CN108017445A

CN108017445A - 一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法

Info

Publication number: CN108017445A
Application number: CN201711271018.5A
Authority: CN
Inventors: 邢芳芳; 范玲超; 周传志; 王怀利; 邹朋
Original assignee: Jindadi Agricultural Technology Co ltd; HEZE KINGENTA ECOLOGICAL ENGINEERING CO LTD; Kingenta Ecological Engineering Group Co Ltd
Current assignee: Jindadi Agricultural Technology Co ltd; HEZE KINGENTA ECOLOGICAL ENGINEERING CO LTD; Kingenta Ecological Engineering Group Co Ltd
Priority date: 2017-12-05
Filing date: 2017-12-05
Publication date: 2018-05-11

Abstract

本发明公开了一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法，微生物菌剂的重量份组成如下：巨大芽孢杆菌HB菌粉10～30份、磷尾矿粉35～65份、磷石膏12～18份、糖厂废渣8～25份、海藻渣6～26份、甘露醇1～8份。本发明盐碱土改良型微生物菌剂配方中各组分协同增效，缺少任何一种，都达不到预期效果，只有采用本发明盐碱土改良型微生物菌剂全配方的情况下，在每亩地使用量30～80公斤的条件下能起到很好的提高肥料利用率、作物增产、提高品质、改良盐碱地的效果。

Description

一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法，属于肥料技术领域。

背景技术

盐碱土是盐土和碱土的总称，土地盐碱化多是由于农田的不合理灌溉以及化肥的过度使用造成的。由于盐碱土的有机质含量少，土壤盐渍化严重，土壤肥力低，理化性状差，普遍缺磷少氮，对作物有害的阴、阳离子多，导致作物不易出苗，严重影响了作物的品质和产量。中国盐碱土的分布比较广，可开展农业利用的盐碱土地面积近130万hm²，占中国耕地面积的10％以上，开发潜力巨大。随着人口增加，耕地面积减少，盐碱地的治理和改良也越来越受到人们重视。

盐碱土的改良主要包括工程改良、化学改良及生物改良。工程改良短期效果明显，但工程投入大；化学改良见效快，但成本高，副作用明显。生物法改良具有成本低、操作方便、不产生二次污染等优点，因此，利用生物法改良盐碱地的研究具有广阔的前景。目前多数研究采用耐盐耐碱微生物肥料进行盐碱土的改良，其中解磷微生物肥料的应用为研究热点。微生物的解磷作用能够将难溶性磷转化为水溶性磷，有效地增加土壤速效磷的含量，产生有机酸和活性酶类，促进作物的生长。相同措施对盐碱土壤的改良效果各不相同，综合防治才能取得良好效果。

现有的盐碱土改良剂有很多，如，中国专利文献CN105670642A(申请号201610126908.6)公开了一种盐碱土壤改良剂及其制备方法，主要包括以重量份计的如下原料制成：糖蜜酒精废液500～600份、香菇菌渣50～70份、角叉菜45～60份、蚯蚓粪30～40份、鹿沼土18～20份、片沸石3～5份、伊利石3～5份、海泡石6～8份、芽孢杆菌1份、醋酸菌0.5份、乳酸菌0.1份和酵母0.3份；芽孢杆菌由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌以重量比为2:1:1组成，醋酸菌由木醋杆菌、醋化醋杆菌和巴氏醋酸杆菌以重量比为1:3:2组成，乳酸菌由保加利亚乳杆菌和嗜酸乳杆菌以重量比为2:1组成，酵母由酿酒酵母和粟酒裂殖酵母以重量比为2:1组成。

中国专利文献CN104609992A(申请号201410844584.0)公开了一种盐碱地专用复合菌肥及其制备方法，所述复合菌肥，包括如下重量百分比的原料组成：解磷解钾类复合菌剂10～20％、餐厨垃圾40～60％、硅藻土30～40％。其中解磷解钾类复合菌剂是将巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、荧光假单胞菌、解淀粉芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、圆褐固氮菌分别培养离心、冷冻干燥后等量混合获得；餐厨垃圾是将经分拣、除杂并脱水除油的餐厨垃圾粉碎后，加入复合菌剂和混合酶制剂，好氧固态发酵后获得。

中国专利文献CN104230600A(申请号201410463730.5)公开了一种盐碱土调理剂及其制备方法，由以下重量份组成：30～70份酶制剂滤渣，10～60份骨粉，1～5份菌剂；所述菌剂为枯草芽孢杆菌菌粉、胶冻芽孢杆菌菌粉、巨大芽孢杆菌菌粉中的一种或几种组合。该发明以酶制剂滤渣吸附微生物制剂，并复配富含生物磷、钙的骨粉，酶制剂滤渣对作物病原菌有较好的抑制作用，有效预防土传病害的发生，同时促使有益细菌如固氮菌、纤维分解菌、乳酸菌、放线菌的增生，抑制有害细菌如霉菌、丝状菌的生长；骨粉调节土壤中碱性离子，利用解磷解钾及枯草芽孢杆菌等混合微生物制剂来改善土壤微生态环境。

中国专利文献CN106588424A(申请号201610790537.1)公开了一种盐碱土壤改良专用缓释肥料，其特征是，它由麦饭石25～35wt％、氯化钾5～10wt％、矿物粉料5～15wt％和有机肥25～30wt％，水制备而成，各组分之和为100％，活性固体菌种包括乳酸菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、木霉、黑曲霉、红曲霉、哈茨木霉菌、棘孢曲霉和酵母，矿物粉料是草炭、沸石、蛭石、蒙脱石、碳酸钙、膨胀珍珠岩中的一种或一种以上的混合物，矿物粉料的细度≤200目，所述有机肥含有腐熟的粪肥、菜籽饼肥、秸秆，所述粪肥、菜籽饼肥与秸秆的重量比为5.5～7.5∶2.5～3.5∶0.5～1.5。

中国专利文献CN102408264A(申请201110246079.2)公开了一种利用废弃磷尾矿粉制备的有机肥料及其制备方法，该有机肥料的原料重量份如下：磷矿尾矿粉20～35份，农作物秸秆粉20～40份，酱油渣20～40份。将磷矿尾矿粉，农作物秸秆粉和酱油渣按重量比例混合均匀，按料水比1:2～1:3，加水，接种4～5％的黑曲霉(Aspergillus niger)，2～3％的醋酸菌(Acetobacter)，3～4％的乳酸菌(Lactobacillus)，4～6％的巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，28～32℃下发酵3～5天；然后，加水15～20％，再于50～65℃下发酵10～15天；烘干，包装即成。

中国专利文献CN105925273A(申请号201610372129.4)公开了一种含荷叶提取物的土壤调理剂对旱涝盐碱地进行原土绿化的方法，本发明所述土壤调理剂包括以下重量份的组分：发酵鸵鸟粪22～24份、花生壳粉8～10份、沼渣5～7份、磷矿粉2～4份、脱硫废弃物2～4份、磷石膏1～3份、硫酸亚铁2～4份、磷酸二氢钾2～4份、磷酸氢二钠2～4份、氨基酸盐1～3份、丙二酸0.5～0.7份、嗜盐甲烷菌0.1～0.3份、枯草芽孢杆菌0.1～0.3份、巨大芽孢杆菌0.1～0.3份、地衣芽孢杆菌0.1～0.3份、酵母菌0.1～0.3份、莠去津0.2～0.4份、增甘膦0.2～0.4份、调节膦0.2～0.4份、荷叶提取物0.2～0.4份、果胶1～3份、藻酸1～3份、壳聚糖1～3份、肝素1～3份、磷酸三钙2～4份、纤维素接枝丙烯酸盐聚合物0.3～0.5份、螯合铁0.1～0.3份、螯合锌0.1～0.3份。

以上现有改良盐碱土的微生物菌剂由多种不同的菌种构成，菌种之间势必产生菌群竞争和拮抗的作用，对盐碱土的修复作用因多种不同的菌种在不同环境和地域的影响而产生的效果不稳定。

中国专利文献CN105154357A(申请号201510505726.5)公开了一种次生盐渍化土壤修复菌剂的制备方法及应用，该次生盐渍化土壤修复菌剂含有冻干后的巨大芽孢杆菌菌株发酵液及保护剂，所述的巨大芽孢杆菌具体为：Bacillus megaterium NCT-2，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.4698；所述的保护剂采用蔗糖、甘露醇、Twen 80、甘油、脱脂奶粉、山梨醇、淀粉、L-谷氨酸钠、麦芽糊精、葡萄糖、海藻糖中的任意一种或几种的组合；其中，巨大芽孢杆菌不仅可以降低土壤硝态氮的含量和EC值，并且可以增加土壤中有机质的含量，提高蔬菜产量和品质。

本发明中将生物改良与化学改良相结合，将耐高盐、酸碱、解磷微生物与可缓解盐胁迫的物质及有机无机养分复配，得到具有改良盐碱土的微生物菌剂。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法，可缓解土壤的盐碱现象，大幅度改良土壤，有效改善作物品质，达到保水、保肥，提高土壤质量及作物产量。

本发明采用的技术方案为：

一种盐碱土改良型微生物菌剂，组分如下，均为重量份：

巨大芽孢杆菌HB菌粉10～30份、磷尾矿粉35～65份、磷石膏12～18份、糖厂废渣8～25份、海藻渣6～26份、甘露醇1～8份；

所述巨大芽孢杆菌HB菌粉含芽孢5.0×10⁹～1.2×10¹⁰个/g；

所述微生物菌剂含有效活菌数1.0×10⁹～3.0×10⁹CFU/g。

本发明所述的糖厂废渣为甘蔗糖渣，为普通市售产品。

本发明所述的海藻渣主要成分如下，均以质量百分比计：粗蛋白15-20％、粗纤维40-50％、海藻酸5-8％，余量为不可避免的杂质；是通过马尾藻、碳酸钾原料生产海藻酸得到的副产物，普通市售产品。

所述巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)HB，2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCC NO.11961；巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)HB为革兰氏阳性菌及好氧菌，杆状，末端圆，单个或呈短链排列，1.2～1.5×2.0～4.0微米，能运动；芽孢1.0～1.2×1.5～2.0微米，椭圆形，中生或次端生。

一种盐碱土改良型微生物菌剂的制备方法，包括步骤如下：

(1)功能菌巨大芽孢杆菌种子液制备

A、巨大芽孢杆菌菌株活化；

B、将活化的巨大芽孢杆菌菌株接种到液体种子培养基中，于32～37℃下培养16～24h，得到巨大芽孢杆菌种子液，备用；

(2)预处理混合料的制备

按比例，取豆粕粉、秸秆粉、麦麸、酒糟、玉米粉混合均匀，豆粕粉、秸秆粉、麦麸、酒糟、玉米粉的重量份如下：豆粕粉40～70份，秸秆粉10～28份，麦麸10～22份，酒糟10～35份，玉米粉5～15份；加水调整含水率至60～70wt％，于20～35℃条件下静置8～24小时，然后于温度115～121℃下蒸煮20～40min，冷却后得预处理混合料，备用；

(3)取步骤(2)制得的预处理混合料，按质量百分比为8～20wt％的接种量接入步骤(1)制备的巨大芽孢杆菌种子液，混合均匀，于32～36℃条件下放置24～30小时，然后翻料、搅拌均匀，再提高温度至38～42℃，继续发酵24～48小时，发酵结束后将温度降至室温，得到发酵物；

(4)将步骤(3)中的发酵物在50～110℃烘干至水分质量含量15％以下，经粉碎处理后得到巨大芽孢杆菌HB菌粉，含有芽孢数5.0×10⁹～1.2×10¹⁰个/g，产孢率达到90％以上；

(5)将磷尾矿粉、磷石膏、糖厂废渣、海藻渣粉碎过5～20目筛后，与步骤(4)得到的巨大芽孢杆菌HB菌粉、甘露醇按比例进行复配，搅拌均匀，即得到盐碱土改良型微生物菌剂。

根据本发明优选的，步骤(1)A中所述的活化培养基为LB培养基，其组分及重量百分比如下：胰蛋白胨0.8～1.2％，酵母提取物为0.4～0.6％，氯化钠0.4～0.6％，琼脂粉1.5～2.0％，其余为水，pH值为7.2。

根据本发明优选的，步骤(1)A中，所述的活化是将低温保存的巨大芽孢杆菌HB在LB平板培养基上37℃条件下培养出单菌落，挑取单菌落在LB斜面培养基上37℃条件下培养18～24h。

根据本发明优选的，步骤(1)B中所述的液体种子培养基组分及其重量百分比如下：葡萄糖2.0～3.0％，玉米浆干粉1.1～1.8％，黄豆粉1.5～4.0％，酵母浸膏0.1～0.2％，磷酸二氢钾0.01～0.03％，氯化钠0.01～0.02％，硫酸镁0.01～0.02％，其余为水，pH值为7.0～7.3。

根据本发明优选的，步骤(3)中巨大芽孢杆菌种子液的接种量为10～19wt％，于33～35℃条件下放置25～30小时。

最为优选的，步骤(3)中巨大芽孢杆菌种子液的接种量为15wt％，34℃条件下放置30小时。

上述制备方法中未详细限定的均按照现有技术。

上述盐碱土改良型微生物菌剂作为磷细菌菌剂，或者，作为促生、养地、改良盐碱土的微生物肥料的应用。

根据本发明优选的，上述应用，盐碱土改良型微生物菌剂每亩施用量为30～80kg。

有益效果：

1.本发明制备的菌剂含有大量高活性的巨大芽孢杆菌的芽孢休眠体，有效芽孢数最高达1.0×10⁹个/g以上，该菌株芽孢具有耐110℃高温、高盐，定殖能力强，繁殖速度快的特点，施入土壤后能够快速在作物根际定殖，改善根际土壤微生态环境，保持优势菌种地位，占领有害菌的生存空间。

2.本发明中的巨大芽孢杆菌繁殖过程中产生有机酸、植酸酶等活化因子，能够活化土壤中被固定的元素，把无效磷转化为有效磷，有效提高施入的化学肥料中以及土壤中磷的吸收效率，促进作物对钾、钙、镁的协同吸收，可以提高化学肥料利用率10％以上；同时，能够缓冲根际土壤酸碱度，减轻土壤盐碱化程度，提高作物抗逆性能；代谢产生吲哚乙酸(IAA)，吲哚乙酸是一种天然的植物生长促进剂，促进种子萌发、作物及根系生长。

3.本发明提供的盐碱土改良微生物菌剂结合盐碱地实际情况，利用生物技术和天然矿物活化技术，恢复土壤生态***，缓解土壤盐碱化问题。此技术的核心在于酸碱平衡和土壤微生态平衡，利用耐高盐、酸碱的微生物与天然矿物质的协同作用，疏通孔道，提高对矿物质及盐离子的吸附和离子交换的能力，有利于盐份淋洗，抑制返盐，起到治盐改碱的作用，并且利用功能微生物的快速定殖、扩繁及特有的代谢产物活化根际微生态环境，促进土壤微生态平衡。

4.本发明菌剂制备工艺简单、生产周期短、安全性高、货架期长，并且实现了废弃物资源的再利用，菌剂中的糖厂废渣、海藻渣富含丰富的蛋白质、维生素等有机养分，极大提高了作物的产量和品质，与配方中的磷尾矿粉、磷石膏、甘露醇协同增效，缺少任何一种组分，都不能达到预期效果。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面以具体实施例来进一步清楚地解释本发明，但是不以任何方式构成对本发明的限制。下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法；下述实施例中的百分含量，如无特别说明，均为重量百分含量。

巨大芽孢杆菌HB菌株，于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.11961。

磷尾矿粉购自贵州瓮福实业开发有限总公司，含P₂O₅8.2％、氧化钙35％、氧化镁15.5％、SiO₂4.4％以及少量铁；

糖厂废渣为甘蔗糖渣，购自广西富喆贸易有限公司，主要成分为废糖蜜、蛋白、粗脂肪、粗纤维；

海藻渣购自金正大生态工程集团股份有限公司；其以马尾藻为原料，采用碳酸钾进行化学降解法生产，主要成分为海藻酸、粗蛋白、粗纤维；

普通有机肥(N-P-K≥5％)购买于临沂国丰。

磷石膏、甘露醇均为普通市售产品，含量80％以上。

下面结合实施例对本发明做进一步详细说明：依据国标GB/T 2087-2006中的方法进行检测，结果为：微生物菌剂含有效活菌数1.0×10⁹～3.0×10⁹CFU/g。

实施例1一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法，步骤如下：

(1)巨大芽孢杆菌种子液制备

A、将低温保存的巨大芽孢杆菌HB在LB平板培养基上37℃条件下培养单菌落，挑取单菌落在LB斜面培养基上37℃条件下培养18h，得活化的菌株；

B、用无菌的接种环刮取一环步骤A活化的菌株接种到50ml液体种子培养基中，在35℃培养20h，即得巨大芽孢杆菌菌液，菌液活菌数1.5×10⁹CFU/ml。

(2)预处理混合料的制备

按质量份，取豆粕粉40份，秸秆粉20份，麦麸20份，酒糟15份，玉米粉5份，放入容器内混合均匀，加水调整至水分含量60wt％，于25℃条件下放置16小时；121℃条件下蒸煮30min，得混合料，冷却备用。

(3)按质量百分比，取步骤(2)制备的预处理混合料，按10wt％的接种量接入步骤(1)制备的巨大芽孢杆菌种子液，混合均匀，于36℃条件下放置28小时，然后翻料、搅拌均匀，再提高温度至40℃，继续发酵28小时，发酵结束后将温度降至室温，得到发酵物。

(4)将步骤(3)中的发酵物在80℃条件下烘干至水分质量含量15％以下，经粉碎处理后得到巨大芽孢杆菌菌粉，含有芽孢数9.0×10⁹个/g。

(5)将磷尾矿粉、磷石膏、糖厂废渣、海藻渣粉碎过5～20目筛后，与步骤(4)得到的巨大芽孢杆菌菌粉、甘露醇进行复配，具体比例如下：

(6)将上述各原料按步骤(5)的工艺配方要求分批计量，输送至混料机中，所有原料搅拌均匀，得到一种盐碱土改良型微生物菌剂粉剂产品，有效活菌数1.8×10⁹CFU/g。

实施例2一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法，步骤如下：

(1)巨大芽孢杆菌种子液制备

A、将低温保存的巨大芽孢杆菌菌株HB在LB平板培养基上37℃条件下培养出单菌落，挑取单菌落在LB斜面培养基上37℃条件下培养24h，得活化的菌株；

B、用无菌的接种环刮取一环步骤A活化的菌株接种到50ml液体种子培养基中，在36℃培养22h，即得巨大芽孢杆菌种子液，菌液活菌数2.1×10⁹CFU/ml。

(2)预处理混合料的制备

按质量份，取豆粕粉45份，秸秆粉20份，麦麸10份，酒糟15份，玉米粉10份，放入容器内混合均匀，加水调整至水分含量70wt％，于30℃条件下放置24小时；120℃条件下蒸煮40min，得混合料，冷却备用。

(3)按质量百分比，取步骤(2)制备的预处理混合料，按15wt％的接种量接入步骤(1)制备的巨大芽孢杆菌种子液，混合均匀，于36℃条件下放置30小时，然后翻料、搅拌均匀，再提高温度至42℃，继续发酵36小时，发酵结束后将温度降至室温，得到发酵物。

(4)将步骤(3)中的发酵物在100℃条件下烘干至水分质量含量15％以下，经粉碎处理后得到巨大芽孢杆菌菌粉，含有芽孢数1.1×10¹⁰个/g。

(6)将上述各原料按步骤(5)的工艺配方要求分批计量，输送至混料机中，所有原料搅拌均匀，得到一种盐碱土改良型微生物菌剂粉剂产品，有效活菌数1.1×10⁹CFU/g。

实施例3一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法，步骤如下：

(1)巨大芽孢杆菌种子液制备

B、用无菌的接种环刮取一环步骤A活化的菌株接种到50ml液体种子培养基中，在37℃培养24h，即得巨大芽孢杆菌菌液，菌液活菌数1.1×10⁹CFU/ml。

(2)预处理混合料的制备

按质量份，取豆粕粉65份，秸秆粉25份，麦麸20份，酒糟35份，玉米粉15份，放入容器内混合均匀，加水调整至水分含量70wt％，于35℃条件下放置24小时；120℃条件下蒸煮40min，得混合料，冷却备用。

(3)按质量百分比，取步骤(2)制备的预处理混合料，按20wt％的接种量接入步骤(1)制备的巨大芽孢杆菌种子液，混合均匀，于36℃条件下放置30小时，然后翻料、搅拌均匀，再提高温度至42℃，继续发酵36小时，发酵结束后将温度降至室温，得到发酵物。

(4)将步骤(3)中的发酵物在100℃条件下烘干至水分质量含量15％以下，经粉碎处理后得到巨大芽孢杆菌菌粉，含有芽孢数1.11×10¹⁰CFU/g。

(6)将上述各原料按步骤(5)的工艺配方要求分批计量，输送至混料机中，所有原料搅拌均匀，得到一种盐碱土改良型微生物菌剂粉剂产品，有效活菌数1.11×10⁹CFU/g。

实施例4一种盐碱土改良型微生物菌剂及其制备方法，步骤如下：

(1)巨大芽孢杆菌种子液制备

A、将低温保存的巨大芽孢杆菌菌株HB在LB平板培养基上37℃条件下培养出单菌落，挑取单菌落在LB斜面培养基上37℃条件下培养18h，得活化的菌株；

B、用无菌的接种环刮取一环步骤A活化的菌株接种到50ml液体种子培养基中，在32℃培养16h，即得巨大芽孢杆菌菌液，菌液活菌数1.2×10⁹CFU/ml。

(2)预处理混合料的制备

按质量份，取豆粕粉41份，秸秆粉15份，麦麸10份，酒糟15份，玉米粉7份，放入容器内混合均匀，加水调整至水分含量65wt％，于30℃条件下放置20小时；120℃条件下蒸煮40min，得混合料，冷却备用。

(4)将步骤(3)中的发酵物在100℃条件下烘干至水分质量含量15％以下，经粉碎处理后得到巨大芽孢杆菌菌粉，含有芽孢数1.29×10¹⁰CFU/g。

(6)将上述各原料按步骤(5)的工艺配方要求分批计量，输送至混料机中，所有原料搅拌均匀，得到一种盐碱土改良型微生物菌剂粉剂产品，有效活菌数1.29×10⁹CFU/g。

对比例1

制备步骤同实施例1，所不同的是步骤(5)中添加菌种编号为CGMCC NO.4698巨大芽孢杆菌菌粉。

对比例2

制备步骤同实施例1，所不同的是步骤(5)中不添加磷尾矿粉。

对比例3

制备步骤同实施例1，所不同的是步骤(5)中添加糖醛渣替代糖厂废渣。

对比例4

制备步骤同实施例1，所不同的是步骤(5)中添加木薯渣替代海藻渣。

对比例5

制备步骤同实施例1，所不同的是步骤(5)中不添加磷石膏。

试验例1一种盐碱土改良型微生物菌剂的大田试验

选择土壤为新疆乌鲁木齐地区盐碱土壤，土壤pH为7.9，有机质为0.9％，水解氮159.6mg/kg，速效磷24.5mg/kg，速效钾150.9mg/kg。试验地总面积720m²，长60m，宽12m，共35畦，种植彩椒品种为黄星1号，每畦56株，移栽株距50cm，行距50cm。使用的肥料为实施例1-4制备的盐碱土改良型微生物菌剂、对比例1-5制备的肥料、等量普通有机肥(临沂国丰，N-P-K≥5％)和清水对照，肥料施用方式为基肥，30kg/亩。各试验地块播种方式、株距、行距、管理措施等均保持一致，计算整个生长周期采收产量，并取根际土壤进行氮磷钾元素分析。所有处理均不施用其它肥料。

表1彩椒施用盐碱土改良型微生物菌剂和施用普通有机肥对部分指标的影响

结果显示：施用实施例1-4制备的盐碱土改良型微生物菌剂组的实验地块均比对比例和对照组增产明显，其中产量最高的实施例1制备的菌剂较清水对照、普通有机肥对照分别增产19.4％、12.88％，Vc含量分别提高28.3％、19.2％，较对比例中产量最高的对比例5、产量最低的对比例1分别增产7.01％、8.6％，Vc含量分别提高12.6％、16.2％；产量最低的实施例2制备的菌剂较清水对照、普通有机肥对照分别增产16.97％、10.6％，Vc含量分别提高22.8％、14.1％，较对比例中产量最高的对比例5、产量最低的对比例1分别增产7.54％、9.40％，Vc含量分别提高8.8％、12.5％。

实施例中的盐碱土改良型菌剂组彩椒根际土壤pH较清水空白、普通有机肥处理组降低0.43以上，较对比例1-5降低0.32以上。施用微生物菌剂的盐碱地氮利用率达到49.9％，比普通有机肥组提高16.8个百分点，较对比例1-5提高11.1个百分点以上；磷利用率达到39.5％，比普通有机肥组提高了11.2个百分点，钾利用率达到72.4％，比普通有机肥组提高了10.2个百分点，较对比例1-5磷、钾利用率分别提高7.7、8.5个百分点以上。

对比例1-5缺少菌剂配方中组分，无法起到协同增效作用。充分证明了本发明的盐碱土改良型微生物菌剂具有显著的提高氮、磷、钾利用率、降低作物根际土壤pH、提高果实Vc含量、促生、增产的作用，并且菌剂配方中组分缺一不可。由上表可知，施用盐碱土改良型微生物菌剂较施普通有机肥组平均亩增产768.25kg，产量增加11.8％。

试验例2一种盐碱土改良型微生物菌剂的大田试验

选择土壤为石灰性土壤，偏碱性，土壤pH为8.1，有机质为1.1％，水解氮152.6mg/kg，速效磷14.5mg/kg，速效钾150.2mg/kg。试验区行长8米，10行区，行距15cm。种植小麦品种为济麦22，播种量为：118kg/hm²。使用的肥料为实施例1、2制备的盐碱土改良型微生物菌剂、对比例1-5制备的肥料、等量普通有机肥(临沂国丰，N-P-K≥5％)和清水对照，肥料施用方式50％作基肥，50％拔节追肥。播种方式，对比法排列，三次重复。计算收获各小区籽粒和秸秆生物产量，取籽粒计算籽茎比，并取根际土壤进行氮磷钾元素分析。田间管理按照丰产要求，并记载生物学性状。所有处理均不施用其它肥料。

表2小麦施用盐碱土改良型微生物菌剂对小麦产量的影响

项目	产量(kg/亩)	穗粒(粒)	千粒重(g)	氮利用率(％)	磷利用率(％)	钾利用率(％)
							实施例1菌剂	569.9	30.8	40.9	40.5	30.9	68.1
实施例2菌剂	568.7	30.5	40.8	40.1	30.9	67.1
							实施例3菌剂	569.6	30.8	41.1	40.3	31.2	68.1
实施例4菌剂	560.9	30.2	40.9	40.3	30.1	66.9
							对比例1	508.8	25.3	35.4	32.8	18.4	59.8
对比例2	521.1	27.8	37.1	34.6	19.5	60.7
							对比例3	514.9	26.7	36.2	34.2	19.7	61.2
对比例4	519.1	27.3	36.6	33.9	19.4	61.8
							对比例5	521.5	28.3	37.1	33.5	19.7	60.9
普通有机肥	495.6	26.6	35.5	32.1	18.3	59.2
							清水	353.5	18.9	28.1	——	——	——

结果显示：在石灰性土壤中，施用实施例1-4制备的盐碱土改良型微生物菌剂组均比对照组、对比例1-5有较大幅度的增产，其中产量最高的实施例1较对比例中产量最低的对比例1增产12％，较对比例中产量最高的对比例5增产9.3％；盐碱土改良型微生物菌剂在小麦生产中氮利用率达到40.5％，比普通有机肥组提高8.4个百分点，较对比例1-5提高5.9个百分点以上；磷利用率达到31.2％，比普通有机肥组提高了12.9个百分点，较对比例1-5提高11.5个百分点以上；钾利用率达到68.1％，比普通有机肥组提高了8.9个百分点，较对比例1-5提高6.3个百分点以上。

对比例1-5缺少菌剂配方中组分，无法起到协同增效作用，充分证明了本发明的盐碱土改良型微生物菌剂具有显著的提高氮、磷、钾利用率的作用，并且菌剂配方中组分缺一不可。由上表可知，施用盐碱土改良型微生物菌剂较施普通有机肥组亩增产71.7kg，产量增加14.5％。

农学实验结果表明，本发明盐碱土改良型微生物菌剂配方中各组分协同增效，缺少任何一种，都达不到预期效果，只有采用本发明盐碱土改良型微生物菌剂全配方的情况下，在每亩地使用量30～80公斤的条件下能起到很好的提高肥料利用率、作物增产、提高品质、改良盐碱地的效果。本发明盐碱土改良型微生物菌剂可以作为基肥、追肥等使用，菌剂的使用量需根据土壤状况、作物品种、作物生育期、作物营养状况等因素进行确定。

Claims

1.一种盐碱土改良型微生物菌剂，组分如下，均为重量份：

所述巨大芽孢杆菌HB菌粉含芽孢5.0×10⁹～1.2×10¹⁰个/g；

所述微生物菌剂含有效活菌数1.0×10⁹～3.0×10⁹CFU/g。

2.如权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于，所述巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)HB，2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCCNO.11961。

3.一种盐碱土改良型微生物菌剂的制备方法，包括步骤如下：

(1)功能菌巨大芽孢杆菌种子液制备

A、巨大芽孢杆菌菌株活化；

(2)预处理混合料的制备

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)A中所述的活化培养基为LB培养基，其组分及重量百分比如下：胰蛋白胨0.8～1.2％，酵母提取物为0.4～0.6％，氯化钠0.4～0.6％，琼脂粉1.5～2.0％，其余为水，pH值为7.2。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)A中，所述的活化是将低温保存的巨大芽孢杆菌HB在LB平板培养基上37℃条件下培养出单菌落，挑取单菌落在LB斜面培养基上37℃条件下培养18～24h。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)B中所述的液体种子培养基组分及其重量百分比如下：葡萄糖2.0～3.0％，玉米浆干粉1.1～1.8％，黄豆粉1.5～4.0％，酵母浸膏0.1～0.2％，磷酸二氢钾0.01～0.03％，氯化钠0.01～0.02％，硫酸镁0.01～0.02％，其余为水，pH值为7.0～7.3。

7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中巨大芽孢杆菌种子液的接种量为10～19wt％，于33～35℃条件下放置25～30小时。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中巨大芽孢杆菌种子液的接种量为15wt％，34℃条件下放置30小时。

9.如权利要求1所述的盐碱土改良型微生物菌剂作为磷细菌菌剂，或者，作为促生、养地、改良盐碱土的微生物肥料的应用。

10.如权利要求1所述的盐碱土改良型微生物菌剂每亩施用量为30～80kg。