CN108157933A - 一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法 - Google Patents

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CN108157933A CN201810083628.0A CN201810083628A CN108157933A CN 108157933 A CN108157933 A CN 108157933A CN 201810083628 A CN201810083628 A CN 201810083628A CN 108157933 A CN108157933 A CN 108157933A
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Abstract

本发明属于柑桔副产物的深加工领域，具体是涉及了一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，主要包括接种活化后的乳酸菌和青霉素菌进行混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣，发酵温度25‑35℃下静置发酵7‑10天，发酵产物烘干过筛后得到所述的高含量可溶性膳食纤维产品。本发明提高了柑橘皮渣中的不溶性膳食纤维向可溶性膳食纤维的转化率，解决了现有固态发酵法存在的底物无法充分利用，柑橘皮和渣大量浪费的问题，变废为宝，进一步提升柑橘皮和渣的应用价值。

Description

一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法
技术领域
本发明属于柑桔副产物的深加工领域，具体是涉及了一种柑橘皮渣中高附加值功能性成分可溶性膳食纤维的制备方法。
背景技术
柑橘属芸香科下属植物，是世界上产量最大的水果之一，我国是世界第三大柑橘生产国。目前，我国柑橘年产量约3500万吨，柑橘加工副产物(皮和渣)约占柑橘鲜重的40-50％，其中含有丰富的果胶、纤维素及黄酮类化合物。部分柑橘皮通常用于提取果胶和黄酮，而柑橘渣并没有有效的处理方式。此外，提取果胶和黄酮后的柑橘皮大部分作为废弃物直接丢弃，造成严重的资源浪费和环境污染。
膳食纤维(dietary fiber，DF)是一类来源于植物的非淀粉多糖，具有重要生理功能，分为可溶性膳食纤维和不可溶性膳食纤维两类。可溶性纤维(soluble dietary fiber，SDF)可溶于水、也可吸水膨胀，并能被肠道微生物酵解，主要有果胶、植物胶、黏胶等。不溶性纤维(insoluble dietary fiber，IDF)不溶于水、也不能被肠道微生物酵解，主要有纤维素、半纤维素、木质素等。这类物质能刺激肠道蠕动、改善肠道菌群，预防便秘和直肠癌等；可辅助调节血糖血脂水平、预防动脉粥样硬化和冠心病等心血管疾病的发生；易产生饱腹感，可作为减肥食品。尤其是可溶性膳食纤维的生理功效更加显著。目前，市售的谷物膳食纤维中SDF含量较低，不仅生理活性较低，并且口感粗糙，达不到平衡膳食的要求。因此，利用柑橘皮渣制备SDF具有良好的前景。
常规制备DF的方法有化学法、物理法、生物法等。化学法、物理法制备过程中会产生大量废水，对产品产量及产物性能无明显的改善作用，利用微生物发酵法制备DF，因条件温和、绿色环保，逐渐被业界人士关注。目前已有研究采用固态发酵法以柑橘皮渣或其它水果皮渣为原料制备SDF方面的研究[1-9]，但因发酵所用菌株的原料专一性不强、功能单一或发酵条件固定不变，导致微生物产生的功效成分无法有效地作用于原料的目标作用位点，亦或发酵条件并不是该酶的最适作用条件，最终使得柑橘皮渣中的DF无法完全释放，制约了可溶性膳食纤维含量的提高。因此，有必要提供更合理的固态发酵法来提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的提取率。
发明内容
针对上述现有技术的不足，本发明目的是提供一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，以期提高可溶性膳食纤维含量，解决现有固态发酵法存在的底物无法充分利用，柑橘皮和渣大量浪费的问题，变废为宝，进一步提升柑橘皮和渣的应用价值。
为实现本发明的发明目的，发明人提供如下技术方案：
一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，包括：
(1)发酵菌种种子培养，按如下方法操作：
乳酸菌经MRS固体培养基活化后，接种于液体培养基中于温度为25-35℃下静置培养1-3天，得到乳酸菌种子培养液；青霉菌孢子经PDA固体培养基活化后(培养皿中长满孢子)，接种于柑橘皮渣中于温度为25-35℃下静置培养2-4天，得到青霉菌种子，
(2)混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣，按如下方法操作：
柑橘皮渣混合均匀后，复配碳源、氮源和无机盐，灭菌后按照先后顺序分步接种乳酸菌和青霉菌，分别按照接种量5％-20％和温度25-35℃下静置发酵，即接种乳酸菌后于25-35℃培养2-4天，然后接种青霉菌后于25-35℃发酵5-7天，静置发酵结束后，将发酵产物中加入适量水，于温度35-55℃下静置12h以上，然后将发酵产物烘干粉碎后测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的含量。
本发明的内容分为两部分，一部分为发酵菌种种子培养，一部分为混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣。发明人研究发现，通过微生物发酵法，利用混菌分步固态发酵联合分段控温方式柑橘皮渣膳食纤维，可进一步提高柑橘皮渣发酵产物中可溶性膳食纤维的含量，高效利用柑橘皮渣生产可溶性膳食纤维，有效提高柑橘皮渣的利用率。
作为优选方案，根据本发明所述的一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，其中所述的步骤(1)中乳酸菌接种按照106个/mL的菌悬液3-10mL接种于50mL液体培养基中。
作为优选方案，根据本发明所述的一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，其中所述的步骤(1)中青霉菌接种按照将106个/mL的孢子悬浮液6-20mL于90g柑橘皮渣中静置培养。
作为优选方案，根据本发明所述的一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，其中所述的步骤(1)和步骤(2)中柑橘皮渣按质量比柑橘皮：柑橘渣＝2:1混匀。
作为优选方案，本发明中所述的柑橘皮渣经过预处理后使用，具体操作为：柑橘剥皮分瓣后榨汁，将残留的皮渣烘干至手抓成团、落地即散的程度(含水量约40-50％)，冷冻保存，备用。
作为优选方案，根据本发明所述的一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，其中所述的步骤(2)中所述的发酵产物中加入适量的水是指以300g柑橘皮渣计算，发酵结束后加入100-300mL水。
作为优选方案，根据本发明所述的一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，其中所述的步骤(2)中静置放置12h以上是指12-48h。
作为优选方案，根据本发明所述的一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，其中所述的步骤(2)中烘干粉碎是指将发酵产物于80-105℃下烘干至含水量3％以下，粉碎过50目筛。
柑橘，是橘、柑、橙、金柑，柚、枳等的总称。本发明实施例以常见的脐橙为例说明本发明，其他品种的柑橘做一样操作。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)本发明独特的混菌分步发酵联合分段控温发酵工艺，分别利用了两种菌的优势，即乳酸菌产生的乳酸破坏柑橘皮渣的致密结构，使青霉菌产生的纤维素酶能够接触到更多的底物纤维素大分子，同时采用分步控温，将温度调至纤维素酶的最适温度(45℃)，增加柑橘皮渣中纤维素的水解率。
(2)本发明通过混菌分步发酵工艺，使得青霉菌产生的纤维素酶更易于接触到柑橘皮渣纤维素中的作用位点，从而提高了柑橘皮渣中的不溶性膳食纤维向可溶性膳食纤维的转化率。
(3)本发明通过分段控温发酵，使得微生物产生的纤维素酶能够在其最适条件下水解纤维素，从而提高柑橘皮渣中不溶性膳食纤维的水解率。
(4)本发明独特的发酵工艺，与现有通过生物法提取柑橘皮渣可溶性膳食纤维相比，具有绿色环保、工艺操作简单、成本低廉、可溶性膳食纤维提取效率高等优点。
具体实施方式
下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。
在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。若无特别指明，实施例采用的方法为本领域通用技术。
主要原材料说明：
乳酸菌(植物乳杆菌Lactobacillus plantarum)和青霉菌(Penicillium sp.)种按照华鹤良[10]和冯健玲等[11]的方法从腐败的柑橘中筛选获得。
赣南脐橙购买于杭州水果市场，剥皮分瓣后榨汁，将残留的皮渣烘干至手抓成团、落地即散的程度(含水量约40-50％)，冷冻保存，备用。
实施例中可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的含量按下述方法检测：
称取烘干粉碎后的发酵产物50g，置于2000mL烧杯中，各加入1250mL pH6.8的PBS缓冲液，超声30min样品完全分散。分别加入5mL木瓜蛋白酶溶液(25kU/mL)，用铝箔盖住，于60℃超声30min，过滤。滤渣用蒸馏水洗涤3次，每次500mL，收集并合并洗涤液，转移至烧杯中，备测可溶性膳食纤维，残渣分别用750mL 78％的乙醇、95％的乙醇和丙酮各冲洗2次，50℃烘干并称量，得到不溶性膳食纤维含量。滤液与不溶性膳食纤维洗涤液合并，倒入烧杯中，加入4倍量体积的95％乙醇(预热至60℃)，用铝箔盖住烧杯，室温沉淀1h，过滤，残渣分别用750mL，78％的乙醇、95％的乙醇和丙酮各冲洗2次，50℃烘干并称量，得到可溶性膳食纤维含量。
实施例1
一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，包括：
(1)发酵菌种种子培养
乳酸菌经MRS固体培养基于28℃静置培养36h活化后，按照106个/mL的菌悬液10mL接种于50mL液体培养基中(包含蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母粉0.5％，K2HPO4 0.2％，柠檬酸二铵0.2％，乙酸钠0.5％，葡萄糖2％，吐温800.1％，MgSO4·7H2O 0.058％，MnSO4·4H2O0.025％，pH自然，115℃灭菌20min)，28℃静置培养48h。
青霉菌孢子接种于PDA固体培养基上，于28℃静置培养3天后，将106个/mL的孢子悬浮液20mL接种于90g柑橘皮渣固体种子培养基中(脐橙皮渣按2：1混合均匀，自然pH，110℃灭菌20min)，28℃培养3天。
(2)混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣
脐橙皮渣300g(皮渣按2:1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO4 0.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种乳酸菌种子培养液(接种量10％)搅拌均匀，28℃发酵3天，然后接种青霉菌种子(接种量10％)，于28℃发酵5天。再将发酵产物加入200mL水，45℃静置24h。将发酵产物于80℃烘干至恒重(含水量3％以下)，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量，分别为42.0％和48.8％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的比例为46.2％。
本发明将脐橙皮渣采用混菌分步发酵联合分段控温工艺发酵后可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比已报道的通过单菌恒温(绿色木霉、24℃)发酵条件下分别提高32.7％和14.9％[7]。(参考另一篇参考文献的话提高分别是90.0％和57.7％[刘云.微生物发酵法提取柑橘皮渣膳食纤维的工艺及起理化特性的研究[D].四川农业大学.2008.])
比较例1
称取柑橘皮渣300g(皮渣按2：1)，于80℃烘干至恒重，粉碎后过50目筛按照实施例1中方法测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量，分别为10.3％和50.2％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的17.0％。
实施例1与比较例1相比可以看出，采用混菌分步发酵联合分段控温工艺条件下脐橙皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比未发酵的脐橙皮渣提高3.08倍和1.72倍。
比较例2
脐橙皮渣300g(皮:渣＝2:1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO4 0.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种青霉菌搅拌均匀，28℃发酵5-7天，将发酵产物于80℃烘干至恒重(含水量3％以下)，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的含量，分别为31.4％和57.2％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的比例为35.5％。
实施例1与比较例2相比可以看出，28℃条件下，混菌分步发酵联合分段控温条件下脐橙皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比青霉菌菌单菌发酵条件下分别提高33.8％和30.1％。
比较例3
脐橙皮渣300g(皮:渣＝2:1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO4 0.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种乳酸菌搅拌均匀，28℃发酵3-4天，将发酵产物于80℃烘干至恒重，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的含量，分别为25.8％和55.9％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的31.5％。
实施例1与比较例3相比可以看出，28℃条件下，混菌分步发酵联合分段控温条件下脐橙皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比乳酸菌单菌发酵条件下分别提高62.8％和46.7％。
比较例4
脐橙皮渣300g(2：1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO40.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种培养好的青霉菌种子，搅拌均匀，28℃发酵5-7天后，加入200mL水，45℃放置24h后，将发酵产物于80℃烘干至恒重，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的含量，分别为35.1％和54.2％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的比例为39.3％。
实施例1与比较例4相比可以看出，28℃发酵条件下，混菌分步发酵联合分段控温条件下脐橙皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比青霉菌单菌发酵联合分段控温条件下分别提高19.7％和17.6％。
比较例5
脐橙皮渣300g(皮:渣＝2:1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO4 0.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种乳酸菌搅拌均匀，28℃发酵3-4天后，接种青霉菌种子，搅拌均匀，28℃发酵5-7天，将发酵产物于80℃烘干至恒重，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的含量，分别为34.6％和54.9％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的比例为38.7％。
实施例1与比较例5相比可以看出，28℃发酵条件下，混菌分步发酵联合分段控温条件下脐橙皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比仅采用混菌发酵条件下分别提高21.4％和19.4％。
实施例2
一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，包括：
(1)发酵菌种种子培养
乳酸菌经MRS固体培养基于35℃静置培养24h活化后，按照106个/mL的菌悬液5mL接种于50mL液体培养基中(包含葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母粉0.5％，K2HPO40.2％，柠檬酸二铵0.2％，MgSO4·7H2O 0.058％，MnSO4·4H2O 0.025％，pH自然，115℃灭菌20min)，35℃静置培养36h。
青霉菌孢子接种余PDA固体培养基上，于35℃静置培养3天后，将106个/mL的孢子悬浮液10mL接种于90g柑橘皮渣固体种子培养基中(脐橙皮渣按2：1混合均匀，自然pH，110℃灭菌20min)，35℃培养3天。
(2)混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣
脐橙皮渣300g(皮渣按2:1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO4 0.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种乳酸菌种子(接种量10％)搅拌均匀，35℃发酵3天，然后接种青霉菌种子(接种量10％)，35℃发酵7天。再将发酵产物加入300mL水，55℃静置12h。将发酵产物于80℃烘干至恒重(含水量3％以下)，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量，分别为38.3％和50.1％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的比例为43.3％。
实施例2与实施例1相比可以看出，35℃发酵条件下，脐橙中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比28℃发酵时分别下降9.7％和6.7％。
实施例2与比较例1相比可以看出，35℃发酵条件下，混菌分步发酵联合分段控温条件下脐橙皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比未发酵的脐橙皮渣分别提高2.72倍和1.55倍。
实施例3
一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，包括：
(1)发酵菌种种子培养
乳酸菌经MRS固体培养基于28℃静置培养36h活化后，按照106个/mL的菌悬液10mL接种于50mL液体培养基中(包含葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母粉0.5％，K2HPO40.2％，柠檬酸二铵0.2％，乙酸钠0.5％，MgSO4·7H2O 0.058％，MnSO4·4H2O 0.025％，pH自然，115℃灭菌20min)，28℃静置培养48h。
青霉菌孢子接种于PDA固体培养基上，28℃静置培养3天后，将106个/mL的孢子悬浮液20mL接种于90g柑橘皮渣固体种子培养基中(蜜柑皮渣按2：1混合均匀，自然pH，110℃灭菌20min)，28℃培养3天。
(2)混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣
蜜柑皮渣300g(皮渣按2:1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO4 0.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种乳酸菌种子(接种量20％)搅拌均匀，28℃发酵3天，然后接种青霉菌种子(接种量20％)，28℃发酵7天。再将发酵产物加入100mL水，35℃静置48h。将发酵产物于80℃烘干至恒重(含水量3％以下)，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量，分别为35.4％和48.7％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的比例为42.1％。
采用本发明的工艺，将蜜柑皮渣经混合菌种分步发酵联合分段控温发酵后，可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比已报道的通过单菌恒温(绿色木霉，24℃)发酵蜜柑皮渣所得结果分别提高6.1％和6.6％，但可溶性膳食纤维含量提高幅度显著大于文献报道[7]。比已报道的另一篇文献所得结果分别提高62.4％和36.2％([刘云.微生物发酵法提取柑橘皮渣膳食纤维的工艺及起理化特性的研究[D].四川农业大学.2008.])。
比较例6
称取蜜柑皮渣300g(皮渣按2:1)，于80℃烘干至恒重，粉碎后按照实施例1中方法测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量，分别为8.2％和42.4％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的16.3％。
实施例3与比较例6相比可以看出，混菌分步发酵联合分段控温条件下蜜柑皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比比较例6中未发酵的蜜柑皮渣分别提高3.32倍和1.58倍。
实施例4
一种柑橘皮渣可溶性膳食纤维的制备方法，包括：
(1)发酵菌种种子培养
乳酸菌经MRS固体培养基于28℃静置培养36h活化后，按照106个/mL的菌悬液8mL接种于50mL液体培养基中(包含葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母粉0.5％，K2HPO40.2％，柠檬酸二铵0.2％，乙酸钠0.5％，MgSO4·7H2O 0.058％，MnSO4·4H2O 0.025％，pH自然，115℃灭菌20min)，28℃静置培养48h。
青霉菌孢子接种于PDA固体培养基上，于28℃静置培养3天后，将106个/mL的孢子悬浮液15mL接种于90g柑橘皮渣固体种子培养基中(胡柚皮渣按2：1混合均匀，自然pH，110℃灭菌20min)，28℃培养3天。
(2)混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣
胡柚皮渣300g(皮渣按2:1)混合均匀后，加入蔗糖3％，蛋白胨0.2％，酵母粉0.1％，KH2PO4 0.37％，K2HPO4 0.11％，(NH4)2SO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.22％，自然pH，配制成固体发酵培养基，110℃灭菌20min。待固体发酵培养基温度降到室温，接种乳酸菌种子(接种量5％)搅拌均匀，28℃发酵3天，然后接种青霉菌种子(接种量5％)，28℃发酵7天。再将发酵产物加入150mL水，45℃静置24h。将发酵产物于80℃烘干至恒重(含水量3％以下)，粉碎后过50目筛，测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量，分别为37.7％和51.3％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的比例为42.3％。
比较例7
称取胡柚皮渣300g(皮渣按2:1)，于80℃烘干至恒重，粉碎后测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量，分别为13.0％和49.5％，可溶性膳食纤维占总膳食纤维的20.8％。
实施例4与比较例7相比可以看出，混菌分步发酵联合分段控温条件下胡柚皮渣中的可溶性膳食纤维含量及其占总膳食纤维的比例比比较例7中未发酵的胡柚皮渣分别提高1.90倍和1.03倍。
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Claims (8)

1.一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于包括：
(1)发酵菌种种子培养，按如下方法操作：
乳酸菌经MRS固体培养基活化后，接种于液体培养基中于温度为25-35℃下静置培养1-3天，得到乳酸菌种子培养液；青霉菌孢子经PDA固体培养基活化后，接种于柑橘皮渣中于温度为25-35℃下静置培养2-4天，得到青霉菌种子，
(2)混菌发酵联合分段控温发酵柑橘皮渣，按如下方法操作：
柑橘皮渣混合均匀后，复配碳源、氮源和无机盐，灭菌后按照先后顺序分步接种乳酸菌和青霉菌，分别按照接种量5％-20％和温度25-35℃下静置发酵，即接种乳酸菌后于25-35℃培养2-4天，然后接种青霉菌后于25-35℃发酵5-7天，静置发酵结束后，将发酵产物中加入适量水，于温度35-55℃下静置12h以上，然后将发酵产物烘干粉碎后测定可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的含量。
2.根据权利要求1所述的一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1)中乳酸菌接种按照106个/mL的菌悬液3-10mL接种于50mL液体培养基中。
3.根据权利要求1所述的一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1)中青霉菌接种按照将106个/mL的孢子悬浮液6-20mL于90g柑橘皮渣中静置培养。
4.根据权利要求1所述的一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1)和步骤(2)中柑橘皮渣按质量比柑橘皮：柑橘渣＝2:1混匀。
5.根据权利要求1所述的一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述的柑橘皮渣经过预处理后使用，具体操作为：柑橘剥皮分瓣后榨汁，将残留的皮渣烘干至手抓成团、落地即散的程度，冷冻保存，备用。
6.根据权利要求1所述的一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2)中所述的发酵产物中加入适量的水是指以300g柑橘皮渣计算，发酵结束后加入100-300mL水。
7.根据权利要求1所述的一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2)中静置放置12h以上是指12-48h。
8.根据权利要求1所述的一种提高柑橘皮渣中可溶性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2)中烘干粉碎是指将发酵产物于80-105℃下烘干至含水量3％以下，粉碎过50目筛。
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