CN108243944A - 一种蝴蝶兰快速育种方法及优质品种组织培养繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蝴蝶兰快速育种方法，利用胚培养技术进行杂交育种，特别是利用早期胚培养技术，克服了远缘杂交的不亲和性，并通过对整个育种过程各环节包括环境条件和育种技术的严格控制，使培育出的新品种植株生长健壮、性状优良并缩短了育种的周期，从而实现新品种的快速育种和优良品种的挑选。本发明还公开了一种蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，针对挑选出的优质新品种，利用花梗节间段在组织培养过程中能够保持母株性状的优点，以实生苗性状稳定、开花性状优良、植株生长健康的优良新品种的花梗作为外植体进行组织培养，并在不同阶段采用特别优选的培养基，使常规情况下培养的蝴蝶兰出苗快、稳定性好、性状优良且观赏价值高。
Description
技术领域
本发明涉及蝴蝶兰培养繁育技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰快速育种方法及优质品种组织培养繁殖方法。
背景技术
蝴蝶兰( Phalaenopsis )为兰科蝴蝶兰属多年生草本花卉，原产于热带和亚热带地区，其花形似蝴蝶，花色艳丽，花期持久，具有极高的观赏价值和经济价值，是当今国内外花卉市场上最热销的盆花之一。最早市场化的盆栽品种是从切花品种中选出的株型较紧凑的品种, 现在已有大量适合盆栽的品种育出。蝴蝶兰育种方法主要有：杂交育种、诱变育种和生物技术育种等，其中，杂交育种是利用属间杂交引入蝴蝶兰种质没有的性状，是创制蝴蝶兰新奇品种的重要手段。而目前，按传统的育种方法需要用3 年的时间才能挑选出新品种，且较无法保证实生苗一次开花的稳定性。
蝴蝶兰属于单茎性气生兰，侧芽极少发育，分株繁殖系数极低，其主要繁殖方法采用无菌播种和通过原球茎、愈伤组织等再诱导不定芽繁殖。但优质蝴蝶兰杂交种利用无菌播种繁殖时，后代会发生分离，不能保持母体的优良性状和种苗的一致性，而采用原球茎、愈伤组织等再诱导不定芽繁殖种苗时，会增加种苗的变异系数。
发明内容
针对以上技术缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种蝴蝶兰快速育种方法及优质品种组织培养繁殖方法，通过杂交育种方式及对整个育种过程中的各环节进行严格控制，实现新品种蝴蝶兰的快速育种，并对挑选出的优质品种的蝴蝶兰花梗节段为外植体，通过诱导出初培苗，再以初培苗进行丛生芽增殖，从而实现优质品种的快速繁育。
为解决以上技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种蝴蝶兰快速育种方法，包括以下步骤：
1）杂交授粉：将优选出的蝴蝶兰品种为亲本，采用开花时生长健壮的母株进行授粉杂交，控制温度在27±3℃，湿度控制在60～80%；授粉后120～150天果实成熟的种子用于播种；
2）无菌播种：将成熟的果实用质量浓度为70～75％的酒精浸泡25～30秒，用无菌水清洗干净后，用质量浓度为0.10～0.12％的氯化汞溶液灭菌10～15分钟，再用无菌水冲洗干净，在超净工作台上切开果实，将粉末状种子均匀撒播于萌发培养基中，播种30～38天后萌发形成原球茎；所用萌发培养基为：1/2MS+0.2～1mg/L6-BA+0.2～1mg/LNAA+20～30g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+50～450mg/L柠檬酸或/和pvp或/和维生素C+0.15～0.20%活性炭+10～20%椰汁，pH为5.4～5.9，其中，柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮pvp、维生素C及活性炭均可作为抗褐化物减轻培养过程中褐化现象；
3）成苗培养：将原球茎接种到原球茎培养基上，所用原球茎培养基为：3g/L花宝一号+10～15g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+3.5～5.5%香蕉汁+1.0～1.8%马铃薯汁+18～22%椰汁+0.10～0.18%活性炭，pH为5.3～5.5，其中，活性炭可有利于植株生长粗壮；
35～45天后生长成完整的小植株，移入成苗培养基，继续培养35～45天后成健壮实生苗；所用成苗生长培养基为：3g/L花宝一号+0.1～1mg/L6-BA+0.4～2mg/LNAA +10～15g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+7～9%椰汁+1.0～1.5%马铃薯汁+0.10～0.18%活性炭，pH为5.1～5.6；
4）出瓶栽培：试管苗长至2～3cm高,具有3～4片叶时，打开瓶塞，在室温下炼苗一周，即可移出瓶外种植；出瓶时，洗净根部的培养基，在0.1%的高锰酸钾溶液中浸泡4～6min后风干叶面上的水分，种植于混合基质中，保持通风和保温、保湿，光照5000～8000Lux; 所用出瓶移栽的混合基质包括采用以下重量配比的原料：腐殖土：碎木炭：水苔：火山岩基石为1.5～2.5:0.9～1.1:0.8～1.2:1；
5）苗期种植：30～45天后，每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各25～35ppm，海藻精5500倍液，在光照8000～10000Lux，温度25±1℃，保持通风条件下继续培养90～120天;
之后每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各30～40ppm，海藻精5000倍液，在光照11000～15000Lux，温度26±2℃，相对湿度60～85%条件下培养120～150天；
之后每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各为40～50ppm，海藻精4500倍液，在光照17000～20000Lux，温度28±2℃，相对湿度60～80%条件下种植120～150天，实生苗种植成熟；
其中，海藻精含有植物生长所需的各种必需元素、氨基酸及植物生长物质同，集植物营养物质、生物活性物质、植物抗逆因子于一体，可满足苗期植株生长所需；
6）实生苗的催花：实生苗种植成熟后移入温室内进行催花处理，每5～10天根部施氮、磷、钾平衡肥一次，肥料EC值1.0～1.2，光照10000～12000Lux，白天温度30±2℃，夜间温度25±1℃；1月后，每5～7天施高磷高钾催花肥一次，肥料EC值1.0～1.2，光照12000～15000Lux，白天温度25±1℃，夜间温度19±1℃；75～90天后，每5～7天施氮、磷、钾平衡肥一次，肥料EC值0.8～1.0，光照15000～20000Lux，白天温度26±2℃，夜间温度20±2℃直至开花；
7）挑选出生长健壮、品质好、观赏性状优良的蝴蝶兰新品种。
本发明还公开了利用上述方法培育出新品种蝴蝶兰后进行蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，包括以下步骤：
1）外植体消毒处理：以挑选出的新品种蝴蝶兰的花梗为外植体，用消毒过的刀片去除花梗节位上腋芽的外苞片，并用质量浓度为70～75％的酒精轻擦表面，用无菌水清洗干净后，将花梗切割成每段均包含一个节位的花梗节段，放入质量浓度为0.10～0.12％的氯化汞溶液中浸泡消毒8～10分钟并不断摇动，再将花梗节段取出，用无菌水清洗干净；
2）初培苗的萌发：将消毒后的外植体两端用消毒过的刀片切去，接种到萌发培养基中，温度23～26℃，前10天暗培养，之后在光强2000～2500Lux条件下培养至22～25天，使外植体萌发得到初培苗；所用萌发培养基为：1/2MS+1～3mg/L6-BA+0.5～1.5mg/LTDZ+0.1～0.3mg/LNAA+0.2～0.3mg/L维生素C+0.2～0.3g/L活性炭+20～30g/L蔗糖+6～7g/L琼脂+0.01～0.05mg/LDA-6，pH为5.4～5.8，其中，植物生长调节剂TDZ可以促进植物芽的再生和繁殖，打破芽的休眠，胺鲜酯DA-6能够促进外植体的快速萌发，提高繁殖速度；
3）初培苗增殖培养：将初培苗接种于增殖培养基中，温度23～26℃，光照12h/d，光强1500～2000Lux条件下培养40～45天，得到丛生芽；所用增殖培养基为：MS+1.0～3.5mg/L6-BA+0.2～1.0mg/LNAA+0.1～0.3mg/LTDZ+12～20%椰汁+0.2～0.3g/L活性炭+20～30g/L蔗糖+6～7g/L琼脂+12～18g/L玉米低聚肽粉，pH为5.4～5.6，其中，玉米低聚肽粉能够增强遗传性状的稳定性；
4）丛生芽增殖：将形成的丛生芽在新的增殖培养基上进行继代增殖，在温度23～25℃，光照时间12h/d，光强2000～2500Lux条件下培养15～20天;
5）壮苗生根培养：增殖继代培养后，选择高2cm以上完整的小苗转入壮苗培养基中，在温度23～25℃，光照时间12h/d，光强2000～2500Lux条件下培养15～20天，之后向壮苗培养基中加入0.18～0.32％活性炭，在温度27～29℃，光照时间15h/d，光强2500～3000Lux条件下继续培养；所用壮苗培养基为：3g/L花宝一号+2.5～3.5mg/L6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+20～27g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+8～12％椰汁+0.01～0.05mg/LDA-6，此过程中添加活性炭可以有效利于植株生长粗壮并防止褐变；
6）移栽：当试管苗生长至4～5cm高，根系达2条以上且健壮有活力，叶1～3片时，将试管苗放在自然光下炼苗7～12天，打开瓶盖炼苗1～2天；取出培养苗，用清水洗净附着在根部的培养基，然后移栽至包括碎木炭、粗椰壳、腐殖土及浸泡过的水苔的混合基质中，保持相对湿度70～85％，温度20～25℃。
由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
由于本发明提供的一种蝴蝶兰快速育种方法，利用杂交授粉后的成熟果荚进行种子诱导原球茎，并通过对整个育种过程各环节包括环境条件和育种技术的严格控制，使培育出的新品种植株生长健壮、性状优良，从而实现新品种的快速育种和优良品种的挑选，整个育种过程在26～28个月之间，大大缩短了新品种选育的周期。
由于本发明提供的一种蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，利用花梗节间段在组织培养过程中能够保持母株性状的优点，以实生苗性状稳定、开花性状优良、植株生长健康的优良新品种的花梗作为外植体进行组织培养，并在不同阶段采用特别优选的培养基，使成活率和诱导率均可达90%，与现有技术相比，具有出苗快、成苗率高、稳定性好、性状优良的优点。
综上所述，本发明利用胚培养技术进行杂交育种，特别是利用早期胚培养技术，克服了远缘杂交的不亲和性，并缩短了育种的周期，同时针对挑选出的优质新品种，外植体采用了后代可保持母系稳定的遗传性状的花梗进行组织培养繁育，使在常规情况下能获得性状稳定且观赏价值高的组合。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例一 蝴蝶兰快速育种方法
本实施例中，利用杂交育种的方法进行蝴蝶兰新品种的快速育种，具体步骤如下：
1）杂交授粉：将优选出的蝴蝶兰品种为亲本，采用开花时生长健壮的母株进行授粉杂交，控制温度在27±3℃，湿度控制在60～80%；授粉后120～150天果实成熟的种子用于播种；
2）无菌播种：将成熟的果实用质量浓度为70～75％的酒精浸泡25～30秒，用无菌水清洗干净后，用质量浓度为0.10～0.12％的氯化汞溶液灭菌10～15分钟，再用无菌水冲洗干净，在超净工作台上切开果实，将粉末状种子均匀撒播于萌发培养基中，播种30～38天后萌发形成原球茎；所用萌发培养基为：1/2MS+0.2～1mg/L6-BA+0.2～1mg/LNAA+20～30g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+50～450mg/L柠檬酸或/和pvp或/和维生素C+0.15～0.20%活性炭+10～20%椰汁，pH为5.4～5.9，其中，柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮pvp、维生素C及活性炭均可作为抗褐化物减轻培养过程中褐化现象；
3）成苗培养：将原球茎接种到原球茎培养基上，所用原球茎培养基为：3g/L花宝一号+10～15g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+3.5～5.5%香蕉汁+1.0～1.8%马铃薯汁+18～22%椰汁+0.10～0.18%活性炭，pH为5.3～5.5；
35～45天后生长成完整的小植株，移入成苗培养基，继续培养35～45天后成健壮实生苗；所用成苗生长培养基为：3g/L花宝一号+0.1～1mg/L6-BA+0.4～2mg/LNAA +10～15g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+7～9%椰汁+1.0～1.5%马铃薯汁+0.10～0.18%活性炭，pH为5.1～5.6；
其中，活性炭可有利于植株生长粗壮；
4）出瓶栽培：试管苗长至2～3cm高,具有3～4片叶时，打开瓶塞，在室温下炼苗一周，即可移出瓶外种植；出瓶时，洗净根部的培养基，在0.1%的高锰酸钾溶液中浸泡4～6min后风干叶面上的水分，种植于混合基质中，保持通风和保温、保湿，光照5000～8000Lux; 所用出瓶移栽的混合基质包括采用以下重量配比的原料：腐殖土：碎木炭：水苔：火山岩基石为1.5～2.5:0.9～1.1:0.8～1.2:1；
5）苗期种植：30～45天后，每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各25～35ppm，海藻精5500倍液，在光照8000～10000Lux，温度25±1℃，保持通风条件下继续培养90～120天;
之后每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各30～40ppm，海藻精5000倍液，在光照11000～15000Lux，温度26±2℃，相对湿度60～85%条件下培养120～150天；
之后每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各为40～50ppm，海藻精4500倍液，在光照17000～20000Lux，温度28±2℃，相对湿度60～80%条件下种植120～150天，实生苗种植成熟；
其中，海藻精含有植物生长所需的各种必需元素、氨基酸及植物生长物质同，集植物营养物质、生物活性物质、植物抗逆因子于一体，可满足苗期植株生长所需；
6）实生苗的催花：实生苗种植成熟后移入温室内进行催花处理，每5～10天根部施氮、磷、钾平衡肥一次，肥料EC值1.0～1.2，光照10000～12000Lux，白天温度30±2℃，夜间温度25±1℃；1月后，每5～7天施高磷高钾催花肥一次，肥料EC值1.0～1.2，光照12000～15000Lux，白天温度25±1℃，夜间温度19±1℃；75～90天后，每5～7天施氮、磷、钾平衡肥一次，肥料EC值0.8～1.0，光照15000～20000Lux，白天温度26±2℃，夜间温度20±2℃直至开花；
7）挑选出生长健壮、品质好、观赏性状优良的蝴蝶兰新品种。
本实施例采用三组实验，各组分别做实验组和对照组两组对比实验，且各组对比实验均做三次平行实验，所用杂交的父本及母本的编号分别如下表所示：
其中，三组实验组均采用上述所述快速育种方法进行育种，对照组采用传统育种方法，至催花期结束，开花时，育种实验期结束，育种整个阶段所需时间如下表所示：
由上表可以看出，采用本发明提供的一种蝴蝶兰快速育种方法，利用杂交授粉后的成熟果荚进行种子诱导原球茎，并通过对整个育种过程各环节包括环境条件和育种技术的严格控制，使培育出的新品种植株生长健壮、性状优良，从而实现新品种的快速育种和优良品种的挑选，整个育种过程在26～28个月之间，大大缩短了新品种选育的周期。
实施例二 蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法
本实施例中，利用实施例一所述方法培育出新品种蝴蝶兰后，选用对比实验组三的实验组3，即父本编号YT-0231、母本编号YT-0215育成的蝴蝶兰品种进行培养繁殖方法，包括以下步骤：
1）外植体消毒处理：以挑选出的新品种蝴蝶兰的花梗为外植体，用消毒过的刀片去除花梗节位上腋芽的外苞片，并用质量浓度为70～75％的酒精轻擦表面，用无菌水清洗干净后，将花梗切割成每段均包含一个节位的花梗节段，放入质量浓度为0.10～0.12％的氯化汞溶液中浸泡消毒8～10分钟并不断摇动，再将花梗节段取出，用无菌水清洗干净；
2）初培苗的萌发：将消毒后的外植体两端用消毒过的刀片切去，接种到萌发培养基中，温度23～26℃，前10天暗培养，之后在光强2000～2500Lux条件下培养至22～25天，使外植体萌发得到初培苗；所用萌发培养基为：1/2MS+1～3mg/L6-BA+0.5～1.5mg/LTDZ+0.1～0.3mg/LNAA+0.2～0.3mg/L维生素C+0.2～0.3g/L活性炭+20～30g/L蔗糖+6～7g/L琼脂+0.01～0.05mg/LDA-6，pH为5.4～5.8，其中，胺鲜酯DA-6能够促进外植体的快速萌发，提高繁殖速度；
3）初培苗增殖培养：将初培苗接种于增殖培养基中，温度23～26℃，光照12h/d，光强1500～2000Lux条件下培养40～45天，得到丛生芽；所用增殖培养基为：MS+1.0～3.5mg/L6-BA+0.2～1.0mg/LNAA+0.1～0.3mg/LTDZ+12～20%椰汁+0.2～0.3g/L活性炭+20～30g/L蔗糖+6～7g/L琼脂+12～18g/L玉米低聚肽粉，pH为5.4～5.6，其中，植物生长调节剂TDZ可以促进植物芽的再生和繁殖，打破芽的休眠，玉米低聚肽粉能够增强遗传性状的稳定性；
4）丛生芽增殖：将形成的丛生芽在新的增殖培养基上进行继代增殖，在温度23～25℃，光照时间12h/d，光强2000～2500Lux条件下培养15～20天;
5）壮苗生根培养：增殖继代培养后，选择高2cm以上完整的小苗转入壮苗培养基中，在温度23～25℃，光照时间12h/d，光强2000～2500Lux条件下培养15～20天，之后向壮苗培养基中加入0.18～0.32％活性炭，在温度27～29℃，光照时间15h/d，光强2500～3000Lux条件下继续培养；所用壮苗培养基为：3g/L花宝一号+2.5～3.5mg/L6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+20～27g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+8～12％椰汁+0.01～0.05mg/LDA-6；
6）移栽：当试管苗生长至4～5cm高，根系达2条以上且健壮有活力，叶1～3片时，将试管苗放在自然光下炼苗7～12天，打开瓶盖炼苗1～2天；取出培养苗，用清水洗净附着在根部的培养基，然后移栽至包括碎木炭、粗椰壳、腐殖土及浸泡过的水苔的混合基质中，保持相对湿度70～85％，温度20～25℃。
本实施例同时以实验组3的不同组织作为外植体，采用相同的组织培养繁殖方法进行组织培养，即分别以种子、花梗、叶片、茎尖、根尖作为外植体，各组分别做实验组和对照组两组对比实验，其中，实验组所用外植体为花梗，且各组对比实验均做三次平行实验。
本对照实验中，培养基组合1为按照本实施例中所用的成分及配比的各培养基的组合，培养基组合2为培养基组合1中相应培养基中不添加玉米低聚肽粉、胺鲜酯DA-6和植物生长调节剂TDZ。
其中，遗传性状评级中，对母本性状遗传评级1～5级逐步增强，1级为性状分离，5级为保留母本性状；对母株影响评级1～5级逐步增大，1级为不影响母株，5级为对母株影响大。实验对比结果如下表所示：
由实施例数据可以看出，与各对照组相比，以花梗作为外植体，经过本发明的组织培养繁殖方法，培养的蝴蝶兰新苗具有较高的诱导萌发率，新苗较为健壮，炼苗后成活率高。同时，同组对照组之间不同培养基组合增养的新苗的萌发率、新苗成活率等均存在较大差别，本发明所用的培养基组合1培养的新苗各性能指标更加优异，表明了本发明方法和培养基的优越性。
综上所述，本发明利用胚培养技术进行杂交育种，特别是利用早期胚培养技术，克服了远缘杂交的不亲和性，并缩短了育种的周期，同时针对挑选出的优质新品种，外植体采用了后代可保持母系稳定的遗传性状的花梗进行组织培养繁育，使在常规情况下能获得性状稳定且观赏价值高的组合。
上面所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的构思和范围进行限定。因此，在不脱离本发明设置构思的前提下，本领域普通人员对本发明的技术方案做出的各种变型和改进，均应落入到本发明的保护范围，本发明请求保护的技术内容，已全部记载在权利要求书中。
Claims (10)
1.一种蝴蝶兰快速育种方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）杂交授粉：将优选出的蝴蝶兰品种为亲本，采用开花时生长健壮的母株进行授粉杂交，控制温度在27±3℃，湿度控制在60～80%；授粉后120～150天果实成熟的种子用于播种；
2）无菌播种：将成熟的果实用质量浓度为70～75％的酒精浸泡25～30秒，用无菌水清洗干净后，用质量浓度为0.10～0.12％的氯化汞溶液灭菌10～15分钟，再用无菌水冲洗干净，在超净工作台上切开果实，将粉末状种子均匀撒播于萌发培养基中，播种30～38天后萌发形成原球茎；
3）成苗培养：将原球茎接种到原球茎培养基上，35～45天后生长成完整的小植株，移入成苗培养基，继续培养35～45天后成健壮实生苗；
4）出瓶栽培：试管苗长至2～3cm高,具有3～4片叶时，打开瓶塞，在室温下炼苗一周，即可移出瓶外种植；出瓶时，洗净根部的培养基，在0.1%的高锰酸钾溶液中浸泡4～6min后风干叶面上的水分，种植于混合基质中，保持通风和保温、保湿，光照5000～8000Lux;
5）苗期种植：30～45天后，每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各25～35ppm，海藻精5500倍液，在光照8000～10000Lux，温度25±1℃，保持通风条件下继续培养90～120天;
之后每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各30～40ppm，海藻精5000倍液，在光照11000～15000Lux，温度26±2℃，相对湿度60～85%条件下培养120～150天；
之后每5～10天根部施肥一次，氮、磷、钾浓度各为40～50ppm，海藻精4500倍液，在光照17000～20000Lux，温度28±2℃，相对湿度60～80%条件下种植120～150天，实生苗种植成熟；
6）实生苗的催花：实生苗种植成熟后移入温室内进行催花处理，每5～10天根部施氮、磷、钾平衡肥一次，肥料EC值1.0～1.2，光照10000～12000Lux，白天温度30±2℃，夜间温度25±1℃；1月后，每5～7天施高磷高钾催花肥一次，肥料EC值1.0～1.2，光照12000～15000Lux，白天温度25±1℃，夜间温度19±1℃；75～90天后，每5～7天施氮、磷、钾平衡肥一次，肥料EC值0.8～1.0，光照15000～20000Lux，白天温度26±2℃，夜间温度20±2℃直至开花；
7）挑选出生长健壮、品质好、观赏性状优良的蝴蝶兰新品种。
2.根据权利要求1所述的一种蝴蝶兰快速育种方法，其特征在于：步骤2）所用萌发培养基为：1/2MS+0.2～1mg/L6-BA+0.2～1mg/LNAA+20～30g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+50～450mg/L柠檬酸或/和pvp或/和维生素C+0.15～0.20%活性炭+10～20%椰汁，pH为5.4～5.9。
3.根据权利要求1所述的一种蝴蝶兰快速育种方法，其特征在于：步骤3）所用原球茎培养基为：3g/L花宝一号+10～15g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+3.5～5.5%香蕉汁+1.0～1.8%马铃薯汁+18～22%椰汁+0.10～0.18%活性炭，pH为5.3～5.5。
4.根据权利要求1所述的一种蝴蝶兰快速育种方法，其特征在于：步骤3）步骤4）所用成苗生长培养基为：3g/L花宝一号+0.1～1mg/L6-BA+0.4～2mg/LNAA +10～15g/L蔗糖+5～8g/L琼脂+7～9%椰汁+1.0～1.5%马铃薯汁+0.10～0.18%活性炭，pH为5.1～5.6。
5.根据权利要求1所述的一种蝴蝶兰快速育种方法，其特征在于：所用出瓶移栽的混合基质包括采用以下重量配比的原料：腐殖土：碎木炭：水苔：火山岩基石为1.5～2.5:0.9～1.1:0.8～1.2:1。
6.根据权利要求1-5任一项所述的一种蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）外植体消毒处理：以挑选出的新品种蝴蝶兰的花梗为外植体，用消毒过的刀片去除花梗节位上腋芽的外苞片，并用质量浓度为70～75％的酒精轻擦表面，用无菌水清洗干净后，将花梗切割成每段均包含一个节位的花梗节段，放入质量浓度为0.10～0.12％的氯化汞溶液中浸泡消毒8～10分钟并不断摇动，再将花梗节段取出，用无菌水清洗干净；
2）初培苗的萌发：将消毒后的外植体两端用消毒过的刀片切去，接种到萌发培养基中，温度23～26℃，前10天暗培养，之后在光强2000～2500Lux条件下培养至22～25天，使外植体萌发得到初培苗；
3）初培苗增殖培养：将初培苗接种于增殖培养基中，温度23～26℃，光照12h/d，光强1500～2000Lux条件下培养40～45天，得到丛生芽；
4）丛生芽增殖：将形成的丛生芽在新的增殖培养基上进行继代增殖，在温度23～25℃，光照时间12h/d，光强2000～2500Lux条件下培养15～20天;
5）壮苗生根培养：增殖继代培养后，选择高2cm以上完整的小苗转入壮苗培养基中，在温度23～25℃，光照时间12h/d，光强2000～2500Lux条件下培养15～20天，之后向壮苗培养基中加入0.18～0.32％活性炭，在温度27～29℃，光照时间15h/d，光强2500～3000Lux条件下继续培养；
6）移栽：当试管苗生长至4～5cm高，根系达2条以上且健壮有活力，叶1～3片时，将试管苗放在自然光下炼苗7～12天，打开瓶盖炼苗1～2天；取出培养苗，用清水洗净附着在根部的培养基，然后移栽至混合基质中，保持相对湿度70～85％，温度20～25℃。
7.根据权利要求6所述的一种蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，其特征在于：步骤2）所用萌发培养基为：1/2MS+1～3mg/L6-BA+0.5～1.5mg/LTDZ+0.1～0.3mg/LNAA+0.2～0.3mg/L维生素C+0.2～0.3g/L活性炭+20～30g/L蔗糖+6～7g/L琼脂+0.01～0.05mg/LDA-6，pH为5.4～5.8。
8.根据权利要求6所述的一种蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，其特征在于：步骤3）所用增殖培养基为：MS+1.0～3.5mg/L6-BA+0.2～1.0mg/LNAA+0.1～0.3mg/LTDZ+12～20%椰汁+0.2～0.3g/L活性炭+20～30g/L蔗糖+6～7g/L琼脂+12～18g/L玉米低聚肽粉，pH为5.4～5.6。
9.根据权利要求6所述的一种蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，其特征在于：步骤5）所用壮苗培养基为：3g/L花宝一号+2.5～3.5mg/L6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+20～27g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+8～12％椰汁+0.01～0.05mg/LDA-6。
10.根据权利要求6所述的一种蝴蝶兰优质品种组织培养繁殖方法，其特征在于：步骤6）所用混合基质包括碎木炭、粗椰壳、腐殖土及浸泡过的水苔。
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