CN108602898A - 交联透明质酸的组合及其制备方法 - Google Patents

交联透明质酸的组合及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108602898A
CN108602898A CN201680080495.0A CN201680080495A CN108602898A CN 108602898 A CN108602898 A CN 108602898A CN 201680080495 A CN201680080495 A CN 201680080495A CN 108602898 A CN108602898 A CN 108602898A
Authority
CN
China
Prior art keywords
hyaluronic acid
cross
linked
combination
viscosity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201680080495.0A
Other languages
English (en)
Inventor
崔圣喆
金贤
金贤一
梁起瑛
朴晓承
李百镐
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hanmi Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Hanmi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hanmi Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Hanmi Pharmaceutical Co Ltd
Priority claimed from PCT/KR2016/005819 external-priority patent/WO2017131298A1/en
Publication of CN108602898A publication Critical patent/CN108602898A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/0241—Containing particulates characterized by their shape and/or structure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/20—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/24—Crosslinking, e.g. vulcanising, of macromolecules
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
    • A61L2400/06—Flowable or injectable implant compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/34—Materials or treatment for tissue regeneration for soft tissue reconstruction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2305/00—Characterised by the use of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08J2301/00 or C08J2303/00
    • C08J2305/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L2205/00—Polymer mixtures characterised by other features
    • C08L2205/02—Polymer mixtures characterised by other features containing two or more polymers of the same C08L -group
    • C08L2205/025—Polymer mixtures characterised by other features containing two or more polymers of the same C08L -group containing two or more polymers of the same hierarchy C08L, and differing only in parameters such as density, comonomer content, molecular weight, structure

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

提供了一种制备具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，该方法包括在含乙醇的碱性水溶液中使透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联；一种制备具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，该方法包括在碱性水溶液中使具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联；和一种交联透明质酸的组合，其包括具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸。

Description

交联透明质酸的组合及其制备方法
相关申请的交叉引用
本申请要求在韩国知识产权局于2016年1月29日提交的韩国专利申请No.10-2016-0011843和2016年2月1日提交的韩国专利申请No.10-2016-0012519的权益，其公开内容通过引用以其整体并入本文。
技术领域
本公开涉及交联透明质酸的制备方法和具有适用于活体的粘弹性的交联透明质酸的组合，其包括使用相同方法制备的交联透明质酸。
背景技术
透明质酸是生物聚合物材料，包括由N-乙酰基-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸组成的线性连接的重复单元，并且还已知在动物胎盘、玻璃体液、滑液、公鸡鸡冠等中普遍存在。还已知透明质酸通过链球菌属(Streptococcus spp)(例如，链球菌(Streptococcus equi)或兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)或葡萄球菌属(Staphylococcus spp)的微生物发酵产生。
是一种交联透明质酸注射剂，一次注射可提供持续长达6个月的效果，在美国市售。包括通过用含有***的水溶液从公鸡鸡冠中提取透明质酸而得到的交联透明质酸，其由于与透明质酸连接的蛋白质与***的轻度交联而具有低粘弹性(US 4,713,448)。将轻度交联透明质酸与具有增强的粘弹性的其进一步交联透明质酸(通过使用二乙烯基砜(DVS)作为交联剂而使轻度交联透明质酸进一步交联而制备)组合，从而制备用于施加到人体的关节腔中的具有适当粘弹性的交联透明质酸的组合
然而，动物源性透明质酸例如来自公鸡鸡冠的透明质酸可能由于动物源性病毒和源材料的质量不一致而具有质量控制问题。
发明内容
技术问题
本公开提供一种制备具有低粘弹性的交联透明质酸的方法。
本公开提供一种具有适用于人体的适当粘弹性的交联透明质酸的组合。
本公开提供一种生物相容性材料，其包括交联透明质酸的组合。
本公开提供一种制备具有适用于活体的适当粘弹性的交联透明质酸的组合的方法。
问题的解决方案
根据本公开的一个方面，提供一种制备具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，所述方法包括在含乙醇的碱性水溶液中使透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联。
根据本公开的另一方面，提供一种制备具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，所述方法包括在碱性水溶液中使采用上述方法制备的交联透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂进一步交联。
根据本公开的另一方面，提供一种交联透明质酸的组合，所述组合包括具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸。
根据本公开的另一方面，提供一种交联透明质酸的组合，该组合包括：通过使用包括在含乙醇的碱性水溶液中使透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联的方法制备的具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸；和
通过使用包括在碱性水溶液中使具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联的方法制备的具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸。
根据本公开的另一方面，提供一种生物相容性材料，其包括任何上述交联透明质酸的组合。
根据本公开的另一方面，提供制备交联透明质酸的组合的方法，该方法包括将具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸组合，其中调节组合比例以满足待制备的交联透明质酸的组合的目标粘弹性。
本发明的有益效果
根据本公开的一个或多个实施方式，在碱性水溶液中使用环氧系交联剂制备交联透明质酸的方法中，将乙醇加入碱性水溶液中，使得所制备的交联透明质酸可具有低粘弹性。可以根据反应条件调节交联透明质酸的粘弹性。通过将具有低粘弹性的交联透明质酸与通过使低粘弹***联透明质酸进一步交联得到的具有高粘弹性的交联透明质酸组合，可以制备具有所需粘弹性的交联透明质酸的组合。因此，可以制备具有适合用于人体的粘弹性、特别是与人的滑液具有相似的粘弹性的交联透明质酸的生物相容性组合，以有效地用于骨关节炎治疗。
附图说明
图1是说明根据本发明的一个实施方式的制备交联透明质酸的组合的方法的流程图。
图2是根据本发明的一个实施方式，作为测量用高分子量(约2.5MDa)透明质酸的一次交联产物和二次交联产物以约9：1的重量混合比例制备的交联透明质酸的组合的粒度的结果的粒度分布图。
图3是根据本公开的一个实施方式的细胞存活率的图，说明MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基四唑鎓)测定对用高分子量透明质酸的一次交联产物和二次交联产物以约9：1的重量混合比例制备的交联透明质酸的组合以及阳性(特氟隆)对照组和阴性(胶乳)对照组的结果。
具体实施方式
除非另外定义，否则本文中使用的所有术语(包括技术和科学术语)具有与本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的含义相同的含义。尽管本文列出了示例性方法或材料，但是其他类似或等同的方法或材料也在本发明的范围内。除非另外定义，否则本文中的任何数值表达可以被解释为近似的含义，例如“约”。作为参考文献公开的所有出版物均通过引用以其整体并入本文。
本公开的发明人尝试从源自微生物的经纯化的透明质酸源材料制备轻度交联透明质酸，但由于经纯化的微生物来源的透明质酸的蛋白质含量低而失败。作为对具有低蛋白质含量的经纯化的微生物来源的透明质酸的轻度交联方法的研究的结果，本发明人发现通过将乙醇引入碱性水溶液(其中发生与多官能环氧系交联剂的常规透明质酸交联反应)中得到了具有新低粘弹性范围的轻度交联透明质酸。本发明人还发现，具有增强的粘弹性的交联透明质酸可以通过具有低粘弹性的轻度交联透明质酸与多官能环氧系交联剂的二次交联反应得到。
本公开的一个方面提供交联透明质酸，其具有50-200Pa的弹性和20-100Pa的粘性。
交联透明质酸不只限于通过特定交联方法得到的那些交联透明质酸。
在一些实施方式中，交联透明质酸可通过包括如下步骤的方法制备：在含乙醇的碱性水溶液中使透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联。稍后将更详细地对其进行描述。
具有50-200Pa的弹性和20-100Pa的粘性的交联透明质酸可以用作使用透明质酸的任何生物相容性材料，该生物相容性材料例如选自由关节炎治疗植入物、皱纹填充剂、化妆品填充剂和药物载体所组成的组。如果需要，交联透明质酸可以与可以通过进一步的交联反应制备的具有增强的粘弹性的交联透明质酸组合用作更合适的生物相容性材料。
本公开的另一方面提供制备具有50-200Pa的弹性和20-100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，该方法包括在含有乙醇的碱性水溶液中用具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂使透明质酸交联。
本公开的另一方面提供制备具有400-800Pa的弹性和40-100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，该方法包括在碱性水溶液中用具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂使采用上述方法制备的交联透明质酸进一步交联。
如本文所用，使用上述方法制备的具有50-200Pa的弹性和20-100Pa的粘性的交联透明质酸也被称为“一次交联产物”，而通过使一次交联产物进一步交联制备的具有400-800Pa的弹性和40-100Pa的粘性的交联透明质酸也被称为“二次交联产物”。一次交联产物可以是透明质酸凝胶的形式，而二次交联产物可以是透明质酸颗粒的形式。
如本文所用，术语“透明质酸”可以解释为透明质酸、透明质酸的盐或其任何混合物中的任何一种。透明质酸的盐可以是任何生物相容性盐形式，例如，选自透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸镁、透明质酸锌、透明质酸钴、透明质酸四丁基铵及其任何组合。在一些实施方式中，透明质酸的盐可以是透明质酸钠。
透明质酸可具有约100,000至约6,000,000的分子量。交联透明质酸的粘弹性可以根据透明质酸的分子量而变化。
在一些实施方式中，透明质酸可以是分子量为约100,000至约6,000,000的透明质酸钠。
透明质酸可以包括本公开所属领域中已知的任何透明质酸。透明质酸可以从任何来源得到。透明质酸可以例如从动物来源(例如，动物胎盘、公鸡鸡冠等)或可以通过发酵产生透明质酸的任何微生物(例如，葡萄球菌属的微生物、链球菌属的微生物等)。
在一些实施方式中，透明质酸可以是微生物来源的透明质酸，例如葡萄球菌属微生物来源。微生物来源的透明质酸可以不存在动物源性透明质酸的问题，例如病毒或源性材料的质量不一致，因此从药物制备的质量控制的角度来看可以是有利的。
具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂可以是本领域中已知的具有至少两个环氧官能团的任何环氧系交联剂，例如，选自由1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)、乙二醇二缩水甘油醚(EGDGE)、1,6-己二醇二缩水甘油醚、丙二醇二缩水甘油醚、聚丙二醇二缩水甘油醚、聚四亚甲基二醇二缩水甘油醚、新戊二醇二缩水甘油醚、聚丙三醇多缩水甘油醚、二丙三醇多缩水甘油醚、丙三醇多缩水甘油醚、三羟甲基丙烷多缩水甘油醚、1,2-(双(2,3-环氧丙氧基)乙烷、季戊四醇多缩水甘油醚、山梨糖醇多缩水甘油醚及其任意组合所组成的组。
在一些实施方式中，具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂可以是BDDE、EGDGE、1,6-己二醇二缩水甘油醚或其任何组合。
在一些实施方式中，可与透明质酸或交联透明质酸反应的环氧系交联剂的量可在约10μl/g至约100μl/g的范围内，并且在一些实施方式中，相对于透明质酸或交联透明质酸，为约20μl/g至约100μl/g。当与透明质酸或交联透明质酸反应的环氧系交联剂的量小于这些范围时，在制备一次交联产物可能不会形成凝胶或在制备二次交联产物时可能不能得到交联颗粒。当与透明质酸或交联透明质酸反应的环氧系交联剂的量大于这些范围时，可能得到以颗粒形式而不是以具有低粘弹性的期望的凝胶形式的一次交联产物。
含有乙醇的碱性水溶液可以是含有约5-13％w/w乙醇的碱性水溶液。交联透明质酸的粘性可以用乙醇的浓度来控制。当乙醇的浓度在该范围内时，透明质酸钠可以与乙醇稳定地混合，而不会被乙醇萃取，使得可以发生交联反应。
碱性水溶液可以是约pH9-13的碱性水溶液。碱性水溶液可以是已知可用于制备交联透明质酸的任何碱性水溶液。例如，碱性水溶液可以是氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或氨水。例如，碱性水溶液可以是氢氧化钠水溶液。
在一些实施方式中，含乙醇的碱性水溶液可以是约0.7％w/w至约1.3％w/w的含有约5％w/w至约13％w/w乙醇的氢氧化钠水溶液。
作为实验的结果，透明质酸凝胶仅当在含有乙醇的碱性水溶液中(而不在含有其它醇例如甲醇或异丙醇的碱性水溶液中)使透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂反应时形成。还发现所形成的透明质酸凝胶的粘弹性根据反应时间而变化。换句话说，发现当碱性水溶液特别地含有有机溶剂当中的乙醇时，可以形成透明质酸水凝胶。还发现可以适当地改变反应时间以形成具有所需粘弹性的透明质酸凝胶。
交联反应可以在乙醇存在下，在高于室温的温度范围下进行，以进行快速交联反应。这种快速交联反应可以诱导轻度交联。高于室温的温度范围可以为约40℃至约60℃。
一次交联产物可以是水凝胶形式的交联透明质酸。通过一次交联产物的进一步交联得到的二次交联产物可以是颗粒形式的交联透明质酸。
根据实验结果，发现通过一次交联产物和二次交联产物的组合可以得到具有所需粘弹性的交联透明质酸的组合。
本公开的另一方面提供交联透明质酸的组合，所述交联透明质酸的组合包括具有50-200Pa的弹性和20Pa-约100Pa的粘性的低粘弹***联透明质酸，和具有400-800Pa的弹性和40-100Pa的粘性的高粘弹***联透明质酸。
低粘弹***联透明质酸和高粘弹***联透明质酸不限于使用特定交联方法制备的交联透明质酸。在一些实施方式中，低粘弹***联透明质酸和高粘弹***联透明质酸可分别是使用上述制备交联透明质酸的方法制备的透明质酸的一次交联产物和透明质酸的二次交联产物。
可以根据交联透明质酸的组合所需的粘弹性来调节低粘弹***联透明质酸和高粘弹***联透明质酸的组合比例。
本公开的另一方面提供交联透明质酸的组合，其包括具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的透明质酸的一次交联产物，和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的透明质酸的二次交联产物。
可以根据交联透明质酸的组合所需的粘弹性来调节一次交联产物和二次交联产物的组合比例。
本公开的另一方面提供一种生物相容性材料，其包括根据任何上述实施方式的交联透明质酸的组合。
生物相容性材料可以是使用透明质酸的生物相容性材料，其例如选自关节炎治疗植入物、皱纹填充剂、化妆品填充剂和药物载体。生物相容性材料可具有可根据其用途而变化的目标粘弹性。交联透明质酸的组合中的低粘弹性的交联透明质酸和高粘弹***联透明质酸的组合比例，或交联透明质酸的组合中的透明质酸一次交联产物和透明质酸二次交联产物的组合比例可以根据交联透明质酸的组合的目标粘弹性来调节。
在一些实施方式中，交联透明质酸的组合可以是具有约100Pa至约150Pa的弹性和约20Pa至约60Pa的粘性的交联透明质酸的组合，这可以导致适合用作人体内的滑液补充剂的粘弹性。已知可以约100Pa至约150Pa的弹性和约20Pa至约60Pa的粘性得到与人滑液的粘弹性类似的粘弹性(Balazs,E.A.,"The physical properties of synovial fluid andthe special role of hyaluronic acid,"Disorders of the Knee 2(1974):61-74)。为了得到具有这种粘弹性水平的交联透明质酸的组合，低粘弹***联透明质酸和高粘弹***联透明质酸的组合比例，或者一次交联产物和二次交联产物的组合比例可根据透明质酸的分子量而变化。
