CN108753440A - 一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油及其制备方法和用途 - Google Patents

一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油及其制备方法和用途 Download PDF

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CN108753440A CN201810546814.3A CN201810546814A CN108753440A CN 108753440 A CN108753440 A CN 108753440A CN 201810546814 A CN201810546814 A CN 201810546814A CN 108753440 A CN108753440 A CN 108753440A
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Abstract

本发明公开了一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，步骤如下：茶籽粉碎成茶籽粉末；将茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到茶油；改变萃取釜中的温度和萃取时间，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物；茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。本发明超临界CO2流体萃取不添加夹带剂，最终得到富含茶皂素苷元和黄酮苷元等活性物质的茶油，实现在同一套超临界流体萃取装置上提取出茶油和茶皂素苷元及黄酮苷元，整个生产过程简单高效，茶皂苷元和黄酮苷元的提取率高，纯度高，有利于工业化生产。

Description

一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油及其制备方法和用途。
背景技术
山茶科(Theaceae)山茶属(CamelliaLinn)植物种子可以榨油，茶籽油中富含油酸等单不饱和脂肪酸(含量在80％左右)，维生素E等多种维生素以及角鲨烯等稀有成分，长期食用可降低血清胆固醇含量、降低血脂，是预防心血管疾病理想的保健用油。同时，榨除茶油后的茶籽饼粕中含有皂素、多酚、茶多糖及茶蛋白等多种生物活性物质，其中，皂素是一种性能优越的天然非离子型表面活性剂，同时还具有溶血性、鱼毒性等生物活性，被广泛应用于农业、水产养殖业、日用化工、医药等领域；油茶多酚不仅具有很好的抗氧化性，而且还能延缓机体衰老、抑制癌症、糖尿病、动脉粥样硬化、心肌梗塞等疾病的发生。
茶油制备常采用浸出法或压榨法，由于超临界CO2萃取技术在提取茶油时具有生产周期短、产率高、无溶剂残留、在保证产品品质的同时不破坏其生物活性成分等优点，逐步被工业化大生产所采用。
专利申请号CN201310238508.0公开了一种微波强化同程萃取茶籽油和茶皂素的方法，由如下步骤实现：将油茶籽剥壳、粉碎，经过微波辐照一段时间后，装入超临界流体萃取装置的萃取釜内，利用超临界流体CO2对油茶籽粉进行萃取，然后从分离釜放出萃取液而得到茶籽油；然后通过超临界流体萃取装置的夹带剂加入口加入一定比例的低级醇水溶液，改变萃取温度和萃取压力，再次利用超临界CO2流体萃取一定时间后从分离釜放出萃取液而得到茶皂素醇溶液。此发明以低级醇为夹带剂，所得提取物后处理繁琐、杂质多、纯度差，并且提取出的物质以极性大的茶皂素和黄酮苷类等成分为主，这类物质不溶于茶油，得到的茶油无降血脂效果或者降血脂效果较差。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油及其制备方法和用途。
本发明提供了一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，包括以下步骤：
1)将未剥壳的茶籽粉碎成茶籽粉末；
2)将茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，萃取釜的温度为30-34℃，萃取釜的压力为25-45MPa，萃取时间为1-2.5h，分离釜的温度为30-40℃，分离釜的压力为7-9MPa；
3)改变萃取釜中的温度和萃取时间，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，萃取釜的温度为50-60℃，萃取釜的压力为25-45MPa，萃取时间为0.5-0.8h，分离釜的温度为20-25℃，分离釜的压力为7-9MPa；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
优选的，所述茶籽为油茶、山茶、浙江红山茶、南山茶、贵州红山茶、狭叶油茶、糙果茶、高州油茶、硬叶糙果茶、长瓣短柱茶、落瓣短柱茶、绵管红山茶、果红山茶、阔柄糙果茶、狭叶瘤果茶和茶梅中的一种的种子。
优选的，所述茶籽为油茶的种子。
优选的，步骤2)中所述萃取釜的温度为30℃，萃取釜的压力为35MPa，萃取时间为1.2h。
优选的，步骤2)中所述CO2流量为2-10L/h。
优选的，步骤2)中所述分离釜的温度为40℃。
优选的，步骤3)中所述萃取釜的温度为55℃，萃取时间为0.5h。
优选的，步骤3)中所述分离釜的温度为25℃。
本发明依据上述制备方法还提供了一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
本发明还提供了一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油在降血脂、抗血栓、耐缺氧以及抗心肌缺血方面的用途。
本发明步骤2)中所述分离时间为1.5-2.5h。
本发明步骤3)中所述分离时间为1-2h。
本发明所述茶籽粉末的粒径为20-60目，含水量为1-5％。
本发明最终得到的茶油中除含有茶皂素苷元和黄酮苷元外，还含有其他具有降血脂的生物活性物质。
本发明所述膏状提取物中富含茶皂素苷元和黄酮苷元活性物质。
本发明中得到的含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油可以制备成有助于降血脂、抗血栓、耐缺氧以及抗心肌缺血方面的的油品、胶囊剂、保健品、调味剂、外用擦剂和药品。
本发明前期研究证明，从茶籽饼粕提取得到的茶皂素和黄酮苷组合物，及其水解产物茶皂素苷元和黄酮苷元的组合物，均具有良好的降血脂、抗血栓、耐缺氧以及抗心肌缺血作用。现有技术是通过两步萃取，在第二步加入夹带剂的方法分别获得茶油和茶皂素(如专利申请号CN201310238508.0)，但由于茶皂素极性大，不溶于茶油，两者不能直接混合，目前还未出现直接从茶籽中提取得到富含茶皂素苷元和黄酮苷元等降血脂功效成分的茶油，现有的具有降血脂功效的茶油都是外部加入其他具有降血脂功效的物质，如专利申请号CN201310003592.8中加入金枪鱼、何首乌、山楂等，这些物质的加入不仅会影响茶油的口感，也会缩短茶油的保质期。因此，目前缺乏即能充分提取出茶籽中茶油，又能保留溶于油脂的脂溶性相对较强的茶皂素苷元和黄酮苷元等降血脂生物活性物质的制备方法。
本申请采用超临界CO2流体萃取方法，第一次萃取提取出茶油，第二次萃取提高萃取温度至50-60℃，并缩短萃取时间，不添加夹带剂，最终得到富含茶皂素苷元和黄酮苷元等活性物质的茶油。本申请不需要添加夹带剂，提取物后处理简单，杂质少、纯度高，通过两次萃取能够实现与茶油同程充分提取相对茶油极性较高的，且溶于茶油的茶皂素苷元和黄酮苷元类成分，得到具有降血脂、抗血栓、耐缺氧以及抗心肌缺血功效的茶油，相对于现有技术，本发明不需要通过茶皂素和黄酮苷酸解或者碱解得到茶皂素苷元和黄酮苷元，而直接在同一套超临界流体萃取装置上提取出茶油和茶皂素苷元及黄酮苷元，整个生产过程简单高效，茶皂苷元和黄酮苷元的提取率高，纯度高，有利于工业化生产。
本发明的有益效果是：
1、本发明不需要添加夹带剂，提取物后处理简单，杂质少、纯度高。
2、本发明的茶籽不需要经过剥壳，直接粉碎，前期处理简单，并且茶油的出油率和茶皂素苷元及黄酮苷元的提取率高，纯度高，生产效率高。
3、本发明采用超临界CO2流体萃取方法，第一次萃取提取出茶油，第二次萃取提高萃取温度至50-60℃，并缩短萃取时间，不添加夹带剂，最终得到富含茶皂素苷元和黄酮苷元等活性物质的茶油，实现在同一套超临界流体萃取装置上提取出茶油和茶皂素苷元及黄酮苷元，整个生产过程简单高效，茶皂苷元和黄酮苷元的提取率高，纯度高，有利于工业化生产。
4、本发明直接从茶籽中提取得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油，制得的茶油中除富含传统茶油中的有机酸类、氨基酸、维生素E等天然活性物质外，还含有茶皂素苷元和黄酮苷元等生物活性物质，且稳定性好，本发明比茶油的传统提取方法制得的茶油的提取率高，油脂质量好，制备方法工艺简单可行、高效环保卫生、经济效益显著。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进一步详细说明。
实施例1
1)将油茶籽粉碎成茶籽粉末，油茶籽粉末的粒径为40目，含水量为3％；
2)将2Kg油茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，CO2流量为2L/h，萃取釜的温度为30℃，萃取釜的压力为35MPa，萃取时间为1.2h，萃取后的萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，分离釜的温度为40℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为2.5h；
3)升高萃取釜中的温度至55℃，萃取釜的压力为35MPa，缩短萃取时间为0.5h，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，分离釜的温度为25℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为1.5h；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，搅拌速度为6000r/min，搅拌时间为30min，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
实施例2
1)将山茶籽粉碎成茶籽粉末，山茶籽粉末的粒径为20目，含水量为1％；
2)将2Kg山茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，CO2流量为6L/h，萃取釜的温度为30℃，萃取釜的压力为45MPa，萃取时间为2.5h，萃取后的萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，分离釜的温度为35℃，分离釜的压力为7MPa，分离时间为2h；
3)升高萃取釜中的温度至50℃，萃取釜的压力为45MPa，缩短萃取时间为0.8h，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，分离釜的温度为20℃，分离釜的压力为7MPa，分离时间为2h；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，搅拌速度为6000r/min，搅拌时间为30min，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
实施例3
1)将南山茶籽粉碎成茶籽粉末，南山茶籽粉末的粒径为60目，含水量为5％；
2)将2Kg南山茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，CO2流量为10L/h，萃取釜的温度为34℃，萃取釜的压力为25MPa，萃取时间为1h，萃取后的萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，分离釜的温度为30℃，分离釜的压力为9MPa，分离时间为1.5h；
3)升高萃取釜中的温度至60℃，萃取釜的压力为25MPa，缩短萃取时间为0.5h，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，分离釜的温度为22℃，分离釜的压力为9MPa，分离时间为1h；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，搅拌速度为6000r/min，搅拌时间为30min，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
对比例1
1)将油茶籽粉碎成茶籽粉末，茶籽粉末的粒径为40目，含水量为3％；
2)将2Kg茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，CO2流量为2L/h，萃取釜的温度为30℃，萃取釜的压力为35MPa，萃取时间为1.2h，萃取后的萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，分离釜的温度为40℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为2.5h；
3)加入茶籽粉末质量50％的体积分数为60％的乙醇水溶液后，升高萃取釜中的温度至55℃，萃取釜的压力为35MPa，缩短萃取时间为0.5h，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离，除去乙醇后得到膏状提取物，分离釜的温度为25℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为1.5h；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合，搅拌速度为6000r/min，搅拌时间为30min，得到的茶油和膏状提取物不能混合，出现分层。
对比例2
1)将油茶籽粉碎成茶籽粉末，油茶籽粉末的粒径为40目，含水量为3％；
2)将2Kg油茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，CO2流量为2L/h，萃取釜的温度为30℃，萃取釜的压力为35MPa，萃取时间为1.2h，萃取后的萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，分离釜的温度为40℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为2.5h；
3)升高萃取釜中的温度至45℃，萃取釜的压力为35MPa，缩短萃取时间为0.5h，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，分离釜的温度为25℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为1.5h；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，搅拌速度为6000r/min，搅拌时间为30min，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
