CN109090123A - 新白叶藤碱衍生物在防治植物源病菌中的应用 - Google Patents

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刘映前
张君香
赵中敏
马强
冯建雄
杨冠洲
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system

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Abstract

本发明涉及天然药物化学领域和生物农药技术领域，公开了一种新白叶藤碱衍生物1a～24a任一化合物在制备防治或抗抗水稻稻瘟病、油菜菌核和番茄灰霉的药物中的应用。由于本发明所述的化合物基于植物白叶藤(C.sanguinolenta)中分离得到的一种天然生物碱新白叶藤碱为先导而获得的杀菌分子，具备天然源农药的优点能够开发为适用于为生产绿色、无污染农产品的植物源农药，属于新型天然源生物农药。

Description

新白叶藤碱衍生物在防治植物源病菌中的应用
技术领域
本发明属于农药技术领域，公开了新白叶藤碱衍生物的一种新用途，具体涉及新白叶藤碱衍生物作为天然源农药在防治植物源病菌中的应用。
背景技术
稻瘟病菌(Pyricularia oryae Cav.)是全球水稻产区最为流行、最具有破坏性的病原体。全球每年因稻瘟病造成的水稻产量损失达11％～30％，20世纪90年代以来，中国稻瘟病的年发生面积均在380万hm2以上，稻谷损失达数亿公斤。油菜菌核病(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)是严重危害油菜产量和品质的广谱性病害，居油菜三大病害“(菌核病,霜霉病,病毒病”)之首，可导致中国油菜产量降低10％～30％，严重时可达80％，使油菜品质下降，给生产上带来巨大损失。此外，由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)侵染引发的灰霉病是番茄生产上的重要病害。近年来，随着保护地番茄栽培面积不断扩大,灰霉病的发生日益严重,一般造成产量损失20％～30％，局部减产70％以上甚至绝收。目前，化学控制是减轻稻瘟病、油菜菌核病和灰霉病危害的主要手段，然而目前使用的商业化杀菌剂对这些病害产生了不同程度的抗性问题，导致使用效率降低。当前适合用来防治植物源病菌的可选高效低毒药剂较少，因而寻找高效低毒的植物源病菌药剂已成为目前植保科技工作者的主要研究课题之一。植物源农药因公认其具有低毒、无残留、选择性高、易分解、不易产生抗药性等优点，而备受研究者亲睐。从植物资源中寻找和筛选潜在的抗菌先导化合物，进行结构优化已成为新型抗菌剂创制的重要途径和研究热点之一。
新白叶藤碱(Neocryptolepine)(5-甲基-5H-吲哚[2,3-b]-喹啉)为白叶藤碱的同分异构体，轴承四元杂环线性融合吲哚环和喹啉环，是从非洲攀缘植物白叶藤(C.sanguinolenta)中分离得到的一种天然生物碱，它在非洲中西部的许多国家被广泛应用于非洲传统药物。其具有多种生物活性，包括细胞毒性、抗细菌、抗真菌和抗寄生虫活性，尤其是抗锥虫、抗利什曼原虫和抗血吸虫病等活性，因其活性多样，在植物中含量较高，成为目前药物化学家广泛修饰和优化的天然源先导结构。
发明内容
本发明目的是针对现有技术存在的缺陷，为农业生产提供一种天然植物源杀菌剂--新白叶藤碱衍生物的新用途，即新白叶藤碱作为农药在防治稻瘟病、油菜菌核病和番茄灰霉病中的应用。
为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
新白叶藤碱衍生物在防治稻瘟病、油菜菌核病和番茄灰霉病中的应用。
以上所述的新白叶藤碱衍生物为化学结构式1a～24a。
进一步地，本发明所述的新白叶藤碱衍生物制备方法按照文献报道的合成方法获得。经多次硅胶柱层析等常规方法分离获得纯品，经质谱和核磁共振等波谱技术，确定了权利要求的新白叶藤碱衍生物1a～24a。经活性筛选结果表明，本发明所述的新白叶藤碱衍生物对稻瘟病、油菜菌核和番茄灰霉病表现出较强的抑制作用，可用于制备杀菌剂。
天然源生物碱具有高效、低毒、无污染、对人畜安全、作用方式独特、选择性高、对天敌和有益生物安全及害虫、病原菌不易产生抗药性等优点，符合人们对理想农药的要求。新白叶藤碱作为一类天然源生物碱属于生物农药，其本发明所述的优点在于：
1)杀菌活性高，可作为新的防治植物源病菌先导对其进行合理性开发。
2)本发明提供的化合物对稻瘟病、油菜菌核和番茄灰霉病具有优异的抑菌作用，为农业病菌防治提供了一种天然源杀菌活性物质。将其作为杀菌剂，其高效、低毒、安全等特点符合当前新农药创制的要求。
附图说明
图1是1a～24a化合物结构图
具体实施方式
为了更好地理解本发明，以下通过具体实施方式，对本发明的上述内容做进一步的详细说明。但不应将此理解为对本发明的限制。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1
中间体的合成方法
中间体的合成方法参见文献：(1)Lu,W.J.,Kathryn,J.W.,Wang Li,Kento Imai,et al.European Journal of Medicinal Chemistry,2013,64:498-511.(2)Ibrahim,E.S.,Pieter,V.D.V.,Steert,K.,et al.Journal Medical Chemistry,2009,52:2979-2988.其具体合成操作详述如下：
中间体2的合成方法:冰浴条件下将吡啶(0.42mL)加入到吲哚(0.77mmol)的四氢呋喃(THF) (10mL)溶液中，随后将三氯乙酰氯(0.58mL)的THF(5mL)溶液用恒压漏斗缓慢滴加到上述溶液中。混合液在25-30℃下搅拌12h。TLC监测反应完全后，用1M HCl(100mL)水溶液将反应淬灭，乙酸乙酯(3×100mL)为有机相萃取3次，合并有机相并用无水Na2SO4干燥剂干燥，之后减压旋干乙酸乙酯，得残留固体。用分析天平称重残留固体(0.60mmol)，后用甲醇(15mL)将其溶解，再加入KOH(1.5mmol)，反应在65℃下回流5h后，再在25-30℃下反应1h，TLC监测，待反应结束后旋干反应液。石油醚和乙酸乙酯体系为洗脱剂，对中间体2进行硅胶柱层析纯化。
中间体2-F的合成采用上述中间体2的合成方法得到，仅以6-氟吲哚代替吲哚。
中间体3的合成方法:在冰浴条件下，将中间体2(1.0mmol)置于100mL的圆底烧瓶中，用 DCM(10mL)将其溶解，随后加入1,4-二甲基哌嗪(0.55mmol)和N-氯代丁二酰亚胺(NCS) (1.1mmol)，迅速在圆底烧瓶中充N2保护，待反应2h后，用恒压漏斗向混合液中滴加三氯乙酸(0.25mmol)和N-甲基苯胺(2.0mmol)的DCM(5mL)溶液，后撤去冰浴，将反应置于室温下搅拌2h，TLC监测，直至反应完全。分别用10％的饱和NaHCO3水溶液和1M HCl水溶液洗涤，用抽滤瓶过滤粗品得白色残留物。最后经石油醚和乙酸乙酯洗脱剂洗脱、纯化，得中间体3。
中间体3-F的合成采用上述中间体3的合成方法得到。
中间体3-Cl的合成采用上述中间体3的合成方法得到，仅以4-氯-N-甲基苯胺代替N-甲基苯胺。中间体4的合成方法:将中间体3(4.0mmol)置于50mL圆底烧瓶中，用二苯醚(5mL)将其溶解，在250℃下回流45min-3h，TLC监测反应完全后，冷却至25℃，用石油醚洗涤滤饼，得中间体4。
中间体4-F和4-Cl的合成采用上述中间体4的合成方法得到。
中间体2：
白色固体；产率:86％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.92(1H,s,-NH-),8.08(1H,d,J＝4.0Hz, Ar-H),8.00(1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H),7.48(1H,m,Ar-H),7.19(2H,m,Ar-H,-CH＝C-),3.80(3H, s,-OCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ165.2,136.8,132.8,126.1,122.8,121.7,120.8,112.8, 106.7,51.0；MS-ESI(m/z):176.0[M+H]+.
中间体3：
白色固体；产率:82％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(1H,s,-NH-),8.13(1H,m,Ar-H),7.24 (5H,m,Ar-H),6.90(3H,m,Ar-H),3.83(3H,s,-OCH3),3.46(3H,s,-NCH3)；13C NMR(100MHz, CDCl3)δ164.5,147.8,147.0,131.8,129.2(2C),126.7,122.7,121.9,121.4,120.6,116.2(2C),110.5, 98.0,50.8,40.0；MS-ESI(m/z):281.1[M+H]+.
