CN109498701A - 一种防治鹅副粘病毒的中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种防治鹅副粘病毒的中药组合物及其制备方法和应用。该中药组合物由桑黄6～18重量份，猫刺小檗15～45重量份，软水黄连9～27重量份，鸭嘴癀10～30重量份的原料药制成。本发明的中药组合物具有标本兼治，整体疗效高，疗程短，不易产生耐药性，残留低，毒副作用小等优点，对于促进养鹅业的健康发展，具有十分重要的经济效益和社会效益。

Description

一种防治鹅副粘病毒的中药组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于中兽药制药领域，涉及一种鹅用抗病毒中药组合物。本发明还涉及该中药组合物的制备方法及该中药组合物在制备防治鹅副粘病毒的中兽药中的应用。
背景技术
鹅副黏病毒病是鹅的一种以消化道病理变化为特征的急性传染病。对鹅的危害较大，常引起大批死亡，雏鹅死亡率可达90％以上，给养鹅业造成严重的经济损失。鹅副黏病毒病的病原为鹅黏病毒,属副黏病毒科副黏病毒属。病毒广泛存在于病鹅的内脏器官内(脾脏、肝脏、肠管等)。在电子显微镜下观察,病毒颗粒大小不一(平均直径为120纳米),形态不正,表面有密集纤突结构,病毒内部由囊膜包裹着螺旋对称核衣壳。由于鹅副粘病毒可以在鸡胚里繁殖，分离的毒株接种10日龄发育鸡胚后能迅速繁殖,鸡胚在接种后2～3天死亡。
鹅副粘病毒发生后，抗生素、磺胺类药物是无治疗作用的，市场上没有防治鹅副粘病毒的西药，能够防治鹅副粘病毒中兽药也很少，即使有个别品种能够防治鹅副粘病毒，但却存在着容易复发和不能根治的弊病。而且中药的剂型是散剂较多，消化吸收比较慢，口服液可以口服或饮水治疗，吸收快，作用好。我国中药资源丰富，临床上使用已有数千年的历史，而且中药治疗可以起到标本兼治的作用，因此开发能够有效防治鹅副粘病毒病的中药组合物是解决本领域难题的有效途径之一。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鹅用抗副粘病毒中药组合物。
本发明另一个目的是提供上述鹅用抗副粘病毒中药组合物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供中药组合物在制备防治鹅副粘病毒的中兽药物中的应用。
本发明的目的是通过下列技术措施来实施的：
一种防治鹅副粘病毒的中药组合物，该组合物由下列重量份的原料药制成：桑黄6～18重量份，猫刺小檗15～45重量份，软水黄连9～27重量份，鸭嘴癀10～30重量份。
上述组合物优选由下列重量份的原料药组成：桑黄8～12重量份，猫刺小檗15～25重量份，软水黄连11～17重量份，鸭嘴癀12～20重量份。
上述组合物最优选由下列重量份的原料药组成：桑黄8～10重量份，猫刺小檗17～20重量份，软水黄连11～13重量份，鸭嘴癀12～15重量份。
上述中药组合物与药学可接受的辅料制成制剂，优选为口服液。
上述治疗鹅副粘病毒的中药组合物的制备方法包括以下步骤：将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合后加水浸泡，煎煮2-3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至乙醇浓度60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇至乙醇浓度75％～80％，搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩。
上述防治鹅副粘病毒的中药口服液的制备方法包括以下步骤：
将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合后加水浸泡，煎煮2-3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至乙醇浓度60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇至乙醇浓度75％～80％，搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，制成口服液。
上述治疗鹅副粘病毒的中药组合物的方法具体为：将桑黄，猫刺小檗，软水黄连，鸭嘴癀混合，加药材总重6～8倍量水浸泡8～24h，煮沸并维持0.5～1.5h，过滤，滤渣再加药材总重5～8倍量水，煮沸并维持0.5～1.5h，过滤，合并两次滤液，浓缩至稠状，加乙醇调至乙醇浓度60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇至乙醇浓度75％～80％，搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩。
该鹅用抗病毒中药组合物在防治鹅副粘病毒传染病中应用，具有显著疗效，可应用于制备防治鹅副粘病毒的中兽药物。
本发明的有益效果：本发明吸取中兽医学精髓；桑黄，为多孔菌科真菌火木层孔菌Phellinusigniarius(L.exFr).Quel的子实体，归肝、肾经，功能有止血，活血，化软止泻。主治血淋，脱肛泻血，脾虚泄泻，病毒性传染病。猫刺小檗，为小檗科植物猫刺小檗Berberissoulieanaschneid的根，归大肠、心、肝经功能有清热，燥湿，泻火解毒。主治湿热痢疾，腹泻，黄疸，湿疹，疮疡，口疮，目赤，咽痛。软水黄连，为毛莨科植物多枝唐松草ThalictrumramosumBoivin的全草，归肝、大肠经，功能有清热燥湿，解毒。主治痢疾，黄疸，目赤，痈肿疮疖。鸭嘴癀为玄参科植物长蒴母草Linderniaanagallis(Burm.f.)prnnell的全草，归肝、脾经，功能有清热解毒，活血消肿。主治风热，咳嗽，扁桃体炎，肠炎，消化不良，目赤肿痛，痈疽肿毒，犬、蛇咬伤，跌打损伤。
本发明组合物中，桑黄为归肝、肾经，猫刺小檗为归大肠、心、肝经，软水黄连为归肝、大肠经，鸭嘴癀为归肝、脾经，因此，本发明提供一种鹅用抗副粘病毒中药组合物，使用传统中药组方，利用药物的归经，针对病鹅的内脏器官内的鹅副粘病毒，四种组方药物共同协同作用，并结合现代中医药理论，以猫刺小檗为君药，将四味药物配伍，对鹅副粘病毒有显著的防治作用，达到标本兼治的目的。
下面就药效试验进一步说明本发明的疗效。
一、本发明体外抗鹅副粘病毒试验
1、药品：
(1)本发明样品1：按照实施例1方法制备得到，用生理盐水配成每毫升药液含1g生药的浓度。
(2)本发明样品2：按照实施例3方法制备得到，用生理盐水配成每毫升药液含1g生药的浓度。
(3)西药对照药品：将阿德福韦酯胶囊，稀释成2.5mg/mL阿德福韦酯溶液。
2、鹅副粘病毒毒株由扬州大学提供，鸡胚尿囊液的HA效价9log2，经测定，最小致死量为1：100万倍稀释。
3、非免鸡胚购自扬州仪征种鸡场。
4、试验分组鸡胚50个，具体分组情况见表1。
5、试验方法
(1)药物毒性实验将本发明样品1和本发明样品2分别用生理盐水稀释，将原液及不同浓度的药液分别接种于3只10日龄鸡胚的尿囊腔中，每只0.2mL，置37.8℃温箱孵育72h，每天观察存活情况，鸡胚全部存活的最高药液浓度为正式实验起始浓度，同时设生理盐水对照组，药物对鸡胚毒性实验结果见表2。
表1 实验分组情况
表2 中药对鸡胚毒性实验结果
*分母为接种胚数，分子为存活胚数。
(2)本发明药物对鹅副粘病毒病毒的抑制作用测定，具体方法：
试验I组 每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明样品1药液0.2mL，病毒稀释液0.1mL。
试验Ⅱ组 每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明样品2药液0.2mL，病毒稀释液0.1mL。
试验III组 每个鸡胚尿囊腔同时接种2.5mg/mL的阿德福韦酯0.2mL，病毒稀释液0.1mL。
阳性对照组 每个鸡胚尿囊腔同时接种生理盐水0.2mL，病毒0.1mL。
空白对照组 不接种病毒，不给药。
上述鸡胚在37.8℃恒温箱中继续孵化，每天照蛋2～3次，弃去24h内死胚，收取24～72h死胚和72h活胚的尿囊液，低温保存备用。以血凝(HA)实验检测鸡胚尿囊液的病毒效价。
本发明药物对鹅副粘病毒病毒增殖的影响，结果见表3。
表3 本发明药物对鹅副粘病毒病毒增殖的抑制作用测定结果
与阳性对照组比较：*P<0.05，**P<0.01
二、本发明对实验性鹅副粘病毒的治疗试验
1、试验动物：本试验用25日龄雏鹅420只，随机分为14组，每组30只，即本发明样品1(按实施例2制备)预防组与治疗组，本发明样品2(按实施例4制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)预防组与治疗组，本发明样品3(仅采用中药猫刺小檗，按照实施例2方法制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)预防组与治疗组，本发明样品4(仅采用中药软水黄连，按实施例2方法制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)预防组与治疗组，本发明样品5(仅采用中药鸭嘴癀，按实施例2方法制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)预防组与治疗组，西药预防组与治疗组，感染对照组，空白对照组。
2、鹅副粘病毒毒株由扬州大学提供，鸡胚尿囊液的HA效价为9log2。
3、试验方法：
(1)先测定尿囊液最小致死量，经测定尿囊液的最小致死量为1000倍稀释，每只鹅肌肉注射尿囊液0.5mL。
(2)操作：空白对照组的鹅不用药，不接种尿囊液，其余13组的鹅在同一时间里每只肌肉注射尿囊液0.5mL。
(3)用药方法与疗效本发明样品1预防组在接种尿囊液的同时，开始用本发明样品1口服，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品1治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品2预防组在接种尿囊液的同时，用本发明样品2口服，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d；本发明样品2治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品3预防组在接种尿囊液的同时，用本发明样品3口服，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d；本发明样品3治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品4预防组在接种尿囊液的同时，用本发明样品4口服，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d；本发明样品4治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品5预防组在接种尿囊液的同时，用本发明样品5口服，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d；本发明样品5治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鹅每次2mL，每天用药2次，连用4d。阿德福韦酯预防组在接种尿囊液的同时，用50mg/mL的阿德福韦酯口服，每只鹅1mL，每日2次，连用4d。阿德福韦酯治疗组在接种尿囊液4d后(出现症状)，用50mg/mL的阿德福韦酯药物治疗，每只鹅每次1mL口服，每天2次，连用4d。感染对照组的鹅只接种尿囊液，不用任何药物，结果见表4。
表4 鹅副粘病毒预防与治疗结果
编号 组别 接种数/只 发病数/只 康复数/只 死亡数/只 治愈率/％
1 本发明样品1预防组 30 0 28 2 93.3
2 本发明样品1治疗组 30 30 26 4 86.6
3 本发明样品2预防组 30 0 29 1 96.6
4 本发明样品2治疗组 30 30 27 3 90.0
5 本发明样品3预防组 30 15 20 10 66.6
6 本发明样品3治疗组 30 30 18 12 60.0
7 本发明样品4预防组 30 13 21 9 70.0
8 本发明样品4治疗组 30 30 19 11 63.3
9 本发明样品5治疗组 30 25 14 16 46.6
10 本发明样品5治疗组 30 30 11 19 36.6
11 阿德福韦酯预防组 30 16 19 11 63.3
12 阿德福韦酯治疗组 30 30 16 14 53.3
13 感染对照组 30 30 0 30 —
14 空白对照组 30 0 30 0 100
三、本发明对鹅副粘病毒治疗的临床观察
鹅副粘病毒病的潜伏期一般为3-5天，日龄小的雏鹅2-3天，日龄大的鹅3-6天。病鹅表现精神沉郁，食欲减退，缩颈离群，行动迟缓，嗜睡不采食，但饮水似不减少，初期排淡黄绿色、灰白色、蛋清样稀粪；病情严重后，粪便呈暗红色、绿色或墨绿色，混有气泡。行走无力，不愿下水，或浮在水面，随水漂游。出现呼吸困难，甩头咳嗽，鼻孔流出少量浆液性分泌物，喙端及边缘色泽变暗。病程后期，部分患鹅表现扭颈、转圈、仰头，两腿麻痹不能站立，随后抽搐而死，病程长的因消瘦营养不良裒竭而死，部分病鹅能够幸存痊愈，但生长发育不良。雏鹅常在发病后1-2天内死亡，青年鹅、成鹅病和稍长，一般为3-5天。
用本发明样品1(按实施例2制备)和本发明样品2(按实施例4制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)，每只鹅每次口服2mL，每天用药两次，连用4天。在江苏的东台县、宝应县、海安县、扬州江都区对发病鹅进行药物治疗试验，结果见表5、表6。
表5 本发明样品1对鹅副粘病毒临床疗效结果
单位 例数/只 样品1治愈数/只 死亡数/只 治愈率/％
东台县鹅场 915 857 58 93.6
宝应县鹅场 423 382 41 90.3
海安县鹅场 316 291 25 92.1
江都区鹅场 512 456 56 89.1
合计 2166 1986 180 91.7
表6 本发明样品2对鹅副粘病毒临床疗效结果
单位 例数/只 样品2治愈数/只 死亡数/只 治愈率/％
东台县鹅场 731 647 84 88.5
宝应县鹅场 419 395 24 94.2
海安县鹅场 578 527 51 91.1
江都区鹅场 387 361 26 93.3
合计 2115 1930 185 91.2
可见，本发明所制作的药物治疗鹅副粘病毒四千余例，均取得较好疗效，一般治疗2d后停止死亡，3～4d后可治愈，治愈后一般不复发，表明本发明治疗鹅副粘病毒有甚高疗效。
四、安全性评价
取ICR小鼠30只，体重在25～30克，按体重随机分成5组，每组6只，雌雄各半，口服溶液给药(按实施例2制备得到)，给药量分别为0.2毫升/只、0.4毫升/只、0.6毫升/只和0.8毫升/只，每天口服2次，连续给药5天，停药后连续观察20天。对照组自由饮水。结果所有小鼠健存，其活动、饮食、毛发、***物未发现异常，未见毒性反应。对小鼠口腔和破损皮肤进行刺激性试验，未见有刺激性反应和其它不良反应。
具体实施方式：
下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述：
实施例1：
组方：桑黄8g，猫刺小檗17g，软水黄连11g，鸭嘴癀12g
具体制备过程如下：将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合，加药材总重6倍的水浸泡24小时后煎煮2次，每次加水量为药材总重6倍量，每次煮沸后维持1小时，过滤，合并滤液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％，充分搅拌混匀，冷藏静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为80％，搅匀，冷藏静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例2：
组方：桑黄10g，猫刺小檗15g，软水黄连12g，鸭嘴癀12g
具体制备过程如下：将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合，加药材总重8倍的水浸泡24小时后煎煮2次，每次加水量为药材总重8倍量，每次煮沸后维持0.5小时，过滤，合并滤液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％，充分搅拌混匀，冷藏静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，冷藏静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药1g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例3：
组方：桑黄8g，猫刺小檗25g，软水黄连17g，鸭嘴癀20g
具体制备过程如下：将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合，加药材总重4倍的水浸泡30小时后煎煮2次，每次加水量为药材总重4倍量，每次煮沸后维持0.5小时，过滤，合并滤液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为65％，充分搅拌混匀，冷藏静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为80％，搅匀，冷藏静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药2g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例4：
组方：桑黄12g，猫刺小檗20g，软水黄连11g，鸭嘴癀12g
具体制备过程如下：将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合，加药材总重5倍的水浸泡27小时后煎煮2次，每次加水量为药材总重5倍量，每次煮沸后维持0.5小时，过滤，合并滤液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为70％，充分搅拌混匀，冷藏静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为80％，搅匀，冷藏静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。

Claims (8)

1.一种防治鹅副粘病毒的中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药制成：桑黄6～18重量份，猫刺小檗15～45重量份，软水黄连9～27重量份，鸭嘴癀10～30重量份。
2.根据权利要求1所述的防治鹅副粘病毒的中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药制成：桑黄8～12重量份，猫刺小檗15～25重量份，软水黄连11～17重量份，鸭嘴癀12～20重量份。
3.根据权利要求1所述的防治鹅副粘病毒的中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药制成：桑黄8～10重量份，猫刺小檗17～20重量份，软水黄连11～13重量份，鸭嘴癀12～15重量份
4.根据权利1、2或3所述的防治鹅副粘病毒的中药组合物，其特征在于所述中药组合物与药学可接受的辅料制成制剂。
5.根据权利4所述的防治鹅副粘病毒的中药组合物，其特征在于所述的剂型是口服液。
6.一种权利要求1、2或3所述的防治鹅副粘病毒的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合后加水浸泡，煎煮2-3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至乙醇浓度60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇至乙醇浓度75％～80％，搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩。
7.一种权利要求5所述的防治鹅副粘病毒的中药口服液的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
将桑黄、猫刺小檗、软水黄连、鸭嘴癀混合后加水浸泡，煎煮2-3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至乙醇浓度60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇至乙醇浓度75％～80％，搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成口服液。
8.权利要求1、2或3所述的防治鹅副粘病毒的中药组合物在制备防治鹅副粘病毒的中兽药物中的应用。
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CN109045127A (zh) * 2018-10-15 2018-12-21 江苏农牧科技职业学院 一种药物组合物在防治鸡传染性支气管炎的应用

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