CN109207549A - 一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法 - Google Patents

一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109207549A
CN109207549A CN201811306372.1A CN201811306372A CN109207549A CN 109207549 A CN109207549 A CN 109207549A CN 201811306372 A CN201811306372 A CN 201811306372A CN 109207549 A CN109207549 A CN 109207549A
Authority
CN
China
Prior art keywords
liquid
fruiting body
hericium erinaceus
high efficiency
hericium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201811306372.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109207549B (zh
Inventor
肖志勇
方丽金
郑秋芳
叶艳鹏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujian Tuotian Bio-Technology Co Ltd
Original Assignee
Fujian Tuotian Bio-Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujian Tuotian Bio-Technology Co Ltd filed Critical Fujian Tuotian Bio-Technology Co Ltd
Priority to CN201811306372.1A priority Critical patent/CN109207549B/zh
Publication of CN109207549A publication Critical patent/CN109207549A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109207549B publication Critical patent/CN109207549B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P39/00Processes involving microorganisms of different genera in the same process, simultaneously
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,包括:新鲜猴头菇子实体选取,去除劣质部分,水洗,磨浆;将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理,再用超声波进行处理,降温,备用;配制猴头菇子实体母液;将所得母液灭菌后接种混合菌种,发酵培养,然后灭活;所述混合菌种包括乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌;将发酵液进行固液分离,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2加入乙醇,静置分层,弃上清液,然后离心分离,将所得物质干燥。本方法所得提取物的多糖含量高达35%左右且水溶性好,同时提取物收率超过20%,提取物中杂质少,环境友好,可以规模化生产。

Description

一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法
技术领域
本发明涉及植物加工领域,具体涉及一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法。
背景技术
猴头菇(学名:Hericium erinaceus),是中国传统的名贵菜肴,肉嫩、味香、鲜美可口。有“山珍猴头、海味燕窝”之称。这种齿菌科的菌类,菌伞表面长有毛茸状肉刺,长约1~3厘米,它的子实体圆而厚,新鲜时白色,干后由浅黄至浅褐色,基部狭窄或略有短柄,上部膨大,直径3.5~10厘米,远远望去似金丝猴头,故称“猴头菇”,又像刺猬,故又有“刺猬菌”之称。大量的医学研究表明,猴头菇多糖对小白鼠肉瘤180和艾氏腹水癌有明显的抑制作用,同时具有助消化、利五脏的功能,对慢性胃炎、十二指肠溃疡等多种消化道疾病均有较好的疗效,能提高人体免疫能力。猴头菇多糖的主要功效包括:(1)抗溃疡和抗炎作用;(2)抗肿瘤作用;(3)保肝护肝作用;(4)增加免疫力,抗衰老作用;(5)提高机体耐缺氧能力,增加心脏血液输出量,加速机体血液循环;(6)降低血糖和血脂的作用。
多糖的分子量从几千到几百万不等,分子量越大其水溶性越差,猴头菇多糖也不例外。大分子量的猴头菇多糖水溶性差,人体对其的吸收效果也不好。公告号为CN104277128的中国发明专利公开了一种猴头菇子实体多糖的制备工艺,包括如下步骤:配制猴头菇子实体母液;将所得母液接种乳酸菌,发酵培养后灭活;将所得发酵液固液分离,液相浓缩后干燥。该方法利用了乳酸菌的发酵作用,使不溶解于水的多糖变成溶解于水的多糖,提取得到人体更容易吸收的分子量较小的猴头菇多糖。但是提取物收率、提取物中多糖含量仍然较低。
发明内容
本发明的目的在于,针对现有技术的上述不足,提出一种提取物收率高、提取物中多糖含量高、提取到的多糖可溶性好且杂质少的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法。
本发明解决技术问题采用的技术方案是,提出一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,包括下列步骤:
步骤一:新鲜猴头菇子实体选取,去除劣质部分,水洗,磨浆;
步骤二:将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理,再用超声波进行处理,降温,备用;
步骤三:配制猴头菇子实体母液;
步骤四:将所得母液灭菌后接种混合菌种,发酵培养,然后灭活;所述混合菌种包括乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌;
步骤五:将发酵液进行固液分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2加入乙醇,静置分层,弃上清液,然后离心分离,将所得物质干燥。
作为优选,步骤二为:将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理3-8min,再用超声波进行处理5-20min,降温至35℃以下,备用。
作为优选,步骤三为:在步骤二处理后的猴头菇子实体浆料中加水,搅拌,配制得到猴头菇子实体母液;所述配制得到的母液中猴头菇子实体与水的比例为0.03-0.2 g/mL。
作为优选,步骤四所述母液灭菌后接种混合菌种为:将所述母液在65-85℃下灭菌处理10-100min,将所述混合菌种接种于种子罐的猴头菇子实体母液中35-37℃下培养12-28h,所述混合菌种的总接种量为5-10%,所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为(1-5)∶(0.5-2)∶1。
作为优选,步骤四中,所述发酵培养为:对种子罐培养好的培养液进行镜检,确认无杂菌污染;将确认无杂菌污染的培养液接种于发酵罐培养,接种量为5-10%,在35-37℃下培养10-60h,经酸度测试,pH值降到4-4.5即培养完成。
作为优选,步骤五为:将所得发酵液采用板框压滤或减压抽滤的方法分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2浓缩后,缓缓加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀6-40h,吸去上清液至原体积的17%以下,下部混合液进行离心分离,将所得沉淀干燥;所述加入的乙醇与所述稀释后滤液的体积比为(3.5-4.5)∶1。
作为优选,步骤四中,所述灭活的具体条件为:在100-110℃下处理25-35min。
作为优选,所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为(1.9-2.1)∶(0.7-0.8)∶1。
作为优选,步骤五中所述干燥包括下列步骤:
S5.1:将所述沉淀置于冷藏室中冷藏至3-7℃;
S5.2:采用快速冷冻技术,将所述冷藏后的沉淀在5-40min之内冷冻至零下5-零下65℃,得到冷冻后的沉淀;所述快速冷冻技术为干冰冷冻、液氮冷冻、气体涡轮膨胀制冷或玻璃化超快冷冻中的一种;
S5.3:以35-65℃、干燥的非氧化性气体吹于所述冷冻后沉淀的表面,干燥至含水量为1.8-2.5%。
作为优选,本方法还包括步骤六:将所得干燥产物粉碎,包装。
本发明提供的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,具有如下有益效果:
1、将磨浆后的猴头菇子实体,先后用微波、超声波进行破壁处理,微波、超声波能量可以直接进入猴头菇子实体内部,从内部粉碎猴头菇子实体,使多糖等各种成分充分流出,大大提升了多糖等各种成分提取率,有利于最终提升提取物的收率。
2、将步骤三配制的母液灭菌后接种混合菌种,混合菌种包括乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌,同时使用这三种菌种,产生协同效应,一方面,乳酸菌、枯草芽孢杆菌可以相互促进将大分子的不溶性多糖分解成可溶性的小分子多糖,另一方面,乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌可以消耗掉单糖等其它杂质,提升提取物中的多糖含量。
3、步骤五中,将发酵液进行固液分离后,所得滤渣用清水淋洗,淋洗水静置分离取上清液跟滤液1合并,得到液体2,减少了多糖有效成分在滤渣中的损失,提高了提取物的收率;而且,进一步将液体2采用醇沉法处理,去除杂质,提升了猴头菇多糖产品中多糖的含量。
4、步骤五干燥过程中,采用非氧化气氛防氧化、快速冷冻保持物料原有分散度的原理出发,综合运用冷冻干燥、气流干燥技术,通过对干燥过程中气氛、温度、时间的控制,大幅提升了干燥过程中多糖的保留效果,同时实现了产品的干燥;控制干燥后的猴头菇多糖中的水含量为1.8-2.5%,既能防止因含水量过高而发生霉变,又能防止干燥太过彻底而导致多糖成分流失或被破坏,而且,1.8-2.5%的含水量范围采用本发明的方案很容易实现,可操作性强;另外,采用快速冷冻技术,可以在猴头菇多糖内部各组分分散度几乎不变的情况下凝固,形成了大量的固体小颗粒,比表面积大,既能提升后续气流干燥的干燥效果,又能简化干燥产品的破碎步骤。
5、本方法所得提取物的多糖含量高达35%左右且水溶性好,同时提取物收率超过20%,提取物中杂质少,环境友好,可以规模化生产。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例,对本发明的技术方案作进一步的描述,但本发明并不限于这些实施例。
实施例1
步骤一:新鲜猴头菇子实体选取,去除劣质部分,水洗,采用磨浆机磨浆;
步骤二:将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理5.5min,再用超声波进行处理12.5min,降温至35℃以下,备用;
步骤三:在步骤二处理后的猴头菇子实体浆料中加水,搅拌,配制得到猴头菇子实体母液;所述配制得到的母液中猴头菇子实体与水的比例为0.115 g/mL;
步骤四:将所述母液在75℃下灭菌处理55min,将所述混合菌种接种于种子罐的猴头菇子实体母液中36℃下培养20h,所述混合菌种的总接种量为7.5%,所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为3∶1.25∶1;对种子罐培养好的培养液进行镜检,确认无杂菌污染;将确认无杂菌污染的培养液接种于发酵罐培养,接种量为7.5%,在36℃下培养35h,经酸度测试,pH值降到4.25即培养完成;将培养完成后的发酵液在105℃下灭活处理30min;
步骤五:将所得发酵液采用板框压滤或减压抽滤的方法分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2浓缩后,缓缓加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀23h,吸去上清液至原体积的17%以下,下部混合液进行离心分离,将所得沉淀干燥,干燥产物即提取得到的猴头菇多糖;所述加入的乙醇与所述浓缩液的体积比为4∶1;
步骤六:将所得干燥产物粉碎,包装。
步骤五中干燥步骤如下:
S5.1:将所述沉淀置于冷藏室中冷藏至5℃;
S5.2:采用干冰冷冻技术,将所述冷藏后的沉淀在22.5min之内冷冻至零下35℃,得到冷冻后的沉淀;
S5.3:以50℃、干燥的非氧化性气体吹于所述冷冻后沉淀的表面,干燥至含水量为2.15%。
实施例2
步骤一:新鲜猴头菇子实体选取,去除劣质部分,水洗,采用磨浆机磨浆;
步骤二:将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理3min,再用超声波进行处理5min,降温至35℃以下,备用;
步骤三:在步骤二处理后的猴头菇子实体浆料中加水,搅拌,配制得到猴头菇子实体母液;所述配制得到的母液中猴头菇子实体与水的比例为0.03 g/mL;
步骤四:将所述母液在65℃下灭菌处理10min,将所述混合菌种接种于种子罐的猴头菇子实体母液中35℃下培养12h,所述混合菌种的总接种量为5%,所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为1∶0.5∶1;对种子罐培养好的培养液进行镜检,确认无杂菌污染;将确认无杂菌污染的培养液接种于发酵罐培养,接种量为5%,在35℃下培养,经酸度测试,pH值降到4即培养完成;将培养完成后的发酵液在100℃下灭活处理25min;
步骤五:将所得发酵液采用板框压滤或减压抽滤的方法分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2浓缩后,缓缓加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀6h,吸去上清液至原体积的17%以下,下部混合液进行离心分离,将所得沉淀干燥,干燥产物即提取得到的猴头菇多糖;所述加入的乙醇与所述浓缩液的体积比为3.5∶1;
步骤六:将所得干燥产物粉碎,包装。
步骤五中干燥步骤如下:
S5.1:将所述沉淀置于冷藏室中冷藏至3℃;
S5.2:采用玻璃化超快冷冻技术,将所述冷藏后的沉淀在5min之内冷冻至零下65℃,得到冷冻后的沉淀;
S5.3:以35℃、干燥的非氧化性气体吹于所述冷冻后沉淀的表面,干燥至含水量为2.5%。
实施例3
步骤一:新鲜猴头菇子实体选取,去除劣质部分,水洗,采用磨浆机磨浆;
步骤二:将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理8min,再用超声波进行处理20min,降温至35℃以下,备用;
步骤三:在步骤二处理后的猴头菇子实体浆料中加水,搅拌,配制得到猴头菇子实体母液;所述配制得到的母液中猴头菇子实体与水的比例为0.2 g/mL;
步骤四:将所述母液在85℃下灭菌处理100min,将所述混合菌种接种于种子罐的猴头菇子实体母液中37℃下培养28h,所述混合菌种的总接种量为10%,所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为5∶2∶1;对种子罐培养好的培养液进行镜检,确认无杂菌污染;将确认无杂菌污染的培养液接种于发酵罐培养,接种量为10%,在37℃下培养,经酸度测试,pH值降到4.5即培养完成;将培养完成后的发酵液在110℃下灭活处理35min;
步骤五:将所得发酵液采用板框压滤或减压抽滤的方法分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2浓缩后,缓缓加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀40h,吸去上清液至原体积的17%以下,下部混合液进行离心分离,将所得沉淀干燥,干燥产物即提取得到的猴头菇多糖;所述加入的乙醇与所述浓缩液的体积比为4.5∶1;
步骤六:将所得干燥产物粉碎,包装。
步骤五中干燥步骤如下:
S5.1:将所述沉淀置于冷藏室中冷藏至7℃;
S5.2:采用气体涡轮膨胀制冷技术,将所述冷藏后的沉淀在40min之内冷冻至零下5℃,得到冷冻后的沉淀;
S5.3:以65℃、干燥的非氧化性气体吹于所述冷冻后沉淀的表面,干燥至含水量为1.8%。
实施例4
步骤一:新鲜猴头菇子实体选取,去除劣质部分,水洗,采用磨浆机磨浆;
步骤二:将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理5.5min,再用超声波进行处理12.5min,降温至35℃以下,备用;
步骤三:在步骤二处理后的猴头菇子实体浆料中加水,搅拌,配制得到猴头菇子实体母液;所述配制得到的母液中猴头菇子实体与水的比例为0.115 g/mL;
步骤四:将所述母液在75℃下灭菌处理55min,将所述混合菌种接种于种子罐的猴头菇子实体母液中36℃下培养20h,所述混合菌种的总接种量为7.5%,所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为2.0∶0.75∶1;对种子罐培养好的培养液进行镜检,确认无杂菌污染;将确认无杂菌污染的培养液接种于发酵罐培养,接种量为7.5%,在36℃下培养35h,经酸度测试,pH值降到4.25即培养完成;将培养完成后的发酵液在105℃下灭活处理30min;
步骤五:将所得发酵液采用板框压滤或减压抽滤的方法分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2浓缩后,缓缓加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀23h,吸去上清液至原体积的17%以下,下部混合液进行离心分离,将所得沉淀干燥,干燥产物即提取得到的猴头菇多糖;所述加入的乙醇与所述浓缩液的体积比为4∶1;
步骤六:将所得干燥产物粉碎,包装。
步骤五中干燥步骤如下:
S5.1:将所述沉淀置于冷藏室中冷藏至5℃;
S5.2:采用液氮冷冻技术,将所述冷藏后的沉淀在22.5min之内冷冻至零下35℃,得到冷冻后的沉淀;
S5.3:以50℃、干燥的非氧化性气体吹于所述冷冻后沉淀的表面,干燥至含水量为2.15%。
对比例1
将实施例1提取得到的产品、采用CN104277128公开的方法提取得到的猴头菇多糖进行对比,比较提取物收率及提取物中的多糖含量及提取物的水溶性,结果如表1所示。提取物收率计算公式:提取得到的猴头菇多糖的干重质量/新鲜猴头菇干燥后的质量。提取物中的多糖含量采用硫酸苯酚法测定。水溶性测试方法,将0.1g猴头菇多糖放入10mL水中,搅拌10min,观察多糖的溶解情况。
结果表明,本发明的提取方法与CN104277128公开的方法相比,提取物收率和提取物中的多糖含量明显高于CN104277128公开的方法,且提取得到的猴头菇多糖具有较好的水溶性。这归因于:(1)先后用微波、超声波进行破壁处理,能量可以直接进入猴头菇子实体内部,从内部粉碎猴头菇子实体,使多糖等各种成分充分流出,将猴头菇子实体内部的多糖等各种成分充分利用;(2)将步骤三配制的母液灭菌后接种混合菌种,混合菌种包括乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌,同时使用这三种菌种,产生协同效应,一方面,乳酸菌、枯草芽孢杆菌可以相互促进将大分子的不溶性多糖分解成可溶性的小分子多糖,另一方面,乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌可以消耗掉单糖等其它杂质,提升提取物中的多糖含量;(3)步骤五中,将发酵液进行固液分离后,所得滤渣用清水淋洗,淋洗水静置分离取上清液跟滤液1合并,得到液体2,减少了多糖有效成分在滤渣中的损失,提高了提取物的收率;而且,进一步将液体2采用醇沉法处理,去除杂质,提升了猴头菇多糖产品中多糖的含量;(4)步骤五干燥过程中,采用非氧化气氛防氧化、快速冷冻保持物料原有分散度的原理出发,综合运用冷冻干燥、气流干燥技术,通过对干燥过程中气氛、温度、时间的控制,大幅提升了干燥过程中多糖的保留效果,同时实现了产品的干燥;控制干燥后的猴头菇多糖中的水含量为1.8-2.5%,既能防止因含水量过高而发生霉变,又能防止干燥太过彻底而导致多糖成分流失或被破坏。
对比例2
采用控制变量法,改变实施例1步骤二中微波、超声波处理的条件,研究微波、超声波处理对提取物收率及提取物中多糖含量的影响,结果如表2所示。多糖含量的测定方法及提取物收率计算方法同对比例1。若无说明,除变量外的所有实验条件同实施例1。
结果表明,微波、超声波处理大大提升了提取物收率,但对提取物中多糖含量没有明显的影响。这归因于:一方面,微波、超声波能量可以直接进入猴头菇内部,从内部粉碎猴头菇,使多糖等各种成分充分流出,避免有效成分残留和浪费;另一方面,微波、超声波只能使猴头菇内部的各种成分流出,进入浆料之中,但没有提纯多糖的效果。
对比例3
采用控制变量法,改变实施例1步骤四中接种的混合菌种的组成比例,研究在不同混合菌种的组成对提取物收率、提取物中多糖含量、提取物水溶性的影响,结果如表3所示。多糖含量的测定方法、提取物收率计算方法及水溶性测试方法同对比例1。若无说明,除变量外的所有实验条件同实施例1。
结果表明,接种的混合菌种的组成比例对提取物收率没有明显影响,但对提取物中多糖含量、提取物水溶性的影响较大。这归因于:混合菌种同时包括乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌时,产生协同效应,一方面,乳酸菌、枯草芽孢杆菌可以相互促进将大分子的不溶性多糖分解成可溶性的小分子多糖,另一方面,乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌可以消耗掉单糖等其它杂质,提升提取物中的多糖含量。
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代,但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。

Claims (10)

1.一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于包括下列步骤:
步骤一:新鲜猴头菇子实体选取,去除劣质部分,水洗,磨浆;
步骤二:将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理,再用超声波进行处理,降温,备用;
步骤三:配制猴头菇子实体母液;
步骤四:将所得母液灭菌后接种混合菌种,发酵培养,然后灭活;所述混合菌种包括乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌;
步骤五:将发酵液进行固液分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2加入乙醇,静置分层,弃上清液,然后离心分离,将所得物质干燥。
2.根据权利要求1所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,所述步骤二为:
将所述磨浆后的猴头菇子实体,先用微波处理3-8min,再用超声波进行处理5-20min,降温至35℃以下,备用。
3.根据权利要求2所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,所述步骤三为:
在步骤二处理后的猴头菇子实体浆料中加水,搅拌,配制得到猴头菇子实体母液;所述配制得到的母液中猴头菇子实体与水的比例为0.03-0.2 g/mL。
4.根据权利要求3所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,步骤四所述母液灭菌后接种混合菌种为:
将所述母液在65-85℃下灭菌处理10-100min,将所述混合菌种接种于种子罐的猴头菇子实体母液中35-37℃下培养12-28h,所述混合菌种的总接种量为5-10%,所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为(1-5)∶(0.5-2)∶1。
5.根据权利要求4所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,步骤四中,所述发酵培养为:
对种子罐培养好的培养液进行镜检,确认无杂菌污染;将确认无杂菌污染的培养液接种于发酵罐培养,接种量为5-10%,在35-37℃下培养10-60h,经酸度测试,pH值降到4-4.5即培养完成。
6.根据权利要求5所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,所述步骤五为:
将所得发酵液采用板框压滤或减压抽滤的方法分离,得滤液1和滤渣,滤渣用清水淋洗,收集淋洗水,淋洗水静置分离出沉淀,取淋洗水上清液跟滤液1合并,得到液体2,液体2浓缩后,缓缓加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀6-40h,吸去上清液至原体积的17%以下,下部混合液进行离心分离,将所得沉淀干燥;所述加入的乙醇与所述稀释后滤液的体积比为(3.5-4.5)∶1。
7.根据权利要求6所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,步骤四中,所述灭活的具体条件为:
在100-110℃下处理25-35min。
8.根据权利要求7所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于:
所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为(1.9-2.1)∶(0.7-0.8)∶1。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,步骤五中所述干燥包括下列步骤:
S5.1:将所述沉淀置于冷藏室中冷藏至3-7℃;
S5.2:采用快速冷冻技术,将所述冷藏后的沉淀在5-40min之内冷冻至零下5-零下65℃,得到冷冻后的沉淀;所述快速冷冻技术为干冰冷冻、液氮冷冻、气体涡轮膨胀制冷或玻璃化超快冷冻中的一种;
S5.3:以35-65℃、干燥的非氧化性气体吹于所述冷冻后沉淀的表面,干燥至含水量为1.8-2.5%。
10.根据权利要求9所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法,其特征在于,还包括:
步骤六:将所得干燥产物粉碎,包装。
CN201811306372.1A 2018-11-05 2018-11-05 一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法 Active CN109207549B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811306372.1A CN109207549B (zh) 2018-11-05 2018-11-05 一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811306372.1A CN109207549B (zh) 2018-11-05 2018-11-05 一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109207549A true CN109207549A (zh) 2019-01-15
CN109207549B CN109207549B (zh) 2020-12-11

Family

ID=64994935

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811306372.1A Active CN109207549B (zh) 2018-11-05 2018-11-05 一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109207549B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111789899A (zh) * 2019-04-08 2020-10-20 韩国韩医药振兴院 抗血管生成用组合物及其制备方法
CN112898262A (zh) * 2020-12-17 2021-06-04 四川农业大学 一种花椒叶黄酮和多糖同步提取方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104277128A (zh) * 2013-07-01 2015-01-14 周伯扬 一种猴头菇子实体多糖的制备工艺
CN104293716A (zh) * 2014-10-08 2015-01-21 湖南民康生物技术研究所 一种用大型真菌菌液(质)制备高效益生菌制剂的方法
CN104480162A (zh) * 2014-11-28 2015-04-01 哈尔滨墨医生物技术有限公司 一种高效提取猴头菇多糖的方法
CN105962375A (zh) * 2016-05-12 2016-09-28 聊城大学 一种猴头菇活性乳酸菌制剂及其制备方法
CN108004282A (zh) * 2017-12-01 2018-05-08 中国农业科学院麻类研究所 一种制备灵芝子实体发酵物的方法、发酵物及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104277128A (zh) * 2013-07-01 2015-01-14 周伯扬 一种猴头菇子实体多糖的制备工艺
CN104293716A (zh) * 2014-10-08 2015-01-21 湖南民康生物技术研究所 一种用大型真菌菌液(质)制备高效益生菌制剂的方法
CN104480162A (zh) * 2014-11-28 2015-04-01 哈尔滨墨医生物技术有限公司 一种高效提取猴头菇多糖的方法
CN105962375A (zh) * 2016-05-12 2016-09-28 聊城大学 一种猴头菇活性乳酸菌制剂及其制备方法
CN108004282A (zh) * 2017-12-01 2018-05-08 中国农业科学院麻类研究所 一种制备灵芝子实体发酵物的方法、发酵物及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
庞满坤: "《天然药物化学基础》", 30 September 2013, 中国中医药出版社 *
张腾霄等: "枯草芽孢杆菌对猴头菇发酵液糖类成分降解规律研究", 《河南工业大学学报》 *
陈若芸: "《中国食用药用真菌化学》", 31 March 2016, 上海科学技术文献出版社 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111789899A (zh) * 2019-04-08 2020-10-20 韩国韩医药振兴院 抗血管生成用组合物及其制备方法
CN111789899B (zh) * 2019-04-08 2022-08-26 韩国韩医药振兴院 抗血管生成用组合物及其制备方法
CN112898262A (zh) * 2020-12-17 2021-06-04 四川农业大学 一种花椒叶黄酮和多糖同步提取方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN109207549B (zh) 2020-12-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105249086B (zh) 一种高cAMP含量的红枣浓缩汁的制备工艺
CN101664138A (zh) 罗汉果速溶粉及其制备方法
CN107868805B (zh) 一种通过乳酸菌发酵降解的龙眼多糖及其制备方法
CN107488598B (zh) 一种牛蒡基蛹虫草菌丝体及其制备方法
CN107164237A (zh) 富硒蛹虫草及其栽培方法与应用
CN107624513A (zh) 一种富含多糖的食药用菌菌丝培养方法及应用
CN105795300A (zh) 一种果蔬提取物冻干粉及其制备方法
CN106360743A (zh) 一种海芦笋膳食纤维的提取方法
CN109207549A (zh) 一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法
CN102134285A (zh) 一种残次坛紫菜多糖的制备方法
CN100347289C (zh) 枯草芽孢杆菌株及其应用方法
CN105707906A (zh) 一种益生性药食同源食品提取物冻干粉及其制备方法
CN105747236A (zh) 一种果蔬药食同源食品提取物冻干粉及其制备方法
CN111109413A (zh) 一种用桑黄菌生产苦荞菌茶的制作方法
CN109762745A (zh) 一种虎奶菇的发酵培养方法以及从培养物中提取活性成分的方法
JP2001327263A (ja) キノコ類の成分の抽出方法
CN106360720A (zh) 一种速溶药食同源食品提取物冻干粉及其制备方法
CN109771452B (zh) 虎奶菇提取物在制备***药物中的应用
CN112370487A (zh) 一种树莓及灰树花发酵产品及其发酵方法
KR101289970B1 (ko) 베타글루칸을 함유하는 막걸리 제조방법 및 이에 의해 제조된 막걸리
CN113367258A (zh) 沙棘复合果汁及其制备方法
CN117322629B (zh) 一种基于发酵酶解工艺的马蹄降脂组合物的制备方法
CN110250458A (zh) 一种竹笋罐头的生产工艺
CN116041561B (zh) 一种利用微生物发酵辅助提取荷叶多糖的方法
CN118027240A (zh) 一种微生物发酵辅助提取沙棘叶多糖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant