CN107955081A - 一种海参中多种营养物质的联合提取方法 - Google Patents

一种海参中多种营养物质的联合提取方法 Download PDF

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Abstract

一种海参中多种营养物质的联合提取方法，它涉及海参中营养物质的提取方法。本发明是为了解决但是目前通常的海参营养物的提取都是单一提取某一种营养物，而把其他成分都丢弃了，原料利用率不高，造成了大量的浪费的技术问题。本发明：一、海参粉碎；二、乙醇提取；三、海参多糖的提取；四、提取海参多肽。本发明的主要特点：本发明从淡干海参原料中可以分别提取海参皂甙、磷脂及不饱和脂肪酸等，还可以提取海参多糖和海参多肽等多种营养成分，提高了海参的利用率和经济价值。本发明应用于海参营养物质的提取方法。

Description

一种海参中多种营养物质的联合提取方法
技术领域
本发明涉及营养物质的提取方法。
背景技术
海参，属海参纲(Holothuroidea)，是生活在海边至8000米的海洋棘皮动物，距今已有六亿多年的历史，海参以海底藻类和浮游生物为食。海参全身长满肉刺，广布于世界各海洋中。我国南海沿岸种类较多，约有二十余种海参可供食用。海参同人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一。海参不仅是珍贵的食品，也是名贵的药材。据《本草纲目拾遗》中记载：海参，味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参。海参具有提高记忆力、延缓性腺衰老，防止动脉硬化以及抗肿瘤等作用。
现代医学研究也表明，海参主要含有海参多糖、海参皂苷(海参素或海参活素)、海参胶原蛋白、海参多肽及多种氨基酸，尤其是精氨酸含量明显高于其他食品，同时，研究发现海参还含有多种维生素和钙镁锌锗硒钒等多种微量元素，以及多种有益的脂质成分，如神经节苷脂、脑苷脂及其他的不饱和脂肪酸。
近年来，人们通过加大对海参各种活性成分的研究发现，海参这些成分具有提高机体免疫力、抑制肿瘤、抗凝血、保护神经组织的生理功能。同时具有调节人体免疫、抗菌、抗病毒、降低血糖、抗疲劳等功效。海参的脂质中富含多种不饱和脂肪酸成分，具有促进儿童脑部发育、改善神经***功能等保健作用；
海参的各种营养物质的功效不断地被发现并得到医学上的重视，根据各种营养物质的不同功效和不同健康人群的不同需求，海参的深加工，及海参不同营养成分的提取和分离技术被不断地开发出来，并将不同的提取物加工成不同功能的保健食品和药品。
但是目前通常的海参营养物的提取都是单一提取某一种营养物，而把其他成分都丢弃了，原料利用率不高，造成了大量的浪费，并且提取海参多糖收率低于2％，海参多肽收率低于10％，提取率均较低。
发明内容
本发明是为了解决目前参营养物质的提取方法的提取率较低，原料利用率不高的技术问题，而提供一种海参中多种营养物质的联合提取方法。
本发明的海参中多种营养物质的联合提取方法是按以下步骤进行的：
一、海参粉碎：将淡干海参置于烘箱中，在温度为80℃～85℃的条件下干燥6h～8h，然后用粉碎机粉碎成直径小于5mm的海参粗粉；
二、乙醇提取：
①提取：将海参粗粉倒入提取罐中，加入体积浓度为60％的乙醇水溶液，搅拌提取4h～4.5h，静置12h～13h；所述的海参粗粉和体积浓度为60％的乙醇水溶液的质量比为1:(10～11)；
②过滤：从提取罐上部用泵抽取提取液，并将提取液用板式过滤器过滤，得澄清的提取液和滤渣收集备用；
③减压蒸馏：将澄清的提取液用泵打入减压蒸馏器中，用减压蒸馏的方式回收乙醇，减压蒸馏的过程控制压力为70Pa～75Pa，温度为50℃～60℃，减压蒸馏至提取液体积剩余1/5，得黄色/黄褐色液体粗提取物；
④减压浓缩：将黄色/黄褐色液体粗提取物置于减压干燥箱中，在压力为70Pa～75Pa和温度为50℃～60℃的条件下进行减压浓缩至液体表面不再有气泡生成，得黄褐色膏状提取物；
三、海参多糖的提取：