中间体4：
棕色固体；产率:89％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.02(1H,s,-NH-),8.40(1H,d,J＝8.0Hz, Ar-H),8.21(1H,m,Ar-H),7.78(2H,m,Ar-H),7.49(1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H),7.39(1H,m,Ar-H), 7.25(1H,m,Ar-H),7.01(1H,m,Ar-H),3.32(3H,s,-NCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ176.7, 152.1,144.3,139.9,136.3,130.9,129.9,129.2,128.0,126.8,126.3,125.3,120.4,116.0,107.5, 38.4；MS-ESI(m/z):249.0[M+H]+.
中间体2-F：
黄色固体；产率:85％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.98(1H,s,-NH-),8.10(1H,dd,J＝3.0, 1.3Hz,Ar-H),7.98(1H,dd,J＝8.8,5.5Hz,Ar-H),7.28(1H,m,Ar-H),7.06(1H,m,-CH＝C-), 3.81(3H,s,-OCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ165.0,133.5,122.7,122.0,121.9,110.3,110.0, 99.0,98.8,51.1；MS-ESI(m/z):194.0[M+H]+.
中间体3-F：
橙黄色固体；产率:80％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(1H,s,-NH-),8.12(1H,m,Ar-H), 7.24(3H,m,Ar-H),7.15(2H,m,Ar-H),6.71(2H,m,Ar-H),3.79(3H,s,-OCH3),3.38(3H,s, -NCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ164.4,146.9,146.0,131.9,129.0(2C),126.4,125.1,123.0, 122.1,121.6,116.6(2C),110.7,98.8,50.9,39.8；MS-ESI(m/z):299.1[M+H]+.
中间体3-Cl：
白色固体；产率:78％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(1H,s,-NH-),8.12(1H,m,Ar-H),7.24 (3H,m,Ar-H),7.15(2H,m,Ar-H),6.71(2H,m,Ar-H),3.79(3H,s,-OCH3),3.38(3H,s,-NCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ164.4,146.9,146.0,131.9,129.0(2C),126.4,125.1,123.0,122.1, 121.6,116.6(2C),110.7,98.8,50.9,39.8；MS-ESI(m/z):315.0[M+H]+.
实施例2
目标化合物1a-3a的合成方法
目标化合物1a-3a的合成方法参见文献：Ibrahim,E.S.,Pieter,V.D.V.,Steert,K.,et al..Journal Medical Chemistry,2009,52:2979-2988.其具体合成操作详述如下：
将上述中间体4(4-F/4-Cl)(2.0mmol)置于圆底烧瓶中，用甲苯(5mL)溶解，待溶解完全后加入POCl3(25.0mmol)，在110℃下回流12h，TLC监测反应完全后，冷却至25℃，旋干甲苯溶液，用冰的饱和NaHCO3水溶液中和产物(保持30℃的中性环境)，二氯甲烷为有机相对反应液进行萃取，再用饱和NaCl水溶液洗涤有机相，合并有机相并用无水Na2SO4干燥，之后减压旋干有机相。最后用二氯甲烷/丙酮洗脱硅胶柱，分离纯化产品。
目标化合物1a：
橙色固体；产率:90％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(1H,m,Ar-H),7.72(3H,m,Ar-H), 7.49(2H,m,Ar-H),7.39(1H,m,Ar-H),7.21(1H,m,Ar-H),4.30(3H,s,-NCH3)；13C NMR(100 MHz,CDCl3)δ155.3,155.0,136.9,135.8,131.0,129.7,126.0,124.8,123.8(2C),122.2,120.2, 119.1,117.6,114.2,33.1；MS-ESI(m/z):267.0[M+H]+.
目标化合物2a：
红色固体；产率:89％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),8.23(1H,dd, J＝8.5,5.8Hz,Ar-H),7.76(1H,t,Ar-H),7.66(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.48(1H,t,Ar-H),7.28 (1H,m,Ar-H),6.90(1H,m,Ar-H),4.27(3H,s,-NCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.0, 136.4,135.3,131.0,125.8,124.7,124.6,122.6,119.8,119.1,114.3,107.9,107.7,104.5,33.2； MS-ESI(m/z):285.0[M+H]+.
目标化合物3a：
红色固体；产率:90％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(2H,m,Ar-H),7.54(2H,m,Ar-H), 7.44(2H,m,Ar-H),7.15(1H,m,Ar-H),4.13(3H,s,-NCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ153.9, 153.8,134.0,133.1,129.9,129.1,127.0,124.5,123.9,122.9,122.4,119.4,118.8,116.6,33.2； MS-ESI(m/z):301.0[M+H]+.
实施例3
目标化合物4a-24a的合成方法
目标化合物4a-24a的合成方法参见文献方法：Mei,Z.W.,Wang,L.,Lu,W.J.,etal.Journal Medical Chemistry, 2013,56:1431-1442.其具体合成操作详述如下：
将上述目标化合物1a(2a/3a)(1.0mmol)和相应的氨基烷基胺试剂(10.0mmol)置于圆底烧瓶中，用DMF(10mL)将其溶解，待温度升至135-155℃时回流1-4h，TLC监测反应完全后，减压旋干DMF。所得残留物用乙酸乙酯和含2N氨水的甲醇洗脱剂对油状物进行硅胶柱层析分离纯化。
目标化合物4a：
黄色固体；产率:84％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.47(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),8.28(1H,d, J＝8.0Hz,Ar-H),7.68(3H,m,Ar-H),7.46(1H,m,Ar-H),7.36(1H,m,Ar-H),7.19(1H,m, Ar-H),4.29(3H,s,-NCH3),3.57(4H,t,-N-(CH2)2 -(CH2)2-N-),2.73(4H,t,-N-(CH2)2-(CH2)2 -N-), 2.45(3H,s,-(CH2)2-NCH3 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.8,154.4,150.6,138.0,130.3, 128.2,126.4,124.9,123.0,122.9,121.2,121.0,119.4,117.4,114.4,55.9(2C),49.7(2C),46.7,33.1； MS-ESI(m/z):331.1[M+H]+.
目标化合物5a：
橙色固体；产率:90％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(1H,dd,J＝8.3,1.4Hz,Ar-H),7.79 (1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.70(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.60(2H,m,Ar-H),7.38(1H,m,Ar-H), 7.27(1H,m,Ar-H),7.14(1H,m,Ar-H),5.05(1H,-NH-CH2-CH2-CH2-CH3),4.17(3H,s,-NCH3), 3.74(2H,m,-NH-CH2 -CH2-CH2-CH3),1.66(2H,m,-NH-CH2-CH2 -CH2-CH3),1.37(2H,m, -NH-CH2-CH2-CH2 -CH3),0.85(3H,t,-NH-CH2-CH2-CH2-CH3 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ155.4,151.6,147.7,137.2,129.3,124.9,123.4,122.9,119.5,119.4,117.8,116.3,114.7,113.7, 107.0,48.0,33.0,31.7,18.9,12.7；MS-ESI(m/z):304.1[M+H]+.
目标化合物6a：
橙色固体；产率:82％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(1H,m,Ar-H),8.05(1H,d,J＝8.0Hz, Ar-H),7.76(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.68(1H,m,Ar-H),7.42(1H,m,Ar-H),7.33(1H,m,Ar-H), 7.17(1H,t,Ar-H),6.80(1H,d,J＝12.0Hz,Ar-H),4.25(3H,s,-NCH3),3.92(2H,q, -N-CH2 -CH2-NH-),3.22(2H,m,2[-NH-CH-(CH3)2]),2.84(2H,t,-N-CH2-CH2 -NH-),1.11(12H, m,2[-NH-CH-(CH3)2 ])；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.6,152.2,148.3,138.1,130.2,125.2, 124.1(2C),121.4,120.2,118.4,117.1,115.4,114.7,105.8,47.4,45.5,44.1,32.7,20.8(5C)； MS-ESI(m/z):375.2[M+H]+.
目标化合物7a：
黄色固体；产率:88％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(1H,m,Ar-H),7.92(1H,d,J＝8.0Hz, Ar-H),7.78(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.72(2H,m,Ar-H),7.48(1H,m,Ar-H),7.38(1H,m,Ar-H), 7.24(1H,m,Ar-H),4.75(1H,m,-NH-CH2-CH2-N-(CH3)2),4.40(2H,m,-NH-CH2 -CH2-N-(CH3)2), 4,29(3H,s,-N-CH3),1.37(6H,d,J＝8.0Hz,-NH-CH2-CH2-N-(CH3)2 ),1.21(2H,t, -NH-CH2-CH2 -N-(CH3)2)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ148.2,138.1,130.4,126.4(2C),124.5, 120.8(2C),120.7,119.0,117.5(2C),116.8,114.7(2C),65.8,50.4,43.8,32.9,24.6；MS-ESI(m/z): 319.1[M+H]+.
目标化合物8a：
橙色固体；产率:87％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),8.17(1H,s, Ar-H),8.08(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.65(2H,t,Ar-H),7.43(1H,t,Ar-H),7.36(1H,t,Ar-H), 7.13(1H,t,Ar-H),4.21(3H,s,-N-CH3),3.38(2H,t,-N-(CH2 )2-(CH2)2-NH),3.63(2H,t, -N-(CH2 )2-(CH2)2-NH),3.44(4H,t,-N-(CH2)2-(CH2)2-NH),1.62(1H,m,-N-(CH2)2-(CH2)2-NH)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.1,153.7,148.1,136.9,129.8,129.5,127.7,124.8,123.3,121.6, 120.4,119.5,118.5,116.7,113.5,49.1,48.0,45.4,39.8,32.1；MS-ESI(m/z):317.1[M+H]+.
目标化合物9a：
橙色固体；产率:89％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.50(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),8.28(1H,d, J＝8.0Hz,Ar-H),7.76(3H,m,Ar-H),7.54(1H,t,Ar-H),7.44(1H,m,Ar-H),7.27(1H,m,Ar-H), 4.36(3H,s,-N-CH3),3.59(4H,t,-N-(CH2)2 -(CH2)3),1.94(6H,m,-N-(CH2)2-(CH2)3 )；13C NMR (100MHz,CDCl3)δ157.9,154.2,151.7,138.1,130.1,127.9,126.6,124.5,123.3,121.4,121.1, 121.0,119.0,117.4,114.3,51.7(2C),33.0,26.7(2C),24.5；MS-ESI(m/z):316.1[M+H]+.
目标化合物10a：
橙黄色固体；产率:80％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(1H,m,Ar-H),7.87(1H,d,J＝8.0 Hz,Ar-H),7.78(1H,m,Ar-H),7.66(2H,m,Ar-H),7.46(1H,m,Ar-H),7.33(1H,m,Ar-H),7.20 (1H,m,Ar-H),5.04(1H,s,-NH-CH2-CH3),4.23(3H,s,-N-CH3),3.85(2H,m,-NH-CH2 -CH3), 1.39(3H,t,-NH-CH2-CH3 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.5,152.8,148.5,138.1,130.3, 126.0,124.4,124.0,120.6,120.5,118.8,117.4,115.9,114.7,108.4,44.0,32.7,17.9；MS-ESI(m/z): 276.1[M+H]+.
目标化合物11a：
橙红色固体；产率:81％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(1H,d,J＝12.0Hz,Ar-H),8.12(1H, d,J＝12.0Hz,Ar-H),7.77(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.68(2H,m,Ar-H),7.43(1H,t,Ar-H),7.34 (1H,t,Ar-H),7.18(1H,t,Ar-H),6.72(1H,s,-NH-CH2-CH2-N-(CH2-N-CH2)2),4.26(3H,s, -N-CH3),3.90(2H,m,-NH-CH2 -CH2-N-(CH2-CH2)2),2.79(2H,t,-NH-CH2-CH2 -N-(CH2-CH2)2), 2.66(4H,d,J＝4.0Hz,-NH-CH2-CH2-N-(CH2 -CH2)2),1.91(4H,d,J＝4.0Hz, -NH-CH2-CH2-N-(CH2-CH2)2 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.3,152.5,149.0,138.5,130.2,125.6,125.3,124.2,120.6,120.2,118.6,117.2,116.0,114.7,108.1,55.1,53.4(2C),46.9,32.7, 23.8(2C)；MS-ESI(m/z):345.2[M+H]+.
目标化合物12a：
红色固体；产率:80％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.22(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),8.17(1H,d, J＝8.0Hz,Ar-H),7.78(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.70(2H,m,Ar-H),7.45(1H,t,Ar-H),7.35(1H, m,Ar-H),7.20(1H,t,Ar-H),6.51(1H,t,-NH-CH2-CH2-N-(CH2-CH2)2),4.26(3H,s,-N-CH3), 3.90(2H,m,-NH-CH2 -CH2-N-(CH2-CH2)2O),3.85(4H,m,-NH-CH2-CH2-N-(CH2-CH2)2 O),2.64 (2H,m,-NH-CH2-CH2 -N-(CH2-CH2)2O),2.59(4H,t,-NH-CH2-CH2-N-(CH2 -CH2)2N-O)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.3,152.7,148.8,138.4,130.6,125.8,125.1,124.0,120.6,120.3, 118.6,117.4,115.8,114.8,108.3,67.1(2C),58.0,53.0(2C),44.6,32.7；MS-ESI(m/z):361.2 [M+H]+.
目标化合物13a：
橙色固体；产率:87％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(1H,d,J＝12.0Hz,Ar-H),8.26(1H, dd,J＝8.6,5.7Hz,Ar-H),7.75(2H,m,Ar-H),7.44(1H,m,Ar-H),7.38(1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H), 6.94(1H,m,Ar-H),4.33(3H,s,-NCH3),3.60(4H,t,-N-(CH2)2 -(CH2)2-N-),2.79(4H,t, -N-(CH2)2-(CH2)2 -N-),2.51(3H,s,-(CH2)2-NCH3 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ164.7,150.0, 137.6,130.3,126.4,125.6,125.5,121.5,121.1,119.4,114.5,106.9,106.7,104.1,103.9,55.8(2C), 49.4(2C),46.7,33.2；MS-ESI(m/z):349.1[M+H]+.
目标化合物14a：
橙黄色固体；产率:90％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(1H,m,Ar-H),7.71(3H,m,Ar-H), 7.39(2H,m,Ar-H),6.91(1H,m,Ar-H),5.03(1H,-NH-CH2-CH2-CH2-CH3),4.22(3H,s,-NCH3), 3.79(2H,m,-NH-CH2 -CH2-CH2-CH3),1.72(2H,m,-NH-CH2-CH2 -CH2-CH3),1.43(2H,m, -NH-CH2-CH2-CH2 -CH3),0.92(3H,t,-NH-CH2-CH2-CH2-CH3 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.5,148.1,137.8,130.4,124.1,121.1,121.0,120.8,120.3,115.8,114.9,106.4,106.1,103.9, 103.7,49.0,34.0,32.7,20.0,13.8；MS-ESI(m/z):322.1[M+H]+.
目标化合物15a：
红色固体；产率:86％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(1H,dd,J＝8.4,1.4Hz,Ar-H),7.97 (1H,dd,J＝8.5,5.5Hz,Ar-H),7.69(2H,m,Ar-H),7.39(2H,m,Ar-H),6.90(1H,m,Ar-H),6.55 (1H,t,-NH-CH2-CH2-N-(CH3)2),4,23(3H,s,-N-CH3),3.84(2H,m,-NH-CH2 -CH2-N-(CH3)2), 2.56(2H,t,-NH-CH2-CH2 -N-(CH3)2),2.39(6H,s,-NH-CH2-CH2-N-(CH3)2 )；13C NMR(100MHz, CDCl3)δ157.3,148.3,138.0,130.3,124.8,121.2,121.1,120.6,116.1,114.8,107.4,106.3,106.0, 103.7,103.5,58.8,45.7,44.9(2C),32.7；MS-ESI(m/z):337.1[M+H]+.
目标化合物16a：
橙色固体；产率:85％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(1H,d,J＝12.0Hz,Ar-H),8.20(1H,s, Ar-H),8.04(1H,dd,J＝8.5,5.7Hz,Ar-H),7.71(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.41(1H,t,Ar-H),7.30 (1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H),6.68(1H,m,Ar-H),4.27(3H,s,-N-CH3),3.88(2H,t, -N-(CH2 )2-(CH2)2-NH),3.69(2H,t,-N-(CH2 )2-(CH2)2-NH),3.48(4H,m,-N-(CH2)2-(CH2)2 -NH)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.1,147.5,136.6,129.5,124.8,124.1,124.0,120.8,119.7,118.0, 113.7,106.2,106.0,103.5,103.2,49.2,48.1,45.5,39.9,32.2；MS-ESI(m/z):335.1[M+H]+.
目标化合物17a：
橙色固体；产率:85％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.86(1H,dd, J＝8.6,5.5Hz,Ar-H),7.61(2H,m,Ar-H),7.30(2H,m,Ar-H),6.80(1H,m,Ar-H),4.15(3H,s, -NCH3),3.80(2H,q,-N-CH2 -CH2-NH-),3.13(2H,m,2[-NH-CH-(CH3)2]),2.76(2H,t, -N-CH2-CH2 -NH-),1.03(12H,m,2[-NH-CH-(CH3)2 ])；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.7, 146.8,136.7,129.2,123.0,120.7,120.6,119.5,119.4,114.7,113.7,104.8,104.6,102.6,102.3, 46.3(2C),44.4,43.0,31.6,19.7(4C)；MS-ESI(m/z):393.2[M+H]+.
目标化合物18a：
橙色固体；产率:79％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(1H,dd,J＝8.3,1.5Hz,Ar-H),8.27 (1H,d,J＝12.0Hz,Ar-H),8.03(1H,dd,J＝8.5,5.5Hz,Ar-H),7.90(1H,dd,J＝8.5,5.7Hz, Ar-H),7.41(2H,m,Ar-H,-NH-C-(CH3)3),6.93(1H,m,Ar-H),4.30(3H,s,-N-CH3),1.38(9H,s, -NH-C-(CH3)3 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.7,150.9,137.9,130.1,127.9,126.7,124.0, 121.1,120.4,114.6,114.1,106.7,106.5,104.0,103.7,58.2,43.8,33.0,32.9,31.9；MS-ESI(m/z): 322.1[M+H]+.
目标化合物19a：
橙红色固体；产率:82％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(1H,dd,J＝8.3,1.4Hz,Ar-H),8.01 (1H,dd,J＝8.5,5.5Hz,Ar-H),7.69(2H,m,Ar-H),7.38(2H,m,Ar-H),6.88(1H,m,Ar-H),6.64 (1H,t,-NH-CH2-CH2-N-(CH2-CH2)2),4.24(3H,s,-N-CH3),3.87(2H,t, -NH-CH2 -CH2-N-(CH2-CH2)2),2.78(2H,t,-NH-CH2-CH2 -N-(CH2-CH2)2),2.66(4H,m, -NH-CH2-CH2-N-(CH2 -CH2)2),1.91(4H,m,-NH-CH2-CH2-N-(CH2-CH2)2 )；13C NMR(100MHz, CDCl3)δ157.3,148.6,138.1,130.3,125.2,121.0,120.9,120.5,116.1,114.8,107.6,106.1,105.8,103.7,103.5,55.1,53.4(2C),46.9,32.7,23.8(2C)；MS-ESI(m/z):363.1[M+H]+.
目标化合物20a：
橙色固体；产率:80％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.22(1H,dd,J＝8.3,1.4Hz,Ar-H),8.04 (1H,dd,J＝8.5,5.5Hz,Ar-H),7.71(2H,m,Ar-H),7.40(2H,m,Ar-H),6.90(1H,m,Ar-H),6.43 (1H,t,-NH-CH2-CH2-N-(CH2-CH2)2),4.25(3H,s,-N-CH3),3.88(2H,m, -NH-CH2 -CH2-N-(CH2-CH2)2O),3.83(4H,m,-NH-CH2-CH2-N-(CH2-CH2)2 O),2.64(2H,dd,J＝ 8.5,2.5Hz,-NH-CH2-CH2 -N-(CH2-CH2)2O),2.58(4H,t,-NH-CH2-CH2-N-(CH2 -CH2)2O)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.3,148.3,138.1,130.4,124.9,121.1,121.0,120.6,115.9,114.9,107.8,106.2,105.9,103.9,103.7,67.0(2C),58.0,53.0(2C),44.5,32.7；MS-ESI(m/z):379.1 [M+H]+.
目标化合物21a：
红色固体；产率:85％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H),8.32(1H,d, J＝8.0Hz,Ar-H),7.72(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.64(2H,m,Ar-H),7.53(1H,t,Ar-H),7.25(1H, m,Ar-H),4.30(3H,s,-NCH3),3.58(4H,t,-N-(CH2)2 -(CH2)2-N-),2.79(4H,t,-N-(CH2)2-(CH2)2 -N-),2.51(3H,s,-NCH3)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.6,154.8,149.2,136.4,130.2,128.7,126.9,125.9,125.2,124.1,122.8,122.0,119.7,117.7,115.7,55.9(2C), 49.7(2C),46.7,33.1；MS-ESI(m/z):365.1[M+H]+.
目标化合物22a：
橙黄色固体；产率:90％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H),7.83(1H, d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.76(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.60(1H,dd,J＝9.1,2.3Hz,Ar-H),7.52(1H, d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.47(1H,m,Ar-H),7.22(1H,m,Ar-H),4.95(1H,-NH-CH2-CH2-CH2-CH3), 4.17(3H,s,-NCH3),3.74(2H,m,-NH-CH2 -CH2-CH2-CH3),1.72(2H,m,-NH-CH2-CH2 -CH2-CH3), 1.43(2H,m,-NH-CH2-CH2-CH2 -CH3),0.93(3H,t,-NH-CH2-CH2-CH2-CH3 )；13C NMR(100MHz, CDCl3)δ156.2,153.0,147.5,136.6,130.2,126.4,125.9,123.9,123.8,120.6,119.1,117.6,116.6, 116.1,109.1,49.0,34.0,32.8,19.9,13.8；MS-ESI(m/z):338.1[M+H]+.
目标化合物23a：
橙色固体；产率:82％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H),8.07(1H,d, J＝8.0Hz,Ar-H),7.75(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.59(2H,m,Ar-H),7.45(1H,t,Ar-H),7.22(1H, m,Ar-H),6.51(1H,d,J＝8.0Hz,-NH-CH2-CH2-N-(CH3)2),4.21(3H,s,-N-CH3),3.82(2H,m, -NH-CH2 -CH2-N-(CH3)2),2.56(2H,t,-NH-CH2-CH2 -N-(CH3)2),2.41(6H,s, -NH-CH2-CH2-N-(CH3)2 )；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.0,152.7,147.7,136.8,130.1,126.1,125.7,124.5,124.0,120.8,119.1,117.4,117.1,116.0,109.0,58.8,45.7,44.8(2C),32.8；MS-ESI (m/z):353.1[M+H]+.
目标化合物24a：
橙红色固体；产率:80％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(1H,d,J＝4.0Hz,Ar-H),8.30(1H, s,Ar-H),8.15(1H,d,J＝8.0Hz,Ar-H),7.72(1H,m,Ar-H),7.56(1H,t,Ar-H),7.26(1H,m, Ar-H),7.13(1H,t,Ar-H),4.35(3H,s,-N-CH3),3.98(2H,t,-N-(CH2 )2-(CH2)2-NH),3.78(2H,t, -N-(CH2 )2-(CH2)2-NH),3.56(4H,t,-N-(CH2)2-(CH2)2 -NH),1.73(1H,d,-N-(CH2)2-(CH2)2-NH)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ161.2,157.6,155.1,147.8,136.4,130.6,129.3,127.3,125.0,124.8, 122.3,121.7,120.0,118.0,115.9,49.8,48.6,46.4,40.8,33.3；MS-ESI(m/z):351.1[M+H]+.
实施例4
新白叶藤碱衍生物对植物源病菌的抑菌活性测定及结果
1)新白叶藤碱衍生物1a～24a。
2)供试菌种：稻瘟病、油菜菌核和番茄灰霉由甘肃省农业科学院提供。
3)生物测定方法：PDA培养基的配制方法：1.称重和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆，土豆切成小块放入锅中，加水1000mL，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用两层纱布趁热在量杯中过滤，弃掉滤渣，滤液用水稀释到1000mL。2.加热、溶解把滤液放入锅中，加葡萄糖20g，琼脂15g，然后放在电磁炉上小火加热，并用玻璃棒不断搅拌，以防治琼脂成团。待完全溶解后再补水至所需量。3.分装将配制好的培养基分装于100mL规格的锥形瓶中(固体培养基以不超过其溶剂的一半为宜)4.加棉塞培养基分装完毕后，在锥形瓶上封上封口膜，以阻止外界微生物进入培养基造成污染，并保证良好的通气性。5.灭菌将培养基置于压力蒸汽灭菌器上，以121℃灭菌3h，压力为0.15MPa。6.制备培养基(含药无菌操作台)将培养基以20mL量分装于培养皿中，静置，冷却，待其凝固。7.上样(接种)将无菌操作台进行灭菌操作，点燃酒精灯，采用插空法，通过点样针将所需菌种在酒精灯外焰接种于培养皿中，用胶带封口。(打空器、点样针等仪器放入乙醇中灭菌)8.培养将接种后的培养皿放入培养箱中进行培养。观察记录现象。计算抑菌率。分别测定新白叶藤碱系列化合物在25mg/L、50mg/L和100mg/L对三种菌的抑制活性，每个浓度做3个重复实验。
表1新白叶藤碱系列化合物1a-24a对三种植物病害的抑菌制活性
表中数据为3个重复的平均值
由上表数据可以看出，该系列衍生物对稻瘟病、油菜菌核和番茄灰霉具有显著的抑菌活性，且部分化合物的抑菌活性高于对照药嘧菌酯的抑菌活性。化合物5a、9a、11a、14a、21a和 22a对三种菌的抑菌活性最为突出。其中，5a在50mg/L浓度下对稻瘟病、油菜菌核和番茄灰霉的抑制率分别为70.42％、65.00％、71.67％。9a在50mg/L浓度下对稻瘟病、油菜菌核和番茄灰霉的抑制率分别为74.58％、100.00％、72.92％。

Claims (5)

1.本发明涉及一种新白叶藤碱衍生物在制备防治或抗农业病菌害的药物中的应用，是新白叶藤碱衍生物的新用途。
2.根据权利要求1所述的新白叶藤碱衍生物1a～24a具有如下的分子结构特征：
。
3.根据权利要求1所述的新白叶藤碱衍生物1a～24a任一化合物在制备防治或抗稻瘟病的药物中的应用。
4.根据权利要求1所述的新白叶藤碱衍生物1a～24a任一化合物在制备防治或抗油菜菌核病的药物中的应用。
5.根据权利要求1所述的新白叶藤碱衍生物1a～24a任一化合物在制备防治或抗番茄灰霉病的药物中的应用。
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