CN109503334B - 一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺 - Google Patents

一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN109503334B
CN109503334B CN201811570311.6A CN201811570311A CN109503334B CN 109503334 B CN109503334 B CN 109503334B CN 201811570311 A CN201811570311 A CN 201811570311A CN 109503334 B CN109503334 B CN 109503334B
Authority
CN
China
Prior art keywords
resveratrol
giant knotweed
knotweed rhizome
powder
purity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811570311.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109503334A (zh
Inventor
李冠枚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Guanlong Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Guangdong Guanlong Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Guanlong Biotechnology Co ltd filed Critical Guangdong Guanlong Biotechnology Co ltd
Priority to CN201811570311.6A priority Critical patent/CN109503334B/zh
Publication of CN109503334A publication Critical patent/CN109503334A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109503334B publication Critical patent/CN109503334B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C37/004—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring by obtaining phenols from plant material or from animal material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C37/68—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation
    • C07C37/685—Processes comprising at least two steps in series
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C37/68—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation
    • C07C37/70—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
    • C07C37/82—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment by solid-liquid treatment; by chemisorption
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C37/68—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation
    • C07C37/70—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
    • C07C37/84—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment by crystallisation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/22—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group aromatic

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺，在浸润后的虎杖粉中加入酒酵母、糖化酶、黑曲酶，在28～50℃的容器内，恒温发酵6～24h，使白藜芦醇的类似物转化成白藜芦醇；将发酵好的材料进行逆流加压低温渗流；然后经过浓缩回收乙醇、溶解去杂、氧化铝柱层析、结晶与重结晶，得到纯度为99％以上的白藜芦醇。本发明将白藜芦醇的纯度提高到99％以上，将产品收率从0.5％‑0.9％提高到1.2％以上，并将白藜芦醇产品白度达到80度以上，提高产品质量，真正应用于工业生产，可缩短生产周期，提高生产效率。

Description

一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺
技术领域
本发明属于生物化学领域，具体来说，是从虎杖中提取白藜芦醇的工艺。
背景技术
白藜芦醇是活性较强的多酚类化合物，是一种重要的植物抗毒素，对抑制癌细胞、降低血脂、防治心血管疾病、抗氧化、延缓衰老等作用比较明显，被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌药物。
在1939年首次发现白藜芦醇，20世纪70年代首次发现葡萄中含有这种物质，后来人们发现虎杖、花生、桑椹等植物中也含有这种成分。天然白藜芦醇是一种天然活性成分，它能以游离态(顺式、反式)和糖苷结合态(顺式、反式)2种形式在植物(如中药材虎杖)中分布及生物合成，且均具有抗氧化效能。
目前国内白藜芦醇生产企业大多数采用虎杖为原料进行提取，其采用的工艺路线是：虎杖药材生→物转化→醇提浓缩→活性炭脱色或萃取→干柱柱层析(硅胶或氧化铝)→结晶与重结晶。此工艺路线的最终产品白藜芦醇收率一般只有0.5-0.9％，颜色略带米黄或灰白色，白度在70度左右，白藜芦醇的纯度均在97-98％，市场上当成98％白藜芦醇销售。其价格与99％有较大的差距，如何提高收率和产品含量，同时把产品颜色白度提高到80度以上。是本领域技术人员和企业期待解决的问题。
发明内容
本发明目的是旨在提供了一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺，将白藜芦醇的纯度提高到99％以上，将产品收率从0.5％-0.9％提高到1.2％以上，并将白藜芦醇产品白度达到80度以上，提高产品质量，真正应用于工业生产，可缩短生产周期，提高生产效率。
为实现上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：
一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺，包括如下步骤：
(1)酶转化：加水浸润虎杖粉；用专用酶将浸润后的虎杖粉置于温度控制在28～50℃的容器内，恒温发酵6～24h，使白藜芦醇的类似物转化成白藜芦醇，专用酶为酒酵母+糖化酶+黑曲酶；
(2)逆流加压低温渗漏：发酵好的虎杖材料均匀装入渗漏柱，径高比1:4-5，总共加入虎杖重量3～5倍的乙酸乙酯和石油醚混合试剂，慢慢通过虎杖层，得渗漏液；
(3)浓缩与回收乙醇；将虎杖渗漏液浓缩回收试剂至无试剂，得浸膏；
(4)溶解去杂；采用60-80％乙醇常温溶解浸膏，过滤，得滤液；
(5)层析：将滤液进氧化铝层析柱，待全部液体进完氧化铝柱以后，再用80-95％乙醇洗脱，至检测没有白藜芦醇时为止；
(6)结晶与重结晶；
(7)将结晶低温真空干燥得成品，白藜芦醇≥99％。
优选的，酒酵母、糖化酶、黑曲酶的配比为2:2:1。
优选的，乙酸乙酯和石油醚的重量配比为6-4:1。
作为本发明一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺的一种优选，在步骤(1)之前对虎杖根粉进行干燥，并粉碎到90％以上能通过20目筛。
作为本发明一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺的另一种优选，所述专用酶与所述虎杖粉的投料比为1：99-101。
作为本发明一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺的又一种优选，所述虎杖粉与所述水的投料比为10：2-3。
作为本发明一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺的再一种优选，步骤(1)中的发酵温度为45°，恒温发酵15小时。
作为本发明一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺的又一种优选，在步骤(5)中，将滤液进氧化铝层析柱，自有液体流出时开始分段收集，自流出红至黑色液体时更换氧化铝柱；待全部液体进完氧化铝柱以后，再用用80-95％乙醇洗脱，至检测没有白藜芦醇时为止。
有益效果：(1)提高了成品98％白藜芦醇的产量，将产量从0.5～0.9％提高到1.2％以上，相比提高0.3～0.7％，即每吨同等原料可多得99％白藜芦醇3～7kg，创造新的价值4800～10200元。(2)提高了99％白藜芦醇产品的色泽，去除了普通品种所带的米黄色至灰白色，使最终产品白度达到80％以上的高品质白藜芦醇。(3)减少了萃取这一步，简化了生产操作与生产环节，缩短生产周期23％，使得大生产容易控制和实现，提高了劳动安全与保护。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员可以更好地理解本发明，下面结合实施例对本发明技术方案进一步说明。
实施例1
(1)取干燥的虎杖根500kg，粉碎到通过20目筛≥90％；
(2)酶转化：加水150kg浸润虎杖粉，加入2kg酒酵母、2kg糖化酶、1kg黑曲酶至浸润后的虎杖粉中，搅拌均匀，置于温度控制在45℃的容器内，恒温发酵15小时，使白藜芦醇的类似物转化成白藜芦醇；
(3)逆流加压低温渗漏：发酵好的虎杖材料均匀装入渗漏柱，径高比1:4，总共加入虎杖重量4倍的乙酸乙酯和石油醚混合试剂，慢慢通过虎杖层，得渗漏液；其中乙酸乙酯和石油醚的配比为6:1；
(4)浓缩与回收乙醇；将虎杖渗漏液浓缩回收试剂至无试剂，得浸膏；
(5)溶解去杂；采用70％乙醇常温溶解浸膏，搅拌30分钟，过滤，得滤液；
(6)层析：将滤液进氧化铝层析柱，自有液体流出时开始分段收集，自流出红至黑色液体时更换氧化铝柱；待全部液体进完氧化铝柱以后，再用用85％乙醇洗脱，至检测没有白藜芦醇时为止；
(7)结晶与重结晶：将氧化铝柱上的洗脱液浓缩至醇浓度至45％时进行结晶与重结晶，20度静置10小时，然后过滤，重结晶；
(8)将结晶低温真空干燥得产品6.15kg，经检测白藜芦醇含量为99.3％，白度82度。
实施例2
(1)取干燥的虎杖根500kg，粉碎到通过20目筛≥90％；
(2)酶转化：加水145kg浸润虎杖粉，加入2kg酒酵母、2kg糖化酶、1kg黑曲酶至浸润后的虎杖粉中，搅拌均匀，置于温度控制在42℃的容器内，恒温发酵17小时，使白藜芦醇的类似物转化成白藜芦醇；
(3)逆流加压低温渗漏：发酵好的虎杖材料均匀装入渗漏柱，径高比1:5，总共加入虎杖重量5倍的乙酸乙酯和石油醚混合试剂，慢慢通过虎杖层，得渗漏液；其中乙酸乙酯和石油醚的配比为4:1；
(4)浓缩与回收乙醇；将虎杖渗漏液浓缩回收试剂至无试剂，得浸膏；
(5)溶解去杂；采用70％乙醇常温溶解浸膏，搅拌30分钟，过滤，得滤液；
(6)层析：将滤液进氧化铝层析柱，自有液体流出时开始分段收集，自流出红至黑色液体时更换氧化铝柱；待全部液体进完氧化铝柱以后，再用用85％乙醇洗脱，至检测没有白藜芦醇时为止；
(7)结晶与重结晶：将氧化铝柱上的洗脱液浓缩至醇浓度至38％时进行结晶与重结晶，20度静置15小时，然后过滤，重结晶；
(8)将结晶低温真空干燥得产品6.15kg，经检测白藜芦醇含量为99.3％，白度82度。
以上对本发明提供的一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺进行了详细介绍。具体实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (4)

1.一种从虎杖中制备白藜芦醇的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
(1)加水浸润虎杖粉；将专用酶和浸润后的虎杖粉置于温度控制在28～50℃的容器内，恒温发酵6～24h，使白藜芦醇的类似物转化成白藜芦醇，专用酶为酒酵母、糖化酶、黑曲酶；其中，酒酵母、糖化酶、黑曲酶的配比为2:2:1；
(2)发酵好的虎杖材料均匀装入渗漏柱，径高比1:4-5，总共加入虎杖重量3～5倍的乙酸乙酯和石油醚混合试剂，慢慢通过虎杖层，得渗漏液；
(3)将虎杖渗漏液浓缩回收试剂至无试剂，得浸膏；
(4)采用60-80％乙醇常温溶解浸膏，过滤，得滤液；
(5)将滤液进氧化铝层析柱，自有液体流出时开始分段收集，自流出红至黑色液体时更换氧化铝柱；待全部液体进完氧化铝柱以后，再用80-95％乙醇洗脱，至检测没有白藜芦醇时为止；
(6)结晶与重结晶；
(7)将结晶低温真空干燥得成品，白藜芦醇≥99％。
2.根据权利要求1所述的一种从虎杖中制备白藜芦醇的制备工艺，其特征在于，在步骤(1)之前对虎杖根粉进行干燥，并粉碎到90％以上能通过20目筛。
3.根据权利要求1所述的一种从虎杖中制备白藜芦醇的制备工艺，其特征在于，所述专用酶与所述虎杖粉的投料比为1：99-101。
4.根据权利要求1所述的一种从虎杖中制备白藜芦醇的制备工艺，其特征在于，所述虎杖粉与所述水的投料比为10：2-3。
CN201811570311.6A 2018-12-21 2018-12-21 一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺 Active CN109503334B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811570311.6A CN109503334B (zh) 2018-12-21 2018-12-21 一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811570311.6A CN109503334B (zh) 2018-12-21 2018-12-21 一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109503334A CN109503334A (zh) 2019-03-22
CN109503334B true CN109503334B (zh) 2022-04-12

Family

ID=65755047

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811570311.6A Active CN109503334B (zh) 2018-12-21 2018-12-21 一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109503334B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110066834A (zh) * 2019-04-12 2019-07-30 长沙市惠瑞生物科技有限公司 一种白藜芦醇的提取方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102242159A (zh) * 2011-05-16 2011-11-16 张家界湘汇生物有限责任公司 二步微生物转化法提高虎杖中白藜芦醇含量的方法
CN102250969A (zh) * 2011-05-16 2011-11-23 张家界湘汇生物有限责任公司 从虎杖中制备高***藜芦醇的工艺
CN104388478A (zh) * 2014-11-24 2015-03-04 苏州嘉禧萝生物科技有限公司 一种使用黑曲霉发酵提高白藜芦醇收率的方法
CN107497134A (zh) * 2017-07-24 2017-12-22 张家界湘汇生物有限责任公司 植物有效成分的提取新方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102242159A (zh) * 2011-05-16 2011-11-16 张家界湘汇生物有限责任公司 二步微生物转化法提高虎杖中白藜芦醇含量的方法
CN102250969A (zh) * 2011-05-16 2011-11-23 张家界湘汇生物有限责任公司 从虎杖中制备高***藜芦醇的工艺
CN104388478A (zh) * 2014-11-24 2015-03-04 苏州嘉禧萝生物科技有限公司 一种使用黑曲霉发酵提高白藜芦醇收率的方法
CN107497134A (zh) * 2017-07-24 2017-12-22 张家界湘汇生物有限责任公司 植物有效成分的提取新方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Biotransformation of polydatin to resveratrol in Polygonum cuspidatum roots by highly immobilized edible Aspergillus niger and Yeast;Shuang Jin 等;《Bioresource Technology》;20130315;第767页Table 1 和2 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109503334A (zh) 2019-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104357297B (zh) 一种苦荞养生白酒及其酿造方法
CN103981054B (zh) 一种生物酶酿造油茶酒的方法
CN103478719A (zh) 一种从鲜槟榔中提取槟榔生物素的方法
CN102040579A (zh) 一种利用花生根、茎、叶、壳提取木犀草素的方法
CN102925497A (zh) 一种从虎杖中制备高***藜芦醇的方法
CN110903677A (zh) 一种栀子黄色素与蓝色素同时制备的方法
CN102250969B (zh) 从虎杖中制备高***藜芦醇的工艺
CN109503334B (zh) 一种从虎杖中制备纯度99％白藜芦醇的制备工艺
CN111269171A (zh) 一种高纯度1-脱氧野尻霉素的制备方法
CN102219652B (zh) 一种从虎杖中提取制备水溶性白藜芦醇的方法
CN101531825A (zh) 桑椹红色素提取的工艺
CN110872545A (zh) 一种麦芽啤酒及其制备方法
CN102511593B (zh) 一种迷迭香红茶饮料的制作方法
CN101475965B (zh) 一种用大枣制备乙醇的方法
CN1687095A (zh) 一种利用五倍子制造单宁酸的工艺
CN101891774A (zh) 鼠李糖的生产工艺
CN112707881B (zh) 一种蓝莓花青素的制备方法
CN110256189B (zh) 从番茄皮渣中提取番茄红素的工艺
CN112852182A (zh) 一种黑加仑葡萄干皮渣的色素提取工艺
CN101962386A (zh) 生物复合酶法提取青蒿素的工艺
KR20200138949A (ko) 비타민 나무 열매 추출물을 이용한 발효주 제조 방법
CN107460226B (zh) 粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法
CN106479800A (zh) 一种添加果胶酶的采用余甘果和鱼腥草酿造保健酒的技术方法
CN107573217B (zh) 一种从厚朴中提取厚朴酚及和厚朴酚的方法
CN106754227A (zh) 一种柴胡醋及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant