卵在冷藏时，不受损伤，能维持稳定的生理活动；采用环糊精包合海藻糖可使海藻糖在保护液中形成稳定的、独立的分子个体，提高对蚕卵中蛋白质和细胞壁的保护效果；乙酸乙酯与环糊精中空结构的疏水性相近，采用乙酸乙酯作为包合润湿剂，并保持低温防止乙酸乙酯快速挥发，可使海藻糖快速被环糊精包裹，增大包合率。
3.本发明提取艾叶、青蒿、鱼腥草中的青蒿素、癸酰乙醛等黄酮和挥发油抑菌成分，并加入蛇油和桉油增强抑菌效果，共同制成消毒液，可有效保护蚕卵，避免蚕卵遭受病菌虫害。使用蛇油可发挥蛇油与卵壳细胞良好的亲和性优势，利于消毒液成分与卵壳的融合，起到长效杀菌抑菌的效果。以乙醇水溶液作为溶剂，采用喷洒或浸渍的方法消毒，既利用了乙醇的杀菌功能，又利用了其强的挥发性，可以避免蚕卵过于潮湿而阻碍卵内外气体交换，并且乙醇还可以增强蚕卵外壳的通透性，帮助活化液渗透。
4.本发明通过在蚕卵的孵化过程中加入消毒液、活化液、保护液，并进行冷藏，使蚕卵到达催青步骤时，发育已近成熟，只需要8-10个小时的短时间催青，便能实现转青。
5.本发明在消毒和活化时采用低温、低湿条件，可以使蚕卵维持在较低的发育速度，不给蚕卵的生长发育创造条件，避免其中先发育的蚕卵在较高温度时发育过快，与发育迟缓的蚕卵生长差距拉大，影响到发育的同步性和蚕卵的一日孵化率。
【具体实施方式】
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
一种蚕卵孵化方法，包括以下步骤：
a.蚕卵消毒：取装有蚕卵的蚕匾，置于蚕室中，设置蚕室温度为14℃、湿度为20％，用消毒液对蚕卵进行消毒，消毒液的温度为16℃；所述蚕卵为越年卵和不越年卵，所述越年卵和不越年卵分别置于不同的蚕匾上；
其中，不越年卵在消毒前进行预处理，所述预处理方法为：取不越年卵置于第一催青室中，设置催青室温度为25℃、湿度为70％，放置48小时。
消毒液包括以下重量份比的原料：艾叶5份、青蒿3份、鱼腥草2份、蛇油0.3份、桉油0.1份、丙酮40份和乙醇水溶液70份；所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为54％。
消毒液的制备方法为：按重量份比，取艾叶、青蒿和鱼腥草，加入丙酮，在60℃回流提取25分钟，然后过滤，收集滤渣，接着在滤渣中加入乙醇水溶液，微波萃取30分钟后，过滤，收集滤液，得到提取液；接着在提取液中加入蛇油和桉油，混合均匀，得到消毒液。
消毒液的使用方法为：取消毒液进行喷洒，喷洒体积为4ml/张蚕卵。
b.蚕卵活化，得活化卵：调节蚕室温度为8℃、湿度为25％，然后取消毒后的蚕卵，用8℃的活化液浸渍15分钟，接着取出，得活化卵；所述活化液包括以下重量份比的原料：凉开水120份、桑叶8份、橙皮4份、竹叶3份、西瓜皮2份、酸奶2份、海藻糖1份和酒曲1份；
其中，活化液的制备方法为：按重量份比，取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，置于真空罐中，然后加入凉开水、酸奶、海藻糖和酒曲，搅拌均匀，接着密封，设置真空罐的真空度为50kPa、发酵温度为32℃，进行50个小时发酵，得到发酵物，然后发酵物用0.1微米滤膜过滤，收集滤液，得到活化液。
c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用2℃的保护液对着活化卵喷洒，待活化卵表面保护液晾干后再次喷洒1次保护液，晾干表面保护液，然后置于冷库中冷藏72小时，设置冷库温度为4℃，得到冷藏卵；所述保护液包括以下重量份比的原料：山梨醇3份、甘油2份、环糊精1.2份、海藻糖0.8份和乙酸乙酯0.2份；
