CN108420826B - 枸杞多糖在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途及包含其的药物组合物 - Google Patents

枸杞多糖在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途及包含其的药物组合物 Download PDF

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Abstract

本发明公开了枸杞多糖在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途。其可以单独或与其他组分制成组合物或联合用药，安全有效。本发明还公开了一种治疗或缓解抑郁症的药物组合物，其包括如下质量份的组分：枸杞多糖10‑30份、绿原酸2‑8份、大豆异黄酮1‑3份。

Description

枸杞多糖在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途及包含其 的药物组合物
技术领域
本发明涉及一种枸杞多糖的新用途，具体涉及其在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途及包含其的药物组合物。
背景技术
抑郁症又称抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床特征，是心境障碍的主要类型。临床可见心境低落与其处境不相称，情绪的消沉可以从闷闷不乐到悲痛欲绝，自卑抑郁，甚至悲观厌世，可有***企图或行为；甚至发生木僵；部分病例有明显的焦虑和运动性激越；严重者可出现幻觉、妄想等精神病性症状。每次发作持续至少2周以上、长者甚或数年，多数病例有反复发作的倾向，每次发作大多数可以缓解，部分可有残留症状或转为慢性。
抑郁症是世界第四大疾病，预计到2020年将成为第二大；但我国对抑郁症的医疗防治还处在识别率低的局面，地级市以上的医院对其识别率不足20％，只有不到10％的患者接受了相关的药物治疗；而且，同时，抑郁症的发病(和***事件)已开始出现低龄(大学，乃至中小学生群体)化趋势。综上所述，对抑郁症的科普、防范、治疗工作亟待重视，抑郁症防治已被列入全国精神卫生工作重点。
目前治疗各类抑郁症的西药主要有三环类抗抑郁剂(简称TCA，分为咪嗪类，普林类，二苯并卓类等)、单胺氧化酶抑制剂(简称MAOI，如异丙肼等)和5-HT再摄取抑制剂(简称SSRI，如氟西汀等)，但是西药普遍存在耐药性、毒副作用大等弊端，因此寻找安全、高效、副作用小的抗抑郁药物尤为重要，尤其是天然抗抑郁药物成为了该领域的研究热点。
枸杞是茄科落叶小灌木的成熟果实，是我国传统的中药材，具有滋补强壮、益精气、祛风、壮阳、强筋骨等功能，现代科学研究证明枸杞有效成分为枸杞多糖，具有降血糖、降血脂、提高免疫、抗氧化、抗疲劳等作用。《食疗本草》上记载枸杞具有“坚筋耐劳、陈风，补益筋骨，能益人，去虚劳”的功用。目前有相关文献报道枸杞子抗疲劳的资料如下：
罗琼、阎俊等报道了枸杞多糖对小鼠抗疲劳作用的影响，实验得出枸杞多糖为枸杞抗疲劳作用的有效成分(枸杞多糖对小鼠抗疲劳作用的影响，湖北医科大学学报，Oct1999，(20)：4)；王彦武，傅伟忠，谭宗艳等报道了枸杞多糖具有抗疲劳作用(枸杞多糖抗疲劳作用的实验研究，China Tropical Medicine，August 2006，(6)：8)；潘京一，杨隽，潘喜华等报道了枸杞子对小鼠具有抗疲劳，提高运动耐力和免疫力的作用(枸杞子抗疲劳与增强免疫作用的实验研究，上海预防医学杂志，2003，(15)：8)。
发明内容
针对现有技术中存在的上述不足，本发明旨在探索可能治疗或缓解抑郁症的药物。
本发明所要解决的技术问题之一是提供枸杞多糖在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途。
本发明所要解决的技术问题之二是提供了一种治疗或缓解抑郁症的药物组合物，其特征在于，包括如下质量份的组分：枸杞多糖10-30份、绿原酸2-8份、大豆异黄酮1-3份。
优选地，所述药物组合物还包括：香菇多糖1～5质量份。
更优选地，所述药物组合物还包括：五味子乙素0.5-1质量份。
进一步优选地，所述药物组合物还包括：水苏糖0.5～1质量份。
本发明中所述枸杞多糖可以直接购买或使用常规方法制备得到，优选为水提醇沉的方法制备得到。
优选地，所述枸杞多糖的制备方法包括如下步骤：
(1)水提：按料液比1:5～1:20(g/mL)向枸杞子中加入去离子水，浸泡1～4h，在60～90℃条件下提取1～2h，离心收集上清液，然后在50～70℃下浓缩至原体积的1/10～1/15；
(2)醇沉：向浓缩液中加入体积分数为90％的乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:2～1:5，静置12～24小时，析出沉淀，得到枸杞多糖。
进一步优选地，所述枸杞多糖的制备方法，包括如下步骤：
(1)水提：按料液比1:5～1:20(g/mL)向枸杞子中加入去离子水，浸泡1～4h，在60～90℃条件下提取1～2h，离心收集上清液，然后在50～70℃下浓缩至原体积的1/10～1/15；
(2)醇沉：向浓缩液中加入体积分数为90％的乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:2～1:5，静置12～24小时，析出沉淀，得到枸杞粗多糖；
(3)酶解：向枸杞粗多糖中加入其质量30～50倍的水得到枸杞粗多糖水溶液，然后加入酶，枸杞子粗多糖和酶的质量比为100:1～50:1；于30～65℃酶解2～4小时；然后于90～100℃水浴处理5～10分钟，终止酶反应，得到酶解液；
(4)醇沉：向酶解液中加入体积分数为90％的乙醇，酶解液与乙醇的体积比为1:2～1:5，静置12～24小时，析出沉淀，离心，干燥，得到枸杞多糖。
其中，
步骤(3)所述酶为果胶酶、葡萄糖淀粉酶、木瓜蛋白酶中的一种或多种，优选为果胶酶、葡萄糖淀粉酶、木瓜蛋白酶质量比(3～5):(1～3):1的混合酶。
步骤(4)所述干燥可以为冷冻干燥、喷雾干燥、烘干箱干燥等。
各步骤中所述离心为3000～4000rpm离心。
本发明所述药物组合物可以由各组分直接混合均匀得到。
本发明所要解决的技术问题之三是提供了上述药物组合物在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途。
所述制备治疗或缓解抑郁症的药物的剂型可以为片剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂、冲剂、口服液制剂等。所述剂型可以按照本领域的常规技术制备得到。
本发明发现了枸杞多糖的新用途，且可以单独或与其他天然提取成分共同用于制备治疗疗抑郁症的药物。提高对抑郁症的症状缓解情况，使用的都是植物提取物，几乎无毒副作用及耐药性，且本发明使用多种组分复配时，对治疗抑郁症具有协同增效的作用，本发明通过特定的酶解方法得到的枸杞多糖对治疗抑郁症效果更佳。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
实施例中葡萄糖淀粉酶，食品级，购于上海江莱生物科技有限公司，酶活力6万/g。
实施例中果胶酶，食品级，购于上海江莱生物科技有限公司，酶活力10万/g。
实施例中木瓜蛋白酶，食品级，购于上海江莱生物科技有限公司，酶活力10万/g。
实施例1枸杞多糖的制备(水提纯沉法)
枸杞多糖的制备方法，包括如下步骤：
(1)水提：按料液比1:5g/mL向枸杞子中加入去离子水，浸泡2h，在90℃条件下提取2h，3500rpm离心收集上清液，然后在60℃下浓缩至原体积的1/10；
(2)醇沉：向浓缩液中加入体积分数为90％的乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:5，静置12小时，析出沉淀，得到枸杞多糖。
实施例2枸杞多糖的制备(水提纯沉酶解法)
(1)水提：按料液比1:5g/mL向枸杞子中加入去离子水，浸泡2h，在90℃条件下提取2h，3500rpm离心收集上清液，然后在60℃下浓缩至原体积的1/10；
(2)醇沉：向浓缩液中加入体积分数为90％的乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:5，静置12小时，析出沉淀，得到枸杞粗多糖；
(3)酶解：向枸杞粗多糖中加入其质量30倍的水得到枸杞粗多糖水溶液，然后加入酶，枸杞子粗多糖和酶的质量比为50:1；于37℃酶解2小时；然后于95℃水浴处理10分钟，终止酶反应，得到酶解液；
(4)醇沉：向酶解液中加入体积分数为90％的乙醇，酶解液与乙醇的体积比为1:5，静置12～24小时，析出沉淀，3500rpm离心，干燥，得到枸杞多糖。
步骤(3)所述酶为果胶酶、葡萄糖淀粉酶、木瓜蛋白酶质量比5:1:1的混合酶。
实施例3枸杞多糖的制备
按照实施例2的方法制备枸杞多糖，区别在于：步骤(3)所述酶为果胶酶。
实施例4枸杞多糖的制备
按照实施例2的方法制备枸杞多糖，区别在于：步骤(3)所述酶为葡萄糖淀粉酶。
实施例5枸杞多糖的制备
按照实施例2的方法制备枸杞多糖，区别在于：步骤(3)所述酶为木瓜蛋白酶。
实施例6枸杞多糖的制备
按照实施例2的方法制备枸杞多糖，区别在于：步骤(3)所述酶为果胶酶、葡萄糖淀粉酶质量比5:2的混合酶。
实施例7枸杞多糖的制备
按照实施例2的方法制备枸杞多糖，区别在于：步骤(3)所述酶为果胶酶、木瓜蛋白酶质量比5:2的混合酶。。
测试例1枸杞多糖对行为绝望模型小鼠抑郁行为的影响
1材料与方法
1.1材料
1.1.1主要药品与试剂
枸杞多糖，由实施例1～7提供；
盐酸氟西汀胶囊，上海中西制药有限公司。
1.1.2实验动物
清洁剂昆明小鼠，雌雄各半，体重18-22g，吉林大学实验动物中心提供。动物分笼饲养，保持12h昼夜节律，室温24±1℃，自由饮水摄食。
1.2方法
1.2.1分组及给药
将小鼠随机分成9组，每组10只，雌雄各半，分组及给药剂量分别为：阴性对照组(生理盐水，0.1ml/kg wt.，灌胃给药)，阳性对照组(氟西汀，10mg/kg wt.，灌胃给药)，实施例1～7的枸杞多糖(0.2g/kg wt.，灌胃给药)，将氟西汀和枸杞多糖按照给药剂量以及0.1ml/10g给药体积，每只小鼠给药范围在0.2ml～0.8ml之间，用生理盐水溶解，配置成适量浓度的溶液。
1.2.2强迫游泳实验
于末次给药1h后，将动物分别放进水温23-25℃水桶中，使动物后肢不能靠水桶底部支撑身体。该实验由两部分组成：先进行15min预游，24h后观测6min内的游泳行为，记录后5min内的不动时间。
1.2.3悬尾不动实验
于末次给药1h后，距小鼠尾尖部位约1cm处用医用胶布贴于细线的一端，另一端与连有的张力换能器相连，小鼠头部离台面约5cm，一次悬挂2只小鼠，中间用白纸隔开，悬挂时间为6min，统计后5min内小鼠的累计不动时间。
2结果
2.1小鼠强迫游泳实验结果
结果如表1所示，连续给药7天后，枸杞多糖和氟西汀阳性对照组与阴性对照组相比较，均能够显著减少小鼠在强迫游泳实验中的不动时间。实施例2与实施例1相比较，使用酶解后醇沉的枸杞多糖，其效果更佳，可能是由于酶解后的枸杞多糖的组成更有利于抑郁症的治疗或酶解后的分子量有助于提高生物利用度。使用果胶酶、葡萄糖淀粉酶、木瓜蛋白酶三种酶进行酶解，效果最显著，单独使用葡萄糖淀粉酶或木瓜蛋白酶，效果相对较差一些。
表1对小鼠强迫游泳不动时间的影响(n＝10，x±SEM)
组别 不动时间/s
阴性对照组 126.7±11.9
阳性对照组 88.1±9.6
实施例1枸杞多糖组 118.9±11.0
实施例2枸杞多糖组 83.9±6.9
实施例3枸杞多糖组 95.5±8.7
实施例4枸杞多糖组 108.2±10.3
实施例5枸杞多糖组 112.4±7.2
实施例6枸杞多糖组 86.9±7.2
实施例7枸杞多糖组 90.5±8.1
2.2小鼠悬尾不动实验结果
结果如表2所示，连续给药7天后，实施例1～7枸杞多糖组和氟西汀阳性对照组与阴性对照组相比较，均能够显著减少小鼠的悬尾不动时间。实施例2与实施例1相比较，使用酶解后醇沉的枸杞多糖，其效果更佳，可能是由于酶解后的枸杞多糖的组成更有利于抑郁症的治疗或酶解后的分子量有助于提高生物利用度。使用果胶酶、葡萄糖淀粉酶、木瓜蛋白酶三种酶进行酶解，效果最显著，单独使用葡萄糖淀粉酶或木瓜蛋白酶，效果相对较差一些。
表2对小鼠悬尾不动时间的影响(n＝10，x±SEM)
组别 不动时间/s
阴性对照组 119.4±10.5
阳性对照组 87.1±7.2
实施例1枸杞多糖组 106.1±10.5
实施例2枸杞多糖组 81.4±7.1
实施例3枸杞多糖组 88.5±6.2
实施例4枸杞多糖组 114.1±8.0
实施例5枸杞多糖组 106.4±7.9
实施例6枸杞多糖组 85.7±8.2
实施例7枸杞多糖组 84.6±7.4
实施例8～13药物组合物的制备
按照下表中的质量份称取各组分，混合均匀，制备实施例8～13的药物组合物，同时设置100％枸杞多糖、100％绿原酸、100％大豆异黄酮作为对比例1～3。表格中的枸杞多糖使用实施例2制备的产品：
表3药物组合物的组成
枸杞多糖 绿原酸 大豆异黄酮 香菇多糖 五味子乙素 水苏糖
实施例8 10质量份 8质量份 1质量份
实施例9 30质量份 2质量份 3质量份
实施例10 15质量份 5质量份 1质量份
实施例11 15质量份 5质量份 1质量份 1质量份
实施例12 15质量份 5质量份 1质量份 1质量份 0.5质量份
实施例13 15质量份 5质量份 1质量份 1质量份 0.5质量份 0.5质量份
对比例1 100％
对比例2 100％
对比例3 100％
测试例2对药物诱发抗抑郁模型小鼠行为的影响
1材料与方法
1.1材料
5-羟色氨酸(5-Hydroxy-DL-tryptophan，5-HTP)，Sigma公司；
利血平，Sgima公司；
实施例8～13的药物组合物；
对比例1～3的药物；
盐酸氟西汀胶囊，上海中西制药有限公司。
1.2实验动物
清洁剂昆明小鼠，雌雄各半，体重18-22g，吉林大学实验动物中心提供，动物分笼饲养，保持12h昼夜节律，室温24±1℃，自由饮水摄食。
1.1.3主要实验仪器
电子天平(德国赛多利斯BP221S)。
1.2实验方法
1.2.1 5-HTP诱导甩头实验
将小鼠随机分成11组，每组10只，雌雄各半，分组及给药剂量分别为：阴性对照组(生理盐水，0.1ml/kg wt.，灌胃给药)，阳性对照组(氟西汀，10mg/kg wt.，灌胃给药)，实施例8～13的药物组合物组(0.2g/kg wt.，灌胃给药)，对比例1～3的药物组(0.2g/kg wt.，灌胃给药)，将氟西汀和药物组合物或药物按照给药剂量以及0.1ml/10g给药体积，每只小鼠给药范围在0.2ml～0.8ml之间，用生理盐水溶解，配置成适量浓度的溶液。
各组动物连续给药7天后，末次给药1h后腹腔注射100mg/kg wt.5-HTP，给药5min后开始连续观察15min，记录每组小鼠各自甩头次数。
1.2.2利血平诱导实验
动物给药及分组同测试例2中1.2.1所述，另外增加一组空白组(10只小鼠)，各组动物连续给药7天后，于末次给药1h后，除空白组灌胃等容量蒸馏水外，其它各组腹腔注射4mg/kg wt.利血平，分别进行体温下降的观察。
2实验结果
2.1对5-HTP诱导实验的影响
结果见表4所述，与阴性对照组相比较，阳性对照药氟西汀剂量组和本发明的药物组合物，均能够显著增加小鼠的甩头次数。
表4对5-HTP诱导实验的影响(n＝10，x±SEM)
Figure BDA0001696005650000101
Figure BDA0001696005650000111
2.2对利血平诱导实验的影响
结果见表5所述，与阴性对照组相比较，阳性对照药氟西汀剂量组和本发明的药物组合物，均能够显著拮抗利血平诱导小鼠体温下降的作用，提示本发明的药物组合物具有抗抑郁作用，并且其抗抑郁作用与影响中枢单胺能神经***有关。
表5对利血平诱导实验的影响(n＝10，x±SEM)
Figure BDA0001696005650000112
Figure BDA0001696005650000121

Claims (3)

1.一种治疗或缓解抑郁症的药物组合物，其特征在于，包括如下质量份的组分：枸杞多糖10-30份、绿原酸2-8份、大豆异黄酮1-3份、香菇多糖1～5质量份、五味子乙素0.5-1质量份、水苏糖0.5～1质量份。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述枸杞多糖的制备方法包括如下步骤：
(1)水提：按料液比1:5～1:20(g/mL)向枸杞子中加入去离子水，浸泡1～4h，在60～90℃条件下提取1～2h，离心收集上清液，然后在50～70℃下浓缩至原体积的1/10～1/15；
(2)醇沉：向浓缩液中加入体积分数为90％的乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:2～1:5，静置12～24小时，析出沉淀，得到枸杞粗多糖；
(3)酶解：向枸杞粗多糖中加入其质量30～50倍的水得到枸杞粗多糖水溶液，然后加入酶，枸杞子粗多糖和酶的质量比为100:1～50:1；于30～65℃酶解2～4小时；然后于90～100℃水浴处理5～10分钟，终止酶反应，得到酶解液；
(4)醇沉：向酶解液中加入体积分数为90％的乙醇，酶解液与乙醇的体积比为1:2～1:5，静置12～24小时，析出沉淀，离心，干燥，得到枸杞多糖；步骤(3)所述酶为果胶酶、葡萄糖淀粉酶、木瓜蛋白酶质量比(3～5):(1～3):1的混合酶。
3.权利要求1所述药物组合物在制备治疗或缓解抑郁症的药物中的用途。
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