对比例3
1)将茶籽粉碎成茶籽粉末，茶籽粉末的粒径为40目，含水量为3％；
2)将2Kg茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，CO2流量为2L/h，萃取釜的温度为30℃，萃取釜的压力为35MPa，萃取时间为1.2h，萃取后的萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，分离釜的温度为40℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为2.5h；
3)升高萃取釜中的温度至55℃，萃取釜的压力为35MPa，萃取时间为2h，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，分离釜的温度为25℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为1.5h；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，搅拌速度为6000r/min，搅拌时间为30min，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
对比例4
1)将茶籽粉碎成茶籽粉末，茶籽粉末的粒径为40目，含水量为3％；
2)将2Kg茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，CO2流量为2L/h，萃取釜的温度为45℃，萃取釜的压力为40MPa，萃取时间为2h，萃取后的萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，分离釜的温度为40℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为2.5h；
3)升高萃取釜中的温度至55℃，萃取釜的压力为30MPa，萃取时间为3h，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，分离釜的温度为25℃，分离釜的压力为7.5MPa，分离时间为1.5h；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，搅拌速度为6000r/min，搅拌时间为30min，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
实施例1-3和对比例1-4的茶籽的出油率及茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率如表1。
茶籽的出油率(％)＝(茶油重量)/(茶籽重量)×100％
茶皂素苷元提取率(％)＝(提取的茶皂素苷元重量)/(茶籽中原始含有茶皂素苷元重量)×100％
黄酮苷元提取率(％)＝(提取的黄酮苷元重量)/(茶籽中原始含有黄酮苷元重量)×100％
茶皂素苷元和黄酮苷元的含量检测均采用紫外分光光度法，为现有技术。
表1茶籽的出油率及茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率
实施例 出油率(％) 茶皂素苷元提取率(％) 黄酮苷元提取率(％)
实施例1 25.8 96.1 92.5
实施例2 25.0 92.5 88.9
实施例3 23.8 96.2 93.0
对比例2 25.6 83.5 82.7
对比例3 25.8 95.7 86.8
对比例4 25.5 95.7 85.5
在萃取的过程中加入夹带剂，得到的提取物与茶油不相溶，不能得到具有降血脂等功效的茶油；从表1中的数据可知，实施例1与对比例2相比，茶籽的出油率及茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率都较高，说明两步萃取的温度差不高于15℃时，会降低茶籽的出油率及茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率，尤其是茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率；实施例1与对比例3相比，茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率都较高，说明第二步萃取的时间过长时，会降低茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率，尤其是黄酮苷元的提取率；实施例1与对比例4相比，茶籽的出油率及茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率都较高，说明第一步萃取的温度较高时，会降低茶籽的出油率及茶皂素苷元和黄酮苷元的提取率，尤其是黄酮苷元的提取率。
降血脂功效的验证实验：
为了验证本发明的产品是否具有辅助降血脂的功能性，本发明样品选择实施例1得到的膏状提取物混合制成粉剂，进行动物测定，测试过程如下。
取SPF级SD雄性大鼠50只，体重160-180g，适应性喂养5d，采用分层随机抽样方法，分为5组，每组10只，分笼饲养，每笼5只。分别为正常对照组、模型对照组、阳性药物组、苷元提取物低、高剂量组。除正常对照组给予普通饲料外，其余各造模组大鼠给予定量高脂饲料，自由取水，分组当天开始灌胃给药。苷元提取物低、高剂量分别为17.5mg/kg、35.0mg/kg，阳性药物为阿托伐他汀钙0.9mg/kg，正常对照组与模型对照组灌胃等体积纯净水，每天1次，连续给药42天。每周称体重一次。根据体重观察样品对体重的影响，并调整给药体积。第42天禁食不禁水12h后称重，结果见表2，采用10％水合氯醛(0.3ml/kg)麻醉大鼠，腹主动脉采血，测定血清中CHO、TG、VDL-C、HDL-C含量，结果见表3。随后取肝脏、脾脏用AB-204型电子天平称重、计算肝脏指数和脾脏指数，结果见表4。
实验结果以均数±标准差(X±S)表示，SPSS22.00统计软件One-Way AVONA LSD法分析处理。
给药42天，各组大鼠体质量均正常增加。与模型对照组比较，苷元低、高剂量组对大鼠体重差异无统计学意义(p>0.05)。
表2大鼠体重的变化
注：与正常对照组比较★p<0.05；★★p<0.01；与模型对照组比较■p<0.05；■■p<0.01；与阳性药物组比较▲p<0.05；▲▲p<0.01。
表3大鼠血脂水平的变化
注：与正常对照组比较★p<0.05；★★p<0.01；与模型对照组比较·p<0.05；■■p<0.01；与阳性药物组比较
▲p<0.05；▲▲p<0.01。
给药后，模型对照组与正常对照组比较，血清CHO、TG和LDL-C含量明显升高(P<0.01),表明造模成功。给药后，苷元低、高剂量组大鼠的CHO、TG和LDL-C水平都明显低于模型对照组(P<0.05，P<0.01)，对大鼠血清中HDL-C无明显影响(P＞0.05)。
表4大鼠肝脏指数和脾脏指数的变化
注：与正常对照组比较★p<0.05；★★p<0.01；与模型对照组比较·p<0.05；■■p<0.01；与阳性药物组比较
▲p<0.05；▲▲p<0.01。
从表2-4的数据可知，模型组大鼠血清中CHO、TG和LDL-C含量显著高于正常对照组，表明造模成功；与模型对照组比较，苷元剂量组能影响大鼠对高脂饲料的吸收，预防大鼠TC、TG和LDL-C升高，能降低大鼠肝脏指数；综合判定本实施例1得到的含茶皂素苷元和黄酮苷元的膏状提取物具有降血脂功效。
抗血栓功效的验证实验：
为了验证本发明的产品是否具有抗血栓的功能性，本发明样品选择实施例1得到的膏状提取物混合制成粉剂，进行动物测定，测试过程如下。
取SPF级SD雄性大鼠50只，体重160-180g，适应性喂养5d，采用分层随机抽样方法，分为5组，分别为空白对照组、模型对照组、阳性药物组、苷元提取物低、高剂量组，阳性药物组。每日灌胃给药，空白对照组和模型对照组给纯净水，苷元提取物低、高剂量组分别给苷元提取物17.5和35mg/kg。阳性药物组给350mg/kg的复方三七胶囊。连续10天。末次给药后24小时，腹腔注射麻醉下沿大鼠腹中线开腹腔，分离下腔静脉，于下腔静脉和左肾静脉交叉下方用丝线结扎，缝合腹壁。4h后重新开腹腔，用止血钳将距结扎处2cm的下腔静脉和与下腔静脉连接的其他静脉侧枝结扎，剪取血栓前腹主动脉取血，再剪取该段结扎的静脉。分离出血管内血栓与滤纸上吸干残血，测其血栓重量，结果见表5。
表5大鼠下腔静脉血栓重量的变化
注：与空白对照组比较：**P<0.01与模型对照组比较：#P<0.05##P<0.05
从表5中的数据可知，与空白对照组比较：模型对照组大鼠下腔静脉血栓重量显著增加(P<0.01)。与模型对照组比较：阳性药物组大鼠下腔静脉血栓重量显著降低(P<0.05)；苷元提取物低剂量、高剂量组大鼠下腔静脉血栓重量显著降低(P<0.05)；说明本实施例1得到的苷元膏状提取物具有抗血栓功效。
耐缺氧功效的验证实验：
为了验证本发明的产品是否具有耐缺氧的功能性，本发明样品选择实施例1得到的膏状提取物混合制成粉剂，进行动物测定，测试过程如下。
SPF级ICR小鼠，雌雄各半，体重18-22g，采用分层随机抽样方法，分为4组。分为别为空白对照组、阳性药物组、苷元提取物低剂量组和高剂量组。分笼饲养，每笼4--5只。每天1次给药，空白对照组给纯净水，苷元提取物低、高剂量组分别给苷元提取物25和50mg/kg。阳性药物组给500mg/kg的复方三七胶囊，连续14天。末次给药后1h，将小鼠放入事先准备好的内装15克钠石灰的125毫升的瓶中。立即盖紧瓶盖。记录从放入小鼠至小鼠停止呼吸的时间即为小鼠的常压耐缺氧时间，结果见表6。
表6小鼠耐缺氧存活时间的变化
注：与空白对照组比较：#P<0.05##P<0.05
从表6中的数据可知，与空白对照组比较：两个剂量苷元提取物组大鼠存活时间均较模型组显著延长(P<0.05)；有提高大鼠耐缺氧存活时间的作用，说明本实施例1得到的苷元膏状提取物具有耐缺氧功效。
抗心肌缺血功效的验证实验：
为了验证本发明的产品是否具有抗心肌缺血的功能性，本发明样品选择实施例1得到的茶油和膏状提取物混合制成粉剂，进行动物测定，测试过程如下。
SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重180-220g，随机分为空白对照组、模型对照组、阳性药物组、苷元提取物低剂量和高剂量组。各组分别灌胃给药，空白对照组和模型对照组给纯净水，苷元提取物低、高剂量组分别给苷元提取物17.5和35mg/kg。阳性药物组给40mg/kg的心得安。每天1次，连续10天。末次给药1h后，腹腔注射20％乌拉坦(1g/100g)麻醉大鼠，然后用心电图机描记Ⅱ导联缺血前正常心电图(ECG异常者剔除)。稳定5min后造模动物舌下静脉注射异丙肾上腺素(ISO)10mg/kg。空白对照注射氯化钠溶液,立即记录ECG(即给ISO后30、60、120、300秒的ECG)。比较各组大鼠的心率、T波变化，结果见表7和表8。
表7大鼠心电图T波峰值的变化
注：与空白对照组比较：**P<0.01与模型对照组比较：#P<0.05##P<0.05
表8大鼠心电图心率的变化
注：与空白对照组比较：**P<0.01与模型对照组比较：#P<0.05##P<0.05
从表7中的数据可知，给大鼠静脉注射异丙肾上腺素后，所造成的心肌缺血改变表现为心电图的T波峰值显著抬高，心率显著加快。均与正常对照组有极显著差异((P<0.01)。两个剂量苷元提取物组对异丙肾上腺素引起的心肌缺血改变均有较好的缓解作用，与模型对照组比较，各时间点(30s、60s、120s、300s)心电图T波峰值显著降低(P<0.01)。
从表8中的数据可知，对异丙肾上腺素引起的心率加快，苷元高剂量组有减缓心率的作用。造模后各时间点(30s、60s、120s、300s)大鼠心率下降较模型组有显著差异。说明说明本实施例1得到的含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油具有抗心肌缺血功效。

Claims (10)

1.一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将未剥壳的茶籽粉碎成茶籽粉末；
2)将茶籽粉末加入萃取釜中进行超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到茶油，萃取釜的温度为30-34℃，萃取釜的压力为25-45MPa，萃取时间为1-2.5h，分离釜的温度为30-40℃，分离釜的压力为7-9MPa；
3)改变萃取釜中的温度和萃取时间，进行二次超临界CO2流体萃取，萃取液进入到分离釜中分离得到膏状提取物，萃取釜的温度为50-60℃，萃取釜的压力为25-45MPa，萃取时间为0.5-0.8h，分离釜的温度为20-25℃，分离釜的压力为7-9MPa；
4)茶油和膏状提取物通过高速均质机混合均匀，得到含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油。
2.如权利要求1所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，所述茶籽为油茶、山茶、浙江红山茶、南山茶、贵州红山茶、狭叶油茶、糙果茶、高州油茶、硬叶糙果茶、长瓣短柱茶、落瓣短柱茶、绵管红山茶、果红山茶、阔柄糙果茶、狭叶瘤果茶和茶梅中的一种的种子。
3.如权利要求1所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，所述茶籽为油茶的种子。
4.如权利要求1或2所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述萃取釜的温度为30℃，萃取釜的压力为35MPa，萃取时间为1.2h。
5.如权利要求1或2所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述CO2流量为2-10L/h。
6.如权利要求1或2所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述分离釜的温度为40℃。
7.如权利要求1或2所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，步骤3)中所述萃取釜的温度为55℃，萃取时间为0.5h。
8.如权利要求1或2所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法，其特征在于，步骤3)中所述分离釜的温度为25℃。
9.一种含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油，其特征在于，所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油是由如权利要求1-8任一项所述含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油的制备方法制得的。
10.一种如权利要求9所述的含茶皂素苷元和黄酮苷元的茶油在降血脂、抗血栓、耐缺氧以及抗心肌缺血方面的用途。
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