CN108640908A - 高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于天然植物有效成分提取分离技术领域，涉及一种高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾及其制备方法。该方法包括：(1)重结晶：将水飞蓟宾原料与溶剂混合，加热回流溶解，回收部分溶剂后冷却静置析出固体，过滤；所述溶剂为丙酮和/或丁酮；(2)重复步骤(1)2‑4次；(3)惰性气体保护下，将步骤(2)所得产物与水混合，加入氢氧化钠溶液，使体系呈PH大于等于9，然后滴加盐酸溶液，调整体系pH为5‑7，过滤，真空干燥，得到所述水飞蓟宾。本发明的水飞蓟宾产品纯度为99％以上，单一有关物质含量低于0.1％、且溶剂残留符合药典要求。

Description

高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾及其制备方法

技术领域

本发明属于天然植物有效成分提取分离技术领域，更具体地，涉及一种高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾及其制备方法。

背景技术

水飞蓟宾(silybin)来源于菊科植物水飞蓟(silybum maruianum L.Gaertn.)的果实，主要存在于水飞蓟籽粒的壳中，因其具有保肝、抗氧化、抗肿瘤、抗炎等活性，同时毒性小、无致畸和致突变作用，成为重要的药用、保健品原料。水飞蓟宾容易包裹溶剂，导致溶剂残留不合格，有些溶剂即使通过高温处理也不易去除。而且，在高温真空干燥的情况下，又容易产生有关物质，导致有关物质含量过高。

在制备水飞蓟宾原料药及制剂过程中，必须考虑其纯度、残留溶剂及有关物质含量等，因此，高纯度、低溶剂残留、低含量有关物质的水飞蓟宾制备一直是技术难题。

专利申请201610453396公开一种高纯度水飞蓟宾分离纯化方法，采用水飞蓟素双相萃取技术分离水飞蓟宾粗品I，采用膜分离技术分离水飞蓟宾粗品I得到水飞蓟宾粗品II，通过重结晶技术结晶水飞蓟宾粗品II得到水飞蓟宾精品I，最后采用等离子重结晶法结晶水飞蓟宾精品I得到高纯度水飞蓟宾，HPLC检测水飞蓟宾含量99％以上，通过工艺的改良减少了有机溶剂用量。该申请所用技术方案较为复杂，成本较高。

专利申请201710883364公开了一种水飞蓟宾的提取方法，包括如下步骤：(1)将待萃取的水飞蓟壳清洗干净后沥干水分，然后进行微波干燥，使其中水分降到10％以下；(2)加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮；(3)总黄酮加水溶解后，取得沉淀物加入乙醇溶液，溶解得水飞蓟宾粗品，采用丙酮为溶剂，加入水飞蓟宾粗品进行加热溶解，加热至回流；(4)将饱和的大孔树脂进行酸洗，然后进行醇洗，从而得到水飞蓟宾的乙醇溶液；(5)冷却搅拌析晶，搅拌；过滤，95％乙醇洗涤，抽干；滤饼干燥，得到水飞蓟宾成品；(6)二次真空干燥浓缩，制得精制的水飞蓟宾。该申请没有公开精制的水飞蓟宾的纯度。

专利申请201610328004公开了一种水飞蓟宾的精提取方法，包括如下步骤：a)压榨除油；b)提取；c)浓缩；d)吸附；e)洗脱；f)干燥提取；g)残留乙醇分离；h)二次浓缩，该申请通过在水飞蓟宾提取过程中采用超声波辅助提取，从而增加了水飞蓟宾的提取效率。该申请没有公开水飞蓟宾的纯度，以及溶剂的残留量。

专利200710085960公开了一种水飞蓟宾的提取方法，该方法以水飞蓟素为起始原料，经过两次回流，两次浓缩、提取循环，再脱色、精制得水飞蓟宾。该专利没有公开水飞蓟宾的纯度和收率。

专利201310386397公开了一种高纯度水飞蓟宾的生产方法。该方法以水飞蓟籽为原料，方法包括：剥壳，经有机溶剂水溶液提取，减压浓缩回收溶剂，加水稀释，去除沉淀，用凝胶型氢键吸附树脂吸附，洗涤去除杂质，高浓度有机溶剂水溶液解吸，解吸液脱色，浓缩结晶，重结晶，干燥，即得到高纯度水飞蓟宾产品，含量为>95％。

江苏大学硕士论文“水飞蓟素提取及高纯度水飞蓟宾制备新工艺的研究”公开了以无水乙醇溶解水飞蓟宾后，加水稀释至70％乙醇，然后结晶、洗脱。利用水飞蓟宾和相关杂质的溶解度差异和稀释溶剂的方法，获得水飞蓟宾的纯度＞97％，原料中水飞蓟宾转移率＞82％。

现有技术中的上述方法还不能实现超高纯度水飞蓟宾(如99％以上)的制备，或者虽能得到较高纯度水飞蓟宾但制备方法复杂成本较高，并且，大多未关注水飞蓟宾中的溶剂残留问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾及其制备方法。本发明的水飞蓟宾产品纯度为99％以上，单一有关物质含量低于0.1％、且溶剂残留符合药典要求。

具体地，本发明提供一种高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾制备方法，该方法包括：

(1)重结晶：将水飞蓟宾原料与溶剂混合，加热回流溶解，回收部分溶剂后冷却静置析出固体，过滤；

所述溶剂为丙酮和/或丁酮；

(2)重复步骤(1)2-4次；

(3)惰性气体保护下，将步骤(2)所得产物与水混合，加入氢氧化钠溶液，使体系pH大于等于9，然后滴加盐酸溶液，调整体系pH为5-7，过滤，真空干燥，得到所述水飞蓟宾。

本发明的制备方法从水飞蓟宾粗品开始，优选地，所述水飞蓟宾原料中水飞蓟宾的纯度为94-96％。

本发明对溶剂的加入量没有特别限定，满足重结晶要求即可，优选地，相对于每克水飞蓟宾原料，所述溶剂的加入量为15-50ml。

根据本发明，优选地，回收溶剂的量为溶剂加入量的20-60％。

根据本发明，优选地，步骤(3)中，相对于每克步骤(2)所得产物，水的加入量为40-60ml。

根据本发明，优选地，步骤(3)中，在0-30℃条件下加入氢氧化钠溶液，例如在冰浴条件下。

本发明对所用氢氧化钠溶液和盐酸溶液的浓度和用量没有特别的限定，只要满足上述pH要求即可，优选地，所述氢氧化钠溶液为低浓度，具体优选浓度为2-6％；所述盐酸溶液的浓度优选为0.8-1.2mol/L。

根据本发明，优选地，步骤(3)中，所述真空干燥的温度为30-100℃。多次重结晶之间也可进行真空干燥，温度可以为30-100℃。

根据本发明，所述惰性气体可以为本领域常规的各种惰性气体，优选为氮气。

本发明还提供由上述水飞蓟宾制备方法制得的水飞蓟宾，所述水飞蓟宾的纯度为99％以上，优选为99.9％以上，溶剂(丙酮和/或丁酮)残留量低于0.5％，符合药典对丙酮和丁酮的残留要求。

本发明通过多次重结晶并结合酸碱处理，制得了高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾产品，并且，该方法简便易行，可低成本、成规模地提纯水飞蓟宾原料。

本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

通过结合附图对本发明示例性实施方式进行更详细的描述，本发明的上述以及其它目的、特征和优势将变得更加明显。

图1示出了实施例1第一次重结晶得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图2示出了实施例1第二次重结晶得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图3示出了实施例1第三次重结晶得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图4示出了实施例1酸碱处理后得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图5示出了实施例2第一次重结晶得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图6示出了实施例2第二次重结晶得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图7示出了实施例2第三次重结晶得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图8示出了实施例2第四次重结晶得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

图9示出了实施例2酸碱处理后得到的水飞蓟宾产品的组成及含量。

具体实施方式

下面将更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。

以下实施例中，水飞蓟宾原料的纯度为95％左右，来源于句容市倍思特医药材料有限公司。

实施例1

(1)第一次重结晶：在5000ml反应瓶中加入水飞蓟宾原料150克，丙酮3000ml，加热回流溶解，回收丙酮至溶液总体积约1000ml，冰箱中冷却过夜，过滤，50℃真空干燥，得107g水飞蓟宾产品S1-1，检测结果如图1所示。产品S1-1中水飞蓟宾的纯度为99.220％，总有关物质含量为0.78％，单一含量最高的有关物质为0.277％。

(2)第二次重结晶：向107克水飞蓟宾产品S1-1中加入丙酮5000ml，加热回流溶解，回收溶剂至溶液总体积约1200ml，冰箱中冷却过夜，过滤，50℃真空干燥，得85g水飞蓟宾产品S1-2，检测结果如图2所示。产品S1-2中水飞蓟宾的纯度为99.458％，总有关物质含量为0.542％，单一含量最高的有关物质为0.174％。

(3)第三次重结晶：向85克水飞蓟宾产品S1-2中加入丙酮3000ml，加热回流溶解，回收溶剂至溶液总体积约700ml，冰箱中冷却过夜，过滤，50℃真空干燥，得57g水飞蓟宾产品S1-3，检测结果如图3所示。产品S1-3中水飞蓟宾的纯度为99.746％，总有关物质含量为0.254％，单一含量最高的有关物质为0.104％。

(4)酸碱处理：在氮气保护下，在反应瓶中加入20克水飞蓟宾产品S3，纯化水1000ml，冰浴下加入4％的氢氧化钠溶液80g，此时体系pH≥9，滴加浓度为1mol/L的盐酸82ml，调节体系pH为6-7，过滤，70℃真空干燥，得水飞蓟宾产品18g，检测结果如图4所示。产品中水飞蓟宾的纯度为99.946％，有关物质仅检测到一种，含量为0.054％，丙酮溶剂残留含量为0.39％。

实施例2

(1)第一次重结晶：在5000ml反应瓶中加入水飞蓟宾原料150克，丁酮3000ml，加热回流溶解，回收丁酮至溶液总体积约1000ml，冰箱中冷却过夜，过滤，50℃真空干燥，得119g水飞蓟宾产品S2-1，检测结果如图5所示。产品S2-1中水飞蓟宾的纯度为99.184％，总有关物质含量为0.816％，单一含量最高的有关物质为0.273％。

(2)第二次重结晶：向119克水飞蓟宾产品S2-1中加入丁酮5000ml，加热回流溶解，回收溶剂至溶液总体积约1200ml，冰箱中冷却过夜，过滤，50℃真空干燥，得92g水飞蓟宾产品S2-2，检测结果如图6所示。产品S2-2中水飞蓟宾的纯度为99.253％，总有关物质含量为0.747％，单一含量最高的有关物质为0.225％。

(3)第三次重结晶：向92克水飞蓟宾产品S2-2中加入丁酮3000ml，加热回流溶解，回收溶剂至溶液总体积约700ml，冰箱中冷却过夜，过滤，50℃真空干燥，得68克水飞蓟宾产品S2-3，检测结果如图7所示。产品S2-3中水飞蓟宾的纯度为99.470％，总有关物质含量为0.530％，单一含量最高的有关物质为0.123％。

(4)第四次重结晶：向68克水飞蓟宾产品S2-3中加入丁酮3000ml，加热回流溶解，回收溶剂至溶液总体积约700ml，冰箱中冷却过夜，过滤，50℃真空干燥，得52克水飞蓟宾产品S2-4，检测结果如图8所示。产品S2-4中水飞蓟宾的纯度为99.626％，总有关物质含量为0.374％，单一含量最高的有关物质为0.100％。

(5)酸碱处理：在氮气保护下，在反应瓶中加入52克水飞蓟宾产品S2-4，纯化水1000ml，冰浴下加入4％的氢氧化钠溶液80g，此时体系pH≥9，滴加浓度为1mol/L的盐酸82ml，调节体系pH为6-7，过滤，70℃真空干燥，得水飞蓟宾产品47g，检测结果如图9所示。产品中水飞蓟宾的纯度为99.930％，有关物质仅检测到一种，含量为0.070％，丁酮溶剂残留含量为0.42％。

以上已经描述了本发明的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。

Claims (8)

1.一种高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾制备方法，其特征在于，该方法包括：

(1)重结晶：将水飞蓟宾原料与溶剂混合，加热回流溶解，回收部分溶剂后冷却静置析出固体，过滤；

所述溶剂为丙酮和/或丁酮；

(2)重复步骤(1)2-4次；

(3)惰性气体保护下，将步骤(2)所得产物与水混合，加入氢氧化钠溶液，使体系pH大于等于9，然后滴加盐酸溶液，调整体系pH为5-7，过滤，真空干燥，得到所述水飞蓟宾。

2.根据权利要求1所述的水飞蓟宾制备方法，其中，所述水飞蓟宾原料中水飞蓟宾的纯度为94-96％。

3.根据权利要求1所述的水飞蓟宾制备方法，其中，回收溶剂的量为溶剂加入量的20-60％。

4.根据权利要求1所述的水飞蓟宾制备方法，其中，步骤(3)中，相对于每克步骤(2)所得产物，水的加入量为40-60ml。

5.根据权利要求1所述的水飞蓟宾制备方法，其中，步骤(3)中，在0-30℃条件下加入氢氧化钠溶液。

6.根据权利要求1所述的水飞蓟宾制备方法，其中，步骤(3)中，所述氢氧化钠溶液的浓度为2-6％；所述盐酸溶液的浓度为0.8-1.2mol/L。

7.根据权利要求1所述的水飞蓟宾制备方法，其中，步骤(3)中，所述真空干燥的温度为30-100℃。

8.由权利要求1-7中任意一项所述的水飞蓟宾制备方法制得的水飞蓟宾，其特征在于，所述水飞蓟宾的纯度为99％以上，溶剂残留量低于0.5％。