在实验中，将高分子量(约2.5MDa)透明质酸和低分子量(约0.9MDa)透明质酸各自进行交联反应以得到一次交联产物。将得到的一次交联产物各自进行进一步的交联反应，得到二次交联产物。将一次交联产物和二次交联产物以不同比例组合以制备交联透明质酸的组合，然后进行粘弹性测量。结果，发现一次交联产物取决于使用高分子量透明质酸或低分子量透明质酸作为起始材料而具有不同的粘弹性。此外，发现二次交联产物与其一次交联产物相比具有显著增强的粘弹性，而与起始材料的分子量无关。交联透明质酸的组合也取决于一次交联产物和二次交联产物的组合比例而各自具有不同的粘弹性(参见实验例2)。
为了得到具有所需粘弹性的交联透明质酸的组合，一次交联产物和二次交联产物的组合比例可以根据用作起始材料的透明质酸源的分子量而变化。在高分子量(约2.5MDa)透明质酸源用作起始材料的情况下，一次交联产物和其二次交联产物以重量计为约9：1的组合比例，或在低分子量(约0.9MDa)透明质酸源用作起始材料的情况下，一次交联产物和其二次交联产物以重量计为8：2的组合比例可以得到具有适合用作关节炎治疗植入物的粘弹性范围(弹性为约100Pa至约150Pa，粘性为约20Pa至60Pa)的交联透明质酸的组合(参见实验例2)。
在一些实施方式中，交联透明质酸的组合可包括重量比为约8：2至约9：1的具有50-200Pa的弹性和20-100Pa的粘性的透明质酸的一次交联产物和具有400-800Pa的弹性和40-100Pa的粘性的透明质酸的二次交联产物。
在一些实施方式中，交联透明质酸的组合可以是通过颗粒化得到的具有约500μm-约750μm的平均粒度的颗粒形式。在一次交联产物和二次交联产物组合之后，可以通过一般的粉碎方法进行颗粒化。
图1是说明根据本发明的一个实施方式的制备交联透明质酸的组合的方法的流程图。现在将在下面描述该制备方法。
参考图1，步骤(a)是制备水凝胶形式的透明质酸的一次交联产物。例如，步骤(a)中使用的透明质酸钠(也缩写为“HA”)可以是通过用链球菌属微生物(可从Hanmi PharmCo.,Ltd.得到)发酵制备的产物。特别地，步骤(a1)是将含透明质酸钠的缓冲液与含乙醇的氢氧化钠水溶液混合。所得透明质酸水凝胶的粘弹性可根据步骤(a1)中乙醇和氢氧化钠的混合比例而变化。在约0.7％w/w至约1.3％w/w氢氧化钠水溶液中存在约5％w/w至约13％w/w的乙醇的情况下，透明质酸钠可以与乙醇稳定混合，而不会被乙醇萃取，因此可以发生交联反应。步骤(a2)是将透明质酸钠与交联剂混合。交联剂的量可以是每单位克透明质酸钠约10μl至约100μl。当交联剂的量小于该范围时，可能得不到具有所需粘弹性的交联透明质酸。步骤(a3)是在含乙醇的碱性水溶液中使透明质酸钠与交联剂进行交联反应的过程。在该步骤中，由于反应温度高于室温且反应物中存在乙醇，所以可以进行快速交联反应，从而可以诱导轻度交联。该反应步骤可在约40℃至约60℃的烘箱中进行约4小时至约6小时。可以将得到的水凝胶形式的交联透明质酸在缓冲液中进行透析(步骤(a4))，然后用蒸馏水进行中和反应(步骤(a5))，然后可以用约95％乙醇诱导作为水凝胶的透明质酸沉淀(步骤(a6))，从而得到粉末形式的交联透明质酸。
步骤(b)是通过使步骤(a)中得到的透明质酸的一次交联产物进一步交联而制备颗粒形式的透明质酸的二次交联产物。步骤(b1)是将步骤(a6)中得到的交联透明质酸钠(HA)加入到约0.7％w/w至约1.3％w/w的氢氧化钠水溶液中并将它们混合在一起。步骤(b2)是将交联剂加入到从步骤(b1)所得的混合物中并将其混合在一起。在该步骤中，对于每1克步骤(a)中得到的交联HA可以加入约10μl至约100μl的交联剂。步骤(b3)是HA与交联剂的交联反应过程。该反应可在约40℃至约60℃的烘箱中进行约8-10小时。与步骤(a3)相比，步骤(b3)中的此交联反应可以进行更长的时间，以诱导产生颗粒形式的交联透明质酸。可以将得到的颗粒形式的交联透明质酸在缓冲液中进行透析(步骤(b4))，然后用蒸馏水进行中和反应(步骤(b5))，然后用约95％乙醇诱导作为颗粒的透明质酸沉淀(步骤(b6))，从而得到粉末形式的交联透明质酸。
步骤(c)将步骤(a)中得到的水凝胶形式的透明质酸钠的一次交联产物与步骤(b)中得到的颗粒形式的透明质酸钠的二次交联产物以不同比例混合，并通过粉碎、填充和灭菌制备最终产品。步骤(c1)将水凝胶形式的透明质酸钠的一次交联产物与颗粒形式的透明质酸钠的二次交联产物以约9：1至约8：2的比例混合，并将该混合物溶解于缓冲液中以制备交联透明质酸的组合。步骤(c2)是将交联透明质酸的组合粉碎成粒径为约500μm至约750μm的颗粒，然后用交联透明质酸的组合填充注射器(步骤(c3))并将填充有交联透明质酸的组合的注射器进行灭菌(步骤(c4))，从而得到最终的具有目标粘弹性的交联透明质酸的组合。
在一些实施方式中，生物相容性材料可以是滑液补充剂，其包括具有50-200Pa的弹性和20-100Pa的粘性的交联透明质酸与具有400-800Pa的弹性和40-100Pa的粘性的交联透明质酸的组合，颗粒形式的组合具有约500μm至约750μm的平均粒度并且具有100-150Pa的弹性和20-60Pa的粘性。
在一些实施方式中，生物相容性材料可以是滑液补充剂，其包括具有50-200Pa的弹性和20-100Pa的粘性的透明质酸一次交联产物与具有400-800Pa的弹性和40-100Pa的粘性的透明质酸二次交联产物的组合，颗粒形式的组合具有约500μm至约750μm的平均粒度并且具有100-150Pa的弹性和20-60Pa的粘性。
滑液补充剂可以具有与人的真实滑液相似的粘弹性，并且可以有效地用作滑液补充剂。滑液补充剂可以包括水凝胶形式的一次交联产物和颗粒形式的二次交联产物两者，从而为关节提供润滑和分离功能，并且可以起到与人的滑液非常相似的功能。由于包括水凝胶形式的一次交联产物和颗粒形式的二次交联产物，生物相容性材料可以在结构上稳定，在人体中不易分解，并且具有作为滑液补充剂的作用，一次注射可持续约6个月或更长时间。
本公开的另一方面提供制备根据任一上述实施方式的交联透明质酸的组合的方法，该方法包括将组合具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸组合，其中调节组合比例以满足待制备的交联透明质酸的组合的目标粘弹性。
根据该方法，通过调节具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸的组合比例，可以得到具有所需粘弹性的交联透明质酸的组合。在一些实施方式中，通过以约9：1至约8：2重量比将具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸组合，可以得到具有100-150Pa的弹性和20-60Pa的粘性的交联透明质酸的组合，其可以导致与人的滑液相似的粘弹性。为了制备具有所需粘弹性的交联透明质酸的组合，可以改变透明质酸的一次交联产物和透明质酸的二次交联产物的组合比例。即使在制备具有相同粘弹性的交联透明质酸的组合时，透明质酸的一次交联产物和透明质酸的二次交联产物的组合比也可以根据透明质酸源的分子量以及一次交联产物和二次交联产物的制备条件(反应温度、反应时间等)而变化。
现在将参考以下示例详细描述本公开的一个或多个实施方式。然而，这些示例仅用于说明目的，而并不旨在限制本公开的一个或多个实施方式的范围。
制备例1：在不含有机溶剂的碱性水溶液中制备交联HA
将10g透明质酸钠与1％w/w NaOH水溶液混合后，相对于每1g透明质酸钠向其中加入50μl BDDE，并使其在约40℃下反应约3小时、12小时或24小时。
制备例2：在含乙醇的碱性水溶液中制备交联HA(1)
将10g透明质酸钠与含有10％w/w乙醇的1％w/w NaOH水溶液混合后，相对于每1g透明质酸钠向其中加入50μl BDDE，并使其在约40℃下反应约3小时、5小时、12小时或24小时。
