CN108342502A - 鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合,PCR引物对为P1或者P2;引物对组合为P1与P3组合使用,或者P2与P3组合使用。还公开了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法,包括如下步骤:1)提取待检测的小麦种子或植株的根茎叶总基因组DNA作为PCR扩增模板;2)采用权利要求1所述的引物对或者引物对组合对得到的DNA模板进行扩增,根据条带的有无和强弱判断待测对象是否含有ms1b隐性不育基因。可有效地对不带胚的半粒小麦种子和植株组织进行检测,能实现对ms1b基因的快速、大通量的检测,大幅度提高蓝粒两系法杂交小麦***中的两用系(不育系)快速转育和选育效率。
Description
技术领域
本发明属于基因分子检测领域,具体涉及一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法。
背景技术
小麦雄性不育基因多数是由自然突变或人工诱导产生的,小麦上发现和诱导的雄性核不育材料较多,这些基因被命名为ms1、Ms2、Ms3、Ms4和ms5,分别定位在4BS、4DS、5AS、4DS和3AL染色体臂上。其中,ms1和ms5为隐性基因,而Ms2、Ms3、Ms4为显性基因。与本发明相关的ms1基因位点有很多突变体,包括Pugsley's突变体(含等位基因ms1a)、Probus突变体(含等位基因ms1b)、Cornerstone突变体(含等位基因ms1c)、FS3突变体(含等位基因ms1e)、FS24突变体(含等位基因ms1f)、LZ突变体(含等位基因ms1g)等等。2006年李中安利用ms1b不育基因建立了《一种以蓝粒为标记性状的两系法杂交小麦的选育方法》(专利号:ZL200610042629.8),现已培育出一大批两用系(不育系)和杂交种在进行试验和示范。为进一步提高两用系(不育系)选育效率,在保持不育基因存在的情况下将其它抗病抗逆、优质、矮杆等优良性状转入两用系(不育系)中,因此迫切需要建立简便可行的鉴定ms1b基因的检测方法,尤其是早期从不带胚的半粒种子上进行检测。
PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)已广泛应用于基因分离、克隆、核酸序列分析、病害分子检测、品种性状的分子标记等研究。目前尚无鉴定ms1b基因的PCR分子检测技术,对该不育基因的识别只有在田间开花时观察植株的育性,根据植株群体的育性个分离情况才能知道是ms1b基因是纯合的还是杂合的或根本没有,需要较大的群体才行,而且极大地受到季节性限制。
发明内容
本发明的目的是提供一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法。
本发明一方面提供了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合,所述的PCR引物对为P1或者P2;所述的引物对组合为P1与P3组合使用,或者P2与P3组合使用;所述引物对P1、P2、P3的序列为:
P1-F:5'-ACCCTCTCTAGATATATCCGT-3',
P1-R:5'-CATATTCAAGTGTCCCGTCA-3',
P2-F:5'-GCTATCGTTTCTGTCCGCTCGTA-3',
P2-R:5'-CCGCTTGACGTGAGTTCCAT-3',
P3-F:5'-TGAGCGAACAACCTAAGACGA-3',
P3-R:5'-CCGTGTCAGCTCAATTACCAT-3'。
本发明另一方面提供了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法,包括如下步骤:
1)提取待检测的小麦种子或植株的根茎叶总基因组DNA作为PCR扩增模板;
2)采用权利要求1所述的引物对或者引物对组合对得到的DNA模板进行扩增,根据条带的有无和强弱判断待测对象是否含有ms1b隐性不育基因:当采用引物对P1进行检测时,如果扩增出720bp的条带,条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因;没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;
当采用引物对P2进行检测时,如果扩增出531bp的条带,条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因,没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;
当采用P1与P3组合双重PCR时,如果扩增出976bp的条带,说明检测对象中含有4B染色体;如果同时扩增出720bp的条带,条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因,没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;如果未扩增出976bp的条带,则说明该样品检测结果不准确需要重新实验;
当采用P2与P3组合双重PCR时,如果扩增出976bp的条带,说明检测对象中含有4B染色体;如果同时扩增出531bp的条带,条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因;没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;如果未扩增出976bp的条带,则检测结果不准确需要重新实验。
当采用引物对P1进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mixbuffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,40个循环,最后72℃延伸5min。
当采用引物对P2进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mixbuffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P2引物对的上下游引物各0.3μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸45s,36个循环,最后72℃延伸5min。
当采用引物对P1和P3引物对组合进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mix buffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL,浓度为浓度为10μmol/L的P3引物对的上下游引物各0.15μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,40个循环,最后72℃延伸5min。
当采用引物对P2和P3引物对组合进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mix buffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P2、P3引物对的上下游引物均各0.3μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸45s,33个循环,最后72℃延伸5min。
本发明的有益效果是:检测周期短、灵敏度好,方法简便、操作简单、准确性好,可有效地对不带胚的半粒小麦种子和植株组织进行检测,能实现对ms1b基因的快速、大通量的检测,大幅度提高蓝粒两系法杂交小麦***中的两用系(不育系)快速转育和选育效率。
附图说明
图1为采用P1引物对检测ms1b的琼脂糖凝胶电泳结果图,其中:M:分子量标准为DL1000 DNA Marker;1-2:13品6;5-2:17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种;8-1:14L6232B蓝粒两用系;N:清水对照。
图2为采用P2引物对检测ms1b的琼脂糖凝胶电泳结果图,其中:M:分子量标准为DL1000 DNA Marker;1-2:13品6;5-2:17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种;7-1:17ZH231(15L7079w/13品6)杂交种;8-1:14L6232B蓝粒两用系;N:清水对照。
图3为采用P3引物对检测4B染色体有无缺失的琼脂糖凝胶电泳结果图,其中,M:分子量标准为DL1000 DNA Marker;1-2:13品6;5-2:17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种;8-1:14L6232B蓝粒两用系;N:清水对照。
图4为采用P1和P3引物组合进行双重PCR检测ms1b和4B染色体的琼脂糖凝胶电泳结果图,其中,M:分子量标准为DL1000 DNA Marker;1-2:13品6;5-2:17ZH189(16L5079w/绵麦367);8-1:14L6232B蓝粒两用系;N:清水对照。
图5为采用P2和P3引物组合进行双重PCR检测ms1b和4B染色体的琼脂糖凝胶电泳结果图,其中,M:分子量标准为DL1000 DNA Marker;1-2:13品6;5-2:17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种;7-1:17ZH231(15L7079w/13品6)杂交种;8-1:14L6232B蓝粒两用系;N:清水对照。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例一、
一、引物设计及组合
根据E.J.Tucker等2017年在《Nature Communication》杂志上发表的基因组序列设计引物对,先建立P1、P2和P3引物对的单个PCR检测体系,然后通过优化反应条件,检测ms1b的P1、P2引物分别与检测4B染色体的P3引物搭配,建立同时检查样品中有无ms1b基因和4B染色体有无缺失的双重PCR体系。3对引物组合详细情况见下表1:
表1本发明所使用的引物对
本发明以种子或植株的根茎叶总基因组DNA为模板,利用本发明的引物对或其组合分别进行PCR扩增,反应结束后根据琼脂糖凝胶电泳判定结果:具体利用P1或者P2引物对,进行PCR扩增可鉴别ms1b不育基因;利用P3引物对进行PCR扩增可鉴别4B染色体在所鉴定的材料中有无缺失;当P1、P2引物对分别与P3组合进行双重PCR扩增可以保证在4B染色体无缺失情况下鉴别ms1b基因有无、是杂合或纯合的,检测结果更准确可靠。
二、DNA提取:
利用Biospin全能型植物基因组DNA提取试剂盒提取DNA,对其操作步骤略有改动,具体步骤如下:
1)用刀片将种子切成两半,无胚部分压碎后放入1.5或2.0mL的离心管中;或用刀片将植物组织切碎后放入1.5mL的离心管中。
2)在装有样品的离心管中加800μL LA plus Buffer,放置30min后加入钢珠用磨样器打碎,置于4℃冰箱中过夜。
3)振荡后置于65℃水浴锅中温浴30min,其间振荡离心管2-3次。
4)加入200μL DA Buffer,混合均匀后置于-20℃冰箱中或冰浴中10min。
5)将混合物在10000rpm离心3min后上清液移至Shredder spin column,再在10000rpm离心1min。
6)将滤液转移到一个新的1.5mL离心管中,加入750uL或滤液体积1.5倍的PBinding Buffer(加酒精的),混合均匀。
7)将混合液移至Spin column中,6000rpm离心1min,弃去接液管中液体(由于液体较多,分2次离心过柱)。
8)向Spin column中加入400μL的G Binding Buffer,10000rpm离心30秒,弃去接液管中液体。
9)向Spin column中加入400μL的Washing Buffer(加酒精的),10000rpm离心30秒,弃去接液管中液体,重复2次。
10)再次将Spin column 10000rpm离心1min,然后将其转移至一个新的1.5mL的离心管上。
11)向Spin column中加入30μL的Elution Buffer,在室温下放置1min后,10000rpm离心1min,弃去Spin column,离心管中液体即为DNA抽提物,-20℃下保存备用。
三、PCR反应体系(20μL):
10μL 2×Green Mix buffer(PROMEGA公司,其成分为GoTaq DNA聚合酶、dNTPs及反应缓冲液);样品基因组DNA抽提物1μL;引物由重庆市擎科兴业生物技术有限公司合成,浓度为10μmol/L,单个PCR扩增中P1、P2引物使用量均为0.3μL,P3引物使用量为0.15μL,双重PCR扩增中P1和P3引物组合中P1和P3使用量分别为0.3μL和0.15μL,P2和P3组合引物中P2和P3使用量均为0.3μL;蒸馏水补足至20μL。
四、PCR反应程序:
1)P1引物对的PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,40个循环,最后72℃延伸5min;
2)P2引物对的PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸45s,36个循环,最后72℃延伸5min;
3)P3引物对的PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,40个循环,最后72℃延伸5min;
4)P1和P3引物对组合双重PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,40个循环,最后72℃延伸5min;
5)P2和P3引物对组合双重PCR的反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸45s,33个循环,最后72℃延伸5min。PCR产物在4℃条件下保存。
从上面可以发现,P1和P3引物对组合的双重PCR的PCR循环次数明显多于P2和P3引物对组合双重PCR的PCR循环次数,因此当提取的DNA量较少时,采用P2和P3引物对组合进行双重PCR效果更好,更易得到清晰的条带。五、电泳:
电泳用2.5%的琼脂糖,DL1000 DNA Marker(TaKaRa公司),80V电压,90min。
实施例二、品种(系)检测鉴定
按照实施例一中的DNA提取方法、PCR反应体系、PCR反应程序、琼脂糖对不同小麦品种(系)检测(电泳结果如附图1-5所示):
一、常规小麦品种(系)检查鉴定
检测了常规小麦品种(系):14品16,13品6,绵麦374,绵麦367,渝麦17,西农538,小偃22,高大1号,陕987,远丰175,MTS-1,15CA50,济麦22,九麦2号,伟隆121,伟隆136,伟隆169等。检测结果显示均表现1-2(13品6)的带型。
二、含1对ms1b基因的蓝粒两用系检测鉴定
检测了蓝粒两用系:08L5070B,12L8012B,12L8015B,12L8016B,14L8056B,14L8139B,14L6232B,15L7079B,15L7084B,15L7095B,15L7096B,15L7266,16L5079B,16L6010B,16L6335B,16L6355B,16L6388B,16L6392B,16L6429B,16L6432B,16L7004B,16L7043B,17L5080B,17L6062B,17L6067B,17L9034B,17L9066B,17L9076B,17L9080B等。检测结果显示均表现8-1(14L6232B蓝粒两用系)的带型。
三、含1个ms1b基因的小麦杂交种的检测鉴定
检测了小麦杂交种:17ZH01,17ZH02,17ZH03,17ZH04,17ZH05,17ZH06,17ZH07,17ZH08,17ZH49,17ZH50,17ZH51,17ZH52,17ZH53,17ZH54,17ZH95,17ZH96,17ZH139,17ZH140,17ZH141,17ZH142,17ZH143,17ZH186,17ZH187,17ZH188,17ZH189,17ZH229,17ZH230,17ZH231,17ZH233,17ZH234,17ZH235,17ZH236等。检测结果显示均表现5-2(17ZH189,杂交种)的带型。
采用本发明方法得到的检测结果和这些品种(系)的已知不育表型是相符合的,说明本发明的检测方法灵敏度好,方法简便,操作简单,能实现对ms1b基因的快速、大通量的检测,大幅度提高蓝粒两系法杂交小麦***中的两用系(不育系)快速转育和选育效率。
Claims (6)
1.一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合,其特征在于:所述的PCR引物对为P1或者P2;所述的引物对组合为P1与P3组合使用,或者P2与P3组合使用;所述引物对P1、P2、P3的序列为:
P1-F:5'-ACCCTCTCTAGATATATCCGT-3',
P1-R:5'-CATATTCAAGTGTCCCGTCA-3',
P2-F:5'-GCTATCGTTTCTGTCCGCTCGTA-3',
P2-R:5'-CCGCTTGACGTGAGTTCCAT-3',
P3-F:5'-TGAGCGAACAACCTAAGACGA-3',
P3-R:5'-CCGTGTCAGCTCAATTACCAT-3'。
2.一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法,其特征在于:包括如下步骤:
1)提取待检测的小麦种子或植株的根茎叶总基因组DNA作为PCR扩增模板;
2)采用权利要求1所述的引物对或者引物对组合对得到的DNA模板进行扩增,根据条带的有无和强弱判断待测对象是否含有ms1b隐性不育基因:当采用引物对P1进行检测时,如果扩增出720bp的条带,条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因;没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;
当采用引物对P2进行检测时,如果扩增出531bp的条带,条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因,没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;
当采用P1与P3组合双重PCR时,如果扩增出976bp的条带,说明检测对象中含有4B染色体;如果同时扩增出720bp的条带,条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因,没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;如果未扩增出976bp的条带,则说明该样品检测结果不准确需要重新实验;
当采用P2与P3组合双重PCR时,如果扩增出976bp的条带,说明检测对象中含有4B染色体;如果同时扩增出531bp的条带,条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因,条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因;没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因;如果未扩增出976bp的条带,则检测结果不准确需要重新实验。
3.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法,其特征在于:当采用引物对P1进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mix buffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,40个循环,最后72℃延伸5min。
4.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法,其特征在于:当采用引物对P2进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mix buffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P2引物对的上下游引物各0.3μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸45s,36个循环,最后72℃延伸5min。
5.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法,其特征在于:当采用引物对P1和P3引物对组合进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mixbuffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL,浓度为浓度为10μmol/L的P3引物对的上下游引物各0.15μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸1min,40个循环,最后72℃延伸5min。
6.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法,其特征在于:当采用引物对P2和P3引物对组合进行检测时,20μL的PCR反应体系包含:10μL 2×Green Mixbuffer;样品基因组DNA抽提物1μL;浓度为10μmol/L的P2、P3引物对的上下游引物均各0.3μL,蒸馏水补足至20μL;PCR反应程序为:预变性95℃,3min,再经95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸45s,33个循环,最后72℃延伸5min。
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CN201810110738.1A Pending CN108342502A (zh) | 2018-02-05 | 2018-02-05 | 鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法 |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109593873A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-04-09 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 小麦隐性核雄性不育突变基因ms1的分子标记及其应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1234722A (zh) * | 1997-05-15 | 1999-11-10 | 耶达研究及发展有限公司 | 生产杂交小麦的方法 |
WO2007092505A2 (en) * | 2006-02-07 | 2007-08-16 | Washington State University Research Foundation | Glyphosate-tolerant wheat genotypes |
CN103409433A (zh) * | 2013-08-12 | 2013-11-27 | 江苏省农业科学院 | 一个水稻稻瘟病广谱抗病新等位基因pi21t及其抗性应用 |
CN104719129A (zh) * | 2015-03-27 | 2015-06-24 | 西南大学 | 一种小麦新品种的选育方法 |
CN105671170A (zh) * | 2016-03-10 | 2016-06-15 | 中国农业大学 | 一种用于鉴别鸡匍匐性状的引物组合及其应用 |
-
2018
- 2018-02-05 CN CN201810110738.1A patent/CN108342502A/zh active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1234722A (zh) * | 1997-05-15 | 1999-11-10 | 耶达研究及发展有限公司 | 生产杂交小麦的方法 |
WO2007092505A2 (en) * | 2006-02-07 | 2007-08-16 | Washington State University Research Foundation | Glyphosate-tolerant wheat genotypes |
CN103409433A (zh) * | 2013-08-12 | 2013-11-27 | 江苏省农业科学院 | 一个水稻稻瘟病广谱抗病新等位基因pi21t及其抗性应用 |
CN104719129A (zh) * | 2015-03-27 | 2015-06-24 | 西南大学 | 一种小麦新品种的选育方法 |
CN105671170A (zh) * | 2016-03-10 | 2016-06-15 | 中国农业大学 | 一种用于鉴别鸡匍匐性状的引物组合及其应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
ELISE J等: ""Molecular identification of the wheat male fertility gene Ms1 and its prospects for hybrid breeding"", 《NATURE COMMUNICATIONS》 * |
金晶,陈茶主编: "《分子诊断学实验指导》", 30 August 2015, 中国医药科技出版社 * |
陈涛等: ""小麦抗白粉病基因Pm13和Pm21的多重PCR检测"", 《贵州农业科学》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109593873A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-04-09 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 小麦隐性核雄性不育突变基因ms1的分子标记及其应用 |
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