CN108179148A - 一种检测遗传性心肌病的探针及其应用 - Google Patents
一种检测遗传性心肌病的探针及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108179148A CN108179148A CN201810142930.9A CN201810142930A CN108179148A CN 108179148 A CN108179148 A CN 108179148A CN 201810142930 A CN201810142930 A CN 201810142930A CN 108179148 A CN108179148 A CN 108179148A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- probe
- gene
- mutation
- target gene
- capture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000523 sample Substances 0.000 title claims abstract description 82
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 title claims abstract description 31
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 title abstract description 27
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 51
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 claims abstract description 22
- 238000013461 design Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims description 31
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 19
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 12
- 238000007622 bioinformatic analysis Methods 0.000 claims description 9
- 101000982032 Homo sapiens Myosin-binding protein C, cardiac-type Proteins 0.000 claims description 8
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 claims description 8
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 claims description 8
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 6
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 6
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 claims description 6
- 102100026771 Myosin-binding protein C, cardiac-type Human genes 0.000 claims description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 5
- 102100040084 A-kinase anchor protein 9 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100036818 Ankyrin-2 Human genes 0.000 claims description 4
- 102000014814 CACNA1C Human genes 0.000 claims description 4
- 101000890598 Homo sapiens A-kinase anchor protein 9 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000928344 Homo sapiens Ankyrin-2 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000958741 Homo sapiens Myosin-6 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001030243 Homo sapiens Myosin-7 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000764260 Homo sapiens Troponin T, cardiac muscle Proteins 0.000 claims description 4
- 101000867811 Homo sapiens Voltage-dependent L-type calcium channel subunit alpha-1C Proteins 0.000 claims description 4
- 102100038319 Myosin-6 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100038934 Myosin-7 Human genes 0.000 claims description 4
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 claims description 4
- 102100026893 Troponin T, cardiac muscle Human genes 0.000 claims description 4
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 claims description 4
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 claims description 4
- 102100024642 ATP-binding cassette sub-family C member 9 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100039819 Actin, alpha cardiac muscle 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100026656 Actin, alpha skeletal muscle Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022015 Alpha-1-syntrophin Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032964 Alpha-actinin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 101100404726 Arabidopsis thaliana NHX7 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100025580 Calmodulin-1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025579 Calmodulin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100035602 Calsequestrin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032212 Caveolin-3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037709 Desmocollin-3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100034578 Desmoglein-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024074 Dystrobrevin alpha Human genes 0.000 claims description 3
- 102100021237 G protein-activated inward rectifier potassium channel 4 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022556 Glycerol-3-phosphate dehydrogenase 1-like protein Human genes 0.000 claims description 3
- 101000760581 Homo sapiens ATP-binding cassette sub-family C member 9 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000959247 Homo sapiens Actin, alpha cardiac muscle 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000834207 Homo sapiens Actin, alpha skeletal muscle Proteins 0.000 claims description 3
- 101000617784 Homo sapiens Alpha-1-syntrophin Proteins 0.000 claims description 3
- 101000797275 Homo sapiens Alpha-actinin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984164 Homo sapiens Calmodulin-1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984150 Homo sapiens Calmodulin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000947118 Homo sapiens Calsequestrin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000869042 Homo sapiens Caveolin-3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000968042 Homo sapiens Desmocollin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000880960 Homo sapiens Desmocollin-3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000924314 Homo sapiens Desmoglein-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001053689 Homo sapiens Dystrobrevin alpha Proteins 0.000 claims description 3
- 101000614712 Homo sapiens G protein-activated inward rectifier potassium channel 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000900194 Homo sapiens Glycerol-3-phosphate dehydrogenase 1-like protein Proteins 0.000 claims description 3
- 101000944277 Homo sapiens Inward rectifier potassium channel 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000614614 Homo sapiens Junctophilin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000982003 Homo sapiens Myopalladin Proteins 0.000 claims description 3
- 101000635878 Homo sapiens Myosin light chain 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000584177 Homo sapiens Myosin light chain kinase 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000583179 Homo sapiens Plakophilin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000974726 Homo sapiens Potassium voltage-gated channel subfamily E member 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000974720 Homo sapiens Potassium voltage-gated channel subfamily E member 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000974715 Homo sapiens Potassium voltage-gated channel subfamily E member 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001047090 Homo sapiens Potassium voltage-gated channel subfamily H member 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001003584 Homo sapiens Prelamin-A/C Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 claims description 3
- 101000694017 Homo sapiens Sodium channel protein type 5 subunit alpha Proteins 0.000 claims description 3
- 101000684813 Homo sapiens Sodium channel subunit beta-1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000694021 Homo sapiens Sodium channel subunit beta-4 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000597193 Homo sapiens Telethonin Proteins 0.000 claims description 3
- 101000844504 Homo sapiens Transient receptor potential cation channel subfamily M member 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000798086 Homo sapiens Triadin Proteins 0.000 claims description 3
- 101000801701 Homo sapiens Tropomyosin alpha-1 chain Proteins 0.000 claims description 3
- 101000851334 Homo sapiens Troponin I, cardiac muscle Proteins 0.000 claims description 3
- 101001087416 Homo sapiens Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 11 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000983956 Homo sapiens Voltage-dependent L-type calcium channel subunit beta-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000740755 Homo sapiens Voltage-dependent calcium channel subunit alpha-2/delta-1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100033114 Inward rectifier potassium channel 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100040503 Junctophilin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102000017714 KCNJ8 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010011185 KCNQ1 Potassium Channel Proteins 0.000 claims description 3
- 102100026786 Myopalladin Human genes 0.000 claims description 3
- 102100030971 Myosin light chain 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100030783 Myosin light chain kinase 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100030348 Plakophilin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022755 Potassium voltage-gated channel subfamily E member 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022752 Potassium voltage-gated channel subfamily E member 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022753 Potassium voltage-gated channel subfamily E member 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022807 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037444 Potassium voltage-gated channel subfamily KQT member 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100026531 Prelamin-A/C Human genes 0.000 claims description 3
- 102000004912 RYR2 Human genes 0.000 claims description 3
- 108060007241 RYR2 Proteins 0.000 claims description 3
- 108700022176 SOS1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101100197320 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) RPL35A gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100027103 Serine/threonine-protein kinase B-raf Human genes 0.000 claims description 3
- 102100027198 Sodium channel protein type 5 subunit alpha Human genes 0.000 claims description 3
- 102100023732 Sodium channel subunit beta-1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100027181 Sodium channel subunit beta-4 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032929 Son of sevenless homolog 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 101150100839 Sos1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102000003618 TRPM4 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100035155 Telethonin Human genes 0.000 claims description 3
- 102100026260 Titin Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032268 Triadin Human genes 0.000 claims description 3
- 102100033632 Tropomyosin alpha-1 chain Human genes 0.000 claims description 3
- 102100036859 Troponin I, cardiac muscle Human genes 0.000 claims description 3
- 102100033019 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 11 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025807 Voltage-dependent L-type calcium channel subunit beta-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037059 Voltage-dependent calcium channel subunit alpha-2/delta-1 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010000982 uK-ATP-1 potassium channel Proteins 0.000 claims description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 12
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 206010020871 hypertrophic cardiomyopathy Diseases 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- GUAHPAJOXVYFON-ZETCQYMHSA-N (8S)-8-amino-7-oxononanoic acid zwitterion Chemical compound C[C@H](N)C(=O)CCCCCC(O)=O GUAHPAJOXVYFON-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 208000004731 long QT syndrome Diseases 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 3
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 3
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 3
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 201000006058 Arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy Diseases 0.000 description 2
- 206010059027 Brugada syndrome Diseases 0.000 description 2
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 2
- 208000001826 Marfan syndrome Diseases 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 201000000015 catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia Diseases 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000012165 high-throughput sequencing Methods 0.000 description 2
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 101150033839 4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150101112 7 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150106774 9 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000239290 Araneae Species 0.000 description 1
- 208000002150 Arrhythmogenic Right Ventricular Dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 101150024963 Pu gene Proteins 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 206010047281 Ventricular arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- XQVYLHKEWUACHO-UHFFFAOYSA-N azane;benzene-1,2-diol Chemical compound N.OC1=CC=CC=C1O XQVYLHKEWUACHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000012268 genome sequencing Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 208000014321 polymorphic ventricular tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000012502 risk assessment Methods 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 206010047302 ventricular tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 210000000216 zygoma Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6869—Methods for sequencing
- C12Q1/6874—Methods for sequencing involving nucleic acid arrays, e.g. sequencing by hybridisation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了一种检测遗传性心肌病的探针及其应用,通过筛选整合与遗传性心肌病相关的目的基因的外显子区域并针对目的基因的特定区域设计探针,并建立一套能够准确且可靠的检测基因突变的体系,测序深度高,简洁灵敏,组装成试剂盒后用于制备检测遗传性心肌病的试剂和药物,具有广阔的应用前景和市场价值。
Description
技术领域
本发明涉及基因测序技术领域,尤其涉及一种检测遗传性心肌病的探针及其应用。
背景技术
高通量测序技术(High-throughput sequencing)又称新一代测序技术("Next-generation"sequencing technology),以能一次并行对几十万到几百万DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。然而全基因组测序的成本和分析的复杂程度还是让科研人员和临床医生倍感困难,目标序列捕获技术的出现,缓解了上述问题,目标序列捕获测序是针对已知的特定基因组区域设计探针捕获后进行测序。目标序列捕获的一种重要的方法是根据核酸分子碱基互补杂交原理发展的。即根据目标基因组序列,设计与之完全互补的探针,将这些探针固定在某些支持物上(用于分离),然后打断基因组DNA,加上接头(用于测序)后与探针杂交,洗脱未杂交上的DNA,回收目标DNA片段,可以直接建库进行DNA测序。
遗传性心肌病主要包括肥厚型心肌病(HCM)、致心律失常性右室心肌病(ARVC/D)、左室心肌致密化不全(LVNC)、心脏离子通道疾病和遗传性心肌淀粉样变。心脏离子通道疾病包括长QT间期综合征(LQTS)、Brugada综合征(BrS)、儿茶酚胺敏感的多形性室速(CPVT)和短QT间期综合征(SQTS)。心肌病患者可因恶性室性心律失常猝死,随着年龄增长,心肌病患者容易进展为心力衰竭,因此心肌病的早期诊断和风险筛查尤为关键。
在测序技术飞速发展的同时,精准医学这一概念作为个体化医学的新型表述形式也开始被正式提出并得到重视。精准医疗是以个体化医疗为基础、随着基因组测序技术快速进步以及生物信息与大数据科学的交叉应用而发展起来的新型医学概念与医疗模式。其本质是通过基因组、蛋白质组等组学技术和医学前沿技术,对于大样本人群与特定疾病类型进行生物标记物的分析与鉴定、验证与应用,从而精确寻找到疾病的原因和治疗的靶点,并对一种疾病的不同状态和过程进行精确分类,最终实现对于疾病和特定患者进行个性化精准治疗的目的,提高疾病诊治与预防的效益。精准医学一被提出,即在心血管疾病诊断领域得到应用,通过对遗传性心血管疾病患者进行基因检测,筛查相关的基因突变位点,研究这些位点及其编码的生物分子或蛋白的结构和功能,可以进一步探究发病原因及机制,实现临床上的精确诊断。
CN105506115A公开一种通过靶向高通量半导体测序技术检测遗传性心肌病致病基因突变的DNA文库及其应用。具体来说,根据80个遗传性心肌病致病基因,设计引物池,对样本基因组DNA进行超多重PCR扩增,扩增产物利用高通量半导体测序技术进行测序,寻找致病突变,为临床诊断提供遗传学和分子生物学的理论依据,但该发明的高通量测序深度较低,工作量太大,准确度低,费时费力。
现有技术使用全外显子组测序的方法进行测序时,人类外显子组较大,测序所需数据量较大,时间较长,测序深度低导致灵敏度低,低频位点和特殊区域的漏检率较高,因此部分基因突变无法有效检出,因此,提供一种基于目标基因捕获的准确度高、简洁高效的检测体系及探针,对于遗传性心肌病的早期诊断和治疗具有重要意义。
发明内容
针对现有技术的不足及实际的需求,本发明提供一种检测遗传性心肌病的探针及其应用,通过筛选整合与遗传性心肌病相关的目的基因的外显子区域并针对目的基因的相关区域设计探针,并建立一套能够准确且可靠的检测基因突变的体系,测序深度高,简洁灵敏,组装成试剂盒后用于制备检测遗传性心肌病的试剂和药物,具有广阔的应用前景和市场价值。
为达此目的,本发明采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供一组探针,包括分别特异性识别多个目的基因的多个探针,且每个探针至少满足下列条件之一:
(1)根据目的基因的外显子及外显子内含子交界处进行设计;
(2)所述探针的长度为50-200bp,优选为60-150bp;
(3)去除含有未知碱基序列的探针;
(4)当多个探针之间属于重复序列的比例不小于50%时,去除所述多个探针;
(5)保证每个探针5’端碱基为T;
(6)含有生物素标记。
本发明中,所述重复序列的比例例如可以是50%、52%、53%、55%、58%、60%、62%、65%、68%、70%、72%、75%、78%、80%、82%、85%、88%、90%、92%、95%、98%或100%。
根据本发明,所述目的基因为选自下列的至少一种:MYBPC3、MYH7、MYH6、TNNT2、TNNI3、GAA、JPH2、CAV3、DES、ACTC1、ACTN2、ACTA1、MYL3、TCAP、TPM1、VCL、TTN、MYLK3、MYPN、ABCC9、LMNA、PKP2、DTNA、DSC2、DSG2、JUP、DSP、RYR2、CASQ2、AKAP9、ANK2、CACNA1C、CACNA2D1、CACNB2、CALM1、KCNE1、KCNE2、KCNE3、KCNQ1、KCNJ2、KCNJ5、KCNJ8、KCNH2、SCN4B、SCN5A、SNTA1、TRPM4、CALM2、BRAF、PTPN11、SOS1、GPD1L、TRDN和SCN1B。
为了评估受检者遗传性心肌病的患病风险,辅助医生进行诊断与治疗,本发明中,发明人充分研究了遗传性心肌病的发病机制与基因组的关系,广泛阅读相关文献,总结筛选与遗传性心肌病相关的目的基因,包括MYBPC3、MYH7、MYH6、TNNT2等导致心肌病的基因,AKAP9、ANK2、CACNA1C等导致离子通道病的基因。
本发明中,根据设计原则设计了1301条序列,总大小为1.8Mb,所述探针的捕获区域为第一方面所述基因的全部外显子和/或外显子内含子交接区域。上述探针是一段具有生物素标记的DNA序列,可以和目的基因杂交,再通过链霉亲和素标记的磁珠与含有生物素的探针结合,即可完成目标基因区域的靶向富集。
第二方面,本发明提供一种试剂盒,包含第一方面所述的探针。
第三方面,本发明提供一种如第一方面所述的探针和/或如第二方面所述的试剂盒用于检测基因突变。
第四方面,本发明提供一种检测基因突变的方法,包括如下步骤:
(1)提取人基因组DNA并进行片段化后构建基因组文库;
(2)根据第一方面所述的基因设计捕获探针并对步骤(1)构建的文库进行杂交捕获;
(3)对步骤(2)捕获的目的基因进行高通量测序和生物信息学分析,得到所述基因突变的结果。
优选地,提取基因组DNA可任选能够有效提取基因组DNA的试剂盒,本发明中使用康为世纪公司的DNA提取试剂盒(AllPure DNA/RNA/Protein Kit)。
优选地,构建基因组文库可任选能有效构建基因组文库的试剂盒,本发明使用KAPA公司的建库试剂盒(KAPA Library Prep Kit)。
优选地,杂交捕获可任选能有效实现杂交捕获的试剂盒,本发明中使用罗氏公司的辅助试剂盒(SeqCap EZ Accessory Kit v2)。
优选地,高通量测序可任选能准确完成高通量测序的平台,本发明中选择Illumina公司的NextSeq 500测序平台。
优选地,步骤(1)所述片段化的长度为150-250bp。
其中,步骤(3)所述生物信息学分析包括以下流程:
(1’)数据质控;
(2’)数据过滤:
(3’)比对:
(4’)突变识别。
优选地,步骤(2’)所述数据过滤的步骤包括:
去除adapter数据;去除primer数据;去除低质量数据。
优选地,步骤(3’)所述比对的步骤包括:
与参考基因组进行比对,找出基因突变。
优选地,步骤(4’)所述突变识别的标准包括:
a)如果一个变异位点的检出次数≤20%的测序深度,则放弃该候选位点;
b)候选突变位点上至少有一条可信度序列,否则该候选位点被去除;
c)突变位点人群频率≤1%,否则该候选位点被去除。
本发明提供了一种基于高通量测序检测人类基因组突变的方法,其是提取血液和组织样本中的基因组DNA双链核酸样本,将样本基于高通量测序进行上机测序,得到血液和组织样本的核酸序列,所得到的核酸序列进行自动化处理,与人类基因组标准序列进行自动比对并注释,找出致病突变,最后根据注释文献结合受检者的临床信息及家族遗传信息判断是否患有遗传性心肌病。
其中,遗传性心肌病风险评估包括下述指标:
(1)突变位点识别;
(2)临床信息比对;
(3)突变与疾病共分离分析。
作为优选技术方法,所述检测基因突变的方法,具体包括如下步骤:
(1)提取人基因组DMA并进行片段化为150-250bp后构建基因组文库;
(2)根据第一方面所述的基因设计捕获探针并对步骤(1)构建的文库进行杂交捕获;
(3)对步骤(2)捕获的目的基因进行高通量测序和生物信息学分析;
其中,生物信息学分析包括以下流程:
(1’)数据质控;
(2’)数据过滤:
去除adapter数据;去除primer数据;去除低质量数据;
(3’)比对:
与参考基因组进行比对,找出基因突变;
(4’)突变识别:
a)如果一个变异位点的检出次数≤20%的测序深度,则放弃该候选位点;
b)候选突变位点上至少有一条可信度序列,否则该候选位点被去除;
c)突变位点人群频率≤1%,否则该候选位点被去除。
第五方面,本发明提供一种如第一方面所述的探针和/或如第二方面所述的试剂盒用于制备检测遗传性心肌病的试剂和/或药物的用途。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
(1)本发明提供了与遗传性心肌病相关的目的基因,并选取目的基因的特定区域设计探针,进行高通量测序并分析结果,所得到的检测结果与全外显子检测结果一致性较高;
(2)本发明采用目标序列捕获技术,检测所需数据量仅为全外显子组测序数据量的1%,平均有效测序深度为全外显子组测序的2-5倍,灵敏度远高于全外显子组测序方法。
附图说明
图1是本发明的全外显子捕获探针和1.8MB捕获探针的针对MYBPC3的34号外显子区域的测序深度图。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果,以下结合附图并通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案,但本发明并非局限在实施例范围内。
实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件,或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可通过正规渠道商购获得的常规产品。
实施例1 1.8Mb区域捕获探针的设计与合成
本实施例提供一组探针,根据如下目的基因进行设计,所述目的基因包括:MYBPC3、MYH7、MYH6、TNNT2、TNNI3、GAA、JPH2、CAV3、DES、ACTC1、ACTN2、ACTA1、MYL3、TCAP、TPM1、VCL、TTN、MYLK3、MYPN、ABCC9、LMNA、PKP2、DTNA、DSC2、DSG2、JUP、DSP、RYR2、CASQ2、AKAP9、ANK2、CACNA1C、CACNA2D1、CACNB2、CALM1、KCNE1、KCNE2、KCNE3、KCNQ1、KCNJ2、KCNJ5、KCNJ8、KCNH2、SCN4B、SCN5A、SNTA1、TRPM4、CALM2、BRAF、PTPN11、SOS1、GPD1L、TRDN和SCN1B;
所述探针满足下列条件:
(1)根据目的基因的外显子及外显子内含子交界处进行设计;
(2)所述探针的长度为50-200bp;
(3)去除含有未知碱基序列的探针;
(4)当多个探针之间属于重复序列的比例不小于50%时,去除所述多个探针;
(5)保证每个探针5’端碱基为T;
(6)含有生物素标记;
由于设计得到的探针组,共包含探针1301条,例如所在11号染色体(Chr11)的区域1范围(47352956~47353267)内MYBPC3基因34号外显子起始位置为47352956,终止位置为47353267,为了覆盖到外显子内含子交接区域,在34号外显子的两侧再延伸10bp设计探针,则探针区域为47352946~47353277。所有探针首尾相接覆盖人类基因组编码区外显子1.8Mb目标区域,所有探针均具有生物素标记;所述捕获探针集合具有唯一性;所述目标区域举例如表1所示,捕获基因列表及外显子区域见表2,所述捕获探针进行部分列举,具体如下;
表1目标区域举例
表2
列举的部分序列为根据11号染色体(Chr11)的区域1范围(47352956~47353267)内MYBPC3基因34号外显子进行设计,为了覆盖到外显子内含子交接区域,在34号外显子的两侧再延伸10bp设计探针,则探针区域为47352946~47353277,具体涉及探针如下:
探针1(SEQ ID NO.1):
bio-TATTGAGAAGAGTGAGTTCTCTGTGACTGCACTTATCTTTTATTGCCCAATAAACATTGGGAAGACATAGCAGGCCAGAAAGGCCTGTCCCCAGACATTGTTTCTTGAGGCCACCCTCCTTTTACCCCAAAGATCCAGGGGCTTCCTTCAGGAGCCCTGTGGACCAGTCTGTGCAACACCCAC;
探针2(SEQ ID NO.2):
bio-TCAGGACTGCCCGACAACTGCCCTGCTGATCCCCCATCGCAGCACAGGAGACACACTTGTCACACATACATCCAACAGTAGGGAGGGGTTTCCCCAACTTCCCTCCAGGCTCCTGGCACGGGGCTGGCATCCGGTTGTACCTGCAACACA.
实施例2检测基因突变
1、DNA提取及片段化:从20份携带已知剪切位点突变(外显子与内含子交界区域突变)的血液样本中使用核酸提取剂试剂盒(康为世纪生物科技有限公司)提取人基因组DNA,在Covaris S2仪器(购自美国Covaris公司)上进行片段化,得到150-250bp的DNA双链核酸片段的混合物;
2、构建基因组文库
使用KAPA公司的建库试剂盒(KAPA Library Prep Kit),具体操作方法参照说明书;
3、杂交捕获
使用实施例1合成的目标序列捕获探针混合物捕获单链的DNA产物,使用罗氏公司的辅助试剂盒(SeqCap EZ Accessory Kit v2);
4、高通量测序
选择Illumina公司的NextSeq 500测序平台,测序读长150bp;
5、生物信息学分析
(1)数据质控;
(2)数据过滤:
去除adapter数据;去除primer数据;去除低质量数据;
(3)比对:
与参考基因组进行比对,找出基因突变;
(4)突变识别:
a)如果一个变异位点的检出次数≤20%的测序深度,则放弃该候选位点;
b)候选突变位点上至少有一条可信度序列,否则该候选位点被去除;
c)突变位点人群频率≤1%,否则该候选位点被去除。
对比例1全外显子捕获探针检测
与实施例2相比,除捕获探针采用全外显子捕获探针外,其他条件与实施例2相同;
实施例2和对比例1的检出结果如下表3;
表3突变检出结果对比
从表3中可以看出,在相同的实验条件下,捕获探针检测的灵敏性高于全外显子检测。
以人类基因组DNA中的MYBPC3基因为例,全外显子捕获探针和目标序列捕获探针的测序深度图如图1所示;
由图1可知,相同数据量的情况下全外显子测序的测序深度较低,因此突变检出灵敏度较低,而靶向捕获探针测序可以很好的提高测序深度,提高检出效率。
实施例3遗传性心肌病风险的判定
取A、B、C、D、E五位受检者血液样本按照实施例2方法进行检测,通过生物信息分析后得到如表4所示:
表4
通过下述三个步骤判定受检者遗传性心肌病风险:
1、进行变异位点识别:2、5、8三个突变由于人群频率高于1%被排除,3号突变由于检出次数不足该位点测序深度的20%被排除,其余突变被认为是可能的阳性位点。
2、临床信息比对:
①对于受检者A,有文献报道受检者携带的1号基因突变会导致肥厚型心肌病(HCM),结合受检者存在劳动性呼吸困难、心肌增厚的临床表型,判定该突变与受检者临床表型相符;
②对于受检者B,有文献报道受检者携带的4号基因突变会导致长QT综合征3型(LQTS3),结合受检者存在QT间期延长的临床表型,判定该突变与受检者临床表型相符;
③对于受检者C,其所携带的6号突变目前没有报道,但是突变可能导致的疾病与受检者QT间期延长的临床表型相符;
④对于受检者D,有文献报道受检者携带的7号基因突变会导致儿茶酚氨源性室性心动过速(CPVT),结合受检者的临床表型,判定该突变与受检者临床表型相符;
⑤对于受检者E,有文献报道受检者携带的9号基因突变会导致马凡综合征2型(MFS2),结合受检者存在主动脉扩张、蜘蛛趾、颧骨发育不全等临床表型,判定该突变与受检者临床表型相符。
3、突变与疾病共分离分析:以受检者A家系研究为例,采集受检者A直系亲属(父亲、母亲、爷爷、奶奶、姥姥、老爷)的血液进行1号基因突变定点分析,结果显示受检者母亲和姥姥携带此突变,父亲、奶奶、爷爷未携带,同时临床信息显示受检者的母亲和姥姥均为肥厚型心肌病患者,表明受检者携带的1号基因突变是一个致病突变。因此,判定受检者携带一个导致肥厚型心肌病的基因突变,患肥厚型心肌病的风险极高。
综上所述,本发明提供一种检测遗传性心肌病的基因及其探针,通过筛选整合与遗传性心肌病相关的目的基因的外显子区域并针对目的基因的相关区域设计探针,并建立一套能够准确且可靠的检测基因突变的体系,测序深度高,简洁灵敏,组装成试剂盒后用于制备检测遗传性心肌病的试剂和药物,具有广阔的应用前景和市场价值。
申请人声明,本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法,但本发明并不局限于上述详细方法,即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了,对本发明的任何改进,对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等,均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
序列表
<110> 北京乐普基因科技股份有限公司
<120> 一种检测遗传性心肌病的探针及其应用
<130> 2018
<141> 2018-02-11
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 183
<212> DNA
<213> 人工合成序列()
<400> 1
tattgagaag agtgagttct ctgtgactgc acttatcttt tattgcccaa taaacattgg 60
gaagacatag caggccagaa aggcctgtcc ccagacattg tttcttgagg ccaccctcct 120
tttaccccaa agatccaggg gcttccttca ggagccctgt ggaccagtct gtgcaacacc 180
cac 183
<210> 2
<211> 150
<212> DNA
<213> 人工合成序列()
<400> 2
tcaggactgc ccgacaactg ccctgctgat cccccatcgc agcacaggag acacacttgt 60
cacacataca tccaacagta gggaggggtt tccccaactt ccctccaggc tcctggcacg 120
gggctggcat ccggttgtac ctgcaacaca 150
Claims (10)
1.一组探针,其特征在于,包括分别特异性识别多个目的基因的多个探针,且每个探针至少满足下列条件之一:
(1)根据目的基因的外显子及外显子内含子交界处进行设计;
(2)所述探针的长度为50-200bp,优选为60-150bp;
(3)去除含有未知碱基序列的探针;
(4)当多个探针之间属于重复序列的比例不小于50%时,去除所述多个探针;
(5)保证每个探针5’端碱基为T;
(6)含有生物素标记。
2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述目的基因为选自下列的至少一种:MYBPC3、MYH7、MYH6、TNNT2、TNNI3、GAA、JPH2、CAV3、DES、ACTC1、ACTN2、ACTA1、MYL3、TCAP、TPM1、VCL、TTN、MYLK3、MYPN、ABCC9、LMNA、PKP2、DTNA、DSC2、DSG2、JUP、DSP、RYR2、CASQ2、AKAP9、ANK2、CACNA1C、CACNA2D1、CACNB2、CALM1、KCNE1、KCNE2、KCNE3、KCNQ1、KCNJ2、KCNJ5、KCNJ8、KCNH2、SCN4B、SCN5A、SNTA1、TRPM4、CALM2、BRAF、PTPN11、SOS1、GPD1L、TRDN或SCN1B。
3.一种试剂盒,其特征在于,包含权利要求1或2所述的探针。
4.一种如权利要求1或2所述的探针和/或如权利要求4所述的试剂盒用于检测基因突变。
5.一种检测基因突变的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提取人基因组DNA并进行片段化后构建基因组文库;
(2)根据权利要求1所述的基因设计捕获探针并对步骤(1)构建的文库进行杂交捕获;
(3)对步骤(2)捕获的目的基因进行高通量测序和生物信息学分析,得到所述基因突变的结果。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述片段化的长度为150-250bp。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述生物信息学分析的突变识别标准包括:
a)如果一个变异位点的检出次数≤20%的测序深度,则放弃该候选位点;
b)候选突变位点上至少有一条可信度序列,否则该候选位点被去除;
c)突变位点人群频率≤1%,否则该候选位点被去除。
8.根据权利要求5-7中任一项所述的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
(1)提取人基因组DNA并进行片段化为150-250bp后构建基因组文库;
(2)根据权利要求1所述的基因设计捕获探针并对步骤(1)构建的文库进行杂交捕获;
(3)对步骤(2)捕获的目的基因进行高通量测序和生物信息学分析。
9.根据权利要求5-8中任一项所述的方法,其特征在于,所述生物信息学分析具体包括:
(1’)数据质控;(2’)数据过滤:(3’)比对:(4’)突变识别;
优选地,步骤(2’)所述数据过滤包括:
去除adapter数据去除primer数据;去除低质量数据;
优选地,步骤(3’)所述比对包括:
与参考基因组进行比对,找出基因突变;
优选地,步骤(4’)所述突变识别的标准包括:
a)如果一个变异位点的检出次数≤20%的测序深度,则放弃该候选位点;
b)候选突变位点上至少有一条可信度序列,否则该候选位点被去除;
c)突变位点人群频率≤1%,否则该候选位点被去除。
10.如权利要求1或2所述的探针和/或如权利要求4所述的试剂盒用于制备检测遗传性心肌病的试剂和/或药物的用途。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810142930.9A CN108179148B (zh) | 2018-02-11 | 2018-02-11 | 一种检测遗传性心肌病的探针及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810142930.9A CN108179148B (zh) | 2018-02-11 | 2018-02-11 | 一种检测遗传性心肌病的探针及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108179148A true CN108179148A (zh) | 2018-06-19 |
CN108179148B CN108179148B (zh) | 2024-02-13 |
Family
ID=62552834
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810142930.9A Active CN108179148B (zh) | 2018-02-11 | 2018-02-11 | 一种检测遗传性心肌病的探针及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108179148B (zh) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109097461A (zh) * | 2018-09-06 | 2018-12-28 | 北京中关村生命科学园生物医药科技孵化有限公司 | 一种心肌病相关基因检测试剂及其应用 |
CN109486937A (zh) * | 2018-12-07 | 2019-03-19 | 北京安智因生物技术有限公司 | 一种遗传性肥厚型心肌病的基因检测文库的构建方法及其试剂盒 |
CN109576800A (zh) * | 2018-12-07 | 2019-04-05 | 北京安智因生物技术有限公司 | 一种遗传性扩张型心肌病的基因检测文库的构建方法及其试剂盒 |
CN109652532A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-04-19 | 中国人民解放军总医院 | 一种检测心血管***用药的标志物 |
CN109652531A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-04-19 | 中国人民解放军总医院 | 一种用于检测遗传性心肌病/心律失常的致病/易感基因的探针组 |
CN110195104A (zh) * | 2019-06-27 | 2019-09-03 | 常州市第二人民医院 | 一种预测缺血性心肌病的分子标志物 |
CN110863045A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-03-06 | 深圳瑞奥康晨生物科技有限公司 | 用于筛查遗传性心脏病的基因组合及其用途 |
CN113652422A (zh) * | 2021-08-08 | 2021-11-16 | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 | Jup基因突变体及其应用 |
CN113801852A (zh) * | 2021-10-18 | 2021-12-17 | 齐齐哈尔医学院 | 一种gpd1l缺失人胚胎干细胞细胞株及其构建方法和应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102965428A (zh) * | 2011-09-30 | 2013-03-13 | 康旭基因技术(北京)有限公司 | 一种检验鉴别遗传性心肌肥厚相关基因突变的试剂盒 |
WO2013102442A1 (zh) * | 2012-01-06 | 2013-07-11 | 深圳华大基因科技有限公司 | 药物相关基因型别数据库、基因分型及药物反应检测方法 |
CN105506115A (zh) * | 2016-01-05 | 2016-04-20 | 华中科技大学同济医学院附属同济医院 | 一种检测诊断遗传性心肌病致病基因的dna文库及其应用 |
CN106283199A (zh) * | 2016-08-27 | 2017-01-04 | 大连晶泰生物技术有限公司 | 检测肿瘤相关的50个热点突变基因的捕获文库和试剂盒 |
CN106521014A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-03-22 | 首都医科大学附属北京天坛医院 | 一种遗传性心脑血管疾病诊断试剂盒 |
-
2018
- 2018-02-11 CN CN201810142930.9A patent/CN108179148B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102965428A (zh) * | 2011-09-30 | 2013-03-13 | 康旭基因技术(北京)有限公司 | 一种检验鉴别遗传性心肌肥厚相关基因突变的试剂盒 |
WO2013102442A1 (zh) * | 2012-01-06 | 2013-07-11 | 深圳华大基因科技有限公司 | 药物相关基因型别数据库、基因分型及药物反应检测方法 |
CN105506115A (zh) * | 2016-01-05 | 2016-04-20 | 华中科技大学同济医学院附属同济医院 | 一种检测诊断遗传性心肌病致病基因的dna文库及其应用 |
CN106283199A (zh) * | 2016-08-27 | 2017-01-04 | 大连晶泰生物技术有限公司 | 检测肿瘤相关的50个热点突变基因的捕获文库和试剂盒 |
CN106521014A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-03-22 | 首都医科大学附属北京天坛医院 | 一种遗传性心脑血管疾病诊断试剂盒 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
吴桂鑫;张小慢;阮洁云;张禅那;惠汝太;邹玉宝;王继征;宋雷;: "MYH7基因Ile736Thr突变所致肥厚型心肌病的表型分析研究", 中国分子心脏病学杂志, no. 04, pages 39 - 41 * |
杨坤;董雪琪;肖嫣;张莹;孟旭;范鹏;刘亚欣;卢超霞;张学;周宪梁;: "家族性肥厚型心肌病致病突变检测及基因型表型关联分析", 中国心血管杂志, no. 06, pages 32 - 36 * |
王东;娄可佳;吴桂鑫;张策;阮洁云;张小慢;邹玉宝;惠汝太;宋雷;王继征;: "MYBPC3基因型-肥厚型心肌病表型关联分析", 中国分子心脏病学杂志, no. 03, pages 52 - 55 * |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109097461A (zh) * | 2018-09-06 | 2018-12-28 | 北京中关村生命科学园生物医药科技孵化有限公司 | 一种心肌病相关基因检测试剂及其应用 |
CN109097461B (zh) * | 2018-09-06 | 2021-07-30 | 北京中关村生命科学园生物医药科技孵化有限公司 | 一种心肌病相关基因检测试剂及其应用 |
CN109486937A (zh) * | 2018-12-07 | 2019-03-19 | 北京安智因生物技术有限公司 | 一种遗传性肥厚型心肌病的基因检测文库的构建方法及其试剂盒 |
CN109576800A (zh) * | 2018-12-07 | 2019-04-05 | 北京安智因生物技术有限公司 | 一种遗传性扩张型心肌病的基因检测文库的构建方法及其试剂盒 |
CN109652532A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-04-19 | 中国人民解放军总医院 | 一种检测心血管***用药的标志物 |
CN109652531A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-04-19 | 中国人民解放军总医院 | 一种用于检测遗传性心肌病/心律失常的致病/易感基因的探针组 |
CN110195104A (zh) * | 2019-06-27 | 2019-09-03 | 常州市第二人民医院 | 一种预测缺血性心肌病的分子标志物 |
CN110863045A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-03-06 | 深圳瑞奥康晨生物科技有限公司 | 用于筛查遗传性心脏病的基因组合及其用途 |
CN113652422A (zh) * | 2021-08-08 | 2021-11-16 | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 | Jup基因突变体及其应用 |
CN113801852A (zh) * | 2021-10-18 | 2021-12-17 | 齐齐哈尔医学院 | 一种gpd1l缺失人胚胎干细胞细胞株及其构建方法和应用 |
CN113801852B (zh) * | 2021-10-18 | 2023-08-18 | 齐齐哈尔医学院 | 一种gpd1l缺失人胚胎干细胞细胞株及其构建方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN108179148B (zh) | 2024-02-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108179148A (zh) | 一种检测遗传性心肌病的探针及其应用 | |
JP6867045B2 (ja) | 血漿dnaの単分子配列決定 | |
CN105189748B (zh) | 测序免疫组库的方法 | |
CN104221022B (zh) | 一种拷贝数变异检测方法和*** | |
CN105695606B (zh) | 用于非治疗目的的肥厚型心肌病相关致病基因突变的筛查方法 | |
JP2019531700A5 (zh) | ||
CN105358709B (zh) | 用于检测基因组拷贝数变化的***和方法 | |
JP7067896B2 (ja) | 品質評価方法、品質評価装置、プログラム、および記録媒体 | |
EP2718862A2 (en) | Method for assembly of nucleic acid sequence data | |
CN103392182A (zh) | 发现遗传疾病中致病突变的组合物和方法 | |
CN107066835A (zh) | 一种利用公共数据资源发现并整合直肠癌相关基因及其功能分析的方法及***和应用 | |
CN105506115A (zh) | 一种检测诊断遗传性心肌病致病基因的dna文库及其应用 | |
CN108949979A (zh) | 一种通过血液样本判断肺结节良恶性的方法 | |
CN109652513A (zh) | 基于二代测序技术精确检测液体活检个体突变的方法和试剂盒 | |
CN110106063B (zh) | 基于二代测序的用于神经胶质瘤1p/19q联合缺失检测的*** | |
JP6891150B2 (ja) | 解析方法、情報処理装置、遺伝子解析システム、プログラム、記録媒体 | |
CN105441454B (zh) | Scap基因突变体及其应用 | |
Goswami et al. | RNA-Seq for revealing the function of the transcriptome | |
CN105838720B (zh) | Ptprq基因突变体及其应用 | |
WO2023021978A1 (ja) | 自己免疫疾患を検査する方法 | |
CN111944905B (zh) | 人类基因组合及其在制备评估***新辅助化疗药物敏感性试剂盒中的应用 | |
CN105821062B (zh) | Amsh基因突变体及其应用 | |
CN104561015A (zh) | Myl4基因突变体及其应用 | |
CN108342473A (zh) | 一种用于检测血脂代谢相关基因abcg1甲基化的试剂盒 | |
CN113257354B (zh) | 基于高通量实验数据挖掘进行关键rna功能挖掘的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
TA01 | Transfer of patent application right | ||
TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20190808 Address after: 100176 Beijing Daxing District Beijing Economic and Technological Development Zone Applicant after: BEIJING IPE CENTER FOR CLINICAL LABORATORY Co.,Ltd. Address before: Room B508, No. 1 Courtyard, Disheng East Road, Daxing District, Beijing, 100176 Applicant before: BEIJING LEPU GENE TECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |