CN109528744A - 龙胆苦苷及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了龙胆苦苷在制备降血糖和/或改善糖尿病血管并发症的药物中的应用；以及龙胆苦苷在制备降血脂的药物中的应用；本发明还公开了一种提取龙胆苦苷的方法。本发明中证明了龙胆苦苷能明显降低糖尿病模型小鼠的血糖、糖化血红蛋白、血清蛋白等糖代谢指标，调节模型小鼠血脂及氧化应激指标的异常，显著改善模型小鼠肾功能及肾组织病理、炎性纤维化成分的异常；而且龙胆苦苷在改善LDL‑C、24h尿蛋白等方面效果良好，由此可知，龙胆苦苷是降低血糖、综合改善糖尿病肾病有潜力的中药单体药物。
Description
技术领域
本发明涉及一种降血糖的中药提取物，尤其是龙胆苦苷及其在制备降血糖药物中应用。
背景技术
糖尿病是全球范围内发病率增长最快的疾病之一，是继心血管疾病、肿瘤之后第三大高死亡率疾病。世界卫生组织估计，到2030年，全球糖尿病患者数可能超过3.6亿人，其中90％～95％为2型糖尿病。中国为世界第二大糖尿病国家，国际权威期刊《新英格兰医学杂志》2010年发布的“中国人口糖尿病流行状况”表明，中国年龄标准化的糖尿病发病率为9.7％(男10.6％，女8.8％)；糖尿病的发病率随年龄增长，20～39岁、40～59岁和超过60岁的人口，糖尿病发病率分别为3.2％、11.5％和20.4％。城市人口的发病率高于农村人口(11.4％vs.8.2％)。令人忧虑的是，糖尿病不再只是中老年人病，有向青少年扩大的趋势。随着胰岛素等药物的使用，糖尿病合并酮症酸中毒等糖尿病急性并发症的发病率大幅下降，而糖尿病合并慢性血管并发症等成为糖尿病的主要并发症，是糖尿病致残率、死亡率升高的主要原因。
糖尿病肾病(DN)又称糖尿病性肾小球硬化症，是糖尿病(DM)常见而难治的慢性微血管并发症，弥漫性的肾小球硬化是糖尿病的特异性肾损伤。临床表现为蛋白尿、水肿等，进一步发展可形成氮质血症，***，致残率与死亡率较高。随着糖尿病发病率的升高，糖尿病肾病已成为导致终末期肾衰竭的主要原因。目前多采取控制血糖、ACEI、钙拮抗剂、噻唑烷二酮类降糖药、降脂药等综合治疗，尚缺乏既能降低血糖、又能改善肾脏损伤的疗效满意的针对性药物。
因此，研发具有降低血糖、改善糖尿病肾病的疗效独特的药物，将极大地提高产品的市场竞争力，填补市场空白，产生良好的社会效益、获得可观的经济效益。
龙胆苦苷(Gentiopicrosid)作为龙胆属植物的主要药效成分之一，广泛存在于龙胆草、秦艽等植物的干燥根及根茎。龙胆苦苷在结构上属裂环环烯醚萜苷类化合物，分子式为C16H20O9，易溶解于水、甲醇及乙醇等溶剂，龙胆苦苷在体内分布迅速，肾脏浓度高，经肾***，不易蓄积。龙胆苦苷分子结构式如下所示：
既往研究表明:龙胆苦苷具有抗炎镇痛、保肝利胆、健胃、调节血压等药理作用，但龙胆苦苷在糖尿病及其糖尿病慢性肾脏疾病中的应用尚未见报道。
发明内容
基于上述问题，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种降低血糖、又能改善肾脏损伤的药物。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案包括如下几个方面：
在第一个方面，本发明提供了龙胆苦苷在制备降血糖和/或改善糖尿病血管并发症的药物中的应用。
优选地，所述血管并发症为肾病。
优选地，所述肾病的症状为氧化应激损伤、肾脏肥大、肾脏纤维化中的一种或多种。
在第二个方面，本发明提供了龙胆苦苷在制备降血脂的药物中的应用。
在第三个方面，本发明提供了一种降血糖和/或改善糖尿病血管并发症的药物，所述药物中含有龙胆苦苷。
优选地，所述血管并发症的症状为氧化应激损伤、肾脏肥大、肾脏纤维化中的一种或多种。
在第四个方面，本发明提供了一种降血脂的药物，所述药物中含有龙胆苦苷。
优选地，所述药物剂型为口服剂或注射剂，所述口服剂为片剂或胶囊剂，所述片剂为包衣片、分散片或缓释片，所述胶囊剂为硬胶囊、软胶囊或缓释胶囊。
在第五个方面，本发明提供了一种提取龙胆苦苷的方法，包括如下步骤：
(1)将龙胆草粉碎成粗粉；
(2)通过乙醇回流法或纯水法提取步骤(1)所得粗粉中成分，所得滤液减压浓缩，得到浓缩液；
(3)采用大孔树脂吸附法对步骤(2)所得浓缩液进行分离、纯化，再经冷冻干燥得纯度>95％的龙胆苦苷。
综上所述，本发明的有益效果为：
本发明中证明了龙胆苦苷能明显降低糖尿病模型小鼠的血糖、糖化血红蛋白、血清蛋白等糖代谢指标，调节模型小鼠血脂及氧化应激指标的异常，显著改善模型小鼠肾功能及肾组织病理、炎性纤维化成分的异常；而且龙胆苦苷在改善LDL-C、24h尿蛋白等方面效果良好，由此可知，龙胆苦苷是降低血糖、综合改善糖尿病肾病有潜力的中药单体药物。
附图说明
图1是检测龙胆苦苷对模型小鼠肝糖原、肝脏组织葡萄糖激酶(GCK)与低密度脂蛋白受体(LDLR)蛋白表达影响的结果图，其中，*与正常组相比，P<0.05；#与模型组比P<0.05；
图2是检测龙胆苦苷对模型小鼠血及肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)影响的结果图，其中，*与正常组相比，P<0.05；#与模型组比P<0.05；
图3是检测龙胆苦苷对糖尿病小鼠肾小球病理HE、PAS、Masson染色影响的结果图，其中，**与正常组相比，P<0.01；#与模型组比P<0.05；
图4是检测龙胆苦苷对糖尿病小鼠肾小球FN免疫组化影响的结果图，其中，**与正常组相比，P<0.01；#与模型组比P<0.05；
图5是检测龙胆苦苷对糖尿病小鼠纤维连接蛋白(FN)、细胞间粘附分子(ICAM-1)、转化生长因子(TGF-β1)等炎性纤维化成分影响的结果图，其中，*与正常组相比，P<0.05；#与模型组比P<0.05。
具体实施方式
糖尿病肾病病变机制尚未完全清楚，目前认为是多因素综合作用的结果，如糖脂代谢紊乱、肾脏血流动力学改变、蛋白质非酶糖基化、氧化应激等因素刺激导致了致多元醇通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路激活，导致了糖尿病状态下肾脏结构与功能的病理改变。近年来越来越多的研究发现，糖脂代谢紊乱、氧化应激及其介导的炎症反应亦参与了DN(糖尿病肾病)的发生发展过程，有人甚至还认为DN是一种慢性炎症。糖尿病状态下，炎症因子如细胞粘附分子(ICAM-1)、转化生长因子(TGF-β)的过度表达，导致持续或放大的炎症反应，促进了肾脏纤维连接蛋白(FN)等细胞外基质的分泌增多，在糖尿病肾病的发生发展中起到了重要的作用。因此，调节糖脂代谢紊乱、抗氧化、抑制肾脏炎性反应将有利于阻抑糖尿病肾病的发生、发展。
本发明提供了一种降低血糖、改善糖尿病肾病的中药单体药物，主要由从龙胆草等植物类中药中提取的有效成分龙胆苦苷。龙胆苦苷是具有良好市场潜力的降低血糖、改善糖尿病肾病的中药单体药物。
在一些实施例中，本发明还提供了龙胆苦苷的提取方法，包括如下步骤：
1)将龙胆草等药材粉碎成粗粉；
2)通过一定浓度乙醇回流法或纯水法提取粗粉中成分，合并滤液，减压浓缩；应用大孔树脂吸附法对滤液进行龙胆苦苷的分离、纯化，冷冻干燥，得纯度>95％龙胆苦苷原料药。
在一些实施例中，将龙胆苦苷加入适量辅料，制成相关口服剂型或注射剂型。为了研究龙胆苦苷对糖尿病小鼠模型血糖、血脂、氧化应激及肾脏损伤的影响，在一些实施例中，采用高糖高脂喂养、加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠模型；观察龙胆苦苷对模型小鼠血糖、糖化血红蛋白、血清蛋白等糖代谢指标的影响，对模型小鼠血脂、氧化应激指标的影响，对模型小鼠肾功能及肾组织病理、炎性纤维化成分的影响，以明确龙胆苦苷对糖尿病小鼠降低血糖、改善糖尿病肾损伤的药理效应。
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。如无特别说明，本发明中的实验方法均采用常规方法。
首先对本发明中涉及的实验材料、仪器和方法进行必要的说明:
(1)试验药物：龙胆苦苷由中山大学药学院药剂实验室分离提取(纯度>95％)，对照药物盐酸二甲双胍片由中美上海施宝贵制药有限公司提供，批号101002，规格0.5g/片。
(2)实验动物：健康雄性C57小鼠，SPF级，体重为7-8周，60只，由中山大学实验动物中心提供。动物实验在中山大学实验动物中心动物实验部屏障环境实验室进行。
(3)试剂：链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)、柠檬酸钠:美国Sigma公司；血清总胆固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肝糖原等测定试剂盒：南京建成生物工程研究所；超氧化歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等测定试剂盒：碧云天；无水乙醇、甲醇、浓硫酸(AR)：广州化学试剂厂；抗鼠二抗、抗兔二抗：美国promega公司；LDLR兔单抗：Proteintech公司；GCK兔多抗：美国Santa CruzBiotechnology公司；FN、ICAM-1、TGF-β兔多抗：abcam公司；α-Tubulin鼠单抗：Sigma公司。
(4)仪器:Beck-manCX-5全自动生化分析；凝胶蛋白分析软件(美国UVP公司)；PVDF膜(美国millipore公司)；通用酶标仪(美国Bio-Tek公司)；台式冷冻高速离心机(Centrifuge 5417R)(德国Eppendorf公司)；Milli.PROTEAN II电泳仪、Mini Trans.Blot电泳转印装置、Gel DoeXR凝胶架(美国Bio.rad公司)。
(5)实验性高糖高脂糖尿病小鼠动物模型的制备：SPF级C57小鼠，使用常规SPF级全价营养饲料适应性饲养两天，随机取10只作为正常对照组，实验过程中始终给予常规SPF级全价营养饲料喂养。其余C57小鼠，以高糖高脂饲料喂养2周后，空腹小时，按40mg/kg的剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ，以柠檬酸钠缓冲液稀释，PH＝4.0，冰盒中新鲜配制)。连续注射5天。C57小鼠腹腔注射STZ后，继续给予高糖高脂饲料喂养，10天后待小鼠血糖稳定后，用血糖仪测定血糖值，以禁食6-8h血糖值≧11.1mmol/L者，为糖尿病小鼠模型。选取模型小鼠50只，分为模型组、龙胆苦苷低剂量组、中剂量组、高剂量组、二甲双胍组。
(6)实验给药及分组：正常对照组、糖尿病模型组、龙胆苦苷低剂量组组(25mg·kg-1·d-1)、龙胆苦苷中剂量组(50mg·kg-1·d-1)、龙胆苦苷高剂量组(100mg·kg-1·d-1)、二甲双胍组(195mg·kg-1·d-1)，每组10只。每天灌胃给药，根据小鼠体重给药，给药体积为0.1mL/10g小鼠。给药时间：9:00-10:30am，每周给药6天，共8周。实验期间除正常对照组外，其余小鼠继续给予高糖高脂饲料，小鼠自由进食、饮水。
观察8周后收集标本，实验结束前一天用代谢笼准确收集24h尿液，进行24h尿蛋白检测；小鼠空腹8小时后，摘眼球取血2ml，离心后留取血清，作生化肾功能检查；小鼠处死后取出肾脏，迅速用预冷生理盐水冲洗,除去被膜,游离肾脏，用滤纸吸干血迹后称双肾重并记录，观察肾脏大小、色泽、质地，使用刀片将左肾沿正中矢状面纵向剖开，将左肾一半放于包埋盒中做好标记再一起放入于4％甲醛液中固定后进行PAS染色处理以及免疫组化检测；左肾另一半及右肾分离肾皮质，将所得的全部肾皮质迅速装入冻存管放入液氮中速冻，后转移到-80℃保存，供western blot检测。
实施例1指标检测
(1)血糖、血脂及肾功能等生化指标的检测
空腹血糖(FBG)采用尾静脉取血，使用血糖仪(美国强生公司)测定血糖值；血清总胆固醇(T-CHO)、血清甘油三脂(TG)分别采用COD-PAP法(单试剂型)、GPO-PAP法(单试剂型)；低密度胆固醇脂蛋白(LDL-C)、高密度胆固醇脂蛋白(HDL-C)采用酶比色法检测；血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白等肾功能指标分别采用肌氨酸氧化酶法、脲酶法、CBB法进行检测，相关检测使用的试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
(2)糖化血清蛋白与血红蛋白的检测
糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HbA1c)分别用果糖胺法、酶比色法进行检测，相关检测使用的试剂盒由南京建成生物研究所提供。
(3)肝糖原、肝脏葡萄糖激酶(GCK)与低密度脂蛋白受体(LDLR)的检测
肝组织中肝糖原含量用酶标法检测，该检测使用的试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；肝脏组织中葡萄糖激酶(GCK)与低密度脂蛋白受体(LDLR)的蛋白表达情况用Wester blotting方法检测。
(4)血与肾脏SOD、MDA的检测
血清及肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA含量分别采用WST-8、硫代巴比妥酸法(TBA)，相关检测使用的试剂盒由碧云天提供。
(5)肾脏肥大指数(体重、肾重比)、病理检测
每周定期称重并记录各组小鼠体重观察其变化，实验结束时以肾重/体重来反映肾脏肥大指数。肾脏组织经10％***液固定后，进行脱水、包埋、常规石蜡制片，切片厚度约为3-4μm，随后对石蜡切片进行HE染色、PAS染色及Masson染色，用细胞成像***(EVOSFL Auto)进行组织学观察。封片一两天后可进行光镜下观察肾脏病理组织学变化，重点观察肾小球的病理改变。
(6)肾脏纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子(TGF-β1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)等炎性纤维化成分检测
肾脏组织中FN、ICAM-1以及TGF-β1的蛋白表达情况用Western blot方法检测。
本实施例的实验结果采用均数±标准误(Mean±SEM)表示，用Graphpad Prism5统计软件进行分析比较，两组组间比较、组内比较用t检验；多组比较用单因素方差分析(one-way ANOVA，Bonferroni法)。若P<0.05则认为有统计学意义。具体的实验结果如下：
1)龙胆苦苷对模型小鼠空腹血糖的影响
从表1中看出，给药前各组成模小鼠的血糖明显高于正常对照组(P<0.05)，且均处于相同水平，给予龙胆苦苷与阳性对照药二甲双胍两周后，与模型组相比，龙胆苦苷低中高三个剂量组与二甲双胍组均能在一定程度上降低小鼠FBG(P<0.05)；随着给药时间的延长，龙胆苦苷给药组的降血糖效应明显增强，给药8周后，与模型组相比，龙胆苦苷中剂量与高剂量组能显著降低小鼠FBG(P<0.05)，且龙胆苦苷高剂量组(100mg/kg)与二甲双胍组(195mg/kg)的FBG较为接近，提示龙胆苦苷具有显著的降血糖作用。
表1龙胆苦苷对STZ诱导的糖尿病小鼠空腹血糖的影响(n＝10)
*P<0.05vs.正常对照组，#P<0.05vs.模型组
2)龙胆苦苷对糖尿病小鼠糖化血红蛋白(HbA1c)及糖化血清蛋白(GSP)的影响
从表2中看出，模型组小鼠的HbA1c和GSP含量明显高于正常对照组(P<0.05)。给药8周后，与模型组相比，龙胆苦苷中、高剂量能明显降低GSP含量(P<0.05)，龙胆苦苷高剂量组能明显降低HbA1c含量(P<0.05)。HbA1c的异常是导致包括糖尿病肾病在内的慢性血管并发症的重要因素，提示龙胆苦苷有改善糖尿病血管并发症(如糖尿病肾病)的作用。
表2龙胆苦苷对STZ诱导的糖尿病小鼠糖化血红蛋白及糖化血清蛋白的影响(n＝10)
| HbA1C(％) | GSP(mmol/L) | |
| 正常对照组 | 8.66±0.79 | 2.79±0.08 |
| 模型组 | 14.52±2.68* | 3.66±0.14* |
| 低剂量组 | 13.31±2.12 | 3.41±0.20 |
| 中剂量组 | 11.59±1.67 | 3.26±0.08# |
| 高剂量组 | 9.94±1.36# | 3.11±0.09# |
| 二甲双胍组 | 10.45±1.19# | 3.25±0.22# |
*P<0.05vs.正常对照组，#P<0.05vs.模型组
3)龙胆苦苷对模型小鼠空腹血脂四项的影响
从表3中看出，模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平与正常组相比均明显升高(P<0.05)。与模型组相比，龙胆苦苷各给药组及二甲双胍组均能明显降低各组小鼠的TG、LDL-C水平(P<0.05)，同时，龙胆苦苷高剂量组与二甲双胍组能明显升高HDL-C水平(P<0.05)，且龙胆苦苷高剂量组对血脂四项的调理作用趋势略优于二甲双胍，提示龙胆苦苷的降血脂作用明确。
表3龙胆苦苷对STZ诱导的糖尿病小鼠血脂四项的影响(n＝10)
*P<0.05vs.正常对照组，#P<0.05vs.模型组
4)龙胆苦苷对模型小鼠肝糖原、肝脏组织葡萄糖激酶(GCK)与低密度脂蛋白受体 (LDLR)蛋白表达的影响
如图1.A所示，与正常组相比，模型组肝脏糖原含量明显降低(P<0.05)。龙胆苦苷中、高剂量组和二甲双胍组与模型组比较，肝糖原含量明显增加(P<0.05)，提示龙胆苦苷具有提高肝糖原的作用。如图1.B所示，与正常组相比，模型组肝脏组织中GCK的蛋白表达明显降低(P<0.05)，龙胆苦苷中、高剂量和二甲双胍组与模型组相比，均能明显提高GCK蛋白的表达(P<0.05)，提示龙胆苦苷能够提高刚脏组织中GCK的蛋白表达。图1.A和图1.B的结果进一步明确了龙胆苦苷可能通过提高肝糖原含量，上调肝脏GCK蛋白表达，发挥调节糖代谢的作用。
如图1.C所示，与正常组相比，模型组肝脏组织中低密度脂蛋白受体(LDLR)的蛋白表达明显降低(P<0.05)，龙胆苦苷各剂量组和二甲双胍组与模型组比较，均能明显提高LDLR的蛋白表达(P<0.05)，提示龙胆苦苷能通过上调LDLR的蛋白表达参与脂代谢的调节。
5)龙胆苦苷对模型小鼠血及肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响
如图2.A、B所示，与正常组相比，模型组血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性明显降低(P<0.05)，脂质过氧化物代谢产物丙二醛(MDA)的含量显著增加(P<0.05)；龙胆苦苷中、高剂量组和二甲双胍组与模型组相比，血清中SOD的活性明显增加，丙二醛的含量显著减少。同样的，与模型组相比，龙胆苦苷中、高剂量组与二甲双胍组也能明显增加肾脏组织中SOD活性(P<0.05)，显著减少MDA含量(P<0.05)。氧化应激损伤是导致糖尿病肾病的中心环节，提示龙胆苦苷可能通过抗氧化应激参与对糖尿病小鼠的肾脏保护作用。
6)龙胆苦苷对糖尿病小鼠肾功能的影响
从表4中看出，与正常组相比，模型组小鼠的肾脏肥大指数明显增加(P<0.05)，血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、24h尿蛋白(UP/24h)等生功能指标明显上升(P<0.05)；龙胆苦苷各组和二甲双胍和模型组相比，能够明显降低肾脏肥大指数(P<0.05)，降低Cr、BUN、UP/24h(P<0.05)。提示龙胆苦苷能明显改善糖尿病模型小鼠的肾功能。
表4龙胆苦苷对STZ诱导的糖尿病肾损伤小鼠肾功能的影响(n＝10)
*P<0.05vs.正常对照组，#P<0.05vs.模型组
7)龙胆苦苷对糖尿病小鼠肾脏病理的影响
进一步观察实验动物肾脏肾小球病变情况，如图3中HE和PAS染色结果所示，与正常小鼠相比，糖尿病小鼠的肾小球体积增大与系膜基质增生明显，系膜区扩张，基底膜增厚，且肾小球内上皮细胞与肾小囊粘连明显，系膜基质指数明显升高(P<0.01)。龙胆苦苷和二甲双胍治疗8周后，龙胆苦苷中、高剂量和二甲双胍均能明显降低系膜基质指数(P<0.01)，明显改善肾脏形态学损伤，包括肾小球内细胞数明显减少、肾小球基底膜增厚及系膜细胞增生明显减轻，同事也减轻肾小球和肾小囊之间的粘连。Masson染色提示，糖尿病小鼠的肾小球中胶原纤维明显增加，而龙胆苦苷低、中、高剂量和二甲双胍治疗后均能得到改善。
纤维连接蛋白(FN)是肾小球细胞外的重要成分，过量的FN生成是促进肾小球纤维化病变的重要原因之一。如图4中FN免疫组化结果所示，糖尿病小鼠肾小球中FN蛋白水平明显增加(P<0.01)，而龙胆苦苷中、高剂量和二甲双胍均能减少肾小球中蛋白水平(P<0.01)。
图3和图4均提示龙胆苦苷能够延缓糖尿病小鼠肾脏病理损害，减少肾脏纤维化。
8)龙胆苦苷对糖尿病小鼠纤维连接蛋白(FN)、细胞间粘附分子(ICAM-1)、转化生 长因子(TGF-β1)等炎性纤维化成分的影响
FN和ICAM-1是肾小球细胞外基质的重要成分，过量的FN和ICAM-1是肾小球纤维化病变的重要原因之一，TGF-β1是肾小球系膜细胞分泌的主要促纤维化因子，促进系膜细胞增殖和肥大，最终加剧肾小球细胞外基质的积聚。我们进一步提取肾脏组织并通过WesternBlotting的方法检测肾脏的FN、ICAM-1及TGF-β1蛋白水平，如图5A、B、C.所示，STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏组织的FN、ICAM-1及TGF-β1的蛋白水平明显增加(P<0.05)，而龙胆苦苷中、高剂量及二甲双胍能够显著降低糖尿病小鼠肾脏的FN、ICAM-1及TGF-β1蛋白水平(P<0.05)。以上结果进一步证明龙胆苦苷减少糖尿病小鼠肾小球炎症纤维化成分的生成，改善肾脏纤维化。
实验结论
龙胆苦苷50mg/kg、100mg/kg剂量组能明显降低糖尿病模型小鼠的血糖、糖化血红蛋白、血清蛋白等糖代谢指标，调节模型小鼠血脂及氧化应激指标的异常，显著改善模型小鼠肾功能及肾组织病理、炎性纤维化成分的异常。与二甲双胍195mg/kg剂量组相比作用类似，且在改善LDL-C、24h尿蛋白等方面显示了一定的作用优势。综上所述，龙胆苦苷是降低血糖、综合改善糖尿病肾病有潜力的中药单体药物。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (9)
1.龙胆苦苷在制备降血糖和/或改善糖尿病血管并发症的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述血管并发症为肾病。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肾病的症状为氧化应激损伤、肾脏肥大、肾脏纤维化中的一种或多种。
4.龙胆苦苷在制备降血脂的药物中的应用。
5.一种降血糖和/或改善糖尿病血管并发症的药物，其特征在于，所述药物中含有龙胆苦苷。
6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，所述血管并发症的症状为氧化应激损伤、肾脏肥大、肾脏纤维化中的一种或多种。
7.一种降血脂的药物，其特征在于，所述药物中含有龙胆苦苷。
8.根据权利要求5或7所述的药物，其特征在于，所述药物剂型为口服剂或注射剂，所述口服剂为片剂或胶囊剂，所述片剂为包衣片、分散片或缓释片，所述胶囊剂为硬胶囊、软胶囊或缓释胶囊。
9.一种提取龙胆苦苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将龙胆草粉碎成粗粉；
(2)通过乙醇回流法或纯水法提取步骤(1)所得粗粉中成分，所得滤液减压浓缩，得到浓缩液；
(3)采用大孔树脂吸附法对步骤(2)所得浓缩液进行分离、纯化，再经冷冻干燥得纯度>95％的龙胆苦苷。
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