CN108553371A - 具有抗敏舒缓功效的护肤组合物及制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抗敏舒缓功效的护肤组合物及其制备方法与应用。该护肤组合物由下述重量份配比的原料制备而成：扁柏1‑10份、白柳1‑10份、百金花1‑10份、波叶大黄1‑15份、川谷1‑10份、大蕉1‑10份、红景天1‑10份。本发明经实验证实能够拮抗化妆品中表面活性剂、防腐剂的刺激性，具有有效的抑制过敏及止痒功效，还兼具美白保湿的功效，起到皮肤屏障的作用。

Description

具有抗敏舒缓功效的护肤组合物及制备方法与应用

技术领域

本发明属于化妆品领域,具体涉及一种具有抗敏舒缓功效的护肤组合物及制备方法与应用。

背景技术

过敏的发病率很高，文献报道约有l/3的人在一生中患过过敏性疾病。根据我国北京地区的统计，在一般人群中过敏的发病率约为15％。太平洋有些地区的过敏性疾病甚至高达50％。进入21世纪以来，该病已成为最常见的全球性疾病之一。世界卫生组织(WHO)的数据表明，目前全球有22％～25％的人患有过敏性疾病，并以每10年23倍的速度增加，目前仅在我国就有两亿多人患病。因此过敏和抗过敏，是现代人面临的不可回避的严峻挑战。

化妆品亦存在致敏风险物质，如：表面活性剂、香精香料、防腐剂。消费者对化妆品引发的刺激和敏感的关注已经达到前所未有的程度，化妆品的安全性更是排在化妆品特性之首。

发明内容

本发明的首要目的在于解决上述现有技术的问题，保证消费者使用产品的安全性而提出一种可以拮抗表面活性剂、香精香料、防腐剂的刺激性，同时亦具有修复受损皮肤的作用，具有抗敏舒缓抗刺激功效的护肤组合物。

本发明的再一目的在于提出一种上述护肤组合物的制备方法及得到的植物提取物。

本发明的第三目的在于提出一种含有上述植物提取物的护肤品。

本发明利用先进的生物技术，结合中国传统的中医理论，将扁柏、白柳、百金花、波叶大黄、川谷、大蕉、红景天有效的组合在一起，形成复方，并将其作为活性组分，进一步制备成护肤制剂，其具有拮抗化妆品用防腐剂、表面活性剂刺激，还具有抑敏、止痒、美白消炎等功效。

为实现本发明的目的，本发明采用如下具体技术方案：

一种具有抗敏舒缓功效的护肤组合物，其中，所述护肤组合物由下述重量份配比的原料制成：

扁柏1-10份、白柳1-10份、百金花1-10份、波叶大黄1-15份、川谷1-10份、大蕉1-10份、红景天1-10份。

所述组合物各原料的较佳重量份配比为：

扁柏2-8份、白柳2-8份、百金花2-8份、波叶大黄2-10份、川谷2-8份、大蕉2-8份、红景天2-8份。

一种上述护肤组合物的制备方法，所述方法步骤如下：

(1)上述原料粉碎后按所述重量份配比称取，混匀；

(2)用体积百分比为70-90％乙醇提取，原料与乙醇的质量体积比g/mL为1：(10-30)，70-80℃提取1-4h；

(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至室温(20-30℃)，80-100目过滤，得滤液；

(4)滤液中加入原始乙醇量的1,3-丁二醇混溶均匀，蒸发出溶液中的乙醇，真空抽滤，收集滤液，即得。

所述步骤(2)中乙醇的体积百分比为80％，原料与乙醇的质量体积比g/mL为1：20。

所述步骤(4)中真空抽滤条件为在布氏漏斗里铺1.2μm滤板，进行真空抽滤。

一种具有抗敏舒缓功效的植物提取物，其中，所述提取物由上述方法提取得到的。

上述植物提取物在制备具有抗敏舒缓功效的外用护肤品添加剂或护肤制剂中的用途。

一种具有抗敏舒缓功效的护肤制剂，其中，所述护肤制剂由上述植物提取物及护肤品领域常规辅料制成。

一种具有抗敏舒缓功效的的膏霜，其中，所述膏霜包含下述重量百分比的组分，如表1所示：

表1

组分	重量百分比％
		上述植物提取物	1-10
鲸蜡硬脂醇	1-3
		硬脂醇聚醚-2	0.5-2
环五聚二甲基硅氧烷	1-3
		环己硅氧烷	0.1-1.5
二苯基甲硅烷氧基苯基聚三甲基硅氧烷	0.1-2
		牛油果树(BUTYROSPERMUMPARKII)果脂	0.1-1
氢化椰油	0.1-2
		聚二甲基硅氧烷	1-2
角鲨烷	0.1-2
		油橄榄(OLEAEUROPAEA)果油	0.1-2
生育酚(维生素E)	0.1-1
		氢化卵磷脂	0.1-1
甲基硬脂酰基牛磺酸钠	0.1-1
		季戊四醇四(双-叔丁基羟基氢化肉桂酸)酯	0.1-1
稻(ORYZASATIVA)糠油	0.1-1
		甜菜碱	0.5-2.5
三山嵛精PEG-20酯类	0.1-1
		PEG-40氢化蓖麻油	0.01-0.1
EDTA二钠	0.01-0.05
		透明质酸钠	0.01-0.05
软玉粉	0.01-0.2
		黄原胶	0.1-0.3
多元醇	5-15
		防腐剂	0.05-0.2
水	余量

其中，上述化妆品中所述多元醇为山梨醇、山梨糖醇、辛甘醇、二丙二醇、甲基丙纤维醇、赤藻糖醇、麦芽糖醇、甘露醇、戊二醇、乙基己基甘油、异戊二醇、己二醇中的一种或一种以上的混合。

其中,上述化妆品中所述的防腐剂为山梨酸钾、苯甲醇、苯氧乙醇中的至少一种。

上述膏霜中除植物提取物外的其他组分，是经过发明人研究得到的与植物提取物相配起到最佳协同功效的成分。

利用本植物提取物及护肤品领域常规方法及辅料也可以制备得到其他剂型，如精华、爽肤水、乳液、喷雾剂等。

本发明的制剂推荐使用方法为：每天洁面后，以涂抹方法施于人体皮肤表面，轻轻按摩直至吸收。

本发明的有益结果：

本发明经实验证实能够抑制细胞DNA损伤和泄露，增加皮肤耐受性，提高皮肤免疫力和抵抗力，预防皮肤过敏等损害的发生。同时本发明还可以有效拮抗化妆品中表面活性剂和防腐剂的刺激性，具有有效的抑制过敏及止痒功效，通过减少IL-6含量抑制Ⅰ型超敏反应(速发型超敏反应)的作用，通过减少IL-8含量抑制Ⅳ型超敏反应(迟发型超敏反应)的作用。还兼具美白保湿的功效，起到皮肤屏障的作用。本发明的原材料获取容易、制备方法简便，绿色安全，易于被过敏人群接受，具有很好的应用前景和市场前景。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施方式作进一步地详细描述,但本发明的实施方式不限于此,对于未特别注明的工艺参数或条件,可参照常规技术进行。

本发明所涉及的七味组分功效介绍如下：

所述的扁柏为柏科侧柏属的一种常绿乔木，拉丁学名为Platycladus orientalis(Linn.)Franco，又称柏树、侧柏、香柏，叶入药，味辛、微酸苦，性寒，入心、肝、大肠经，具有轻身益气，令人耐寒暑，去湿痹，生肌的功效。

所述的白柳为杨柳科柳属植物，拉丁学名为Salix alba L.，以叶、芽或根入药，味苦，性寒，具有清热解毒，祛风除湿之功效。

所述百金花为龙胆科百金花属草本植物，拉丁学名为Centaurium pulchellum(Swartz)Druce var.altaicum(Griseb.)Kitag.et Hara，全草入药，味苦,性微寒，具有清热，退黄，利胆的功效。

所述波叶大黄为蓼科大黄属波叶组多年生草本植物，拉丁学名为Rheumundulatum Linn.，根入药，性寒，味苦，入胃、大肠经，具有泻热解毒，凉血行瘀的功效。

所述川谷为禾本科薏苡属一年生或多年生草本，拉丁学名为Coix lacryma-jobiLinn.，种仁入药，味苦甘，性寒，无毒，入脾、膀胱经，具有清热、利湿、健脾、杀虫之功效。

所述的大蕉为芭蕉科芭蕉属多年生草本植物，拉丁学名为Musa sapientumLinn.，果入药，味甘；性寒，入肺、脾经，具有清热、润肺、滑肠、解毒的功效。

所述的红景天为景天科红景天属植物全瓣红景天，拉丁学名为Rhodiola roseaLinn.，根入药，性寒，味甘涩，入心、肺经，具有治咳血，咯血，肺炎咳嗽，妇女白带的功效。

实施例1本护肤组合物的制备

(1)下述原料粉碎后按所述重量配比称取，混匀；扁柏100g、白柳100g、百金花50g、波叶大黄150g、川谷10g、大蕉10g、红景天50g；

(2)用体积百分比为90％的乙醇提取，原料与乙醇质量体积比g/mL为1：20，75℃提取2.5h；

(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至室温20℃，100目过滤，得滤液；

(4)滤液中加入原始乙醇量的1,3-丁二醇混溶均匀，旋转蒸发出溶液中的乙醇，在布氏漏斗里铺1.2μm滤板，将上述所得滤液进行真空抽滤，收集滤液即得植物提取物A。

实施例2本护肤组合物的制备

(1)下述原料粉碎后按所述重量配比称取，混匀；扁柏10g、白柳50g、百金花10g、波叶大黄80g、川谷100g、大蕉50g、红景天100g；

(2)用体积百分比为70％的乙醇提取，原料与乙醇质量体积比g/mL为1：30，80℃提取1h；

(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至室温30℃，80目过滤，得滤液；

(4)滤液中加入原始乙醇量的1,3-丁二醇混溶均匀，旋转蒸发出溶液中的乙醇，在布氏漏斗里铺1.2μm滤板，将上述所得滤液进行真空抽滤，收集滤液即得植物提取物B。

实施例3本护肤组合物的制备

(1)下述原料粉碎后按所述重量配比称取，混匀；扁柏50g、白柳10g、百金花100g、波叶大黄10g、川谷50g、大蕉100g、红景天10g；

(2)用体积百分比为80％的乙醇提取，原料与乙醇质量体积比g/mL为1：10，70℃提取4h；

(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至室温(25℃)，90目过滤，得滤液；

(4)滤液中加入原始乙醇量的1,3-丁二醇混溶均匀，旋转蒸发出溶液中的乙醇，在布氏漏斗里铺1.2μm滤板，将上述所得滤液进行真空抽滤，收集滤液即得植物提取物C。

实施例4-6舒敏膏霜的组分及用量见表2

表2

其中，实施例4中所述的植物提取物为实施例1所制备而得的植物提取物A，所述多元醇为山梨醇，所述的防腐剂为山梨酸钾；实施例5中所述的植物提取物为实施例2所制备而得的植物提取物B，所述的多元醇为二丙二醇，所述的防腐剂为苯甲醇；实施例6中所述的植物提取物为实施例3所制备而得的植物提取物C，所述的多元醇为山梨酸钾，所述的防腐剂为苯甲醇。

对比例1-7

对比例1-7除了植物提取物不同外，其余组分及用量与实施例4相同，其中对比例1所述植物提取物由扁柏用实施例1所述制备方法制备而成；其中对比例2所述植物提取物由白柳用实施例1所述制备方法制备而成；其中对比例3所述植物提取物由百金花用实施例1所述制备方法制备而成；其中对比例4所述植物提取物由波叶大黄用实施例1所述制备方法制备而成；其中对比例5所述植物提取物由川谷用实施例1所述制备方法制备而成；其中对比例6所述植物提取物由大蕉用实施例1所述制备方法制备而成；其中对比例7所述植物提取物由红景天用实施例1所述制备方法制备而成。

本发明功效实验

一.实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C止痒效果评价

计算送检样品对皮肤过敏瘙痒模型的致痒阈，为评价样品止痒功效提供实验依据。实验方法：

(1)受试药物：实施例1、实施例2及实施例3制备得到的植物提取物A、B、C；

(2)分组：实验小鼠共60只，分为实施例1植物提取物A大剂量组、中剂量组和小剂量组，实施例2植物提取物B大剂量组、中剂量组和小剂量组，实施例3植物提取物C大剂量组、中剂量组和小剂量组，模型对照组，每组6只。

(3)剂量设计

植物提取物受试品以0.15mL/1cm²、0.1mL/1cm²、0.05mL/1cm²局部涂抹作为大剂量、中剂量组和小剂量组。模型对照组给予0.1mL/1cm²蒸馏水局部涂抹。

(4)实验过程先用脱毛膏将老鼠右后足背毛发脱掉，连续3天于脱毛处分别均匀涂抹相应剂量受试品，模型对照组给予蒸馏水涂抹。实验第3天，精密称取磷酸组胺适量，临用前以蒸馏水配成0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.10％梯度浓度备用。用粗砂纸将豚鼠右后足背脱毛处擦伤，面积约1cm²，局部再涂药1次，于末次涂药10min后在擦伤处滴0.01％磷酸组胺0.05mL，以后每隔3min依0.01％、0.02％、0.03％、0.04％……递增浓度，每次均为0.05mL。直到出现豚鼠回头舔右后足，以最后出现豚鼠回头舔右后足时所滴取的磷酸组胺总量为致痒阈。计算各组致痒阈并比较组间的差异性。

(5)实验结果

结果显示，使用磷酸组胺致痒后，豚鼠出现回头舔右后足行为。使用受试品涂抹致痒部位后，植物提取物A、B、C可显著提高豚鼠磷酸组胺致痒阈，与模型对照组比较有显著性差异(P<0.01P<0.05)，见表3。

表3样品对豚鼠磷酸组胺致痒反应的影响(x±s,n＝6)

注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

(6)实验结论

植物提取物A、B、C对过敏后皮肤瘙痒具有很好的止痒功效。

二.实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C抑制皮肤过敏功效评价

(1)受试药物：实施例1、实施例2及实施例3制备得到植物提取物A、B、C；

(2)分组：实验小鼠共55只，分为实施例1植物提取物A大剂量组、中剂量组和小剂量组，实施例2植物提取物B大剂量组、中剂量组和小剂量组，实施例3植物提取物C大剂量组、中剂量组和小剂量组，空白对照组，模型对照组，每组5只。

(3)剂量设计

受试品以0.15mL/1cm²、0.1mL/1cm²、0.05mL/1cm²局部涂抹作为大剂量、中剂量组和小剂量组。空白对照组和模型对照组给予0.1mL/1cm²蒸馏水局部涂抹。

(4)实验过程

先用脱毛膏将老鼠背部毛发脱掉，除空白对照组外，其余各组大鼠背部选取3个点，每点皮下注射anti-DNP IgE0.5μg(0.5μL)。48h后，各组大鼠尾静脉注射含有4％伊文思蓝的DNP-HAS 100μg(100μL)。在尾静脉注射DNP-HAS前1h，在给药各组大鼠背部，以注射anti-DNP IgE的点为中心，每点涂抹2cm²面积的相应药物。静脉注射DNP-HAS后30min处死大鼠。剪下蓝染皮肤，使用1：1丙酮-生理盐水混合溶液浸泡24h，离心取上清，用分光光度计于620nm处检测OD值。使用伊文思蓝溶液制作标准曲线，计算每只大鼠背部皮肤染料含量及PCA反应抑制率。

(5)实验结果

结果显示，致敏后大鼠局部皮肤蓝染，使用受试品涂抹后，受试品可显著降低大鼠蓝染皮肤染料含量，与模型对照组比较均有显著性差异(P<0.01，P<0.05)(见表4)

表4样品对大鼠PCA反应的影响

(5)实验结果

注：空白对照组比较，**P<0.01；与模型对照组比较，*P<0.05。

(6)试验结论

实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C能有效有抑制皮肤被动过敏。

三.实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C对PAMCI诱导的Ku812细胞IL-8，IL-6的影响

(1)实验原理IL-6是一种多功能细胞因子，血液中活化的单核巨噬细胞是其主要来源。它也是启动全身性炎症反应最强的细胞因子，能够诱导T细胞和B细胞的增值分化，刺激肝细胞产生急性期蛋白等，通过级联反应使炎症作用放大。病毒、细菌感染均能诱导体内IL-6表达增加。

IL-8是由Th1细胞分泌的细胞因子，主要介导细胞毒和局部炎症有关的免疫应答辅助抗体生成，参与细胞免疫及迟发型超敏型炎症的发生，主要生物学作用是趋化并激活中性粒细胞，促进中性粒细胞的溶酶体酶活性和吞噬作用,对嗜碱性粒细胞和T细胞也有一定的趋化作用，中性粒细胞与IL-8接触后发生形态变化，定向游走到反应部位并释放一系列活性产物，这些作用可导致机体局部炎症反应，达到杀菌和损伤细胞的目的。

对炎症因子IL-6和IL-8的抑制表明植物提取物具有抑制由紫外线损伤、自由基氧化、环境污染、皮脂分泌过多、细菌感染等导致的皮肤炎症，如泛红、瘙痒等。

(2)实验方法：以DMSO或双蒸水配制阳性药及实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C，用时以含10％胎牛血清培养基稀释，低、中、高浓度为25mg/mL、50mg/mL、100mg/mL。

用含10％胎牛血清的IMDM培养基将Ku812细胞密度调整为2.2×10⁶个/mL的细胞悬液，接种于96孔板，每孔200μL。设细胞空白对照组、模型组、阳性药物组及受试药物组，每组设3个平行孔，37℃、5％CO₂培养箱培养静置10min，阳性药及受试药物组加入阳性药及受试药物，终浓度为50μg/mL，置培养箱中预温孵，15min后除细胞空白组外，各组细胞加入刺激剂PMA、A12387使终浓度分别为5nm、1μm，细胞空白组加入同体积含等浓度DMSO培养基。2h后离心分离细胞，收集细胞上清液，测定上清液中IL-8、IL-6含量。

(3)实验结果计算提取物A低、中、高浓度对IL-6抑制率分别为：10.3％、16.9％、30.7％；对IL-8抑制率分别为：6.7％、18.3％、31.6％；提取物B低、中、高浓度对IL-6抑制率分别为：7.8％、15.5％、28.3％；对IL-8抑制率分别为：8.1％、17.4％、29.9％；提取物C对IL-6抑制率分别为：6.1％、16.3％、23.1％；对IL-8抑制率分别为：5.8％、17.4％、26.2％。表明实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C可以通过抑制IL-6发挥抑制Ⅰ型超敏反应(速发型超敏反应)的作用，通过抑制IL-8发挥抑制Ⅳ型超敏反应(迟发型超敏反应)的作用。

四.实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C对透明质酸酶抑制作用实验方法：

采用透明质酸酶体外抑制实验Elson-Morgan法进行。取0.1mL 0.25mmol/L CaCl₂溶液和0.5mL透明质酸酶液37℃保温培养20min；加入植物提取物0.5mL，继续37℃保温培养20min；加入0.5mL透明质酸钠液37℃保温30min，常温放置5min；加入0.1mL0.4mol/L NaOH溶液和0.5mL乙酰丙酮溶液，置于沸水浴中加热15min后立即用冰水进行冷却5min；加入埃尔利希试剂1.0mL并用3.0mL无水乙醇进行稀释，放置20min显色，用分光光度计测定其吸光度值。

抗过敏活性计算公式：

式中：A——对照溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液)

B——对照空白溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液及酶液)

C——试样溶液ABS值

D——试样空白溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替酶液)

实验时先对A组试样进行450～700nm范围的波长扫描，以确定最大吸收波长，然后以去离子水作为参比，在该最大吸收波长处分别进行ABS值测定。

各提取物体外对透明质酸酶抑制作用详见表5，实验结果：

表5样品透明质酸酶抑制率

实验结论：实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物A、B、C体外对透明质酸酶有较好的抑制作用。

五.实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物抑制表面活性剂刺激效果

实验分别采用十二烷基硫酸钠作为表面活性剂刺激源，刺激血红细胞溶血。选择理由：国标GB17149.2-1997《化妆品接触性皮炎诊断标准与处理原则》中所列化妆品中常见致敏原，且国标中数据显示刺激程度较大，本领域技术人员熟知的常用化妆品表面活性剂，其他阴离子表面活性剂的作用机理与十二烷基硫酸钠相似。由实验可以发现血红细胞的溶血率随表面活性剂浓度的增加迅速上升，在0.3％的添加量时即会产生较明显的红细胞溶血现象。

通过向RBC Test System测试***中预先加入不同浓度的实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物，分别测试其对典型表面活性剂十二烷基硫酸钠刺激性的抑制作用。

RBC溶血测试表明，实施例1、实施例2、实施例3的植物提取物在0.5％的添加量时即开始具有较明显的抑制刺激效果，0.8％时抑制率均达到50％左右。随实施例1、实施例2、实施例3植物提取物浓度逐渐增加，其抑制十二烷基硫酸钠的刺激效果逐渐增加，当使用浓度为1.2％时，其刺激抑制效果均能达到80％左右。表明实施例1、实施例2、实施例3的植物提取物具有良好的降低表面活性剂刺激性的功效。

六.实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物抑制防腐剂刺激效果

根据国标GB17149.2-1997《化妆品接触性皮炎诊断标准与处理原则》中所列化妆品中常见致敏原，实验采用常用防腐剂对羟基苯甲酸甲酯(尼泊金甲酯)作为代表，测定其刺激血红细胞溶血的强弱。其中，尼泊金脂类防腐剂是业界技术人员最常选用的一大类防腐剂，尼泊金甲酯可以代表含尼泊金脂类的一大类防腐剂。实验结果表明血红细胞的溶血率随防腐剂浓度的增加迅速上升，在0.3％的添加量时即会产生较明显的红细胞溶血现象。

通过向RBC Test System测试***中预先加入不同浓度的实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物，分别测试其对对羟基苯甲酸甲酯刺激性的抑制作用。

RBC溶血测试表明，实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物在0.8％的添加量时即开始具有较明显的抑制刺激效果，抑制率均达到45％左右。随实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物浓度逐渐增加，可以明显看出其抑制对羟基苯甲酸甲酯引起的刺激效果逐渐增强，当使用浓度为1.6％时，其抑制刺激效果能达到75％左右。表明实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物具有良好的降低防腐剂刺激性的功效。

七.实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物抑制细胞DNA损伤和泄露

DNA存储着生物体赖以生存和繁衍的遗传信息，因此维护DNA分子的完整性对细胞及生物体至关紧要。外界环境和生物体内部的因素都经常会导致DNA分子的损伤或改变，如果DNA的损伤或遗传信息的改变不能更正，可能影响细胞的功能或生存。所以在进化过程中生物细胞所获得的修复DNA损伤的能力就显得十分重要，也是生物能保持遗传稳定性之所在。自然界的恶劣环境，如强烈的紫外线照射、物理因素、化学因素等均能造成DNA的损伤。抑制细胞DNA损伤和泄露可以提高皮肤免疫力和抵抗力，以应对恶劣环境中对辐射或其他刺激源的损害。

实验方法参考王海涛.化妆品用抗敏抗刺激活性物质的筛选、提取及作用机理研究.北京工商大学2010:66。

实验采用1.0％、5.0％两个梯度的实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物作为测试浓度(实验时稀释20倍使用)，分别测定其对SDS诱导DNA损伤的保护作用。

通过OxiSelect^TM彗星分析试剂盒的观察，DNA受到的损坏愈大，DNA碎段就愈多，愈小的DNA碎段游离的速度就愈快，也游离的愈远，进而形成了彗星的尾部，而较大的一些碎段位置则靠近细胞核，因而形成彗星的头部。DNA碎段游动的程度不同使图像呈现出彗星状。彗星的长度与DNA的损害程度呈正相关性，彗星尾端愈长，细胞的损害程度愈大。

表6实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物抑制细胞DNA损伤彗星实验结果

表6

通过图像分析软件对彗星图片进行测量、分析发现，在没有实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物存在的情况下，DNA发生100％损伤，彗尾长约45.5±2.7μm。在预添加实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物保护，然后用SDS刺激时，发生明显的DNA损伤减弱现象，其DNA损伤细胞拖尾率和彗尾长度均发生显著性的降低。实验结果见表6。

以上实验结果表明，实施例1、实施例2、实施例3所得植物提取物对DNA的损伤和泄露有很好的抑制作用。

八.实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜增加皮肤耐受性临床验证

采用预先在皮肤上臂内侧表面涂抹实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜，30分钟后在相应部位通过10％SDS溶液贴片(面积：2cm×2cm)刺激皮肤。实验前，将60名志愿者均分3组，志愿者前臂用清水清洗干净，将前臂分成3块区域，区域2预先涂抹实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜，区域1和区域3不做处理。静坐30min，分别在区域1和区域2贴10％的SDS贴片，区域3作为完全空白对照，不做任何处理。每15min向SDS贴片滴加0.2mLSDS溶液。45min后，通过皮肤色度测试仪Mexameter MX18测试皮肤在区域的红斑值E，反映皮肤受刺激的程度。

实验结果统计后显示，10％SDS刺激后区域皮肤不适症状明显，出现一系列如红肿、瘙痒的敏感症状。而预先涂抹含实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜，再采用10％SDS刺激区域不适症状不明显，相应的红肿和瘙痒现象明显减弱，皮肤耐受性明显增强，与完全空白区域对照，皮肤相应生理指标接近；综合三个区域的比较，可以明显表明实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜能够增强皮肤的耐受性。

九.实施例4-6和对比例1-7具有抗敏舒缓功效的的膏霜止痒功效临床验证

实验方法：患者来源为中山大学附属医院皮肤科门诊患者。

本组共500例，男215例，女285例，年龄最大45岁，最小21岁，病程最长1年，最短2个月，随机均分为10组。

临床主要表现为颜面、手、下肢、足部皮肤时有不适，痒，脱屑，尤其使用化妆品后，出现一系列的症状，反复难愈(仅针对敏感人群的以面部为主的人群，化妆品可以使用者；排除严重过敏、全身过敏及其他具有医疗体征疾病的患者)。

临床观察方法及疗效标准

1、样品使用方法：

每日洁面后，在面部和敏感部位涂实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜适量，早晚各一次。1周、4周后各统计一次。

2、疗效判定标准

(1)治愈：临床症状消失、敏感症状消退；

(2)有效：临床症状减轻、敏感症状消退或消失，减小或减少；

(3)无效：临床症状、敏感症状未见好转。

临床观察结果与结论

1、结果

实施例4-6和对比例1-7具有抗敏舒缓功效的的膏霜临床观察总情况及受试者症状表现与疗效的情况详见表7。

表7实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜临床观察总情况

2、临床结果分析

(1)针对面部皮肤敏感人群，面部皮肤主要症状(痒、红疹、干燥脱屑情况，使用实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜1周对有效率可达90％(45例)，1个月的治愈率为72％(36例)。

(2)由实施例4-6与对比例1-7对比得知，扁柏、白柳、百金花、波叶大黄、川谷、大蕉、红景天只有合用时，治疗敏感肌肤效果才显著。

(3)试用者对应用实施例4-6具有抗敏舒缓功效的的膏霜4周后的总体评价见表8：

表8

(4)只要坚持使用对敏感肌肤人群治疗效果均显著。

十.实施例4-6制备的具有抗敏舒缓功效的的膏霜美白功效实验

1.实验原理

人体实验，由特定实验人群组成受试群体，测试受试者使用化妆品(以及化妆品功效成分)前后皮肤颜色的变化，从而确定化妆品(或功效成分)的美白功效。

2.实验仪器与样品

仪器：皮肤黑色素和血红素测试仪(Mexameter MX18，德国CK电子公司生产)；Lab色差仪(MPA9，德国CK电子公司生产)。

样品：实施例4-6制备得到的膏霜。

3.实验人群和测试时间

共150人，年龄在34～48岁之间，均分为3组。

志愿者使用时间：每天早晚各涂抹1次实施例4-6制备的具有抗敏舒缓功效的的膏霜。

测试时间：一周测试一次，测试4周。

4.实验方法

(1)受试者涂抹样品前，先将试实验部位洗净，晾干后涂抹样品。受试者左、右手臂内侧受试区域和对照区域，各确定4×4cm大小的面积作为实验部位。

(2)受试者取适量膏霜涂均匀抹在测试区域。同时受试者使用空白基质在对照区域，每天早晚各涂抹1次。实验期间，受试者在实验部位不能涂抹任何化妆品。

(3)受试者在连续使用样品后每周同一时间，使用皮肤黑色素和血红素测试仪与Lab色差仪测试皮肤颜色的变化，取平均值，见表9：

表9

黑色素含量	初始值	1周后	2周后	3周后	4周后
						实施例4对照组	190.8	189.8	188.4	186.7	185.3
实施例4	190.8	183.3	177.1	170.5	164.3
						实施例5对照组	191.1	189.9	188.5	187.3	186.6
实施例5	191.1	184.5	177.3	170.4	165.2
						实施例6对照组	190.6	189.2	187.8	186.4	185.2
实施例6	190.6	183.2	176.4	169.3	164.7

5.结果分析

黑色素含量变化分析

(1)由表9可以看出，在使用样品前，样品组与对照组黑色素含量无差异性；在样品使用后，各时间段样品组与对照组黑色素含量相比较均存在显著性差异。

(2)样品组使用1周后与对照组相比较，存在明显地差异性，黑色素含量明显降低；样品组4周内抑制黑色素效果明显，且持续性佳。

6.结论

以上试验结果表明：

(1)样品试用后，具有较好的抑制黑色素能力，且4周内的持续效果佳。

(2)样品试用第一周，其增加皮肤亮度的效果不明显，试用2～4周，其增加皮肤亮度的效果显著。说明本样品可以有效提升美白效果。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，故凡未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (10)

1.一种具有抗敏舒缓功效的护肤组合物，其特征在于，由下述重量份配比的原料制备而成： 扁柏1-10份、白柳1-10份、百金花1-10份、波叶大黄1-15份、川谷1-10份、大蕉1-10份、红景天1-10份。

2.根据权利要求1所述的具有抗敏舒缓功效的护肤组合物，其特征在于，由下述重量份配比的原料制备而成： 扁柏2-8份、白柳2-8份、百金花2-8份、波叶大黄2-10份、川谷2-8份、大蕉2-8份、红景天2-8份。

3.一种权利要求1或2所述具有抗敏舒缓功效的护肤组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法的步骤如下：

(1) 权利要求1或2所述原料粉碎后按所述重量份配比称取，混匀；

(2)用体积百分比为70-90％乙醇提取，原料与乙醇质量体积比g/mL为1：（10-30），70-80℃提取1-4h；

(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至室温(20-30℃)，80-100目过滤，得滤液；

(4)滤液中加入原始乙醇量的1,3-丁二醇混溶均匀，蒸发出溶液中的乙醇，真空抽滤，收集滤液，即得。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中乙醇的体积百分比为80％，原料与乙醇的质量体积比g/mL为1：20。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中真空抽滤条件为在布氏漏斗里铺1.2μm滤板，进行真空抽滤。

6.一种具有抗敏舒缓功效的植物提取物，其特征在于，所述植物提取物由权利要求3-5中任意一项所述制备方法制备得到。

7.权利要求6所述植物提取物在制备具有抗敏舒缓功效的外用护肤品添加剂或护肤制剂中的用途。

8.一种具有抗敏舒缓功效的护肤制剂，其特征在于，所述护肤制剂由权利要求6所述植物提取物及护肤品领域常规辅料制成。

9.一种具有抗敏舒缓功效的膏霜，其特征在于，所述膏霜包含下述重量百分比的组分：

权利要求6所述植物提取物 1-10%

鲸蜡硬脂醇 1-3%

硬脂醇聚醚-2 0.5-2%

环五聚二甲基硅氧烷 1-3%

环己硅氧烷 0.1-1.5%

二苯基甲硅烷氧基苯基聚三甲基硅氧烷 0.1-2%

牛油果树（BUTYROSPERMUM PARKII）果脂 0.1-1%

氢化椰油 0.1-2%

聚二甲基硅氧烷 1-2%

角鲨烷 0.1-2%

油橄榄（OLEA EUROPAEA）果油 0.1-2%

生育酚（维生素E） 0.1-1%

氢化卵磷脂 0.1-1%

甲基硬脂酰基牛磺酸钠 0.1-1 %

季戊四醇四（双-叔丁基羟基氢化肉桂酸）酯 0.1-1%

稻（ORYZA SATIVA）糠油 0.1-1%

甜菜碱 0.5-2.5%

三山嵛精 PEG-20 酯类 0.1-1%

PEG-40 氢化蓖麻油 0.01-0.1%

EDTA 二钠 0.01-0.05%

透明质酸钠 0.01-0.05%

软玉粉 0.01-0.2%

黄原胶 0.1-0.3%

多元醇 5-15%

防腐剂 0.05-0.2%

水 余量。

10.根据权利要求9所述的具有抗敏舒缓功效的膏霜，其特征在于，所述多元醇为山梨醇、山梨糖醇、辛甘醇、二丙二醇、甲基丙纤维醇、赤藻糖醇、麦芽糖醇、甘露醇、戊二醇、乙基己基甘油、异戊二醇、己二醇中的一种或一种以上的混合；所述的防腐剂为山梨酸钾、苯甲醇、苯氧乙醇中的至少一种。