CN108120713A - 一种尿糖试纸及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于体外诊断试纸领域,公开了一种尿糖试纸及其制备方法,一种尿糖试纸,包括基片,基片上设置有尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块中加入了酶稳定剂和酶激活剂,酶稳定剂的成分为5%明胶溶液、5%肌醇溶液、1.5mol/L金属硫酸盐溶液、1%山梨醇溶液、1.5%海藻糖溶液、1.5%海藻糖酸钠溶液中的任意一种或两种以上的混合物,酶激活剂的成分为1%十二烷基硫酸钠溶液、1.5%司盘20溶液、20%曲拉通X‑100溶液、3%胆酸钠溶液中的任意一种或两种以上的混合物,本发明的尿糖检测试剂块加入了酶稳定剂和酶激活剂,制作的尿糖试纸具有取材简单、制作方便、浸润性良好、呈色均匀、保存时间长和诊断快捷的优点。
Description
技术领域
本发明属于体外诊断试纸领域,特别是涉及一种尿糖试纸及其制备方法。
背景技术
17世纪人们发现了糖尿病人的尿液中含有糖,以酵母发酵为基础开始了尿液中葡萄糖的检测;到19世纪中叶,广泛采用铜还原法检验尿糖;后来Fehling和Benedict利用化学反应原理研制的尿葡萄糖定性溶液作为湿化学法的典范在全世界盛行(班氏法),但该方法存在检测费时且繁琐,检验结果具有特异性差、灵敏度低等缺点;20世纪后半叶,尿检方法发生了突变,出现了操作简便、诊断快速、特异性高的的尿糖试纸,尿糖试纸是用葡萄糖氧化酶试纸检测尿液中是否有葡萄糖存在,对糖尿病人自检及临床用药监护尤为方便,且提高了灵敏度,在美国、西德和日本都已盛行。
中国专利申请号201210579953.9(申请日为2012.12.27)的《一种葡萄糖检测试纸》,将葡糖糖氧化酶和过氧化物酶包埋于聚合物纳米纤维的腔室内,得到一种无纺布膜形态的葡萄糖检测试纸,但是此法包埋载体为聚合物纳米纤维,对取材要求较高。
曲蕊等在1993年第03期《青岛化工学院学报》的“葡萄糖氧化酶尿糖试纸的研制中”提出了一种添加了明胶和海藻酸钠的尿糖试纸,该试纸以碘化钾为显色剂,但由于缺乏对酶的充分保护,其长期稳定性得不到保障。
行业内有人采用乙基纤维素成膜法保护,采用酶法制作的尿糖试纸,以延长产品稳定性,但该法研制的试纸存在一个比较普遍的缺点,浸润性不好,试纸与尿液接触后容易因为浸润不均导致呈色不均匀,以致影响结果的判读。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用干化学法制作的尿糖试纸,克服了现有技术中尿糖试纸存在的缺陷,可为临床检验和诊断提供更加方便、直观和准确的依据。
本发明提供了一种尿糖试纸,包括基片,基片上设置有尿糖检测试剂块,所述尿糖检测试剂块中加入了酶稳定剂和酶激活剂。
所述酶稳定剂的成分为5%明胶溶液、5%肌醇溶液、1.5mol/L金属硫酸盐溶液、1%山梨醇溶液、1.5%海藻糖溶液、1.5%海藻糖酸钠溶液中的任意一种或两种以上的混合物。
所述酶激活剂的成分为1%十二烷基硫酸钠溶液、1.5%司盘20溶液、20%曲拉通X-100溶液、3%胆酸钠溶液中的任意一种或两种以上的混合物。
所述尿糖检测试剂块的制备原料组成如下:磷酸氢二钠质量体积浓度为5-12g/L、柠檬酸质量体积浓度为30-60g/L、聚乙烯吡咯烷酮质量体积浓度为6-15g/L、邻联甲苯胺质量体积浓度为15-50g/L、3%马来酸二甲酯体积百分浓度为0.1-0.5%、1%橙黄G染料试液体积百分浓度为0.1-0.5%、葡萄糖氧化酶酶活性为30-100ku/L、过氧化物酶酶活性为100-500ku/L、酶稳定剂体积百分浓度为0.5-2.5%、酶激活剂体积百分浓度为1-10%。
尿糖试纸的制备方法包括以下步骤:
(1)用量筒量量取3/5量筒体积的去离子水,加入烧杯中;
(2)依次加入准确称量的磷酸氢二钠、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮,用玻璃棒搅拌溶解,磷酸氢二钠充分溶解后加入柠檬酸,柠檬酸充分溶解后加入聚乙烯吡咯烷酮,聚乙烯吡咯烷酮充分溶解后加入3%马来酸二甲酯,搅匀;
(3)然后依次加入准确称量的邻联甲苯胺、过氧化物酶、葡萄糖氧化酶,搅拌,使其充分溶解;
(4)再加入1%橙黄G染料试液、酶稳定剂,搅匀;
(5)最后加入酶激活剂,充分搅匀后,将搅匀后的溶液转移至容量瓶中,用去离子水定容至刻度,即得葡萄糖检测液;
(6)将滤纸在葡萄糖检测液中充分浸润,经过烘箱进行烘干,分切后得到尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块通过双面胶粘贴在基片上,滚切后获得尿糖试纸。
有益效果:
1.本发明的尿糖检测试剂块加入了酶稳定剂和酶激活剂,制作的尿糖试纸具有取材简单、制作方便、浸润性良好、呈色均匀、保存时间长和诊断快捷的优点。
2.本发明的尿糖试纸诊断结果更加准确、临床适用性更好,适用性和稳定性得到了提高。
具体实施方式
为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例一:
一种尿糖试纸,包括基片,基片上设置有尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块中加入了酶稳定剂和酶激活剂。
尿糖试纸的试剂原料为:磷酸氢二钠、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、3%马来酸二甲酯、邻联甲苯胺、1%橙黄G染料试液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、酶稳定剂和酶激活剂。酶稳定剂的成分为5%明胶溶液,酶激活剂的成分为1%十二烷基硫酸钠溶液。
尿糖试纸的制备方法包括以下步骤:
(1)用量筒量取去离子水650ml,加入1000ml烧杯中;
(2)依次加入准确称量的磷酸氢二钠9.5g、柠檬酸50g、聚乙烯吡咯烷酮12.5g,用玻璃棒搅拌溶解,磷酸氢二钠充分溶解后加入柠檬酸,柠檬酸充分溶解后加入聚乙烯吡咯烷酮,聚乙烯吡咯烷酮充分溶解后加入3%马来酸二甲酯3.5ml,搅匀;
(3)然后依次加入准确称量的邻联甲苯胺35g、过氧化物酶100ku、葡萄糖氧化酶100ku,搅拌,使其充分溶解;
(4)再加入1%橙黄G染料试液3.5ml、酶稳定剂25ml,搅匀;
(5)最后加入酶激活剂5ml,充分搅匀后,将搅匀后的溶液转移至1000ml容量瓶中,用去离子水定容至刻度,即得葡萄糖检测液。
(6)将滤纸在葡萄糖检测液中充分浸润,经过烘箱进行烘干,分切后得到尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块通过双面胶粘贴在基片上,滚切后获得尿糖试纸。
实施例二:
一种尿糖试纸,包括基片,基片上设置有尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块中加入了酶稳定剂和酶激活剂。
尿糖试纸的试剂原料为:磷酸氢二钠、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、3%马来酸二甲酯、邻联甲苯胺、1%橙黄G染料试液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、酶稳定剂和酶激活剂。酶稳定剂的成分为1.5mol/L金属硫酸盐溶液,酶激活剂的成分为20%曲拉通X-100溶液。
尿糖试纸的制备方法包括以下步骤:
(1)用量筒量取去离子水650ml,加入1000ml烧杯中;
(2)依次加入准确称量的磷酸氢二钠5g、柠檬酸30g、聚乙烯吡咯烷酮6g,用玻璃棒搅拌溶解,磷酸氢二钠充分溶解后加入柠檬酸,柠檬酸充分溶解后加入聚乙烯吡咯烷酮,聚乙烯吡咯烷酮充分溶解后加入3%马来酸二甲酯1ml,搅匀;
(3)然后依次加入准确称量的邻联甲苯胺15g、过氧化物酶500ku、葡萄糖氧化酶30ku,搅拌,使其充分溶解;
(4)再加入1%橙黄G染料试液1ml、酶稳定剂5ml,搅匀;
(5)最后加入酶激活剂1ml,充分搅匀后,将搅匀后的溶液转移至1000ml容量瓶中,用去离子水定容至刻度,即得葡萄糖检测液。
(6)将滤纸在葡萄糖检测液中充分浸润,经过烘箱进行烘干,分切后得到尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块通过双面胶粘贴在基片上,滚切后获得尿糖试纸。
实施例三:
一种尿糖试纸,包括基片,基片上设置有尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块中加入了酶稳定剂和酶激活剂。
尿糖试纸的试剂原料为:磷酸氢二钠、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、3%马来酸二甲酯、邻联甲苯胺、1%橙黄G染料试液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、酶稳定剂和酶激活剂。酶稳定剂的成分为1.5%海藻糖酸钠溶液和1.5%海藻糖溶液的混合物,1.5%海藻糖酸钠溶液和1.5%海藻糖溶液的混合比例为3:2。酶激活剂的成分为1.5%司盘20溶液和3%胆酸钠溶液的混合物,1.5%司盘20溶液和3%胆酸钠溶液的混合比例为2:1。
尿糖试纸的制备方法包括以下步骤:
(1)用量筒量取去离子水650ml,加入1000ml烧杯中;
(2)依次加入准确称量的磷酸氢二钠12g、柠檬酸60g、聚乙烯吡咯烷酮15g,用玻璃棒搅拌溶解,磷酸氢二钠充分溶解后加入柠檬酸,柠檬酸充分溶解后加入聚乙烯吡咯烷酮,聚乙烯吡咯烷酮充分溶解后加入3%马来酸二甲酯5ml,搅匀;
(3)然后依次加入准确称量的邻联甲苯胺50g、过氧化物酶300ku、葡萄糖氧化酶70ku,搅拌,使其充分溶解;
(4)再加入1%橙黄G染料试液5ml、酶稳定剂15ml,搅匀;
(5)最后加入酶激活剂6ml,充分搅匀后,将搅匀后的溶液转移至1000ml容量瓶中,用去离子水定容至刻度,即得葡萄糖检测液。
(6)将滤纸在葡萄糖检测液中充分浸润,经过烘箱进行烘干,分切后得到尿糖检测试剂块,尿糖检测试剂块通过双面胶粘贴在基片上,滚切后获得尿糖试纸。
Claims (3)
1.一种尿糖检测试纸,包括基片,所述基片上设置有尿糖检测试剂块,其特征在于:所述尿糖检测试剂块中加入了酶稳定剂和酶激活剂,其中所述酶稳定剂的体积百分浓度为0.5-2.5%,所述酶激活剂的体积百分浓度为1-10%;
所述酶稳定剂选自5%明胶溶液、5%肌醇溶液、1.5mol/L金属硫酸盐溶液、1%山梨醇溶液、1.5%海藻糖溶液、1.5%海藻糖酸钠溶液中的任意一种或两种以上的混合物;
所述酶激活剂选自1%十二烷基硫酸钠溶液、1.5%司盘20溶液、20%曲拉通X-100溶液、3%胆酸钠溶液中的任意一种或两种以上的混合物。
2.根据权利要求1所述的一种尿糖检测试纸,其特征在于:所述尿糖检测试剂块的制备原料组成包括如下:磷酸氢二钠质量体积浓度为5-12g/L,柠檬酸质量体积浓度为30-60g/L,聚乙烯吡咯烷酮质量体积浓度为6-15g/L,邻联甲苯胺质量体积浓度为15-50g/L,3%马来酸二甲酯体积百分浓度为0.1-0.5%,1%橙黄G染料试液体积百分浓度为0.1-0.5%,葡萄糖氧化酶酶活性为30-100ku/L,过氧化物酶酶活性为100-500ku/L,酶稳定剂的体积百分浓度为0.5-2.5%,酶激活剂的体积百分浓度为1-10%。
3.根据权利要求2所述的一种尿糖检测试纸的制备方法,其特征在于:步骤为:(1)用量筒量取3/5量筒体积的去离子水,加入烧杯中;
(2)依次加入准确称量的磷酸氢二钠、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮,用玻璃棒搅拌溶解,磷酸氢二钠充分溶解后加入柠檬酸,柠檬酸充分溶解后加入聚乙烯吡咯烷酮,聚乙烯吡咯烷酮充分溶解后加入3%马来酸二甲酯,搅匀;
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(4)再加入1%橙黄G染料试液、酶稳定剂,搅匀;
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