CN109557233B - 一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法 - Google Patents
一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109557233B CN109557233B CN201910086778.1A CN201910086778A CN109557233B CN 109557233 B CN109557233 B CN 109557233B CN 201910086778 A CN201910086778 A CN 201910086778A CN 109557233 B CN109557233 B CN 109557233B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- paeoniflorin
- solution
- sample
- reference substance
- components
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 45
- 235000006484 Paeonia officinalis Nutrition 0.000 title claims abstract description 25
- 241001106477 Paeoniaceae Species 0.000 title claims abstract description 24
- YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N paeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(CO)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 92
- YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N Paeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@]1(C[C@@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N 0.000 claims abstract description 68
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims abstract description 50
- 244000236658 Paeonia lactiflora Species 0.000 claims abstract description 19
- 235000008598 Paeonia lactiflora Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 51
- UILPJVPSNHJFIK-UHFFFAOYSA-N Paeonol Chemical compound COC1=CC=C(C(C)=O)C(O)=C1 UILPJVPSNHJFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- VFPFQHQNJCMNBZ-UHFFFAOYSA-N ethyl gallate Chemical compound CCOC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 VFPFQHQNJCMNBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- QJYNZEYHSMRWBK-NIKIMHBISA-N 1,2,3,4,6-pentakis-O-galloyl-beta-D-glucose Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)=C1 QJYNZEYHSMRWBK-NIKIMHBISA-N 0.000 claims description 48
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 45
- QQUHMASGPODSIW-UHFFFAOYSA-N Albiflorin Natural products C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC12C(=O)OC3(C)CC(O)C1CC32OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O QQUHMASGPODSIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- QQUHMASGPODSIW-ICECTASOSA-N albiflorin Chemical compound O([C@@]12C[C@H]3[C@H](O)C[C@@]1(OC(=O)[C@]32COC(=O)C=1C=CC=CC=1)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QQUHMASGPODSIW-ICECTASOSA-N 0.000 claims description 28
- LATYEZNGPQKAIK-UHFFFAOYSA-N 6'-O-benzoylpaeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(COC(=O)C=6C=CC=CC=6)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=CC=C1 LATYEZNGPQKAIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- LATYEZNGPQKAIK-HRCYFWENSA-N Benzoylpaeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@]1(C[C@@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C=2C=CC=CC=2)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 LATYEZNGPQKAIK-HRCYFWENSA-N 0.000 claims description 27
- VIWQCBZFJFSCLC-UHFFFAOYSA-N alpha-benzoyloxypaeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(COC(=O)C=6C=CC=CC=6)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 VIWQCBZFJFSCLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 claims description 26
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 claims description 26
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 claims description 26
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 claims description 26
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 claims description 26
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 claims description 26
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 claims description 26
- 235000019277 ethyl gallate Nutrition 0.000 claims description 25
- -1 hydroxy paeoniflorin Chemical compound 0.000 claims description 25
- YLTGFGDODHXMFB-UHFFFAOYSA-N isoacetovanillon Natural products COC1=CC=C(C(C)=O)C=C1O YLTGFGDODHXMFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- MLIBGOFSXXWRIY-UHFFFAOYSA-N paeonol Natural products COC1=CC=C(O)C(C(C)=O)=C1 MLIBGOFSXXWRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- KLFIUQCKSSAFFU-QHOIGUMUSA-N Galloylpaeoniflorin Natural products O=C(OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@]23[C@]4(COC(=O)c5ccccc5)[C@@H]5O[C@@]2(C)C[C@@](O)(O5)[C@@H]4C3)O1)c1cc(O)c(O)c(O)c1 KLFIUQCKSSAFFU-QHOIGUMUSA-N 0.000 claims description 24
- KLFIUQCKSSAFFU-ANNBSXMPSA-N galloylpaeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@@]1(C[C@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 KLFIUQCKSSAFFU-ANNBSXMPSA-N 0.000 claims description 24
- 239000004262 Ethyl gallate Substances 0.000 claims description 23
- 238000012937 correction Methods 0.000 claims description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 18
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 18
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 17
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 16
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical group OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 12
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 11
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 9
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 7
- VYQNWZOUAUKGHI-UHFFFAOYSA-N monobenzone Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1OCC1=CC=CC=C1 VYQNWZOUAUKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 claims description 7
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 claims description 7
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 5
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 101100379079 Emericella variicolor andA gene Proteins 0.000 claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 13
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 8
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- FBSFWRHWHYMIOG-UHFFFAOYSA-N methyl 3,4,5-trihydroxybenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 FBSFWRHWHYMIOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000009835 oxypaeoniflora Substances 0.000 description 2
- FCHVXNVDFYXLIL-QYDSDWLYSA-N oxypaeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@@]1(C[C@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FCHVXNVDFYXLIL-QYDSDWLYSA-N 0.000 description 2
- RLXWQODPAWIVOI-UHFFFAOYSA-N oxypaeoniflorin Natural products OCC1OC(OC23CC4C5(O)CC2OC(O5)C34COC(=O)c6ccc(O)cc6)C(O)C(O)C1O RLXWQODPAWIVOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013441 quality evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 2
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000736199 Paeonia Species 0.000 description 1
- 241000218201 Ranunculaceae Species 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 230000001914 calming effect Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- IBKQQKPQRYUGBJ-UHFFFAOYSA-N methyl gallate Natural products CC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 IBKQQKPQRYUGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000035900 sweating Effects 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
- G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
- G01N2030/884—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本发明公开了一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法。该方法采用液相色谱分析技术，借助一测多评方法，能以芍药苷单一对照品对白芍提取液中的11种指标成分同时进行含量测定。该方法准确性好，能以较低成本对白芍提取液的质量进行评价，可解决因待测成分对照品缺乏而无法进行含量测定的问题，有助于更全面地对白芍及其相关中药制剂进行质量评价与控制。
Description
技术领域
本发明属于中药成分含量测定领域，具体涉及一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法。
背景技术
白芍由毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根置沸水中煮后除去外皮或去皮后再煮，晒干而得。白芍是临床广泛使用的中药，具有药养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳的功效。现代药理研究表明，白芍在抗炎、镇痛、神经***保护、保肝等方面具有良好的药效。白芍是中药处方中的常见药味，许多中成药生产过程中都需要对白芍进行提取。建立白芍提取液的质量分析方法有助于白芍及其相关中药制剂的质量评价与控制。
2015版《中国药典》仅以芍药苷为指标成分对白芍进行含量测定。公开号为CN102138985B的中国专利文献公开了一种白芍制剂中芍药苷和芍药内酯苷的含量测定方法以及指纹图谱分析方法。指纹图谱分析虽然能以半定量的方式进行质量评价，但不能对各指标成分的含量进行准确测定。公开号为CN102495143A的中国专利文献公开了一种测定白芍中芍药苷、芍药内酯苷和芍药苷亚硫酸酯3种化合物的方法。公开号为CN102297918A的中国专利文献公开了一种白芍及其炮制品中9种化合物（没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷、丹皮酚）同时测定的方法。公开号为CN106841450A的中国专利文献公开了一种同时测定芍药中9种化合物（芍药苷、氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、苯甲酸、儿茶素、丹皮酚、没食子酸、五没食子酰葡萄糖）的方法。此外，也有多篇学术论文报道了白芍中上述成分及没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、苯甲酰芍药苷亚硫酸酯等成分的含量测定方法。然而，上述方法在应用时都需要使用待测成分的对照品，而一些成分对照品紧缺、价格昂贵，待测成分越多分析成本越高。
一测多评法是一种基于待测成分间的相对校正因子，以一个内参物对照品代替多个成分对照品进行定量的方法，可用于解决对照品紧缺和检测成本高的问题，是一种符合中药特点的多指标质量评价新模式。现有学术论文（一测多评法测定白芍中5种成分含量，中药材，39(8):1810-1813；一测多评法测定白芍中的五种成分含量，皖西学院学报，34(5):85-88）报道的白芍一测多评方法仅能同时测定5种成分，因此，为了以较低的分析成本测定更多成分，以更全面地评价白芍及相关中成药的质量，很有必要在现有技术基础之上研究设计出测定白芍提取液中多指标成分含量的方法。
发明内容
本发明的目的是为了解决上述问题，基于一测多评法，提供一种能够准确测定白芍提取液中没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖（1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖的简称）、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚11种成分含量的高效液相色谱分析方法。该方法操作简便、实用性高、检测成本低，可以客观、全面、准确地评价白芍提取液的质量，解决因对照品缺乏而无法准确测定多种指标成分含量的问题。
为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：
一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备
直接将白芍提取液作为供试品溶液进行分析；
（2）对照品溶液的制备
分别精密称取没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚11种成分的对照品适量，分别用体积分数为30~100%的甲醇水溶液溶解并定容，制成具有已知浓度的各指标成分的单一对照品储备液；
再分别精密吸取各成分的单一对照品储备液适量，混合后加体积分数为10~50%的甲醇水溶液稀释得到适宜浓度的混合对照品溶液，备用；
（3）相对校正因子的测定
取步骤（2）制备的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，得到混合对照品溶液中芍药苷和其他各待测成分的峰面积，以芍药苷为内参物，以相对校正因子计算公式f x/s =f x / f s = (m x ×A s ) / (m s × A x )分别计算没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚10种成分对芍药苷的相对校正因子，
式中，f s 为芍药苷的校正因子，f x 为除芍药苷以外的某一待测成分的校正因子，m s 是混合对照品溶液中芍药苷的进样质量，A s 是混合对照品溶液中芍药苷进样质量为m s 时测得的峰面积，m x 是混合对照品溶液中除芍药苷以外的某一待测成分的进样质量，A x 是混合对照品溶液中除芍药苷以外的某一待测成分进样质量为m x 时测得的峰面积；
（4）样品中多指标成分的测定
精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，得到供试品溶液中各待测成分的峰面积，供试品溶液中芍药苷的进样质量m s ’由芍药苷单一对照品溶液以外标定量法测定得到，供试品溶液中除芍药苷以外的其他某一待测成分的进样质量m x ’由公式m x ’= f x/s ×m s ’× (A x ’/ A s ’)计算得到，
式中，A s ’和A x ’分别是供试品溶液中测得的芍药苷和除芍药苷以外的其他某一待测成分的峰面积，f x/s 是步骤（3）测得的没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚10种成分对芍药苷的相对校正因子；
供试品溶液中各待测成分的浓度由测定或计算得到的进样质量m s ’和m x ’经换算得到。
由于羟基芍药苷、没食子酰基芍药苷等成分的对照品价格昂贵，若采用常规的多个对照品外标定量测定方法，分析成本太高，本方法基于一测多评法，能准确且低成本地测定多个成分的含量。
所述测定方法中，高效液相色谱测定的条件为：色谱柱：反相C18色谱柱；流动相：A相为乙腈，B相为磷酸水溶液；洗脱程序为线性梯度洗脱；流速：0.9～1.1 mL/min；柱温：25～30 ℃；检测波长：羟基芍药苷，257 nm ± 2 nm；没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚，274 nm ± 2 nm。
作为优选，所述的流动相中，磷酸水溶液的质量分数为0.005～0.02%。
作为优选，所述的洗脱程序中，乙腈占流动相体积比为：0～20 min，7～9%；20～50min，从7～9%线性增加到23～25%；50～60 min，49～51%；60～68 min，从49～51%线性增加到85～95%。
作为优选，步骤（3）中，没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚10种成分与芍药苷间的相对校正因子分别为0.0349 ± 0.003、0.0615 ± 0.006、0.149 ± 0.01、1.08 ±0.05、0.0328 ± 0.003、0.101 ± 0.01、0.0417 ± 0.004、0.190 ± 0.01、0.607 ±0.03、0.0202 ± 0.002。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
（1）本发明提供一种能够准确测定白芍提取液中11种成分含量的高效液相色谱分析方法，可以更全面、准确地评价白芍提取液的质量。
（2）本发明对流动相的组成、流动相流速、柱温进行了大量筛选，确定采用优选的色谱条件，可以同时保证11个指标成分在色谱分析中达到很好的分离。本发明通过紫外全波长扫描，综合考虑多波长测定的简便性，确定11个指标成分合适的检测波长，可以灵敏地检测各指标成分。
（3）本发明基于一测多评法，利用待测成分间的相对校正因子，以芍药苷单一对照品作为内参物代替多个成分对照品进行定量，可用于解决对照品紧缺和检测成本高的问题。本方法检测成本低、实用性高，具有很好的应用前景和使用价值。
（4）对本发明提供的分析方法进行方法学验证表明，该方法精密度、重复性、准确性、灵敏度均很好。本发明的测定结果通过外标定量法进行验证，结果表明，本发明的测定结果与外标定量法相似度极高，可以准确地测定各指标成分。
附图说明
图1为实施例1中混合对照品的高效液相色谱图；
图2为实施例1中白芍提取液的高效液相色谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
实施例1
一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法，该方法包括以下步骤：
（1）白芍提取液的制备
白芍药材（产地为吉林白山）粉碎、过筛至20~80目，取5 g粉末，加入25 mL容量瓶，加体积分数为70%的乙醇水溶液25 mL超声提取（超声功率500W，40kHz）40 min，提取结束，溶液放冷至常温后，定容至刻度线，即得白芍提取液。
（2）供试品溶液的制备
直接将步骤（1）得到的白芍提取液作为供试品溶液，无前处理和稀释。
（3）对照品溶液的制备
分别精密称取没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷对照品，分别加体积分数30%的甲醇水溶液溶解并定容，制成4.975 mg/mL 没食子酸、2.974 mg/mL 羟基芍药苷、0.7321 mg/mL儿茶素、7.051 mg/mL芍药内酯苷、95.95 mg/mL芍药苷、12.62 mg/mL没食子酸乙酯、0.2959 mg/mL没食子酰基芍药苷、3.838 mg/mL五没食子酰葡萄糖、3.727 mg/mL 苯甲酰芍药苷单一对照品储备液；精密称取苯甲酸、丹皮酚对照品，分别加纯甲醇溶解并定容，制成23.69 mg/mL苯甲酸、4.009 mg/mL丹皮酚单一对照品储备液。
然后分别精密吸取上述各成分的单一对照品储备液，混合后加体积分数30%的甲醇水溶液稀释得到含42.29 μg/mL没食子酸、108.5 μg/mL 羟基芍药苷、56.74 μg/mL儿茶素、409.0 μg/mL芍药内酯苷、6141 μg/mL芍药苷、107.3 μg/mL没食子酸乙酯、136.0 μg/mL没食子酰基芍药苷、343.5 μg/mL五没食子酰葡萄糖、236.9 μg/mL苯甲酸、240.4 μg/mL 苯甲酰芍药苷、36.08 μg/mL丹皮酚的混合对照品溶液，于4℃保存，备用。
（4）相对校正因子的测定
以芍药苷为内参物（以符号s表示），m s 是其进样质量，A s 是内参物进样质量为m s时测得的峰面积，f s = m s / A s 是其校正因子。对于其他待测成分（以符号x表示），m x 是x成分的进样质量，A x 是x成分进样质量为m x 时测得的峰面积，f x = m x / A x 是x成分的校正因子。x成分与s成分间的相对校正因子f x/s 的计算公式为f x/s = f x / f s = (m x ×A s ) / (m s ×A x )。
取步骤（3）制备得到的混合对照品溶液，进样10 μL进行高效液相色谱分析，得到混合对照品溶液的高效液相色谱图（如图1所示），波长274 nm，峰1：没食子酸；峰2：羟基芍药苷；峰3：儿茶素；峰4：芍药内酯苷；峰5：芍药苷；峰6：没食子酸乙酯；峰7：没食子酰基芍药苷；峰8：五没食子酰葡萄糖；峰9：苯甲酸；峰10：苯甲酰芍药苷；峰11：丹皮酚。
色谱图积分得到芍药苷和其他各待测成分的峰面积，并以公式f x/s = (m x ×A s ) /(m s × A x )分别计算各待测成分与芍药苷间的相对校正因子，没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚10种成分对于芍药苷的相对校正因子分别为0.0349、0.0615、0.149、1.08、0.0328、0.101、0.0417、0.190、0.607、0.0202。
（5）样品中多指标成分的测定
取步骤（2）的供试品溶液，进样10 μL注入高效液相色谱仪进行测定，得到白芍提取液的高效液相色谱图（如图2所示），波长274 nm，峰1：没食子酸；峰2：羟基芍药苷；峰3：儿茶素；峰4：芍药内酯苷；峰5：芍药苷；峰6：没食子酸乙酯；峰7：没食子酰基芍药苷；峰8：五没食子酰葡萄糖；峰9：苯甲酸；峰10：苯甲酰芍药苷；峰11：丹皮酚，色谱图积分得到芍药苷和其他各待测成分的峰面积。
供试品溶液中芍药苷的进样质量m s ’由芍药苷对照品以外标定量法测定得到，供试品溶液中其他待测成分的进样质量m x ’由公式m x ’= f x/s ×m s ’×(A x ’/ A s ’)计算得到。此公式中的A s ’和A x ’是对供试品溶液分析测得的内参物和其他待测成分的峰面积，f x/s 是步骤（3）测得的各待测成分与芍药苷间的相对校正因子。由测定或计算得到的进样质量m s ’和m x ’，除以进样体积，计算得到样品中各待测成分的浓度，结果如下：没食子酸18.41 μg/mL、羟基芍药苷58.94 μg/mL、儿茶素60.92 μg/mL、芍药内酯苷347.2 μg/mL、芍药苷5879 μg/mL、没食子酸乙酯61.53 μg/mL、没食子酰基芍药苷96.33 μg/mL、五没食子酰葡萄糖255.8μg/mL、苯甲酸109.3 μg/mL、苯甲酰芍药苷269.4 μg/mL、丹皮酚17.77 μg/mL。
（6）步骤（4）和步骤（5）所用的高效液相色谱参数如下：
仪器：Waters e2695高效液相色谱仪；
色谱柱：Phenomenex Luna C18色谱柱（5 μm，250 × 4.6 mm）；
流动相：质量分数0.01%磷酸水溶液-乙腈；
洗脱程序为线性梯度洗脱，乙腈占流动相体积比为：0~20 min，8%；20~50 min，从8%线性增加到24%；50~60 min，50%；60~68 min，从50%线性增加到90%；
流速：1.0 mL/min；
柱温：27 ℃；
检测波长：羟基芍药苷，257 nm；没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚，274 nm。
（7）本发明方法的方法学考察结果如下：
（7.1）线性关系考察
取步骤（3）制备得到的混合对照品溶液。按步骤（6）中的色谱条件分别进样2、5、10、20、35、50 μL进行测定，记录相应的峰面积。以各成分浓度（μg/mL）乘以进样体积（μL）得到被测成分进样质量（ng）作为自变量X，以峰面积作为因变量Y，进行线性回归。11种成分的回归方程和线性范围如表1所示。结果表明，11个成分在考察的浓度范围内线性关系良好。
表1. 线性关系考察结果
（7.2）精密度、重复性、稳定性考察
取步骤（2）制备得到的同一份供试品溶液，按步骤（6）中的色谱条件重复进样6次，按步骤（5）测得11个成分浓度的RSD如表2所示。结果表明，精密度良好。