制备例3：在含乙醇的碱性水溶液中制备交联HA(2)
将10g透明质酸钠与含有10％w/w乙醇的1％w/w NaOH水溶液混合后，相对于每1g透明质酸钠向其中加入50μl EGDGE，并使其在约40℃下反应约24小时。
制备例4：在含乙醇的碱性水溶液中制备交联HA(3)
将10g透明质酸钠与含有10％w/w乙醇的1％w/w NaOH水溶液混合后，相对于每1g透明质酸钠向其中加入50μl 1,6-己二醇二缩水甘油醚，并使其在约40℃下反应约24小时。
制备例5：在含甲醇的碱性水溶液中制备交联HA
将10g透明质酸钠与含有10％w/w甲醇的1％w/w NaOH水溶液混合后，相对于每1g透明质酸钠向其中加入50μl BDDE，并使其在约40℃下反应约3小时、12小时或24小时。
制备例6：在含异丙醇的碱性水溶液中制备交联HA
将10g透明质酸钠与含有10％w/w异丙醇的1％w/w NaOH水溶液混合后，相对于每1g透明质酸钠向其中加入50μl BDDE，并使其在约40℃下反应约3小时、12小时或24小时。
实验例1：对在制备例1至6中制备的交联HA的凝胶化观察和粘弹性测量
通过肉眼观察确定制备例1至6的交联HA中是否发生凝胶化，并进行粘弹性测量。用旋转流变仪(Kinexus Pro流变仪，可得自Malvern，Worchestershire，UK)进行粘弹性测量。使用直径为20mm的锥体在约0.5mm的锥板距离(GAP)下测量动态粘弹性。将温度保持恒定在约25℃直至分析结束。使用控制程序以振荡模式以约0.1-5Hz的频率进行粘弹性测量，以测量储能模量G’和损耗模量G”。储能模量G’表示储存在样品中的能量(弹性行为)，损耗模量G”表示损失的能量(粘性行为)。结果显示在表1和2中。
[表1]
[表2]
参照表1和2的结果，发现在使用不含有机溶剂的碱性水溶液的制备例1中和在使用含乙醇的碱性水溶液制备例2至4中在交联透明质酸中发生凝胶化。然而，由于透明质酸的褐变，交联反应24小时后将不能继续交联反应。
与使用不含有机溶剂的碱性水溶液的制备例1的交联透明质酸相比，发现使用含乙醇的碱性水溶液的制备例2的交联透明质酸具有显著低的粘弹性。这表明向碱性水溶液中加入乙醇进行交联反应可以抑制交联反应，并因此导致具有降低的粘弹性的交联透明质酸。
在使用含有除乙醇以外的低级醇的碱性水溶液的制备例5和6中，即使在发生交联反应长时间之后，也没有生成水凝胶形式的交联透明质酸。
实施例1：水凝胶形式的透明质酸的一次交联产物的制备
使用高分子量透明质酸钠(分子量为2.5Mda)和低分子量透明质酸钠(分子量为0.9Mda)分别进行示例1至3的制备方法。高分子量透明质酸钠(分子量为2.5Mda)和低分子量透明质酸钠(分子量为0.9Mda)均通过用获自Hanmi PharmCo.,Ltd的链球菌属微生物(兽疫链球菌)发酵产生。
将透明质酸钠加入到含有1％w/w氢氧化钠水溶液和10％w/w乙醇的混合溶剂中并完全溶解后，相对于1g透明质酸钠向其中加入50μl BDDE并将其混合一起。混合后，在约40℃的反应温度下进行交联反应约5小时。在反应终止后，将所得的水凝胶形式的透明质酸的一次交联产物在磷酸盐缓冲盐水(PBS)缓冲液中进行透析，然后用蒸馏水洗涤以除去BDDE。将得到的中和后的水凝胶用95％乙醇水溶液萃取，从而得到粉末形式的透明质酸的一次交联产物。
实施例2：颗粒形式的透明质酸的二次交联产物的制备
将实施例1中得到的透明质酸的一次交联产物进行二次交联反应。将实施例1中得到的粉末形式的透明质酸的一次交联产物与1％w/w氢氧化钠水溶液以约1：5的重量比混合，然后将其完全溶解。相对于每1g一次交联产物将50μl BDDE加入到所得反应混合物中，然后将其混合在一起。混合后，在约40℃的反应温度下进行交联反应约8小时。在反应终止后，将得到的颗粒形式的透明质酸的二次交联产物在PBS缓冲液中透析约12-24小时，然后用蒸馏水洗涤以除去BDDE。将得到的颗粒形式的中和后的透明质酸用95％乙醇水溶液萃取，从而得到粉末形式的透明质酸的二次交联产物。
实施例3：交联透明质酸的组合的制备
将实施例1中得到的水凝胶形式的透明质酸的一次交联产物和实施例2中得到的颗粒形式的透明质酸的二次交联产物在PBS缓冲液中以约9：1或约8：2的重量比混合在一起，以制备2％w/w的混合溶液。以物理力通过使混合溶液通过500μm-目筛来粉碎混合溶液。将粉碎的混合物装入注射器中，然后在约121℃下灭菌约20分钟。
实验例2：交联透明质酸的组合的粘弹性测量
在PBS缓冲液中将实施例1中得到的水凝胶形式的透明质酸的一次交联产物和实施例2中得到的颗粒形式的透明质酸的二次交联产物以约10:0、9:1、8:2和0:10的重量比混合在一起，以制备2％w/w的混合溶液。通过以物理力将混合溶液各自通过500μm-目筛而将其粉碎。使用旋转流变仪(Kinexus Pro流变仪，可得自Malvern，Worchestershire，UK)测量各混合溶液的粘弹性。结果如表3所示。
[表3]
参考表3的结果，交联透明质酸的组合取决于一次交联产物与二次交联产物的混合比例而具有不同的粘弹性。
用来自高分子量透明质酸的一次交联产物和二次交联产物以约9：1(以重量计)的混合比例得到的交联透明质酸的组合具有约114.40Pa的弹性和约45.19Pa的粘性。用来自低分子量透明质酸的一次交联产物和二次交联产物以约8：2(以重量计)的混合比例得到的交联透明质酸的组合具有106.1Pa的弹性和45.71Pa的粘性。因此，发现交联透明质酸的这两种组合具有与人的滑液相似的粘弹性。
在相同条件下制备的交联透明质酸的粘弹性根据起始透明质酸源的分子量而变化。即使在相同的交联条件下制备，来自起始高分子量透明质酸源的交联透明质酸也具有比来自起始低分子量透明质酸源的交联透明质酸更高的粘弹性。因此，为了制备具有所需粘弹性的交联透明质酸的组合，一次交联产物和二次交联产物的组合比例可以根据起始透明质酸源的分子量而变化。
实验例3：交联透明质酸的组合的粒度分析
用高分子量透明质酸的一次交联产物和二次交联产物以约9：1(以重量计)的混合比例得到的交联透明质酸的组合(其被发现具有与实验例2中的人的滑液相似的粘弹性)的粒度使用粒度分析仪(可得自Microtrac，Montgomeryville，PA)进行分析。
所得到的交联透明质酸的组合的粒度分布如图2所示。
参考图2，发现交联透明质酸的组合具有约606μm的平均粒径(D10:235.8μm,D50:553.5μm,和D90:1009μm)。
实验例4：细胞毒性测定
用来自高分子量透明质酸的一次交联产物和二次交联产物以约9：1(以重量计)的混合比例得到的交联透明质酸的组合(其被发现具有与实验例2中的人的滑液相似的粘弹性)的细胞毒性通过MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基四唑鎓)测定法进行评价。
根据MTT测定，对来自交联透明质酸的组合以及来自作为阳性对照组的特氟龙和作为阴性对照组的胶乳洗脱液的毒性进行了评价达约72小时。根据MTT测定法得到的细胞存活率的结果如图3所示。
参考图3的结果，特氟龙和胶乳的细胞存活率分别为100％和37％。交联透明质酸的组合具有约89.93％的细胞存活率，其高于细胞毒性的下限80％。因此，发现作为本公开的实施方式的交联透明质酸的组合具有高生物相容性。
虽然已经参考本发明的优选实施方式具体示出和描述了本发明，但是本领域技术人员将理解，在不脱离由所附权利要求定义的本发明的精神和范围的情况下，可以在形式和细节上进行各种改变。所公开的实施方式应仅被认为仅是描述性的，而不是为了限制的目的。因此，本发明的范围不是由本发明的详细描述限定，而是由所附权利要求限定，并且该范围内的所有差异将被解释为包括在本发明中。

