CN107936312A - 交联透明质酸钠生物膜的制备方法 - Google Patents

交联透明质酸钠生物膜的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107936312A
CN107936312A CN201711226835.9A CN201711226835A CN107936312A CN 107936312 A CN107936312 A CN 107936312A CN 201711226835 A CN201711226835 A CN 201711226835A CN 107936312 A CN107936312 A CN 107936312A
Authority
CN
China
Prior art keywords
gel
biomembrane
sodium
hyaluronic acid
cross
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201711226835.9A
Other languages
English (en)
Inventor
韦忠明
黄启斌
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guilin Pavay Biological Technology Co Ltd
Original Assignee
Guilin Pavay Biological Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guilin Pavay Biological Technology Co Ltd filed Critical Guilin Pavay Biological Technology Co Ltd
Priority to CN201711226835.9A priority Critical patent/CN107936312A/zh
Publication of CN107936312A publication Critical patent/CN107936312A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/24—Crosslinking, e.g. vulcanising, of macromolecules
    • C08J3/246—Intercrosslinking of at least two polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/02—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques
    • C08J3/03—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques in aqueous media
    • C08J3/075—Macromolecular gels
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2305/00—Characterised by the use of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08J2301/00 or C08J2303/00
    • C08J2305/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2471/00—Characterised by the use of polyethers obtained by reactions forming an ether link in the main chain; Derivatives of such polymers
    • C08J2471/02—Polyalkylene oxides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08K—Use of inorganic or non-macromolecular organic substances as compounding ingredients
    • C08K5/00—Use of organic ingredients
    • C08K5/0008—Organic ingredients according to more than one of the "one dot" groups of C08K5/01 - C08K5/59
    • C08K5/0025—Crosslinking or vulcanising agents; including accelerators

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种交联透明质酸钠生物膜的制备方法，包括以下步骤：1)将透明质酸钠干粉溶解于氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.01～0.05％的聚乙二醇，在35～50℃下保温5～8h,得到凝胶X；2)将凝胶X在500～1000MPa下压制1～3min；3)调节压制后的凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液溶胀18～36h；4)将溶胀后的凝胶X降温至‑4℃，并保温处理1～3h,冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。交联后的透明质酸钠生物膜具有比较稳定的网状结构，能有效的提高透明质酸的抗降解性、延长体内存留时间。

Description

交联透明质酸钠生物膜的制备方法
技术领域
本发明涉及一种透明质酸钠凝胶技术领域，具体涉及一种交联透明质酸钠生物膜的制备方法。
背景技术
透明质酸是重复二塘结构单元β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖相互标题链接构成的线性黏多糖。透明质酸是构成人体细胞间质、眼玻璃体、关节滑液等***的主要成分，在体内发挥保水、维持细胞外空间、调节渗透压、润滑、促进细胞修复的重要生理功能。由于透明质酸具有粘弹性分离、粘弹性保护和粘弹性填充等特性，已使其在普外科和妇产科防止术后粘连的临床医学以及烧伤、创伤和整形外科等医学领域中得到广泛应用。但是由于天然透明质酸在体内容易降解，在体内长期存留，难以发挥其优异的物理化学特性，往往会限制其疗效的发挥。近年来在预防粘连和软组织填充等方面的应用，要求透明质酸在人体内应具有较长的存留时间，有时甚至要求在体内长期存留。通常为了获得较长时间有效的透明质酸钠填充物，采用修饰和交联的方法对透明质酸分子进行改造，改变透明质酸的某些属性。交联透明质酸钠凝胶同时是将透明质酸与交联剂在水溶液中搅拌混合，通过交联剂使透明质酸钠高分子链间化学键和来制备。所用的交联剂，当凝胶在生物体内分解后，残留的交联剂成分对生物体来说被识别为异物，引发炎症等不良影响。因此，为确保生物体适合性，需要制备低的交联度的凝胶。但是，常规的交联方法，如果减少交联剂的添加量，所得的凝胶粘弹性降低，不柔软。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种交联透明质酸钠生物膜的制备方法，交联后的透明质酸钠生物膜具有比较稳定的网状结构，能有效的提高透明质酸的抗降解性、延长体内存留时间。
本发明提供的技术方案是交联透明质酸钠生物膜的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)将透明质酸钠干粉溶解于氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.01～0.05％的聚乙二醇，在35～50℃下保温5～8h,得到凝胶X；
2)将凝胶X在500～1000MPa下压制1～3min；
3)调节压制后的凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液溶胀18～36h；
4)将溶胀后的凝胶X降温至-4℃，并保温处理1～3h,冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。
步骤1)中，氢氧化钠溶液的质量浓度为10～20％。氢氧化钠水溶液中氢氧化钠的质量百分比为10～20％。聚乙二醇的用量为透明质酸钠重量的0.02％。
步骤2)中，凝胶X尚未经过平衡和溶胀阶段，还处于不稳定阶段，而且本申请中交联剂的添加量较少，透明质酸钠和交联剂之间的交联度还不充分，此时对凝胶X进行高压处理，可以促进高分子链段沿着压力方向取向形成更加杂乱排列，导致高分子链段互相缠结相互穿透，进一步形成搭接紧密的三维网状结构。
步骤3)中，溶胀温度为40～50℃。溶胀时间为24h。
步骤4)中，由于步骤2)的高压作用，促进高分子链互相缠结形成稳定的三维网状结构，与此同时，交联剂的少量添加，导致高分子链交联十分紧密，高分子链的自由链端也发生了互相缠结，这会导致凝胶网络产生缺陷而降低弹性。因此，本申请将凝胶X降温至-4℃，并保温处理1～3h,可以使大分子链进行构象调整，链的局部运动平行地排起来，促使高分子链的自由端解缠结，使得成品生物膜柔软。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1)本发明交联后的透明质酸钠生物膜具有比较稳定的网状结构，能有效的提高透明质酸的抗降解性、延长体内存留时间。
2)本发明添加少量交联剂即可得到十分稳定的网状结构，而且凝胶柔软性好。
具体实施方式
以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
实施例1
1)将透明质酸钠干粉溶解于质量浓度为10％的氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.01％的聚乙二醇，在35℃下保温5h,得到凝胶X；
2)将凝胶X在500MPa下压制1min；
3)调节压制后的凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液，在40℃下溶胀18h；
4)将溶胀后的凝胶X降温至-4℃，并保温处理1h,冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。
1、耐酶性测试方法：精密称取上述凝胶，加入到0.1mogl/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)5ml和透明质酸酶液(100U/ml)5ml，混合均匀，置于37℃水浴中酶解24h，然后在100℃煮沸10min灭活。0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液1.0ml，加水定容至10ml。采用改良咔唑显色法测定糖醛酸含量，乘以2.07后折算为加入酶液的样品中交联透明质酸钠的含量a；未加酶样品中的交联透明质酸钠含量为b，计算酶降解率＝a/b×100％。酶降解率越低，表明凝胶的耐酶性越好，凝胶在体内填充的维持时间越长。
2、动力黏度测定：采用旋转式黏度计测定法，按照《中华人民共和国药典》(2010版)二部附录VI G第二法测定，在剪切速率不小于0.25HZ,(25±0.1)℃条件下，根据在旋转过程中作用于液体介质中的切应力大小完成测定，并以下式计算凝胶的动力黏度：
η＝K·(T/ω)
式中：K为用已知黏度的标准液测得的旋转式黏度计常数；
T为扭力矩；
ω为角速度。
3、特性黏数测定：采用乌氏粘度计测定特性黏数，根据《中华人民共和国药典》(2010版)二部附录VI G第三法测定。
经检测，透明质酸钠生物膜的酶降解率为3.5％，动力黏度为50.8×104mPa·s，特性黏数为4661.8cm3/g。
对照例1
1)将透明质酸钠干粉溶解于质量浓度为10％的氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.01％的聚乙二醇，在35℃下保温5h,得到凝胶X；
2)调节凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液，在40℃下溶胀18h,冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。
按照实施例1的方法进行检测，透明质酸钠生物膜的酶降解率为13.2％,动力黏度为25.1×104mPa·s，特性黏数为2682.6cm3/g。
实施例2
1)将透明质酸钠干粉溶解于质量浓度为20％的氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.05％的聚乙二醇，在50℃下保温8h,得到凝胶X；
2)将凝胶X在1000MPa下压制3min；
3)调节压制后的凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液，在50℃下溶胀36h；
4)将溶胀后的凝胶X降温至-4℃，并保温处理3h,冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。
按照实施例1的方法进行检测，透明质酸钠生物膜的酶降解率为3.8％,动力黏度为56.1×104mPa·s，特性黏数为4589.7cm3/g。
实施例3
1)将透明质酸钠干粉溶解于质量浓度为15％的氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.02％的聚乙二醇，在45℃下保温6h,得到凝胶X；
2)将凝胶X在800MPa下压制2min；
3)调节压制后的凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液，在45℃下溶胀24h；
4)将溶胀后的凝胶X降温至-4℃，并保温处理2h,冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。
按照实施例1的方法进行检测，透明质酸钠生物膜的酶降解率为3.3％,动力黏度为58.9×104mPa·s，特性黏数为4739.4cm3/g。
实施例4
1)将透明质酸钠干粉溶解于质量浓度为10％的氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.05％的聚乙二醇，在35℃下保温8h,得到凝胶X；
2)将凝胶X在500MPa下压制3min；
3)调节压制后的凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液，在40℃下溶胀36h；
4)将溶胀后的凝胶X降温至-4℃，并保温处理1h,冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。
按照实施例1的方法进行检测，透明质酸钠生物膜的酶降解率为3.4％,动力黏度为55.6×104mPa·s，特性黏数为4553.1cm3/g。

Claims (5)

1.交联透明质酸钠生物膜的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)将透明质酸钠干粉溶解于氢氧化钠溶液中，加入透明质酸钠干粉重量0.01～0.05％的聚乙二醇，在35～50℃下保温5～8h,得到凝胶X；
2)将凝胶X在500～1000MPa下压制1～3min；
3)调节压制后的凝胶X的pH值至中性，加入磷酸盐缓冲液溶胀18～36h；
4)将溶胀后的凝胶X降温至-4℃，并保温处理1～3h，冷冻干燥，压制成膜，得到透明质酸钠生物膜。
2.根据权利要求1所述的交联透明质酸钠生物膜的制备方法，其特征在于：氢氧化钠溶液的质量浓度为10～20％。
3.根据权利要求1所述的交联透明质酸钠生物膜的制备方法，其特征在于：溶胀温度为40～50℃。
4.根据权利要求1所述的交联透明质酸钠生物膜的制备方法，其特征在于：溶胀时间为24h。
5.根据权利要求1所述的交联透明质酸钠生物膜的制备方法，其特征在于：聚乙二醇的用量为透明质酸钠重量的0.02％。
CN201711226835.9A 2017-11-29 2017-11-29 交联透明质酸钠生物膜的制备方法 Pending CN107936312A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711226835.9A CN107936312A (zh) 2017-11-29 2017-11-29 交联透明质酸钠生物膜的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711226835.9A CN107936312A (zh) 2017-11-29 2017-11-29 交联透明质酸钠生物膜的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107936312A true CN107936312A (zh) 2018-04-20

Family

ID=61947666

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711226835.9A Pending CN107936312A (zh) 2017-11-29 2017-11-29 交联透明质酸钠生物膜的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107936312A (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101892559A (zh) * 2009-05-21 2010-11-24 中国科学院化学研究所 透明质酸和聚乙二醇的复合纤维膜材料及其制法和用途
CN104225677A (zh) * 2013-06-13 2014-12-24 山东省生物药物研究院 交联透明质酸细胞支架材料及其制备方法和应用
CN104814943A (zh) * 2015-04-15 2015-08-05 常州大学 一种载盐酸阿霉素交联透明质酸复合膜的制备方法
CN106589424A (zh) * 2016-12-12 2017-04-26 华熙福瑞达生物医药有限公司 一种注射用交联透明质酸凝胶及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101892559A (zh) * 2009-05-21 2010-11-24 中国科学院化学研究所 透明质酸和聚乙二醇的复合纤维膜材料及其制法和用途
CN104225677A (zh) * 2013-06-13 2014-12-24 山东省生物药物研究院 交联透明质酸细胞支架材料及其制备方法和应用
CN104814943A (zh) * 2015-04-15 2015-08-05 常州大学 一种载盐酸阿霉素交联透明质酸复合膜的制备方法
CN106589424A (zh) * 2016-12-12 2017-04-26 华熙福瑞达生物医药有限公司 一种注射用交联透明质酸凝胶及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
贾柯: ""新型透明质酸钠凝胶的制备及性能研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Rinaudo Main properties and current applications of some polysaccharides as biomaterials
KR101597333B1 (ko) 생분해성 단일-상 점착성 히드로겔
KR101868183B1 (ko) 가교된 겔의 제조 공정
TWI789338B (zh) 原位可交聯的多醣組合物之用途、關聯於其之多筒注射系統、用於形成原位可交聯的多醣組合物之衍生物之組合及用於形成原位可交聯的多醣組合物之套組
JP2022058693A (ja) 多糖によって架橋されているタンパク質の調製および／または調合物
CN104327311B (zh) 一种透明质酸复合交联水凝胶及其制备方法
TWI683674B (zh) 具有改良抗性之多糖軟組織充填劑
CN105473623A (zh) 用于制备交联的透明质酸产物的方法
JP2015500895A (ja) 水不溶性ゲル組成物およびその製造方法
CN101244290A (zh) 一种用于组织填充的交联透明质酸微粒凝胶的制备方法
JP2006522851A (ja) 低分子量及び高分子量の多糖の架橋；注射用単相ヒドロゲルの調製；多糖及び得られたヒドロゲル
US20100172953A1 (en) Biopolymer Based Implantable Degradable Devices
CN104086788A (zh) 一种注射用修饰透明质酸钠凝胶
CN106714780A (zh) 热凝胶组合物
CN109806182B (zh) 一种含透明质酸和氨基酸的组合物及其制备方法和应用
CN107141519A (zh) 一种改性壳聚糖基超吸水凝胶及其制备和应用
CN107955194A (zh) 高质量交联透明质酸钠凝胶的制备方法
CN106999626B (zh) 生物相容性组合物以及制备方法
CN110655662B (zh) 一种橄榄苦苷交联制备透明质酸钠凝胶的方法及透明质酸钠凝胶
CN107880288A (zh) 一种透明质酸钠凝胶的制备方法
CN107936312A (zh) 交联透明质酸钠生物膜的制备方法
CN111249172A (zh) 一种美容注射凝胶及其制备方法
CN108034060A (zh) 一种透明质酸钠生物膜的制备方法
CN107793577A (zh) 一种医用透明质酸钠凝胶的制备方法
CN106167549A (zh) 一种缓降解交联透明质酸凝胶的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180420