CN108251315B - 蟹味菇及其培养方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种蟹味菇及其培养方法,蟹味菇于2018年02月05日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2018090;该蟹味菇的宏观生物学特性包括:在PDA培养基上最佳的生长温度是25℃,培养时间为10d的时候,菌落白色,直径30~33mm;质地丝绒状,培养皿反面呈浅黄色;无可溶性色素产生,无渗出液产生;微观生物学特性包括:菌丝分枝,壁光滑,产生锁状联合,分支末端断裂产生大量杆状或柱状粉孢子。本发明提供的蟹味菇,不带苦味,味道鲜美,生物性能特殊;培养方法简单,生产稳定,生产成本低,具有很高的经济价值。

Description

蟹味菇及其培养方法
技术领域
本发明涉及食用菌栽培技术领域,具体涉及一种蟹味菇及其培养方法。
背景技术
蟹味菇隶属担子菌亚门层菌纲伞菌目的一种食用菌,菌盖表面近白色至灰褐色,中央常有深色的大理石花纹。菌褶近白色,与菌柄圆弯生,密集至稍稀。蟹味菇侧向生长时菌柄偏生,孢子印近白色,阔卵形至近球形。蟹味菇味比平菇鲜,肉比滑菇厚,质比香菇韧,口感极佳,还具有独特的蟹香味,在日本有“香在松茸、味在玉蕈”之说。蟹味菇中含有丰富维生素和17种氨基酸,其中赖氨酸、精氨酸的含量高于一般菇类,有助于青少年益智增高,同时具有抗癌、降低胆固醇的功效;并且,真菌多糖、嘌呤、腺苷能增强免疫力,促进抗体形成抗氧化成分能延缓衰老。目前人工种植的蟹味菇带有苦味,味道不够鲜美,并且产量低。
发明内容
针对现有技术中的缺陷,本发明目的在于提供一种蟹味菇及其培养方法,以提供一种不带苦味、味道鲜美的蟹味菇,且生物性能特殊;培养方法简单,生产稳定,生产成本低,具有很高的经济价值。
为实现上述目的,本发明提供的技术方案为:
本发明提供一种蟹味菇M53H7,于2018年02月05日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2018090。保藏地址:中国,武汉,武汉大学(中国湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内)。分类命名为Hypsizygus marmoreus M53H7。本发明提供的蟹味菇的宏观生物学特性包括:在PDA培养基上最佳的生长温度是25℃,培养时间为10d的时候,菌落白色,直径30~33mm;质地丝绒状,培养皿反面呈浅黄色;无可溶性色素产生,无渗出液产生。
本发明提供的蟹味菇的微观生物学特性包括:菌丝分枝,壁光滑,产生锁状联合,分支末端断裂产生大量杆状或柱状粉孢子。
蟹味菇的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO:1所示,具体为:
CTTGTTTGGGTTGTTGCTGGCTCTTAGGAGCATGTGCACGCCTGACACATTTTTACCACCTGTGCACCCTTTGTAGACCTGGAACACCTCTCGAGGCAACTCGGTTTGAGGATTGCCGCTGCTGAAAAGCCGGCTTTCCTTGCGTTCCCGGTCTATGTCTTTATATACCCCATGAATGTAACTGAATGTCTTTAATGGGCCTTAGTGCCTTTAAATCAAATACAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACCTTGCGCTCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTAAATTCTCAACCTTTCCAGCTTTTACTAGCTTGGTCAGGCTTGGATGTGGGGGTTGCGGGCTTCTCAGAAGTCGGCTCTCCTTAAATGCATTAGCGGAACCTTTGTTGACCAGCTCTGGTGTGATAATTATCTACGCCATTGTGAAGCAGCTTTAATAATGGGGTTCAGCTTCTAACCGTCCCCTTCACGGGACAACTCTCTGACATTTTGACCTCAAATCAGGTAGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA。