Claims (18)

1.一种制备具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，所述方法包括在含乙醇的碱性水溶液中使透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联。
2.一种制备具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸的方法，所述方法包括在碱性水溶液中使采用根据权利要求1所述的方法制备的交联透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂进一步交联。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述透明质酸通过用微生物发酵得到。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述透明质酸包括透明质酸、透明质酸的盐或其任何混合物。
5.根据权利要求4的所述方法，其中所述透明质酸的盐选自由透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸镁、透明质酸锌、透明质酸钴、透明质酸四丁基铵及其任意组合所组成的组。
6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述透明质酸包括分子量为约100,000至约6,000,000的透明质酸钠。
7.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂选自由1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)、乙二醇二缩水甘油醚(EGDGE)、1,6-己二醇二缩水甘油醚、丙二醇二缩水甘油醚、聚丙二醇二缩水甘油醚、聚四亚甲基二醇二缩水甘油醚、新戊二醇二缩水甘油醚、聚丙三醇多缩水甘油醚、二丙三醇多缩水甘油醚、丙三醇多缩水甘油醚、三羟甲基丙烷多缩水甘油醚、1,2-(双(2,3-环氧丙氧基)乙烷、季戊四醇多缩水甘油醚、山梨糖醇多缩水甘油醚及其任意组合所组成的组。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述含乙醇的碱性水溶液含有约5％w/w至约13％w/w的乙醇。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述含乙醇的碱性水溶液是含有约5％w/w至约13％w/w的乙醇的约0.7％w/w至1.3％w/w的氢氧化钠水溶液。
10.一种交联透明质酸的组合，包括具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸。
11.一种交联透明质酸的组合，所述组合包括：
通过包括在含乙醇的碱性水溶液中使透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联的方法制备的具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸；和
通过包括在碱性水溶液中使具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸与具有至少两个环氧官能团的环氧系交联剂交联的方法制备的具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸。
12.根据权利要求10或11所述的交联透明质酸的组合，所述组合具有约100Pa至约150Pa的弹性和约20Pa至约60Pa的粘性。
13.根据权利要求12所述的交联透明质酸的组合，其中具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的所述交联透明质酸与具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的所述交联透明质酸以约8：2至约9：1的重量比组合。
14.根据权利要求12所述的交联透明质酸的组合，其中所述交联透明质酸的组合是以平均粒度为约500μm至约750μm的颗粒形式。
15.一种生物相容性材料，包括根据权利要求10或权利要求11所述的交联透明质酸的组合。
16.根据权利要求15所述的生物相容性材料，其中所述生物相容性材料选自由关节炎治疗植入物、皱纹填充剂、化妆品填充剂和药物载体所组成的组。
17.一种制备交联透明质酸的组合的方法，该方法包括将通过根据权利要求1所述的方法制备的具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的交联透明质酸和通过根据权利要求2所述的方法制备的具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的所述交联透明质酸组合，其中调节组合比例以满足待制备的交联透明质酸的组合的目标粘弹性。
18.根据权利要求17所述的方法，其中具有约50Pa至约200Pa的弹性和约20Pa至约100Pa的粘性的所述交联透明质酸与具有约400Pa至约800Pa的弹性和约40Pa至约100Pa的粘性的所述交联透明质酸的组合比例以重量计为约9：1至约8：2。
CN201680080495.0A 2016-01-29 2016-06-01 交联透明质酸的组合及其制备方法 Pending CN108602898A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20160011843 2016-01-29
KR10-2016-0011843 2016-01-29
KR1020160012519A KR20170090965A (ko) 2016-01-29 2016-02-01 복합 히알루론산 가교물 및 그 제조방법
KR10-2016-0012519 2016-02-01
PCT/KR2016/005819 WO2017131298A1 (en) 2016-01-29 2016-06-01 Combination of cross-linked hyaluronic acids and method of preparing the same

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108602898A true CN108602898A (zh) 2018-09-28

Family

ID=59653285

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680080495.0A Pending CN108602898A (zh) 2016-01-29 2016-06-01 交联透明质酸的组合及其制备方法

Country Status (4)

Country Link
US (2) US20180215840A1 (zh)
JP (2) JP6821689B2 (zh)
KR (1) KR20170090965A (zh)
CN (1) CN108602898A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111839768A (zh) * 2020-07-28 2020-10-30 中日友好医院(中日友好临床医学研究所) 锌修饰种植体及其制备方法
CN113164652A (zh) * 2018-12-20 2021-07-23 株式会社Lg化学 具有优异的填充剂性能的包含透明质酸水凝胶的填充剂
CN114828903A (zh) * 2019-12-17 2022-07-29 阿尔特刚股份有限公司 滑液代用品
CN115246958A (zh) * 2022-07-28 2022-10-28 爱博诺德(北京)医疗科技股份有限公司 具有与组织、细胞生长相适应的孔壁结构的交联透明质酸凝胶
CN115245596A (zh) * 2022-07-28 2022-10-28 爱博诺德(北京)医疗科技股份有限公司 透明质酸基凝胶组合物

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102320153B1 (ko) * 2017-11-23 2021-11-02 주식회사 파마리서치 이중 가교를 통한 히알루론산 겔 및 이의 제조방법
KR102400586B1 (ko) 2018-12-07 2022-05-23 한미약품 주식회사 히알루론산 가교물, 히알루론산 수화 겔 및 이들의 제조방법
US20220040374A1 (en) * 2018-12-07 2022-02-10 Hanmi Pharm. Co., Ltd Crosslinked hyaluronic acid, hyaluronic acid hydrogel, and method for producing crosslinked hyaluronic acid and hyaluronic acid hydrogel
WO2020184744A1 (ko) * 2019-03-08 2020-09-17 주식회사 지씨에스 복합체의 제조 방법
KR102143829B1 (ko) 2019-03-19 2020-08-12 한상철 가교결합된 히알루론산 및 루페올을 포함하는 피부 보습 및 여드름 개선용 화장료 조성물
JP7506431B2 (ja) * 2019-08-01 2024-06-26 メディクリニア カンパニー リミテッド ヒアルロン酸とプルロニックを含む関節及び軟骨損傷の予防又は治療用組成物
CN114206996B (zh) * 2019-09-27 2024-01-02 株式会社Lg化学 制备聚合物微粒的方法，聚合物微粒，使用其的医用组合物、美容组合物、医用制品和美容制品
KR102532697B1 (ko) * 2019-09-27 2023-05-16 주식회사 엘지화학 고분자 마이크로 입자의 제조방법, 고분자 마이크로 입자, 이를 포함하는 의료용 조성물, 미용 조성물, 의료 용품 및 미용 용품
KR102425496B1 (ko) 2020-05-08 2022-07-26 주식회사 종근당 고탄성, 고점도 및 고유효 가교율을 갖는 히알루론산 가교체, 및 이의 제조방법
KR102597505B1 (ko) * 2020-06-01 2023-11-02 주식회사 엘지화학 고분자 마이크로 입자의 제조방법, 고분자 마이크로 입자, 이를 포함하는 의료용 조성물, 미용 조성물, 의료 용품 및 미용 용품
US20220331260A1 (en) * 2020-06-01 2022-10-20 Lg Chem, Ltd. A method of preparing polymeric microparticles, polymeric microparticles, medical composition, cosmetic composition, medical articles and cosmetic articles using the same
KR102527554B1 (ko) * 2020-11-24 2023-05-03 가톨릭대학교 산학협력단 상분리를 이용한 미소구체의 제조 방법
WO2023100219A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Kewpie Corporation Hyaluronic acid powder
CN114404355B (zh) * 2021-12-28 2024-05-24 常州药物研究所有限公司 透明质酸钠凝胶及其制备方法、应用

Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4716224A (en) * 1984-05-04 1987-12-29 Seikagaku Kogyo Co. Ltd. Crosslinked hyaluronic acid and its use
CN1207744A (zh) * 1995-11-15 1999-02-10 生化学株式会社 光固化交联透明质酸凝胶及其制备方法
US20070066816A1 (en) * 2002-12-31 2007-03-22 Industrial Technology Research Institute Method for producing double-crosslinked hyaluronate material
US20090163441A1 (en) * 2006-05-11 2009-06-25 Sandra Gobbo Hyaluronic Acid Binary Mixtures and Therapeutic Use Thereof
CN101790542A (zh) * 2007-07-30 2010-07-28 阿勒根公司 经可调交联的透明质酸组合物
KR101250846B1 (ko) * 2005-07-04 2013-04-05 주식회사 엘지생명과학 히알루론산 가교물의 제조방법
CN103146003A (zh) * 2013-03-06 2013-06-12 上海其胜生物制剂有限公司 一种低温二次交联透明质酸钠凝胶的制备方法
CN103834053A (zh) * 2014-02-28 2014-06-04 陕西佰傲再生医学有限公司 一种可注射的交联透明质酸凝胶及其制备方法
US20140294752A1 (en) * 2013-04-01 2014-10-02 Research & Business Foundation Sungkyunkwan University Method for nucleic acid delivery using hyaluronic acid
WO2014206701A1 (en) * 2013-06-28 2014-12-31 Galderma S.A. A process for preparing a cross-linked hyaluronic acid product
WO2014206500A1 (en) * 2013-06-28 2014-12-31 Galderma S.A. Method for manufacturing a shaped cross-linked hyaluronic acid product
KR20150008556A (ko) * 2013-07-15 2015-01-23 (주)아크로스 조직수복용 생체재료 제조방법

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4713448A (en) * 1985-03-12 1987-12-15 Biomatrix, Inc. Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues
US5143724A (en) * 1990-07-09 1992-09-01 Biomatrix, Inc. Biocompatible viscoelastic gel slurries, their preparation and use
EP0625904B1 (en) * 1992-02-10 2003-05-28 Advanced Medical Optics, Inc. Bimodal molecular weight hyaluronate formulations and methods for using same
FR2861734B1 (fr) * 2003-04-10 2006-04-14 Corneal Ind Reticulation de polysaccharides de faible et forte masse moleculaire; preparation d'hydrogels monophasiques injectables; polysaccharides et hydrogels obtenus
US8124120B2 (en) * 2003-12-22 2012-02-28 Anika Therapeutics, Inc. Crosslinked hyaluronic acid compositions for tissue augmentation
US20060105022A1 (en) 2004-11-15 2006-05-18 Shiseido Co., Ltd. Process for preparing crosslinked hyaluronic acid gel
EP1818344A4 (en) 2004-11-15 2012-04-18 Shiseido Co Ltd METHOD FOR SYNTHESIZING RETICULATED HYALURONIC ACID GEL
CN102416020A (zh) * 2004-12-30 2012-04-18 建新公司 用于关节内粘弹性补充的方案
ATE544786T1 (de) * 2007-09-28 2012-02-15 Shiseido Co Ltd Quellbares vernetztes hyaluronsäurepulver und herstellungsverfahren dafür
US9109051B2 (en) 2007-12-19 2015-08-18 Evonik Goldschmidt Gmbh Crosslinked hyaluronic acid in emulsion

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4716224A (en) * 1984-05-04 1987-12-29 Seikagaku Kogyo Co. Ltd. Crosslinked hyaluronic acid and its use
CN1207744A (zh) * 1995-11-15 1999-02-10 生化学株式会社 光固化交联透明质酸凝胶及其制备方法
US20070066816A1 (en) * 2002-12-31 2007-03-22 Industrial Technology Research Institute Method for producing double-crosslinked hyaluronate material
KR101250846B1 (ko) * 2005-07-04 2013-04-05 주식회사 엘지생명과학 히알루론산 가교물의 제조방법
US20090163441A1 (en) * 2006-05-11 2009-06-25 Sandra Gobbo Hyaluronic Acid Binary Mixtures and Therapeutic Use Thereof
CN101790542A (zh) * 2007-07-30 2010-07-28 阿勒根公司 经可调交联的透明质酸组合物
CN103146003A (zh) * 2013-03-06 2013-06-12 上海其胜生物制剂有限公司 一种低温二次交联透明质酸钠凝胶的制备方法
US20140294752A1 (en) * 2013-04-01 2014-10-02 Research & Business Foundation Sungkyunkwan University Method for nucleic acid delivery using hyaluronic acid
WO2014206701A1 (en) * 2013-06-28 2014-12-31 Galderma S.A. A process for preparing a cross-linked hyaluronic acid product
WO2014206500A1 (en) * 2013-06-28 2014-12-31 Galderma S.A. Method for manufacturing a shaped cross-linked hyaluronic acid product
KR20150008556A (ko) * 2013-07-15 2015-01-23 (주)아크로스 조직수복용 생체재료 제조방법
CN103834053A (zh) * 2014-02-28 2014-06-04 陕西佰傲再生医学有限公司 一种可注射的交联透明质酸凝胶及其制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
STEFANO SANTORO等: "《Rheological properties of cross-linked hyaluronic acid dermal fillers》", 《JOURNAL OF APPLIED BIOMATERIALS ＆ FUNCTIONAL MATERIALS》 *
XINQIAO JIA等: "《Prolongation of sciatic nerve blockade by in situ cross-linked hyaluronic acid》", 《BIOMATERIALS》 *
贾柯等: "《颗粒化交联透明质酸钠凝胶的制备及其抗酶解性能》", 《河南大学学报(自然科学版)》 *
陈建英等: "《注射用交联透明质酸钠凝胶的制备及其体外抗酶降解性的研究》", 《中国生化药物杂志》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113164652A (zh) * 2018-12-20 2021-07-23 株式会社Lg化学 具有优异的填充剂性能的包含透明质酸水凝胶的填充剂
CN114828903A (zh) * 2019-12-17 2022-07-29 阿尔特刚股份有限公司 滑液代用品
CN111839768A (zh) * 2020-07-28 2020-10-30 中日友好医院(中日友好临床医学研究所) 锌修饰种植体及其制备方法
CN115246958A (zh) * 2022-07-28 2022-10-28 爱博诺德(北京)医疗科技股份有限公司 具有与组织、细胞生长相适应的孔壁结构的交联透明质酸凝胶
CN115245596A (zh) * 2022-07-28 2022-10-28 爱博诺德(北京)医疗科技股份有限公司 透明质酸基凝胶组合物

Also Published As

Publication number Publication date
US20180215840A1 (en) 2018-08-02
US20190315887A1 (en) 2019-10-17
JP6821689B2 (ja) 2021-01-27
US11180576B2 (en) 2021-11-23
JP2021021082A (ja) 2021-02-18
KR20170090965A (ko) 2017-08-08
JP2019503425A (ja) 2019-02-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108602898A (zh) 交联透明质酸的组合及其制备方法
KR102076337B1 (ko) 히알루론산 유도체 및 dna 분획물이 포함된 히알루론산 주사용 조성물 및 이의 이용
CN103974722B (zh) 水不溶性凝胶组合物及其制备方法
CN101925348B (zh) 可生物降解的单相粘性水凝胶
KR102275105B1 (ko) 고밀도 망상구조로 가교된 히알루론산 및 그의 제조방법
CN104117091A (zh) 制备组织植入体的方法
CN104327311B (zh) 一种透明质酸复合交联水凝胶及其制备方法
KR101374271B1 (ko) 히알루론산 에폭사이드 가교체 및 그 제조방법
Fatimi et al. Gelation studies of a cellulose-based biohydrogel: The influence of pH, temperature and sterilization
CN105705137A (zh) 获得基于含有以粉末形式添加的利多卡因和碱剂的透明质酸且热灭菌的可注射水凝胶的方法
CN114502599B (zh) 一种超支化聚甘油多缩水甘油醚及其作为多糖交联剂的用途
Yao et al. Strong, elastic and degradation-tolerated hydrogels composed of chitosan, silk fibroin and bioglass nanoparticles with factor-bestowed activity for bone tissue engineering
KR101521058B1 (ko) 생체적합성 조성물 및 이의 제조방법
WO2017131298A1 (en) Combination of cross-linked hyaluronic acids and method of preparing the same
US20190240335A1 (en) Biocompatible Hydrogel Compositions
CN117659439A (zh) 一种注射用交联玻尿酸凝胶的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180928