①向步骤二②的滤渣中加入水，在温度为2℃～8℃的条件下浸泡24h～25h，得水发参；所述的步骤二②的滤渣与水的质量比为1:(5～6)；
②将水发参置于纯化水中，用匀浆机打成海参匀浆；所述的水发参与纯化水的质量比为1:(5～6)；
③酶解：将海参匀浆转移至水解罐内，水浴加热至50℃～55℃，加入蛋白酶A.S1398，在水浴温度为50～55℃的条件下水解4h，得到酶解物；所述的蛋白酶A.S1398与步骤三②中的水发参的质量比1:(65～67)；
④灭酶：将酶解物放置于酶解罐内，将蒸汽通入酶解罐夹层中加热酶解物至沸腾并保持沸腾15min～20min使蛋白酶失去活性，得到酶解液，再将常温水通入酶解罐夹层中将酶解液冷却至30℃；
⑤离心：将冷却后的酶解液用离心机离心，取上清液；
⑥醇沉：向上清液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到混合液，搅拌15min，放置在2℃～8℃的冷库中静置12h～14h，得反应液；所述的混合液中乙醇的体积浓度为60％；
⑦离心：用离心机将上步骤三⑥中的反应液离心，分别收集离心沉淀物和离心上清液；
⑧洗涤：取上步的离心沉淀物置于丙酮中，搅拌15min，用减压过滤器过滤掉丙酮，用体积浓度为95％的乙醇洗涤沉淀物，用减压过滤器过滤掉乙醇，将洗涤后的沉淀物放置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥时间为5h～6h，得海参粗多糖；所述的离心沉淀物与丙酮的质量比为1:1；
⑨海参粗多糖除蛋白：将海参粗多糖制成质量分数为5％的水溶液，加入醋酸钾使醋酸钾的浓度达到2mol/L，在温度为2℃～8℃的条件下静置过夜，用离心机离心，取沉淀，得到去蛋白的海参粗多糖；
⑩配制溶液：取去蛋白的海参粗多糖，加水制成10g/L的海参多糖溶液；
吸附：将树脂D392加入到海参多糖溶液中，用质量分数为10％的氢氧化钠溶液调整pH为10～11，在温度为60℃的条件下吸附5h；所述的树脂D392的质量与海参多糖溶液的体积比为1g:5mL；
结晶：用减压过滤器过滤吸附完的产物，收集滤液，用减压浓缩器在温度为60℃和压力为70Pa的条件下将滤液浓缩至原体积的18％～20％，向浓缩液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到浓缩液的乙醇溶液，在温度为2℃～8℃的条件下静置12h，用离心机离心，取沉淀放于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃，压力为150Pa，减压干燥5h～6h，即得海参多糖；所述的浓缩液的乙醇溶液中乙醇的体积浓度为60％；
四、提取海参多肽：
①脱苦、脱色：向步骤三⑦中得到的离心上清液中投入树脂D280，震荡吸附2h～2.5h，用减压过滤器过滤收集滤液；所述的树脂D280的质量和步骤三⑦中得到的离心上清液的体积比为1g:(5mL～6mL)；
②干燥:取上步骤的滤液置于减压浓缩罐中，在温度为60℃和压力为70Pa的条件下减压浓缩至原体积的20％～25％，用0.22μm的除菌滤器在0.1MPa的条件下除菌过滤，将除菌过滤液置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥15h～16h，得海参多肽。
本发明的主要特点：
本发明从淡干海参原料中，可以分别提取海参皂甙、磷脂及不饱和脂肪酸等(步骤二④中得到的黄褐色膏状提取物)，此膏状提取物为淡干海参总质量的8％～10％，其中，海参皂甙约为20％，磷脂约为30％，不饱和脂肪酸约为30％，以及其他微量营养成分，如脂溶性氨基酸，维生素A、维生素E、烟酸、视黄醇、硫胺素、核黄素、尼克酸等及微量元素如：钙、磷、钾、镁、锌、硒等；
还可以提取海参多糖(收率为2.6％)和海参多肽(收率为12％)等多种营养成分，提高了海参的利用率和经济价值；
由于海参的不同的营养成分具有不同的滋补功效，经综合提取分离后可以进一步加工成为具有不同针对性作用的保健品，可以进一步强化其保健功效；
本发明在于联合提取，同时分离多种营养物，从而提高了海参的综合利用率和开发价值。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式为一种海参中多种营养物质的联合提取方法，具体是按以下步骤进行的：
一、海参粉碎：将淡干海参置于烘箱中，在温度为80℃～85℃的条件下干燥6h～8h，然后用粉碎机粉碎成直径小于5mm的海参粗粉；
二、乙醇提取：
①提取：将海参粗粉倒入提取罐中，加入体积浓度为60％的乙醇水溶液，搅拌提取4h～4.5h，静置12h～13h；所述的海参粗粉和体积浓度为60％的乙醇水溶液的质量比为1:(10～11)；
②过滤：从提取罐上部用泵抽取提取液，并将提取液用板式过滤器过滤，得澄清的提取液和滤渣收集备用；
③减压蒸馏：将澄清的提取液用泵打入减压蒸馏器中，用减压蒸馏的方式回收乙醇，减压蒸馏的过程控制压力为70Pa～75Pa，温度为50℃～60℃，减压蒸馏至提取液体积剩余1/5，得黄色/黄褐色液体粗提取物；
④减压浓缩：将黄色/黄褐色液体粗提取物置于减压干燥箱中，在压力为70Pa～75Pa和温度为50℃～60℃的条件下进行减压浓缩至液体表面不再有气泡生成，得黄褐色膏状提取物；
三、海参多糖的提取：
①向步骤二②的滤渣中加入水，在温度为2℃～8℃的条件下浸泡24h～25h，得水发参；所述的步骤二②的滤渣与水的质量比为1:(5～6)；
②将水发参置于纯化水中，用匀浆机打成海参匀浆；所述的水发参与纯化水的质量比为1:(5～6)；
③酶解：将海参匀浆转移至水解罐内，水浴加热至50℃～55℃，加入蛋白酶A.S1398，在水浴温度为50～55℃的条件下水解4h，得到酶解物；所述的蛋白酶A.S1398与步骤三②中的水发参的质量比1:(65～67)；
④灭酶：将酶解物放置于酶解罐内，将蒸汽通入酶解罐夹层中加热酶解物至沸腾并保持沸腾15min～20min使蛋白酶失去活性，得到酶解液，再将常温水通入酶解罐夹层中将酶解液冷却至30℃；
⑤离心：将冷却后的酶解液用离心机离心，取上清液；
⑥醇沉：向上清液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到混合液，搅拌15min，放置在2℃～8℃的冷库中静置12h～14h，得反应液；所述的混合液中乙醇的体积浓度为60％；
⑦离心：用离心机将上步骤三⑥中的反应液离心，分别收集离心沉淀物和离心上清液；
⑧洗涤：取上步的离心沉淀物置于丙酮中，搅拌15min，用减压过滤器过滤掉丙酮，用体积浓度为95％的乙醇洗涤沉淀物，用减压过滤器过滤掉乙醇，将洗涤后的沉淀物放置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥时间为5h～6h，得海参粗多糖；所述的离心沉淀物与丙酮的质量比为1:1；
⑨海参粗多糖除蛋白：将海参粗多糖制成质量分数为5％的水溶液，加入醋酸钾使醋酸钾的浓度达到2mol/L，在温度为2℃～8℃的条件下静置过夜，用离心机离心，取沉淀，得到去蛋白的海参粗多糖；
⑩配制溶液：取去蛋白的海参粗多糖，加水制成10g/L的海参多糖溶液；
吸附：将树脂D392加入到海参多糖溶液中，用质量分数为10％的氢氧化钠溶液调整pH为10～11，在温度为60℃的条件下吸附5h；所述的树脂D392的质量与海参多糖溶液的体积比为1g:5mL；
结晶：用减压过滤器过滤吸附完的产物，收集滤液，用减压浓缩器在温度为60℃和压力为70Pa的条件下将滤液浓缩至原体积的18％～20％，向浓缩液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到浓缩液的乙醇溶液，在温度为2℃～8℃的条件下静置12h，用离心机离心，取沉淀放于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃，压力为150Pa，减压干燥5h～6h，即得海参多糖；所述的浓缩液的乙醇溶液中乙醇的体积浓度为60％；
四、提取海参多肽：
①脱苦、脱色：向步骤三⑦中得到的离心上清液中投入树脂D280，震荡吸附2h～2.5h，用减压过滤器过滤收集滤液；所述的树脂D280的质量和步骤三⑦中得到的离心上清液的体积比为1g:(5mL～6mL)；
②干燥:取上步骤的滤液置于减压浓缩罐中，在温度为60℃和压力为70Pa的条件下减压浓缩至原体积的20％～25％，用0.22μm的除菌滤器在0.1MPa的条件下除菌过滤，将除菌过滤液置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥15h～16h，得海参多肽。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤一中将淡干海参置于烘箱中，在温度为80℃的条件下干燥8h，然后用粉碎机粉碎成直径小于5mm的海参粗粉。其他与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是：步骤二④中将黄色和黄褐色液体粗提取物置于减压干燥箱中，在压力为70Pa和温度为60℃的条件下进行减压浓缩至液体表面不再有气泡生成，得黄褐色膏状提取物。其他与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：步骤三③所述的蛋白酶A.S1398的活力为20万单位/g。其他与具体实施方式一至三之一相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是：步骤四①中向步骤三⑦中得到的离心上清液中投入树脂D280，震荡吸附2h，用减压过滤器过滤收集滤液；所述的树脂D280的质量和步骤三⑦中得到的离心上清液的体积比为1g:5mL。其他与具体实施方式一至四之一相同。
用以下试验对本发明进行验证：
试验一：本试验为一种海参中多种营养物质的联合提取方法，具体是按以下步骤进行的：
一、海参粉碎：将淡干海参置于烘箱中，在温度为80℃的条件下干燥8h，然后用粉碎机粉碎成直径小于5mm的海参粗粉；
二、乙醇提取：
①提取：将海参粗粉倒入提取罐中，加入体积浓度为60％的乙醇水溶液，搅拌提取4h，静置12h；所述的海参粗粉和体积浓度为60％的乙醇水溶液的质量比为1:10；
②过滤：从提取罐上部用泵抽取提取液，并将提取液用板式过滤器过滤，得澄清的提取液和滤渣收集备用；
③减压蒸馏：将澄清的提取液用泵打入减压蒸馏器中，用减压蒸馏的方式回收乙醇，减压蒸馏的过程控制压力为70Pa，温度为60℃，减压蒸馏至提取液体积剩余1/5，得黄色/黄褐色液体粗提取物；
④减压浓缩：将黄色/黄褐色液体粗提取物置于减压干燥箱中，在压力为70Pa和温度为60℃的条件下进行减压浓缩至液体表面不再有气泡生成，得黄褐色膏状提取物；
三、海参多糖的提取：
①向步骤二②的滤渣中加入水，在温度为6℃的条件下浸泡24h，得水发参；所述的步骤二②的滤渣与水的质量比为1:5；
②将水发参置于纯化水中，用匀浆机打成海参匀浆；所述的水发参与纯化水的质量比为1:5；
③酶解：将海参匀浆转移至水解罐内，水浴加热至50℃，加入蛋白酶A.S1398，在水浴温度为50的条件下水解4h，得到酶解物；所述的蛋白酶A.S1398与步骤三②中的水发参的质量比1:66.7；所述的蛋白酶A.S1398的活力为20万单位/g；
④灭酶：将酶解物放置于酶解罐内，将蒸汽通入酶解罐夹层中加热酶解物至沸腾并保持沸腾15min使蛋白酶失去活性，得到酶解液，再将常温水通入酶解罐夹层中将酶解液冷却至30℃；
⑤离心：将冷却后的酶解液用离心机离心，取上清液；
⑥醇沉：向上清液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到混合液，搅拌15min，放置在6℃的冷库中静置12h，得反应液；所述的混合液中乙醇的体积浓度为60％；
⑦离心：用离心机将上步骤三⑥中的反应液离心，分别收集离心沉淀物和离心上清液；
⑧洗涤：取上步的离心沉淀物置于丙酮中，搅拌15min，用减压过滤器过滤掉丙酮，用体积浓度为95％的乙醇洗涤沉淀物，用减压过滤器过滤掉乙醇，将洗涤后的沉淀物放置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥时间为6h，得海参粗多糖；所述的离心沉淀物与丙酮的质量比为1:1；
⑨海参粗多糖除蛋白：将海参粗多糖制成质量分数为5％的水溶液，加入醋酸钾使醋酸钾的浓度达到2mol/L，在温度为6℃的条件下静置过夜，用离心机离心，取沉淀，得到去蛋白的海参粗多糖；
⑩配制溶液：取去蛋白的海参粗多糖，加水制成10g/L的海参多糖溶液；
吸附：将树脂D392加入到海参多糖溶液中，用质量分数为10％的氢氧化钠溶液调整pH为10，在温度为60℃的条件下吸附5h；所述的树脂D392的质量与海参多糖溶液的体积比为1g:5mL；
结晶：用减压过滤器过滤吸附完的产物，收集滤液，用减压浓缩器在温度为60℃和压力为70Pa的条件下将滤液浓缩至原体积的20％，向浓缩液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到浓缩液的乙醇溶液，在温度为6℃的条件下静置12h，用离心机离心，取沉淀放于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃，压力为150Pa，减压干燥5h～6h，即得海参多糖；所述的浓缩液的乙醇溶液中乙醇的体积浓度为60％；
四、提取海参多肽：
①脱苦、脱色：向步骤三⑦中得到的离心上清液中投入树脂D280，震荡吸附2h，用减压过滤器过滤收集滤液；所述的树脂D280的质量和步骤三⑦中得到的离心上清液的体积比为1g:5mL；
②干燥:取上步骤的滤液置于减压浓缩罐中，在温度为60℃和压力为70Pa的条件下减压浓缩至原体积的20％，用0.22μm的除菌滤器在0.1MPa的条件下除菌过滤，将除菌过滤液置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥15h，得海参多肽。
本试验从淡干海参原料中，可以分别提取海参皂甙、磷脂及不饱和脂肪酸等(步骤二④中得到的黄褐色膏状提取物)，此膏状提取物为淡干海参总质量的8％～10％，其中，海参皂甙约为20％，磷脂约为30％，不饱和脂肪酸约为30％，以及其他微量营养成分，如脂溶性氨基酸，维生素A、维生素E、烟酸、视黄醇、硫胺素、核黄素、尼克酸等及微量元素如：钙、磷、钾、镁、锌、硒等；
还可以提取海参多糖(收率为2.6％)和海参多肽(收率为12％)等多种营养成分，提高了海参的利用率和经济价值；
由于海参的不同的营养成分具有不同的滋补功效，经综合提取分离后可以进一步加工成为具有不同针对性作用的保健品，可以进一步强化其保健功效。

Claims (5)

1.一种海参中多种营养物质的联合提取方法，其特征在于海参中多种营养物质的联合提取方法是按以下步骤进行的：
一、海参粉碎：将淡干海参置于烘箱中，在温度为80℃～85℃的条件下干燥6h～8h，然后用粉碎机粉碎成直径小于5mm的海参粗粉；
二、乙醇提取：
①提取：将海参粗粉倒入提取罐中，加入体积浓度为60％的乙醇水溶液，搅拌提取4h～4.5h，静置12h～13h；所述的海参粗粉和体积浓度为60％的乙醇水溶液的质量比为1:(10～11)；
②过滤：从提取罐上部用泵抽取提取液，并将提取液用板式过滤器过滤，得澄清的提取液和滤渣收集备用；
③减压蒸馏：将澄清的提取液用泵打入减压蒸馏器中，用减压蒸馏的方式回收乙醇，减压蒸馏的过程控制压力为70Pa～75Pa，温度为50℃～60℃，减压蒸馏至提取液体积剩余1/5，得黄色/黄褐色液体粗提取物；
④减压浓缩：将黄色/黄褐色液体粗提取物置于减压干燥箱中，在压力为70Pa～75Pa和温度为50℃～60℃的条件下进行减压浓缩至液体表面不再有气泡生成，得黄褐色膏状提取物；
三、海参多糖的提取：
①向步骤二②的滤渣中加入水，在温度为2℃～8℃的条件下浸泡24h～25h，得水发参；所述的步骤二②的滤渣与水的质量比为1:(5～6)；
②将水发参置于纯化水中，用匀浆机打成海参匀浆；所述的水发参与纯化水的质量比为1:(5～6)；
③酶解：将海参匀浆转移至水解罐内，水浴加热至50℃～55℃，加入蛋白酶A.S1398，在水浴温度为50～55℃的条件下水解4h，得到酶解物；所述的蛋白酶A.S1398与步骤三②中的水发参的质量比1:(65～67)；
④灭酶：将酶解物放置于酶解罐内，将蒸汽通入酶解罐夹层中加热酶解物至沸腾并保持沸腾15min～20min使蛋白酶失去活性，得到酶解液，再将常温水通入酶解罐夹层中将酶解液冷却至30℃；
⑤离心：将冷却后的酶解液用离心机离心，取上清液；
⑥醇沉：向上清液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到混合液，搅拌15min，放置在2℃～8℃的冷库中静置12h～14h，得反应液；所述的混合液中乙醇的体积浓度为60％；
⑦离心：用离心机将上步骤三⑥中的反应液离心，分别收集离心沉淀物和离心上清液；
⑧洗涤：取上步的离心沉淀物置于丙酮中，搅拌15min，用减压过滤器过滤掉丙酮，用体积浓度为95％的乙醇洗涤沉淀物，用减压过滤器过滤掉乙醇，将洗涤后的沉淀物放置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥时间为5h～6h，得海参粗多糖；所述的离心沉淀物与丙酮的质量比为1:1；
⑨海参粗多糖除蛋白：将海参粗多糖制成质量分数为5％的水溶液，加入醋酸钾使醋酸钾的浓度达到2mol/L，在温度为2℃～8℃的条件下静置过夜，用离心机离心，取沉淀，得到去蛋白的海参粗多糖；
⑩配制溶液：取去蛋白的海参粗多糖，加水制成10g/L的海参多糖溶液；
吸附：将树脂D392加入到海参多糖溶液中，用质量分数为10％的氢氧化钠溶液调整pH为10～11，在温度为60℃的条件下吸附5h；所述的树脂D392的质量与海参多糖溶液的体积比为1g:5mL；
结晶：用减压过滤器过滤吸附完的产物，收集滤液，用减压浓缩器在温度为60℃和压力为70Pa的条件下将滤液浓缩至原体积的18％～20％，向浓缩液中加入体积浓度为95％的乙醇，得到浓缩液的乙醇溶液，在温度为2℃～8℃的条件下静置12h，用离心机离心，取沉淀放于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃，压力为150Pa，减压干燥5h～6h，即得海参多糖；所述的浓缩液的乙醇溶液中乙醇的体积浓度为60％；
四、提取海参多肽：
①脱苦、脱色：向步骤三⑦中得到的离心上清液中投入树脂D280，震荡吸附2h～2.5h，用减压过滤器过滤收集滤液；所述的树脂D280的质量和步骤三⑦中得到的离心上清液的体积比为1g:(5mL～6mL)；
②干燥:取上步骤的滤液置于减压浓缩罐中，在温度为60℃和压力为70Pa的条件下减压浓缩至原体积的20％～25％，用0.22μm的除菌滤器在0.1MPa的条件下除菌过滤，将除菌过滤液置于减压干燥箱中，设置减压干燥箱的温度为80℃、压力为150Pa，减压干燥15h～16h，得海参多肽。
2.根据权利要求1所述的一种海参中多种营养物质的联合提取方法，其特征在于步骤一中将淡干海参置于烘箱中，在温度为80℃的条件下干燥8h，然后用粉碎机粉碎成直径小于5mm的海参粗粉。
3.根据权利要求1所述的一种海参中多种营养物质的联合提取方法，其特征在于步骤二④中将黄色和黄褐色液体粗提取物置于减压干燥箱中，在压力为70Pa和温度为60℃的条件下进行减压浓缩至液体表面不再有气泡生成，得黄褐色膏状提取物。
4.根据权利要求1所述的一种海参中多种营养物质的联合提取方法，其特征在于步骤三③所述的蛋白酶A.S1398的活力为20万单位/g。
5.根据权利要求1所述的一种海参中多种营养物质的联合提取方法，其特征在于步骤四①中向步骤三⑦中得到的离心上清液中投入树脂D280，震荡吸附2h，用减压过滤器过滤收集滤液；所述的树脂D280的质量和步骤三⑦中得到的离心上清液的体积比为1g:5mL。
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