由于建立的分析方法没有供试品前处理和稀释过程，所以重复性试验考察方式为取步骤（1）得到的同一份白芍提取液，装到6个进样瓶中作为供试品溶液，按步骤（6）中的色谱条件分别进样分析，按步骤（5）测得11个成分浓度的RSD如表2所示。结果表明，重复性良好。
取步骤（2）制备得到的供试品溶液，在常温下放置0、1、2、4、8、12、24小时后按步骤（6）中的色谱条件进样，按步骤（5）测得11个成分浓度的RSD如表2所示。结果表明，11个成分在常温下24小时内稳定。
表2. 精密度、重复性、稳定性考察结果
（7.3）加样回收率考察
按步骤（1）和步骤（2）分别制备得到6份供试品溶液，按步骤（5）测定11种成分的浓度。分别取6 份供试品溶液各0.1 mL，精密加入步骤（3）制备得到的混合对照品溶液0.1 mL混匀，按步骤（5）测定11种成分浓度，并计算各成分的加样回收率。测定结果如表3所示，加样回收率在96%~107%范围内，表明该方法的准确度良好。
表3. 加样回收率（%）考察结果
（8）本发明方法与外标法测定结果比较
以外标法对步骤（5）中的同一份供试品溶液进行测定，得到各待测成分浓度如下：没食子酸19.18 μg/mL、羟基芍药苷62.44 μg/mL、儿茶素61.22 μg/mL、芍药内酯苷353.7 μg/mL、芍药苷5879 μg/mL、没食子酸乙酯63.09 μg/mL、没食子酰基芍药苷98.35 μg/mL、五没食子酰葡萄糖251.4 μg/mL、苯甲酸112.0 μg/mL、苯甲酰芍药苷268.8 μg/mL、丹皮酚18.42 μg/mL。步骤（5）中本发明方法测定结果与外标法基本一致，相对偏差在-5.7%~+1.7%范围内，表明本发明方法能准确且低成本地测定11种指标成分的含量。
实施例2
一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法，该方法包括以下步骤：
（1）白芍提取液的制备
白芍药材（产地为浙江东阳）粉碎、过筛至20~80目，取5 g粉末，加入25 mL容量瓶，加体积分数为70%的乙醇水溶液25 mL超声提取（超声功率500W，40kHz）40 min，提取结束，溶液放冷至常温后，定容至刻度线，即得白芍提取液。
（2）供试品溶液的制备
直接将步骤（1）得到的白芍提取液作为供试品溶液，无前处理和稀释。
（3）对照品溶液的制备
精密称取芍药苷对照品479.75 mg，加体积分数30%的甲醇水溶液溶解并定容至5mL，制成对照品储备液。
然后精密吸取上述对照品储备液640 μL，加浓度为30%甲醇水溶液稀释定容至10mL，得到浓度为6141 μg/mL的芍药苷对照品溶液，于4℃保存，备用。
（4）样品中多指标成分的测定
取步骤（2）得到的供试品溶液和步骤（3）得到的芍药苷对照品溶液，分别进样10 μL进行高效液相色谱分析，得到白芍提取液的高效液相色谱图和芍药苷对照品溶液的高效液相色谱图，色谱图积分得到白芍提取液中各待测成分的峰面积及芍药苷对照品溶液中芍药苷的峰面积。
供试品溶液中芍药苷的进样质量m s ’由芍药苷对照品溶液以外标定量法测定得到，供试品溶液中其他待测成分的进样质量m x ’由公式m x ’ = f x/s ×m s ’× (A x ’/ A s ’)计算得到。
没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚10种成分对于芍药苷的相对校正因子在本发明方法的开发过程中已测定，具体测定过程可参考实施例1的步骤（4），测定结果分别为0.0349、0.0615、0.149、1.08、0.0328、0.101、0.0417、0.190、0.607、0.0202，可直接使用。
由测定或计算得到的进样质量m s ’和m x ’，除以进样体积，计算得到样品中各待测成分的浓度，结果如下：没食子酸25.09 μg/mL、羟基芍药苷90.08 μg/mL、儿茶素631.0 μg/mL、芍药内酯苷7966 μg/mL、芍药苷6127 μg/mL、没食子酸乙酯0 μg/mL、没食子酰基芍药苷130.3 μg/mL、五没食子酰葡萄糖465.9 μg/mL、苯甲酸573.0 μg/mL、苯甲酰芍药苷372.3 μg/mL、丹皮酚16.96 μg/mL。
（5）步骤（4）所用的高效液相色谱参数如下：
仪器：Waters e2695高效液相色谱仪；
色谱柱：Phenomenex Luna C18色谱柱（5 μm，250 × 4.6 mm）；
流动相：质量分数0.01%磷酸水溶液-乙腈；
洗脱程序为线性梯度洗脱，乙腈占流动相体积比为：0~20 min，8%；20~50 min，从8%线性增加到24%；50~60 min，50%；60~68 min，从50%线性增加到90%；
流速：1.0 mL/min；
柱温：27 ℃；
检测波长：羟基芍药苷，257 nm；没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚，274 nm。
（6）本发明方法与外标法测定结果比较
以外标法对步骤（4）中的同一份供试品溶液进行测定，得到各待测成分浓度如下：没食子酸25.79 μg/mL、羟基芍药苷92.41 μg/mL、儿茶素607.1 μg/mL、芍药内酯苷7913 μg/mL、芍药苷6127 μg/mL、没食子酸乙酯0 μg/mL、没食子酰基芍药苷131.2 μg/mL、五没食子酰葡萄糖460.6 μg/mL、苯甲酸572.8 μg/mL、苯甲酰芍药苷368.7 μg/mL、丹皮酚17.64 μg/mL。步骤（4）中本发明方法测定结果与外标法基本一致，相对偏差在-3.9%~+4.0%范围内，表明本发明方法能准确且低成本地测定11种指标成分的含量。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (3)
1.一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备
直接将白芍提取液作为供试品溶液进行分析；
（2）对照品溶液的制备
分别精密称取没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚11种成分的对照品适量，分别用体积分数为30~100%的甲醇水溶液溶解并定容，制成具有已知浓度的各指标成分的单一对照品储备液；
再分别精密吸取各成分的单一对照品储备液适量，混合后加体积分数为10~50%的甲醇水溶液稀释得到适宜浓度的混合对照品溶液，备用；
（3）相对校正因子的测定
取步骤（2）制备的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，得到混合对照品溶液中芍药苷和其他各待测成分的峰面积，以芍药苷为内参物，以相对校正因子计算公式f x/s = f x / f s = (m x ×A s ) / (m s ×A x )分别计算没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚10种成分对芍药苷的相对校正因子，
式中，f s 为芍药苷的校正因子，f x 为除芍药苷以外的某一待测成分的校正因子，m s 是混合对照品溶液中芍药苷的进样质量，A s 是混合对照品溶液中芍药苷进样质量为m s 时测得的峰面积，m x 是混合对照品溶液中除芍药苷以外的某一待测成分的进样质量，A x 是混合对照品溶液中除芍药苷以外的某一待测成分进样质量为m x 时测得的峰面积；
（4）样品中多指标成分的测定
精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，得到供试品溶液中各待测成分的峰面积，供试品溶液中芍药苷的进样质量m s ’由芍药苷单一对照品溶液以外标定量法测定得到，供试品溶液中除芍药苷以外的其他某一待测成分的进样质量m x ’由公式m x ’ = f x/s ×m s ’×(A x ’/ A s ’)计算得到，
式中，A s ’和A x ’分别是供试品溶液中测得的芍药苷和除芍药苷以外的其他某一待测成分的峰面积，f x/s 是步骤（3）测得的没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚10种成分对芍药苷的相对校正因子；
供试品溶液中各待测成分的浓度由测定或计算得到的进样质量m s ’和m x ’经换算得到；
上述高效液相色谱测定的条件为：色谱柱：反相C18色谱柱；流动相：A相为乙腈，B相为磷酸水溶液，磷酸水溶液的质量分数为0.005~0.02%；洗脱程序为线性梯度洗脱；流速：0.9~1.1 mL/min；柱温：25~30 ℃；所述的洗脱程序中，乙腈占流动相体积比为：0~20 min，7~9%；20~50 min，从7~9%线性增加到23~25%；50~60 min，49~51%；60~68 min，从49~51%线性增加到85~95%。
2.根据权利要求1所述的白芍提取液中多指标成分含量的测定方法，其特征在于，所述测定方法中，高效液相色谱仪的检测波长：羟基芍药苷，257 nm ± 2 nm；没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚，274 nm ± 2 nm。
3.根据权利要求1所述的白芍提取液中多指标成分含量的测定方法，其特征在于，步骤（3）中，没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酸乙酯、没食子酰基芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚10种成分与芍药苷间的相对校正因子分别为0.0349 ± 0.003、0.0615 ± 0.006、0.149 ± 0.01、1.08 ± 0.05、0.0328 ± 0.003、0.101 ± 0.01、0.0417 ± 0.004、0.190 ± 0.01、0.607 ± 0.03、0.0202 ± 0.002。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910086778.1A CN109557233B (zh) | 2019-01-29 | 2019-01-29 | 一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910086778.1A CN109557233B (zh) | 2019-01-29 | 2019-01-29 | 一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109557233A CN109557233A (zh) | 2019-04-02 |
| CN109557233B true CN109557233B (zh) | 2020-08-18 |
Family
ID=65873969
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910086778.1A Active CN109557233B (zh) | 2019-01-29 | 2019-01-29 | 一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109557233B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117074520B (zh) * | 2023-10-12 | 2024-01-05 | 四川聚元药业集团有限公司 | 一种用于白芍提取液成份分析的检测*** |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101073606A (zh) * | 2006-05-18 | 2007-11-21 | 天津天士力制药股份有限公司 | 一种白芍药材的提取分离方法 |
| CN102297918A (zh) * | 2011-01-29 | 2011-12-28 | 辽宁中医药大学 | Hplc波长切换同时测定白芍及炮制品中9种成分含量方法 |
| CN104535677A (zh) * | 2014-12-23 | 2015-04-22 | 江苏省中医药研究院 | 一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法 |
| CN107091893A (zh) * | 2017-05-26 | 2017-08-25 | 浙江中医药大学 | 一种醒脑静注射液或其中间体中多指标成分含量的测定方法 |
| CN108061768A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-05-22 | 广东方制药有限公司 | 一种白芍hplc特征图谱的构建及其检测方法 |
| CN109164184A (zh) * | 2018-10-09 | 2019-01-08 | 江苏农牧科技职业学院 | 一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法 |
-
2019
- 2019-01-29 CN CN201910086778.1A patent/CN109557233B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101073606A (zh) * | 2006-05-18 | 2007-11-21 | 天津天士力制药股份有限公司 | 一种白芍药材的提取分离方法 |
| CN102297918A (zh) * | 2011-01-29 | 2011-12-28 | 辽宁中医药大学 | Hplc波长切换同时测定白芍及炮制品中9种成分含量方法 |
| CN104535677A (zh) * | 2014-12-23 | 2015-04-22 | 江苏省中医药研究院 | 一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法 |
| CN107091893A (zh) * | 2017-05-26 | 2017-08-25 | 浙江中医药大学 | 一种醒脑静注射液或其中间体中多指标成分含量的测定方法 |
| CN108061768A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-05-22 | 广东方制药有限公司 | 一种白芍hplc特征图谱的构建及其检测方法 |
| CN109164184A (zh) * | 2018-10-09 | 2019-01-08 | 江苏农牧科技职业学院 | 一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| HPLC法同时测定赤芍中9个活性成分的含量;王化 等;《中草药》;20180228;第49卷(第3期);第708-711页 * |
| HPLC波长切换法同时测定白芍饮片中9个成分的含量;李伟铭等;《药物分析杂志》;20111231(第12期);第2208-2212页 * |
| 一测多评法测定白芍中5种成分含量;张文生 等;《中药材》;20160831;第39卷(第8期);第1809-1812页 * |
| 一测多评法测定白芍中的五种成分含量;周光姣 等;《皖西学院学报》;20181031;第34卷(第5期);第85-88页 * |
| 一测多评法测定赤芍中不同类型成分的含量;王瑞 等;《沈阳药科大学学报》;20110831;第28卷(第8期);第594-598页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109557233A (zh) | 2019-04-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102928523B (zh) | 一种野菊花指纹图谱的测定方法和野菊花的检测方法 | |
| CN105467059A (zh) | 一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN102038728A (zh) | 灯盏细辛药材的质量控制方法 | |
| CN1141575C (zh) | 一种丹参药材的鉴别方法 | |
| CN104914199A (zh) | 一种中药组合物制剂中十二种成分的含量测定方法 | |
| CN103808835B (zh) | Hplc-dad法同时测定四物汤煎剂中10种化学成分含量的方法 | |
| CN107402265B (zh) | 康媛颗粒指纹图谱的检测方法 | |
| CN114152686A (zh) | 一种包含肉桂的中药复方的指纹图谱构建方法及其应用 | |
| CN111537630A (zh) | 一种妇科再造丸hplc指纹图谱及多指标定量的建立方法 | |
| CN112858549A (zh) | 一种双黄连口服液定量指纹图谱质量监测方法 | |
| CN109557233B (zh) | 一种白芍提取液中多指标成分含量的测定方法 | |
| CN103645251A (zh) | 一种复方阿胶制剂的指纹图谱检测方法 | |
| CN116879424A (zh) | 生血宝制剂中特女贞苷含量测定方法 | |
| CN104614475A (zh) | 一种消渴清颗粒的含量检测方法 | |
| CN115015423B (zh) | 芍药甘草汤中17种化学成分的含量测定方法 | |
| Gao et al. | Establishment and validation of quantitative analysis of multi-components by a single marker for quality control of polygoni multiflori radix | |
| CN110455948B (zh) | 一种头痛宁胶囊指纹图谱检测方法 | |
| Bo et al. | Quantitative determination of multiple components in Herba Epimedii using a single reference standard: a comparison of two methods | |
| CN112213404B (zh) | 一种三七药酒指纹图谱构建及其含量测定方法 | |
| Xie et al. | Simultaneous quantification of five compounds from Nauclea officinalis leaves by High Performance Liquid Chromatography | |
| CN113341007A (zh) | 一种基于hplc特征图谱的枣仁安神胶囊全药味多成分含量测定方法 | |
| CN102998386A (zh) | 一种用高效液相色谱测定白芍愈伤组织中白芍双苷的方法 | |
| CN114113356A (zh) | 逍遥丸的指纹图谱检测方法 | |
| CN101549081A (zh) | 一种菝葜的质量控制方法 | |
| CN111956734A (zh) | 一种咽康含片的优化提取方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |