CN109503675B - 从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法 - Google Patents

从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109503675B
CN109503675B CN201811491679.3A CN201811491679A CN109503675B CN 109503675 B CN109503675 B CN 109503675B CN 201811491679 A CN201811491679 A CN 201811491679A CN 109503675 B CN109503675 B CN 109503675B
Authority
CN
China
Prior art keywords
filtrate
filtering
volume
filter residue
rubusoside
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811491679.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109503675A (zh
Inventor
李雨嫣
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hunan Food And Drug Vocational College
Original Assignee
Hunan Food And Drug Vocational College
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hunan Food And Drug Vocational College filed Critical Hunan Food And Drug Vocational College
Priority to CN201811491679.3A priority Critical patent/CN109503675B/zh
Publication of CN109503675A publication Critical patent/CN109503675A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109503675B publication Critical patent/CN109503675B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
    • C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C07H15/256—Polyterpene radicals

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供一种从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法，包括粉碎、醇取、过滤、浓缩、水溶、碱溶、过滤，滤渣经黑曲霉发酵、再次醇取、过滤、浓缩、水溶、碱溶，分别上柱层析，洗脱、减压浓缩，结晶重结晶一次得甜茶素纯品和熊果酸纯品。本发明通过微生物转化，提高其功能成分的溶出和转化效率，同时利用黑曲霉产酸中和碱处理物，也有利于黑曲霉快速生长；另外采用醇提、再用水溶和碱溶方式将甜茶素和熊果酸分开，经柱层析和结晶获得高纯度产品，有效防止甜茶素在碱试剂下破坏，提高了其产率。

Description

从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法
技术领域
本发明属于天然产物化学的技术领域，主要涉及一种从甜茶叶中提取甜茶素和熊果酸的方法。
背景技术
甜茶是蔷薇科多年生藤木，为广西特有的一种野生甜味植物，主产于我区大瑶山，由于其味甜，故名甜茶。与罗汉果、甜叶菊并称广西三大甜味植物，在我区民间具有悠久的应用历史，长期以来当地人们一直当茶饮用，亦用来代糖加工食品，还可入药。1979年广西分析测试研究中心就甜茶进行了化学成份分析，确定其含甜味物质的化学结构与甜叶菊甙一致，甜度是蔗糖的300倍，而热值仅是蔗糖的5％。经鉴定，其甜茶素(甜茶糖甙)含量高达6-7％。经药理试验，具有降血糖、降血压、促进新陈代谢抑制胃酸过多，清热润肺、生津解渴、并有高甜度，低热值的特性，可作糖尿病、肥胖症的辅助治疗。对热感、热咳具有较好的疗效，经毒理试验无毒副作用，是世界上一种新型的高级甜味保健饮品。口感清甜爽口，老少皆宜。经常饮用，能强身健体。
国内外对甜茶素和萜类物质的分离提取、功能成分等方面进行了研究，对小规模提取较高纯度的甜茶素和和萜类物质也有报道，公开号为CN 102239983 A的中国专利介绍了一种从甜茶叶中提取甜茶素的方法，采用柱层析、结晶与重结晶等手段进行大规模的制备甜茶素纯品，作为食品添加剂进行添加，广泛应用于肥胖、高血压、糖尿病及心脏病等患者的保健食品。具体过程是采用干燥过后的甜茶叶经用乙醇溶液提取、过滤、减压浓缩，然后用树脂吸附、乙醇洗脱、将洗脱液减压浓缩，脱色，结晶和重结晶制得甜茶素纯品。公开号为CN107513094A的中国专利介绍了一种从甜茶中提取纯化齐墩果酸和熊果酸的工艺方法，包括采用无水乙醇超声波提取、抽滤；浓缩合并后的提取液得浸膏，所得的浸膏用氯仿溶解，浓缩回收氯仿后得褐色浸膏；浸膏用5％氢氧化钠碱溶酸沉、沉淀物用硅胶柱层析分离等方法得到高纯度的齐墩果酸和熊果酸，采用高效液相色谱法进行含量测定，齐墩果酸和熊果酸的纯度均在90％以上，齐墩果酸的得率在20mg/100g以上，熊果酸的得率在90mg/100g以上。
从现有文献资料来看，甜茶的功能成分利用率不高，并作为废弃物进行处理，浪费大量的甜茶资源，若能充分利用甜茶功能成分，能大大降低其有效成分的生产成本和对环境的保护。
发明内容
针对甜茶利用率不高，本发明提供一种甜茶利用率高、方法简单、成本低、功能产品纯度高的甜茶素和熊果酸的制备方法。
因此，本发明提供一种从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法，步骤包括：
(1)粉碎干燥甜茶，加入70～85％乙醇水溶液，在70～80℃进行回流提取1～3h，过滤，得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中乙醇水溶液体积L与甜茶重量kg为2～4:1；
(2)滤液Ⅰ减压浓缩至浸膏，加入水溶解，过滤，得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ，其中加入水体积L与滤液Ⅰ体积L比为1～2:10；
(3)滤渣Ⅱ加入0.2～0.8mol/L氢氧化钠溶液至7.2～7.8，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ；
(4)滤渣Ⅲ与滤渣Ⅰ进行混合，加入4～10％黑曲霉发酵液，常温发酵4～6天，再加入70～85％乙醇水溶液，在70～80℃进行回流提取1～3h，过滤，得滤液Ⅳ和滤渣Ⅳ，其中乙醇水溶液体积L与甜茶重量kg为2～4:1；
(5)滤液Ⅳ减压浓缩至浸膏，加入水溶解，过滤，得滤液Ⅴ和滤渣Ⅴ，其中加入水体积L与滤液Ⅳ体积L比为1～2:10；
(6)滤渣Ⅴ加入0.2～0.8mol/L氢氧化钠溶液至7.2～7.8，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅵ；
(7)将滤液Ⅱ与滤液Ⅴ合并，上XD-5树脂，用三至五倍柱体积的40％～60％乙醇进行洗脱，收集洗脱液Ⅰ，直接加入95％乙醇至终浓度为75％～85％，冰箱放置过夜，结晶重结晶一次得甜茶素纯品；
(8)将滤液Ⅲ与滤液Ⅵ合并，调节至5.5～6.5，再加入两至四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇萃取液，减压浓缩至原有体积的1/5～1/15，直接上D4006大孔树脂柱，用四至六倍柱体积的80％～85％乙醇进行洗脱，减压浓缩至原有体积的1/5～1/10，静置15～30min，趁热过滤1次，所得滤液冰箱放置过夜，结晶与重结晶一次得熊果酸纯品。
上述过滤是指陶瓷膜过滤1次。
上述减压浓缩的温度为40～60℃，采用旋转蒸发器进行减压浓缩。
上述黑曲霉发酵液可以购买，或自制获得--采用常规真菌液体培养基接种黑曲霉菌种，在28～30℃下进行摇床培养2～3天即可，其中加入黑曲霉发酵液的量L与甜茶重量kg比为4～10：100。
技术效果
1、本发明通过微生物转化，提高其功能成分的溶出和转化效率，同时利用黑曲霉产酸中和碱处理物，也有利于黑曲霉快速生长。
2、本发明采用醇提、再用水溶和碱溶方式将甜茶素和熊果酸分开，经柱层析和结晶获得高纯度产品，有效防止甜茶素在碱试剂下破坏，提高了其产率。
3、采用结晶和重结晶进行纯化，工艺简单，易于操作，纯化效率高。
具体实施方式
下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。
实施例1
粉碎100kg干燥甜茶，加入80％乙醇水溶液300L，在80℃进行回流提取2h，过滤，得260L滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；滤液Ⅰ减压浓缩至浸膏，加入30L水溶解，过滤，得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；滤渣Ⅱ加入0.5mol/L氢氧化钠溶液至7.5，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ。
滤渣Ⅲ与滤渣Ⅰ进行混合，加入8L黑曲霉发酵液，常温发酵4～6天，再加入85％乙醇水溶液300L，在80℃进行回流提取2h，过滤，得280L滤液Ⅳ和滤渣Ⅳ；滤液Ⅳ减压浓缩至浸膏，加入35L水溶解，过滤，得滤液Ⅴ和滤渣Ⅴ；滤渣Ⅴ加入0.5mol/L氢氧化钠溶液至7.5，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅵ。
将滤液Ⅱ与滤液Ⅴ合并，上XD-5树脂，用五倍柱体积的55％乙醇进行洗脱，收集洗脱液Ⅰ，直接加入95％乙醇，至溶液中乙醇终浓度为80％，冰箱放置过夜，结晶重结晶一次得3.26kg甜茶素纯品；将滤液Ⅲ与滤液Ⅵ合并，调节至6，再加入四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇萃取液，减压浓缩至原有体积的1/5～1/15，直接上D4006大孔树脂柱(天津鸿博美化工科技有限公司)，用六倍柱体积的80％～85％乙醇进行洗脱，减压浓缩至原有体积的1/5～1/10，静置15～30min，趁热过滤1次，所得滤液冰箱放置过夜，结晶与重结晶一次得1.83kg熊果酸纯品。经HPLC法检测，所获得甜茶素纯品中甜茶素含量为98.68％，熊果酸纯品中熊果酸含量为98.71％。
对照实施例1
粉碎100kg干燥甜茶，加入80％乙醇水溶液300L，在80℃进行回流提取2h，过滤，得260L滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；滤渣Ⅰ再加入85％乙醇水溶液300L，在80℃进行回流提取2h，过滤，得280L滤液Ⅱ。
滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并，减压浓缩至浸膏，加入60L水溶解，过滤，得滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ；滤渣Ⅱ加入0.5mol/L氢氧化钠溶液至7.5，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅳ和滤渣Ⅳ；滤渣Ⅳ加入0.5mol/L氢氧化钠溶液至7.5，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅴ。
将滤液Ⅲ，上XD-5树脂，用五倍柱体积的55％乙醇进行洗脱，收集洗脱液Ⅰ，直接加入95％乙醇，至溶液中乙醇终浓度为80％，冰箱放置过夜，结晶重结晶一次得2.75kg甜茶素纯品；将滤液Ⅴ合并，调节至6，再加入四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇萃取液，减压浓缩至原有体积的1/5～1/15，直接上D4006大孔树脂柱，用六倍柱体积的80％～85％乙醇进行洗脱，减压浓缩至原有体积的1/5～1/10，静置15～30min，趁热过滤1次，所得滤液冰箱放置过夜，结晶与重结晶一次得1.53kg熊果酸纯品。经HPLC法检测，所获得甜茶素纯品中甜茶素含量为98.52％，熊果酸纯品中熊果酸含量为98.48％。

Claims (3)

1.一种从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法，其步骤包括如下：
(1)粉碎干燥甜茶，加入70～85％乙醇水溶液，在70～80℃进行回流提取1～3h，过滤，得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中乙醇水溶液体积L与甜茶重量kg为2～4:1；
(2)滤液Ⅰ减压浓缩至浸膏，加入水溶解，过滤，得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ，其中加入水体积L与滤液Ⅰ体积L比为1～2:10；
(3)滤渣Ⅱ加入0.2～0.8mol/L氢氧化钠溶液至pH7.2～7.8，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ；
(4)滤渣Ⅲ与滤渣Ⅰ进行混合，加入4～10％黑曲霉发酵液，常温发酵4～6天，再加入70～85％乙醇水溶液，在70～80℃进行回流提取1～3h，过滤，得滤液Ⅳ和滤渣Ⅳ，其中乙醇水溶液体积L与甜茶重量kg为2～4:1；
(5)滤液Ⅳ减压浓缩至浸膏，加入水溶解，过滤，得滤液Ⅴ和滤渣Ⅴ，其中加入水体积L与滤液Ⅳ体积L比为1～2:10；
(6)滤渣Ⅴ加入0.2～0.8mol/L氢氧化钠溶液至pH7.2～7.8，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅵ；
(7)将滤液Ⅱ与滤液Ⅴ合并，上XD-5树脂，用三至五倍柱体积的40％～60％乙醇进行洗脱，收集洗脱液Ⅰ，直接加入95％乙醇至终浓度为75％～85％，冰箱放置过夜，结晶重结晶一次得甜茶素纯品；
(8)将滤液Ⅲ与滤液Ⅵ合并，调节至pH5.5～6.5，再加入两至四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇萃取液，减压浓缩至原有体积的1/5～1/15，直接上D4006大孔树脂柱，用四至六倍柱体积的80％～85％乙醇进行洗脱，减压浓缩至原有体积的1/5～1/10，静置15～30min，趁热过滤1次，所得滤液冰箱放置过夜，结晶与重结晶一次得熊果酸纯品。
2.根据权利要求1的方法，所述过滤是指陶瓷膜过滤1次。
3.根据权利要求1的方法，所述减压浓缩的温度为40～60℃，采用旋转蒸发器进行减压浓缩。
CN201811491679.3A 2018-12-07 2018-12-07 从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法 Active CN109503675B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811491679.3A CN109503675B (zh) 2018-12-07 2018-12-07 从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811491679.3A CN109503675B (zh) 2018-12-07 2018-12-07 从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109503675A CN109503675A (zh) 2019-03-22
CN109503675B true CN109503675B (zh) 2021-10-12

Family

ID=65751832

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811491679.3A Active CN109503675B (zh) 2018-12-07 2018-12-07 从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109503675B (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102239983A (zh) * 2011-05-16 2011-11-16 向华 一种从甜茶叶中提取甜茶素的方法
CN104370981A (zh) * 2014-09-30 2015-02-25 桂林市一峰食品有限公司 一种从甜茶中提取甜茶素的方法
CN107513094A (zh) * 2017-09-12 2017-12-26 桂林市产品质量检验所 一种从甜茶中提取纯化齐墩果酸和熊果酸的工艺方法
CN108178775A (zh) * 2017-12-28 2018-06-19 长沙湘资生物科技有限公司 栀子提取栀子甙和熊果酸的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102239983A (zh) * 2011-05-16 2011-11-16 向华 一种从甜茶叶中提取甜茶素的方法
CN104370981A (zh) * 2014-09-30 2015-02-25 桂林市一峰食品有限公司 一种从甜茶中提取甜茶素的方法
CN107513094A (zh) * 2017-09-12 2017-12-26 桂林市产品质量检验所 一种从甜茶中提取纯化齐墩果酸和熊果酸的工艺方法
CN108178775A (zh) * 2017-12-28 2018-06-19 长沙湘资生物科技有限公司 栀子提取栀子甙和熊果酸的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Triterpenoids from the Roots of Rubus parvifolius;Yoon Soo Choi,等;《Arch.Pharm.Res.》;19911231;第14卷(第3期);225-230 *
Ursolic acid analogues: non-phenolic functional food components in Jamaican raspberry fruits;Camille S. Bowen-Forbes，等;《Food Chemistry》;20091231;第116卷;633-637 *
广西甜茶化学成分、提取工艺及生物活性研究进展;谭冬明,等;《中成药》;20170630;第39卷(第6期);1252-1255 *
近5年悬钩子属植物化学成分研究进展;刘敬，等;《时珍国医国药》;20171231;第28卷(第5期);1195-1197 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109503675A (zh) 2019-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109593034B (zh) 一种从银杏叶提取废液中制备莽草酸的方法
CN101497633B (zh) 一种同时制备异甜菊醇和槐糖的方法
CN101100685B (zh) 一种制备l-***糖的方法
CN106520896B (zh) 一种微生物一步发酵转化制备***中间体的方法
KR101566589B1 (ko) 진세노사이드 f2의 함량이 증가된 발효 홍삼의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효 홍삼 추출물
CN103073614A (zh) 一种从黄芪中提取高***芪甲苷的方法
CN101760483A (zh) 一种从新鲜虎杖中制备高***藜芦醇的方法
CN108949839A (zh) 一种高纯度木糖醇及其制备方法
CN109053385A (zh) 一种提取木犀草素和白藜芦醇的方法
CN107602390B (zh) 一种从烟叶中提取绿原酸和东莨菪素的方法
WO2022247097A1 (zh) 一种从罗汉果花中分离出有效成分的方法
CN111187328B (zh) 一种制备罗汉果醇的方法
CN111875482B (zh) 一种从蒿属植物中提取白坚木皮醇的方法
CN109503675B (zh) 从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法
CN113402626A (zh) 一种香水莲花多糖提取物及其制备方法和应用
CN102485736A (zh) 一种常温下从甜菊糖中提取高纯度莱鲍迪苷a的方法
KR101158846B1 (ko) 진세노사이드 컴파운드 케이의 제조방법
CN111233950A (zh) 一种从紫锥菊中提取咖啡酸衍生物的方法
CN110105411B (zh) 一种银锻苷的制备方法
CN113429444B (zh) 一种从甜叶菊母液糖中分离纯化甜茶苷的方法
CN107382936A (zh) 一种从野漆树中提取黄颜木素和野漆树苷的方法
CN113754626A (zh) 一种酶法制备漆黄素的方法
CN103041175B (zh) 一种从绶草中提取生物碱的方法
CN102719485B (zh) 一种利用罗汉果块根中淀粉转化乙醇的方法
CN107573312A (zh) 利用红麸杨提取黄颜木素的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant