CN108883055B - 非洲楝提取物的美容用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及通过水提取得到的非洲楝提取物的美容用途，其用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器中胶原蛋白XVIII的表达；用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性，和/或用于减少皮肤毛孔可见度和/或使得皮肤更光滑和/或用于限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。最终，本发明涉及美容护理方法，包含施用非洲楝提取物或包含非洲楝提取物的美容组合物，其用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器中胶原蛋白XVIII的表达；用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性，和/或用于减少皮肤毛孔可见度和/或使得皮肤更光滑和/或用于限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。

Description

非洲楝提取物的美容用途
本发明涉及新的美容(cosmetic)和/或皮肤病学成分以及其美容和/或皮肤病学用途，并且还涉及包含它们的美容组合物，用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器、特别是基板(basal laminae)中胶原蛋白XVIII的表达，并由此维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性和/或减少皮肤毛孔的可见度和/或使得皮肤更光滑和/或限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。
基板、也称作基底膜，对皮肤的不同隔间具有支持和凝聚功能，特别是上皮、尤其是表皮、真皮、脂肪细胞和内皮细胞。在皮肤衰老过程中观察到基板、尤其是真皮表皮接界(DEJ)的降解，并且反映在不同隔间的结构和特性缺失。因此，真皮表皮接界的降解反映在真皮中为紧致度和弹性缺失、反映在表皮中为表皮厚度降低、以及在皮脂腺中为皮肤毛孔可见度的增加，这特别地归因于其直径的增加。
已知胶原蛋白在基板、尤其是真皮表皮接界处起重要作用。对于XVIII型胶原蛋白而言尤其如此。
胶原蛋白XVIII是硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族的胶原蛋白，其存在于身体所有基板中并且由角质细胞、脂肪细胞、汗腺(sudoriparous gland)上皮细胞、毛囊干细胞和内皮细胞合成。它也是存在于皮肤所有隔间内的具有硫酸乙酰肝素的唯一胶原蛋白。
它在这些基板、特别是DEJ、内皮和上皮基板和脂肪细胞中起重要的结构作用。因此，胶原蛋白XVIII的表达减少，特别是在如实施例2中证实的皮肤老化过程中的表达减少，和/或其降解，导致基板的衰退、皮肤结构的破坏及其上述表现形式。因此，胶原蛋白XVIII的表达减少导致真皮表皮接界的瓦解和真皮与表皮之间的交换减少、皮肤的紧致度缺失和弹性丧失。
在皮脂腺的DEJ中，胶原蛋白XVIII的降解和/或表达的减少诱导皮肤毛孔塌陷和孔的开口直径的增加。
在汗腺的基板处，胶原蛋白XVIII的降解和/或表达的减少诱导汗腺瓦解并且其开口也增加，因此排汗增加。在毛囊的基板处，胶原蛋白XVIII表达的降解诱导营养物交换下降，因此毛球的结构和代谢减少，且体毛和/或头发脱落。
此外，胶原蛋白XVIII蛋白位于脂肪细胞周围的基板上。因此，其降解和/或表达减少诱导脂肪细胞分解，这导致皮肤的支持和由此的紧致度丧失。
在内皮细胞中，胶原蛋白XVIII的降解和/或表达的减少诱导营养物供应减少，包括在真皮中结构分子合成下降，并因此丧失紧致度和弹性。
胶原蛋白XVIII在基板、特别是真皮表皮接界以及脂肪细胞、内皮细胞、汗腺和毛囊的基板上的基本结构作用使其成为美容和皮肤病学领域关注的目标。
令人惊讶的是，本发明人已经发现：植物非洲楝(Khaya senegalensis)的提取物具有增加胶原蛋白XVIII在皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器处、特别是在真皮表皮接界处的表达的能力，从而能够增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性，并且还可以降低毛孔的可见度，也就是说减小其开口，和/或使皮肤更光滑和/或限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。
非洲楝是一种也称作瓦加杜古(cailcedrat)的树，其属于楝科(Meliaceae)并且在几个非洲国家发现，尤其是贝宁、喀麦隆、塞内加尔、几内亚、象牙海岸或布基纳法索。它还在北澳大利亚和新喀里多尼亚群岛发现。本发明的非洲楝树皮来源于布基纳法索。
非洲楝是一种用于在非洲大规模建造独木舟的植物。此外，它的种子富含油酸，由此制成西非烹饪中使用的油。非洲楝还已知为药用植物。因此，种子和叶用于对抗发烧和头痛。特别是树皮因其抗炎特性而闻名，因此用于治疗关节炎、腰痛和其他关节疼痛，以及用于治疗皮肤病。该植物树皮的煎汤剂已被用作消毒剂。
专利申请WO2012033634公开了可以局部施用的美容抗衰老组合物，其尤其包含植物提取物非洲楝提取物，用于抑制金属蛋白酶1(MMP1)合成和刺激前胶原I合成。但是，该申请没有公开非洲楝提取物的以下美容用途：用于维持和/或增加胶原蛋白XVIII的表达或用于减少皮肤毛孔的可见度和/或使得皮肤更光滑和/或用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性和/或用于限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。此外，该提取物不是通过水提取得到。
专利申请EP1019016还公开了尤其用于局部施用于皮肤的协同抗衰老复合物，其包含非洲楝树皮的脱水提取物，所述复合物使得能够抗击UV辐射、该辐射生成的炎症过程和减少成纤维细胞的脂质过氧化作用。该申请未公开非洲楝提取物用于维持和/或增加胶原蛋白XVIII的表达或用于减少皮肤毛孔的可见度和/或使得皮肤更光滑和/或用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性和/或用于限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生的用途。
申请WO2011117642还公开了包含非洲楝提取物的毛发护理组合物，该组合物适合于不同用途，包括保湿、抗头皮屑作用或增容效果(volumizing effect)。该专利申请未公开用于皮肤和/或粘膜、也未公开用于增加胶原蛋白XVIII的表达、也未公开用于增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度或弹性、也未公开用于减少皮肤毛孔可见度、也未公开用于限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生的任何美容用途。因此，对于申请人的知识而言，没有对比文件公开本发明的用途。
本发明的目的在于提供完全新的美容活性成分，其能够维持和/或增加胶原蛋白XVIII在皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器、特别是在皮肤腺体、尤其是汗腺和皮脂腺和毛囊中的表达。这类成分具有维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和弹性的优点，而且具有减少皮肤毛孔可见度、使得皮肤更光滑、限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少体毛和/或头发脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生的优点。
这种新美容活性成分的优点在于对于皮肤和/或粘膜和/或头皮是局部可接受的、无毒性、易于获得、能够以工业规模容易地制造和包装。
因此，本发明的第一个主题涉及非洲楝提取物、优选通过水提取得到的非洲楝提取物的美容用途，用于维持和/或增加胶原蛋白XVIII在皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器、尤其是汗腺和皮脂腺和毛囊、特别是在基板中的表达。
优选地，本发明的提取物维持和/或增加胶原蛋白XVIII在基板、优选上皮基板、优选DEJ、包括皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮脂腺的DEJ、和脂肪细胞、内皮细胞、汗腺和/或毛囊的基板中的表达。
出于本发明的目的，“美容用途和/或美容组合物”旨在表示非药物组合物和/或用途，即不需要治疗性处理，即预期用于任何皮肤和/或粘膜和/或头皮的“健康”区域。
“皮肤和/或粘膜和/或头皮的健康区域”旨在表示本发明的提取物所施用的并且由皮肤科医生称为“未患病”的皮肤或粘膜或头皮的区域，也就是说没有感染、疤痕、皮肤病或障碍如念珠菌病、脓疱病、牛皮癣、湿疹、痤疮或皮炎或创伤或伤口和/或其它皮肤病。
本发明的提取物可以应用于身体和/或面部和/或头皮的皮肤的全部或部分、优选腿部、大腿、手臂、腹部、胸部、颈部、腋窝、唇，更优选面部的全部或部分，优选面颊、额头、下巴、唇、眼周区域、面部的“T”区域。
皮肤和/或粘膜和/或头皮中存在几种胶原蛋白，例如I、III、IV、V、VI、VII、XII、XIII、XIV、XVI、XVII、XVIII、XXIV、XXIX型胶原蛋白。本发明涉及胶原蛋白XVIII。
“粘膜”意指眼粘膜、***粘膜、泌尿生殖粘膜、***粘膜、鼻粘膜和/或口腔、唇和/或牙龈粘膜；优选眼睛和/或口腔粘膜。
“胶原蛋白XVIII的表达”旨在表示基因表达，即表达mRNA(信使RNA)的表达和/或胶原蛋白XVIII的蛋白质表达。优选地，这是胶原蛋白的蛋白质表达。优选地，这是由角质细胞、脂肪细胞、内皮细胞、汗腺的上皮细胞和/或毛囊的干细胞表达胶原蛋白XVIII。
优选地，胶原蛋白是人胶原蛋白，特别是人皮肤和/或粘膜和/或头皮的胶原蛋白。胶原蛋白XVIII的表达可根据常规方法测定。胶原蛋白XVIII的蛋白质表达优选在产生它的细胞上测定，即角质细胞、脂肪细胞、内皮细胞、汗囊的上皮细胞和/或毛囊的干细胞。
有利地，胶原蛋白XVIII的蛋白质表达在角质细胞、脂肪细胞、内皮细胞、汗囊的上皮细胞和/或毛囊的干细胞上测定，特别是在角质细胞、脂肪细胞和/或内皮细胞上通过体外测定来测定，优选通过免疫标记后的共聚焦显微镜检查测定，例如按照实施例3中给出的方法。
出于本发明的目的，“免疫标记”旨在表示这样的技术，其固定对胶原蛋白XVIII蛋白特异性的荧光抗体，并通过显微镜定量荧光，优选共聚焦显微镜。
“维持胶原蛋白的表达”旨在表示相对于不存在本发明提取物的情况下检测到的基因和/或蛋白质表达，防止胶原蛋白的基因和/或蛋白质表达水平降低，尤其是相对于在皮肤和/或粘膜和/或头皮的外在或内在老化过程中观察到的胶原蛋白的基因和/或蛋白质表达水平。
出于本发明的目的，“增加胶原蛋白的表达”意指相对于在本发明提取物不存在的情况下检测到的基因和/或蛋白质表达，在非洲楝提取物存在下胶原蛋白的基因和/或蛋白质表达水平增加，优选至少3％，优选至少10％，更优选至少20％。优选地，这是胶原蛋白XVIII的蛋白质表达的增加。
在本发明的优选实施方案中，这是在产生它的“正常”人细胞即非患病细胞中测定的胶原蛋白XVIII的蛋白质表达的增加。有利地，所述增加在根据实施例1a)制备的非洲楝提取物的存在下测定。
根据本发明的一个有利的实施方案，胶原蛋白XVIII的蛋白质表达的增加在正常人角质细胞、正常人脂肪细胞、正常内皮细胞、汗腺的正常上皮细胞和/或毛囊正常干细胞中测定，特别是在正常人角质形成细胞、正常脂肪细胞和/或正常内皮细胞中测定，更有利地仍然在根据实施例1a)制备的非洲楝提取物存在下测定。
除非另有说明，“正常”细胞、“正常”角质细胞、“正常”脂肪细胞意指未患病的细胞。
优选地，胶原蛋白XVIII的蛋白质表达在使用抗-胶原蛋白XVIII抗体进行免疫细胞化学标记后，通过共聚焦显微镜检查测定，如实施例2中所述。
本发明的主题还是本发明的非洲楝提取物用于维持和/或增加胶原蛋白XVIII的基因和/或蛋白质表达、优选蛋白质表达、用于增加皮肤、粘膜和/或皮肤附属器上的真皮表皮接界的厚度中的用途。
“增加真皮表皮接界的厚度”在此意指增加其密度和/或增加真皮与表皮之间的交换并改善其结构。
本发明的主题是本发明的非洲楝提取物的美容用途，其用于维持和/或增加胶原蛋白XVIII的基因和/或蛋白质表达、优选蛋白质表达、用于减少皮肤毛孔的可见度和/或使得皮肤更光滑和/或用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性和/或用于限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。
出于本发明的目的，“减少皮肤毛孔的可见度”旨在表示收紧皮肤毛孔，也就是说减小毛孔的开口直径、和/或皮肤表面处毛孔的密度和/或面积，和/或防止皮肤毛孔扩张。因此，本发明的提取物使得可能减小皮肤表面处毛孔的开口和/或密度。
皮肤毛孔的可见度可以在施用包含本发明的提取物的组合物之后、由皮肤科医生在预定区域上通过称为“评分”的评价在体内证明。它还可以通过图像分析的客观仪器方法来证明，该方法使得能够用交叉偏振光从施用包含本发明提取物的组合物之前和之后取得的志愿者面部的高分辨率照片中提取和量化特定参数。
皮肤毛孔的密度也可以通过成像、特别是通过条纹投影技术、通过在特别是实施例5b)中描述的条件下测量称为曲率的参数而在体内测定。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的非洲楝提取物以有效量、在施用包含本发明的提取物的霜剂28天后将皮肤毛孔的可见度减少至少10％、优选至少20％；有利地，非洲楝提取物在实施例1a)中描述的条件下制备，优选如实施例1e)中所述以活性成分的形式配制。
此外，根据本发明，“使得皮肤更光滑”旨在表示增加皮肤表面的均匀性，并减少皮肤微细凹凸(microrelief)。
此外，根据本发明，“限制和/或减少排汗”旨在表示收紧汗腺的管道和/或减少汗腺的开口直径，从而减少产生的汗液量。
此外，“限制和/或减少头发和/或体毛脱落”旨在表示减少休止期中头发和/或体毛的数量。
这些效果可以通过本领域技术人员公知的常规测定方法来测定。
此外，根据本发明，“增加头发和/或体毛生长”旨在表示增加头发和/或体毛生长速率，这可以根据常规使用的方法测定。
此外，根据本发明，“减少或限制皮脂产生”旨在表示防止皮脂腺分泌的皮脂增加或减少皮脂腺分泌皮脂的量。该性质可以根据本领域技术人员众所周知的常规方法测定，例如定量分析贴剂型样品(例如SebutapeTM)中皮脂标记物例如角鲨烯。
出于本发明的目的，“增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性”旨在表示为美学目的，分别增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性，它们特别地因胶原蛋白XVIII的表达减少、更具体地在真皮表皮接界的表达减少而已经失去紧致度和/或弹性。
“维持皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性”旨在表示预防皮肤和/或粘膜和/或头皮下垂，它们特别地归因于胶原蛋白XVIII的表达、更特别地在真皮表皮接界的表达减少。
皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性可以根据本领域技术人员公知的常规方法测定，尤其是通过使用皮肤弹性测量仪(cutometer)、或者TonodermTM或DynaSKIN合并dermaTOP的体内测定。
因此，优选地，在本发明提取物存在下，该非洲楝提取物将皮肤和/或粘膜和/或头皮的弹性增加至少0.5％，优选至少1.5％，仍然更优选至少4％且仍然更有利地至少8％。
在本发明的一个实施方案中，通过基于评价在受控气流的作用下皮肤变形的方法、在重建的皮肤上测量皮肤弹性的增加，所述变形在实施例4a)所述条件下通过激光测量。
在本发明的另一个实施方案中，通过测量通过参数(Y2-Ue)/Y2反映的皮肤的粘弹性行为，在实施例4b)中描述的条件下、在相同的重建皮肤上测量皮肤弹性的增加(图1)。当所述参数减小时，皮肤的弹性增加，这意味着皮肤更容易恢复其初始状态。
如实施例5a)中所述，弹性也可以用皮肤弹性测量仪测定其即时和/或整体方面。
本发明的非洲楝提取物是局部可接受的美容和/或皮肤病学提取物。
出于本发明的目的，“局部可接受的”旨在表示适合于局部施用、对于皮肤和/或粘膜和/或头皮无毒性和无刺激性的成分，其不会诱导过敏反应并且在化学上不是不稳定。
本发明的提取物可以口服或局部使用。有利地，它局部使用。出于本发明的目的，“局部”旨在表示将成分直接局部施用和/或喷在皮肤和/或粘膜和/或头皮表面上。
本发明的提取物可以是植物非洲楝的全部或部分的任意提取物，且尤其是选自根、树皮、花、种子、幼苗、地上部分，特别是枝干和/或叶及其混合物。本发明的提取物优选为树皮提取物。
所述提取物可以通过本领域公知的植物提取方法得到，例如通过将植物的至少一部分、优选相对于植物部分和溶剂的总重为1％-30％(w/w)重量、优选10％-20％(w/w)重量浸渍在溶剂或溶剂混合物中，例如100/0-0/100(v/v)的水、醇、多元醇、二醇、水/醇、水/二醇或水/多元醇混合物。例如，提取物能够通过在水/乙醇混合物中、特别是在相应比例70/30(v/v)中提取得到。优选地，提取物通过水提取得到。
因此，本发明的提取物可以通过提取相对于树皮和溶剂的总重10％-20％重量的树皮得到，优选水作为唯一溶剂。
出于本发明的目的，“通过水提取得到的提取物”旨在表示通过用水溶液提取得到的任意提取物，所述水溶液包含相对于水溶液总重大于60％重量、有利地至少70％重量、特别地至少80％重量、更具体地至少90％重量、特别是至少95％重量的水，甚至更有利地不含丁二醇，特别是不含醇，特别是仅包含水。
所述提取物可以通过在如下温度范围内提取得到：4℃-95℃、优选20℃-95℃、仍然更优选50-95℃、优选70℃-90℃。在一个优选的实施方案中，提取在85℃进行。
提取可以在1小时-24小时期间进行，优选1小时-12小时、仍然更优选1小时-6小时。有利地，提取在1小时期间进行。
在本发明的一个有利的实施方案中，提取在2个连续的提取温度期间内进行，第一个提取期间温度范围在4℃-95℃、优选20℃-70℃、有利地在50℃温度，期限为1小时-12小时、优选4小时期限，随后第二个提取期间温度范围在50℃-95℃、优选85℃温度，期限为1小时。
水提取物可以通过任何方式脱色，特别是使用活性炭或脱色土，在这种情况下，该方法通常包括重新调节提取物的pH的附加步骤。作为变化形式或另外，上述方法可以包括在脱色步骤之前或之后根据本领域技术人员已知的任何技术对提取物进行除臭的步骤。根据一个实施方案，然后可将任选脱色和/或除臭的提取物通过蒸发浓缩或通过任何方式脱水，尤其是通过喷雾干燥或冻干。佐剂、优选麦芽糖糊精可以在干燥之前或之后并且优选在脱水之前加入到液体提取物中，其比例为相对于脱水后获得的干提取物的总重为20-80％重量的麦芽糖糊精。
因此，在本发明的一个特别有利的实施方案中，提取物通过在作为唯一溶剂的水中提取相对于树皮和水的总重20％重量的量的非洲楝树皮而得到，在50℃温度下提取4小时、然后在85℃温度下提取1小时。然后将由此获得的提取物离心并除去沉淀物。然后将提取物冷却至4℃的温度，过滤，然后加入麦芽糖糊精。将提取物在实施例1a)中描述的条件下灭菌(UHT)，然后喷雾干燥。
在另一个实施方案中，本发明的提取物是通过在作为唯一溶剂的水中提取相对于树皮和水的总重10％重量的量的非洲楝树皮而得到，在50℃温度下提取4小时，然后在85℃温度下提取1小时。将提取物离心，除去沉淀，然后将提取物冷却至4℃的温度。过滤得到的液体提取物，加入麦芽糖糊精。将提取物在实施例1b)中描述的条件下灭菌(UHT)，然后喷雾干燥。
在本发明的另一个实施方案中，提取物通过在作为唯一溶剂的水中提取相对于叶子和水的总重10％重量的量的非洲楝叶子而得到，在50℃温度下提取4小时，然后在85℃温度下提取1小时。将提取物离心，然后冷却至4℃的温度。将得到的液体提取物干燥并加入麦芽糖糊精。将提取物在实施例1c)中描述的条件下灭菌(UHT)，然后喷雾干燥。
在另一个实施方案中，本发明的提取物通过在85℃的温度下、在水/乙醇混合物(70/30；v/v)中提取相对于树皮和溶剂混合物的总重为20％重量的量的非洲楝树皮1小时而得到。将提取物离心并除去沉淀物。将提取物干燥并加入麦芽糖糊精。将提取物在实施例1d)中描述的条件下喷雾干燥。
在另一个实施方案中，提取物可以在实施例1a)中描述的条件下获得，然后在实施例1e)中描述的条件下、在水和甘油的混合物中稀释，最终量为相对于提取物、水和甘油的总重为1.5％重量。
非洲楝提取物可单独用作美容和/或皮肤病学活性成分或包含在美容和/或皮肤病学组合物中。当其以活性成分的形式单独使用时，本发明的提取物优选在甘油存在或不存在的情况下是可溶的并溶于溶剂，尤其是极性溶剂，例如水、醇、多元醇、二醇或其混合物。优选地，将提取物溶解在水和甘油的混合物中以产生可以容易配制的美容成分。有利地，在这种情况下，所述提取物根据实施例1e)中描述的方案生产。
因此，本发明的另一个主题是单独或包含在包含至少一种美容接受的赋形剂的美容组合物中的本发明的提取物在皮肤和/或粘膜和/或头皮上的局部用途。
本发明的非洲楝提取物优选以相对于组合物的总重1x10-4％至10％重量、优选1x10-4％至5％重量、仍然更有利地1x10-3％至3％重量的浓度存在于组合物中，特别是相对于组合物总重0.001至0.1％重量。
在本发明的一个实施方案中，包含本发明提取物的美容组合物用于维持和/或增加胶原蛋白XVIII在如下中的基因和/或蛋白质表达，优选蛋白质表达：皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器，特别是皮肤腺体，尤其是汗腺和皮脂腺和毛囊，特别是皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮脂腺的基板、优选DEJ，和/或脂肪细胞、内皮细胞、汗腺和/或毛囊的基板；优选用于增加皮肤和/或粘膜和/或头皮上的真皮表皮接界的厚度；用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性；和/或用于减少皮肤毛孔的可见度和/或使得皮肤更光滑和/或用于限制和/或减少排汗和/或用于限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。
美容组合物还可以包括一种或多种美容可接受的赋形剂，其选自表面活性剂和/或乳化剂、防腐剂、缓冲剂、螯合剂、变性剂、遮光剂、pH调节剂、还原剂、稳定剂、增稠剂、胶凝剂、成膜聚合物、填充剂、消光剂(mattifying agent)、光泽剂、色素、染料、芳香剂及其混合物。CTFA(美容成分手册(Cosmetic Ingredient Handbook)，第二版(1992))描述了适用于本发明的各种美容赋形剂。
有利地，赋形剂选自聚甘油、酯、纤维素聚合物和衍生物、羊毛脂衍生物、磷脂、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、基于蔗糖的稳定剂、维生素E及其衍生物、黄原胶、天然和合成蜡、植物油、甘油三酯、不皂化物质、植物甾醇、硅氧烷、蛋白水解物、甜菜碱、氧化胺、植物提取物、蔗糖酯、二氧化钛、甘氨酸和对羟基苯甲酸酯，更优选选自硬脂基聚氧乙烯(2)醚、硬脂基聚氧乙烯(21)醚、乙二醇-15硬脂醚、十六十八烷基(cetearyl)醇、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、丁二醇、辛二醇、天然生育酚、甘油、二羟基鲸蜡基磷酸钠、异丙基羟基鲸蜡基醚、硬脂酸乙二醇酯、三异壬精(triisononanoin)、椰油酸辛酯(octyl cocoate)、聚丙烯酰胺、异链烷烃(isoparaffin)、月桂基聚氧乙烯(7)醚、卡波姆、丙二醇、己二醇、甘油、红没药醇、聚二甲基硅氧烷、氢氧化钠、PEG 30-二多羟基硬脂酸酯、癸酸/辛酸甘油三酯、辛酸十六十八烷基酯、己二酸二丁酯、葡萄籽油、霍霍巴油、硫酸镁、EDTA、环(二)甲基硅酮、黄原胶、柠檬酸、十二烷基硫酸钠、矿物油和蜡、异硬脂酸异硬脂醇酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇异硬脂酸酯、PEG 8、蜂蜡、氢化棕榈仁油甘油酯、羊毛脂油、芝麻油、乳酸鲸蜡酯、羊毛脂醇、蓖麻油、二氧化钛、乳糖、蔗糖、低密度聚乙烯、等渗盐水溶液，及其混合物。
本发明的美容组合物可以选自水性或油性溶液、霜剂或水凝胶或油凝胶，尤其是沐浴凝胶、乳、乳液、微乳或纳米乳液，其特别是基于水包油型或油包水型或多重或硅氧烷的，面膜、浆液(serum)、洗液、液体皂、皮肤病学棒、软膏、泡沫、贴剂、无水产品，优选为液体或糊剂或固体，例如化妆粉、棒或唇膏的形式，特别是唇膏的形式。有利地，它是霜剂或浆液。
本发明使用的组合物还可含有导致互补或协同作用的美容活性成分，例如抗衰老活性剂。在这些活性剂中，可以提及刺激真皮大分子合成或防止其降解的活性剂、刺激角质细胞增殖的活性剂、安抚剂、保湿剂，或者用于调节毛孔和/或其开口大小的其他活性剂。
在抗衰老活性剂中，可以提及：
-刺激纤连蛋白合成的试剂，特别是玉米提取物，这种提取物特别是由BASFBeauty Care Solutions France以DelinerTM的名称出售，以及由Sederma公司以商品名
Figure BDA0001825507180000121
出售的棕榈酰五肽；
-刺激弹性纤维形成的试剂，例如由申请人以DermagenistTM名称销售的甘牛至(Origanum majorana)提取物；
-用于刺激胞外基质和/或上皮基底膜中的串珠样蛋白聚糖和肌营养不良蛋白聚糖表达的试剂，例如由BASF Beauty Care Solutions France以PerlauraTM名称出售的圆穗蓼(Polygonum bistorta)提取物；
-保护胞外基质成纤维细胞生长因子(FGF2)免于其降解和/或其变性的试剂，尤其是如BASF Beauty Care Solutions France的公布号为FR0654316的专利申请中所描述的黄葵(Hibiscus abelmoscus)提取物，并且由BASF Beauty Care Solutions France出售，名称为LinefactorTM；和/或刺激成纤维细胞生长的活性剂，例如含有肽的发酵大豆提取物，称作PhytokineTM，由BASF Beauty Care Solutions France销售，并在专利申请EP1119344B1(Laboratoires Expanscience)中有描述，且优选这两种提取物的组合；
-刺激层粘连蛋白合成的试剂，特别是生物技术改良的麦芽提取物，这种提取物特别是由BASF Beauty Care Solutions France以BasalineTM的名称销售；
-刺激透明质酸合酶2(HAS2)表达和/或活性的试剂，例如专利申请FR 2893252 A1中所述的植物提取物，且特别是高良姜(红豆蔻(Alpinia galanga))的水提取物，且由BASFBeauty Care Solutions France以名称HyalufixTM销售；
-刺激赖氨酰氧化酶样(LOXL)合成的试剂，例如Geophila cordifolia的提取物和专利申请FR 2855968中描述的那些，特别是由BASF Beauty Care Solutions France以名称Lys'lastineTM销售的莳萝子(dill)提取物；
-刺激胞内ATP合成的试剂，特别是藻类掌状海带(Laminaria digitata)的提取物；
-刺激糖胺聚糖合成的试剂，例如乳发酵的产物；
-活化剂，可刺激胶原蛋白，例如视黄醇和/或维生素C；
-抑制金属蛋白酶(MMPs)的活性剂，例如更特别是MMP1、2、3和9，例如类视色素和衍生物、寡肽和脂肽、脂氨基酸，由BASF Beauty Care Solutions France SAS以ArganylTM名称销售的刺阿干(Argania spinosa)叶的提取物；番茄红素；异黄酮；栎精；莰非醇；芹菜配基；
-再填充剂，特别是由BASF Beauty Care Solutions France以HyaluronicFilling SpheresTM为名销售的透明质酸填充球；
-用于增加LOX的表达、用于强化表皮结构的试剂，例如菊苣(Cichorium intybus)提取物，由BASF Beauty Care Solutions France以名称LOX-AGETM销售；
-增加胶原蛋白去糖化和/或增加I型胶原蛋白的表达的试剂，例如拟丹参(Salviamiltiorrhiza)叶提取物和烟酸的组合，由BASF Beauty Care Solutions France以CollRepairTM的名称销售；
-刺激基膜聚糖(lumican)和胶原蛋白合成的试剂，例如由BASF Beauty CareSolutions France以名称DermicanTM销售并在专利申请WO2005/120554A1中描述的合成乙酰基Gln Asp Val His四肽；
-用于保护和刺激弹性蛋白和胶原蛋白的试剂，例如BASF Beauty CareSolutions France以名称ElestanTM销售的Manilkara multinervis叶提取物和由BASFBeauty Care Solutions France以名称EperulineTM销售的镰形木荚苏木(Eperuafalcata)根提取物；
-抗色素斑剂，特别是通过抑制黑色素合成起作用，例如由BASF Beauty CareSolutions France以名称ActiwhiteTM销售的豌豆(Pisum sativum)提取物和蔗糖二月桂酸酯的协同复合物，或由BASF Beauty Care Solutions France以名称RadianskinTM销售的羟基苯氧基丙酸。
优选用于本发明组合物的刺激角质细胞增殖的试剂尤其包含类视色素，例如视黄醇及其酯，包括棕榈酸视黄酯和间苯三酚。刺激角质细胞分化的试剂包括例如矿物质如钙和木酚素如开环异落叶松树脂酚，以及由BASF Beauty Care Solutions France以名称NeurobioxTM销售的欧蓍草(Achillea millefollium)的提取物。
作为优选用于本发明组合物的安抚剂可以提及：五环三萜、乌索酸及其盐、石竹素及其盐、桦木酸及其盐、水杨酸盐、特别是水杨酸锌、红没药醇、尿囊素、ω-3不饱和油、可的松、氢化可的松、吲哚美辛和倍他米松、抗炎活性剂且特别是申请FR 2847267中描述的那些，特别是由BASF Beauty Care Solutions France SAS以名称
Figure BDA0001825507180000151
出售的野葛(Pueraria lobata)的根提取物，可可树(Theobroma cacao)提取物。
在用于调节孔径和/或其开口和/或皮脂产生的试剂中，可以提及例如由BASFBeauty Care Solutions France以名称LOX-AGETM销售的菊苣提取物，或以名称Mat-XSTMClinical销售的合成肌氨酸，和/或如BASF Beauty Care Solutions France的专利申请WO2010/063674中所述且以名称MAT XSTMBright中销售的雄蕊状鸡脚参(Orthosiphonstamineus)提取物。
作为优选用于本发明组合物的保湿剂，可以提及：支链淀粉、透明质酸钠和海藻酸钠的组合，由BASF Beauty Care Solutions France以名称Patch2OTM销售。
本发明的另一个目的在于美容护理方法，其特征在于该方法包括施用、优选局部施用本发明的非洲楝提取物或包含该提取物的美容组合物，特别地将其施用于皮肤和/或粘膜和/或头皮上，用于维持和/或增加胶原蛋白XVIII在如下中的基因和/或蛋白质表达、优选蛋白质表达：皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器，特别是在基板、优选DEJ，包括皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮脂腺的DEJ，脂肪细胞、内皮细胞、汗腺和/或毛囊基板；用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性；和/或用于减少皮肤毛孔的可见度和/或使得皮肤更光滑和/或限制和/或减少排汗和/或限制和/或减少头发和/或体毛脱落和/或增加头发和/或体毛生长和/或减少或限制皮脂产生。
在本发明的一个实施方案中，所述护理方法将本发明的非洲楝提取物或包含其的美容组合物施用在身体的皮肤和/或粘膜和/或面部和/或头皮的全部或部分上组成，优选腿部、大腿、手臂、腹部、胸部、颈部、腋窝、唇，仍然更优选面部的全部或部分，且优选脸颊、额头、下巴、唇、眼周区域、面部的“T”区。
因此，所述美容护理方法由局部施用本发明的包含非洲楝提取物的美容组合物组成，其浓度相对于组合物的总重为1x10-4％至10％重量、优选1x10-4％至5％重量、更有利的仍然为1x10-3％至3％重量、特别是0.001％至0.1％重量。
本发明的最后一个主题涉及如上所述的非洲楝提取物，其任选地以药物、优选皮肤病学组合物的形式，如上所述，其用于预防和/或治疗涉及XVIII型胶原蛋白的基因和/或蛋白质表达、优选蛋白质表达丧失的疾病，例如牵涉眼睛发育的那些如克诺布洛赫综合征(Knobloch syndrome)，牵涉脑发育的那些，牵涉神经***和某些肾小球病的那些。
本发明的提取物可以是药物、优选皮肤病学组合物的形式，其包含至少一种药学上和/或皮肤病学上接受的赋形剂。在本发明的一个实施方案中，所述组合物通过局部和/或口服、优选通过局部施用。
有利地，根据本发明的非洲楝提取物存在于药物、优选皮肤病学组合物中，相对于组合物的总重，浓度为1x10-4％至10％重量、优选1x10-4％至5％重量、更有利地1x10-3％至3％重量，特别是相对于组合物总重为0.001％至0.1％重量。
下面给出参考本发明说明的实施例。给出这些实施例是为了示例的目的，并且决不限制本发明的范围。每个实施例都具有一般范围。这些实施例是本发明的组成部分，并且从包括实施例在内的整体描述中看来，无论任何相对于现有技术似乎具有新颖性的特征均为本发明的组成部分。
附图清单：
图1：皮肤的生物力学性能、皮肤残余变形和粘弹性成分的表达的评价。
图2:皮肤弹性的体内测定的系数。
实施例1：不同非洲楝提取物的制备
实施例1a)将相对于树皮和水的总重为20％重量的来自非洲楝植物的树皮进行研磨，然后在50℃的温度下、在作为唯一溶剂的水中提取4小时，然后在85℃的温度下提取1小时。然后将提取物离心并除去沉淀物。然后将提取物冷却至4℃的温度。过滤得到的液体提取物并加入麦芽糖糊精(其量使得麦芽糖糊精相对于脱水后得到的液体提取物和麦芽糖糊精的混合物的总重占50％重量)。将整个混合物进行UHT灭菌，然后喷雾干燥。
实施例1b)将相对于树皮和水的总重为10％重量的来自非洲楝植物的树皮进行研磨，然后在50℃的温度下在作为唯一溶剂的水中提取4小时，然后在85℃的温度下提取1小时。然后将提取物离心，然后冷却至4℃的温度。过滤得到的液体提取物，加入麦芽糖糊精。提取物经UHT灭菌，然后喷雾干燥。
实施例1c)将相对于叶子和水的总重为10％重量的来自植物的叶子研磨，然后在50℃的温度下在作为唯一溶剂的水中提取4小时，然后在85℃的温度下提取1小时。然后将提取物离心，然后冷却至4℃的温度。将得到的液体提取物过滤，干燥，加入麦芽糖糊精。提取物经UHT灭菌，然后喷雾干燥。
实施例1d)将相对于树皮和下面的溶剂混合物的总重为20％重量的来自非洲楝植物的树皮进行研磨，然后用水/乙醇混合物(70/30；v/v)在85℃温度下提取1小时。然后将提取物离心并除去沉淀物。加入麦芽糖糊精。将提取物喷雾干燥。
实施例1e)将相对于树皮和水的总重为20％重量的来自非洲楝植物的树皮进行研磨，然后在50℃的温度下在作为唯一溶剂的水中提取4小时，然后在85℃的温度下提取1小时。然后将提取物离心并除去沉淀物。然后将提取物冷却至4℃的温度。过滤得到的液体提取物并加入麦芽糖糊精(其量使得麦芽糖糊精相对于脱水后得到的液体提取物和麦芽糖糊精的混合物的总重占50％重量)。将整个混合物进行UHT灭菌，然后喷雾干燥。然后将提取物以美容活性成分的形式配制如下：将喷雾干燥的提取物稀释在水和甘油的混合物(其量为相对于水/甘油/提取物混合物的总重1.5％重量)和相对于水/甘油/提取物混合物为80％重量的甘油中，然后过滤。获得的提取物是液体提取物。
实施例2：皮肤衰老过程中胶原蛋白XVIII表达减少的证实
方案：收集来自6个不同年龄(10至69岁)的供体的面部皮肤样品，称为“正常”，即没有患病，然后在-80℃下冷冻。切割样品，然后在10分钟内用甲醇/丙酮的混合物固定，并用PBS(磷酸盐缓冲盐水)缓冲液冲洗。然后在环境温度下在初级抗-胶原蛋白XVIII抗体(特异性靶向胶原蛋白XVIII的产生胶原的部分而非内皮抑素(endostatin)部分的抗体)存在下温育样品。用PBS缓冲液冲洗后，将样品与含有荧光Cy3标记的二级家兔抗体一起温育。冲洗后，用DAPI试剂(4',6'-二脒基-2-苯基吲哚)染色细胞核。使用共聚焦显微镜观察和量化存在于真皮表皮接界的胶原蛋白XVIII的蛋白质表达的减少，并通过图像分析定量(每个供体3个活组织检查(n＝3)和每个活组织检查5个视野)。(SD：标准偏差)。
结果：表1
MEAN SD
年龄10岁的供体 36.81 11.79
年龄15岁的供体 27.07 4.29
年龄30岁的供体 20.60 8.79
年龄44岁的供体 16.51 3.19
年龄60岁的供体 14.26 2.72
年龄69岁的供体 13.34 3.98
结论：结果表明，胶原蛋白XVIII的表达随供体衰老而减少，证实胶原蛋白XVIII的表达与皮肤衰老之间的相关性。
实施例3：非洲楝提取物存在下胶原蛋白XVIII的表达增加
实施例3a)角质细胞中胶原蛋白XVIII的表达增加
方案：将来自健康36岁女性供体(女性，乳腺)的乳腺的“正常”即无疾病人角质细胞在限定培养基(KSFM)中、在根据实施例1a)制备的2种不同终浓度的非洲楝提取物存在下培养48小时，然后除去培养基。将获得的细胞层固定(磷酸盐缓冲盐水(PBS)缓冲液/多聚甲醛)，然后透化(PBS缓冲液/Triton)。
用在含有牛血清白蛋白(BSA)的PBS缓冲液中稀释至1/500的抗-胶原蛋白XVIII抗体测定胶原蛋白XVIII。90分钟后，将稀释至1/200的、与荧光素偶联的二级抗体在黑暗中施用2小时。干燥后，将混合物用氢氧化铵溶液再溶解。测量荧光(ENVision，PerkinElmer)。将荧光结果相对于在不存在非洲楝提取物(对照)时用相同细胞培养基获得的荧光标准化，并且与在每种条件下获得的细胞存活率相关联。所示结果对应于6次测试的平均值(n＝6)。(SD：标准偏差)。
结果：表2
MEAN SD
对照 100 14.0
非洲楝提取物3x10-3％(w/v培养基)实施例1a) 154.0 18.6
非洲楝提取物1.5x10-3％(w/v培养基)实施例1a) 149.9 11.1
结论：本发明的非洲楝提取物使人角质细胞的胶原蛋白XVIII的蛋白质表达相对于未处理的对照显著增加至少+49％(Dunnett统计分析检验，p<0.001)。
实施例3b)脂肪细胞中胶原蛋白XVIII的表达增加
方案：将源自雌性供体的称作正常的即无疾病皮下人类前脂肪细胞在37℃的温度下和5％CO2气氛中、在特定的生长培养基中培养3天。当达到细胞层饱和阶段时，用分化培养基代替所述培养基，其中已经加入了在实施例1a)中描述的条件下制备的、具有在培养基中不同终浓度(w/v)的本发明的非洲楝提取物，并在6天的时间内培养。
通过免疫细胞化学评估胶原蛋白XVIII的蛋白质表达。将上述培养的细胞用丙酮在-20℃下固定10分钟，然后冲洗(PBS缓冲液)，并在37℃下置于血清中30分钟并冲洗(PBS缓冲液)。然后将稀释至1/200的初级抗-胶原蛋白XVIII抗体在环境温度下温育2小时。冲洗后，将稀释至1/200的二级抗体在环境温度和远离光的条件下温育45分钟。然后除去培养基，然后在10分钟内将细胞复染(Evans Blue)，然后漂洗(PBS)。观察通过共聚焦显微镜检查进行。在图像分析后定量胶原蛋白XVIII。胶原蛋白XVIII的蛋白质表达的增加与所述胶原蛋白在图像上的占据百分比成正比。表3的结果表示为胶原蛋白XVIII的占据百分比的平均值(n＝6)。(SD：标准偏差)
结果：表3
平均值 SD
对照 4.1 0.4
非洲楝提取物1x10-4％(w/v培养基)实施例1a) 12.9 0.8
非洲楝提取物3x10-5％(w/v培养基)实施例1a) 8.9 0.8
结论：相对于未处理的对照，本发明的非洲楝提取物显著增加人脂肪细胞的胶原蛋白XVIII的蛋白质表达至少+117.1％和至多+214.6％(Shapiro-Wilk统计分析检验，p<0.001)。
实施例3c)内皮细胞中胶原蛋白XVIII的表达增加
方案：
将来自健康的62岁供体的、称作正常的即无疾病人内皮细胞在37℃的温度、5％CO2气氛下、在特定生长培养基(EMB-2)中培养5天。然后将细胞接种在8-孔Labtecks(millicell EZ载玻片)上，仍然在特定的生长培养基中，其中已经加入了在实施例1a)中描述的条件下制备的、在培养基中不同终浓度(w/v)的本发明的非洲楝提取物，并在3天和7天期间培养。
通过免疫细胞化学评估胶原蛋白XVIII的蛋白质表达。将下面的培养细胞用丙酮在-20℃固定10分钟，然后漂洗(PBS缓冲液)并在37℃下置于血清中30分钟并冲洗(PBS缓冲液)。然后将稀释至1/500的抗-胶原蛋白XVIII抗体在环境温度下温育2小时。将稀释至1/250的二级抗体(抗家兔Alexas 488，Invitrogen)在环境温度和远离光的条件下温育45分钟。然后冲洗培养基，然后在10分钟内染色(Evans Blue)，然后漂洗(PBS)。观察通过共聚焦显微镜检查进行。在图像分析后获得胶原蛋白XVIII的定量。胶原蛋白XVIII的蛋白质表达的增加与所述胶原蛋白在图像上的占据百分比成正比。
结果：
得到的结果表明，内皮细胞的胶原蛋白XVIII的表达显著增加。
实施例4：非洲楝提取物存在下皮肤的生物力学特性改善的体外证实
实施例4a)重建的皮肤模型的残留变形的改善
方案：在更新培养基的每个步骤中，以0.00075％(w/v)的浓度加入在实施例1a)中描述的条件下制备的本发明的非洲楝提取物。获取得自健康30岁女性供体的乳腺活检的、称作“正常”即没有患病的人体角质细胞以及得自健康18岁女性捐赠者的乳腺活组织检查的、称作“正常”的即未患病的人成纤维细胞。将成纤维细胞在含有10％小牛血清和抗生素(Normocin，100μg/ml)的特定DMEM(Dulbecco改良的Eagle培养基)培养基中培养。将角质细胞在含有抗生素的K-FSM培养基(Life Technologies)中培养，直至亚融合。将真皮成纤维细胞接种到由胶原蛋白、脱乙酰壳多糖和糖胺聚糖组成的基质上，并且将这些真皮等同物在37℃的温度和5％CO2气氛下培养28天。含有在特定DMEM培养基上培养的成纤维细胞的培养基补充10％胎牛血清、抗坏血酸(50μg/ml)和抗生素。
然后将角质细胞接种在真皮等同物上，并在含有牛血清白蛋白(BSA)(0.8％)、胰岛素、氢化可的松、抗坏血酸和抗生素的简单DMEM培养基中再培养21天。为了触发分化过程，在角质细胞接种后7天将重建的皮肤置于气-液界面上。
通过基于评估皮肤在受控气流下变形的方法测定重建皮肤模型的生物力学性质。通过耦合到仪器的激光来监测皮肤的变形。然后获得变形曲线(参见图1)。“残余”值反映皮肤的残余变形，单位为mm(残余，图1)。这种“残余”系数越小，则皮肤越有弹性并恢复其初始形态。结果以mm(n＝13)表示(SD：标准偏差)。
结果：表4
残留(mm) SD
对照 0.0451 0.0131
非洲楝提取物7.5x10-4％实施例1a) 0.0318 0.0189
结论：结果表明，在本发明的非洲楝提取物存在下培养的重建皮肤，与在没有提取物的情况下培养时相比，具有显著较低的残余变形率(Mann-Whitney统计分析检验p<0.05)。因此，本发明的提取物确实可以增加皮肤的弹性。
实施例4b)非洲楝提取物存在下重建皮肤的粘弹性成分的改善
方案：在上述条件下培养重建的皮肤。皮肤的粘弹性成分的评价通过参数(Y2-Ue)/Y2(图1)反映。当所述参数减小时，皮肤的弹性增加，这意味着皮肤更容易返回其初始状态。结果列于表5中，并用13次试验的平均值表示(n＝13)。
结果：表5
平均值 SD
对照 0.333 0.031
非洲楝提取物7.5x10-4％实施例1a) 0.256 0.062
结论：结果显示，在本发明非洲楝提取物存在下培养的重建皮肤，相对于对照，参数(Y2-Ue)/Y2显著降低(Mann-Whitney统计分析检验p<0.001)至少23.1％，这反映了重建皮肤的弹性增加。
实施例5：非洲楝提取物对皮肤的作用的体内证实
方案：将实施例6中描述的包含根据实施例1e制备的非洲楝提取物(其相对于霜剂的总重的最终浓度为1％)的霜剂和不含提取物的相同的安慰剂霜剂在2个月的时间期限内每天各自施用于25名年龄在53至65岁的女性高加索人志愿者的一半面部，她们的皮肤具有可见毛孔且失去弹性。
实施例5a)皮肤弹性的体内测定
考虑到R2和R7系数，通过皮肤弹性测定法(cutometry)评估皮肤弹性。R2系数对应于Ua/Uf比(皮肤变形的最大振幅与容量之间的部分)(参见图2)，这反映了整体弹性。R7系数对应于Ur/Uf比，这反映了皮肤的即时弹性(图2)。结果表示为与对照(没有非洲楝提取物的霜剂)相比，在时间T28和T56天时的弹性增加％。
结果：
表6：R2系数(Ua/Uf)
与安慰剂相比的Ua/Uf系数(R2)％改善
T56
1％非洲楝提取物(w/w) +10.70％
结论：结果显示，在每天施用56天后，与用安慰剂霜剂处理的一半面部皮肤相比，用包含非洲楝提取物的霜剂处理的一半面部皮肤的总弹性显著增加(p<0.05，Student’s t检验)。
表7:R7系数(Ur/Uf)
Figure BDA0001825507180000231
结论：结果显示，在每天施用28天后，与用安慰剂霜剂处理的一半面部皮肤相比，用包含非洲楝提取物的霜剂处理的一半面部皮肤的即时弹性显著增加9.6％(p<0.05，Student’s t检验)；在每日施用56天后，与用安慰剂霜剂处理的一半面部皮肤相比，用包含非洲楝提取物的霜剂处理的一般面部皮肤的即时弹性显著增加11.60％。
实施例5b)皮肤毛孔密度的体内测定
通过条纹投影法，通过称为“曲率”的参数分析皮肤微细凹凸来评估孔密度。该参数越大，则表面均匀性越大(孔隙和皮肤微细凹凸)。由于该测量是在脸颊上进行，因此可以直接与孔密度的测量值相关联。因此，该参数的减小反映了皮肤毛孔和皮肤微细凹凸的密度的降低。
结果：将结果表示为与安慰剂相比的曲率参数的％减少。
表8
T28 T56
1％非洲楝提取物(w/w) -22.8％ -38.2％
结论：结果显示所述参数减小，这反映出在28天施用包含本发明的非洲楝提取物的霜剂存在下，孔密度显著降低为22.80％(p<0.05，Student’s t检验)。
实施例5c)皮肤皱纹的体内测定
在上述条件(实施例5b的方案)下，通过条纹投影法测量所述皱纹的体积，在T28(28天)时测定本发明提取物对鱼尾纹皱纹的有效性。结果表示为在包含根据本发明非洲楝提取物的霜剂存在下，皱纹体积与对照(不含提取物的霜剂)相比的体积减少％。
结果：表9
T56
1％非洲楝提取物(w/w) -16.2
结论：与对照相比，非洲楝提取物使在T56天时检测到的皱纹体积减少16.2％(p<0.05，Student’s t检验)。
实施例6:包含非洲楝提取物的美容组合物的实施例
使用本领域技术人员已知的方法将下面的不同相A、B、C和D相混合在一起，以制备本发明的组合物。将比例表示为％。
A相
Figure BDA0001825507180000241
B相
Figure BDA0001825507180000242
Figure BDA0001825507180000251
/>
C相
卡波姆 0.15
水 10
D相
根据实施例1e)得到的非洲楝提取物 1.00。

Claims (21)

1.通过水提取得到的非洲楝提取物的非治疗性美容用途，其用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器中胶原蛋白XVIII的表达，以用于
减少皮肤毛孔的可见度和/或使得皮肤更光滑和/或
限制和/或减少排汗和/或
减少或限制皮脂产生，
其中所述非洲楝提取物是树皮提取物。
2.通过水提取得到的非洲楝提取物作为唯一活性成分的非治疗性美容用途，其用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器中胶原蛋白XVIII的表达，以用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性，其中所述非洲楝提取物是树皮提取物。
3.权利要求1或2所要求保护的非治疗性美容用途，用于维持和/或增加皮肤、和/或粘膜和/或头皮和/或皮脂腺的真皮表皮接界中、和/或脂肪细胞、内皮细胞、汗腺和/或毛囊的基板中胶原蛋白XVIII的表达。
4.权利要求3所要求保护的非治疗性美容用途，其中胶原蛋白XVIII的表达为蛋白质表达。
5.权利要求3所要求保护的非治疗性美容用途，其中胶原蛋白XVIII由角质细胞、脂肪细胞、内皮细胞、汗腺上皮细胞和/或毛囊干细胞表达。
6.权利要求1或2所要求保护的非治疗性美容用途，其中将所述提取物局部使用。
7.权利要求1或2所要求保护的提取物的非治疗性美容用途，使得非洲楝提取物在包含至少一种美容可接受的赋形剂的美容组合物中以相对于该组合物总重为1x10-4％至10％重量的浓度存在。
8.权利要求7所要求保护的提取物的非治疗性美容用途，使得非洲楝提取物在美容组合物中以相对于该组合物总重为1x10-4％至5％重量的浓度存在。
9.权利要求8所要求保护的提取物的非治疗性美容用途，使得非洲楝提取物在美容组合物中以相对于该组合物总重为1x10-3％至3％重量的浓度存在。
10.权利要求9所要求保护的提取物的非治疗性美容用途，使得非洲楝提取物在美容组合物中以相对于该组合物总重为0.001％至0.1％重量的浓度存在。
11.非治疗性美容护理方法，其特征在于该方法包括将通过水提取得到的非洲楝提取物和/或包含其的美容组合物施用于皮肤和/或粘膜和/或头皮上，用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器中胶原蛋白XVIII的基因和/或蛋白质表达，以用于
减少皮肤毛孔可见度和/或使得皮肤更光滑和/或
限制和/或减少排汗和/或
减少或限制皮脂产生，
其中所述非洲楝提取物是树皮提取物。
12.非治疗性美容护理方法，其特征在于该方法包括将通过水提取得到的非洲楝提取物作为唯一活性成分和/或包含其作为唯一活性成分的美容组合物施用于皮肤和/或粘膜和/或头皮上，用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮和/或皮肤附属器中胶原蛋白XVIII的基因和/或蛋白质表达，以用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的紧致度和/或弹性，其中所述非洲楝提取物是树皮提取物。
13.权利要求11或12所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中的施用是局部施用。
14.权利要求13所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中所述非洲楝提取物在美容组合物中的浓度为相对于该组合物总重为1x10-4％至10％重量。
15.权利要求13所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中通过水提取得到的非洲楝提取物或包含它的美容组合物的局部施用是在身体和/或面部和/或头皮的全部或部分上进行。
16.权利要求13所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中通过水提取得到的非洲楝提取物或包含它的美容组合物的局部施用是在腿、大腿、手臂、腹部、胸部、颈部、腋窝、唇的全部或部分上进行。
17.权利要求13所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中通过水提取得到的非洲楝提取物或包含它的美容组合物的局部施用是在全部或部分的面部上进行。
18.权利要求17所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中通过水提取得到的非洲楝提取物或包含它的美容组合物的局部施用是在面颊、前额、下巴、唇、眼周区域的全部或部分上进行。
19.权利要求17所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中通过水提取得到的非洲楝提取物或包含它的美容组合物的局部施用是在面部的“T”区域的全部或部分上进行。
20.权利要求14所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中所述美容组合物包含的非洲楝提取物，相对于该组合物总重，其浓度为1x10-4％至5％重量。
21.权利要求14所要求保护的非治疗性美容护理方法，其中所述美容组合物包含的非洲楝提取物，相对于该组合物总重，其浓度为1x10-3％至3％重量。
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