CN109369226A - 一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥及应用 - Google Patents
一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109369226A CN109369226A CN201811336356.7A CN201811336356A CN109369226A CN 109369226 A CN109369226 A CN 109369226A CN 201811336356 A CN201811336356 A CN 201811336356A CN 109369226 A CN109369226 A CN 109369226A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- plant
- soil
- bio
- cadmium
- pseudomonas aeruginosa
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000002689 soil Substances 0.000 title claims abstract description 44
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 31
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 30
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 title claims abstract description 17
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 230000008439 repair process Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 47
- 241000588697 Enterobacter cloacae Species 0.000 claims abstract description 16
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 claims abstract description 16
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims abstract description 15
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 claims abstract description 14
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 claims abstract description 14
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims abstract description 3
- 240000002307 Solanum ptychanthum Species 0.000 claims description 9
- 235000002594 Solanum nigrum Nutrition 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 241000219318 Amaranthus Species 0.000 claims description 7
- 240000008013 Phytolacca acinosa Species 0.000 claims description 7
- 235000009076 Phytolacca acinosa Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000589 Siderophore Substances 0.000 abstract description 12
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 abstract description 12
- 230000028327 secretion Effects 0.000 abstract description 9
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005067 remediation Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 26
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000031068 symbiosis, encompassing mutualism through parasitism Effects 0.000 description 6
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 5
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 244000178993 Brassica juncea Species 0.000 description 2
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 244000284012 Vetiveria zizanioides Species 0.000 description 2
- 235000007769 Vetiveria zizanioides Nutrition 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- YKYOUMDCQGMQQO-UHFFFAOYSA-L cadmium dichloride Chemical compound Cl[Cd]Cl YKYOUMDCQGMQQO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 2
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 2
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 241001269238 Data Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 241000592344 Spermatophyta Species 0.000 description 1
- 241000223261 Trichoderma viride Species 0.000 description 1
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- CEKJAYFBQARQNG-UHFFFAOYSA-N cadmium zinc Chemical compound [Zn].[Cd] CEKJAYFBQARQNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 231100000085 chronic toxic effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- NWFNSTOSIVLCJA-UHFFFAOYSA-L copper;diacetate;hydrate Chemical compound O.[Cu+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O NWFNSTOSIVLCJA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229910052745 lead Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 230000008121 plant development Effects 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000003900 soil pollution Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N uranium(0) Chemical compound [U] JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
- B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
- B09C1/105—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes using fungi or plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
- C05G3/00—Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
- C05G3/80—Soil conditioners
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
本发明公开了一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥及应用,它由铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)、阴沟肠杆菌(Enterobacter Cloacae)、多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)和胶质芽孢杆菌(Bacillus MucilaginosusKrassilnikov)组成,铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的比例为3︰2︰3︰1。本发明中生物菌肥除了能活化土壤重金属镉,改变土壤中镉的有效性外,还能产生植物生长调节物质、分泌抗生素类(IAA和铁载体)物质,促进植物生长,从而提高植物对镉污染土壤的修复效率。
Description
技术领域
本发明属于环境工程技术领域,具体来说,涉及到植物修复土壤镉污染领域。
背景技术
近年全国土壤污染日益严重,2014年环境保护部和国土资源部公布《全国土壤污染状况调查公报》显示全国耕地土壤点位污染物超标率为19.4%,主要污染物为镉、镍、铜等,其中土壤镉超标率达7.0%。
由于镉的难降解性和高积累性,通过急性或慢性毒性作用积累于生物体内,较低浓度就能对植物产生毒害。目前在镉污染土壤修复技术中,植物修复技术因其成本低、绿色净化、环保安全、无二次污染等优点受到人们的重视。
植物修复技术是一种原位修复技术,对土壤扰动小,可永久解决土壤污染问题,并可大面积修复受污染土壤。此外,与其他修复技术相比,植物修复技术成本较低。植物修复技术本身也存在着超积累植物具有个体矮小、生长缓慢、根系扩张深度有限、对重金属的选择性、从根部到茎叶的重金属低转移率等缺陷。
植物修复效率提高依赖于根际微生物和植物本身之间的相互作用。一些实验数据表明植物根部能够跟大量不同微生物相互作用,这些相互作用构成了植物修复程度的主要决定因素。因此,利用植物和微生物相互作用来修复重金属污染的土壤是一个值得考虑的策略。
耐性菌株和植物旺盛生长活动的根系分泌物相互作用,降低了土壤环境的pH值,促进了细菌的生长和土壤重金属的活化,同时根系分泌为土壤提供了微生物生长所需的碳源和能源物质,从而促进了根际微生物的生长和活性。一定程度上活化土壤中的铅镉,从而有利于富集植物对重金属的吸收。杨卓(2009)等研究表明,添加接种由胶质芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌组成的混合微生物制剂,能增加印度芥菜的生物量,活化土壤中的铅镉锌,增强印度芥菜对重金属的提取量,提高了修复效果。靳治国(2010)利用瓶培养法富集技术,从土壤中分别筛出耐Pb的绿色木霉菌、耐Cd的淡紫拟青霄菌,其明显促进了龙葵的生长,同时增加了龙葵整个植株体对Pb、Cd的吸收量。罗雅(2012)在耐性细菌强化香根草修复试验中添加耐性菌株后对香根草生长量和Cd污染的修复有促进作用。
微生物菌与植物相互作用来修复重金属污染的土壤时,需要考虑很多因素,比如菌株之间的拮抗作用,土壤环境影响,与不同植物联合作用差异巨大等。
发明内容
本发明所要解决的技术问题为:如何提供一种微生物和植物联合修复镉污染土壤的生物菌肥,解决现有的微生物菌与植物相互作用来修复重金属污染的土壤时,菌株之间的拮抗作用,与不同植物联合作用差异巨大的问题。
本发明的技术方案为:一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥,它由铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)、阴沟肠杆菌(Enterobacter Cloacae)、多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)和胶质芽孢杆菌(Bacillus MucilaginosusKrassilnikov)组成,铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的比例为3︰2︰3︰1。
进一步地,所述植物为籽粒苋、龙葵或商陆。
当然,该生物菌肥中也可以包括其它非菌类成分,比如载体、培养基成分等。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
1、本发明中所选的铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌四种微生物以特定的比例组合,除了能活化土壤重金属镉,改变土壤中镉的有效性外,还能产生植物生长调节物质、分泌抗生素类(IAA和铁载体)物质,促进植物生长,从而提高植物对镉污染土壤的修复效率。
2、本发明中所选的铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌四种微生物以特定的比例组合,拮抗作用小,能保证每种微生物在镉胁迫条件下都能有效生长,从而保证修复效率。
3、本发明中所选的铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌四种微生物以特定的比例组合,与不同植物联合均能取得很好的修复效果。
附图说明
图1为优势微生物组合镉胁迫下耐性分析。
具体实施方式
通过下面制备流程对本发明作进一步详细阐述。
表1本发明涉及的微生物材料信息如下
以上菌株均为市售菌株,通过公众途径均可购买。
一、镉胁迫下微生物正交组合实验筛选设计
正交组合实验设计4因素3水平,共10个实验;设计镉的浓度为:25mg/L,培养基选用LB液体培养基(LB液体培养基(1L):胰蛋白胨10.0g,酵母提取液2.0g,氯化钠10g,pH=7.0)。
表2微生物正交组合表如下
序号 | 铜绿假单胞菌 | 阴沟肠杆菌 | 多粘类芽孢杆菌 | 胶质芽孢杆菌 |
1 | 0.1ml | 0.1ml | 0.1ml | 0.1ml |
2 | 0.1ml | 0.2ml | 0.2ml | 0.2ml |
3 | 0.1ml | 0.3ml | 0.3ml | 0.3ml |
4 | 0.2ml | 0.1ml | 0.2ml | 0.3ml |
5 | 0.2ml | 0.2ml | 0.3ml | 0.1ml |
6 | 0.2ml | 0.3ml | 0.1ml | 0.2ml |
7 | 0.3ml | 0.1ml | 0.2ml | 0.3ml |
8 | 0.3ml | 0.2ml | 0.3ml | 0.1ml |
9 | 0.3ml | 0.3ml | 0.1ml | 0.2ml |
10 | 0ml | 0ml | 0ml | 0ml |
根据紫外分光光度计OD600吸光值来检测微生物组合菌液浓度,吲哚乙酸和产铁载体能力可判定各微生物组合协同或拮抗作用,进而筛选出镉胁迫下共生效果最佳的优势微生物组合。
1、镉胁迫下微生物组合共生效果的影响
本研究为了分析4种微生物组合共生效果,通过对25ml/L镉胁迫下正交组合实验获得10个正交试验组用于探究微生物的共生效果,如图1所示,发现2号、4号、8号、9号和10号在0D630吸光值均呈上升趋势,证明这5个正交组合在镉胁迫下共生效果明显优于其他组合,在25mg/L镉胁迫下,上述5种组合均体现出较强的镉耐受能力和抗性,可以在镉胁迫下良好的生长。相反25mg/L镉胁迫下其余5组微生物组合均呈先上升后下降趋势,证明这5个组合在刚开始阶段共生效果良好,后期出现拮抗作用,抑制了微生物的生长,体现出了较差的镉耐受能力,无法共同生长,这些原因均导致其不易于后期应用,故而这些正交组合实验组不可选。
2、优势微生物组合IAA、铁载体分泌情况
(1)优势微生物组合IAA分泌情况
植物根际促生细菌能在代谢过程中产生植物激素,其是促进植物生长的重要因素。吲哚乙酸(IAA)是植物体内最为普遍的生长激素,有多种生物功效,包括促进细胞伸长和细胞分化,进而促进植物生长发育,在细菌、真菌、藻类、蕨类和种子植物普遍存在。本研究以吲哚乙酸(IAA)标准液的浓度为横坐标(x),OD530为纵坐标(y)绘制准曲线,得到A组(PC)回归方程为:y=0.0518x+0.0083(R2=0.9949);B组(S2)回归方程为:y=0.0519x+0.106(R2=0.9467)。
本研究以优势微生物组合IAA分泌情况为研究对象,IAA越大,对植物生长的促进效果越好。结果表明5个组合微生物均能产IAA。本研究发现2号、8号和9号优势微生物组合分泌IAA的能力比4号和10号强,分别为19.37mg/L、37.93mg/L和19.32mg/L。即2号、8号和9号组合为优势微生物菌株组合,而4和10号则相对较低分别为13.52mg/L和11.78mg/L,对植物生长的促进效果较小,不易于后期应用。
表3优势微生物组合IAA分泌能力测定
组合序号 | IAA浓度(mg/L) |
2 | 19.37 |
4 | 13.52 |
8 | 37.93 |
9 | 19.32 |
10 | 11.78 |
(2)优势微生物组合铁载体分泌情况
产生铁载体被认为是植物根际促生细菌直接和间接促进植物生长的有效途径之一,也是判断菌株促生能力强弱的指标之一。铁载体能有效的提高土壤金属活性,促进植物根际有益物质的吸收,提高植物自身的生长状况进而更好的提高铀耐受能力。由于检测液吸光值(Ar)数值较大,其A/Ar值越小,菌株产铁载体能力越强。如表所见,2号和8号A/Ar值相对较低,分别为1.24和1.62。本研究发现微生物能正常分泌铁载体,而耐受性越强产铁载体越多,体现出较强的铁载体分泌能力,更能满足植物和微生物对铁的需求,抑制了有害微生物的生长繁殖。
表4优势微生物组合产铁载体能力分析
组合序号 | 铁载体浓度(mg/L) |
2 | 1.24 |
8 | 1.62 |
9 | 1.93 |
综上对IAA和铁载体分泌物的能力的判定,最终发现8号(铜绿假单胞菌0.3ml、阴沟肠杆菌0.2ml、多粘类芽孢杆菌0.3ml和胶质芽孢杆菌0.1ml)分泌情况均高于其他组,可有效促进镉胁迫下植物的生长,可作为植物-微生物联合修复的应用材料。
二、本发明的强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥的制备
分别对铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌进行振荡培养。菌株(OD600=0.8)以0.2ml的菌种接种量接种到液体营养琼脂培养基中,150rpm 28℃振荡培养1d至对数生长期,将菌液转移至无菌离心瓶中8500rpm离心10min收集菌体,并使用去蒸馏水反复清洗,最终将离心的菌体用无菌蒸馏水洗净后稀释至0D600≈1.0(菌液浓度约为108CFU/ml)。将菌体铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌按照体积比3︰2︰3︰1进行混合,得到本发明的生物菌肥。
三、本发明的强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥的应用:
实验用土均来自农田沙土,经自然风干,磨碎过20目筛。以CdCl2·2.5H2O水溶液的形式污染土壤,保持土壤湿润平衡2周,使土壤重金属镉污染水平为100mg/Kg。实施例中所用镉污染土壤均按上述步骤制成。
将平衡好的土壤装入花盆,盆口直径50cm,高30cm,装土壤20Kg;每个实施例各12盆。
具体步骤:各实施例均设两个处理(A、B组),每种处理3次重复求平均值。将株高约8cm籽粒苋、龙葵和商陆幼苗分别移栽至相对应花盆,每盆仅一株幼苗。
各实施例A组每盆1周植株根部加10ml无菌水,B组每盆1周植株根部加10ml生物菌肥,连续处理4次,每天观察、自然生长,整个生长过程不作施肥处理。45天后收获,检测各实施例植株干重和重金属镉含量。
实施例1(实验材料:籽粒苋)
表5实验结果
试验后收获籽粒苋,将植株依次分为根、茎和叶,烘箱恒温105℃烘干,测量植株各组织干重和重金属含量,如表5所示,结果表明:施加本发明的生物菌肥组(B组)籽粒苋植株与未施加组(A组)相比,其地上部分干重、地下部分干重、转移系数和富集系数分别增加99.15%、57.19%、35.16%和45.76%。
实施例2(实验材料:龙葵)
表6实验结果
试验后收获龙葵,将植株依次分为根、茎和叶,烘箱恒温105℃烘干,测量植株各组织干重和重金属含量,如表6所示,结果表明:施加本发明的生物菌肥组(B组)龙葵植株与未施加组(A组)相比,其地上部分干重、地下部分干重、转移系数和富集系数分别增加50.09%、29.16%、28.2%和62.5%。
实施例3(实验材料:商陆)
表7实验结果
试验后收获商陆植株,将植株依次分为根、茎和叶,烘箱恒温105℃烘干,测其植株各组织干重和重金属含量,如表7所示,结果表明:施加本发明的生物菌肥组(B组)商陆植株与未施加组(A组)相比,其地上部分干重、地下部分干重、转移系数和富集系数分别增加46.83%、63.56%、41.39%和66.67%。
以上3个实施例充分证明本发明的生物菌肥可提高籽粒苋、龙葵和商陆三种植物修复镉污染土壤的效率,其主要是本发明的生物菌肥可通过分泌植物生长激素,增强植株地上和地下部位生物量,提升植物体内重金属转移和富集含量,达到提高镉污染土壤的修复效率。
Claims (3)
1.一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥,它由铜绿假单胞菌(PseudomonasAeruginosa)、阴沟肠杆菌(Enterobacter Cloacae)、多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)和胶质芽孢杆菌(Bacillus MucilaginosusKrassilnikov)组成,铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、多粘类芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的比例为3︰2︰3︰1。
2.根据权利要求1所述的一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥在植物修复镉污染土壤上的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述植物为籽粒苋、龙葵或商陆。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201811336356.7A CN109369226B (zh) | 2018-11-09 | 2018-11-09 | 一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201811336356.7A CN109369226B (zh) | 2018-11-09 | 2018-11-09 | 一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥及应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN109369226A true CN109369226A (zh) | 2019-02-22 |
CN109369226B CN109369226B (zh) | 2021-08-03 |
Family
ID=65384478
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201811336356.7A Expired - Fee Related CN109369226B (zh) | 2018-11-09 | 2018-11-09 | 一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥及应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN109369226B (zh) |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110408562A (zh) * | 2019-07-12 | 2019-11-05 | 南京农业大学 | 一种修复镉污染土壤并促进植物生长的复合微生物菌剂的制备方法及应用 |
CN110420996A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-08 | 江西青赣环境科技有限公司 | 一种生态修复重金属污染土壤治理方法 |
CN111518723A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-08-11 | 华南农业大学 | 大猩猩芽孢杆菌yc9l及其应用 |
CN112275795A (zh) * | 2020-10-10 | 2021-01-29 | 山东省科学院生态研究所 | 一种苜蓿-芽孢杆菌联合修复重金属污染土壤的方法 |
CN112795384A (zh) * | 2020-09-21 | 2021-05-14 | 暨南大学 | 一种强化阴沟肠杆菌y16在植物根系定殖的方法 |
CN113812422A (zh) * | 2021-09-07 | 2021-12-21 | 华南农业大学 | 一种多粘类芽孢杆菌和/或其发酵液的应用 |
CN115025763A (zh) * | 2022-05-23 | 2022-09-09 | 湖南凯迪工程科技有限公司 | 一种处理矿山含镉废水的改性功能材料及其制备方法和应用 |
CN115354003A (zh) * | 2022-08-25 | 2022-11-18 | 安徽省农业科学院园艺研究所 | 一种促进葫芦高密度生长并降低镉吸收的菌株及其应用 |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104353661A (zh) * | 2014-10-17 | 2015-02-18 | 广东大众农业科技股份有限公司 | 一种治理重金属污染土壤的方法 |
CN105170621A (zh) * | 2015-09-30 | 2015-12-23 | 河南行知专利服务有限公司 | 一种活化剂和微生物强化植物修复重金属污染土壤的方法 |
CN105344709A (zh) * | 2014-11-18 | 2016-02-24 | 迈科珍生物技术有限公司 | 一种修复有害有机物和/或重金属污染基质的方法 |
CN107185959A (zh) * | 2017-06-15 | 2017-09-22 | 湖南农业大学 | 一种通过种植苋菜减少土壤重金属镉污染的方法 |
CN108265017A (zh) * | 2018-02-23 | 2018-07-10 | 南京农业大学 | 一种促进超积累植物生长及强化萃取土壤重金属的生物修复试剂及修复方法 |
CN108277173A (zh) * | 2018-01-12 | 2018-07-13 | 西北农林科技大学 | 一种提高重金属污染土壤中植物抗性的双接菌方法 |
CN108637010A (zh) * | 2018-03-29 | 2018-10-12 | 上海金禾天地信息科技有限公司 | 一种同时显著降低镉、铅含量高效土壤修复方法 |
CN108640743A (zh) * | 2018-05-22 | 2018-10-12 | 广州草木蕃环境科技有限公司 | 修复重金属污染耕地的钝化调控剂及其制备和使用方法 |
CN108746169A (zh) * | 2018-07-09 | 2018-11-06 | 广东环境保护工程职业学院 | 一种修复土壤重金属镉污染的方法 |
-
2018
- 2018-11-09 CN CN201811336356.7A patent/CN109369226B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104353661A (zh) * | 2014-10-17 | 2015-02-18 | 广东大众农业科技股份有限公司 | 一种治理重金属污染土壤的方法 |
CN105344709A (zh) * | 2014-11-18 | 2016-02-24 | 迈科珍生物技术有限公司 | 一种修复有害有机物和/或重金属污染基质的方法 |
CN105170621A (zh) * | 2015-09-30 | 2015-12-23 | 河南行知专利服务有限公司 | 一种活化剂和微生物强化植物修复重金属污染土壤的方法 |
CN107185959A (zh) * | 2017-06-15 | 2017-09-22 | 湖南农业大学 | 一种通过种植苋菜减少土壤重金属镉污染的方法 |
CN108277173A (zh) * | 2018-01-12 | 2018-07-13 | 西北农林科技大学 | 一种提高重金属污染土壤中植物抗性的双接菌方法 |
CN108265017A (zh) * | 2018-02-23 | 2018-07-10 | 南京农业大学 | 一种促进超积累植物生长及强化萃取土壤重金属的生物修复试剂及修复方法 |
CN108637010A (zh) * | 2018-03-29 | 2018-10-12 | 上海金禾天地信息科技有限公司 | 一种同时显著降低镉、铅含量高效土壤修复方法 |
CN108640743A (zh) * | 2018-05-22 | 2018-10-12 | 广州草木蕃环境科技有限公司 | 修复重金属污染耕地的钝化调控剂及其制备和使用方法 |
CN108746169A (zh) * | 2018-07-09 | 2018-11-06 | 广东环境保护工程职业学院 | 一种修复土壤重金属镉污染的方法 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
刘莉华等: "接种内生细菌对龙葵吸收积累镉的影响 ", 《环境科学学报》 * |
李交昆 等: "根际促生菌强化植物修复重金属污染土壤的研究进展", 《生命科学》 * |
李亮: "《土壤环境的新型生物修复》", 30 June 2017, 天津大学出版社 * |
李素霞: "《土壤-蔬菜***对氮镉互作效应的响应及其调控模式研究》", 31 October 2017, 武汉大学出版社 * |
王东升等: "产铁载体菌对龙葵修复土壤Cd污染的促进效应 ", 《环境工程学报》 * |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110408562B (zh) * | 2019-07-12 | 2021-05-04 | 南京农业大学 | 一种修复镉污染土壤并促进植物生长的复合微生物菌剂的制备方法及应用 |
CN110408562A (zh) * | 2019-07-12 | 2019-11-05 | 南京农业大学 | 一种修复镉污染土壤并促进植物生长的复合微生物菌剂的制备方法及应用 |
CN110420996A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-08 | 江西青赣环境科技有限公司 | 一种生态修复重金属污染土壤治理方法 |
CN111518723A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-08-11 | 华南农业大学 | 大猩猩芽孢杆菌yc9l及其应用 |
CN112795384A (zh) * | 2020-09-21 | 2021-05-14 | 暨南大学 | 一种强化阴沟肠杆菌y16在植物根系定殖的方法 |
CN112275795B (zh) * | 2020-10-10 | 2022-04-08 | 山东省科学院生态研究所 | 一种苜蓿-芽孢杆菌联合修复重金属污染土壤的方法 |
CN112275795A (zh) * | 2020-10-10 | 2021-01-29 | 山东省科学院生态研究所 | 一种苜蓿-芽孢杆菌联合修复重金属污染土壤的方法 |
CN113812422A (zh) * | 2021-09-07 | 2021-12-21 | 华南农业大学 | 一种多粘类芽孢杆菌和/或其发酵液的应用 |
CN113812422B (zh) * | 2021-09-07 | 2022-08-16 | 华南农业大学 | 一种多粘类芽孢杆菌和/或其发酵液的应用 |
CN115025763A (zh) * | 2022-05-23 | 2022-09-09 | 湖南凯迪工程科技有限公司 | 一种处理矿山含镉废水的改性功能材料及其制备方法和应用 |
CN115025763B (zh) * | 2022-05-23 | 2024-02-23 | 湖南凯迪工程科技有限公司 | 一种处理矿山含镉废水的改性功能材料及其制备方法和应用 |
CN115354003A (zh) * | 2022-08-25 | 2022-11-18 | 安徽省农业科学院园艺研究所 | 一种促进葫芦高密度生长并降低镉吸收的菌株及其应用 |
CN115354003B (zh) * | 2022-08-25 | 2023-12-19 | 安徽省农业科学院园艺研究所 | 一种促进葫芦高密度生长并降低镉吸收的菌株及其应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN109369226B (zh) | 2021-08-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109369226A (zh) | 一种强化植物修复镉污染土壤的生物菌肥及应用 | |
CN105170627B (zh) | 一种微生物-植物联合修复镉污染土壤的方法 | |
CN106119170B (zh) | 修复重金属污染土壤的微生物菌株及其应用 | |
CN104450552B (zh) | 一种硫酸盐还原菌‑解磷菌及其在联合修复镉污染土壤中的应用 | |
CN106493167B (zh) | 地衣芽孢杆菌和菌剂及它们的应用和钝化重金属的方法 | |
CN106434374B (zh) | 棘孢木霉及其在重金属污染修复中的应用 | |
CN103923659B (zh) | Nta及微生物菌剂强化高羊茅修复污灌区土壤重金属的方法 | |
CN105255782B (zh) | 对六价铬具有还原能力的纤维菌及用途 | |
CN103589659B (zh) | 一株球状红球菌wj4及其在邻苯二甲酸酯污染土壤修复中的应用 | |
CN104673715B (zh) | 对镉具有固定效应并能促进植物生长的肠杆菌及其应用 | |
CN105802890B (zh) | 一种抗重金属促植物生长的无色杆菌cz207菌株及其用途 | |
CN106167776A (zh) | 一种可活化土壤中重金属镉的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)TH‑35及其应用 | |
CN105170628A (zh) | 一种植物-微生物联合修复铅污染土壤的方法 | |
CN102321554B (zh) | 一种蜡状芽孢杆菌及其作为植物根际促生菌的应用 | |
CN106244500B (zh) | 一株抗锑细菌nxh2及其应用 | |
CN103266073A (zh) | 一种东南景天内生菌及其应用 | |
CN104263682B (zh) | 一株具有多环芳烃降解功能的植物促生内生细菌及其应用 | |
CN106635903A (zh) | 一种提高中重度盐碱地作物耐盐性的促生菌组合 | |
CN106591156A (zh) | 一株黑附球菌fxz2及其应用 | |
CN105985917A (zh) | 一种提高小球藻在养猪废水中生物量的方法 | |
CN111117909B (zh) | 一种耐多重重金属促植物生长的菌株及其应用 | |
CN104877926A (zh) | 一株拮抗黄栌枯萎病菌的菌株及其应用 | |
CN104738091B (zh) | 一种抗花生连作复合菌剂的制备及应用 | |
CN110184225A (zh) | 一株具有PAHs降解能力的根际促生细菌PHE-2及其应用 | |
CN104805036A (zh) | 微杆菌(Microbacterium sp.)J-1在降解多种邻苯二甲酸酯中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20210803 |