其中，保护液的制备方法为：按重量份比，取山梨醇置于甘油中，搅拌均匀，得到混合液，备用；取海藻糖，在6℃下加入乙酸乙酯搅拌润湿，然后继续保持6℃加入环糊精，混合均匀，接着加入上述混合液，搅拌均匀，得到保护液。
d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，设置蚕室温度为8℃、湿度为65％，回温时间为1小时，然后升高蚕室温度至27℃进行催青，催青8小时，得到转青卵；
e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用光照强度为25lux的荧光灯对转青卵进行40分钟的感光，保持荧光灯与转青卵的距离在80cm，孵化得到蚁蚕。
实施例2
一种蚕卵孵化方法，包括以下步骤：
a.蚕卵消毒：取装有蚕卵的蚕匾，置于蚕室中，设置蚕室温度为18℃、湿度为30％，用消毒液对蚕卵进行消毒，消毒液的温度为20℃；所述蚕卵为越年卵和不越年卵，所述越年卵和不越年卵分别置于不同的蚕匾上；
其中，不越年卵在消毒前进行预处理，所述预处理方法为：取不越年卵置于第一催青室中，设置催青室温度为28℃、湿度为74％，放置72小时。
消毒液包括以下重量份比的原料：艾叶9份、青蒿5份、鱼腥草4份、蛇油0.4份、桉油0.3份、丙酮50份和乙醇水溶液80份；所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为60％。
消毒液的制备方法为：按重量份比，取艾叶、青蒿和鱼腥草，加入丙酮，在70℃回流提取35分钟，然后过滤，收集滤渣，接着在滤渣中加入乙醇水溶液，微波萃取40分钟后，过滤，收集滤液，得到提取液；接着在提取液中加入蛇油和桉油，混合均匀，得到消毒液。
消毒液的使用方法为：取消毒液进行喷洒，喷洒体积为5ml/张蚕卵。
b.蚕卵活化，得活化卵：调节蚕室温度为12℃、湿度为35％，然后取消毒后的蚕卵，用12℃的活化液浸渍30分钟，接着取出，得活化卵；所述活化液包括以下重量份比的原料：凉开水130份、桑叶10份、橙皮6份、竹叶5份、西瓜皮4份、酸奶3份、海藻糖2份和酒曲2份；
其中，活化液的制备方法为：按重量份比，取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，置于真空罐中，然后加入凉开水、酸奶、海藻糖和酒曲，搅拌均匀，接着密封，设置真空罐的真空度为60kPa、发酵温度为34℃，进行60个小时发酵，得到发酵物，然后发酵物用0.2微米滤膜过滤，收集滤液，得到活化液。
c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用6℃的保护液对着活化卵喷洒，待活化卵表面保护液晾干后再次喷洒1次保护液，晾干表面保护液，然后置于冷库中冷藏120小时，设置冷库温度为4℃，得到冷藏卵；所述保护液包括以下重量份比的原料：山梨醇5份、甘油4份、环糊精1.8份、海藻糖1.4份和乙酸乙酯0.4份；
其中，保护液的制备方法为：按重量份比，取山梨醇置于甘油中，搅拌均匀，得到混合液，备用；取海藻糖，在10℃下加入乙酸乙酯搅拌润湿，然后继续保持10℃加入环糊精，混合均匀，接着加入上述混合液，搅拌均匀，得到保护液。
d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，设置蚕室温度为16℃、湿度为75％，回温时间为2小时，然后升高蚕室温度至29℃进行催青，催青10小时，得到转青卵；
e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用光照强度为25-35lux的荧光灯对转青卵进行50分钟的感光，保持荧光灯与转青卵的距离在90cm，孵化得到蚁蚕。
实施例3
一种蚕卵孵化方法，包括以下步骤：
