CN108484291A

CN108484291A - 废弃蛹虫草米饼生物菌肥及制作方法

Info

Publication number: CN108484291A
Application number: CN201810586296.8A
Authority: CN
Inventors: 赫凯; 敖广宇; 吕晓欢
Original assignee: Shenyang Zhong Bo Environmental Protection & Technology R & D Co Ltd
Current assignee: Shenyang Zhong Bo Environmental Protection & Technology R & D Co Ltd
Priority date: 2018-06-08
Filing date: 2018-06-08
Publication date: 2018-09-04

Abstract

本发明涉及生物肥料技术领域，具体涉及到一种生物菌肥的制备方法。一种废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，包括蛹虫草米饼50～150份，糖蜜10～20份，木瓜蛋白酶1～2份，菌剂5～10份，水150～500份，将蛹虫草米饼粉碎后加入水搅拌混合；向混合液中加入酶进行酶解处理得到酶解液；糖蜜和菌剂加入酶解液中进行发酵处理后进行离心分离得到菌体；菌体冷冻干燥得到菌种冻干粉与蛹虫草残渣进行混合得到生物菌肥。本发明利用农户种植蛹虫草后废弃的蛹虫草米饼经过酶解和发酵后与之前过滤的米饼残渣进行混合，得到生物菌肥；该生物菌肥含有大量碳源、氮源、氨基酸、丰富的孢子及蛹虫草残留的实体，具有速溶，活菌数量更高的优点，使得肥料效果更迅速与持久。

Description

废弃蛹虫草米饼生物菌肥及制作方法

技术领域

本发明涉及生物肥料技术领域，具体涉及到一种生物菌肥的制备方法。

背景技术

肥料生产技术的发展过程是先从有机肥开始，然后向无机肥、发酵有机肥、细菌肥、微生物菌肥方向发展。微生物肥是一种以微生物生命活动及其产物导致农作物得到特定肥料效应的微生物活体制品，它在培肥地力、提高化肥利用率、抑制农作物对重金属及农药等有害物质的吸收、净化和修复土壤、促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用、提高农产品品质等方面有着不可替代的作用。土壤微生态区系的微生物的活性大小，对植物根部营养非常重要。微生物肥料是活体肥料，它的作用主要靠它含有的大量有益微生物的生命活动来完成。只有当这些有益微生物处于旺盛的繁殖和新陈代谢的情况下，物质转化和有益代谢产物才能不断形成。因此，微生物肥料中有益微生物的种类、生命活动是否旺盛是其有效性的基础。

现有技术中国专利CN101857500A公开了一种含螯合态微量元素的微生物有机肥料及其生产方法，虽然目前市场上出现了大量的微生物菌肥及有机肥等等生产方法及制作。但是生物菌肥能否有效的发挥其功效是关键性问题。其功效主要体现在两个方面，一个是生物菌肥的菌体群落数量，另一个就是菌体的活性，该专利中菌体数量达到1*1010cfu/g，数量较低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种废弃蛹虫草米饼生物菌肥及制作方法，利用废弃的蛹虫草米饼含有大量碳源、氮源、氨基酸、丰富的孢子及蛹虫草残留的实体，都是菌体生长及作物生长需要丰富的营养成分的特点，通过酶解和发酵制作得到速溶，肥效高效持久，活菌数量更高的生物菌肥，并处理了农用的废弃物品，减少了环境污染。

本发明是这样实现的：一种废弃蛹虫草米饼生物菌肥，以质量份计，准备蛹虫草米饼50～150份，糖蜜10～20份，木瓜蛋白酶1～2份，菌剂5～10份，水150～500份作为原料；

S1.将蛹虫草米饼粉碎后加入水搅拌混合均匀得到混合液；

S2.向混合液中加入木瓜蛋白酶进行酶解处理，酶解完毕后过滤得到蛹虫草米饼酶解液，并包括过滤残留的蛹虫草残渣备用；

S3.将糖蜜和菌剂加入到蛹虫草米饼酶解液中进行发酵处理，得到发酵菌液；

S4.利用离心机对发酵菌液进行离心，去上清，收集沉淀物菌体；

S5.将沉淀物菌体加入到复配保护剂中在冷冻干燥机上冷冻干燥得到菌种冻干粉；

S6.将菌种冻干粉与蛹虫草残渣进行混合，混合比例为1:3～5，混合后进行密封包装，得到生物菌肥。

所述步骤S1中，将蛹虫草米饼残渣粉碎到50～120目。

所述步骤S2中，所述酶解处理的工艺参数为加热到50～65℃，处理3～6小时。

所述步骤S4中，所述离心的工艺参数为，转数在4000～6000r/min条件下，离心5～10min。

所述步骤S5中，冷冻干燥的时间为8～15h。

所述步骤S3中发酵处理的具体流程为，

1)将菌剂活化；

2)将活化后的菌剂按照3%-10%的量接种于PDA液体培养基中，20～45℃条件下，150～200r/min，摇床培养3～4天，制得一级种子；

3)将制得的一级种子按PDA液体培养基体积的5～10％的接种量，分别接种于发酵罐中，20～45℃条件下，保持转速150～200r/min，通气量1∶0.5～2，培养3～4天，制得二级种子；

4)将二级种子按PDA液体培养基体积的2～8％的接种量，接种于发酵罐中进行高密度发酵培养，获得高浓度发酵液后放罐。

所述菌剂为哈茨木霉菌、勾状木酶与枯草芽孢杆菌混合菌剂，菌种比例为1:1:1。

所述高浓度发酵液的放罐条件为有效菌体群落数≥1.0×1012cfu/g。

本发明废弃蛹虫草米饼生物菌肥及制作方法将农户种植蛹虫草后废弃的蛹虫草米饼进行收集，分拣，经过粉碎，浸泡，酶解、将酶解液与残渣分开保留，先在酶解液中补充适量的碳源后接入菌种进行发酵。当菌体群落浓度达到一定程度时停止发酵，将发酵的菌种制作成冻干粉后，与之前过滤的米饼残渣进行混合，独立真空分装后，完成生物菌肥的制作。

最终得到的生物菌肥含有大量碳源、氮源、氨基酸、丰富的孢子及蛹虫草残留的实体，都是菌体生长及作物生长需要丰富的营养成分，具有速溶，肥效高效持久，活菌数量更高的优点，使得肥料效果更迅速与持久；并且处理了农用的废弃物品，减少了环境污染。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明表述的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例

一种废弃蛹虫草米饼生物菌肥，以质量份计，回收农民栽培北虫草废弃的固体培养基即蛹虫草米饼50～150份，糖蜜10～20份，木瓜蛋白酶1～2份，菌剂5～10份，水150～500份作为原料；

S1.将蛹虫草米饼粉碎后加入水搅拌混合均匀得到混合液；将蛹虫草米饼残渣粉碎到50～120目。

S2.向混合液中加入蛋白酶进行酶解处理，酶解完毕后过滤得到蛹虫草米饼酶解液，并包括过滤残留的蛹虫草残渣备用；所述酶解处理的工艺参数为加热到50～65℃，处理3～6小时。

S3.将糖蜜和菌剂加入到蛹虫草米饼酶解液中进行发酵处理，得到发酵菌液；本发明中，考虑到蛹虫草米饼的实际发酵效果，所述菌剂选用哈茨木霉菌、勾状木酶与枯草芽孢杆菌混合菌剂，菌种比例为1～2: 1～2: 1～2；

发酵的具体流程为：

1)将菌剂活化；

2)将活化后的菌剂按3%-10%的量接种于PDA液体培养基中，20～45℃条件下，150～200r/min，摇床培养3～4天，制得一级种子；

4)将二级种子按PDA液体培养基体积的2～8％的接种量，接种于发酵罐中进行高密度发酵培养，获得高浓度发酵液后放罐，得到发酵菌液；在本实施例中，作为优选，所述高浓度发酵液的放罐条件为有效菌体群落数≥1.0×1012cfu/g。

S4.利用离心机对发酵菌液进行离心，去上清，收集沉淀物菌体；所述离心的工艺参数为，转数在4000～6000r/min条件下，离心5～10min。

S5.将沉淀物菌体加入到复配保护剂中在冷冻干燥机上冷冻干燥得到菌种冻干粉；冷冻干燥的时间为8～15h。

下面结合具体实施数据对本发明作进一步的说明。然而，本发明的范围并不限于下述实施例。

准备蛹虫草米饼100～150份，糖蜜10～20份，木瓜蛋白酶1～2份，菌剂5～10份，水150～500份作为原料

实施例1

将农民种植北虫草收集来的蛹虫草米饼分拣挑出后，自然晾晒干燥后，选出100份蛹虫草米饼用粉碎机进行粉碎，粉碎至100目，加入水，米饼粉末与水的比例为1:5，搅拌均匀后，加入蛋白水解酶1份，50℃处理3小时后，将酶解液与米饼残渣分离留着备用，在酶解液内加入20份糖蜜，之后接入经活化发酵的三级菌种，哈茨木霉菌、勾状木酶与枯草芽孢杆菌，其菌种比例为1:1:1，将活化后的菌剂按4%的量接种于PDA液体培养基中，30℃条件下，150～200r/min，摇床培养3天，制得一级种子；将制得的一级种子按PDA液体培养基体积的7％的接种量，分别接种于发酵罐中，30℃条件下，保持转速150～200r/min，通气量1∶1，培养3天，制得二级种子；将二级种子按PDA液体培养基体积的5％的接种量，接种于发酵罐中进行高密度发酵培养，当发酵液中有效菌体群落数≥1.0×1012cfu/g后放罐，得到发酵菌液；

对发酵菌液进行离心分离得到菌体。将菌体加入到复配保护剂中（50%的甘油：糖蜜=100ml:2g），在冷冻干燥机上冷冻干燥10h，得到的冻干粉与米饼残渣以1:3的比例混合后，真空密封包装得到生物菌肥。

实施例2

将收集来的蛹虫草米饼分拣挑出后，自然晾晒干燥后，选出50份蛹虫草米饼用粉碎机进行粉碎，粉碎至50目，加入水，米饼粉末与水的比例为1:10，搅拌均匀后，加入木瓜蛋白酶2份，50℃处理3小时后，将酶解液与米饼残渣分离留着备用，在酶解液内加入10份糖蜜，之后接入经活化发酵的三级菌种，哈茨木霉菌、勾状木酶与枯草芽孢杆菌，其菌种比例为1:1.5:1，将活化后的菌剂按5%接种于PDA液体培养基中，于27℃条件下，150～200r/min，摇床培养4天，制得一级种子；将制得的一级种子按PDA液体培养基体积的5％的接种量，分别接种于发酵罐中，于27℃条件下，保持转速150～200r/min，通气量1∶0.5，培养4天，制得二级种子；将二级种子按PDA液体培养基体积的3％的接种量，接种于发酵罐中进行高密度发酵培养，当发酵液中有效菌体群落数≥1.0×1012cfu/g后放罐，得到发酵菌液；对发酵菌液进行离心分离得到菌体。将菌体加入到复配保护剂（40%的甘油：糖蜜=100ml:5g）中，在冷冻干燥机上冷冻干燥8h，得到的冻干粉与米饼残渣以1:4的比例混合后，真空密封包装得到生物菌肥。

实施例3

将收集来的蛹虫草米饼分拣挑出后，自然晾晒干燥后，选出50份蛹虫草米饼用粉碎机进行粉碎，粉碎至50目，加入水，米饼粉末与水的比例为1:8，搅拌均匀后，加入木瓜蛋白酶混合蛋白酶共1.5份，于65℃处理3小时后，将酶解液与米饼残渣分离留着备用，在酶解液内加入15份糖蜜，之后接入经活化发酵的三级菌种，哈茨木霉菌、勾状木酶与枯草芽孢杆菌，其菌种比例为2:1:1，将活化后的菌剂按6%的量接种于PDA液体培养基中，于37℃条件下，150～200r/min，摇床培养3天，制得一级种子；将制得的一级种子按PDA液体培养基体积的10％的接种量，分别接种于发酵罐中，于37℃条件下，保持转速150～200r/min，通气量1∶2，培养3天，制得二级种子；将二级种子按PDA液体培养基体积的8％的接种量，接种于发酵罐中进行高密度发酵培养，当发酵液中有效菌体群落数≥1.0×1012cfu/g后放罐，得到发酵菌液；对发酵菌液进行离心分离得到菌体。将菌体加入到复配保护剂（30%的甘油：糖蜜=100ml:6g），在冷冻干燥机上冷冻干燥15h，得到的冻干粉与米饼残渣以1:5的比例混合后，真空密封包装得到生物菌肥。

在吉林金博地生态试验田，应用实施例1得到的生物菌肥与从山东购买的生物菌肥NY884-2012对小麦试验田进行施肥实验，结果如下：CK为对照组（为不添加任何肥料的空白对照）、1组代表本专利生物菌肥、2组代表购买的生物菌肥NY884-2012；得到表1的试验结果。

处理

有机质

条锈病

叶锈病

白粉病

根结线虫

产量

CK

1.69%

2⁺-3

2⁺-3⁺

MR

500斤/亩

1组

2.37%

0-2级

0-1级

HR

650斤/亩

2组

1.98%

1-3级

2-3级

1级

R

590斤/亩

表1

根据表1中的结果表明，本发明的生物菌肥能够有效的降低病虫害发生率，并提高亩产量，具有良好的效果。

Claims

1.一种废弃蛹虫草米饼生物菌肥，其特征是，包括以下步骤：

以质量份计，准备蛹虫草米饼50～150份，糖蜜10～20份，木瓜蛋白酶1～2份，菌剂5～10份，水150～500份作为原料；

S1.将蛹虫草米饼粉碎后加入水搅拌混合均匀得到混合液；

2.如权利要求2所述的废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，其特征是：所述步骤S1中，将蛹虫草米饼残渣粉碎到50～120目。

3.如权利要求2所述的废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，其特征是：所述步骤S2中，所述酶解处理的工艺参数为加热到50～65℃，处理3～6小时。

4.如权利要求2所述的废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，其特征是：所述步骤S4中，所述离心的工艺参数为，转数在4000～6000r/min条件下，离心5～10min。

5.如权利要求2所述的废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，其特征是：所述步骤S5中，冷冻干燥的时间为8～15h。

6.如权利要求2～6中任意一权利要求所述的废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，其特征是：所述步骤S3中发酵处理的具体流程为，

1)将菌剂活化；

7.如权利要求7所述的废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，其特征是：所述菌剂为哈茨木霉菌、勾状木酶与枯草芽孢杆菌混合菌剂，菌种比例为1:1:1。

8.如权利要求7所述的废弃蛹虫草米饼生物菌肥制作方法，其特征是：所述高浓度发酵液的放罐条件为有效菌体群落数≥1.0×1012cfu/g。