本发明提供了一种培养蟹味菇的培养基,培养基为PDA培养基,PDA培养基的原料组分按重量份计,包括:马铃薯200重量份、葡萄糖20重量份、琼脂15~20重量份和水1000重量份。
本发明还提供了一种蟹味菇的培养方法,包括步骤:装瓶:对液体培养基进行装瓶,使用850cc的栽培瓶,每瓶的培养基重量为600~640g;灭菌:将瓶盖扣紧栽培瓶,然后121℃灭菌90min,然后冷却至20~25℃;接种培养:向栽培瓶进行接种,每瓶原种接种30~32瓶栽培瓶,然后在25℃、湿度为70%~72%、二氧化碳浓度为2200~2400ppm的培养室内进行培养;搔菌:培养时间为60~70天后,进行搔菌处理并补充培养中丧失的水分;催蕾、生育:将栽培瓶摆放在栽培床架上,栽培室温度为20~25℃,湿度为95%~98%,二氧化碳浓度控制在1500ppm以下,培养15~20天开始采收。
优选地,液体培养基的原料组分按重量份计,包括:豆粕粉20~30重量份、麦麸粉5~8重量份、过磷酸钙0.2~0.5重量份,蔗糖1~2重量份、薏米粉2~4重量份、磷酸二氢钾0.2~0.4重量份、硫酸镁0.04~0.06重量份和水400~500重量份。
优选地,液体培养基的制备方法包括步骤:将豆粕粉、麦麸粉和薏米粉加入水中,搅拌均匀,去除泡沫;然后加入其他剩余原料组分,搅拌均匀,制得液体培养基。
本发明提供的技术方案,具有如下的有益效果:(1)本发明提供的蟹味菇,不带苦味,味道鲜美,生物性能特殊;(2)本发明提供的蟹味菇的培养方法简单,生产稳定,生产成本低,具有很高的经济价值。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1为本发明实施例一中的蟹味菇M53H7的宏观形态图;
图2为本发明实施例一中的蟹味菇M53H7的微观形态图;
图3为本发明实施例二中的蟹味菇M53H7与相关种的ITS rDNA基因序列的***发育树。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案,因此只是作为示例,而不能以此来限制本发明的保护范围。
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,数据为三次重复实验的平均值或平均值±标准差。
实施例一
本实施例提供一种蟹味菇M53H7,于2018年02月05日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2018090。
本实施例提供的蟹味菇M53H7的宏观生物学特性(如图1所示)包括:在PDA培养基上最佳的生长温度是25℃,培养时间为10d的时候,菌落白色,直径30~33mm;质地丝绒状,培养皿反面呈浅黄色;无可溶性色素产生,无渗出液产生。
本实施例提供的蟹味菇M53H7的微观生物学特性(如图2所示)包括:菌丝分枝,壁光滑,产生锁状联合,分支末端断裂产生大量杆状或柱状粉孢子。
将本实施例的蟹味菇M53H7在中国食品发酵工业研究院微生物检测中心进行真菌鉴定检测(报告编号:17-298-920-1204),测得的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO:1所示,具体为:
CTTGTTTGGGTTGTTGCTGGCTCTTAGGAGCATGTGCACGCCTGACACATTTTTACCACCTGTGCACCCTTTGTAGACCTGGAACACCTCTCGAGGCAACTCGGTTTGAGGATTGCCGCTGCTGAAAAGCCGGCTTTCCTTGCGTTCCCGGTCTATGTCTTTATATACCCCATGAATGTAACTGAATGTCTTTAATGGGCCTTAGTGCCTTTAAATCAAATACAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACCTTGCGCTCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTAAATTCTCAACCTTTCCAGCTTTTACTAGCTTGGTCAGGCTTGGATGTGGGGGTTGCGGGCTTCTCAGAAGTCGGCTCTCCTTAAATGCATTAGCGGAACCTTTGTTGACCAGCTCTGGTGTGATAATTATCTACGCCATTGTGAAGCAGCTTTAATAATGGGGTTCAGCTTCTAACCGTCCCCTTCACGGGACAACTCTCTGACATTTTGACCTCAAATCAGGTAGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA。
培养本实施例的蟹味菇M53H7的PDA培养基,原料组分按重量份计,包括:马铃薯200重量份、葡萄糖20重量份、琼脂18重量份和水1000重量份。
实施例二
将实施例一中的蟹味菇M53H7在中国食品发酵工业研究院微生物检测中心进行真菌鉴定检测(报告编号:17-298-920-1204),测得的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO:1所示,将蟹味菇M53H7与相关种的ITS rDNA基因序列进行比对,发现与Hypsizygusmarmoreus ZJNKYY(JX046031)的相似度为100%,与Hypsizygus ulmarius CBS 286.77(AY265850)的相似度为97%,与Hypsizygus tessulatus AFTOL-ID 1898(DQ917653)的相似度为93%,与Lyophyllum infumatum FR2014070(KP192627)的相似度为92%,与Lyophyllum moncalvoanum PDD96328(NR_137615)的相似度为90%。
蟹味菇M53H7与相关种的ITS rDNA基因序列的***发育树如图3所示。是采用MEGA5.0软件,邻位连接法显示菌株“蟹味菇M53H7”与相关种的ITS rDNA基因序列***发育树,进行1000次的相似度重复计算,图中发育树节点只显示Bootstrap值大于70%数值。
实施例三
本实施例提供一种蟹味菇M53H7的培养方法,包括步骤:
装瓶:对液体培养基进行装瓶,使用850cc的栽培瓶,每瓶的培养基重量为620g;其中,液体培养基的原料组分按重量份计,包括:豆粕粉25重量份、麦麸粉6重量份、过磷酸钙0.3重量份,蔗糖1.5重量份、薏米粉3重量份、磷酸二氢钾0.3重量份、硫酸镁0.05重量份和水450重量份。液体培养基的制备方法包括步骤:将豆粕粉、麦麸粉和薏米粉加入水中,搅拌均匀,去除泡沫;然后加入其他剩余原料组分,搅拌均匀,制得液体培养基;
灭菌:将瓶盖扣紧栽培瓶,然后121℃灭菌90min,然后冷却至22℃;
接种培养:向栽培瓶进行接种实施例一中的蟹味菇M53H7,每瓶原种接种31瓶栽培瓶,然后在25℃、湿度为71%、二氧化碳浓度为2300ppm的培养室内进行培养;
搔菌:培养时间为65天后,进行搔菌处理并补充培养中丧失的水分;
催蕾、生育:将栽培瓶摆放在栽培床架上,栽培室温度为25℃,湿度为97%,二氧化碳浓度控制在1500ppm以下,培养18天开始采收。
实施例四
本实施例提供一种蟹味菇M53H7的培养方法,包括步骤:
装瓶:对液体培养基进行装瓶,使用850cc的栽培瓶,每瓶的培养基重量为600g;其中,液体培养基的原料组分按重量份计,包括:豆粕粉20重量份、麦麸粉8重量份、过磷酸钙0.2重量份,蔗糖2重量份、薏米粉2重量份、磷酸二氢钾0.4重量份、硫酸镁0.04重量份和水500重量份。液体培养基的制备方法包括步骤:将豆粕粉、麦麸粉和薏米粉加入水中,搅拌均匀,去除泡沫;然后加入其他剩余原料组分,搅拌均匀,制得液体培养基;
灭菌:将瓶盖扣紧栽培瓶,然后121℃灭菌90min,然后冷却至20℃;
接种培养:向栽培瓶进行接种实施例一中的蟹味菇M53H7,每瓶原种接种30瓶栽培瓶,然后在25℃、湿度为70%、二氧化碳浓度为2200ppm的培养室内进行培养;
搔菌:培养时间为60天后,进行搔菌处理并补充培养中丧失的水分;
催蕾、生育:将栽培瓶摆放在栽培床架上,栽培室温度为20℃,湿度为95%,二氧化碳浓度控制在1500ppm以下,培养15天开始采收。
实施例五
本实施例提供一种蟹味菇M53H7的培养方法,包括步骤:
装瓶:对液体培养基进行装瓶,使用850cc的栽培瓶,每瓶的培养基重量为640g;其中,液体培养基的原料组分按重量份计,包括:豆粕粉30重量份、麦麸粉5重量份、过磷酸钙0.5重量份,蔗糖1重量份、薏米粉4重量份、磷酸二氢钾0.2重量份、硫酸镁0.06重量份和水400重量份。液体培养基的制备方法包括步骤:将豆粕粉、麦麸粉和薏米粉加入水中,搅拌均匀,去除泡沫;然后加入其他剩余原料组分,搅拌均匀,制得液体培养基;
灭菌:将瓶盖扣紧栽培瓶,然后121℃灭菌90min,然后冷却至25℃;
接种培养:向栽培瓶进行接种实施例一中的蟹味菇M53H7,每瓶原种接种32瓶栽培瓶,然后在25℃、湿度为72%、二氧化碳浓度为2400ppm的培养室内进行培养;
搔菌:培养时间为70天后,进行搔菌处理并补充培养中丧失的水分;
催蕾、生育:将栽培瓶摆放在栽培床架上,栽培室温度为25℃,湿度为98%,二氧化碳浓度控制在1500ppm以下,培养20天开始采收。
对比例一
本对比例提供一种蟹味菇M53H7的培养方法,包括步骤:
装瓶:对液体培养基进行装瓶,使用850cc的栽培瓶,每瓶的培养基重量为620g;其中,液体培养基的原料组分按重量份计,包括:豆粕粉25重量份、麦麸粉6重量份、过磷酸钙0.3重量份,蔗糖1.5重量份、磷酸二氢钾0.3重量份、硫酸镁0.05重量份和水450重量份。液体培养基的制备方法包括步骤:将豆粕粉、麦麸粉和薏米粉加入水中,搅拌均匀,去除泡沫;然后加入其他剩余原料组分,搅拌均匀,制得液体培养基;
灭菌:将瓶盖扣紧栽培瓶,然后121℃灭菌90min,然后冷却至22℃;
接种培养:向栽培瓶进行接种实施例一中的蟹味菇M53H7,每瓶原种接种31瓶栽培瓶,然后在25℃、湿度为71%、二氧化碳浓度为2300ppm的培养室内进行培养;
搔菌:培养时间为65天后,进行搔菌处理并补充培养中丧失的水分;
催蕾、生育:将栽培瓶摆放在栽培床架上,栽培室温度为25℃,湿度为97%,二氧化碳浓度控制在1500ppm以下,培养18天开始采收。
对比例二
本对比例提供一种蟹味菇(市场购买的蟹味菇菌种)的培养方法(同实施例三),包括步骤:
装瓶:对液体培养基进行装瓶,使用850cc的栽培瓶,每瓶的培养基重量为620g;其中,液体培养基的原料组分按重量份计,包括:豆粕粉25重量份、麦麸粉6重量份、过磷酸钙0.3重量份,蔗糖1.5重量份、薏米粉3重量份、磷酸二氢钾0.3重量份、硫酸镁0.05重量份和水450重量份。液体培养基的制备方法包括步骤:将豆粕粉、麦麸粉和薏米粉加入水中,搅拌均匀,去除泡沫;然后加入其他剩余原料组分,搅拌均匀,制得液体培养基;
灭菌:将瓶盖扣紧栽培瓶,然后121℃灭菌90min,然后冷却至22℃;
接种培养:向栽培瓶进行接种蟹味菇(市场购买的菌种),每瓶原种接种31瓶栽培瓶,然后在25℃、湿度为71%、二氧化碳浓度为2300ppm的培养室内进行培养;
搔菌:培养时间为65天后,进行搔菌处理并补充培养中丧失的水分;
催蕾、生育:将栽培瓶摆放在栽培床架上,栽培室温度为25℃,湿度为97%,二氧化碳浓度控制在1500ppm以下,培养18天开始采收。
将本发明实施例三至实施例五、对比例一至对比例二培养得到的蟹味菇(各取100个蟹味菇)进行比较,并且就栽培过程的效果进行比较,具体见下表1所示。
表1蟹味菇的性能比较
Figure GDA0001634775640000081
需要注意的是,除非另有说明,本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域技术人员所理解的通常意义。除非另外具体说明,否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对步骤、数字表达式和数值并不限制本发明的范围。在这里示出和描述的所有示例中,除非另有规定,任何具体值应被解释为仅仅是示例性的,而不是作为限制,因此,示例性实施例的其他示例可以具有不同的值。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中,“多个”的含义是两个以上,除非另有明确具体的限定。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围,其均应涵盖在本发明的保护范围当中。
SEQUENCE LISTING
<110> 林勇全
<120> 蟹味菇及其培养方法
<130> 2
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 634
<212> DNA
<213> Hypsizygus marmoreus
<400> 1
cttgtttggg ttgttgctgg ctcttaggag catgtgcacg cctgacacat ttttaccacc 60
tgtgcaccct ttgtagacct ggaacacctc tcgaggcaac tcggtttgag gattgccgct 120
gctgaaaagc cggctttcct tgcgttcccg gtctatgtct ttatataccc catgaatgta 180
actgaatgtc tttaatgggc cttagtgcct ttaaatcaaa tacaactttc aacaacggat 240
ctcttggctc tcgcatcgat gaagaacgca gcgaaatgcg ataagtaatg tgaattgcag 300
aattcagtga atcatcgaat ctttgaacgc accttgcgct ccttggtatt ccgaggagca 360
tgcctgtttg agtgtcatta aattctcaac ctttccagct tttactagct tggtcaggct 420
tggatgtggg ggttgcgggc ttctcagaag tcggctctcc ttaaatgcat tagcggaacc 480
tttgttgacc agctctggtg tgataattat ctacgccatt gtgaagcagc tttaataatg 540
gggttcagct tctaaccgtc cccttcacgg gacaactctc tgacattttg acctcaaatc 600
aggtaggatt acccgctgaa cttaagcata tcaa 634

Claims (4)

1.一种蟹味菇,其特征在于:
所述蟹味菇于2018年02月05日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2018090。
2.权利要求1所述的蟹味菇的培养方法,其特征在于,包括步骤:
装瓶:对液体培养基进行装瓶,使用850cc的栽培瓶,每瓶的培养基重量为600~640g;
灭菌:将瓶盖扣紧栽培瓶,然后121℃灭菌90min,然后冷却至20~25℃;
接种培养:向栽培瓶进行接种,每瓶原种接种30~32瓶栽培瓶,然后在25℃、湿度为70%~72%、二氧化碳浓度为2200~2400ppm的培养室内进行培养;
搔菌:培养时间为60~70天后,进行搔菌处理并补充培养中丧失的水分;
催蕾、生育:将栽培瓶摆放在栽培床架上,栽培室温度为20~25℃,湿度为95%~98%,二氧化碳浓度控制在1500ppm以下,培养15~20天开始采收。
3.根据权利要求2所述的蟹味菇的培养方法,其特征在于,
所述液体培养基的原料组分按重量份计,包括:豆粕粉20~30重量份、麦麸粉5~8重量份、过磷酸钙0.2~0.5重量份,蔗糖1~2重量份、薏米粉2~4重量份、磷酸二氢钾0.2~0.4重量份、硫酸镁0.04~0.06重量份和水400~500重量份。
4.根据权利要求3所述的蟹味菇的培养方法,其特征在于,
所述液体培养基的制备方法包括步骤:将豆粕粉、麦麸粉和薏米粉加入水中,搅拌均匀,去除泡沫;然后加入其他剩余原料组分,搅拌均匀,制得所述液体培养基。
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