a.蚕卵消毒：取装有蚕卵的蚕匾，置于蚕室中，设置蚕室温度为15℃、湿度为23％，用消毒液对蚕卵进行消毒，消毒液的温度为17℃；所述蚕卵为越年卵和不越年卵，所述越年卵和不越年卵分别置于不同的蚕匾上；
其中，不越年卵在消毒前进行预处理，所述预处理方法为：取不越年卵置于第一催青室中，设置催青室温度为26℃、湿度为71％，放置54小时。
消毒液包括以下重量份比的原料：艾叶6份、青蒿3.5份、鱼腥草2.5份、蛇油0.32份、桉油0.15份、丙酮42份和乙醇水溶液72份；所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为55％。
消毒液的制备方法为：按重量份比，取艾叶、青蒿和鱼腥草，加入丙酮，在62℃回流提取27分钟，然后过滤，收集滤渣，接着在滤渣中加入乙醇水溶液，微波萃取32分钟后，过滤，收集滤液，得到提取液；接着在提取液中加入蛇油和桉油，混合均匀，得到消毒液。
消毒液的使用方法为：将蚕卵连同蚕匾一起，置于消毒液中浸渍5分钟。
b.蚕卵活化，得活化卵：调节蚕室温度为9℃、湿度为28％，然后取消毒后的蚕卵，用9℃的活化液浸渍18分钟，接着取出，得活化卵；所述活化液包括以下重量份比的原料：凉开水123份、桑叶8.5份、橙皮4.5份、竹叶3.5份、西瓜皮2.5份、酸奶2.3份、海藻糖1.2份和酒曲1.3份；
其中，活化液的制备方法为：按重量份比，取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，置于真空罐中，然后加入凉开水、酸奶、海藻糖和酒曲，搅拌均匀，接着密封，设置真空罐的真空度为53kPa、发酵温度为33℃，进行52个小时发酵，得到发酵物，然后发酵物用0.12微米滤膜过滤，收集滤液，得到活化液。
c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用3℃的保护液对着活化卵喷洒，待活化卵表面保护液晾干后再次喷洒1次保护液，晾干表面保护液，然后置于冷库中冷藏108小时，设置冷库温度为1℃，得到冷藏卵；所述保护液包括以下重量份比的原料：山梨醇3.5份、甘油2.5份、环糊精1.3份、海藻糖0.9份和乙酸乙酯0.25份；
其中，保护液的制备方法为：按重量份比，取山梨醇置于甘油中，搅拌均匀，得到混合液，备用；取海藻糖，在7℃下加入乙酸乙酯搅拌润湿，然后继续保持7℃加入环糊精，混合均匀，接着加入上述混合液，搅拌均匀，得到保护液。
d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，设置蚕室温度为10℃、湿度为68％，回温时间为1.2小时，然后升高蚕室温度至28℃进行催青，催青8.5小时，得到转青卵；
e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用光照强度为27lux的荧光灯对转青卵进行42分钟的感光，保持荧光灯与转青卵的距离在83cm，孵化得到蚁蚕。
实施例4
一种蚕卵孵化方法，包括以下步骤：
a.蚕卵消毒：取装有蚕卵的蚕匾，置于蚕室中，设置蚕室温度为17℃、湿度为28％，用消毒液对蚕卵进行消毒，消毒液的温度为19℃；所述蚕卵为越年卵和不越年卵，所述越年卵和不越年卵分别置于不同的蚕匾上；
其中，不越年卵在消毒前进行预处理，所述预处理方法为：取不越年卵置于第一催青室中，设置催青室温度为27℃、湿度为73％，放置66小时。
消毒液包括以下重量份比的原料：艾叶8份、青蒿4.5份、鱼腥草3.5份、蛇油0.37份、桉油0.25份、丙酮48份和乙醇水溶液77份；所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为58％。
消毒液的制备方法为：按重量份比，取艾叶、青蒿和鱼腥草，加入丙酮，在67℃回流提取33分钟，然后过滤，收集滤渣，接着在滤渣中加入乙醇水溶液，微波萃取37分钟后，过滤，收集滤液，得到提取液；接着在提取液中加入蛇油和桉油，混合均匀，得到消毒液。
消毒液的使用方法为：将蚕卵连同蚕匾一起，置于消毒液中浸渍6分钟。
b.蚕卵活化，得活化卵：调节蚕室温度为11℃、湿度为33％，然后取消毒后的蚕卵，用11℃的活化液浸渍26分钟，接着取出，得活化卵；所述活化液包括以下重量份比的原料：凉开水128份、桑叶9.5份、橙皮5.5份、竹叶4.5份、西瓜皮3.5份、酸奶2.7份、海藻糖1.8份和酒曲1.7份；
其中，活化液的制备方法为：按重量份比，取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，置于真空罐中，然后加入凉开水、酸奶、海藻糖和酒曲，搅拌均匀，接着密封，设置真空罐的真空度为58kPa、发酵温度为33℃，进行57个小时发酵，得到发酵物，然后发酵物用0.18微米滤膜过滤，收集滤液，得到活化液。
c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用5℃的保护液对着活化卵喷洒，待活化卵表面保护液晾干后再次喷洒1次保护液，晾干表面保护液，然后置于冷库中冷藏108小时，设置冷库温度为3℃，得到冷藏卵；所述保护液包括以下重量份比的原料：山梨醇4.5份、甘油3.5份、环糊精1.6份、海藻糖1.3份和乙酸乙酯0.35份；
其中，保护液的制备方法为：按重量份比，取山梨醇置于甘油中，搅拌均匀，得到混合液，备用；取海藻糖，在9℃下加入乙酸乙酯搅拌润湿，然后继续保持9℃加入环糊精，混合均匀，接着加入上述混合液，搅拌均匀，得到保护液。
d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，设置蚕室温度为14℃、湿度为73％，回温时间为1.8小时，然后升高蚕室温度至28℃进行催青，催青9.5小时，得到转青卵；
e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用光照强度为33lux的荧光灯对转青卵进行47分钟的感光，保持荧光灯与转青卵的距离在88cm，孵化得到蚁蚕。
实施例5
一种蚕卵孵化方法，包括以下步骤：
a.蚕卵消毒：取装有蚕卵的蚕匾，置于蚕室中，设置蚕室温度为16℃、湿度为25％，用消毒液对蚕卵进行消毒，消毒液的温度为18℃；所述蚕卵为越年卵和不越年卵，所述越年卵和不越年卵分别置于不同的蚕匾上；
其中，不越年卵在消毒前进行预处理，所述预处理方法为：取不越年卵置于第一催青室中，设置催青室温度为26℃、湿度为72％，放置60小时。
消毒液包括以下重量份比的原料：艾叶7份、青蒿4份、鱼腥草3份、蛇油0.35份、桉油0.2份、丙酮45份和乙醇水溶液75份；所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为57％。
消毒液的制备方法为：按重量份比，取艾叶、青蒿和鱼腥草，加入丙酮，在65℃回流提取30分钟，然后过滤，收集滤渣，接着在滤渣中加入乙醇水溶液，微波萃取35分钟后，过滤，收集滤液，得到提取液；接着在提取液中加入蛇油和桉油，混合均匀，得到消毒液。
消毒液的使用方法为：将蚕卵连同蚕匾一起，置于消毒液中浸渍6分钟。
b.蚕卵活化，得活化卵：调节蚕室温度为10℃、湿度为30％，然后取消毒后的蚕卵，用10℃的活化液浸渍22分钟，接着取出，得活化卵；所述活化液包括以下重量份比的原料：凉开水125份、桑叶9份、橙皮5份、竹叶4份、西瓜皮3份、酸奶2.5份、海藻糖1.5份和酒曲1.5份；
其中，活化液的制备方法为：按重量份比，取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，置于真空罐中，然后加入凉开水、酸奶、海藻糖和酒曲，搅拌均匀，接着密封，设置真空罐的真空度为55kPa、发酵温度为33℃，进行55个小时发酵，得到发酵物，然后发酵物用0.15微米滤膜过滤，收集滤液，得到活化液。
c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用4℃的保护液对着活化卵喷洒，待活化卵表面保护液晾干后再次喷洒1次保护液，晾干表面保护液，然后置于冷库中冷藏96小时，设置冷库温度为2℃，得到冷藏卵；所述保护液包括以下重量份比的原料：山梨醇4份、甘油3份、环糊精1.4份、海藻糖1.1份和乙酸乙酯0.3份；
其中，保护液的制备方法为：按重量份比，取山梨醇置于甘油中，搅拌均匀，得到混合液，备用；取海藻糖，在8℃下加入乙酸乙酯搅拌润湿，然后继续保持8℃加入环糊精，混合均匀，接着加入上述混合液，搅拌均匀，得到保护液。
d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，设置蚕室温度为12℃、湿度为70％，回温时间为1.5小时，然后升高蚕室温度至28℃进行催青，催青9小时，得到转青卵；
e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用光照强度为30lux的荧光灯对转青卵进行45分钟的感光，保持荧光灯与转青卵的距离在85cm，孵化得到蚁蚕。
实施例6
除步骤a中消毒液的制备采用水代替乙醇水溶液外，其余方法同实施例5。
实施例7
除步骤a中消毒液的制备不加入蛇油外，其余方法同实施例5。
实施例8
除不进行步骤b的蚕卵活化外，其余方法同实施例5。
实施例9
除步骤b中不加入海藻糖外，其余方法同实施例5。
实施例10
除步骤c中的保护液制备时不加入乙酸乙酯润湿外，其余方法同实施例5。
实施例11
除步骤c中的保护液制备时不加入乙酸乙酯润湿，也不加入环糊精包合外，其余方法同实施例5。
实施例12实施效果对比
1.实验样品制备：选择同一批越年卵和不越年卵，养蚕量以1张蚕卵计，分别按实施例1-11的方法孵化，得到实验样品1-11。
2.评价方法：分别统计实验样品1-11中越年卵和不越年卵的一日孵化率和蚁蚕平均体重；同时，按常规饲养方法将蚁蚕喂养至四眠五龄熟蚕，待结茧后，分别随机抽取每份实验样品的越年卵和不越年卵蚕茧各50粒进行称重，统计平均重量，并分别统计蚕茧产量。
3.实验结果
表1蚁蚕和蚕茧评价结果
从表1结果看出，实验样品1-5的评价结果优于实验样品6-11。
实验样品6中的消毒液采用水作为溶剂，使蚕卵壳表面水分过多，透气性变差，影响了一日孵化率和蚁蚕重量，导致蚕茧质量和产量下降。
实验样品7的消毒液中没有加入蛇油，使消毒液的浸润效果变差，抑菌抗菌效果下降，导致蚕卵一日孵化率和蚁蚕重量均下降，蚕茧质量和产量降低。
实验样品8的蚕卵省略了活化步骤，使蚕卵的生长发育速度变慢，成熟时间较晚，一日孵化率和蚁蚕重量受到影响，导致蚕茧质量和产量下降。
实验样品9的活化液中没有加入海藻糖，使活化液中的生物酶活性结构缺乏保护，活性下降，导致蚕卵一日孵化率和蚁蚕重量下降，蚕茧质量和产量下降。
实验样品10的保护液制备时没有加入乙酸乙酯进行湿润，实验样品11的保护液在制备时没有加入乙酸乙酯和环糊精，均使海藻糖对蛋白质和细胞壁的保护功能下降，使蚕卵一日孵化率、蚁蚕重量、蚕茧质量和产量降低。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。
Claims (8)
1.一种蚕卵孵化方法，其特征在于，包括以下步骤：
a.蚕卵消毒：取装有蚕卵的蚕匾，置于蚕室中，设置蚕室温度为14-18℃、湿度为20％-30％，用消毒液对蚕卵进行消毒，消毒液的温度为16-20℃；所述蚕卵为越年卵和不越年卵，所述越年卵和不越年卵分别置于不同的蚕匾上；
b.蚕卵活化，得活化卵：调节蚕室温度为8-12℃、湿度为25％-35％，然后取消毒后的蚕卵，用8-12℃的活化液浸渍15-30分钟，接着取出，得活化卵；所述活化液包括以下重量份比的原料：凉开水120-130份、桑叶8-10份、橙皮4-6份、竹叶3-5份、西瓜皮2-4份、酸奶2-3份、海藻糖1-2份和酒曲1-2份；
c.活化卵保护、冷藏，得冷藏卵：取活化卵，使用2-6℃的保护液对着活化卵喷洒，待活化卵表面保护液晾干后再次喷洒1次保护液，晾干表面保护液，然后置于冷库中冷藏72-120小时，设置冷库温度为0-4℃，得到冷藏卵；所述保护液包括以下重量份比的原料：山梨醇3-5份、甘油2-4份、环糊精1.2-1.8份、海藻糖0.8-1.4份和乙酸乙酯0.2-0.4份；
d.冷藏卵催青，得转青卵：取冷藏卵，置于蚕室中进行回温，设置蚕室温度为8-16℃、湿度为65％-75％，回温时间为1-2小时，然后升高蚕室温度至27-29℃进行催青，催青8-10小时，得到转青卵；
e.转青卵感光孵化，得蚁蚕：用光照强度为25-35lux的荧光灯对转青卵进行40-50分钟的感光，保持荧光灯与转青卵的距离在80-90cm之间，孵化得到重量在700μg以上的蚁蚕。
2.根据权利要求1所述的一种蚕卵孵化方法，其特征在于，步骤b中所述活化液的制备方法为：按重量份比，取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，置于真空罐中，然后加入凉开水、酸奶、海藻糖和酒曲，搅拌均匀，接着密封，设置真空罐的真空度为50～60kPa、发酵温度为32-34℃，进行50-60个小时发酵，得到发酵物，然后发酵物用0.1-0.2微米滤膜过滤，收集滤液，得到活化液。
3.根据权利要求1所述的一种蚕卵孵化方法，其特征在于，步骤c中所述保护液的制备方法为：按重量份比，取山梨醇置于甘油中，搅拌均匀，得到混合液，备用；取海藻糖，在6-10℃下加入乙酸乙酯搅拌润湿，然后继续保持6-10℃加入环糊精，混合均匀，接着加入上述混合液，搅拌均匀，得到保护液。
4.根据权利要求1所述的一种蚕卵孵化方法，其特征在于，步骤a中所述消毒液包括以下重量份比的原料：艾叶5-9份、青蒿3-5份、鱼腥草2-4份、蛇油0.3-0.4份、桉油0.1-0.3份、丙酮40-50份和乙醇水溶液70-80份；所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为54％-60％。
5.根据权利要求4所述的一种蚕卵孵化方法，其特征在于，所述消毒液的制备方法为：按重量份比，取艾叶、青蒿和鱼腥草，加入丙酮，在60-70℃回流提取25-35分钟，然后过滤，收集滤渣，接着在滤渣中加入乙醇水溶液，微波萃取30-40分钟后，过滤，收集滤液，得到提取液；接着在提取液中加入蛇油和桉油，混合均匀，得到消毒液。
6.根据权利要求1、4或5所述的一种蚕卵孵化方法，其特征在于，所述消毒液的使用方法为：取消毒液进行喷洒，喷洒体积为4-5ml/张蚕卵。
7.根据权利要求1、4或5所述的一种蚕卵孵化方法，其特征在于，所述消毒液的使用方法为：将蚕卵连同蚕匾一起，置于消毒液中浸渍5-7分钟。
8.根据权利要求1所述的一种蚕卵孵化方法，其特征在于，步骤a中所述不越年卵在消毒前进行预处理，所述预处理方法为：取不越年卵置于第一催青室中，设置催青室温度为25-28℃、湿度为70％-74％，放置48-72小时。
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