CN107921113A - 免疫调节组合物及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本公开提供包含活的新月柄杆菌(CC)的免疫调节组合物。本公开的免疫调节组合物可用于调节个体中的免疫应答。本公开因此提供调节个体中的免疫应答的方法,所述方法涉及向所述个体施用包含活CC的免疫调节组合物。
Description
引言
新月柄杆菌(Caulobacter crescentus)为非病原的、无害的、水生革兰氏阴性细菌,其生长在~23℃的许多土壤和淡水环境中。已对柄杆菌属研究了近50年。主要实验室菌株(新月柄杆菌CB15)已在遗传和生物化学上得到充分表征,并且已对新月柄杆菌的基因组进行测序。柄杆菌属容易使用标准实验室设备进行生长。它们还容易在商用的发酵罐中在无动物蛋白的限定基本培养基中生长至至少30个光密度单位(OD)。
在本领域中需要免疫调节组合物,其可用于预防和/或治疗以下病症:如炎症、不希望的炎性活性、加剧的免疫应答、异常的免疫应答、免疫失调及自身免疫疾病。
概述
本公开提供包含新月柄杆菌(CC)的免疫调节组合物。本公开的免疫调节组合物可用于调节个体中的免疫应答。本公开提供调节个体中的免疫应答的方法,所述方法涉及向所述个体施用包含CC的免疫调节组合物。
附图简述
图1示出了在从用CC和PBS每周两次经由鼻内和口服途径处理的小鼠中分离的脾细胞中伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导的促炎性细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-6及IL-17A)产生的减少。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+标准偏差(SD)。
图2示出了在从用CC和磷酸盐缓冲盐水(PBS)每周两次经由鼻内和口服途径处理的小鼠中分离的脾细胞中的美洲商陆有丝***原(PWM)诱导的促炎性细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-6及IL-17A)产生的减少。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+SD。
图3A-3C示出了在从用CC和PBS每周两次经由鼻内和口服途径处理并用培养基(A)、PWM(B)及ConA(C)离体刺激24h的小鼠中分离的脾细胞中的IL-10的诱导。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+SD。
图4示出了在从用CC和PBS每周两次经口处理的小鼠中分离的脾细胞中IL-10的诱导分布。用LPS体外刺激细胞24小时或72小时。
图5示出了在从用CC和PBS每周两次经口施用的小鼠中分离的肠系膜***中细胞因子(IFN-γ、IL-6及IL-17A)的分布减少。用脂多糖(LPS)体外刺激细胞24小时。数据显示为平均值+SD。
图6示出了在从每周两次喂予CC和PBS的小鼠中分离的脾细胞中产生IL-10的CD4+和CD8+T细胞的增强。呈现表达细胞内IL-10且对CD3和CD4或CD8呈阳性的细胞百分比。
图7示出了在从用CC和PBS每周一次经由皮下途径处理的小鼠中分离的脾细胞中ConA诱导的促炎性细胞因子(IFN-γ、TNF-α及IL-6)产生的调节。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+SD。
图8示出了在用CC或PBS每周一次经口处理的小鼠中调控性淋巴细胞(CD8T细胞、NKT细胞及NK细胞)的诱导。数据代表表达CD25、FoxP3或PD-1的CD3+CD8+、CD3+CD49b+及CD3-CD49b+群。
图9示出了在用CC或PBS每周一次皮下处理的小鼠中调控性淋巴细胞(CD4和CD8T细胞)的诱导。数据代表表达CD25和FoxP3的CD3+CD4+和CD3+CD8+群。
图10示出了在来自用7mg/Kg的LPS体内激发后2小时(hrs)用CC和PBS经口处理的小鼠的血清样品中IL-1β、IL-6及IL-10的调节。LPS激发的小鼠在血清中的炎性细胞因子有显著增加,这在用CC处理的小鼠中是减少的。相比之下,CC处理造成LPS激发的小鼠中IL-10的增加。
图11示出了在来自用7mg/Kg的LPS体内激发2h后用CC和PBS经口处理的小鼠的肝脏和肺脏匀浆样品中TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-17A的调节。将所用的CC以两种形式制备:CC-1(在液体胨酵母提取物(PYE)培养基中生长且在室温下在盐水中储存的CC),和CC-2(在液体PYE培养基中生长且在4℃下冰箱中储存的CC)。数据表示为三个孔的平均值+SD。
图12示出了在来自用7mg/Kg的LPS体内激发2h后用CC和PBS经口处理的小鼠的血清样品中的生化参数(GLU:葡萄糖;GLOB:球蛋白;ALT:丙氨酸转氨酶;TP:总磷酸盐;TBIL:总胆红素)。将所用的CC以两种形式制备:CC-1(在液体PYE培养基中生长且在室温下在盐水中储存的CC),和CC-2(在液体PYE培养基中生长且在4℃下冰箱中储存的CC)。
图13示出了从用7mg/Kg的LPS体内激发2h后用CC和PBS经口处理的小鼠中分离的肝脏切片的苏木精和曙红(H&E)染色。将所用的CC以两种形式制备:CC-1(在液体PYE培养基中生长且在室温下在盐水中储存的CC),和CC-2(在液体PYE培养基中生长且在4℃下冰箱中储存的CC)。
图14示出了在Aldra(咪喹莫特)诱导的牛皮癣小鼠模型中用CC和PBS经口处理两周(5天/周)后的细胞因子(IFN-γ、IL-6、IL-17A及IL-22)的调节。从小鼠中收获脾细胞并在培养基中离体培养4天,然后收集上清液并测试细胞因子。
图15示出了在DSS(葡聚糖硫酸钠)诱导的IBD(炎性肠病)小鼠模型中细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-8、MIP-1α)的调节。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+SD。
图16示出了在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型中用CC经口处理之后的自身抗原特异性T细胞增殖及抗体(IgG和IgG2a)应答的抑制。
图17示出了在卵清蛋白诱导的过敏性气道炎症模型中用CC经口处理后的过敏原特异性IgE抗体应答的抑制。
图18示出了在卵清蛋白诱导的过敏性气道炎症模型中用CC经口处理后在脾脏中的过敏原特异性细胞因子(IL-4和IL-6)的减少。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+SD。
图19示出了在卵清蛋白诱导的过敏性气道炎症模型中用CC+***(DEX)、DEX单独经口处理或无处理对照后在脾脏中的过敏原特异性细胞因子(IL-4和IL-6)的减少。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+SD。
图20示出了与未处理的高脂饮食饲喂的小鼠相比用CC的经口处理对高脂饮食的小鼠的肝脏中的促炎性细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-6及IL-1β)的作用。在开始高脂饮食之后~180天获取数据并显示为5只小鼠的平均值+SD。数据用pg/ml表示并且显示为一式三份的平均值+SD。
图21示出了与未处理的高脂饮食饲喂的小鼠相比用CC的经口处理对高脂饮食的小鼠的脾脏中的促炎性细胞因子(IFN-γ、TNF-α及IL-6)的作用。在开始高脂饮食之后~180天获取数据并显示为5只小鼠的平均值+SD。数据用pg/ml表示。
图22示出了在来自高脂饮食的经CC处理的小鼠的血清样品中的生化参数(CHOL:胆固醇;TRIG:甘油三酯;URIC:尿酸;CK:肌酸激酶),并且与未处理的高脂饮食饲喂的小鼠相比。在开始高脂饮食之后~180天获取数据并显示为5只小鼠的平均值。
图23示出了与未处理的高脂饮食饲喂的小鼠相比CC在高脂饮食的小鼠中对葡萄糖耐受性的影响。在开始高脂饮食之后~180天获取数据并显示为5只小鼠的平均值+SD。
图24示出了在来自携带EL-4皮下肿瘤的经CC+环磷酰胺和环磷酰胺处理的小鼠的血清样品中的生化参数(PHOS:磷酸盐;TBIL:总胆红素),并且与正常小鼠相比。
图25示出了在来自患有B16转移性癌症的经CC+顺铂和顺铂处理的小鼠的血清样品中的生化参数(PHOS:磷酸盐;UREA;TBIL:总胆红素;AST:天冬氨酸转氨酶),并且与正常小鼠相比。
图26示出了在来自患有B16肿瘤的经CC+抗PD-1单克隆抗体和抗PD-1单克隆抗体处理的小鼠的血清样品中的生化参数(ALT:丙氨酸转氨酶;AST:天冬氨酸转氨酶),并且与正常小鼠相比。
图27示出了在来自用25mg/Kg,i.p LPS体内激发2和24h后用LPS-ve CC和PBS经口处理的小鼠的肝脏匀浆样品中IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-1β、MIP-1α、IL-8及IL-10的调节。数据用pg/ml表示并且显示为三个孔的平均值+SD。
图28显示弧形柄杆菌(CV)可造成在人PBMC细胞培养物中由益生菌(鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus),LB)或致病细菌(单核细胞增多性李斯特氏菌(Lysteriamonocytogenes),LM)诱导的炎性细胞因子(IFN-γ和TNF-α)的下调。数据用pg/ml表示并且显示为三个孔的平均值+SD。
图29示出了CC诱导离体培养的人髓样树突细胞(DC)产生IL-10。数据用pg/ml表示并且显示为三个孔的平均值+SD。
图30显示CC可用于从存在于人外周血液中的多能干细胞分化/扩增髓性细胞。数据代表如通过流式细胞术所测定的CD34+CD45-、CD34+CD45-CD11c+及CD34+CD45-CD11b+群。
定义
术语“个体”、“宿主”、“受试者”和“患者”在本文中可互换使用,并且是指哺乳动物,包括但不限于人、非人灵长类动物(例如猿)、非人哺乳动物(例如,哺乳动物家畜动物(例如牛、猪、山羊和绵羊动物))和哺乳动物宠物(例如猫、狗);鱼;及鸟(例如鸡)。
“生物样品”包括从个体处获得的多种样品类型。该定义包括血液、血清、血浆及生物来源的其它液体样品;实体组织样品,如活检标本或来源于此的组织培养物或细胞及其子代。该定义还包括采集后以任何方式处置的样品,如用试剂处理;洗涤;或对某些细胞群如上皮细胞进行了富集。术语“生物样品”包括临床样品,并且还包括培养的细胞、细胞上清液、器官、组织样品、肺活检样品、肺上皮细胞、胃肠上皮细胞、胃肠道组织样品、支气管肺泡灌洗(BAL)液样品、鼻灌洗液样品、血液、血浆、血清、脑脊髓液、粪便样品等等。
“免疫调节剂(immunomodulator)”或“免疫调节剂(immunomodulatory agent)”为实现以下一项或多项的任何试剂:恢复阻抑的免疫功能、下调异常的免疫功能、调控异常/过度的免疫功能、增强正常免疫功能及提供所需免疫应答。免疫功能包括以下一种或多种:体液(抗体介导的)免疫、细胞免疫及先天免疫。“免疫调节剂”包括直接作用于免疫应答的表达中所涉及的细胞或作用于细胞或分子机制的试剂,后一细胞或分子机制又用于改变免疫应答中所涉及的细胞的功能。免疫功能的调控可能是由于免疫调节剂消除由免疫***内源性或外源性的正反馈影响所产生的活化机制的作用。免疫功能的调控可能是由于免疫调节剂消除由免疫***内源性或外源性的负反馈影响所产生的抑制机制的作用。因此,免疫调节剂可具有不同的作用机制。
术语“调节(modulate)”和“调节(modulation)”是指提高、降低或平衡免疫细胞、细胞因子、趋化因子、抗体、可溶性因子、表面分子、细胞内分子、效应子功能、调控功能等的数量和/或活性。
术语“自身免疫疾病”和“自身免疫病症”在本文中可互换使用并且是指特征为对自体抗原的免疫应答、即对通常存在于体内的物质和组织的免疫应答的疾病。
术语“炎性疾病”是指归因于、起因于或造成炎症的疾病。术语“炎性疾病”还可指的是由造成异常的组织损伤和/或细胞死亡的各种先天性和适应性免疫细胞引起放大应答的失调的炎症应答。
“佐剂”为能够增强免疫应答且因此为一类免疫强化剂的任何试剂(Stites和Terr,Basic and Clinical Immunology,第7版,Appleton and Lange Norwalk CT.第797页,1991)。佐剂在接种中用于增强免疫应答,以便增强体液和/或细胞介导的免疫应答。
“细胞因子”意指影响其它细胞的功能并且作为一种分子的任何分泌的多肽,该分子调节免疫或炎性应答中细胞之间的相互作用。细胞因子包括但不限于单核因子、趋化因子及淋巴因子,不管是哪些细胞产生了它们。
术语“抗体”和“免疫球蛋白”包括任何同种型的抗体或免疫球蛋白、保留与抗原的特异性结合的抗体片段,包括但不限于Fab、Fv、scFv和Fd片段、嵌合抗体、人源化抗体、单链抗体、双特异性抗体、及包含抗体的抗原结合部分和非抗体蛋白质的融合蛋白。该术语还包括Fab’、Fv、F(ab’)2和或保留与抗原的特异性结合的其它抗体片段、及单克隆抗体。抗体可为单价或二价的。
“治疗有效量”或“有效量”意指当为了治疗疾病而向哺乳动物或其它受试者施用时足以实现对于疾病的这种治疗的化合物或试剂的量。“治疗有效量”将根据化合物或试剂、疾病及其严重性以及有待治疗的受试者的年龄、重量、一般健康状况、性别等而变化。在一些情况下,试剂的“有效量”为以下量:1)恢复免疫功能至正常水平;2)调节免疫功能至正常水平;或3)降低免疫功能至低于病理水平。
本文使用的术语“治疗(treatment)”、“治疗(treating)”等一般意指获得所需的药理和/或生理效果。该效果可以是完全或部分地抑制疾病或其症状的预防性效果,和/或可以是部分或完全的治愈疾病和/或可归因于该疾病的副作用的治疗性效果。如本文所用,“治疗”包括在哺乳动物中的疾病或症状的任何治疗,并且包括:(a)预防疾病或症状在可能易患该疾病或症状但尚未被诊断为患上该疾病的受试者中出现;(b)抑制疾病或症状,即阻止其发展;或(c)减轻疾病,即造成疾病的消退。治疗剂可在疾病或损伤发生之前、期间或之后施用。特别感兴趣的是治疗正发生的疾病,其中治疗使患者不希望的临床症状稳定或减轻。这种治疗理想地在受影响组织功能完全丧失之前进行。本疗法理想地在疾病的症状期期间施用,并且在一些情况下,在疾病的症状期之后施用。
“药学上可接受的载体或赋形剂”意指任何类型的无毒固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、包囊材料或配制助剂。制备制剂的本领域技术人员能够根据所选人的具体特征、需要治疗的疾病状态、疾病的阶段、和其它相关情况来容易地选择合适的给药形式和模式。
在进一步描述本发明前,应理解本发明不限于所描述的具体实施方案,因为这些实施方案当然可以变化。还应该理解,本文所用的术语仅仅是为了描述具体的实施方案,并不意味着限制,因为本发明的范围只受所附权利要求书的限制。
当提供一个数值范围时,应该理解的是介于该范围的上下限间的每一个中间值(除非文中另外清楚地指出,否则所述中间值是下限单位的十分之一)和任何其他所说明的或者在所说明的范围中的中间值都被包括在本发明内。这些较小范围的上下限可独立地被包括在该较小的范围中,且在所说明范围内明确地排除极限值的条件下也被包括在本发明内。当所述范围包括所述限值中的一个或两个时,排除了那些所包括的上下限中的一个或两个的范围也包括在本发明范围内。
除非另外定义,否则本文所用的全部技术和科学术语都具有本发明相关领域的普通技术人员通常理解的相同含义。虽然类似于或等价于本文所述的那些的任何方法和材料还可用于实践或测试本发明,但现在描述示优选方法和材料。本文所提及的全部出版物以引用的方式并入本文,从而公开和描述了与出版物所引用的内容相关的方法和/或材料。
除非文中另外清楚指出,否则必须指出如本文和所附权利要求书中所用,单数形式“一个(种)”和“所述”包括复数指示物。因此,例如,提及“活的新月柄杆菌”包括多个这种细菌且提及“细胞因子”包括提及本领域技术人员已知的一个或多个细胞因子及其等效物,诸如此类。还应该注意,权利要求书可能撰写成排除了任何可选要素。因此,此声明旨在用作排除性术语如“单独”、“仅仅”等与权利要求要素的陈述相关联的前提基础,或采用“负”限制。
应当理解,为清楚起见在单独的实施方案的上下文中描述的本发明的某些特点也可在单个实施方案中以组合形式提供。相反,为简洁起见在参照单一实施方案的上下文中所描述的本发明的某些特点也可单独地或以任何适合的子组合方式给出。关于本发明的实施方案的所有组合具体地由本发明所涵盖并且在本文中公开就好象每个组合个别地和明确地公开一样。另外,各种实施方案及其要素的所有子组合也具体地由本发明所涵盖并且在本文中公开就好象每个这种子组合个别地且明确地在本文中公开一样。
本文所讨论的出版物只提供在本申请的申请日之前的公开内容。本文中的任何内容都不能被解释为承认本发明无权使借助于在先发明的这种出版日期提前。此外,所提供的出版日期可能不同于实际的出版日期,实际的出版日期可能需要独立地确认。
详述
本公开涉及新月柄杆菌(CC)及其作为免疫调节性生物治疗剂的用途。已显示CC通过调节先天性和适应性免疫应答而具有免疫调节性作用。本公开提供包含活的新月柄杆菌(CC)的免疫调节组合物。本公开的免疫调节组合物可用于调节个体中的免疫应答。本公开的免疫调节组合物可用于减少个体中不希望的免疫应答。本公开的免疫调节组合物可用于减轻个体的炎症。本公开提供调节个体中的免疫应答的方法,所述方法涉及向所述个体施用包含CC的免疫调节组合物。本公开提供减少个体中不希望的免疫应答的方法,所述方法涉及向所述个体施用包含活CC的免疫调节组合物。本公开提供减轻个体的炎症的方法,所述方法涉及向所述个体施用包含活CC的免疫调节组合物。
免疫调节组合物
本公开提供包含新月柄杆菌(CC)的免疫调节组合物。本公开的免疫调节组合物中的CC是活的。免疫调节组合物中的CC可为非变性的、突变的、减毒的和/或遗传修饰的。本公开的免疫调节组合物可包含新月柄杆菌的一种或多种不同菌株的混合物(cocktail)。
含有CC的免疫调节组合物包含CC单独,且出于免疫调节活性而具有药学上可接受的载体或赋形剂,包括“佐剂”,其中CC向受试者的施用可完全不依赖于和/或在时间和/或在空间上与一种或多种抗原向受试者的施用分开,在受试者中需要调节或调控针对所述一种或多种抗原的免疫应答(例如,抗原特异性应答)。
本公开的免疫调节组合物可调节(例如,降低个体中的免疫应答)。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中的B细胞数量的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中的B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中的抗原特异性B细胞数量的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的抗原特异性B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中的抗原特异性B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的自身抗原特异性B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中的自身抗原特异性B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的过敏原特异性B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中的过敏原特异性B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的B细胞活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的B细胞活化水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的B细胞活化至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的B细胞活化水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中的B细胞活化至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中对给定抗原有特异性的抗体的量的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中对给定抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中对所述抗原有特异性的抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中对给定抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中对所述抗原有特异性的抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中自身抗原特异性抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中自身抗原特异性抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中过敏原特异性抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中过敏原特异性抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中一种或多种细胞因子产生的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种细胞因子产生的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中所述一种或多种细胞因子的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种细胞因子的产生相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中所述一种或多种细胞因子的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。在其它情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中GM-CSF的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中GM-CSF的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中GM-CSF的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中GM-CSF的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-22的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中IL-22的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-22的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-22的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。在其它情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中干扰素(IFN)-α或IFN-β或IFN-γ的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中IFN-α和/或IFN-β和/或IFN-γ的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中干扰素(IFN)-α和/或IFN-β和/或IFN-γ的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中干扰素(IFN)-α和/或IFN-β和/或IFN-γ的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IFN-γ的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IFN-γ的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-1β、IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6或TNF-α的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中IL-1β、IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6或TNF-α的一种或多种的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-10的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效提高个体中IL-10的水平至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中产生IL-10的CD4+和/或CD8+T细胞的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效提高个体中产生IL-10的CD4+和/或CD8+T细胞的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-1β、IL-17A、IL-2、IL-6和TNF-α中的一种或多种的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-1β、IL-17A、IL-2、IL-6和TNF-α中的一种或多种的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-17的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-17的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-2的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-2的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中TNF-α的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中TNF-α的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-6的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-6的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-1β的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-1β的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中TGF-β的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效提高个体中TGF-β的水平至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。
在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中细胞因子、趋化因子或淋巴毒素如但不限于GM-CSF、IL-2、IL-22、干扰素、IL-1β、TGF-β、IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6、IL-5、IL-13、TNF-α、IL-9、IL-28、KC/IL-8、MIP-1α、LTα4等的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如增加、减少或平衡)个体中一种或多种细胞因子、趋化因子或淋巴毒素如但不限于GM-CSF、IL-2、IL-22、干扰素、IL-1β、TGF-β、IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6、IL-5、IL-13、TNF-α、IL-9、IL-28、KC/IL-8、MIP-1α、LTα4等的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的Th1应答的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的Th1应答水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的Th1应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的Th1应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中的Th1应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD4+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中自身抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中自身抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD8+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD8+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD8+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD8+T的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中CD8+T的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD8+T的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性CD8+T的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中自身抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中自身抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中自然杀伤(NK)细胞、NKT细胞、γδT细胞、先天性淋巴样细胞(ILC)、巨噬细胞和树突细胞(DC)中的一种或多种的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC中的一种或多种的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC中的一种或多种的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC中的一种或多种的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中调控性细胞的数量和/或活性的量。调控性T细胞(Treg)为CD4+或CD8+,并且还可为FoxP3+。Treg还可由其它标记如PD-1、CTLA-4等定义。调控性细胞还可包含其它先天性细胞,如NK、NKT、γδT细胞、ILC和DC、及B淋巴细胞。NK和NKT也可为FoxP3+并且也可由其它标记如PD-1定义。如本文所用,“调节调控性细胞的数量和/或活性”是指增加、减少或平衡调控性细胞的数量和/或活性。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中调控性细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中调控性细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中调节性细胞的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中调控性细胞的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD8+调控性细胞(例如,CD8+/CD25+/FoxP3+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中CD8+调控性细胞(例如,CD8+/CD25+/FoxP3+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD8+控性性细胞(例如,CD8+/FoxP3+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中CD8+调控性细胞(例如,CD8+/FoxP3+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NKT细胞(例如,NKT+/FoxP3+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中NKT细胞(例如,NKT+/FoxP3+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NKT细胞(例如,NKT+/PD-1+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中NKT细胞(例如,NKT+/PD-1+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NK细胞(例如,NK+/FoxP3+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中NK细胞(例如,NK+/FoxP3+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NK细胞(例如,NK+/PD-1+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中NK细胞(例如,NK+/PD-1+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD4+调控性细胞(例如,CD4+/FoxP3+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中CD4+调控性细胞(例如,CD4+/FoxP3+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。作为另一个实例,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD4+调控性细胞(例如,CD4+/CD25+/FoxP3+细胞)的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中CD4+调控性细胞(例如,CD4+/CD25+/FoxP3+细胞)的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th17细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效标准化病理免疫应答的一种或多种血清标记的水平的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CH、GLU、GLOB、ALT、AST、TP、PHOS、TRIG、URIC、CK、TBIL或尿素的水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效标准化一种或多种血清标记(这些标记包括但不限于胆固醇(CHOL)、葡萄糖(GLU)、球蛋白(GLOB)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总磷酸盐(TP)、总胆红素(TBIL)、磷酸盐(PHOS)、甘油三酯(TRIG)、尿酸(URIC)、肌酸激酶(CK)和尿素)的水平至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th22细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中TH9细胞的数量和/或活性的量。如本文所用,“调节TH9细胞的数量和/或活性”是指增加、减少或平衡TH9细胞的数量和/或活性。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中TH9细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中TH9细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)和/或调控个体中的先天性和/或适应性(包括细胞和体液两种)免疫应答的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种先天性或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中先天性和/或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中先天性和/或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中先天性和/或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效诱导和/或增加个体中先天性和/或适应性免疫细胞中的细胞凋亡以免发生不希望的炎症的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种先天性或适应性免疫细胞的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效诱导和/或增加个体中先天性和/或适应性免疫细胞中的细胞凋亡至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效诱导造血干细胞的增殖和/或分化并恢复体内平衡的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下的个体相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时在个体中有效诱导造血干细胞的增殖和/或分化并恢复体内平衡至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含CC和抗原。当本公开的免疫调节组合物包含CC和抗原时,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的免疫应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的免疫应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的免疫应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的免疫应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,当免疫调节组合物包含单独或以组合形式的CC、抗原、自身抗原或过敏原时,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中针对抗原的免疫应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中针对抗原的免疫应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
免疫应答可为体液免疫应答,例如B细胞或抗体免疫应答。因此,例如,在一些情况下,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的B细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的B细胞应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中针对抗原的B细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中针对抗原的B细胞应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下对抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)对抗原有特异性的抗体的量至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中对抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中对抗原有特异性的抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
免疫应答可为细胞免疫应答,例如T细胞应答。因此,例如,在一些情况下,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的T细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的T细胞应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中针对抗原的T细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中针对抗原的T细胞应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。在一些情况下,免疫应答为体液免疫应答和细胞免疫应答。
本公开的免疫调节组合物可包含每ml约103CC至每ml约1012CC之量的CC。举例来说,本公开的免疫调节组合物可包含以下含量的CC:每ml约103CC至每ml约104CC、每ml约104CC至每ml约105CC、每ml约105CC至每ml约106CC、每ml约106CC至每ml约107CC、每ml约108CC至每ml约109CC、每ml约109CC至每ml约1010CC、每ml约1010CC至每ml约1011CC、或每ml约1011CC至每ml约1012CC。
本公开的免疫调节组合物可包含每mg约103CC至每mg约1012CC之量的CC。举例来说,本公开的免疫调节组合物可包含以下含量的CC:每mg约103CC至每mg约104CC、每mg约104CC至每mg约105CC、每mg约105CC至每mg约106CC、每mg约106CC至每mg约107CC、每mg约108CC至每mg约109CC、每mg约109CC至每mg约1010CC、每mg约1010CC至每mg约1011CC、或每mg约1011CC至每mg约1012CC。
本公开的免疫调节组合物可包含每克约103CC至每克约1015CC之量的CC。举例来说,本公开的免疫调节组合物可包含以下含量的CC:每克约103CC至每克约104CC、每克约104CC至每克约105CC、每克约105CC至每克约106CC、每克约106CC至每克约107CC、每克约108CC至每克约109CC、每克约109CC至每克约1010CC、每克约1010CC至每克约1011CC、每克约1011CC至每克约1012CC、每克约1012CC至每克约1013CC、每克约1013CC至每克约1014CC、或每克约1014CC至每克约1015CC。
本公开的免疫调节组合物可包含每单位剂型约102至约1020个菌落形成单位(cfu)之量的CC;举例来说,本公开的免疫调节组合物可包含以下含量的CC:每单位剂型约102至约103、约103至约105、约105至约107、约107至约109、约109至约1011、约1011至约1013、约1013至约1015、约1015至约1018、或约1018至约1020cfu。单位剂型可为以单剂量施用的量;例如,单位剂型可为0.5ml、1.0ml或适于以单剂量施用的其它体积。
CC可通过将新月柄杆菌暴露于约0℃至约37℃(例如,约0℃至15℃;约10℃至20℃;约20℃至25℃;约23℃至25℃;约23℃至37℃;或约30℃至35℃)的温度持续约1小时至延长的时间段(例如,至少1小时;至少2小时;至少4小时;过夜;至少24小时;至少48小时;至少100小时、或超过100小时)来制备。CC也可储存在盐水、磷酸盐缓冲盐水(PBS)或任何其它缓冲液中,在约36℃至-170℃(例如,约0℃至36℃;约0℃至4℃;约10℃至15℃;约0℃至-20℃;约-10℃及更低)的温度下,或在本领域技术人员已知的条件下。CC可为0.0000001至100%活的。例如,CC可为0.0000001至0.000001%活的、0.000001至0.00001%活的、0.00001至0.0001%活的、0.0001%至0.001%活的、0.001%至0.01%活的、0.01%至0.1%活的、0.1%至1%活的、1%至10%活的、10%至100%活的、25%至100活的、50%至100%活的、75%至100%活的、或90%至100%活的。
本公开的免疫调节组合物可包含在培养基中以约0.1OD至30.0OD的各种光密度单位(OD)生长的CC。例如,生长的CC培养物的OD可为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9等。
新月柄杆菌
本公开的免疫调节组合物包含柄杆菌属,其中柄杆菌属为非病原的。非病原柄杆菌属包括19种不同种,包括不粘柄菌属(Asticcacaulis)的两个种(弧形柄杆菌、黑柄杆菌(C.henricii)、中间柄杆菌、锈棕色柄杆菌(C.robiginosus)、金红柄杆菌(C.rutilis)、副弧形柄杆菌(C.subvibriodes)、梭状柄杆菌、罗西柄杆菌(C.rossii)、离中不粘柄菌、双鞘不粘柄菌等)。参见,例如JS Poindexter,The Caulobacters:Ubiquitous UnusualBacteria,Microbiol Rev 45,123-179,1981)。若干柄杆菌属可从美国典型培养物保藏中心(ATCC)获得,如CB35、CB26、CB28、KA5、CB66、FC4等。呈活的、非变性、突变或减毒形式的柄杆菌属的所有这些物种都可用作本文所述的免疫调节剂。另外,柄杆菌属细菌可呈不活动的柄、能动的游动细胞、粗短的鞭毛蛋白和鞭毛蛋白阳性的、鞭毛蛋白阴性的、***和/或非***的形式。柄杆菌属可在以下条件下生长:18℃-42℃范围内的温度,和5-9范围内的pH,但最佳在23-25℃范围内的温度和pH 7下于PYE培养基中。突变或遗传修饰形式的柄杆菌属可通过以下方式产生:改变培养条件的营养素、化学品、pH、温度、紫外线或红外线、辐射等;或遗传修饰活细菌中的各种酶、代谢途径、表面分子、核酸、质粒、细胞和细胞壁组分、光滑和粗糙的LPS(JS Poindexter,The Caulobacters:Ubiquitous Unusual Bacteria,Microbiol Rev 45,123-179,1981)。
新月柄杆菌可充当递送抗原的载体和/或递送媒介物。作为非遗传修饰(GM),如静电和疏水相互作用,抗原与新月柄杆菌表面的结合可使新月柄杆菌能够充当抗原载体和/或递送媒介物。此外,由于生物粘附/粘膜粘附,所以新月柄杆菌可通过M细胞转运、递送至DC/APC及DC/APC的后续调节、在粘膜表面处的NK、NKT、B和T细胞应答的调节来促进抗原摄取。
虽然以下论述集中于新月柄杆菌,但多种非病原柄杆菌属物种中的任一种均可包含在本公开的免疫调节组合物中。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含新月柄杆菌(CC)。在一些情况下,新月柄杆菌为野生型。在一些情况下,新月柄杆菌为脂多糖阴性菌株。在一些情况下,新月柄杆菌为S层阴性菌株。在一些情况下,CC为突变、减毒的,或含有***突变。在一些情况下,新月柄杆菌有或没有耐药性质粒,如氯霉素、青霉素耐药性质粒。在一些情况下,新月柄杆菌可生长在除PYE培养基外的其它培养基中。
在一些情况下,新月柄杆菌被遗传修饰以产生一种或多种异源多肽。所述多肽可具有广泛多种尺寸。合适的异源多肽包括但不限于PD1、PDL、CTLA-4、GITR、VISTA;抗原呈递细胞(APC)或T细胞上所见的共抑制性蛋白;细胞因子(例如,IL-10;或以上列出的细胞因子中的任一种);趋化因子;抗原(例如,如上文所述的自身抗原或过敏原);针对以下的抗体:抗原(例如,自身抗原;如上文所述)、信号传导分子、受体、细胞因子、促细胞凋亡蛋白;融合蛋白(例如,抗原与细胞因子、抗原与载体蛋白)等。
在一些情况下,新月柄杆菌通过用荧光、放射性同位素、光标签等标记或偶联细菌来修饰。
在一些情况下,新月柄杆菌为遗传修饰的。在一些情况下,新月柄杆菌被遗传修饰以使得微生物是减毒的。在一些情况下,新月柄杆菌的核酸被修饰以使得微生物对于增殖是减毒的。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含整个CC。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含活的或非变性的CC。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含CC的个别或多个组分、副产物和/或代谢物,其可在其它合成或天然细菌细胞中分离、合成或基因制造作为合成生物素。CC的组分可包括但不限于效应分子,例如多糖、糖基神经酰胺、肽聚糖、核酸、结构蛋白、短链脂肪酸、脂肪酸代谢物、羟基脂肪酸等。新月柄杆菌的级分、组分、副产物和/或代谢物可通过以下操作获得:过滤培养上清液,用各种有机溶剂、酶如糖苷酶、脂肪酶、DNA酶、RNA酶、蛋白酶、溶菌酶等处理。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含CC的个别或多个组分,可使用物理化学或遗传方法将其与抗原融合并用作合成细菌。
在一些情况下,新月柄杆菌在其外膜囊泡中被生物工程化以包装和递送化疗剂和/或免疫治疗剂及来自其它细菌的合成遗传物质。在一些情况下,新月柄杆菌被生物工程化并构建到基因回路中作为合成治疗细菌,“合成生物素”。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含CC的S层。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含CC的S层,其经遗传修饰以展示一种或多种异源多肽、化疗剂和/或免疫治疗剂。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含S层的组分。
抗原
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或超过10种)抗原。合适的抗原包括但不限于来源于自身抗原和过敏原的抗原。
在一些实施方案中,新月柄杆菌经遗传修饰以产生抗原;并且经遗传修饰的新月柄杆菌为活的,以产生本公开的免疫调节组合物。遗传修饰细菌的方法是本领域中已知的。
在其它实施方案中,CC在本公开的免疫调节组合物中与抗原混合。新月柄杆菌可充当递送抗原的载体和/或递送媒介物。作为非遗传修饰(GM),如静电和疏水相互作用,抗原与新月柄杆菌表面的结合可使新月柄杆菌能够充当抗原载体和/或递送媒介物。此外,由于生物粘附/粘膜粘附,所以新月柄杆菌可通过M细胞转运、递送至DC/APC及DC/APC的后续调节、在粘膜表面处的NK、NKT、B和T细胞应答的调节来促进抗原摄取。
用于本文所述的免疫调节组合物及采用CC的方法的某些实施方案中的抗原可为任何指表位、分子、分子复合物、细胞或组织,在受试者中需要调节针对它们的免疫原性。
本公开的免疫调节组合物可包含一种或多种抗原或抗原性组合物,其能够调节针对人或动物自身抗原或过敏原的免疫应答。抗原可与自身免疫疾病、过敏、哮喘、朊病毒疾病或其中抗原特异性应答的调节将为需要或有益的任何其它病状有关。
合适的抗原可为本领域中已知的任何类型的抗原。抗原可由以下多种来源中的任一种产生:如植物、动物、原核生物、体外细胞培养物等。抗原可呈如下所述的多种形式。
合适的抗原包括例如肽、修饰的肽、肽拟表位、构形上受限的合成肽、来自一种或多种抗原的多表位肽、分支肽、脂肽、单脂肽、二脂肽、与蛋白质缀合或融合的肽、与T细胞或B细胞表位缀合或融合的肽。参见,例如美国专利号8,198,400。合适的抗原包括例如全长抗原、截短抗原、突变抗原、及灭活或组合形式。合适的抗原包括例如蛋白质、纯化或重组蛋白、重组融合蛋白、与toll样受体(TLR)激动剂/拮抗剂缀合的蛋白质和肽、与细菌毒素缀合的蛋白质和肽、与抗体缀合的蛋白质和肽、与细胞因子和趋化因子缀合的蛋白质和肽、糖蛋白、糖脂蛋白及其衍生物。合适的抗原包括例如多糖、多糖缀合物、寡糖、脂质、糖脂、碳水化合物及其衍生物。抗原可被修饰以调节抗原呈递和/或共抑制、或增强共抑制信号。
抗原或抗原性组合物可由自身抗原、过敏原等获得。
抗原可为全细胞提取物、细胞溶胞产物、全细胞、全活细胞、全灭活细胞、全辐射细胞等。抗原可为粗的、纯化的或重组的形式。在一些情况下,抗原为至少50%纯的、至少60%纯的、至少70%纯的、至少80%纯的、至少90%纯的、至少95%纯的、至少98%纯的、或至少99%纯的、或大于99%纯的。
抗原可以化学方式、酶方式或遗传方式偶联到CC上。在一些情况下,抗原以与CC混合的形式存在于本公开的免疫调节组合物中。
本公开的免疫调节组合物可包含单一类型的抗原。本公开的免疫调节组合物可包含2种或更多种不同的抗原。本公开的免疫调节组合物可包含2、3、4、5、6或大于6种不同的抗原。当本公开的免疫调节组合物包含一种以上抗原时,所述一种以上抗原可来自相同的细胞或过敏原。当本公开的免疫调节组合物包含一种以上抗原时,所述一种以上抗原可来自两种或更多种细胞或过敏原。
抗原可呈蛋白质、脂多糖、脂蛋白、蛋白多糖、糖蛋白、粘多糖、寡糖等形式。
抗原可呈包含编码抗原(例如多肽抗原)的核苷酸序列的核酸形式。例如,抗原可以DNA(例如,质粒DNA、裸DNA等)、RNA和/或野生型、减毒的和/或基于重组载体的核酸形式提供。编码抗原的核酸可为“裸的”或包含于如脂质体的递送***中。
编码抗原的重组载体可为至少一种重组表达构建体,其包含与在以下各物中编码抗原的核苷酸序列可操作地连接的启动子:重组病毒载体(如腺病毒(例如Ad2、Ad4、Ad5、Ad35、Ad35K5等)、腺相关病毒、慢病毒、疱疹病毒、痘病毒、水疱性口腔炎病毒、α病毒、麻疹病毒、番木瓜花叶病毒、巨细胞病毒、修饰的牛痘安卡拉病毒MVA、脊髓灰质炎病毒、Marba病毒等)、细菌载体疫苗(如沙门氏菌属(Salmonella)、志贺氏菌属(Shigella)、大肠埃希氏菌(E.coli)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、李斯特氏菌属某种(Listeria sp.)、乳杆菌属某种(Lactobacillus sp.))、真菌载体(如热杀的重组酵母属(Saccharomyces)酵母)、植物病毒、病毒样颗粒(VLP)、病毒体、合成疫苗颗粒、合成仿生超分子生物载体、去病原化病毒/菌株(如来自H5N1的NIBRG14)。载体可呈活的野生型、非复制型、突变的、修饰的、有缺陷的或减毒的形式。载体可来自人、动物、植物或原核生物来源并且以任何有效量。
在治疗或预防自身免疫疾病或过敏时,抗原可在与本公开的免疫调节组合物相同或不同的时间、相同或不同的位点给予。
自身抗原
在一些情况下,除CC之外,本公开的免疫调节组合物还包含自身抗原。在一些情况下,除CC之外,本公开的免疫调节组合物还包含来自一种或多种自身组织的一种或多种自身抗原,例如1、2、3、4、5或更多种抗原。
例如,当自身免疫疾病为1型糖尿病时,抗原可为胰岛β细胞相关抗原、胰岛素原、谷氨酸脱羧酶、嗜铬粒蛋白A、胰岛淀粉状多肽HSP60;为全身性红斑狼疮时,抗原可为snRNP;为格雷夫氏病(Grave's disease)时,抗原可为甲状腺球蛋白、促甲状腺激素受体或甲状腺上皮细胞;为血小板减少性紫癜时,抗原可为血小板、GPIIB/IIIa;为多发性硬化症时,抗原可为髓鞘碱性蛋白、MOG、PLP;为乳糜泻时,抗原可为转谷氨酰胺酶。
合适的自身抗原可为牵涉于自身免疫疾病的发生和/或传播中的自身抗原,其病理可归因于对由相关靶器官、组织或细胞表达的分子有特异性的抗体的存在,例如全身性红斑狼疮(SLE)或重症肌无力(MG)。在这种疾病中,可能期望将针对相关自身抗原的进行中的抗体介导(即Th2型)的免疫应答导向细胞(即Th1型)免疫应答。或者,可期望通过预防性地诱导针对适当自身抗原的Th1应答来预防未患有但疑似易患相关自身免疫疾病的受试者中针对自身抗原的Th2应答的发作或降低该应答的水平。可包括在本发明的免疫调节组合物中的自身抗原包括但不限于:(a)对于SLE,是史密斯蛋白(Smith protein)、RNP核糖核蛋白、及SS-A和SS-B蛋白;和(b)对于MG,是乙酰胆碱受体。牵涉于一种或多种类型的自身免疫应答中的其它抗原的实例包括例如内源性激素,如***、***、***、生长激素、催乳素及其它激素。
合适的自身抗原的其它实例包括与以下疾病有关的抗原:神经疾病,如精神***症、阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease)、抑郁症、垂体机能减退;及心血管疾病,如动脉粥样硬化(例如,对于动脉粥样硬化的抗原可为胆固醇酯转移蛋白、氧化型LDL、apoB210、apoB100)等。
本领域技术人员将认识到其它合适的自身抗原包括与幼年型类风湿性关节炎和马施二氏强直性脊柱炎(Marie-Strumpell ankylosing spondylitis)有关的那些抗原,其可能造成前葡萄膜炎及继发的青光眼。其它合适的自身抗原包括与亨廷顿氏病(Huntington's disease)和帕金森氏病(Parkinson's disease)有关的那些抗原。
自身抗原的实例包括与细胞或器官特异性自身免疫有关的那些。这种自身抗原包括乙酰胆碱受体,与重症肌无力有关;肌动蛋白,与慢性活动性肝炎和原发性胆汁性肝硬化有关;腺嘌呤核苷酸易位体(ANT),与扩张型心肌病和心肌炎有关;β-肾上腺素受体,与扩张型心肌病有关;芳族L-氨基酸脱羧酶,与I型自身免疫性多内分泌腺病综合征(APS-I)有关;脱唾液酸糖蛋白受体,与自身免疫性肝炎有关;杀细菌/渗透性增强蛋白(Bpi),与囊性纤维化脉管炎有关;钙敏感受体,与获得性甲状旁腺功能减退有关;胆固醇侧链断裂酶(CYPIIa),与APS-I有关;胶原IV型α3-链,与古德帕斯彻综合征(Goodpasture syndrome)有关;细胞色素P450 2D6(CYP2D6),与自身免疫性肝炎有关;肌间线蛋白,与克罗恩氏病(Crohn disease)和冠状动脉病有关;桥粒芯蛋白1,与落叶状天疱疮有关;桥粒芯蛋白3,与寻常天疱疮有关;F-肌动蛋白,与自身免疫性肝炎有关;GM神经节苷脂,与格林巴利综合征(Guillain-Barrésyndrome)有关;谷氨酸脱羧酶(GAD65),与1型糖尿病和僵人综合征有关;谷氨酸受体(GLUR),与拉斯马森脑炎(Rasmussen encephalitis)有关;H/K ATP酶,与自身免疫性胃炎有关;17-α-羟化酶(CYP17),与APS-I有关;21-hydroxylast(CYP21),与艾迪生病(Addison disease)有关;IA-2(ICA512),与1型糖尿病有关;胰岛素,与1型糖尿病和胰岛素低血糖综合征(平田病(Hirata disease))有关;胰岛素受体,与B型胰岛素抗性、棘皮症和全身性红斑狼疮(SLE)有关;1型内因子,与恶性贫血有关;白细胞功能相关抗原(LFA-1),与治疗抗性莱姆关节炎(Lyme arthritis)有关;髓磷脂相关糖蛋白(MAG),与多发性神经病有关;髓鞘碱性蛋白,与多发性硬化症和脱髓鞘疾病有关;髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白(MOG),与多发性硬化症有关;减数***(myosis),与风湿热有关;p-80-coilin,与特应性皮炎有关;丙酮酸脱氢酶复合体-E2(PDC-E2),与原发性胆汁性肝硬化有关;碘化钠同向转运体(NIS),与巴塞多化甲状腺肿和自身免疫性甲状腺机能减退有关;SOX-10,与白斑病有关;甲状腺和眼肌共享蛋白,与甲状腺相关眼病有关;甲状腺球蛋白,与自身免疫性甲状腺炎有关;甲状腺过氧化物酶,与自身免疫性桥本氏甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis)有关;促甲状腺素受体,与格雷夫氏病有关;组织转谷氨酰胺酶,与腹腔病有关;转录辅激活物p75,与特应性皮炎有关;色氨酸羟化酶,与APS-I有关;酪氨酸酶,与白斑病和转移性黑色素瘤有关;以及酪氨酸羟化酶,与APS-I有关。
自身抗原的实例包括与***自身免疫有关的那些。这种自身抗原包括ACTH,与ACTH缺乏症有关;氨酰tRNA组氨酰合成酶,与肌炎和皮肌炎有关;氨酸tRNA合成酶(几种),与多发性肌炎和皮肌炎有关;心磷脂,与SLE有关;碳酸酐酶II,与SLE、斯耶格伦综合征( syndrome)和全身性硬化有关;胶原(多种类型),与类风湿性关节炎(RA)、SLE和进行性全身性硬化有关;着丝点相关蛋白,与全身性硬化有关;DNA依赖性核小体刺激ATP酶,与皮肌炎有关;纤维蛋白,与硬皮病有关;纤连蛋白,与SLE、RA和硬斑病有关;葡萄糖-6-磷酸异构酶、与RA有关;β2-糖蛋白I(β2-GPI),与原发性抗磷脂综合征有关;高尔基体蛋白(95、97、160、180),与斯耶格伦综合征、SLE和RA有关;热休克蛋白,与各种免疫相关病症有关;半桥粒蛋白180,与大疱性类天疱疮、妊娠疱疹和瘢痕性类天疱疮有关;组蛋白H2A-H2B-DNA,与SLE有关;IgE受体,与慢性特发性荨麻疹有关;角蛋白,与RA有关;Ku-DNA-蛋白激酶,与SLE有关;Ku-核蛋白,与***综合征有关;La磷蛋白(La 55-B),与斯耶格伦综合征有关;髓过氧化物酶,与坏死性和新月体性肾小球性肾炎及***性血管炎有关;蛋白酶3(PR3),与韦格纳肉芽肿病(Wegener granulomatosis)和丘-施二氏综合征(Churg-Strausssyndrome)有关;RNA聚合酶I-III(RNP),与全身性硬化和SLE有关;信号识别蛋白(SRP54),与多发性肌炎有关;拓扑异构酶-I(Scl-70),与硬皮病和雷诺综合征(Raynaud syndrome)有关;微管蛋白,与慢性肝病和内脏利什曼虫病(visceral leishmaniasis)有关;以及波形蛋白,与***性自身免疫病有关。
自身抗原的其它实例包括与血浆蛋白和细胞因子自身免疫有关的那些。这种自身抗原包括C1抑制剂,与自身免疫性C1缺乏症有关;C1q,与SLE和膜增生性肾小球性肾炎(MPGN)有关;细胞因子(IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、LIF),与RA和全身性硬化有关;因子II、因子V、因子VII、因子VIII、因子IX、因子X、因子XI、因子XII、凝血酶、vWF,与延长的凝血时间有关;糖蛋白IIb/IIIg和1B/IX,与自身免疫性血小板减少性紫癜有关;IgA,与免疫缺陷有关;以及氧化的LDL(OxLDL),与动脉粥样硬化有关。
自身抗原的又一些实例包括与癌症和副肿瘤自身免疫有关的那些。这种自身抗原包括双载蛋白,与神经元病和小肺细胞癌有关;周期素B1,与肝细胞癌有关;DNA拓扑异构酶II,与肝癌有关;桥粒斑蛋白,与副肿瘤天疱疮有关;桥尾蛋白,与副肿瘤僵人综合征有关;Hu蛋白,与副肿瘤脑脊髓炎有关;神经元烟碱乙酰胆碱受体,与亚急性自主神经病变有关;p53,与癌症和SLE有关;p62(IGF-II mRNA结合蛋白),与肝细胞癌(China)有关;恢复蛋白,与癌症相关视网膜病有关;Ri蛋白,与副肿瘤眼阵挛肌阵挛共济失调有关;βIV膜收缩蛋白,与下运动神经元综合征有关;突触结合蛋白,与兰伯特-伊顿肌无力综合征(Lambert-Eatonmyasthenic syndrome)有关;电压门控钙通道,与与兰伯特-伊顿肌无力综合征有关;以及Yo蛋白,与副肿瘤小脑变性有关。
过敏原
在一些情况下,除CC之外,本公开的免疫调节组合物还包含过敏原。合适的过敏原可使用已知方法获得和/或产生。合适的过敏原的类别包括但不限于花粉、除猫毛屑以外的动物毛屑、草、霉菌、粉尘、抗生素、带刺昆虫的毒液、以及多种环境(包括化学品和金属)、药物和食品过敏原。常见的树过敏原包括来自以下的花粉:三角叶杨、杨树、岑树、桦树、枫树、橡树、榆树、山核桃树及美洲山核桃树;常见植物过敏原包括来自艾蒿、豚草、英国车前草、酸模(sorrel-dock)及藜的那些;植物接触过敏原包括来自毒栎、毒葛及荨麻的那些;常见的草过敏原包括黑麦草、提摩西草(Timothy)、蒋森草(Johnson)、百慕大草(Bermuda)、牛毛草及蓝草过敏原;常见的过敏原还可从霉菌或真菌中获得,如链格孢属(Alternaria)、镰刀菌属(Fusarium)、单孢枝霉菌属(Hormodendrum)、曲菌属(Aspergillus)、小多孢菌属(Micropolyspora)、毛霉属(Mucor)及嗜热放线菌(thermophilic actinomycetes);表皮过敏原可从房屋或有机粉尘(通常是真菌来源)、节肢动物如嗜甜家螨(屋尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus))或动物来源如羽毛和狗毛屑处获得;常见的食品过敏原包括奶和奶酪(diary)、蛋、小麦、坚果(例如花生)、海鲜(例如贝类)、豌豆、豆及面筋过敏原;常见的环境过敏原包括金属(镍和金)、化学品(甲醛、三硝基苯酚及松节油)、胶乳、橡胶、纤维(棉花或羊毛)、粗麻布、染发剂、化妆品、清洁剂及芳香剂过敏原;常见的药物过敏原包括局部麻醉剂和水杨酸盐过敏原;抗生素过敏原包括青霉素、四环素及磺酰胺过敏原;且常见的昆虫过敏原包括蜜蜂、黄蜂和蚁毒液、及蟑螂萼过敏原。尤其充分表征的过敏原包括但不限于Der p I过敏原的主要和隐蔽表位(Hoyne等人(1994)Immunology 83190-195),bee venom phospholipase A2(PLA)(Akdis等人(1996)J.Clin.Invest.98:1676-1683),birch pollen allergen Bet v 1(Bauer等人(1997)Clin.Exp.Immunol.107:536-541)以及the multi-epitopic recombinant grass allergen rKBG8.3(Cao等人(1997)Immunology 90:46-51)。这些及其它合适的过敏原可商购获得和/或可按照已知技术作为提取物容易地制备。
合适的过敏原包括树木花粉过敏原、杂草花粉过敏原、药草花粉过敏原、青草花粉过敏原、螨过敏原、昆虫过敏原、毒液过敏原、动物毛发过敏原、毛屑过敏原及食品过敏原。
在一些情况下,过敏原呈提取物、纯化的过敏原、修饰的过敏原或重组过敏原或重组过敏原的突变体或其任何组合的形式。在一些情况下,过敏原选自由以下组成的组:青草花粉过敏原、尘螨过敏原、豚草过敏原、猫过敏原及桦树过敏原。
过敏原可以每单位剂型约2.5μg至约75μg的量存在于本公开的免疫调节组合物中。例如,过敏原可以每单位剂型以下的量存在于本公开的免疫调节组合物中:约2.5μg至约5μg、约5μg至约10μg、约10μg至约15μg、约15μg至约20μg、约20μg至约25μg、约25μg至约50μg、或约50μg至约75μg、或大于75μg。
在一些情况下,包含过敏原的本公开的免疫调节组合物的剂量具有约65至约17,600个生物过敏原单位(BAU)的效力。在一些情况下,包含过敏原的本公开的免疫调节组合物的剂量包括约650BAU至约6,000BAU。
抗体
在一些情况下,除CC之外,本公开的免疫调节组合物还包含针对癌抗原、自身抗原、过敏原或致病抗原的抗体(例如,治疗性抗体、单克隆抗体、双特异性抗体、化学免疫缀合抗体、放射免疫缀合抗体、抗体-细胞因子融合蛋白、抗体-抗原融合蛋白、抗体-免疫毒素融合蛋白等)。
可包括在本公开的免疫调节组合物中的抗体包括但不限于针对共刺激或共抑制分子(CD28、CD40、CTLA-4、PD-1、PDL-1、GITR、VISTA、LAG-3、ICOS、CD137、OX40、CD137、CD227、CTLA-4、KIR、TCR、TIM3等)的抗体;及其它治疗性抗体。
合适抗体的非限制性实例包括但不限于阿达木单抗、贝伐单抗、英夫利昔单抗、阿昔单抗、阿来组单抗、巴匹珠单抗、巴利昔单抗、贝利单抗、巴列津单抗、布罗达单抗、康纳单抗、塞妥珠单抗、西妥昔单抗、西他土珠(conatumumab)、地诺单抗、依库珠单抗、etrolizumab、吉妥单抗奥佐米星、格里木单抗、替伊莫单抗、拉贝珠单抗、马帕妥木单抗、马妥珠单抗、美泊利单抗、莫维珠单抗、莫罗单抗-CD3、那他珠单抗、尼妥珠单抗、奥法木单抗、奥马佐单抗、奥戈伏单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、pemtumornab、帕妥珠单抗、兰尼单抗、利妥昔单抗、罗维珠单抗、托珠单抗、托西莫单抗、曲妥单抗、优特克单抗、维多珠单抗、扎鲁木单抗及扎木单抗。
可与本公开的免疫调节组合物组合使用的治疗性和预防性抗体的非限制性实例包括MDX-010(Medarex,N.J.),其为用于治疗***癌的人源化抗CTLA-4抗体;SYNAGISTM(MedImmune,Md.),其为用于治疗RSV感染的人源化抗呼吸道合胞病毒(RSV)单克隆抗体;及HERCEPTINTM(曲妥单抗)(Genentech,Calif.),其为用于治疗转移性乳腺癌的人源化抗HER2单克隆抗体。其它实例为人源化抗CD18F(ab')2(Genentech);CDP860,其为人源化抗CD18F(ab')2(Celltech,UK);PRO542,其为与CD4融合的抗HIV gp120抗体(Progenics/GenzymeTransgenics);奥司他韦,其为人抗乙型肝炎病毒抗体(Protein Design Lab/Novartis);PROTOVIRTM,其为人源化抗CMV IgGI抗体(Protein Design Lab/Novartis);MAK-195(SEGARD),其为鼠抗TNF-αF(ab')2(Knoll Pharma/BASF);IC14,其为抗CD14抗体(ICOSPharm);人源化抗VEGF IgG1抗体(Genentech);OVAREXTM,其为鼠抗CA 125抗体(Altarex);PANOREXTM,其为鼠抗17-IA细胞表面抗原IgG2a抗体(Glaxo Wellcome/Centocor);BEC2,其为鼠抗独特型(GD3表位)IgG抗体(ImClone System);IMC-C225,其为嵌合抗EGFR IgG抗体(ImClone System);VITAXINTM,其为人源化抗αVβ3整联蛋白抗体(Applied MolecularEvolution/MedImmune);Campath 1H/LDP-03,其为人源化抗CD52IgG1抗体(Leukosite);Smart M195,其为人源化抗CD33IgG抗体(Protein Design Lab/Kanebo);RITUXANTM,其为嵌合抗CD20IgG1抗体(IDEC Pharm/Genentech,Roche/Zettyaku);LYMPHOCIDETM,其为人源化抗CD22IgG抗体(Immunomedics);Smart ID10,其为人源化抗HLA抗体(Protein DesignLab);ONCOLYMTM(Lym-1),其为放射性同位素标记的鼠抗HLA诊断试剂(DIAGNOSTICREAGENT)抗体(Techniclone);ABX-IL8,其为人抗IL8抗体(Abgenix);抗CD11a,其为人源化IgG1抗体(Genentech/Xoma);ICM3,其为人源化抗ICAM3抗体(ICOS Pharm);IDEC-114,其为灵长类动物源化抗CD80抗体(IDEC Pharm/Mitsubishi);ZEVALINTM,其为放射性同位素标记的鼠抗CD20抗体(IDEC/Schering AG);IDEC-131,其为人源化抗CD40L抗体(IDEC/Eisai);IDEC-151,其为灵长类动物源化抗CD4抗体(IDEC);IDEC-152,其为灵长类动物源化抗CD23抗体(IDEC/Seikagaku);SMART抗CD3,其为人源化抗CD3IgG(Protein Design Lab);5G1.1,其为人源化抗补体因子5(C5)抗体(Alexion Pharm);D2E7,其为人源化抗TNF-α抗体(CAT/BASF);CDP870,其为人源化抗TNF-αFab片段(Celltech);IDEC-151,其为灵长类动物源化抗CD4IgG1抗体(IDEC Pharm/SmithKline Beecham);MDX-CD4,其为人抗CD4IgG抗体(Medarex/Eisai/Genmab);CDP571,其为人源化抗TNF-αIgG4抗体(Celltech);LDP-02,其为人源化抗α4β7抗体(LeukoSite/Genentech);OrthoClone OKT4A,其为人源化抗CD4IgG抗体(Ortho Biotech);ANTOVATM,其为人源化抗CD40L IgG抗体(Biogen);ANTEGRENTM,其为人源化抗VLA-4IgG抗体(Elan);MDX-33,其为人抗CD64(FcγR)抗体(Medarex/Centeon);SCH55700,其为人源化抗IL-5IgG4抗体(Celltech/Schering);SB-240563和SB-240683,其分别为人源化抗IL-5和IL-4抗体(SmithKline Beecham);rhuMab-E25,其为人源化抗IgEIgG1抗体(Genentech/Norvartis/Tanox Biosystems);ABX-CBL,其为鼠抗CD-147IgM抗体(Abgenix);BTI-322,其为大鼠抗CD2IgG抗体(MedImmune/Bio Transplant);Orthoclone/OKT3,其为鼠抗CD3IgG2a抗体(ortho Biotech);SIMULECTTM,其为嵌合抗CD25IgG1抗体(Novartis Pharm);LDP-01,其为人源化抗β2-整联蛋白IgG抗体(LeukoSite);抗LFA-1,其为鼠抗CD18F(ab')2(Pasteur-Merieux/Immunotech);CAT-152,其为人抗TGF-β2抗体(Cambridge Ab Tech);以及Corsevin M,其为嵌合抗因子VII抗体(Centocor)。以上列出的免疫反应剂以及任何其它免疫反应剂可根据本领域技术人员已知的任何方案来施用,包括由免疫反应剂的供应商所推荐的方案。
可与本公开的免疫调节组合物组合使用的治疗性和预防性抗体的其它实例包括阿达木单抗和英利昔单抗(Remicade);ACTEMRATM(Genentech),其为用于治疗抗TNF难治性类风湿性关节炎(RA)和幼年特发性关节炎(JIA)的重组单克隆IgG1抗人白介素6-受体抗体;ARZERRATM(GlaxoSmithKline/Novartis),其为用于治疗RA的针对CD20分子上的近膜表位的嵌合人单克隆抗体;BENLYSTATM(GlaxoSmithKline),其为用于治疗SLE的结合至并抑制可溶性形式的B-淋巴细胞刺激(BLyS)蛋白的人单克隆IgG1γ;ORENCIATM(Bristol-MyersSquibb),其为结合至抗原呈递细胞上的CD80/86以便抑制T细胞上的CD28的共刺激的CTLA-4IgG1,其是用于治疗RA、JIA及SLE;SIMPONI(Janssen),其为作用于可溶性及膜结合TNF-α上的IgG1单克隆抗体,其是用于治疗RA、牛皮癣关节炎(PsA)及强直性脊柱炎(AS);CIMZIATM(UCB Group),其为用于治疗RA的TNF-α单克隆抗体的聚乙二醇化人源化抗体Fab’片段;西法木单抗(MedImmune),其是为治疗SLE、皮肌炎及多发性肌炎而设计的抗IFN-α单克隆抗体;各种静脉内免疫球蛋白产物,其为用于治疗SLE、全身性硬化及血管炎的来自健康个体的免疫球蛋白的集合;KINERETTM(Swedish Oprhan Biovitrum AB)、ILARISTM(Novartis)及ARCALYSTTM(Regeneron),其为用于治疗RA和cryopyrin相关周期综合征(CAPS)的白介素-1阻断剂。
细胞因子
在一些情况下,除CC之外,本公开的免疫调节组合物还包含细胞因子。可包括在本公开的免疫调节组合物中的细胞因子包括但不限于白介素、转化生长因子(TGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、集落刺激因子(CSF)、***活化肽(CTAP)、成骨因子、以及所述生长因子的生物活性类似物、片段及衍生物。合适的细胞因子包括B/T细胞分化因子、B/T细胞生长因子、促有丝***细胞因子、趋化性细胞因子、集落刺激因子、血管生成因子、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL1、IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL11、IL12、IL13、IL14、IL15、IL16、IL17、IL18、IL22等、瘦素、肌生长抑制素、巨噬细胞刺激蛋白、血小板衍生生长因子、肿瘤坏死因子(TNF)-α(TNF-α)、TNF-β、神经生长因子(NGF)、CD40L、CD137L/4-1BBL、人淋巴毒素-β、G-CSF、M-CSF、GM-CSF、血小板衍生生长因子(PDGF)、IL-1α、IL1-β、IP-10、PF4、GRO、9E3、***、内皮抑素、制管张素、血管内皮生长因子(VEGF)或其任何片段或组合。其它细胞因子包括转化生长因子(TGF)超基因家族的成员,包括β转化生长因子(例如TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3);骨形态发生蛋白(例如BMP-1、BMP-2、BMP-3、BMP-4、BMP-5、BMP-6、BMP-7、BMP-8、BMP-9);肝素结合生长因子(例如成纤维细胞生长因子(FGF)、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、***(IGF));造血生长因子(Flt3);垂体生长激素或衍生物;生长激素、刺激神经激素、抑制素(例如抑制素A、抑制素B);分化因子(例如GDF-1);以及活化素(例如,活化素A、活化素B、活化素AB)。在一些情况下,除CC之外,本公开的免疫调节组合物还包含调节细胞因子的化合物或试剂。
佐剂
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种佐剂。
示例性佐剂包括但不限于:(1)水包油型乳液制剂(有或没有其它特异性免疫刺激剂,如胞壁酰肽(参见下文)或细菌细胞壁组分),例如像(a)MF59TM(WO 90/14837;第10章Vaccine design:the subunit and adjuvant approach,编者Powell&Newman,PlenumPress 1995),含有5%角鲨烯、0.5%Tween 80和0.5%Span 85(任选含有MTP-PE),使用微流化器被配制成亚微细粒,(b)SAF,含有10%角鲨烷、0.4%Tween80、5%pluronic-嵌段共聚物L121和thr MDP,被微流化为亚微乳液或涡旋以生成较大粒度的乳液,以及(c)RIBI TM佐剂***(RAS)(Ribi Immunochem,Hamilton,Mont.),含有2%角鲨烯、0.2%Tween 80及一种或多种细菌细胞壁组分,如单磷酰脂质A(MPL)、海藻糖双霉菌酸酯(TDM)及细胞壁骨架(CWS),例如MPL+CWS(Detox TM);(2)皂角苷佐剂,如可使用QS21或StimulonTM(CambridgeBioscience,Worcester,Mass.)或由此产生的颗粒,如ISCOMs(免疫刺激复合体),所述ISCOMS可不含另外的清洁剂,例如WO 00/07621;(3)完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA);(4)细胞因子,如白介素(例如,IL-1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-12、IL-15、IL-28等)(WO99/44636)等)、干扰素(例如γ干扰素)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)、集落刺激因子(例如GM-CSF)等;(5)单磷酰脂质A(MPL)或3-O-脱酰化MPL(3dMPL),例如,GB-2220221、EP-A-0689454,当与肺炎球菌糖一起使用时任选地在实质性缺乏明矾下,例如WO 00/56358;(6)3dMPL与例如QS21和/或水包油乳液的组合,例如EP-A-0835318、EP-A-0735898、EP-A-0761231;(7)包含CpG基序的寡核苷酸(Krieg Vaccine2000,19,618-622;WO 96/02555、WO 98/16247、WO 98/18810、WO 98/40100、WO 98/55495、WO98/37919及WO 98/52581),即含有至少一个CG二核苷酸的寡核苷酸,其中胞嘧啶为未甲基化的;(8)聚氧乙烯醚或聚氧乙烯酯,例如WO 99/52549;(9)与辛苯聚醇组合的聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯表面活性剂(WO 01/21207)或与至少一种另外的非离子型表面活性剂如辛苯聚醇组合的聚氧乙烯烷基醚或酯表面活性剂(WO 01/21152);(10)皂角苷和免疫刺激寡核苷酸(例如CpG寡核苷酸)(WO 00/62800);(11)免疫刺激剂和金属盐颗粒,例如WO 00/23105;(12)皂角苷和水包油型乳液,例如WO 99/11241;(13)皂角苷(例如QS21)+3dMPL+IM2(任选地包括固醇),例如WO 98/57659;(14)αGalCer及其衍生物;(16)toll样受体(TLR)激动剂、NOD样受体(NLR)激动剂、RIG-I激动剂、C型凝集素受体激动剂及其它病原体识别受体(PRR)激动剂,例如CpG ODN、ISS-ODN、林塔托利(rinatolimod)、聚I:C及其衍生物、鞭毛蛋白、安普利近、咪唑喹啉(imidazoquinaline)(例如咪喹莫特、瑞喹莫德)、胞壁酰二肽;(17)充当免疫刺激剂以提高组合物功效的其它物质。胞壁酰肽包括N-乙酰基-胞壁酰基-L-苏氨酰基-D-异谷氨酰胺(thr-MDP)、N-25乙酰基-去甲胞壁酰基-L-丙氨酰基-D-异谷氨酰胺(nor-MDP)、N-乙酰胞壁酰基-L-丙氨酰基-D-异谷氨酰胺基-L-丙氨酸-2-(1'-2'-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-羟基磷酰氧基)-乙胺MTP-PE)等。在一些情况下,包括适于向人施用的佐剂。
其它示例性佐剂包括但不限于:霍乱毒素B亚基、BCG、绿脓假单胞菌外蛋白A、生育酚、HBV核心、大肠埃希氏菌不耐热毒素(如LT-A、LT-B)、百日咳毒素、白喉类毒素、破伤风类毒素、霍乱毒素衍生物(CTA1-DD、CT)、突变的LT和CT、基于铝盐的佐剂(如明矾、磷酸铝、硫酸铝、铝胶)、磷酸钙、高岭土、单磷酰基脂质A(MPLR)及其衍生物、吡喃葡萄糖基脂质A、合成脂质A、脂质A模拟物、维生素E、DepovaxTM、皂角苷(Quil-A、AS01、AS02(角鲨烯+MPL+QS-21))、AS03、AS04(明矾+MPLR)、番茄素(Tomatin)、Protolin、RC-529、PluronicTM、Monatides、Matrix-M、OM-174、Lipovac、IC-31、细菌/分枝杆菌肽(如KLK、阳离子(聚)肽、抗细菌微生物肽、防卫素、特夫素、抗菌肽)、二肽(如匹多莫德)、贝他定、Hepon(十四肽)、SCV-07(γ-D-谷氨酰基-L-色氨酸)、胸腺素-a、Immunofan、Thymogen、吲哚力西丁(Indolicidin)及其衍生物、聚磷腈(polyphosphagene)及其衍生物、Gellan、核苷酸(单核苷酸、二核苷酸、多核苷酸、环核苷酸)、Eurocine等。
除CC之外,本公开的免疫调节组合物还可包含一种或多种粘膜粘着剂,如海藻酸钠、淀粉、凝集素、硫醇化聚合物、GelVacTM、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、卡波姆、十六烷基三甲基溴化铵。
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种佐剂制剂,如水包油乳液、油包水乳液、纳米乳液、微粒递送***、脂质体、微球、生物可降解微球、斑块病毒体、蛋白脂质体、蛋白酶体、免疫刺激复合体(ISCOMs、ISCOMATRIX)、微颗粒、纳米颗粒、生物可降解的纳米颗粒、硅纳米颗粒、聚合微米/纳米颗粒、聚合薄片状底物颗粒(PLSP)、微颗粒树脂、纳米脂质体聚合凝胶(nanolipogel)、合成的/生物可降解的及生物相容性半合成或天然聚合物或树枝状聚合物(如PLG、PLGA、PLA、聚己酸内酯、硅聚合物、聚酯、聚二甲基硅氧烷、聚苯乙烯磺酸钠、聚苯乙烯苄基三甲基氯化铵、聚苯乙烯二乙烯基苯树脂、聚磷腈、聚-[二-(羧基乙酰苯氧基)磷腈(PCPP)、聚-(甲基丙烯酸甲酯)、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、透明质酸及衍生物、壳聚糖及其衍生物、多糖、δ菊粉多糖、糖脂(合成的或天然的)、脂多糖、一种或多种聚阳离子化合物(如聚氨基酸、聚-(γ-谷氨酸)、聚-精氨酸-HCl、聚-L-赖氨酸、多肽、生物高聚物)、阳离子二甲基二(十八烷基)铵(DDA)、α-半乳糖苷神经酰胺及其衍生物、古细菌脂质及衍生物、内酰胺、gallen、甘油酯、磷脂、螺旋体等或其混合物。
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种佐剂制剂,如水包油乳液或油包水乳液,包括可食用油类(如橄榄油、芥子油、植物油、大豆油、矿物油等)。
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种表面活性剂和清洁剂(例如,非离子型清洁剂或类脂囊泡)(如Tween-80、聚山梨醇酯80、Span 85、硬脂酪氨酸等)。本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含以上提及的提供贮库效应的组分或佐剂。
益生菌
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种益生菌。“益生菌”是指含有一个物种(即单一分离株)或纯细菌的组合(即,所需细菌的共培养物)的组合物,并且还可包含任何额外的载体、赋形剂和/或治疗剂,其可向哺乳动物施用以用于恢复微生物群和/或提供健康益处。益生菌的实例包括但不限于乳杆菌属某种、双歧杆菌属某种(Bifidobacteria sp.)、布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii)、链球菌属某种(Streptococcus sp.)、屎肠球菌(Enterococcusfaecium)、凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)、梭菌属某种(Faecalibacterium sp.)等。
益生元
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种益生元。如本文所用,术语“益生元”是指并非由摄取它们的哺乳动物所消化但是作为用于微生物群(特别是肠道微生物群)的生长或活性的基质的营养增补剂。许多益生元为碳水化合物,例如多糖和低聚糖,但该定义不排除非碳水化合物。最普遍形式的益生元在营养学上被归类为可溶性纤维。益生元可提供在胃肠道微生物群的组成和/或活性方面的变化。“益生元”还指的是含有无活力的食物组分的组合物,所述食物组分特别是由被认为具有积极价值的固有细菌(如双歧杆菌属、乳杆菌属等)在体内代谢。益生元的实例包括但不限于果糖、木糖、大豆、葡萄糖、甘露糖等。
微生物群
术语“微生物群”、“微生物组”、“共生菌”或“共生体”可互换使用并且是指在个体中的不同位置(如肠、皮肤、唾液、结肠、***、肺等)处的微生物群体(细菌、病毒、真菌、寄生虫)。微生物群的平衡失调与若干自身免疫和炎性疾病的病因或发病有关。本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含个体的微生物群的成员,如拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、拟杆菌目(Bacteriodales)、肠杆菌目(Enterobacteriales)、梭菌属等。微生物群的成员的其它实例是已知的或将为本领域技术人员显而易见。参见,美国专利申请号2014/0010844。参见,Howarth和Wang,Nutrients.2013,5(1):58-81,关于内源性微生物群、益生菌及它们的生物制品的作用的说明。因此,本发明组合物可用于建立、调节、调控或维持平衡的微生物群。微生物组的成员可以是自体、同种异体及异种来源的、野生型、活的、灭活的、热杀的、突变的、减毒的和/或遗传工程化的。
***原体
除CC之外,本公开的免疫调节组合物还可包含治疗性致病细菌、病毒、真菌等,如李斯特氏菌属、酵母菌属、埃希氏菌属、沙门氏菌属、葡萄球菌属(Staphylococcus)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、痘病毒、腺病毒、溶瘤病毒。治疗性微生物致病体的其它实例是已知的或将为本领域技术人员显而易见。参见,美国专利申请号2014/0010844。***原体可为野生型、活的、灭活的、热杀的、突变的、减毒的和/或基因工程化的。
治疗剂
本公开的免疫调节组合物除CC之外还可包含一种或多种治疗剂。治疗剂的实例是已知的或将为本领域技术人员显而易见。在本文“方法”章节中提供治疗剂的非限制性实例,包括抗炎剂、抗增殖剂、免疫抑制剂、抗组胺剂、免疫调控剂、免疫调节剂、抗代谢剂、抗过敏剂、细胞毒性剂、抗蠕虫剂、抗血管生成剂、抗微生物剂(如抗病毒剂、抗细菌剂、抗寄生虫剂、抗疟疾剂、抗原生动物剂)、治疗性肽等。
方法
本公开提供调节个体中的免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供降低个体中不希望的免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫降低组合物。本公开提供减轻个体中的炎症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫降低组合物。本公开提供治疗个体中的自身免疫病症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供治疗个体中的过敏(过敏性疾病)的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供治疗个体的代谢疾病的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供治疗个体的神经障碍的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供提高个体中的治疗性治疗的功效和/或降低其毒性的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供治疗、恢复或纠正与个体中的微生物组失衡有关的疾病或医学病状的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供治疗、恢复或纠正个体的菌群失调的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。
本公开还提供一种调节树突细胞的方法,所述方法包括:a)使从个体处获得的树突细胞(DC)与包含以下的组合物接触:i)新月柄杆菌;和/或ii)抗原;所述接触步骤是在体外的,以及调节DC上的抗原呈递,由此生成调节的DC群。然后可将调节的DC群向DC由其获得的个体施用。
在一些情况下,各种免疫细胞可从淋巴组织、外周血液、器官及组织处获得和/或可从由骨髓或各种器官处获得的干细胞分化而来。
本公开还提供一种诱导干细胞的增殖、分化和/或调节的方法,所述方法包括使从个体处获得的干细胞与包含新月柄杆菌的组合物接触。干细胞与CC的接触造成干细胞的增殖、分化和/或调节,由此生成扩增的、分化的和/或调节的细胞群。然后可将扩增的、分化的和/或调节的细胞群向干细胞由其获得的个体施用。
本公开还提供一种产生调控性淋巴细胞如NK、NKT、γδT细胞、ILC、T细胞及B细胞的方法,所述方法包括:a)使从个体处获得的淋巴细胞(NK、NKT、γδT细胞、ILC、T细胞、B细胞)在抗原呈递细胞存在或不存在下与包含以下的组合物接触:i)新月柄杆菌;和/或ii)抗原。淋巴细胞与CC的接触产生调控性淋巴细胞,由此生成调控性淋巴细胞群。然后可将调控性淋巴细胞群向淋巴细胞由其获得的个体施用。
调节免疫应答的方法
本公开提供调节个体中的免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供降低个体中不希望的免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫降低组合物。本公开提供减轻个体中的炎症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫降低组合物。本公开提供治疗个体中的自身免疫病症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供治疗个体中的过敏(过敏性疾病)的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。
在一些情况下,免疫应答为体液免疫应答。在一些情况下,本公开提供调节个体中的体液免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。在一些情况下,免疫调节组合物不包括任何另外的抗原(除CC上存在的抗原以外)。在一些情况下,免疫调节组合物包含抗原(例如,除CC上存在的抗原以外的抗原)。如上所述,合适的抗原包括自身抗原和过敏原。
在一些情况下,免疫应答为细胞免疫应答。在一些情况下,本公开提供调节个体中的细胞免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。在一些情况下,免疫调节组合物不包括任何另外的抗原(除CC上存在的抗原以外)。在一些情况下,免疫调节组合物包含抗原(例如,除CC上存在的抗原以外的抗原)。如上所述,合适的抗原包括自身抗原和过敏原。
在一些情况下,免疫应答包括调节B细胞的数量。在一些情况下,本发明方法包括向有此需要的个体施用有效量的免疫调节组合物,其中免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量向个体施用时有效调节(例如减少)个体中的B细胞数量的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中的B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中的抗原特异性B细胞数量的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的抗原特异性B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中的抗原特异性B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的抗原特异性B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中的抗原特异性B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的自身抗原特异性B细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中的自身抗原特异性B细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的B细胞活化的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的B细胞活化水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的B细胞活化至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的B细胞活化水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中的B细胞活化至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中对给定抗原有特异性的抗体的量的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中对给定抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中对所述抗原有特异性的抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中对给定抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中对所述抗原有特异性的抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中一种或多种细胞因子产生的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种细胞因子产生的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中所述一种或多种细胞因子的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种细胞因子的产生相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中所述一种或多种细胞因子的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。在其它情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中GM-CSF的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中GM-CSF的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中GM-CSF的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中GM-CSF的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-22的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中IL-22的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-22的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-22的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中干扰素(IFN)-α或IFN-β或IFN-γ的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中IFN-α和/或IFN-β和/或IFN-γ的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中干扰素(IFN)-α和/或IFN-β和/或IFN-γ的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中干扰素(IFN)-α和/或IFN-β和/或IFN-γ的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6或TNF-α的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6或TNF-α的一种或多种的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6或TNF-α的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6或TNF-α的一种或多种的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-6的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-6的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中IL-1β的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中IL-1β的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中TGF-β的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效提高个体中TGF-β的水平至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。
在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中细胞因子、趋化因子或淋巴毒素如但不限于GM-CSF、IL-2、IL-22、干扰素、IL-1β、TGF-β、IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6、IL-5、IL-13、TNF-α、IL-9、IL-28、KC/IL-8、MIP-1α、LTα4等的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如增加、减少或平衡)个体中一种或多种细胞因子、趋化因子或淋巴毒素如但不限于GM-CSF、IL-2、IL-22、干扰素、IL-1β、TGF-β、IL-17A、IL-2、IL-10、IL-6、IL-5、IL-13、TNF-α、IL-9、IL-28、KC/IL-8、MIP-1α、LTα4等的产生至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍或大于10倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的Th1应答的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的Th1应答水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中的Th1应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的Th1应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中的Th1应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD4+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性CD4+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD8+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD8+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中CD8+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CD8+T的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中CD8+T的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性CD8+T的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性CD8+T的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中自身抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中自身抗原特异性CD8+T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性溶细胞性T细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中自然杀伤(NK)细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和树突细胞(DC)中的一种或多种的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC中的一种或多种的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC中的一种或多种的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中NK细胞、NKT细胞、γδT细胞、ILC、巨噬细胞和DC中的一种或多种的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加、减少或平衡个体中调控性细胞的数量和/或功能的量。Treg(调控性T细胞)为CD4+或CD8+,并且还可为FoxP3+。Treg还可由其它标记如PD-1、CTLA-4等定义。调控性细胞还可包含其它先天性细胞,如NK、NKT、γδT细胞、ILC和DC、及B淋巴细胞。NK和NKT也可为FoxP3+并且也可由其它标记如PD-1定义。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中调控性细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中调控性细胞的数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中的调控性细胞数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效增加个体中的调控性细胞数量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th17细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性Th17细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th22细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中抗原特异性Th22细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中TH9细胞的数量和/或活性的量。如本文所用,“调节TH9细胞的数量和/或活性”是指增加、减少或平衡TH9细胞的数量和/或活性。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中TH9细胞的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节个体中TH9细胞的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)个体中先天性和/或适应性(包括细胞和体液两者)免疫应答的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种先天性或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)个体中先天性和/或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中先天性和/或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中先天性和/或适应性免疫细胞和/或其效应子功能的数量和/或活性至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效诱导和/或加强个体中先天性和/或适应性免疫细胞中的细胞凋亡以免发生不希望的炎症的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中一种或多种先天性或适应性免疫细胞的数量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效诱导和/或加强个体中先天性和/或适应性免疫细胞中的细胞凋亡至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物包含CC和抗原。当本公开的免疫调节组合物包含CC和抗原时,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的免疫应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的免疫应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的免疫应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的免疫应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,当免疫调节组合物包含单独或以组合形式的CC、抗原、自身抗原或过敏原时,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中针对抗原的免疫应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中针对抗原的免疫应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
免疫应答可为体液免疫应答,例如B细胞或抗体免疫应答。因此,例如,在一些情况下,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的B细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的B细胞应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中针对抗原的B细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中针对抗原的B细胞应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。例如,在一些情况下,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下对抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如减少)对抗原有特异性的抗体的量至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中对抗原有特异性的抗体的量相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效减少个体中对抗原有特异性的抗体的量至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
免疫应答可为细胞免疫应答,例如T细胞免疫应答。因此,例如,在一些情况下,当抗原为与自身抗原或过敏原相关或来源于自身抗原或过敏原的抗原时,与在不存在免疫调节组合物治疗下针对抗原的T细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效调节(例如降低)针对抗原的T细胞应答至少约10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中针对抗原的T细胞应答相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效降低个体中针对抗原的T细胞应答至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。在一些情况下,免疫应答为体液免疫应答和细胞免疫应答。
在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效标准化病理免疫应答的一种或多种血清标记的水平的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下个体中CHOL、GLU、GLOB、ALT、AST、TP、PHOS、TRIG、URIC、CK、TBIL或尿素的水平相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效标准化一种或多种血清标记(这些标记包括但不限于胆固醇(CHOL)、葡萄糖(GLU)、球蛋白(GLOB)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总磷酸盐(TP)、总胆红素(TBIL)、磷酸盐(PHOS)、甘油三酯(TRIG)、尿酸(URIC)、肌酸激酶(CK)和尿素)的水平至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%或大于75%的量。
佐剂
在一些实施方案中,本发明方法包括施用本发明的免疫调节组合物,其中所述免疫调节组合物包含CC和一种或多种佐剂。
示例性佐剂包括但不限于:(1)水包油型乳液制剂(有或没有其它特异性免疫刺激剂,如胞壁酰肽(参见下文)或细菌细胞壁组分),例如像(a)MF59TM(WO 90/14837;第10章Vaccine design:the subunit and adjuvant approach,编者Powell&Newman,PlenumPress 1995),含有5%角鲨烯、0.5%Tween 80和0.5%Span 85(任选含有MTP-PE),使用微流化器被配制成亚微细粒,(b)SAF,含有10%角鲨烷、0.4%Tween80、5%pluronic-嵌段聚合物L121和thr MDP,被微流化为亚微乳液或涡旋以生成较大粒度的乳液,以及(c)RIBI TM佐剂***(RAS)(Ribi Immunochem,Hamilton,Mont.),含有2%角鲨烯、0.2%Tween 80及一种或多种细菌细胞壁组分,如单磷酰脂质A(MPL)、海藻糖双霉菌酸酯(TDM)及细胞壁骨架(CWS),例如MPL+CWS(Detox TM);(2)皂角苷佐剂,如可使用QS21或StimulonTM(CambridgeBioscience,Worcester,Mass.)或由此产生的颗粒,如ISCOM(免疫刺激复合体),所述ISCOMS可不含另外的清洁剂,例如WO 00/07621;(3)完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA);(4)细胞因子,如白介素(例如,IL-1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-12、IL-15、IL-28等)(WO99/44636)等)、干扰素(例如γ干扰素)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)、集落刺激因子(例如GM-CSF)等;(5)单磷酰脂质A(MPL)或3-O-脱酰化MPL(3dMPL),例如,GB-2220221、EP-A-0689454,当与肺炎球菌糖一起使用时任选地在实质性缺乏明矾下,例如WO 00/56358;(6)3dMPL与例如QS21和/或水包油乳液的组合,例如EP-A-0835318、EP-A-0735898、EP-A-0761231;(7)包含CpG基序的寡核苷酸(Krieg Vaccine2000,19,618-622;WO 96/02555、WO 98/16247、WO 98/18810、WO 98/40100、WO 98/55495、WO 98/37919及WO 98/52581),即含有至少一个CG二核苷酸的寡核苷酸,其中胞嘧啶为未甲基化的;(8)聚氧乙烯醚或聚氧乙烯酯,例如WO 99/52549;(9)与辛苯聚醇组合的聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯表面活性剂(WO 01/21207)或与至少一种非离子型表面活性剂如辛苯聚醇组合的聚氧乙烯烷基醚或酯表面活性剂(WO 01/21152);(10)皂角苷和免疫刺激寡核苷酸(例如CpG寡核苷酸)(WO 00/62800);(11)免疫刺激剂和金属盐颗粒,例如WO 00/23105;(12)皂角苷和水包油型乳液,例如WO 99/11241;(13)皂角苷(例如QS21)+3dMPL+IM2(任选地包括固醇),例如WO 98/57659;(14)αGalCer及其衍生物;(16)toll样受体(TLR)激动剂、NOD样受体(NLR)激动剂、RIG-I激动剂、C型凝集素受体激动剂及其它病原体识别受体(PRR)激动剂,例如CpG ODN、ISS-ODN、rinatolimod、聚I:C及其衍生物、鞭毛蛋白、安普利近、咪唑喹啉(imidazoquinaline)(例如咪喹莫特、瑞喹莫德)、胞壁酰二肽;(17)充当免疫刺激剂以提高组合物功效的其它物质。胞壁酰肽包括N-乙酰基-胞壁酰基-L-苏氨酰基-D-异谷氨酰胺(thr-MDP)、N-25乙酰基-去甲胞壁酰基-L-丙氨酰基-D-异谷氨酰胺(nor-MDP)、N-乙酰胞壁酰基-L-丙氨酰基-D-异谷氨酰胺基-L-丙氨酸-2-(1'-2'-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-羟基磷酰氧基)-乙胺MTP-PE)等。在一些情况下,包括适于向人施用的佐剂。
其它示例性佐剂包括但不限于:霍乱毒素B亚基、BCG、绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)外蛋白A、生育酚、HBV核心、大肠埃希氏菌不耐热毒素(如LT-A、LT-B)、百日咳毒素、白喉类毒素、破伤风类毒素、霍乱毒素衍生物(CTA1-DD、CT)、突变的LT和CT、基于铝盐的佐剂(如明矾、磷酸铝、硫酸铝、铝胶)、磷酸钙、高岭土、单磷酰基脂质A(MPLR)及其衍生物、吡喃葡萄糖基脂质A、合成脂质A、脂质A模拟物、维生素E、DepovaxTM、皂角苷(Quil-A、AS01、AS02(角鲨烯+MPL+QS-21))、AS03、AS04(明矾+MPLR)、番茄素(Tomatin)、Protolin、RC-529、PluronicTM、Monatides、Matrix-M、OM-174、Lipovac、IC-31、细菌/分枝杆菌肽(如KLK、阳离子(聚)肽、抗细菌微生物肽、防卫素、特夫素、抗菌肽)、二肽(如匹多莫德)、贝他定、Hepon(十四肽)、SCV-07(γ-D-谷氨酰基-L-色氨酸)、胸腺素-a、Immunofan、Thymogen、Indolicidin及其衍生物、聚磷腈及其衍生物、Gellan、核苷酸(单核苷酸、二核苷酸、多核苷酸、环核苷酸)、Eurocine等。
组合疗法
在一些实施方案中,本发明方法涉及施用本发明的免疫调节组合物作为单一疗法,例如,仅施用本发明的免疫调节组合物,而不共同施用任何其它治疗剂。在其它实施方案中,本发明治疗方法为一种组合疗法,其包括施用:a)本发明的免疫调节组合物;和b)至少一种另外的治疗剂(或所述治疗剂的药学上可接受的盐、前药、前药的盐、立体异构体、互变异构体等),其中免疫调节组合物和至少一种另外的治疗剂是以有效调节免疫应答的组合量来施用。合适的另外的治疗剂描述如下。
本发明的组合疗法可包括:a)在同一制剂或单独的制剂中同时施用免疫调节组合物和至少一种另外的治疗剂;b)在施用免疫调节组合物的约5分钟至约4周内施用至少一种另外的治疗剂,例如,在施用免疫调节组合物的以下时段内施用至少一种另外的治疗剂:约5分钟至约15分钟、约15分钟至约30分钟、约30分钟至约60分钟、约1小时至约2小时、约2小时至约4小时、约4小时至约8小时、约8小时至约12小时、约12小时至约24小时、约24小时至约2天、约2天至约4天、约4天至约7天、约1周至约2周、或约2周至约4周。
在一些实施方案中,将至少一种另外的治疗剂与免疫调节组合物共配制。在其它实施方案中,将至少一种另外的治疗剂和免疫调节组合物单独配制。
在一些实施方案中,免疫调节组合物和至少一种另外的治疗剂的有效量为协同量。如本文所用,本发明的免疫调节组合物和另外的(例如第二)治疗剂的“协同组合”或“协同量”为在疾病的治疗性或预防性治疗上比可仅从以下的相加性组合所预测或预期的治疗结果的渐进改善更有效的组合或量:(i)当以与单一疗法相同的剂量施用时免疫调节组合物的治疗性或预防性益处及(ii)当以与单一疗法相同的剂量施用时另外的治疗剂的治疗性或预防性益处。
本发明的组合疗法可包括:施用免疫调节组合物和至少一种另外形式的疗法,如放射疗法(包括放射性同位素,如125I、锶-89、32P、α-放射性同位素、β-放射同位素等)、光动力疗法、激光疗法、天然产物疗法、营养疗法、细胞疗法、益生元疗法、益生菌疗法、共生疗法、副益生菌疗法等,在相同或不同的时间下给予。
本发明的组合疗法可包括:施用免疫调节组合物和至少一种另外形式的疗法,如个体的微生物群的一个或多个成员,如拟杆菌门、变形菌门、厚壁菌门、疣微菌门、拟杆菌目、肠杆菌目、梭菌属、VSL#3等,在相同或不同的时间下给予。因此,本发明可用于建立、调节、调控或维持平衡的微生物群。微生物组的成员可为野生型、活的、灭活的、热杀的、突变的、减毒的和/或基因工程化的。
本发明的组合疗法可包括:施用免疫调节组合物和至少一种另外形式的疗法,如益生菌的一个或多个成员。
本发明的组合疗法可包括:施用免疫调节组合物和至少一种另外形式的疗法,如治疗性致病细菌、病毒、真菌等的一个或多个成员,如李斯特氏菌属、酵母属、埃希氏菌属、沙门氏菌属、葡萄球菌属、克雷伯氏菌属、痘病毒、腺病毒、溶瘤细胞病毒。***原体可为野生型、突变的、减毒的和/或基因工程化的。***原体的成员可为野生型、活的、灭活的、热杀的、突变的、减毒的和/或基因工程化的。
在一些实施方案中,有效量的免疫调节组合物可在异源或同源初次-加强疫苗、免疫疗法和/或化疗方案中施用。
本发明的组合疗法可包括:施用免疫调节组合物和治疗性疫苗。
本发明的组合疗法可包括:施用免疫调节组合物和治疗性抗体。例如,在一些实施方案中,本发明方法包括:a)施用本公开的免疫调节组合物;及b)施用至少一种抗体。CC和抗体可在同一制剂中或在单独的制剂中。CC和抗体可同时或在不同的时间施用。合适的抗体包括针对癌抗原或致病抗原的抗体(例如,治疗性抗体、单克隆抗体、双特异性抗体、化学免疫缀合抗体、放射免疫缀合抗体、抗体-细胞因子融合蛋白、抗体-抗原融合蛋白、抗体-抗毒素融合蛋白等)。合适的抗体包括但不限于针对共刺激或共抑制分子(CD28、CD40、ICOS、CD137、OX40、CD137、CD227、CTLA-4、PD-1、KIR、TCR、PDL1、LAG3、TIM3、VISTA等)的抗体;及其它治疗性抗体。合适抗体的非限制性实例包括但不限于阿达木单抗、贝伐单抗、英夫利昔单抗、阿昔单抗、阿来组单抗、巴匹珠单抗、巴利昔单抗、贝利单抗、巴列津单抗、布罗达单抗、康纳单抗、塞妥珠单抗、西妥昔单抗、西他土珠(conatumumab)、地诺单抗、依库珠单抗、etrolizumab、吉妥单抗奥佐米星、格里木单抗、替伊莫单抗、拉贝珠单抗、马帕妥木单抗、马妥珠单抗、美泊利单抗、莫维珠单抗、莫罗单抗-CD3、那他珠单抗、尼妥珠单抗、奥法木单抗、奥马佐单抗、奥戈伏单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、pemtumornab、帕妥珠单抗、兰尼单抗、利妥昔单抗、罗维珠单抗、托珠单抗、托西莫单抗、曲妥单抗、优特克单抗、维多珠单抗、扎鲁木单抗及扎木单抗。
可与本公开的免疫调节组合物组合使用的治疗性和预防性抗体的非限制性实例包括MDX-010(Medarex,N.J.),其为用于治疗***癌的人源化抗CTLA-4抗体;SYNAGISTM(MedImmune,Md.),其为用于治疗RSV感染的人源化抗呼吸道合胞病毒(RSV)单克隆抗体;及HERCEPTINTM(曲妥单抗)(Genentech,Calif.),其为用于治疗转移性乳腺癌的人源化抗HER2单克隆抗体。其它实例为人源化抗CD18F(ab')2(Genentech);CDP860,其为人源化抗CD18F(ab')2(Celltech,UK);PRO542,其为与CD4融合的抗HIV gp120抗体(Progenics/GenzymeTransgenics);奥司他韦,其为人抗乙型肝炎病毒抗体(Protein Design Lab/Novartis);PROTOVIRTM,其为人源化抗CMV IgGI抗体(Protein Design Lab/Novartis);MAK-195(SEGARD),其为鼠抗TNF-αF(ab')2(Knoll Pharma/BASF);IC14,其为抗CD14抗体(ICOSPharm);人源化抗VEGF IgG1抗体(Genentech);OVAREXTM,其为鼠抗CA 125抗体(Altarex);PANOREXTM,其为鼠抗17-IA细胞表面抗原IgG2a抗体(Glaxo Wellcome/Centocor);BEC2,其为鼠抗独特型(GD3表位)IgG抗体(ImClone System);IMC-C225,其为嵌合抗EGFR IgG抗体(ImClone System);VITAXINTM,其为人源化抗αVβ3整联蛋白抗体(Applied MolecularEvolution/MedImmune);Campath 1H/LDP-03,其为人源化抗CD52IgG1抗体(Leukosite);Smart M195,其为人源化抗CD33IgG抗体(Protein Design Lab/Kanebo);RITUXANTM,其为嵌合抗CD20IgG1抗体(IDEC Pharm/Genentech,Roche/Zettyaku);LYMPHOCIDETM,其为人源化抗CD22IgG抗体(Immunomedics);Smart ID10,其为人源化抗HLA抗体(Protein DesignLab);ONCOLYMTM(Lym-1),其为放射性同位素标记的鼠抗HLA诊断试剂抗体(Techniclone);ABX-IL8,其为人抗IL8抗体(Abgenix);抗CD11a,其为人源化IgG1抗体(Genentech/Xoma);ICM3,其为人源化抗ICAM3抗体(ICOS Pharm);IDEC-114,其为灵长类动物源化抗CD80抗体(IDEC Pharm/Mitsubishi);ZEVALINTM,其为放射性同位素标记的鼠抗CD20抗体(IDEC/Schering AG);IDEC-131,其为人源化抗CD40L抗体(IDEC/Eisai);IDEC-151,其为灵长类动物源化抗CD4抗体(IDEC);IDEC-152,其为灵长类动物源化抗CD23抗体(IDEC/Seikagaku);SMART抗CD3,其为人源化抗CD3IgG(Protein Design Lab);5G1.1,其为人源化抗补体因子5(C5)抗体(Alexion Pharm);D2E7,其为人源化抗TNF-α抗体(CAT/BASF);CDP870,其为人源化抗TNF-αFab片段(Celltech);IDEC-151,其为灵长类动物源化抗CD4IgG1抗体(IDECPharm/SmithKline Beecham);MDX-CD4,其为人抗CD4IgG抗体(Medarex/Eisai/Genmab);CDP571,其为人源化抗TNF-αIgG4抗体(Celltech);LDP-02,其为人源化抗α4β7抗体(LeukoSite/Genentech);OrthoClone OKT4A,其为人源化抗CD4IgG抗体(Ortho Biotech);ANTOVATM,其为人源化抗CD40L IgG抗体(Biogen);ANTEGRENTM,其为人源化抗VLA-4IgG抗体(Elan);MDX-33,其为人抗CD64(FcγR)抗体(Medarex/Centeon);SCH55700,其为人源化抗IL-5IgG4抗体(Celltech/Schering);SB-240563和SB-240683,其分别为人源化抗IL-5和IL-4抗体(SmithKline Beecham);rhuMab-E25,其为人源化抗IgE IgG1抗体(Genentech/Norvartis/Tanox Biosystems);ABX-CBL,其为鼠抗CD-147IgM抗体(Abgenix);BTI-322,其为大鼠抗CD2IgG抗体(MedImmune/Bio Transplant);Orthoclone/OKT3,其为鼠抗CD3IgG2a抗体(ortho Biotech);SIMULECTTM,其为嵌合抗CD25IgG1抗体(Novartis Pharm);LDP-01,其为人源化抗β2-整联蛋白IgG抗体(LeukoSite);抗LFA-1,其为鼠抗CD18F(ab').sub.2(Pasteur-Merieux/Immunotech);CAT-152,其为人抗TGF-β2抗体(Cambridge Ab Tech);以及Corsevin M,其为嵌合抗因子VII抗体(Centocor)。以上列出的免疫反应剂以及任何其它免疫反应剂可根据本领域技术人员已知的任何方案来施用,包括由免疫反应剂的供应商所推荐的方案。
可与本公开的免疫调节组合物组合使用的治疗性和预防性抗体的其它实例包括阿达木单抗和英利昔单抗(Remicade);ACTEMRATM(Genentech),其为用于治疗抗TNF难治性RA和幼年特发性关节炎(JIA)的重组单克隆IgG1抗人白介素6-受体抗体;ARZERRATM(GlaxoSmithKline/Novartis),其为用于治疗RA的针对CD20分子上的近膜表位的嵌合人单克隆抗体;BENLYSTATM(GlaxoSmithKline),其为用于治疗SLE的结合至并抑制可溶性形式的B-淋巴细胞刺激(BLyS)蛋白的人单克隆IgG1γ;ORENCIATM(Bristol-Myers Squibb),其为结合至抗原呈递细胞上的CD80/86以便抑制T细胞上的CD28的共刺激的CTLA-4IgG1,其是用于治疗RA、JIA及SLE;SIMPONI(Janssen),其为作用于可溶性及膜结合TNF-α上的IgG1单克隆抗体,其是用于治疗RA、牛皮癣关节炎(PsA)及强直性脊柱炎(AS);CIMZIATM(UCB Group),其为用于治疗RA的TNF-α单克隆抗体的聚乙二醇化人源化抗体Fab’片段;西法木单抗(MedImmune),其是为治疗SLE、皮肌炎及多发性肌炎而设计的抗IFN-α单克隆抗体;各种静脉内免疫球蛋白产物,其为用于治疗SLE、全身性硬化及血管炎的来自健康个体的免疫球蛋白的集合;KINERETTM(Swedish Oprhan Biovitrum AB)、ILARISTM(Novartis)及ARCALYSTTM(Regeneron),其为用于治疗RA和cryopyrin相关周期综合征(CAPS)的白介素-1阻断剂。
本发明的组合疗法可包括:施用本公开的免疫调节组合物和一种或多种细胞因子。例如,在一些实施方案中,本发明方法包括:a)施用本公开的免疫调节组合物;及b)施用一种或多种细胞因子。CC和一种或多种细胞因子可在同一制剂中或在单独的制剂中。CC和一种或多种细胞因子可同时或在不同的时间施用。合适的细胞因子包括但不限于白介素、转化生长因子(TGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、集落刺激因子(CSF)、***活化肽(CTAP)、成骨因子、以及所述生长因子的生物活性类似物、片段及衍生物。合适的细胞因子包括B/T细胞分化因子、B/T细胞生长因子、促有丝***细胞因子、趋化性细胞因子、集落刺激因子、血管生成因子、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL1、IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL11、IL12、IL13、IL14、IL15、IL16、IL17、IL18、IL22等、瘦素、肌生长抑制素、巨噬细胞刺激蛋白、血小板衍生生长因子、肿瘤坏死因子(TNF)-α(TNF-α)、TNF-β、神经生长因子(NGF)、CD40L、CD137L/4-1BBL、人淋巴毒素-β、G-CSF、M-CSF、GM-CSF、血小板衍生生长因子(PDGF)、IL-1α、IL1-β、IP-10、PF4、GRO、9E3、***、内皮抑素、制管张素、血管内皮生长因子(VEGF)或其任何片段或组合。其它细胞因子包括转化生长因子(TGF)超基因家族的成员,包括β转化生长因子(例如TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3);骨形态发生蛋白(例如BMP-1、BMP-2、BMP-3、BMP-4、BMP-5、BMP-6、BMP-7、BMP-8、BMP-9);肝素结合生长因子(例如成纤维细胞生长因子(FGF)、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、***(IGF));造血生长因子(Flt3);垂体生长激素或衍生物;生长激素、刺激神经激素、抑制素(例如抑制素A、抑制素B);分化因子(例如GDF-1);以及活化素(例如,活化素A、活化素B、活化素AB)。
本发明的组合疗法可包括:施用本公开的免疫调节组合物和一种或多种治疗剂,如抗血管生成剂(例如,在用于治疗实体肿瘤和用于治疗并预防转移的方法中)和抗激素剂(特别是在治疗激素依赖性癌症如乳腺癌和***癌的方法中)。
在一个实施方案中,本公开的免疫调节组合物是与一种或多种抗血管生成剂组合施用。这种试剂包括但不限于制管张素、沙利度胺、kringle 5、内皮抑素、Serpin(丝氨酸蛋白酶抑制剂)抗凝血酶、纤连蛋白的29kDa N末端和40kDa C末端蛋白水解片段、催乳素的16kDa蛋白水解片段、血小板因子-4的7.8kDa蛋白水解片段、对应于血小板因子-4的片段的13-氨基酸肽(Maione等人,1990,Cancer Res.51:2077-2083)、对应于胶原I的片段的14-氨基酸肽(Tolma等人,1993,J.Cell Biol.122:497-511)、对应于血小板反应蛋白I的片段的19氨基酸肽(Tolsma等人,1993,J.Cell Biol.122:497-511)、对应于SPARC的片段的20-氨基酸肽(Sage等人,1995,J.Cell.Biochem.57:1329-1334)、或其任何片段、家族成员或变体,包括其药学上可接受的盐。
抑制血管生成并且对应于层粘连蛋白、纤连蛋白、前胶原及EGF的其它肽也已有所描述(参见,例如Cao,1998,Prog Mol Subcell Biol.20:161-176)。阻断结合RGD蛋白(即,具有肽基序Arg-Gly-Asp)的某些整联蛋白的单克隆抗体和环状五肽已证明具有抗血管形成活性(Brooks等人,1994,Science 264:569-571;Hammes等人,1996,Nature Medicine 2:529-533)。此外,通过受体拮抗剂抑制尿激酶型纤溶酶原激活物受体将抑制血管生成、肿瘤生长和转移(Min等人,1996,Cancer Res.56:2428-33;Crowley等人,1993,Proc Natl AcadSci.90:5021-25)。
在另一实施方案中,本公开的组合疗法包括施用本公开的免疫调节组合物以及激素治疗模式。这种治疗模式包括施用激素拮抗剂(例如,氟他胺、比卡鲁胺、他莫昔芬、雷洛昔芬、乙酸亮丙瑞林(LUPRON)、LH-RH拮抗剂)、激素生物合成和加工的抑制剂、和类固醇(例如,***、类视黄醇、deltoids、倍他米松、皮质醇、可的松、强的松、去氢睾酮、糖皮质激素、盐皮质激素、***、***、孕酮)、维生素A衍生物(例如,所有反式视黄酸(ATRA));维生素D3类似物;抗***(例如,米非司酮、奥那司酮)以及抗雄激素(例如,醋酸赛普罗特博)。
在另一实施方案中,本公开的免疫调节组合物与利用如反义多核苷酸、核糖酶、RNA干扰分子、三股螺旋多核苷酸等多核苷酸化合物的治疗模式结合使用。
在某些实施方案中,本公开的免疫调节组合物与免疫调控剂组合施用。在一些实施方案中,将免疫调节组合物与免疫调控剂一起配制。“免疫调控剂”为抑制、掩蔽或增强所施用的受试者的免疫***的物质。示例性试剂为抑制细胞因子产生、下调或抑制自身抗原表达、或掩蔽MHC抗原的那些物质。这种试剂的实例包括2-氨基-6-芳基-5-取代的嘧啶(参见,美国专利号4,665,077)、咪唑硫嘌呤(或环磷酰胺,如果存在对咪唑硫嘌呤的不良反应的话);溴隐亭;戊二醛(其掩蔽MHC抗原,如美国专利号4,120,649中所述);针对MHC抗原及MHC片段的抗独特型抗体;环孢菌素A;类固醇,如糖皮质类固醇,例如,强的松、甲基强的松龙及***;细胞因子或细胞因子受体拮抗剂,包括抗干扰素-γ、-β或α抗体;抗肿瘤坏死因子-a抗体;抗肿瘤坏死因子-β抗体;抗白介素-2抗体及抗IL-2受体抗体;抗-L3T4抗体;异源抗淋巴细胞球蛋白;泛-T抗体,优选抗CD3或抗CD4/CD4a抗体;含有LFA-3结合域的可溶性肽;IDO抑制剂;链激酶;TGF-β;链道酶;FK506;RS-61443;脱氧精胍菌素;以及雷帕霉素。细胞因子的实例包括但不限于淋巴因子、单核因子及传统的多肽激素。包括在细胞因子中的是生长激素,如人生长激素、N-甲硫氨酰基人生长激素及牛生长激素;甲状旁腺激素;甲状腺素;胰岛素;胰岛素原;松弛素;松弛素原;糖蛋白激素,如促卵泡激素(FSH)、胰高血糖素、促甲状腺激素(TSH)及***(LH);肝生长因子;成纤维细胞生长因子;催乳素;胎盘催乳素;肿瘤坏死因子-α;苗勒氏抑制物质;小鼠***相关肽;抑制素;活化素;血管内皮生长因子;整联蛋白;促血小板生成素(TPO);神经生长因子,如NGF-α;血小板生长因子;转化生长因子(TGF),如TGF-α和TGF-β;***-I和-II;***(EPO);骨诱导因子;干扰素;集落刺激因子(CSF),如巨噬细胞-CSF(M-CSF);粒细胞-巨噬细胞-CgP(GM-CSP);和粒细胞-CSF(G-CSF);白介素(IL),如IL-1、IL-1a、IL-2、1L-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-11、IL-12、IL-15;肿瘤坏死因子,如TNF-α或TNF-β;及其它多肽因子,包括LIF和kit配体(KL)。如本文所用,术语细胞因子包括来自天然来源或重组细胞培养物的蛋白质及天然序列细胞因子的生物活性等效物。免疫调控剂的其它实例包括美沙拉嗪、美沙拉明、柳氮磺胺吡啶、柳氮磺胺吡啶衍生物、抗组胺药、糖皮质激素、肾上腺素、茶碱、色甘酸钠、抗白细胞三烯、用于鼻炎的抗胆碱能药物、抗胆碱能减充血剂、肥大细胞稳定剂、单克隆抗IgE抗体。
在某些实施方案中,本公开的免疫调节组合物是以与一种或多种免疫调节剂(例如细胞因子)的组合疗法形式施用。合适的细胞因子包括但不限于白介素-1(IL-1)、IL-2、IL-3、IL-12、IL-15、IL-18、G-CSF、GM-CSF、促血小板生成素及γ干扰素。
调节抗细菌免疫应答的方法
本公开提供调节针对细菌或由细菌产生的物质的免疫应答的方法,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。
在一些情况下,与个体中的致病细菌的治疗前数量相比,调节针对细菌或由细菌产生的物质的免疫应答的本公开方法有效地将个体中的细菌数量减少了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到致病细菌。
在一些情况下,调节针对细菌或由细菌产生的物质(如内毒素、毒素、LPS等)的免疫应答的本公开方法有效调控针对致病细菌的免疫应答。致病细菌包括例如***、革兰氏阴性细菌、分枝杆菌等。致病细菌的非限制性实例包括分枝杆菌属、链球菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属、奈瑟氏菌属及李斯特氏菌属。在一些情况下,所述细菌为淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhea)、结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、麻风分枝杆菌(M.leprae)、单核细胞增多性李斯特氏菌、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、酿脓链球菌(S.pyogenes)、无乳链球菌(S.agalactiae)、绿色链球菌(S.viridans)、粪链球菌(S.faecalis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epidermis)或牛葡萄球菌(S.bovis)。
所考虑致病细菌的其它实例包括但不限于***(例如李斯特氏菌属、杆菌属如炭疽杆菌(Bacillus anthracis)、丹毒丝菌属物种(Erysipelothrix species))、革兰氏阴性细菌(例如,巴尔通氏体属(Bartonella)、布鲁氏杆菌属(Brucella)、伯克霍尔德菌属(Burkholderia)、弯曲杆菌属(Campylobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、埃希氏菌属、弗朗西斯氏菌属(Francisella)、嗜血杆菌(Hemophilus)、克雷伯氏菌属、摩根氏菌属(Morganella)、变形杆菌属(Proteus)、普罗维登斯菌属(Providencia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙门氏菌属、沙雷氏菌属(Serratia)、志贺氏菌属、弧菌属(Vibrio)及耶尔森氏菌属(Yersinia)物种)、螺旋体细菌(例如,疏螺旋体属(Borrelia)物种,包括引起莱姆病的伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi))、厌氧细菌(例如,放线菌属及梭菌属物种)、革兰氏阳性及阴性球菌、肠球菌属物种、链球菌属物种、肺炎球菌属物种、葡萄球菌属物种、奈瑟氏属菌物种。
特定的感染性细菌的另外的非限制性实例包括柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、衣原体属某些种(Chlamydia spp.)、幽门螺杆菌(Helicobacter pyloris)、伯氏疏螺旋体(Borelia burgdorferi)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)、鸟分枝杆菌(Mycobacteria avium)、胞内分枝杆菌(M.intracellulare)、堪萨斯分枝杆菌(M.kansaii)、戈氏分枝杆菌(M.gordonae)、非洲分枝杆菌(M.africanum)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、脑膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitidis)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、炭疽杆菌(Bacillus anthracis)、鼠疫耶尔森菌(Yersiniapestis)、白喉棒杆菌(Corynebacterium diphtheriae)、红斑丹毒丝菌(Erysipelothrixrhusiopathiae)、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、破伤风杆菌(Clostridiumtetani)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)、多杀性巴氏杆菌(Pasturella multocida)、具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum)、念珠状链杆菌(Streptobacillus moniliformis)、苍白密螺旋体(Treponemapallidium)、细弱密螺旋体(Treponema pertenue)、钩端螺旋体属(Leptospira)、立克次氏体属(Rickettsia)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)及衣氏放线菌(Actinomyces israelli)。
致病细菌可为野生型、活的、灭活的、热杀的、突变的、减毒的和/或遗传修饰的。
在一些情况下,调节针对细菌或由细菌产生的物质的免疫应答的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的抗细菌剂或抗分枝杆菌剂。抗细菌剂和抗分枝杆菌剂在本领域中是已知的,且包括例如β-内酰胺抗生素、四环素、链霉素、氯霉素、新霉素、短杆菌肽、杆菌肽、磺酰胺、呋喃西林、萘啶酮酸、利福平、氟喹诺酮、异烟肼、吡嗪酰胺、万古霉素、甲氧西林等。
合适的抗细菌剂包括例如氨基糖苷类,如氨丁卡霉素、阿泊拉霉素、阿贝卡星、班贝霉素、丁酰苷菌素、达下霉素、双氢链霉素、健霉素、庆大霉素、异帕米星、卡那霉素、小诺米星、新霉素、十一烯酸新霉素、奈替米星、巴龙霉素、核糖霉素、紫苏霉素、壮观霉素、链霉素、烟肼链霉素及托普霉素;袢霉素,如利福酰胺、利福平、利福霉素及利福昔明;β-内酰胺、如碳青霉烯类,如亚胺培南;头孢菌素,如头孢克洛、头孢羟氨下、头孢羟唑、头孢三嗪、孢西酮、头孢唑啉、头孢克肟、头孢甲肟、头孢地嗪、头孢尼西、头孢哌酮、头孢雷特、头孢噻肟、头孢替安、头孢咪唑、头孢匹胺、头孢泊肟酯、头孢沙定、头孢磺啶、头孢他啶、头孢特仑、头孢替唑、头孢布烯、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢唑南、头孢赛曲钠、头孢氨苄、头孢甘酸、头孢利定、头孢菌素、头孢金素、头孢匹林钠、头孢拉定及特头孢氨苄(Pivcefalexin);头霉素类,如头孢拉宗、头孢美唑、头孢米诺、Cefetan及头孢噻吩;单环类,如氨曲南、卡芦莫南及替吉莫南;氧头孢烯类,如氟氧头孢和Moxolactam;青霉素,如美西林、氮卓脉青霉素匹酯、羟氨苄青霉素、氨苄西林、阿帕西林、阿扑西林、阿哚西林、阿洛西林、巴氨西林、苄基青霉酸、青霉素钠、羧苄青霉素、羧苄青霉素苯酯钠、卡茚西林、氯甲西林、氯唑西林、环己西林、双氯西林、联苯青霉素钠、依匹西林、芬贝西林、Floxicillin、海他西林、仑氨西林、美坦西林、甲氧西林钠、美洛西林、奈夫西林钠、苯唑西林、培那西林、喷沙西林氢碘化物、苄胺青霉素G、苄星青霉素G、二苯甲胺青霉素G、青霉素G钙、海巴明青霉素G、青霉素G钾、普鲁卡因青霉素G、盘尼西林N、青霉素O、青霉素V、苄星青霉素V、海巴明青霉素V、青哌环素、苯氧乙基青霉素钾、哌拉西林、匹凡西林、苯丙西林、喹那西林、磺苄西林、酞氨西林、替莫西林及替卡西林;林可酰胺类,如氯林肯霉素和林肯霉素;大环内酯,如阿奇霉素、碳霉素、克拉霉素、红霉素、醋硬脂红霉素、依托红霉素、葡庚糖酸红霉素、乳糖酸红霉素、丙酸红霉素、硬脂酸红霉素、交沙霉素、柱晶白霉素、麦迪霉素、美欧卡霉素、竹桃霉素、伯霉素、罗他霉素、蔷薇霉素、罗红霉素、螺旋霉素及醋竹桃霉素;多肽,如双霉素、杆菌肽、缠霉素、粘菌素、持久杀菌素、结核放线菌素、镰孢真菌素、短杆菌肽、短杆菌肽S、蜜柑霉素、多粘菌素、多粘菌素B-甲磺酸、原始霉素、瑞斯托菌素、替考拉宁、硫链丝菌肽、结核放线菌素、短杆菌酪肽、短杆菌素、万古霉素、紫霉素、泛酸紫霉素、维及霉素和杆菌肽锌;四环素,如阿哌环素、氯四环素、羟甲金霉素、地美环素、强力霉素、胍甲环素、赖氨甲四环素、甲氯环素、甲烯土霉素、米诺环素、土霉素、青哌环素、匹哌环素、罗利环素、脱甲脱氧四环素、琥氯霉素吡甲四环素及四环素;环丝氨酸;莫匹罗星;及抗结核菌素。合适的抗细菌剂包括对细菌有特异性的抗体。
调节抗病毒免疫应答的方法
本公开提供调节针对病毒的免疫应答的方法,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。
在一些情况下,调节针对病毒的免疫应答的本公开方法有效地将个体中的病毒(例如,致病病毒)数量减少了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到致病病毒。
例如,在一些情况下,调节针对病毒的免疫应答的本公开方法有效地将个体中的病毒载量减少了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到致病病毒。在一些情况下,与个体中病毒的基因组拷贝的治疗前数量相比,调节针对病毒的免疫应答的本公开方法有效地将个体中病毒的基因组拷贝数量减少了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到病毒的基因组拷贝。
在一些情况下,调控针对病毒的免疫应答的本公开方法调控针对致病病毒的免疫应答。致病病毒包括但不限于疱疹病毒(HSV-1、HSV-2、VZV、EBV、CMV、HHV-6、HHV-8)、流感病毒(Flu A、B)、肝炎病毒(HepA、HepB、HepC、HepD、HepE)、人免疫缺陷病毒(HIV-1、HIV-2)、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、鼻病毒、腺病毒、SARS病毒、***状瘤病毒、正痘病毒、西尼罗病毒(West Nile viruses)及登革热病毒。致病病毒包括黄病毒科病毒的成员。致病病毒包括选自由以下组成的组的黄病毒:登革热病毒、库宁(Kunjin)病毒、日本脑炎(Japaneseencephalitits)病毒、西尼罗病毒及黄热病病毒。致病病毒包括淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、乙型肝炎病毒、爱泼斯坦巴尔病毒(Epstein Barr virus)及人免疫缺陷病毒。致病病毒包括但不限于逆转录病毒科(Retroviridae)(例如人免疫缺陷病毒,如HIV-1,也称为LAV或HTLV-III/LAV,或HIV-III;及其它分离株,如HIV-LP;小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)(例如脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒;肠道病毒、人柯萨奇病毒(humanCoxsackie viruses)、鼻病毒、埃可病毒);杯状病毒科(Calciviridae)(例如,引起肠胃炎的毒株);披膜病毒科(Togaviridae)(例如马脑炎病毒、风疹病毒);黄病毒科(Flaviridae)(例如登革热病毒、脑炎病毒、黄热病病毒);冠状病毒科(Coronaviridae)(例如冠状病毒);弹状病毒科(Rhabdoviridae)(例如水疱性口腔炎病毒、狂犬病病毒);丝状病毒科(Filoviridae)(例如埃博拉样病毒(ebola-like viruses);马伯格氏病毒(Marburgvirus));副粘病毒科(Paramyxoviridae)(例如副流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒);正粘病毒科(Orthomyxoviridae)(例如流感病毒);布尼亚病毒科(Bungaviridae)(例如汉坦病毒(Hantaan viruses)、布尼亚(bunga)病毒、白蛉热病毒及内罗(Nairo)病毒);砂粒病毒科(Arenaviridae)(出血热病毒);呼肠孤病毒科(Reoviridae)(例如呼肠孤病毒、环状病毒及轮状病毒);波尔纳病病毒科(Bornaviridae);嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)(乙型肝炎病毒);细小病毒科(Parvoviridae)(细小病毒);乳多空病毒科(Papovaviridae)(***状瘤病毒、多形瘤病毒);腺病毒科(Adenoviridae)(例如腺病毒);疱疹病毒科(Herpesviridae)(单纯疱疹病毒(HSV)1和2)、水痘带状疱疹病毒、巨细胞病毒(CMV)、疱疹病毒;痘病毒科(Poxviridae)(天花病毒、牛痘病毒、痘病毒);及虹彩病毒科(Iridoviridae)(例如非洲猪瘟病毒(African swine fever virus));以及未分类的病毒(例如海绵状脑病的病原体、丁型肝炎的病原体,被视为乙型肝炎病毒的有缺陷的卫星)、非甲非乙型肝炎的病原体(1类,内部传播;2类,胃肠外传播,即丙型肝炎病毒);诺沃克和相关病毒(Norwalk and related viruses)及星状病毒。
在一些情况下,调节针对病毒的免疫应答的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂,例如抗病毒剂。
抗病毒剂在本领域中是已知的并且包括例如抗HCV剂,如病毒唑及其类似物;糖苷酶抑制剂;葡糖苷酶抑制剂;IRES(内部核糖体进入位点)、p7、进入、融合、解旋酶、组装、外出、NS2、NS3、NS4、NS5a及NS5B抑制剂;肌苷一磷酸脱氢酶抑制剂;亲环蛋白抑制剂;金属蛋白酶抑制剂;抗HCV核苷(酸)及非核苷RNA聚合酶抑制剂等;抗HIV剂;抗HBV剂;等等。
在一些实施方案中,所述至少一种另外的治疗剂为干扰素(例如,干扰素-α、干扰素-β、干扰素-γ、干扰素-λ、干扰素-τ、干扰素-ω等)。在一些实施方案中,所述至少一种另外的治疗剂为IFN-α。在一些实施方案中,所述至少一种另外的治疗剂为IFN-β。
用于治疗HCV感染的合适的另外的抗病毒剂包括但不限于病毒唑及其前药,如盐酸塔利韦林、特拉匹韦、索菲布韦、波普瑞韦、西鲁瑞韦、西咪匹韦、丹诺普韦、范尼普韦、MK-5172、MK-0608、2’-C-甲基-7-去氮腺苷、2’-C-甲基-腺苷、BI201335、那拉普韦(narlaprevir)、阿那匹韦、GS-9256、GS-9451、ABT-450、IDX-320、ACH-1625、瓦洛他滨、mericitabine、R1626、PSI-938、INX-189、BILN1941、BI-207127、VCH222、VX-135、ANA598、ANA773、ABT-072、ABT-333、HCV-796、GS-9190、Daclatasavir、BMS-824393、BMS-791325、PPI-461、GS-5885、阿拉泊韦(Debio-025)、NIM-811、SCY-635、硝唑尼特、克立咪唑、miravirasen、西戈斯韦、BCX-5191、GSK-2336805、抗-PD-1抗体(CT-011)、巴维昔单抗(抗磷脂酰丝氨酸Mab)、治疗性疫苗(GI-5005、IC-41、TG-4040)预防性疫苗(如HCV E1/E2/MF-59)及其前药。合适的另外的治疗剂包括例如用于治疗乙型肝炎病毒感染的治疗剂,包括但不限于拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦、telbuvudine、替诺福韦及其前药。
例如,用于治疗HCV感染的合适的另外的抗病毒剂包括聚乙二醇化IFN-α的每周注射与病毒唑(1-β-D-呋喃核糖基-1H-1,2,4-***-3-甲酰胺)的每天两次口服剂量的组合。
合适的另外的治疗剂包括例如用于治疗免疫缺陷病毒感染或用于治疗可伴随免疫缺陷病毒感染的病症(例如细菌感染、真菌感染等)的治疗剂。合适的另外的治疗剂包括例如β-内酰胺抗生素、四环素、氯霉素、新霉素、短杆菌肽、杆菌肽、磺酰胺、呋喃西林、萘啶酮酸、可的松、氢化可的松、倍他米松、***、氟考龙、***龙、曲安奈德、吲哚美辛、舒林酸、阿昔洛韦、金刚烷胺、金刚烷乙胺、重组可溶性CD4(rsCD4)、蓝藻抗病毒蛋白-N、microvirin、恩夫韦、抗受体抗体(例如针对鼻病毒)、奈韦拉平、西多福韦(VistideTM)、磷甲酸三钠(FoscarnetTM)、泛昔洛韦、喷昔洛韦、伐昔洛韦、核酸/复制抑制剂、干扰素、叠氮胸苷(AZT,RetrovirTM)、去羟肌苷(双去氧肌苷,ddI,VidexTM)、司他夫定(d4T,ZeritTM)、扎西他宾(双脱氧胞苷,ddC,HividTM)、奈韦拉平(ViramuneTM)、拉米夫定(EpivirTM,3TC)、蛋白酶抑制剂、沙奎那韦(InviraseTM、FortovaseTM)、利托那韦(NorvirTM)、奈非那韦(ViraceptTM)、依法韦仑(SustivaTM)、阿巴卡韦(ZiagenTM)、安普那韦(AgeneraseTM)茚地那韦(CrixivanTM)、更昔洛韦、AzDU、地拉韦啶(RescriptorTM)、洛匹那韦(kaletra)、三协维、利福平、clathiromycin、***、集落刺激因子(G-CSF和GM-CSF)、非核苷逆转录酶抑制剂、核苷抑制剂、病毒进入抑制剂、融合抑制剂、整合酶抑制剂、阿霉素、氟尿嘧啶、氨甲蝶呤、天冬酰胺酶及其组合。用于HIV的另外的合适的治疗剂包括整合酶和融合抑制剂,如雷特格韦、艾特格韦、恩夫韦地、马拉维若等。
在一些实施方案中,至少一种另外的治疗剂为神经氨糖酸苷酶抑制剂,例如,其中流感病毒为流感A或流感B。合适的神经氨糖酸苷酶抑制剂包括例如奥司他韦((3R,4R,5S)-5-氨基-4-乙酰胺基-3-(戊烷-3-基氧基)环己-1-烯-1-甲酸乙酯;TamifluTM)、扎那米韦(2R,3R,4S)-4-[(二氨基亚甲基)氨基]-3-乙酰胺基-2-[(1R,2R)-1,2,3-三羟基丙基]-3,4-二氢-2H-吡喃-6-甲酸;RelenzaTM)、及帕拉米韦(1S,2S,3S,4R)-3-[(1S)-1-乙酰胺基-2-乙基-丁基]-4-(二氨基亚甲基氨基)-2-羟基-环戊烷-1-甲酸)。在一些实施方案中,至少一种另外的治疗剂为M2阻断剂,例如阻断病毒性离子通道(M2蛋白)。抗病毒药物金刚烷胺和金刚烷乙胺为M2阻断剂,并且可用于本方法中。
例如用于治疗HSV-1或HSV-2感染的合适的另外的治疗剂包括但不限于阿昔洛韦(Zovirax)、缬更昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦(Valtrex)、更昔洛韦(Cytovene)、西多福韦(Vistide)、反义寡核苷酸福米韦生(Vitravene)、膦甲酸(Foscavir)、喷昔洛韦、碘苷、阿糖腺苷及曲氟尿苷。
在一些实施方案中,所述一种或多种不同治疗剂为所选出的靶向两种或更多种不同病毒的抗病毒剂;例如,HIV抑制剂、HBV抑制剂、HCV抑制剂、疱疹病毒抑制剂、流感病毒抑制剂、RNA抑制剂、干扰RNA(RNAi)抑制剂、天然产物等。在一些情况下,治疗病毒感染的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂,例如,单克隆抗体或针对病毒抗原的抗体产物,其中合适的单克隆抗体包括但不限于HBIg、针对流感病毒毒株的抗体、抗甲型肝炎病毒抗体、SYNAGIS(抗RSVMab)、抗狂犬病抗体、ostavir(抗HBV Mab)、Pro542(抗HIV gp120)、Potovir(抗CMV Mab)、抗PD-1抗体(CT-011)、巴维昔单抗(抗磷脂酰丝氨酸Mab)等。
调节针对寄生虫感染的免疫应答的方法
本公开提供调节针对微生物寄生虫(例如,致病原生动物;蠕虫;等)的免疫应答的方法,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。
在一些情况下,与个体中的微生物寄生虫的治疗前数量相比,调节针对微生物寄生虫的免疫应答的本公开方法有效地将个体中的微生物寄生虫(例如,致病原生动物;致病蠕虫)数量减少了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到微生物寄生虫。
在一些情况下,调节针对微生物寄生虫的免疫应答的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。抗寄生虫剂在本领域中是已知的并且包括例如氯喹等。例如,抗疟疾剂包括例如奎宁、氯喹、阿托伐醌、氯胍、伯氨喹、氨酚喹、甲氟喹、喹哌、青蒿素、次甲基蓝、乙胺嘧啶、磺胺多辛、蒿甲醚-苯芴醇、氨苯砜-氯丙胍、青蒿琥酯、奎尼丁、氯羟吡啶、吡啶/吡啶酚类似物、4(1H)-喹啉酮类似物、双氢青蒿素、阿托伐醌与氯胍的混合物、内过氧化物及吖啶酮。抗寄生虫剂包括对寄生虫有特异性的抗体。
在一些情况下,调节(例如降低)针对微生物寄生虫的免疫应答的本公开方法调节针对以下微生物寄生虫的免疫应答:如疟原虫属某些种(Plasmodium spp.)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、巴贝西虫属某些种(Babesia spp.)、旋毛线虫(Trichinellaspiralis)、痢疾内变形虫(Entamoeba histolytica)、蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)、比氏肠胞虫(Enterocytozoon bieneusi)、纳氏虫属(Naegleria)、棘阿米巴属(Acanthamoeba)、罗德西亚锥虫(Trypanosoma rhodesiense)和冈比亚锥虫(Trypanosomagambiense)、等孢子球虫属某些种(Isospora spp.)、隐孢子虫属某些种(Cryptosporidiumspp.)、艾美虫属某些种(Eimeria spp.)、新孢子虫属某些种(Neospora spp.)、肉孢子虫属某些种(Sarcocystis spp.)及血吸虫属某些种(Schistosoma spp)。
在一些情况下,调节(例如降低)针对原生动物寄生虫的免疫应答的本公开方法调节针对以下原生动物寄生虫的免疫应答:如贾第鞭毛虫属;疟原虫属物种(例如镰状疟原虫(Plasmodium falciparum));刚地弓形虫;隐孢子虫属;毛滴虫属(Trichomonas)物种;锥虫(例如克氏锥虫(Trypanosoma cruzi));或利什曼虫属(Leishmania)。
调节针对致病真菌的免疫应答的方法
本公开提供调节对致病真菌的免疫应答的方法,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。
在一些情况下,与个体中的真菌体的治疗前数量相比,调节针对致病真菌的免疫应答的本公开方法有效地将个体中的真菌体数量减少了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到致病真菌。
在一些情况下,调节(例如降低)针对致病真菌的免疫应答的本公开方法诱导或调节针对以下真菌的免疫应答:如念珠菌属某些种(Candida spp.),包括白色念珠菌(C.albicans);曲霉属某些种(Aspergillus spp.);隐球酵母属(Cryptococcus spp.),包括新型隐球菌(C.neoformans);芽生菌属某种(Blastomyces sp.);肺细胞属某些种(Pneumocytes spp.)或球孢子菌属某些种(Coccidioides spp.)。
在一些情况下,调节针对致病真菌的免疫应答的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。抗真菌剂在本领域中是已知的并且包括例如氟康唑、5-氟胞嘧啶等。
合适的抗真菌剂包括例如多烯类,如两性霉素-B(包括两性霉素-B的各种制剂)、杀假丝菌素、制皮菌素、菲律宾菌素、制霉色基素、八丈岛霉素、哈霉素、鲁斯霉素、美帕曲星、游霉素、制霉菌素、拟青霉素及表霉素;及其它,如重氮丝氨酸、灰黄霉素、寡霉素、十一碳烯酸新霉素、吡咯尼群、干蠕孢菌素、杀结核菌素及绿胶霉素;烯丙胺类,如萘替芬和特比萘芬;咪唑类,如联苯苄唑、布康唑、氯登妥因、氯苄达唑、氯康唑、克霉唑、益康唑、恩康唑、芬替康唑、异康唑、酮康唑、霉康唑、奥莫康唑、奥昔康唑、硝酸盐、硫康唑及噻康唑;***类,如氟康唑、伊曲康唑及特康唑;及其它,如吖啶琐辛、阿莫罗芬、苯柳胺酯、溴柳氯苯胺、丁氯柳胺、丙酸钙、Chlophenesin、环匹罗司、氯羟喹啉、Coparaffinate、双胺噻唑、二盐酸盐、依沙酰胺、氟胞嘧啶、哈利他唑、海克替啶、氟苯氯苯硫脲、硝呋太尔、碘化钾、丙酸、羟基吡啶硫酮、水杨酰苯胺、丙酸钠、二苯嗪硫酮、替诺尼唑、托西拉酯、托林达酯、托萘酯、五羟黄酮、苄硫噻二嗪乙酸、十一碳烯酸及丙酸锌。
治疗过敏性疾病的方法
本公开提供治疗个体中的过敏性疾病如哮喘、过敏性鼻炎、结膜炎、特应性皮炎的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。在一些情况下,本公开的治疗过敏性疾病的方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物,其中所述免疫调节组合物包含过敏原。合适的过敏原如上所述。
在一些情况下,治疗过敏性疾病的本公开方法有效调控免疫应答。在一些情况下,与治疗前水平相比,治疗过敏性疾病的本公开方法有效减少以下一个或多个:a)个体中的IgE水平;b)个体中的过敏原特异性IgE的水平;c)个体中的肥大细胞数量;d)个体中的组胺水平;以及e)个体中的IL-4水平。
在一些情况下,治疗过敏性疾病的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。合适的另外的治疗剂包括例如抗组胺药、类固醇(例如皮质类固醇)、***素诱导物、抗炎剂、白细胞三烯拮抗剂、IL-4突变蛋白、可溶性IL-4受体、免疫抑制剂(如耐受肽疫苗)、抗IL-4抗体、IL-4拮抗剂、抗IL-5抗体、可溶性IL-13受体-Fc融合蛋白、抗IL-9抗体、CCR3拮抗剂、CCR5拮抗剂、VLA-4抑制剂及IgE的下调剂。合适的类固醇包括但不限于倍氯米松、氟替卡松、曲安缩松、布地缩松、皮质类固醇及布地缩松。
治疗自身免疫病症的方法
本公开提供治疗个体中的自身免疫病症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。自身免疫病状引起许多自身免疫病症,如类风湿性关节炎、哮喘、1型糖尿病、多发性硬化症、全身性红斑狼疮(SLE)、斯耶格伦综合征、动脉粥样硬化、自身免疫肝炎、自身免疫胰腺炎、乳糜泻、自身免疫性溶血性贫血、强直性脊柱炎、自身免疫疾病相关癌症、自身免疫疾病相关纤维化等。通过用本公开的免疫调节组合物调节先天性和适应性免疫机制,可治疗自身免疫病症。在一些情况下,治疗自身免疫病症的本公开方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物,其中所述免疫调节组合物包含自身抗原。合适的自身抗原如上所述。
在一些情况下,与自身反应性T细胞的治疗前数量和/或活性相比,治疗自身免疫病症的本公开方法有效地将个体中的自身反应性T细胞的数量和/或活性减少了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到自身反应性T细胞。
在一些情况下,与自身抗体的治疗前水平相比,治疗自身免疫病症的本公开方法有效地将个体中的自身抗体水平降低了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到自身抗体。
在一些情况下,与细胞因子的治疗前水平相比,治疗自身免疫病症的本公开方法有效地将个体中的细胞因子水平调节了至少约25%、至少约50%、至少约75%或至少约99%,或者以致于在个体中(例如,在从个体处获得的生物样品中)不能检测到细胞因子。
在一些情况下,治疗自身免疫病症的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。可用于治疗自身免疫病症的治疗剂的实例包括但不限于抗炎剂;免疫抑制剂(例如皮质类固醇(例如强的松、皮质醇、甲基强的松龙等))、环孢菌素A);细胞毒性剂(例如6-巯基嘌呤、咪唑硫嘌呤、氨甲蝶呤、烷化剂、抗代谢物剂);植物碱;天然产物;甾体激素;低氧剂;抗增殖剂;抗癌剂;达那唑;colchisine;左旋四咪唑;生物应答调节剂等等。
也可用于治疗自身免疫病症的治疗剂的实例包括用于减少细胞增殖的试剂,其在本领域中是已知的并且广泛使用。这种试剂包括烷化剂,如氮芥类、亚硝基脲、氮丙啶衍生物、烷基磺酸盐及三氮烯,包括但不限于二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、环磷酰胺(Cytoxan.TM.)、美法仑(L-溶肉瘤素)、卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀(甲基-CCNU)、链脲霉素、氯脲霉素、尿嘧啶氮芥、双氯乙基甲胺(chlormethine)、异环磷酰胺、氮芥苯丁酸、双溴丙基哌嗪、曲他胺、三亚乙基硫代磷酰胺、白消安、氮烯唑胺及替莫唑胺。
抗代谢剂包括叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物及腺苷脱氨酶抑制剂,包括但不限于阿糖胞苷(CYTOSAR-U)、胞嘧啶***糖苷、氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(FudR)、6-硫代鸟嘌呤、6-巯基嘌呤(6-MP)、喷司他丁、5-氟尿嘧啶(5-FU)、氨甲蝶呤、10-炔丙基-5,8-二脱氮杂叶酸盐(PDDF,CB3717)、5,8-二脱氮杂四氢叶酸(DDATHF)、甲酰四氢叶酸、磷酸氟达拉滨、喷司他丁、吉西他滨、环胞苷、胍唑、肌苷乙二醇二醛、EICAR、病毒唑、噻唑扶林、去铁胺(defroxamine)及吡唑并咪唑。
合适的天然产物及它们的衍生物(例如长春花生物碱、抗肿瘤抗生素、酶、淋巴因子及表鬼臼毒素)包括但不限于Ara-C、紫杉醇多西他赛脱氧柯福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、咪唑硫嘌呤;布喹那;生物碱,例如长春新碱、长春花碱、长春瑞滨、长春地辛等;鬼臼霉素,例如依托泊苷、替尼泊苷、喜树碱等;抗生素,例如蒽环霉素、盐酸柔红霉素(道诺霉素、红比霉素、柔红霉素)、伊达比星、阿霉素、表柔比星及吗啉代衍生物等;phenoxizone双环肽,例如更生霉素;碱性糖肽,例如博来霉素;蒽醌甙,例如普卡霉素(光神霉素);蒽二酮,例如米托蒽醌;氮丙啶吡咯并吲哚二酮,例如丝裂霉素;大环免疫抑制剂,例如环孢菌素、FK-506(他克莫司,普乐可复)、雷帕霉素等;抗血管类黄酮;等等。其它试剂包括矿物质、营养素、维生素、增补剂、抗氧化剂、药草、香料(姜、牛至、丁香等)、天然保健品(绿茶、鱼油等)及抗炎治疗和形式。
其它抗增殖细胞毒性剂为诺维本(navelbene)、CPT-11、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、雷洛昔芬、环磷酰胺、叶酸、视黄酸、异环磷酰胺及多洛克方(droloxafine)。其它合适的抗增殖剂包括siRNA、干扰RNA(RNAi)及反义RNA。
具有抗增殖活性的微管影响剂也是适用的且包括但不限于别秋水仙碱(NSC406042)、软海绵素B(NSC 609395)、秋水仙碱(NSC 757)、秋水仙碱衍生物(例如NSC33410)、多拉司他汀10(NSC 376128)、美登素(NSC 153858)、利索新(NSC 332598)、紫杉醇衍生物、多西他赛硫代秋水仙碱(NSC 361792)、三苯甲基半胱氨酸(trityl cysterin)、硫酸长春碱、硫酸长春新碱、天然和合成的埃博霉素,包括但不限于埃博霉素A、埃博霉素B、圆皮海绵内酯;雌氮芥、诺考达唑等。
适用的激素调节剂和类固醇(包括合成类似物)包括但不限于肾上腺类固醇,例如强的松、***等;***和孕酮,例如己酸羟孕酮、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、***、哥罗米酚、他莫昔芬等;及肾上腺皮质抑制剂,例如氨鲁米特;17α-乙炔***;己烯雌酚、***、氟羟***、丙酸屈他雄酮、睾内酯、甲基强的松龙、甲基***、***龙、曲安奈德、氯三芳乙烯、羟孕酮、氨鲁米特、雌氮芥、醋酸甲羟孕酮、亮丙瑞林、氟他胺(Drogenil)、托瑞米芬(Fareston)及***刺激增殖和分化;因此,结合至***受体的化合物用于阻断此活性。皮质类固醇可抑制T细胞增殖。
其它细胞毒性剂包括金属配合物,例如顺铂(顺式-DDP)、卡铂等;脲,例如羟基脲;及肼,例如N-甲肼;表鬼臼毒素;拓扑异构酶抑制剂,例如依立替康、磷酸足叶乙甙、米托蒽醌;甲基苄肼;米托蒽醌;甲酰四氢叶酸;替加氟等。所关注的其它抗增殖剂包括免疫抑制剂,例如霉酚酸、沙利度胺、脱氧司加林、azasporine、来氟米特、咪唑立宾、氮杂螺烷(azaspirane)(SKF 105685);(ZD 1839,4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-(3-(4-吗啉基)丙氧基)喹唑啉);等等。
适于与本公开方法结合使用的生物应答调节剂包括但不限于:(1)酪氨酸激酶(RTK)活性抑制剂;(2)丝氨酸/苏氨酸激酶活性抑制剂;(3)肿瘤相关抗原拮抗剂,如特异性地结合至肿瘤抗原的抗体;(4)细胞凋亡受体激动剂;(5)白介素-2;(6)干扰素-α;(7)干扰素-γ;(8)集落刺激因子;(9)血管生成抑制剂;(10)肿瘤坏死因子拮抗剂子;及(11)BRAF抑制剂。
治疗包括免疫失调的疾病的方法
本公开提供调节、恢复和/或调控个体中的免疫功能障碍的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。免疫功能障碍病状引起许多疾病,如类风湿性关节炎(RA)及相关疾病、糖尿病、牛皮癣、全身性红斑狼疮(SLE)及相关疾病、移植物抗宿主疾病(GVHD)、溃疡性结肠炎、细菌诱导的结肠炎、克罗恩氏病、斑形脱发、哮喘、过敏性鼻炎、结膜炎、移植排斥、桥本氏甲状腺炎、炎性肠病(IBD)、短肠综合征及其它胃肠病症(如克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、心血管疾病、肥胖、伤口愈合、烧伤恢复、衰老、体重增加、脂肪沉积等。肠粘膜表面处的免疫应答失调可通过增加来自肠道的微生物及微生物产物的移位而造成全身性免疫***激活。通过用本公开的免疫调节组合物调节先天性和适应性免疫机制(包括免疫细胞、细胞因子、抗体等),免疫失调可得到预防和/或治疗。
在一些情况下,治疗免疫功能障碍病症的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。
在一些情况下,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的呈疫苗形式的本公开的免疫调节组合物,所述疫苗包含将调节针对疾病相关抗原的有障碍的免疫应答的抗原。
在一些情况下,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物以便保护、调节、恢复或纠正患者微生物组中的疾病或医学病状相关的不平衡。微生物群中的平衡失调引起了各种病症,如皮肤病状、活跃的炎性应答、炎症相关癌症、早产、不育症、女性避孕、泌尿生殖器感染、性传播疾病等。
本发明的另一方面包括通过大体上增加或减少受试者的微生物区的相对丰度的治疗方法。
在一些情况下,治疗免疫失调并恢复体内平衡的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的所述微生物组的一个或多个成员或益生菌。
治疗包括不希望的炎性活性的疾病的方法
本公开提供调节和/或调控个体中不希望的炎性活性的方法,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。不希望的炎性病状造成许多疾病,如腹泻病、由化疗或放疗引起的粘膜炎、由感染因子或抗生素引起的肠胃炎、结肠袋炎、肥胖相关炎症、阑尾炎、器官(肝、肾、肺、心、胰岛等)移植、细菌感染、病毒感染、真菌感染、癌症相关炎症、泌尿生殖器疾病、细菌性***病、手术相关损伤、败血症、厌食症、高草酸尿症、溃疡、伤口愈合、肾病、肝病、肝纤维化、酒精性肝炎、纤维化疾病如肺纤维化、肾纤维化、特发性肺纤维化、痤疮、不希望的呼吸道炎性活性、炎症相关癌症、炎症相关器官(肺、肝、肾、心、胃肠道、脑等)损伤和损害、自发炎症疾病(如TNF受体相关周期性综合征、杜宾-强生综合征(Dubin Johnson syndrome)、***(Behcet’s disease)、家族性地中海热等)等。通过用本公开的免疫调节组合物调节先天性和适应性免疫机制(包括免疫细胞、细胞因子、趋化因子、抗体等),炎性病症可得到预防和/或治疗。
在本发明的一个方面,控制不希望的炎性应答还包括调节激素、***素、反应性中间体及白细胞三烯的水平。
在一些情况下,治疗炎性病症的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂、微生物组的一个或多个成员或益生菌。可用于治疗炎性病状的治疗剂的实例包括但不限于抗炎剂;免疫抑制剂;细胞毒性剂等。
可用于治疗炎性病状的治疗剂的其它非限制性实例包括:钙调磷酸酶抑制剂(例如,吡美莫司、他克莫司等)、氨甲蝶呤、环孢菌素和局部试剂(例如,他扎罗汀、蒽林、卡泊三烯(calciprotriene)、皮质类固醇等)。
在一些情况下,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的呈疫苗形式的本公开的免疫调节组合物,所述疫苗包含将调节针对疾病相关抗原的炎性免疫应答的抗原。
所述组合物适于治疗的自身免疫疾病、免疫失调、炎症、过敏性疾病、真皮疾病、感染性疾病及器官移植的其它实例包括以下疾病,如原发性硬化性胆管炎、口炎性腹泻、自身免疫性关节炎、莱姆关节炎、牛皮癣关节炎、反应性关节炎、脊柱关节病、皮炎、硬皮病、结节病、弥漫性血管内凝血、川崎病(Kawasaki's disease)、肾病综合征、慢性疲劳综合征、纤维肌痛、韦格纳氏肉芽肿病(Wegener’s granulomatosis)、亨-舍二氏紫癜(Henoch-Schoenlejn purpurea)、显微镜下肾血管炎、慢性活动性肝炎、葡萄膜炎、败血性休克、中毒性休克综合征、败血症综合征、恶病质、获得性免疫缺陷综合征、急性横贯性脊髓炎、亨廷顿氏舞蹈病(Huntington's chorea)、原发性胆汁性肝硬化、溶血性贫血、I型多腺体缺陷综合征和II型多腺体缺陷综合征、施密特氏综合征(Schmidt's syndrome)、成人(急性)呼吸窘迫综合征、血清反应阴性关节病、关节病、莱特尔氏病(Reiter's disease)、牛皮癣性关节病、衣原体、耶尔森氏菌属和沙门氏菌属相关关节病、脊柱关节病、动脉粥样硬化性疾病/动脉硬化、过敏性结肠炎、特异反应性过敏、食物过敏如花生过敏、树坚果过敏、蛋过敏、牛奶过敏、大豆过敏、小麦过敏、海鲜过敏、贝类过敏或芝麻籽过敏、自身免疫大疱病、寻常天疱疮、落叶型天疱疮、类天疱疮、线性IgA疾病、自身免疫性溶血性贫血、库姆阳性溶血性贫血(Coombs positive haemolytic anaemia)、获得性恶性贫血、幼年型恶性贫血、肌痛性脑炎/贵族自由疾病(Royal Free Disease)、自身免疫性脑脊髓炎、慢性皮肤粘膜念珠菌病、巨细胞性动脉炎、非酒精性脂肪肝疾病、脂肪性肝炎、原发性硬化性肝炎、隐原性自身免疫性肝炎、获得性免疫缺陷相关疾病、丙型肝炎、常见变异型免疫缺陷(常见变异型血丙种球蛋白过少)、扩张型心肌病、纤维化肺病、隐原性纤维性肺泡炎、炎症后间质性肺病、间质性肺炎、***疾病相关的间质性肺病、混合***病相关的肺病、全身性硬化相关的间质性肺病、斯耶格伦病(Sjogren's disease)相关的肺病、强直性脊柱炎相关的肺病、血管炎弥漫性肺病、含铁血黄素沉着相关的肺病、药物诱导的间质性肺病、放射后肺纤维化、闭塞性细支气管炎、慢性嗜酸细胞性肺炎、淋巴细胞性渗透性肺病、感染后间质性肺病、痛风性关节炎、1型自身免疫性肝炎(典型的自身免疫性或狼疮样肝炎)、2型自身免疫性肝炎(抗LKM抗体肝炎)、自身免疫介导的低血糖、伴有黑棘皮病的B型胰岛素抗性、甲状旁腺机能减退、骨关节病、原发性硬化性胆管炎、特发性白细胞减少、自身免疫性中性粒细胞减少症、肾病NOS、肾小球性肾炎、显微镜下肾血管炎、盘状狼疮、红斑狼疮、***、特发性或NOS、***自身免疫、交感性眼炎、继发于***疾病的肺高血压、古德帕斯彻氏综合征(Goodpasture’s syndrome)、多发性结节性动脉炎的肺部表现、急性风湿热、类风湿性脊椎炎,斯提耳氏病(Still's disease)、全身性硬化、高安氏病(Takayasu's disease)/动脉炎、自身免疫性血小板减少症、特发性血小板减少症、自身免疫性甲状腺病、甲状腺机能亢进、萎缩性自身免疫性甲状腺机能减退、原发性黏液腺瘤病、晶状体源性葡萄膜炎、原发性血管炎、白斑病、过敏症、宠物过敏、乳液过敏、药物过敏、过敏性鼻结膜炎、嗜曙红的食管炎、嗜酸性白细胞增多综合征、嗜酸细胞性肠胃炎、皮肤红斑狼疮、嗜酸细胞性食管炎、嗜酸性白细胞增多综合征、嗜酸细胞性肠胃炎、牙周疾病如慢性齿龈炎和牙周炎、泌尿生殖***病症(如肾小球性肾炎、多囊性肾病、肾盂积水、肾衰竭、尿路梗阻、高尿酸血症等)、妇科病症(如外阴痛、***炎、骨腔病症等)、生殖疾病、泌尿疾病、线粒体相关病症、疼痛、偏头痛、血液疾病、精神障碍、口腔疾病(如***)、肌肉骨骼疾病、眼部疾病、肾病(如肾病型胱氨酸病)、中毒(如酒精中毒、慢性水杨酸盐中毒)、皮肤搔痒症、皮肤角化病、皮肤病(如红斑鳞状、肥厚性皮肤病、流行性皮肤病、红斑痤疮、色素障碍、紫癜、痤疮、皮肤过敏、白斑病、大疱性皮肤病、表皮松解、硬皮病、湿疹、皮肤淋巴瘤)、肌肉萎缩病、肌肉病症、支气管疾病、血管疾病、子宫肌瘤、激素失调(如慢性疲劳综合征)、脱发、骨质疏松症、上呼吸道感染相关的炎症及佩吉特氏病(Paget’s disease)。
治疗代谢病症的方法
本公开提供治疗个体的代谢病症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。代谢病症造成许多疾病,如肥胖相关代谢功能障碍、糖尿病、胰岛素抗性、葡萄糖代谢病症、低胰岛素血症、动脉粥样硬化、高胆固醇血症、局部缺血、代谢综合征、氧化应激、高血压、内分泌病症(艾迪生氏病(Addison’disease)、库兴氏病(Cushing’s disease)、甲状腺机能亢进、甲状腺机能减退、垂体机能减退、***等)、脂类代谢异常、肥胖相关病症(如骨丢失、体重增加等)、胰脏相关病症、线粒体疾病等。通过用本公开的免疫调节组合物调节先天性和适应性免疫机制(包括免疫细胞、细胞因子、抗体等),代谢疾病可得到预防和/或治疗。
在一些情况下,治疗炎性病症的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂、微生物组的一个或多个成员或益生菌。例如,所关注的治疗剂包括且不限于作为用于治疗心血管疾病的抗炎剂的那些试剂。这类试剂包括氨氯地平,用于降低血压和预防胸痛;依那普利,用于治疗高血压和一些类型的慢性心力衰竭;普伐他汀、阿托伐他汀及罗素伐他汀,用于治疗血脂异常和预防心血管疾病;血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂(例如贝那普利、雷米普利等);血管紧张素II受体阻断剂(ARB)(例如坎地沙坦、氯沙坦等);β阻断剂(例如醋丁洛尔、比索洛尔、索他洛尔等);钙通道阻断剂(例如氨氯地平、维拉帕米等)等等。所关注的治疗剂的其它实例包括且不限于作为治疗糖尿病的抗炎剂的那些试剂。这类试剂包括靶向IKK-NF-κB途径的试剂;依那西普、英夫利昔单抗、阿达木单抗,其靶向TNF-α;阿那白滞素和卡那津单抗,其靶向IL-1β;托珠单抗,其靶向IL-6;AMP活化的蛋白激酶活化剂;sirtuin-1活化剂;雷帕霉素抑制剂的哺乳动物靶标;C-C基序趋化因子受体2拮抗剂等。在一些情况下,所关注的治疗剂包括且不限于作为用于治疗肥胖的抗炎剂的那些试剂。这类试剂包括氯卡色林;QsymiaTM(Vivus);利拉鲁肽、丁氨苯丙酮、纳曲酮、氯卡色林、奥利司他、苯丁胺/托吡酯等。
在一些情况下,所关注的治疗剂包括且不限于用于治疗代谢病症如糖尿病的那些试剂,包括胰岛素(例如短效、速效、中效和长效胰岛素)、胰淀素模拟药物(例如普兰林肽)、α-葡糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖、米格列醇等)、双胍(例如二甲双胍等)、磺酰脲(例如优降糖、格列甲嗪等)、美格列脲(例如瑞格列奈)、D-苯丙氨酸衍生物(例如那格列奈)、噻唑烷二酮(例如罗格列酮、吡格列酮等)、DPP-4抑制剂(例如西他列汀、沙格列汀、利拉利汀等)、胰高血糖素样受体-1(GLP-1)激动剂(例如艾塞那肽、利拉鲁肽等)、钠葡萄糖转运蛋白-2(SGLT-2)抑制剂(例如坎格列净、达格列净等)等等。
治疗神经障碍的方法
本公开提供调节和/或调控炎性应答的方法,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。炎性病状是以下许多神经障碍的原因:如阿尔茨海默氏病、抑郁症、注意缺陷多动障碍(ADHD)、心境障碍、精神***症、多发性硬化症、帕金森氏病、孤独症、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、脑型疟疾、亨廷顿氏病、焦虑症、癫痫等。通过用本公开的免疫调节组合物调节先天性和适应性免疫机制(包括免疫细胞、细胞因子、抗体等),神经障碍可得到治疗。
在一些情况下,治疗神经障碍的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂、微生物组的一个或多个成员或益生菌。所关注的用于神经障碍的疾病缓解剂的非限制性实例包括乙酰胆碱酯酶抑制剂(例如多奈哌齐、卡巴拉汀等)、N-甲基,D-天冬氨酸受体(NMDAR)拮抗剂(例如美金刚胺、奈拉美生等)、多巴胺能药(例如甲基多巴肼/左旋多巴)、多巴胺激动剂(例如普拉克索、罗匹尼罗、阿朴***等)、抗胆碱能药(例如三己芬迪、甲磺酸苯扎托品)、儿茶酚-邻甲基转移酶(COMT)抑制剂(例如恩他卡朋、托卡朋等)、抗惊厥剂(例如安定、巴氯芬、丹曲林、替扎尼定等)、疾病缓解剂;(例如特立氟胺、芬戈莫德、米托蒽醌、富马酸二甲酯、那他珠单抗等)。
在一些情况下,所述方法包括向有此需要的个体施用有效量的呈疫苗形式的本公开的免疫调节组合物,所述疫苗包含将调节针对疾病相关蛋白(如阿尔茨海默氏病或痉挛性假硬化(CJD)所特有的淀粉样斑块)的免疫应答的抗原。
预防或治疗免疫抑制和感染的方法
本公开提供预防或限制由于病毒感染或由于中风及其它脑损伤后的感染所致的免疫缺陷/缺损/抑制的方法,所述方法包括向有此需要的个体施用本公开的免疫调节组合物。各种形式的病毒(例如HIV)感染、脑外伤(包括中风)造成长期全身性免疫抑制,由此导致较高的感染和死亡率。此外,肝脏非变异的NKT细胞已显示对改善全身性免疫抑制说来是重要的。本公开提出一种通过调节NK、NKT及其它免疫细胞预防这些患者中的全身性免疫抑制和感染的策略。
在一些情况下,治疗免疫抑制、中风或脑外伤病症的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫治疗组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。
提高治疗性治疗的功效和/或降低其毒性的方法
本公开还提供提高治疗性治疗的功效和/或降低其毒性、和/或预防抗药性和改变代谢的方法,优选地用抗感染药(如抗细菌剂、抗真菌剂或抗病毒剂)、抗癌剂、治疗性抗体、抗炎剂、代谢病症相关药物、免疫刺激剂、免疫调节化合物、免疫调控剂、Si RNA、包括益生菌和微生物组的治疗性微生物(活的、灭活的、热杀的、突变的、减毒的、基因工程化的)治疗或手术治疗,通过向个体、细胞或组织施用有效量的本公开的免疫调节组合物,优选为调控免疫应答所需的量。
在一些情况下,提高功效和降低毒性的本公开方法包括向有此需要的个体施用免疫调节组合物,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。
合适的治疗剂和抗体的非限制性实例在上文的方法章节中有所描述。
调节树突细胞的方法
本公开提供一种调节树突细胞的方法,所述方法包括:a)使从个体处获得的树突细胞(DC)与包含以下的组合物接触:i)新月柄杆菌;和/或ii)抗原。使DC与CC和抗原在体外接触。DC与抗原和CC的接触调节DC上的抗原呈递,由此生成调节的DC群。在一些情况下,可使用如扩散、电穿孔、主动转运、脂质体融合、吞噬作用、超声处理等方法使抗原与DC接触。在一些情况下,所述方法还包括向DC由其获得的个体施用抗原呈递DC。在一些情况下,所述方法还包括向DC由其获得的个体施用抗原呈递DC与抗体、化疗剂或细胞因子的组合。向个体施用调节的DC可治疗个体中的疾病。
合适的抗原如上所述。在一些情况下,使包含CC和抗原的组合物与DC接触;并且将CC-抗原-DC混合物孵育约30分钟至约48小时的一段时间,由此生成抗原呈递DC群。与在抗原呈递DC的初始群中的DC比例相比,本发明方法可将作为抗原呈递DC的DC的比例调节至少约25%、至少约50%、至少约75%、至少约2倍、至少约5倍、至少约10倍、至少约25倍、至少约50倍、至少约100倍或超过100倍。
生成调控性免疫细胞的方法
本公开提供一种生成调控性淋巴细胞如NK、NKT、γδT细胞、ILC、T细胞及B细胞的方法,所述方法包括:a)使从个体处获得的淋巴细胞(NK、NKT、γδT细胞、ILC、T细胞和/或B细胞)与包含以下的组合物在抗原呈递细胞存在或不存在下接触:i)新月柄杆菌;和/或ii)抗原。淋巴细胞与CC的接触产生调控性淋巴细胞群。在一些情况下,所述方法包括向细胞由其获得的个体施用调控性淋巴细胞,以便预防和/或治疗宿主中的疾病。在一些情况下,所述方法还包括向细胞由其获得的个体施用调控性淋巴细胞与抗体、化疗剂或细胞因子的组合,以便预防和/或治疗宿主中的疾病。
治疗细胞内病原体感染的方法
本公开提供预防和/或治疗个体中的胞内病原体(例如,病毒、分枝杆菌、细菌、寄生虫等)感染的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。
在一些情况下,治疗胞内病原体的本公开方法包括向有此需要的个体施用,且还包括向所述个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。
出于研究、诊断和/或治疗目的来调节动物模型或细胞培养物中的免疫应答的方
法
本公开提供一种出于研究目的来调节动物模型中的免疫应答的方法。本公开还提供一种调节各种TLR、NLR、DC和/或效应淋巴细胞如NK、NKT、T和B细胞的方法,所述方法包括:a)使从个体处获得的效应细胞(NK、NKT、T和B细胞)与包含以下的组合物在抗原呈递细胞存在或不存在下接触:i)新月柄杆菌;和/或ii)抗原。效应淋巴细胞与CC的接触调节它们的活化,由此生成调控的效应淋巴细胞群。在一些情况下,所述方法包括通过鉴别和扩增特异性抗原反应性T细胞和/或B细胞来诊断疾病状况。在一些情况下,所述方法包括在体外鉴别和扩增特异性抗原反应性T细胞和/或B细胞以用于研究目的。在一些情况下,所述方法包括向细胞由其获得的个体施用活化的效应淋巴细胞,以便预防和/或治疗宿主中的疾病。在一些情况下,所述方法包括激活TLR或NLR以用于研究和/或诊断目的。
诱导干细胞的增殖、分化和/或调节的方法
本公开提供一种在个体中诱导干细胞的增殖、分化和/或调节及恢复体内平衡的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。本公开提供一种修饰干细胞的方法,所述方法包括使干细胞与包含新月柄杆菌的组合物接触,其中所述接触生成扩增的、分化的和/或调节的干细胞群。
本公开还提供一种诱导干细胞的增殖、分化和/或调节的方法,所述方法包括使从个体处获得的干细胞与本公开的免疫调节组合物(例如,包含新月柄杆菌的免疫调节组合物)接触。干细胞与CC的接触造成它们的增殖和分化,由此生成扩增的、分化的和/或调节的细胞群。然后可将扩增的、分化的和/或调节的细胞群向干细胞由其所获得的个体施用。
在一些实施方案中,本公开的诱导干细胞的增殖、分化和/或调节的方法包括:a)从个体处获得干细胞;b)使干细胞在体外与CC接触,由此生成扩增的、分化的和/或调节的细胞群;以及c)向所述个体施用所扩增、分化和/或调节的细胞群。
在一些实施方案中,在个体中诱导干细胞的增殖、分化和/或调节的本公开方法包括向所述个体施用有效量的本公开的免疫调节组合物。在一些情况下,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时有效诱导造血干细胞的增殖、分化和/或调节并恢复体内平衡的量。例如,在一些情况下,与在不存在免疫调节组合物治疗下的个体相比,本公开的免疫调节组合物的有效量为当以单剂量或多剂量施用时在个体中有效诱导造血干细胞的增殖、分化和/或调节并恢复体内平衡至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少75%、至少100%(或2倍)、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、大于10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍的量。
递送治疗性分子的方法
本公开提供一种递送如蛋白质、肽、siRNA、碳水化合物、大分子等治疗性分子的方法,其中新月柄杆菌可充当递送治疗性分子的载体和/或递送媒介物。由于非遗传修饰(GM),如静电和疏水性相互作用,分子与新月柄杆菌表面的结合可使得新月柄杆菌能充当载体和/或递送媒介物。而且,由于生物粘附/粘膜粘附,新月柄杆菌可促进在粘膜表面处通过M细胞转运的递送摄取。
制剂、剂量和施用途径
本公开的免疫调节组合物可包含一种或多种药学上可接受的赋形剂;并且可以多种方式中的任一种配制,配制方式可取决于例如施用途径。药学上可接受的赋形剂为本领域技术人员所知,并且已在多个出版物中有详细描述,包括例如A.Gennaro(1995)"Remington:The Science and Practice of Pharmacy",第19版,Lippincott,Williams,&Wilkins。合适的赋形剂媒介物包括例如:水、盐水、葡萄糖、甘油、乙醇、惰性蛋白质、亲水性聚合物、氨基酸、脂肪酸、表面活性剂、非离子型表面活性剂、碳水化合物、糊精、多元醇、螯合剂等、及其组合。另外,如果需要的话,媒介物可含有少量辅助物质,如润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂。制备这类剂型的实际方法是已知的或将为本领域技术人员显而易见。参见,例如Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Company,Easton,Pennsylvania,第17版,1985;Remington:The Science and Practice of Pharmacy,A.R.Gennaro,(2000)Lippincott,Williams&Wilkins。
免疫调节组合物可掺入到多种制剂中以供治疗性给药。更具体地说,免疫调节组合物可通过与适当的药学上可接受的载体、盐、防腐剂、缓冲剂或稀释剂组合而配制成药物组合物,并且可配制成呈固体、半固体、液体、冻干、冷冻干燥或气态形式的制剂,如片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂、膏剂、溶液、栓剂、注射剂、皮肤贴剂、吸入剂及气溶胶。在其它实施方案中,制剂包含胶态递送***,其包括例如脂质体、纳米颗粒、纳米乳液、纳米胶囊、微球及聚合物。
在药物剂型中,免疫调节组合物可单独或以与其它药学活性化合物适当联合及组合形式施用。免疫调节组合物、抗原、佐剂和/或治疗性药物可并行、同时、依次或在不同时间下,在相同或不同的部位处并经由不同途径施用。以下方法和赋形剂仅为示例性的且决不限制。
对于口服制剂,免疫调节组合物可单独或以与以下适当添加剂的组合形式使用以制造片剂、粉剂、颗粒剂或胶囊,例如,与常规的添加剂,如乳糖、甘露糖醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉;与粘合剂,如结晶纤维素、纤维素衍生物、***胶、玉米淀粉或明胶;与崩解剂,如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲基纤维素钠;与润滑剂,如滑石或硬脂酸镁;并且如果需要的话,与稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂及调味剂。
免疫调节组合物可通过将组合物溶解、悬浮或乳化于含水或非水溶剂中而配制成供施用的液体制剂,所述溶剂如植物或其它类似油、合成脂肪族酸甘油酯、高级脂肪酸或丙二醇的酯;并且如果需要的话,用常规添加剂,如增溶剂、等渗剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂及防腐剂。
免疫调节组合物可以气溶胶制剂形式使用以便经由吸入施用。本公开的免疫调节组合物可被配制到加压可接受的推进剂中,如二氯二氟甲烷、丙烷、氮气等。
此外,免疫调节组合物可通过与多种基质如乳化基质或水溶性基质混合而制成栓剂。免疫调节组合物可经由栓剂直肠施用。栓剂可包括媒介物,如可可脂、碳蜡和聚乙二醇,其在体温下融化,而在室温下凝固。
本公开的免疫调节组合物也可以脂质体或脂质体聚合凝胶形式施用。脂质体可通过以下多种途径给予:经口、经鼻、胃肠外、经皮、经吸入等。如本领域中已知,脂质体来源于磷脂或其它脂质物质。脂质体通过将单层或多层水合液体晶体分散在含水介质中而形成。可使用能够形成脂质体的任何无毒的、生理学上可接受的和可代谢的脂质。呈脂质体形式的本组合物除本公开的免疫调节组合物之外还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等中的一种或多种。示例性脂质为天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)。脂质体可具有在小于100nm至几微米范围内的尺寸。形成脂质体的方法是本领域中已知的。例如,Prescott编著,MethodsinCell Biology,第XIV卷,Academic Press,New York,N.Y.(1976),第33页及以下。
可提供用于口服或直肠施用的单位剂型,如糖浆剂、酏剂、乳液和悬浮液,其中每个剂量单位(例如茶匙、汤匙、片剂或栓剂)含有预定量的含有一种或多种活性剂的组合物。类似地,用于注射或静脉内施用的单位剂型可包含呈在无菌水、生理盐水或另一种药学上可接受的载体中的溶液形式的免疫调节组合物。
本发明的免疫调节组合物可被配制用于局部施用。局部施用包括施用于皮肤或粘膜,包括肺、眼、鼻和耳的表面。合适的局部制剂包括例如皮肤贴剂制剂、经皮贴剂制剂、微阵列、霜剂、洗剂、凝胶制剂、粉剂、膏剂、糊剂、鼻内滴剂或凝胶。
膏剂为半固体制剂,其通常是基于矿脂或其它石油衍生物。合适的膏剂包括油性基质;可乳化基质;乳液基质;及水溶性基质。油性膏剂基质包括例如植物油、从动物处获得的脂肪、及从石油处获得的半固体烃类。可乳化的膏剂基质(也称为吸收性膏剂基质)几乎不含或不含水并且包括例如硫酸羟基硬脂、无水羊毛脂及亲水性矿脂。乳液膏剂基质为油包水(WIO)乳液或水包油(OIW)乳液,并且包括例如十六醇、单硬脂酸甘油酯、羊毛脂及硬脂酸。示例性水溶性膏剂基质是由不同分子量的聚乙二醇来制备。
洗剂是施用于皮肤表面勿需摩擦的制剂,且通常是液体或半液体制剂,其中固体颗粒包括活性剂,存在于水或醇基质中。洗剂通常是固体悬浮液,出于本发明的目的,优选含有水包油型的液体油状乳液。洗剂可用于治疗大面积身体部位,因为偏液态的组合物更容易施用。洗剂可含有悬浮剂,以实现更好的分散,并且还含有可用于使活性剂定位并保持与皮肤接触的化合物,例如甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等。与本发明结合使用的洗剂制剂的一个实例含有与亲水性矿脂混合的丙二醇,这种矿脂例如可以从Beiersdorf,Inc.(Norwalk,Coon.)以商标名出售而获得。
合适的霜剂可为粘性液体或半固体乳液,呈水包油或油包水。霜剂基质是可水洗的,并且含有油相、乳化剂和水相。油相有时也称为“内部”相,其通常由矿脂和脂肪醇如十六烷基或十八烷基醇构成;水相尽管通常不是必须的,但其体积超过油相,且通常含有湿润剂。如Remington,同上所说明的霜剂制剂中的乳化剂通常是非离子、阴离子、阳离子或两性表面活性剂。
可使用凝胶制剂。凝胶为半固体、悬浮液/型***。单相凝胶含有基本上均匀地分布在载液中的有机大分子,其可为含水的,但也可含有乙醇且任选地含有油。
局部制剂也可使用常规的“经皮”型贴剂递送给皮肤,其中所述试剂(免疫调节组合物)包含在层状结构内,该层状结构充当附着于皮肤的递送装置。在这类结构中,免疫调节组合物包含在上背衬层下面的层或“储库”中。层状结构可含有单个储库,或其可含有多个储库。在一个实施方案中,储库包含用于使***在药物递送期间粘附到皮肤上的药学上可接受的接触粘合材料的聚合物基体。合适的皮肤接触粘合材料的实例包括但不限于聚乙烯、聚硅氧烷、聚异丁烯、聚丙烯酸酯、聚氨酯等。所选的具体聚合粘结剂将取决于具体的免疫调节组合物、媒介物等,即,粘结剂必须与含药物的组合物的所有组分相容。在一个替代实施方案中,含有免疫调节组合物的储库和皮肤接触粘结剂可作为独立和独特的层存在,同时粘结剂在储库的下面,在此情况下,所述层可为如上所述的聚合物基体,或其可为液体或水凝胶储库,或者可采用一些其他形式。
如本文所用的术语“单位剂型”是指适合人和动物受试者用的单一剂量的物理上离散单位,每一单位含有预定量的活性剂(例如,CC;抗原等)和药学上可接受的稀释剂、载体或媒介物,该预定量经计算足以产生所需效果。活性剂的规格取决于所用的具体化合物和有待实现的效果、以及宿主中的每种化合物相关的药物动力学。
也可使用其它施用模式。例如,免疫调节组合物可以栓剂形式配制,且在一些情况下,为气溶胶和鼻内组合物。对于栓剂,媒介物组合物将包括传统的粘合剂和载体,如聚二醇或甘油三酯。这类栓剂可由含有在约0.5%至约10%(w/w)或约1%至约2%范围内的活性成分的混合物形成。
鼻内制剂通常将包括既不对鼻粘膜造成刺激又不明显妨碍纤毛功能的媒介物。可采用稀释剂,如水、水性盐水或其它已知物质。鼻腔制剂还可含有防腐剂,如但不限于氯丁醇和杀藻胺。还可含有表面活性剂,增强鼻粘膜对本发明蛋白质的吸收。
免疫调节组合物可作为可注射剂施用。通常,可注射组合物是作为液体溶液或悬浮液来制备;也可制备注射前适于液体媒介物溶液或液体媒介物悬浮液的固体形式。制剂也可被乳化或者活性成分被包裹在脂质体媒介物中。
合适的赋形剂媒介物为例如水、盐水、葡萄糖、甘油、乙醇等、及其组合。另外,如果需要的话,媒介物可含有少量辅助物质,如润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂。制备这类剂型的实际方法是已知的或将为本领域技术人员显而易见。参见,例如Remington'sPharmaceutical Sciences,Mack Publishing Company,Easton,Pennsylvania,第17版,1985;Remington:The Science and Practice of Pharmacy,A.R.Gennaro,(2000)Lippincott,Williams&Wilkins。在任何情况下,有待施用的组合物或制剂含有的活性剂(例如,CC;抗原等)的量应足以在所治疗的受试者中实现所需效果。
药学上可接受的赋形剂如媒介物、佐剂、盐、载体或稀释剂容易为公众所获得。此外,药学上可接受的助剂物质,如pH调节和缓冲剂、渗透压调节剂、稳定剂、乳化剂、表面活性剂、防腐剂、氨基酸、脂肪酸、润湿剂等等,同样容易为公众所获得。
口服制剂
在一些实施方案中,免疫调节组合物被配制以便向需要所述免疫调节组合物的个体经口递送。
对于经口递送,在一些实施方案中,包含免疫调节组合物的本发明制剂包含肠溶性包衣材料。合适的肠溶性包衣材料包括醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS)、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP)、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯(CAP)、醋酸聚乙烯邻苯二甲酸酯(PVPA)、EudragitTM及虫胶。
合适的口服制剂还包括用任何以下物质来配制的免疫调节组合物:微颗粒(参见,例如美国专利号6,458,398);生物可降解的大分子单体(参见,例如美国专利号6,703,037);生物可降解的水凝胶(参见,例如Graham和McNeill(1989)Biomaterials 5:27-36);生物可降解的微粒载体(参见,例如美国专利号5,736,371);生物可吸收的内酯聚合物(参见,例如美国专利号5,631,015);缓慢释放的蛋白质聚合物(参见,例如美国专利号6,699,504;Pelias Technologies,Inc.);聚(丙交酯-共-乙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物(参见,例如美国专利号6,630,155;Atrix Laboratories,Inc.);包含生物相容性聚合物及分散在聚合物内的金属阳离子稳定剂的颗粒的组合物(参见,例如美国专利号6,379,701;AlkermesControlled Therapeutics,Inc.);以及微球(参见,例如美国专利号6,303,148;Octoplus,B.V.)。
合适的口服制剂还包括用任何以下物质配制的免疫调节组合物:载体如(Emisphere Technologies,Inc.);TIMERx,即合并有黄原胶和刺槐豆胶的亲水性基体,其在葡萄糖存在下于水中形成强粘合剂(Penwest);GeminexTM(Penwest);ProciseTM(GlaxoSmithKline);SAVITTM(Mistral Pharma Inc.);RingCapTM(Alza Corp.);(Smartrix Technologies,Inc.);SQZgelTM(MacroMed,Inc.);GeomatrixTM(Skye Pharma,Inc.);Tri-layer(Alza Corporation);等等。
同样适用的是以下制剂,如在美国专利号6,296,842(Alkermes ControlledTherapeutics,Inc.);美国专利号6,187,330(Scios,Inc.)等中所述的那些。
在本文中同样适用的是包含肠吸收增强剂的制剂。合适的肠吸收增强剂包括但不限于钙螯合剂(例如柠檬酸盐、乙二胺四乙酸);表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠、胆汁盐、棕榈酰肉毒碱及脂肪酸钠盐);毒素(例如闭锁小带毒素);等等。
合适的口服制剂还包括配制成以下形式的免疫调节组合物:食品增补剂(例如营养品、酸奶、冻酸奶、奶粉、乳酪、能量棒、饮品、益生元、共生菌、副益生菌)等。
控制释放制剂
在一些实施方案中,将免疫调节组合物以控制释放制剂形式配制。
控制释放可意谓许多延长释放剂型中的任一种。出于本发明的目的,下列术语可被视为基本上等同于控制释放:连续释放、控制释放、延缓释放、贮库、逐渐释放、长期释放、程序化释放、延长释放、按比例释放、延迟释放、长效、延缓、缓慢释放、间隔释放、持续释放、定时包衣(time coat)、定时释放、延缓作用、延长作用、按时分层作用、长效、延长作用、重复作用、缓慢作用、持续作用、持续作用药物及长期释放。这些术语的进一步论述可见于Lesczek Krowczynski,Extended-Release Dosage Forms,1987(CRC Press,Inc.)中。
各种控制释放技术涉及到非常广泛的药物剂型。控制释放技术包括但不限于物理***和化学***。
物理***包括但不限于带速度控制膜的储库***,如微囊化、粗囊化和膜***;不带速度控制膜的储库***,如中空纤维、超微孔三醋酸纤维素、及多孔聚合基材和泡沫;单片(monolithic)***,包括物理溶于非多孔的、聚合的或弹性的基体(例如,不易受侵蚀的、易受侵蚀的、环境剂进入和可降解的)的那些***,和物理分散于非多孔的、聚合的或弹性的基体(例如,不易受侵蚀的、易受侵蚀的、环境剂进入和可降解的)材料;层状结构,包括化学上类似于或不类似于外控制层的储库层;及其它物理方法,如渗透泵、或在离子交换树脂上的吸收。
化学***包括但不限于聚合物基体的化学侵蚀(例如,异质或同质侵蚀)、或聚合物基体的生物侵蚀(例如,异质或同质的)。用于控制释放的***类别的另外论述可见于Agis F.Kydonieus,Controlled Release Technologies:Methods,Theory and Applications,1980(CRC Press,Inc.)中。
存在许多控制释放药物制剂,其被开发出来用于经口施用。这些制剂包括但不限于:渗透压控制的胃肠递送***;流体压力控制的胃肠递送***;膜渗透控制的胃肠递送***,其包括微孔膜渗透控制的胃肠递送装置;抗胃液的肠靶向控制释放胃肠递送装置;凝胶扩散控制的胃肠递送***;以及离子交换控制的胃肠递送***,包括阳离子和阴离子药物。关于控制释放药物递送***的另外信息可见于Yie W.Chien,Novel Drug Delivery Systems,1992(Marcel Dekker,Inc.)中。现将更详细地论述其中一些制剂。
将肠溶包衣涂敷到片剂上,以免活性剂在胃中释放,从而降低产生不希望的副作用的危险或者保持药物的稳定性,否则这些药物由于暴露于胃环境而可能发生降解。用于这个目的的大多数聚合物是多酸,它们根据或由于以下事实发挥作用:它们在含水介质中的溶解度取决于pH值,且它们需要具有比胃内通常遇到的pH要高的pH的条件。
口服控制释放结构的一个示例性类型是固体或液体剂型的肠溶包衣。肠溶包衣被设计在肠液中崩解以便于快速吸收。掺入到具有肠溶包衣的制剂中的活性剂的吸收延迟取决于通过胃肠道的移动速率,所以胃排空的速率是一个重要因素。一些研究者已经报道,多单位型剂型如颗粒剂可能优于单个单位型。
合适的肠溶包衣剂包括但不限于:羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物、聚乙烯醋酸酯-邻苯二甲酸酯及醋酸邻苯二甲酸纤维素。
另一种类型的有用的口服控制释放结构为固态分散体。固态分散体可被定义为一种或多种活性成分在呈固态的惰性载体或基体中的分散体,通过熔化(熔融)法、溶剂法或熔化-溶剂法来制备。
可用于固态分散体的载体的实例包括但不限于水溶性聚合物,如聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮及羟丙基甲基纤维素。替代的载体包括磷脂酰胆碱。磷脂酰胆碱为两性但水不溶性脂质,其可改善呈非晶态的其它不溶性活性剂在磷脂酰胆碱固态分散体中的溶解度。
其它载体包括聚氧乙烯氢化蓖麻油。免疫调节组合物可包括在具有肠溶性聚合物如羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯和非肠溶性聚合物如羟丙基甲基纤维素的固态分散体***中。另一种固态分散体剂型包括将所关注的药物(例如活性剂)与乙基纤维素和硬脂酸以不同比率掺合。
存在通常已知用于制备固态分散体的各种方法。这些方法包括但不限于熔化法、溶剂法及熔化-溶剂法。
可注射微球为另一种控制释放剂型。可注射微球可通过非水相分离技术和喷雾干燥技术来制备。微球可使用聚乳酸或共聚(乳酸/羟基乙酸)来制备。
可使用的其它控制释放技术包括但不限于:SODAS(Spheroidal Oral DrugAbsorption System)、INDAS(Insoluble Drug Absorption System)、IPDAS(IntestinalProtective Drug Absorption System)、MODAS(Multiporous Oral Drug AbsorptionSystem)、EFVAS(Effervescent Drug Absorption System)、PRODAS(Programmable OralDrug Absorption System)及DUREDAS(Dual Release Drug Absorption System),可从Elan Pharmaceutical Technologies获得。SODAS是利用控制释放珠的多颗粒剂型。INDAS是为提高难溶药物的溶解度而设计的一系列药物递送技术。IPDAS是利用高密度控制释放珠与立即释放颗粒的组合的多颗粒片剂形式。MODAS是控制释放单一单位剂型。每个片剂是由被半透性多产膜围绕的内核组成,该半透膜控制药物释放速率。EFVAS是泡腾药物吸收***。PRODAS是采用立即释放与控制释放微型片剂的组合的一系列多颗粒制剂。DUREDAS是在一种剂型内提供双重释放速率的双层片剂制剂。虽然这些剂型为本领域技术人员所知,但现将更详细地论述其中某些剂型。
本公开的免疫调节组合物可掺入到上述控制释放剂型或其它常规剂型的任一种中。每剂所包含的活性剂的量可被调节,以满足个体患者的需要和适应症。本领域技术人员在阅读本公开后将容易知晓如何调节活性剂在控制释放制剂中的水平和释放速率,以便优化活性剂的递送及其生物利用度。
吸入性制剂
在一些实施方案中,本公开的免疫调节组合物将藉助于用于吸入途径的药物递送***向患者施用。免疫调节组合物可以适合吸入施用的形式来配制。吸入施用途径的优点在于:吸入性药物可绕过血脑屏障。药物递送***是一种适用于呼吸疗法的***,其将活性剂递送至支气管的粘膜内衬。也可使用依赖压缩气体的驱动力以将免疫调节组合物从容器中喷出的***。气溶胶或加压包可用于此目的。
如本文所用,术语“气溶胶”是依据它的常规含义来使用,意指被加压推进气体携载至治疗性施加位置的极细微液态或固态颗粒。当采用药物气溶胶时,气溶胶含有治疗活性化合物(例如活性剂),其可溶解、悬浮或乳化于流体载体和推进剂的混合物中。气溶胶可呈溶液、悬浮液、乳液、粉剂或半固体制剂形式。气溶胶可作为精细的固体颗粒或作为液体薄雾经由患者的呼吸道施用。可利用本领域技术人员已知的各种类型的推进剂。合适的推进剂包括但不限于烃类或其它合适的气体。在加压气溶胶的情况下,剂量单位可通过提供递送计量数量的值来确定。
免疫调节组合物还可被配制用于以喷雾器来递送,喷雾器是一种在气体中生成基本均匀大小的极精细液体颗粒的仪器。例如,含有免疫调节组合物的液体是以液滴形式分散。小液滴可由空气流携带通过喷雾器的出口管。所生成的薄雾渗入患者的呼吸道中。
存在几种不同类型的吸入方法,这些方法可结合本公开的免疫调节组合物使用。免疫调节组合物可用低沸点推进剂来配制。这类制剂通常经由常规的定量吸入器(MDI)来施用。或者,免疫调节组合物可以含水或乙醇溶液形式来配制并由常规的喷雾器递送。在一些实施方案中,使用如美国专利5,497,763;5,544,646;5,718,222;和5,660,166中所公开的装置和***将这类溶液制剂雾化。免疫调节组合物可被配制成干燥粉末制剂。这类制剂可通过在产生粉末的气溶胶薄雾之后简单地吸入干燥粉末制剂来施用。进行此操作的技术描述于1998年7月7日公布的美国专利5,775,320和1998年4月21日公布的美国专利5,740,794中。
在一些实施方案中,本公开的免疫调节组合物将被配制用于经***递送。用于***内施用的本发明免疫调节组合物可被配制成***内生物粘附片剂、***内生物粘附微颗粒、***内霜剂、***内洗剂、***内泡沫剂、***内膏剂、***内糊剂、***内溶液或***内凝胶。
在一些实施方案中,本发明的免疫调节组合物将被配制用于经直肠递送。用于直肠内施用的本发明制剂包含本发明免疫调节组合物,该组合物被配制成直肠内生物粘附片剂、直肠内生物粘附微颗粒、直肠内霜剂、直肠内洗剂、直肠内泡沫剂、直肠内膏剂、直肠内糊剂、直肠内溶液或直肠内凝胶。本公开的免疫调节组合物可用改善对粘膜的粘附的试剂来配制:如粘膜粘附剂、生物粘附剂、颗粒、微球或脂质体。
本发明免疫调节组合物可包含以下一种或多种:赋形剂(例如蔗糖、淀粉、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、葡萄糖、纤维素、滑石、磷酸钙或碳酸钙)、粘合剂(例如纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、聚丙基吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、***胶、聚(乙二醇)、蔗糖或淀粉)、崩解剂(例如淀粉、羧甲基纤维素、羟丙基淀粉、低取代的羟丙基纤维素、碳酸氢钠、磷酸钙或柠檬酸钙)、润滑剂(例如硬脂酸镁、轻质无水硅酸、滑石或十二烷基硫酸钠)、调味剂(例如柠檬酸、薄荷醇、甘氨酸或橙粉)、防腐剂(例如苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯)、稳定剂(例如柠檬酸、柠檬酸钠或乙酸)、悬浮剂(例如甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或硬脂酸铝)、分散剂(例如羟丙基甲基纤维素)、稀释剂(例如水)、以及基质蜡(例如可可脂、白凡士林或聚乙二醇)。
包含免疫调节组合物的片剂可用合适的成膜剂涂布,例如羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素或乙基纤维素,可向其中任选地添加合适的赋形剂,例如,软化剂,如甘油、丙二醇、酞酸二乙酯或甘油三醋酸;填充剂,如蔗糖、山梨糖醇、木糖醇、葡萄糖或乳糖;着色剂,如氢氧化钛;等等。
剂量
本公开的免疫调节组合物的剂量可根据以下因素而变化:如有待实现的临床目标、所治疗个体的年龄、所治疗个体的身体状况等。
本公开的免疫调节组合物可包含每单位剂型约103CC至每单位剂型约1020CC之量的CC。例如,本公开的免疫调节组合物可包含以下量的CC:每单位剂型约103CC至每单位剂型约104CC、每单位剂型约104CC至每单位剂型约105CC、每单位剂型约105CC至每单位剂型约106CC、每单位剂型约106CC至每ml约107CC、每单位剂型约108CC至每单位剂型约109CC、每ml约109CC至每单位剂型约1010CC、每单位剂型约1015CC至每单位剂型约1020CC、或大于每单位剂型1020CC。
例如,本公开的免疫调节组合物可包含每ml约103CC至每ml约1020CC之量的CC。例如,本公开的免疫调节组合物可包含以下量的CC:每ml约103CC至每ml约104CC、每ml约104CC至每ml约105CC、每ml约105CC至每ml约106CC、每ml约106CC至每ml约107CC、每ml约108CC至每ml约109CC、每ml约109CC至每ml约1010CC、每ml约1015CC至每ml约1020CC、或大于每ml1020CC。
本公开的免疫调节组合物可包含每单位剂型约102至约1020个集落形成单位(cfu)之量的CC;举例来说,本公开的免疫调节组合物可包含每单位剂型以下量的CC:约102至约103、约103至约105、约105至约107、约107至约109、约109至约1011、约1011至约1013、约1013至约1015、约1015至约1018、或约1018至约1020cfu。单位剂型可为以单剂量施用的量;举例来说,单位剂型可为0.5ml、1.0ml、或适合以单剂量施用的其它体积。
本公开的免疫调节组合物可包含每mg约103CC至每mg约1012CC之量的CC。例如,本公开的免疫调节组合物可包含以下量的CC:每mg约103CC至每mg约104CC、每mg约104CC至每mg约105CC、每mg约105CC至每mg约106CC、每mg约106CC至每mg约107CC、每mg约108CC至每mg约109CC、每mg约109CC至每mg约1010CC、每mg约1010CC至每mg约1011CC、或每mg约1011CC至每mg约1012CC。
本公开的免疫调节组合物可包含每克约103CC至每克约1015CC之量的CC。例如,本公开的免疫调节组合物可包含以下量的CC:每克约103CC至每克约104CC、每克约104CC至每克约105CC、每克约105CC至每克约106CC、每克约106CC至每克约107CC、每克约108CC至每克约109CC、每克约109CC至每克约1010CC、每克约1010CC至每克约1011CC、每克约1011CC至每克约1012CC、每克约1012CC至每克约1013CC、每克约1013CC至每克约1014CC、或每克约1014CC至每克约1015CC。
本公开的免疫调节组合物可包含约102至约1020cfu/ml之量的CC;举例来说,本公开的免疫调节组合物可包含以下量的CC:约102至约103、约103至约105、约105至约107、约107至约109、约109至约1011、约1011至约1013、约1013至约1015、约1015至约1018、或约1018至约1020cfu/ml。
在一些实施方案中,施用多剂量的本公开的免疫调节组合物。本公开的免疫调节组合物的施用频繁可根据以下多种因素中的任何而变化,例如,症状的严重性等。例如,在一些实施方案中,本公开的免疫调节组合物可如下施用:每月一次、每月两次、每月三次、每隔一周(qow)、每周一次(qw)、每周两次(biw)、每周三次(tiw)、每周四次、每周五次、每周六次、每隔一天(qod)、每天(qd)、每天两次(qid)、或每天三次(tid)。
本公开的免疫调节组合物的施用持续时间(例如,施用本公开的免疫调节组合物所经的时间段)可根据以下多种因素中的任何而变化,例如,患者应答等。例如,本公开的免疫调节组合物可经以下范围内的时间段施用:约单的小时至一天、约一天至约一周、约两周至约四周、约一个月至约两个月、约两个月至约四个月、约四个月至约六个月、约六个月至约八个月、约八个月至约1年、约1年至约2年、或约2年至约4年或更久。
当免疫调节组合物包含抗原时,抗原的剂量被选为有效并调节免疫应答而无显著不良副作用的量。所述量可例如根据所采用的特异性抗原、施用途径等而变化。当免疫调节组合物包含抗原时,抗原的剂量可在每单位剂型1ng至每单位剂型约100mg范围内,例如,每单位剂型约1ng至约25ng、约25ng至约50ng、约50ng至约100ng、约100ng至约250ng、约250ng至约500ng、约500ng至约750ng、约750ng至约1μg、约1μg至约25μg、约25μg至约50μg、约50μg至约100μg、约100μg至约250μg、约250μg至约500μg、约500μg至约750μg、约750μg至约1mg、约1mg至约25mg、约25mg至约50mg、或约50mg至约100mg。
施用途径
使用适合于药物递送的任何可利用的方法和途径向个体施用本公开的免疫调节组合物,包括体内和离体方法以及全身和局部施用途径。
常规的和药学上可接受的施用途径包括鼻内、肌内、气管内、皮下、皮内、结节内、透皮、经皮、肿瘤内、局部施用、静脉内、囊泡内、经直肠、经鼻、经口及其它肠内和胃肠外施用途径。施用途径如果需要的话可被组合或根据试剂和/或所需效果来调整。组合物可以单剂量或多剂量施用。
可使用适合于常规药物递送的任何可利用的常规方法或途径向宿主施用本公开的免疫调节组合物,包括全身或局部途径。一般说来,预期施用途径包括但不一定限于肠内、胃肠外或吸入途径。
除吸入施用以外的胃肠外施用途径包括但不一定限于局部、经皮、皮下、肌内、皮内、淋巴内、眶内、囊内、脊柱内、胸骨内、颅内、囊泡内及静脉内途径,即,除经由消化道以外的任何施用途径。可进行胃肠外施用以实现免疫调节组合物的全身或局部递送。当需要全身递送时,施用通常包括药物制剂的侵入式或全身吸收的局部或粘膜施用。
本公开的免疫调节组合物还可通过肠内施用递送给受试者。肠内施用途径包括但不必限于经口和经直肠(例如,使用栓剂)递送。
本公开的免疫调节组合物也可经由粘膜递送途径递送给受试者。粘膜递送途径包括经鼻、颊内、舌下、经***、经眼部和经直肠施用途径。
在某些实施方案中,本公开的免疫调节组合物经由不同途径的组合以下文所示的顺序向受试者施用:
i.全身、粘膜;
ii.全身、全身、粘膜、粘膜;
iii.全身、粘膜、全身;
iv.粘膜、粘膜、全身、全身;
v.粘膜、全身、全身;
vi.粘膜、全身、粘膜,举例来说。
当全身或粘膜施用本公开的免疫调节组合物一次以上时,两次或更多次全身或粘膜施用可通过相同的全身(例如,两次肌内注射)或粘膜途径(两次IN/SL施用)或不同(例如,一次肌内注射和一次静脉内注射;一次IN施用和一次SL施用)途径进行。
使用以下任何可利用的方法、递送或装置向个体施用本公开的免疫调节组合物:如疫苗贴剂、针、显微针(空心或实心)、滴剂、糖浆剂、片剂、胶囊、吸移管、剂量喷雾泵、鼻滴管、吸入装置、液体或干燥粉末、悬浮液或溶液、喷洒器、AccusprayTM、热响应凝胶、喷射注射器、NasovakTM、BespakTM、膏剂、洗剂、栓剂、凝胶等。
合适的施用途径在本领域中是已知的;任何已知的施用途径可联合施用本公开的免疫调节组合物来使用。参见,例如Nursing Drug Guide:Nursing Drug Handbook(2015)第36版,Lippincott。
适合治疗的个体
适合使用本公开方法治疗的个体包括人;非人哺乳动物;鱼;及鸟。在下文论述的以上实施方案的任一个中,使用本发明方法治疗的个体可为非人哺乳动物,如家畜(例如猪、绵羊、山羊、牛、马、公山羊、羊、牛等);哺乳动物宠物(例如猫、狗、马等);鸟,如鸡、母鸡、火鸡、鹅、鹌鹑、鸭等;或其它动物,如鱼。
在下文论述的以上实施方案的任一个中,使用本发明方法治疗的个体是以下年龄的人类:约一个月至约6个月、约6个月至约1岁、或约1岁至约5岁。在下文论述的以上实施方案的任一个中,使用本发明方法治疗的个体是以下年龄的人类:约5岁至约12岁、约13岁至约18岁、或约18岁至约25岁。在下文论述的以上实施方案的任一个中,使用本发明方法治疗的个体是以下年龄的人类:约25岁至约50岁、约50岁至约75岁、或大于75岁。在下文论述的以上实施方案的任一个中,使用本发明方法治疗的个体是免疫受损的人类。
在一些实施方案中,个体患有病毒性疾病或处于患上病毒性疾病的风险中。在一些情况下,所述疾病是选自但不限于由以下组成的组的病毒性疾病:由以下病毒引起的病毒性疾病:寨卡病毒(Zika virus)、乙型肝炎、丙型肝炎、轮状病毒、人免疫缺陷病毒、人嗜T淋巴细胞病毒、DNA病毒(如细小病毒)、腺病毒、乳多空病毒(例如***状瘤病毒、多形瘤病毒及SV40)、疱疹病毒(例如I型单纯性疱疹(HSV-I)、II型单纯性疱疹(HSV-II)及埃-巴二氏病毒)、痘病毒(例如痘疮(天花)和牛痘病毒);及RNA病毒,如逆转录病毒[例如I型人免疫缺陷病毒(HIV-I)、II型人免疫缺陷病毒(HIV-II)、I型人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-I)、II型人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-II)]、正粘病毒(例如流感病毒)、副粘病毒(例如麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒)、弹状病毒(例如狂犬病病毒)、仙台病毒(Sendai virus)、小核糖核酸病毒(例如脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、鼻病毒)、呼肠孤病毒(例如轮状病毒、科洛拉多蜱传热病毒)、囊膜病毒(例如风疹病毒(风疹)、日本脑炎病毒及塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus))、虫媒病毒、杯状病毒(例如戊型肝炎病毒)、黄病毒(例如黄热病病毒、登革热病毒)、冠状病毒、丝状病毒(例如埃博拉病毒和马伯格氏病毒(Ebola andMarburg viruses))以及布尼亚病毒(Bunyaviruses)(例如汉坦病毒、加利福尼亚脑炎病毒(California encephalitis virus))。
在一些实施方案中,个体具有细菌感染或处于患上细菌感染的风险中。在一些实施方案中,个体患有分枝杆菌感染或处于患上分枝杆菌感染的风险中。在一些实施方案中,个体感染有或处于感染了致病细菌的风险中。致病细菌包括例如***、革兰氏阴性细菌、分枝杆菌等。致病细菌的非限制性实例包括分枝杆菌(例如结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌复合体(M.avium complex))、非结核分枝杆菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属、奈瑟氏菌属及李斯特氏菌属。在一些情况下,所述细菌为淋病奈瑟氏菌、结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、单核细胞增多性李斯特氏菌、肺炎链球菌、酿脓链球菌、无乳链球菌、绿色链球菌、粪链球菌或牛葡萄球菌。所考虑的致病细菌的其它实例包括但不限于***(例如李斯特氏菌属、杆菌属如炭疽杆菌、丹毒丝菌属物种)、革兰氏阴性细菌(例如,巴尔通氏体属、布鲁氏杆菌属、弯曲杆菌属、肠杆菌属、埃希氏菌属、弗朗西斯氏菌属、嗜血杆菌属、克雷伯氏菌属、摩根氏菌属、变形杆菌属、普罗维登斯菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属、沙雷氏菌属、志贺氏菌属、弧菌属及耶尔森氏菌属物种)、螺旋体细菌(例如,疏螺旋体属物种,包括引起莱姆病的伯氏疏螺旋体)、厌氧细菌(例如,放线菌属和梭菌属物种)、革兰氏阳性和阴性球菌、肠球菌物种、链球菌物种、肺炎球菌物种、葡萄球菌物种、奈瑟氏菌物种。
在一些情况下,个体患有或处于患上寄生虫疾病的风险中。可通过本公开方法治疗或预防的寄生虫疾病包括但不限于:阿米巴虫病、疟疾、利什曼虫、球虫病、贾第鞭毛虫病、隐孢子虫病、弓形体病、锥虫病、血吸虫病及丝虫病。
在一些情况下,个体患有或处于患上真菌病的风险中。可通过本公开方法治疗或预防的真菌疾病包括但不限于:念珠菌属某些种,包括白色念珠菌;曲霉属某些种;隐球菌属某些种,包括新型隐球菌;芽生菌属某种;肺细胞属某些种;酵母;霉菌或球孢子菌属某些种。
在一些情况下,个体患有或处于患上蠕虫感染、吸虫感染等的风险中。还包括各种蠕虫的感染,如但不限于蛔虫病、钩虫病、鞭虫病、类圆线虫病、弓蛔虫病(toxoccariasis)、旋毛虫病、盘尾丝虫病、丝虫病及恶丝虫病。还包括各种吸虫的感染,如但不限于血吸虫病、肺吸虫病及华支睾吸虫病。
在一些实施方案中,个体患有自身免疫病症、炎性病症或免疫功能障碍,或处于患上自身免疫病症、炎性病症或免疫功能障碍的风险中。在一些情况下,所述疾病选自但不限于由以下组成的组:过敏、类风湿性关节炎、哮喘、糖尿病、全身性红斑狼疮(SLE)、格雷夫斯氏病、动脉粥样硬化、多发性硬化症、精神***症、阿尔茨海默氏病、抑郁症、垂体机能减退、神经变性病症、心血管疾病、肥胖、器官移植、败血症、肝脏疾病、牛皮癣、代谢疾病等。
在一些情况下,所述疾病选自由自身免疫疾病和自身免疫相关疾病组成的组,包括但不限于急性播散性脑脊髓炎、急性坏死性出血性脑白质炎、艾迪生氏病、无γ球蛋白血、斑形脱发、淀粉样变性、强直性脊柱炎、抗GBM/抗TBM肾炎、抗磷脂综合征、血管性水肿、再生障碍性贫血、家族性自主神经异常、肝炎、高脂血症、免疫缺陷、内耳疾病、心肌炎、***、胰腺炎、视网膜病、血小板减少性紫癜、甲状腺疾病、荨麻疹、轴突和神经元神经病、巴娄病(Balo disease)、***、大疱性类天疱疮、心肌病、卡斯尔曼氏病(Castlemandisease)、乳糜泻、恰加斯式病(Chagas disease)、慢性疲劳综合征、慢性炎性脱髓鞘多发性神经病、慢性复发性多灶性骨髓炎、丘-施二氏综合征、瘢痕性类天疱疮/良性粘膜炎天疱疮、克罗恩氏病、柯根综合征(Cogans syndrome)、冷凝集素病、先天性心脏阻滞、柯萨奇心肌炎(Coxsacke myocarditis)、CREST病、原发性混合性冷球蛋白血症、脱髓鞘神经病、疱疹样皮炎、皮肌炎、德维克氏病(Devic’s disease)、盘状狼疮、德雷斯勒综合征(Dressler'syndrome)、子宫内膜异位症、嗜酸细胞性食管炎、嗜酸细胞性筋膜炎、结节性红斑、实验性变应性脑脊髓炎、埃文斯综合征(Evans syndrome)、纤维肌痛、纤维性肺泡炎、巨细胞性动脉炎、巨细胞性心肌炎、肾小球性肾炎、古德帕斯彻氏综合征、伴有多血管炎的肉芽肿病、格雷夫斯氏病、格-巴综合征、桥本氏脑炎、桥本氏甲状腺炎、溶血性贫血、亨-舍二氏紫癜(Henoch-Schonlein purpura)、妊娠疱疹、低丙种球蛋白血、特发性血小板减少性紫癜、IgA肾病、IgG4相关的硬化性疾病、免疫调节脂蛋白、包涵体肌炎、间质性膀胱炎、幼年型关节炎、幼年型糖尿病(1型糖尿病)、幼年型肌炎、川崎综合征、兰伯特-伊顿综合征、白细胞***性血管炎、扁平苔癣、硬化性苔癣、木样结膜炎、线性IgA病、狼疮、莱姆病、美尼尔氏病(Meniere's disease)、显微镜下多血管炎、混合***病、莫伦氏溃疡(Mooren'sulcer)、穆-哈二氏病(Mucha-Habermann disease)、多发性硬化症、重症肌无力、肌炎、发作性睡病、视神经脊髓炎、中性白细胞减少、眼部瘢痕的类天疱疮、视神经炎、复发性风湿病、PANDAS、副肿瘤性小脑变性、阵发性睡眠性血红蛋白尿、帕里伯格综合征(Parry Rombersyndrome)、帕森尼奇-特纳综合征(Parsonnage-Turner syndrome)、睫状体扁平部炎、天疱疮、周围神经病、静脉周脑脊髓炎、恶性贫血、POEMS综合征、多发性结节性动脉炎、I型、II型和III型自身免疫性多内分泌腺综合征、风湿性多肌痛、多发性肌炎、心肌梗塞后综合症、开胸-心包切开后综合征、***皮炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、牛皮癣、牛皮癣关节炎、特发性肺纤维化、坏疽性脓皮症、纯红细胞再生障碍、雷诺氏现象(Raynaudsphenomenon)、反应性关节炎、反射交感性营养不良、莱特尔氏综合征(Reiter'ssyndrome)、复发性多软骨炎、多动腿综合征、腹膜后纤维化、风湿热、类风湿性关节炎、结节病、施密特综合征(Schmidt syndrome)、巩膜炎、硬皮病、斯耶格伦氏综合征、***和睾丸自身免疫、僵人综合征、亚急性细菌性心内膜炎、苏萨克氏综合征(Susac's syndrome)、交感性眼炎、高安氏动脉炎(Takayasu's arteritis)、颞动脉炎/巨细胞性动脉炎、血小板减少性紫癜、托-享二氏综合征(Tolosa-Hunt syndrome)、横贯性脊髓炎、1型糖尿病、溃疡性结肠炎、未分化***病、葡萄膜炎、血管炎、水疱性皮肤病、白斑病及韦格纳氏肉芽肿病。
实施例
给出下列实施例,以便为本领域普通技术人员提供有关如何完成和采用本发明的全面公开内容和描述,但不意在对本发明人认为的本发明的范围构成限定,也不意在代表下列实验是全部或仅有的进行的实验。已经努力确保所用数值(例如,量、温度等)的精确性,但是应说明一些实验误差和偏差。除非另外指出,否则份是重量份,分子量是重量平均分子量,温度是摄氏温度,且压力为大气压或接近大气压。可使用标准缩写,例如,bp:碱基对;kb:千碱基;pl:皮升;s或sec:秒;min:分钟;h或hr:小时;aa:氨基酸;kb:千碱基;bp:碱基对;nt:核苷酸;i.m.:肌内(地);i.p.:腹膜内(地);i.n.:鼻内(地);i.v.:静脉内(地);s.c.:皮下(地);M/ml:百万单位或106CFU/ml;M:百万单位/小鼠或106CFU/小鼠;等等。
材料和方法
下列材料和方法用于如下所述的实施例中。
材料
RPMI无血清培养基获自Life Technologies(Burlington,Ontario,Canada)。RPMI补充有5-10%胎牛血清、丙酮酸钠、青霉素-链霉素及2-巯基-乙醇以制备完全培养基,其被用于各种细胞培养物中。ConA、PWM及LPS获自Sigma Chemical Company。细胞因子试剂盒和荧光标记的抗小鼠抗体购自eBioscience(San Diego,CA)。抗小鼠FOXP3购自biolegend(San Diego,CA)。Aldra霜剂(5%咪喹莫特)是获自阿尔伯塔大学医院药房(University ofAlberta Hospital pharmacy)。使野生型和脂多糖(LPS)阴性新月柄杆菌(LPS-ve CC)在室温下(22-27℃)在孵育箱中生长,并且在4℃或室温下储存在盐水中持续不同的时间段。使野生型弧形柄杆菌(CV)在室温下(22-27℃)在孵育箱中生长,并且在4℃或室温下储存在盐水中持续不同的时间段。
方法
小鼠
6-8周龄C57BL/6或9-11周龄BALB/c雄性或雌性小鼠购自Charles River育种实验室(Charles River Breeding Laboratories)。此项研究中使用的所有动物实验方案都经过阿尔伯塔大学动物护理和使用健康科学委员会(University of Alberta Animal Careand Use Committee for Health Sciences)的批准,并且根据阿尔伯塔大学,埃德蒙顿,加拿大(University of Alberta,Edmonton,Canada)的指南进行。
小鼠治疗和样品收集
使用如不同实施例和图例中所述的剂量、方案和途径向小鼠单次或多次施用在PBS中的新月柄杆菌(CC)。将所用的CC以两种形式制备:CC-1(在液体PYE培养基中生长且在室温下在盐水中储存的CC),和CC-2(在液体PYE培养基中生长且在4℃下冰箱中储存的CC)。CC-2在图和描述中也被称为CC。
在特定时间下对小鼠施以安乐死之后,收集血液、脾脏、肺脏、肝脏、***等。使用商用的Vet测试试剂盒(Idexx Laboratories),用血清样品来测定生化标记。
从脾脏分离淋巴细胞
在免疫后的特定时间,对小鼠施以安乐死以获得脾细胞。将来自3-5只小鼠的脾脏汇集并且研磨成单细胞悬液,并经由Falcon 100μm尼龙细胞渗滤器过滤。离心以后,将细胞沉淀再悬浮于2ml无菌蒸馏水中并短暂涡旋。立即添加2×PBS并且在短暂涡旋后,用1×PBS使体积变为25ml。对管离心并将细胞沉淀再悬浮于10ml完全RPMI中。将其再次经由Falcon100μm尼龙细胞渗滤器过滤并离心。将细胞沉淀再悬浮于2ml RPMI培养基中。这些淋巴细胞用于实验。
小鼠细胞因子ELISA
使用夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒,按照制造商方案(eBioscience,CA,USA),就IL-10、GM-CSF、IL-17A、IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-6、IL-1βIL-22、MIP-1α、IL-8/KC的存在对增殖共培养物的上清液或小鼠血清样品中分泌的细胞因子和趋化因子进行测量。1:2至1:50的稀释度用于标准范围在5至2,000pg/ml内的样品。最终,读取ELISA板并且用自动ELISA读板仪(Fluostar Optima,BMG Labtech)计算浓度。
抗体应答的评价
使用酶联免疫吸附测定(ELISA)测定血清和肺洗出液中的抗体(IgG、IgG2a、IgE)水平。简言之,将96孔硝化纤维素(Nunc)板用相关抗原(如OVA、MOG肽)包被并在4℃下孵育过夜。将板用含有正常小鼠血清的PBS阻断,接着在室温下用不同稀释度的实验样品孵育2小时。洗涤板4次之后,添加与碱性磷酸酶(AP)缀合的抗小鼠Ig同种型抗体,然后孵育2小时。洗涤板之后,添加PNPP底物并且在405nm波长下在Fluostar ELISA读数器上读取显色。用于抗体检测的所有试剂都获自Southern Biotech(Birmingham,AL)。
T细胞增殖测定
在96孔平底微量滴定板中在一式三份培养物中测量脾T细胞的增殖应答。将来自免疫小鼠的总计4×105个脾T细胞和4×105个抗原呈递细胞(APC)(来自用18Gy辐照的对照同系基因小鼠的脾细胞)与不同浓度(0.1、1及10μg/mL)的MOG肽混合,在37℃(5%CO2)下在RPMI培养基(含有10%胎牛血清(FBS))中培养4天。
用0.5μCi/孔[3H]-胸苷(Amersham)对细胞进行脉冲12-18h并在滤纸上(PerkinElmer)采集。在Microbeta Trilux液体闪烁计数器(Perkin Elmer)上对掺入到增殖细胞DNA中的[3H]-胸苷的水平计数。增殖表示为一式三份培养物的平均cpm±SE(标准误差)。
表面标记、细胞内IL-10及Foxp3的流式细胞术分析
将来自免疫小鼠的总计5×105个细胞进行多色荧光标记的mAb(根据制造商说明书的浓度)的细胞内和细胞外染色。将细胞用Fc小鼠血清(Sigma)孵育以防止非特异性结合并用荧光激活细胞分选仪(FACS)-缓冲液(在1×磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的2%胎牛血清)洗涤。在4℃下与用于细胞外标记的抗小鼠CD3e-FITC、CD4-PECy-5、CD25-PE-Cy7、CD8a-APC-Cy7、抗-PD-1-PerCP eFluore 710、抗-CD49b-Alexafluor-700(对于BALB/c和C57bl/6小鼠)等(eBioscience)一起孵育30分钟后,将细胞洗涤两次并固定于固定液(在FACS-缓冲液中的1%多聚甲醛)中5分钟。洗涤两次之后,将细胞与冷的渗透缓冲液(在PBS中的FACS-缓冲液+0.3%皂角苷(Sigma)+5%正常人血清)一起孵育5分钟,然后添加抗小鼠IL-10(eBioscience)和抗Foxp3-PE(biolegend)且在4℃下进一步孵育30分钟。将细胞用含有1%皂角苷的FACS-缓冲液洗涤一次并固定。将其在Fortessa中读取并使用FACS-DIVA软件(Becton Dickinson,Mountain View,CA)分析。基于其相应的同种型-匹配对照单克隆抗体来门控每个标记。
人PBMC和DC
使用Ficoll-Paque从正常人供体处获得外周血液单核细胞(PBMC)。为了获得树突细胞(DC),使用在文献中充分确立的程序将粘附的PBMC与重组GM-CSF和IL-4一起在RPMI培养基中培养5-6天。将如个别实施例中所述的与测试材料培养给定时间的人PBMC用针对CD34、CD45、CD11c及CD11b的抗体染色,使用标准程序用商业(eBiosciences)上获得的不同荧光团进行标记。
结果
以下实施例旨在说明而非限制本发明的范围。
将CC的免疫调节作用在如下经由全身和粘膜途径的不同模型和适应症中单独和与不同的抗原一起测试。
实施例1:在健康小鼠中经口和鼻内施用CC后在伴刀豆凝集素A(ConA)刺激的脾细胞中新月柄杆菌(CC)对调节炎性细胞因子的作用
将C57/bl6雄性小鼠用CC以500x106CFU/小鼠或PBS对照每周两次经口或鼻内治疗五次。在最后一次治疗后8天对小鼠施以安乐死。分离脾脏并用T细胞促***素ConA以1ug/ml浓度离体刺激24小时。收集上清液并且使用ELISA测量细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-6及IL-17A)(图1)。这些结果表明,CC的治疗在用Con A离体刺激后的脾细胞中下调炎性细胞因子的产生,并且提示CC在抑制来自包括病毒、细菌、真菌的多种感染以及来自环境毒素、药物反应和自身免疫病症的由T细胞介导的炎症方面的作用。
实施例2:在健康小鼠中经口和鼻内施用CC后新月柄杆菌(CC)调节来自美洲商陆(PWM)刺激的脾细胞的炎性细胞因子的作用
将C57/bl6雄性小鼠用CC以500x106CFU/小鼠或PBS对照每周两次经口或鼻内治疗五次。在最后一次治疗后8天对小鼠施以安乐死。分离经治疗的小鼠的脾脏并用B细胞促***素PWM以0.1ug/ml浓度离体刺激24小时。收集上清液以便使用ELISA进行细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-6及IL-17A)测量(图2)。这些结果表明,CC的治疗下调在用PWM离体刺激后的脾细胞中炎性细胞因子的产生,并且提示CC减轻在感染和非感染相关的全身炎性病症中的促炎性细胞因子的过度产生方面的作用。
实施例3:在经口和鼻内施用后新月柄杆菌(CC)对抗炎细胞因子IL-10的体内诱导的作用:
将五只C57/bl6雄性小鼠组用CC以500x106CFU/小鼠或PBS对照每周两次经口或鼻内治疗五次。在最后一次治疗后8天对小鼠施以安乐死并且分离脾脏。将脾细胞用培养基、ConA及PWM培养24小时。收集上清液以便使用ELISA进行IL-10测量(图3A-图3C)。所获结果显示在有或没有刺激剂下24小时培养后CC上调脾细胞中离体IL-10的产生并且提示CC可诱导体内IL-10产生。这些结果还表明CC在炎性病状中重建体内平衡方面的全身免疫调节和抗炎作用。
总之,图1、图2和图3中所示的结果提示CC具有诱导较高水平的抗炎细胞因子IL-10和下调炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-6及IL-17A的水平的能力。促炎性细胞因子在许多疾病的发病机制中发挥重要作用且因此人们对开发在一系列罹患的疾病中调节它们的过度产生的治疗剂感兴趣。
实施例4:新月柄杆菌(CC)对从CC治疗的小鼠中分离的离体LPS刺激的脾细胞的IL-10产生的作用:
将雌性C57/bl6小鼠用CC以500x106CFU/小鼠或PBS对照每周两次经由管饲法经口治疗四次。在最后一次治疗后4天对小鼠施以安乐死并且收集脾脏。用LPS以1ug/ml浓度刺激脾细胞24和72小时。收集上清液并使用ELISA测量IL-10(图4)。所获结果显示与安慰剂组(PBS)相比,CC在LPS刺激后上调脾细胞中的离体IL-10产生。这些研究提示CC在正常化促炎性细胞因子的失调释放方面的抗炎活性及对炎性应答和/或自身免疫病症的保护。
实施例5:在经口治疗后新月柄杆菌(CC)对肠相关肠系膜***中的促炎性细胞因子的作用:
为了确定CC对肠淋巴组织中炎性细胞因子水平的作用,将雌性C57/bl6小鼠用CC以500x106CFU/小鼠或PBS对照每周两次经口治疗四次。在最后一次治疗后三天,对小鼠施以安乐死并收集局部肠系膜***。在24小时LPS刺激后收集的上清液中测定细胞因子水平。CC的经口施用与PBS组相比造成IFN-γ、IL-6及IL-17A的水平下降(图5)。这些结果显示CC可下调局部肠系膜***中的Th1和Th17细胞因子的产生。因此,CC具有降低多种炎性病症中的TH1和/或TH17介导的促炎性细胞因子水平的能力,其中免疫失调和炎症是由以下外部或内部刺激或微生物触发:诸如革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、病毒、真菌、寄生虫、LPS、毒素、自身抗原、糖基磷脂酰肌醇、组织损伤(外伤、烧伤)等。
实施例6:新月柄杆菌(CC)在经口治疗后的小鼠中全身免疫调节的作用:
将雌性C57/bl6小鼠用CC以500x106CFU/小鼠或PBS对照每周两次经口治疗四次。在最后一次治疗后4天对小鼠施以安乐死并且收集脾脏。通过流式细胞术分析表达IL-10+的CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞的百分比。CC的治疗造成脾细胞中CD4+和CD8+T细胞上的细胞内IL-10的表达增加(图6)。总的来说,图4-图6中示出的结果显示CC在炎性和自身免疫病症中具有局部和全身正常化免疫失调的强能力。
实施例7:在皮下治疗后新月柄杆菌(CC)对调节脾脏中的促炎性细胞因子产生的作用:
向三只C57/bl6雄性小鼠组每周一次经由皮下途径施用CC(500x106CFU/小鼠)或PBS持续四周。在最后一次治疗后28天对小鼠施以安乐死。采集脾脏并且将脾细胞用ConA培养。在24小时ConA刺激后收集的上清液中测定细胞因子水平。图7中所示的结果表明CC导致持续调节IFN-γ、TNF-α及IL-6细胞因子的产生(图7)。因此,CC可甚至在疗法停止之后还提供持久的免疫调节作用。
实施例8:在用新月柄杆菌(CC)经口治疗之后先天性和适应性免疫细胞的调节:
将三只C57/bl6雄性小鼠组每周一次用CC(500x106CFU/小鼠)或PBS经口治疗持续四周。在最后一次治疗后28天对小鼠施以安乐死并且采集脾细胞并通过流式细胞术来分析。CC的经口治疗造成CD8+、CD8+CD25+及NKT(CD3+CD49b+)细胞上的FOXP3表达增加和NK细胞上的PD-1表达增加(图8)。因此,CC诱导各种调控性淋巴细胞来控制炎症。这些数据表明CC可通过调控先天性和适应性免疫细胞上的不同调控性分子的表达来诱导体内平衡,且因此CC可用于控制各种疾病中的过度炎症。已显示NK细胞上的PD-1表达控制分枝杆菌感染中的炎性应答。另外,还显示NK上的PD-1保护免受包括病毒性、细菌性及自身免疫病症。
已显示NK和/或NKT细胞下调包括以下的若干疾病中的自身免疫应答:多发性硬化症、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、斯耶格伦氏综合征、自身免疫性甲状腺病、牛皮癣、***、I型糖尿病、神经变性疾病等。因此,本公开提出用于预防和/或治疗一系列炎性、过敏性及自身免疫病症的有吸引力的生物治疗剂。因此,本公开总体上提出一种通过调节适应性和先天性T和/或NK和/或NKT细胞的活性来预防和/或治疗感染性和非感染性情形下的全身和局部炎症的策略。
实施例9:在用新月柄杆菌(CC)皮下治疗之后脾细胞中的T细胞的调节:
将三只C57/bl6雄性小鼠组每周一次用CC(500x106CFU/小鼠)或PBS皮下治疗四周。在最后一次治疗后28天对小鼠施以安乐死并且采集脾细胞并通过流式细胞术来分析。CC的皮下治疗造成CD4+、CD4+CD25+、CD8+及CD8+CD25+T细胞上的FOXP3表达增加(图9)。因此,CC的胃肠外施用也可提供持久的免疫调节作用。这些结果显示CC在诱导和扩增调控性T细胞亚组中的作用。已显示T调控性细胞在包括以下的广泛范围疾病中抑制炎性活性:自身免疫性脑脊髓炎、IBD、细菌诱导的结肠炎、1型糖尿病、嗜酸细胞性气道炎症、移植物抗宿主疾病、器官移植等。
实施例10:新月柄杆菌(CC)在败血症/炎症的LPS激发模型中控制全身炎症方面展现积极益处:调节血清中的细胞因子水平。
用LPS在100μl PBS中以7mg/Kg腹膜内激发3只C57/bl6雄性小鼠组,并且在用LPS体内激发2小时和24小时后用CC(500x106CFU/小鼠)经口治疗。健康未激发的和饲喂PBS的小鼠也被纳入作为对照。在第二治疗之后对小鼠施以安乐死并且收集血液样品并通过ELISA分析其中的细胞因子。LPS激发的小鼠在血清中具有高水平的炎性细胞因子。相比之下,CC治疗下调炎性细胞因子IL-1β和IL-6的产生并上调抗炎细胞因子IL-10的产生(图10)。因此,CC促进非损伤性免疫应答。IL-1β和IL-6的诱导与许多急性和慢性炎性疾病及自身免疫疾病有关,如败血症、MS、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、RA、痛风、代谢疾病(动脉粥样硬化、II型糖尿病)、高血压、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、牛皮癣及过敏。因此,CC可有助于管理和改善这些炎性医学病状。
实施例11:新月柄杆菌(CC)在败血症/炎症模型中控制局部炎症方面展现积极益处:调节肺脏和肝脏中的细胞因子水平。
用LPS在100μl PBS中以7mg/Kg腹膜内激发3只C57/bl6雄性小鼠组,并在用LPS体内激发2小时和24小时后用CC(500x106CFU/小鼠)经口治疗。健康未激发的和饲喂PBS的小鼠也被纳入作为对照。在这些研究中,将所用的CC以两种形式制备:CC-1(在液体PYE培养基中生长且在室温下在盐水中储存的CC),和CC-2(在液体PYE培养基中生长且在4℃下冰箱中储存的CC)。在CC-1和CC-2的第二次治疗之后对小鼠施以安乐死,并且采集肺脏和肝脏,然后测定其匀浆中的细胞因子。与LPS激发组相比,CC-1和CC-2都下调肺脏和肝脏中炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-17A的产生(图11)。这些结果表明CC可用于控制炎性过程并正常化组织功能,包括与以下有关的炎症后的医学病状:在各种(肠、肺、肝、脑、皮肤、心脏等)器官中的病毒和细菌病原体、组织损伤、细胞应激、代谢扰动等。LPS介导的败血症是急救护理、手术及烧伤病房中死亡的常见原因。通过靶向宿主免疫组分而致力于改善LPS介导的致死性炎性级联的治疗方法可具有临床和治疗优势。
实施例12:新月柄杆菌(CC)在LPS激发的小鼠炎症模型中对肝损伤的生化参数展现积极效果:
用LPS在100μl PBS中以7mg/Kg腹膜内激发3只C57/bl6雄性小鼠组,并在用LPS体内激发2小时和24小时后用CC(500x106CFU/小鼠)经口治疗。健康未激发的和饲喂PBS的小鼠也被纳入作为对照。在这些研究中,将所用的CC以两种形式制备:CC-1(在液体PYE培养基中生长且在室温下在盐水中储存的CC),和CC-2(在液体PYE培养基中生长且在4℃下冰箱中储存的CC)。在CC-1和CC-2的第二次治疗之后对小鼠施以安乐死,并采集血液样品以确定对生化标记的作用。CC-1和CC-2的治疗都能使LPS激发的小鼠的葡萄糖(GLU)、球蛋白(GLOB)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总磷酸盐(TP)及总胆红素(TBIL)水平正常化至非激发的且饲喂PBS的小鼠的水平(图12)。这些结果表明CC可有效地用于治疗各种炎症介导的病症,包括肝相关疾病。
实施例13:新月柄杆菌(CC)预防LPS激发的小鼠模型中的肝损伤:
用LPS在100μl PBS中以7mg/Kg腹膜内激发3只C57/bl6雄性小鼠组,并在用LPS体内激发2小时和24小时后用CC(500x106CFU/小鼠)经口治疗。健康未激发的和饲喂PBS的小鼠也被纳入作为对照。在这些研究中,将所用的CC以两种形式制备:CC-1(在液体PYE培养基中生长且在室温下在盐水中储存的CC),和CC-2(在液体PYE培养基中生长且在4℃下冰箱中储存的CC)。在CC-1和CC-2的第二次治疗之后对小鼠施以安乐死,并收集各种器官。在CC-1和CC-2两者的情况下都未观察到肺、肝及其它器官的炎症或损伤。进行肝切片的H&E染色。图13中所示的结果显示与LPS激发的小鼠相比,通过经口途径施用的CC在预防LPS诱导的炎症及肝损伤中的保护作用。肝脏的大规模破坏与许多医学病状有关,这些医学病状是由归因于感染性和非感染性发病机制的不希望的炎性活性造成。因此,CC在预防和改善由自身免疫性肝炎、酒精相关性肝病、病毒介导的肝炎等所致的肝损伤中具有强大潜力。
实施例14:在用新月柄杆菌(CC)经口治疗后咪喹莫特(IMQ)诱导的牛皮癣样皮炎小鼠模型中细胞因子的调节:
向10-11周龄Balb/c雌性小鼠在剃过毛的背部施用局部剂量的6.25mg 5%IMQ霜剂(Aldra,咪喹莫特)持续连续6天。从第3天起(5天一周,持续两周),用CC以500x106CFU/小鼠经口治疗小鼠。在最后一次治疗后3天对小鼠施以安乐死并采集脾脏。将脾细胞用培养基离体培养4天并且检查培养上清液中的细胞因子(图14)。与PBS治疗的牛皮癣小鼠相比,CC的治疗造成Aldra诱导的牛皮癣小鼠中IFN-γ、IL-6、IL-17A及IL-22的产生减少(图14)。这些研究表明CC可纠正炎性疾病和自身免疫疾病中的细胞因子失调并产生有益的治疗效果。除牛皮癣之外,免疫细胞在真皮和表皮中的浸润也发生在其它慢性皮肤疾病如特应性皮炎、反常性痤疮、红斑痤疮等中。因此,CC可用于治疗具有炎性组分的各种皮肤病症。总之,图14中所示的结果表明CC具有全身免疫调节和抗炎活性以便保护免于病原体或自身免疫相关的炎性应答。
实施例15:新月柄杆菌(CC)在罹患DSS诱导的炎性肠病(IBD)的小鼠的结肠组织中对减少促炎性细胞因子和趋化因子的作用。
向5只雄性C57bl/6组给予饮用水中的3%葡聚糖硫酸钠(DSS)持续连续7天。在DSS开始的同一天用CC(500x106CFU/小鼠)治疗小鼠。水治疗的小鼠用作对照。在第10天,对小鼠施以安乐死并且采集结肠组织并且培养24h。使用ELISA测定培养上清液中的细胞因子。所获结果表明CC减少促炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β、及趋化因子IL-8/KC和MIP-1α(图15)。因此,CC的经口治疗在鼠DSS诱导的结肠炎模型(对于IBD)中降低局部结肠中炎性细胞因子和趋化因子的异常水平,这解释了级联的激活在IBD中导致上皮通透性、细胞凋亡、溃疡、腹泻等。
实施例16:新月柄杆菌(CC)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中对抑制自身抗原特异性T细胞和抗体应答的作用。
为了确定CC在减轻自身抗原特异性免疫应答中的作用,将五只C57Bl6雌性小鼠组用在CFA中乳化的200μg MOG35-55肽在100μl盐水中皮下免疫。另外,在第0天和第3天,小鼠腹膜内接受400ng在200μl盐水中的百日咳毒素。从免疫的第3天开始,将小鼠每三天连续地用CC(500x106cfu/小鼠)经口治疗直到实验结束。PBS治疗的激发小鼠被用作对照。在免疫后30天对小鼠施以安乐死并收集脾脏和血液样品。在脾细胞中检查针对MOG肽(10、1及0.1μg/ml)的T细胞应答。通过ELISA分析血清样品中的抗MOG抗体(IgG和IgG2a)滴度。有趣的是,与PBS对照组相比,CC减轻自身抗原MOG特异性T细胞应答(图16)。与PBS对照组相比,CC还降低自身抗原MOG特异性IgG和IgG2a抗体滴度(图16)。这些结果提示CC可降低自身抗原特异性T和B细胞应答。EAE模型是人类炎性脱髓鞘疾病,多发性硬化症(MS)的常用模型。MS是中枢神经***(CNS)的炎性疾病。EAE是一种复杂病状,其中免疫病理与神经病理机制之间的相互作用产生MS的病理特征,即炎症、脱髓鞘、轴突缺失及神经胶质增生。因此,CC可有效治疗自身免疫和神经障碍、自身免疫性血液疾病、自身免疫性溶血性贫血等。
实施例17:新月柄杆菌(CC)在卵清蛋白诱导的小鼠气道炎症模型中对减轻过敏原(OVA)特异性抗体和细胞因子应答的作用。
为了确定CC在气道/肺炎性疾病中的作用,在第1天和第6天,用在400μl盐水中的10μg卵清蛋白和2mg Al(OH)3腹膜内敏化5只Balb/c雄性小鼠组。在第12天和第14天用50μg卵清蛋白鼻内激发(15μl/鼻孔)小鼠。从敏化的第7天开始,每三天用CC(500x106CFU/小鼠)经口治疗小鼠直到第17天。在单独的组中,将小鼠在第13天用***(DEX,2mg/Kg,i.p.)单独治疗一次或用***和CC治疗。对照小鼠以与CC相同的方案接受盐水。在最后一次治疗的次日对小鼠施以安乐死,收集血液样品、肺洗出液和脾脏。将脾细胞的单细胞悬液(2x106个细胞/ml)用50μg OVA培养96h并且通过ELISA分析培养上清液中的细胞因子(IL-4和IL-6)水平。CC的经口治疗减少OVA敏化小鼠中OVA特异性IgE在血清和肺洗出液中的产生(图17)。发现通过CC治疗,脾脏中的IL-4和IL-6水平也降低(图18)。与***单独治疗相比,CC治疗与***的组合进一步造成脾脏中的IL-4和IL-6水平进一步降低(图19)。这些数据提示CC的治疗预防小鼠中OVA诱导的过敏性气道炎症。过敏是一种复杂疾病,其中多种免疫细胞和炎性介质促进过敏性疾病的起始和表现。过敏是IgE介导的超敏反应的最常见结果。IL-4和IL-6产生的增加与过敏性疾病有关。IgE在血清中的存在是由B细胞中IL-4介导的Ig类别转换驱动的过敏性疾病的标志。IgE依赖性过敏反应可影响一种或多种靶器官及过敏性疾病,如鼻炎、鼻窦炎、结膜炎、哮喘、皮炎和食物过敏等。
实施例18:新月柄杆菌(CC)在高脂饮食诱导的肥胖模型中治疗代谢病症和减轻全身性炎症的作用。
向五只C57bl/6小鼠组饲喂高脂饮食持续4-6个月并且每周三次用CC(500x106cfu/小鼠)治疗4-6个月。PBS治疗的高脂饮食饲喂的小鼠用作对照。在约第180天,终止实验之前进行葡萄糖耐受性试验。使用OneTouch监测***测量血糖。对小鼠施以安乐死并收集血液、肝脏和脾脏。血清样品用于通过兽医测试(Vet test)来测定生化参数。制备肝脏匀浆并且通过ELISA测定促炎性细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-1β)。将脾细胞(2x106个细胞/ml)用LPS(1mg/ml)培养24h并且通过ELISA分析培养上清液中的细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-6)。与高脂饮食对照小鼠相比,CC的经口治疗显著减少肝脏(图20)和脾脏(图21)中的促炎性细胞因子,提示CC可有效地减轻慢性和全身性炎症。在高脂饮食诱导的肥胖模型中,CC的经口治疗还在与代谢疾病有关的生化参数中提供积极益处(图22)。此外,进行CC治疗的小鼠显示与对照组相比改善的葡萄糖耐受性(图23)。已充分确定,肥胖与低度炎症有关,低度炎症又促成以下许多代谢病症,包括2型糖尿病、心血管疾病、高血压、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、非酒精性脂肪肝疾病、脱发等。在肥胖状态下,许多炎性细胞因子和趋化因子(例如,IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-1β等)的产生是失调的。肥胖也与造成葡萄糖耐受不良的胰岛素抗性和非酒精性脂肪肝疾病有关。已显示TNF-α活性的抑制还显著抑制脂肪性肝炎在饲喂酒精的动物中的发展。高胆固醇与冠心病(动脉粥样硬化)、中风、外周血管疾病、糖尿病及高血压的风险升高有关。升高水平的甘油三酯与动脉粥样硬化有关并且还增加急性胰腺炎的风险。当肾脏不能有效地消除尿酸时,出现高尿酸水平。可引起高尿酸的其它因素包括肥胖、甲状腺机能减退等。尿酸的积聚可造成炎症及痛风发作的剧烈疼痛。肌酸激酶水平升高见于心脏病发作、所有类型的肌营养不良、内分泌病症、神经肌肉疾病等中。已知促炎性细胞因子如TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-1β参与了肥胖、肥胖相关病状如2型糖尿病、胰岛素抗性、非酒精性脂肪肝疾病、酒精诱导的肝脏疾病、血管功能障碍相关的神经变性过程如阿尔茨海默病、神经精神病症如抑郁症、精神***症等。线粒体活性氧物质(ROS)驱使慢性人类疾病中促炎性细胞因子(TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-1β)产生。这些研究显示CC的治疗在高脂饮食的肥胖小鼠中减少与代谢病症有关的血清生化标记、改善葡萄糖耐受性并减少肝脏中的促炎性细胞因子。
实施例19:新月柄杆菌(CC)在携带EL-4淋巴瘤的小鼠中降低与抗癌药物环磷酰胺有关的肝和肾毒性的作用。
为了确定CC在降低与治疗性治疗有关的毒性中的作用,将五只C57Bl6小鼠组用在100μl盐水中的0.25x106个EL-4细胞/小鼠在左下胁腹中皮下激发。从用EL-4细胞激发后第5天开始,每周一次经口施用CC(50x106cfu/小鼠)。在第17天和第21天,将小鼠用环磷酰胺以150mg/Kg腹膜内治疗。健康的未激发的及环磷酰胺单独治疗的激发的小鼠被用作对照。在EL-4激发后第30天对小鼠人道地施以安乐死并且收集血液样品。CC连同环磷酰胺的治疗在携带EL-4肿瘤的小鼠中将磷酸盐(PHOS)和总胆红素(TBIL)的血清水平正常化至非激发的正常小鼠的水平(图24)。这些结果表明CC可用于有效地降低抗癌剂或治疗性治疗的毒性。
实施例20:新月柄杆菌(CC)在B16转移性癌症模型中降低与抗癌药物有关的器官毒性的作用。
为了确定CC在降低与癌症化疗有关的毒性中的作用,将五只C57Bl6小鼠组用在100μl盐水中的0.4x106个B16细胞/小鼠腹膜内激发。在B16激发后第7天和第10天将小鼠用顺铂(4mg/kg)腹膜内治疗并且每周一次经口施用CC(50x106cfu/小鼠)。健康的未激发的及顺铂单独治疗的激发的小鼠被用作对照。在B16激发后第30天对小鼠施以安乐死并且收集血液样品以确定对血清生化标记的作用。CC连同顺铂的治疗在携带B16转移性癌症的小鼠中将磷酸盐(PHOS)、尿素、总胆红素(TBIL)及天冬氨酸转氨酶(AST)的血清水平正常化至非激发的正常小鼠的水平(图25)。这些结果表明CC可用于有效地降低抗癌剂或治疗性治疗的毒性。
实施例21:新月柄杆菌(CC)在B16黑色素瘤小鼠模型中降低升高的与检查点抑制剂抗体(抗PD-1)有关的肝毒性的生化参数水平的作用。
为了确定CC在降低与治疗性抗体有关的毒性中的作用,将五只C57Bl6小鼠组用在100μl盐水中的0.4x106个B16细胞/小鼠在左下胁腹中皮下激发。从用B16黑色素瘤癌细胞激发后第3天开始,每周一次经口施用CC(50x106cfu/小鼠)。在用CC第一次治疗之后两天,腹膜内施用抗PD-1抗体(200ug/小鼠)并且每3-4天继续进行。健康的未激发的及抗PD-1抗体单独治疗的激发的小鼠被用作对照。在肿瘤激发后第25天对小鼠施以安乐死并且收集血液样品以确定对生化标记的作用。CC连同抗PD-1单克隆抗体的治疗在携带B16肿瘤的小鼠中将磷酸丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的血清水平正常化至非激发的正常小鼠的水平(图26)。这些结果表明CC可用于有效地降低治疗性和检查点抑制剂抗体或治疗性治疗的毒性。
实施例22:LPS阴性新月柄杆菌(LPS-ve CC)在败血症/炎症的LPS激发模型中保护小鼠免受肝损伤:调节肝脏中的细胞因子水平。
为了确定脂多糖阴性(LPS-ve)CC在免疫调节中的作用,将C57/bl6雌性小鼠用在200μl盐水中的LPS以25mg/Kg腹膜内激发并且在用LPS体内激发2h和20h后用LPS-ve CC(500x106CFU/小鼠)经口治疗。健康未激发的和饲喂PBS的小鼠也被纳入作为对照。在第二次治疗24h之后对小鼠施以安乐死,并且采集肝脏,然后测定其匀浆中的细胞因子。LPS激发的小鼠在肝脏匀浆中具有高水平的炎性细胞因子和趋化因子。相比之下,LPS-ve CC治疗下调炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8/KC及趋化因子MIP-1α的产生并上调抗炎细胞因子IL-10的产生(图27)。这些结果表明类似于使用野生型CC所获得的结果,LPS-ve CC在控制炎性过程中也展现积极的效果。因此,LPS阴性CC可用于控制炎性过程并正常化组织功能,包括炎症后的医学病状。
实施例23:弧形柄杆菌(CV)在人PBMC中减少由益生菌或致病细菌诱导的促炎性细胞因子的作用。
将人PBMC(4x106/孔)用灭活的鼠李糖乳杆菌(LB)或单核细胞增多性李斯特氏菌(LM)(50x106CFU/ml)刺激6h。然后添加CV(250x106CFU/ml)并且再孵育板24h或96h。收集培养上清液并且通过ELISA测定IFN-γ和TNF-α。CV的治疗降低由LB和LM诱导的IFN-γ和TNF-α的水平(图28)。这些结果提示柄杆菌属的其它物种可减轻与细菌或病毒病原体有关的炎症。这些结果还提示柄杆菌属物种可用于治疗由微生物组相关和不相关的微生物诱导的不希望的炎性应答。此外,它们可用于调节微生物组治疗剂的免疫调节活性。
实施例24:新月柄杆菌(CC)在离体操纵人髓样树突细胞中的作用。
将从外周血液单核细胞分化来的人髓样树突细胞(2x106/ml)在CC(50或10CFU/ml)的不存在和存在下培养24h。收集培养上清液并且通过ELISA检查IL-10水平。所获结果提示CC可生成产生IL-10的调节的DC群(图29)。树突细胞(DC)是适应性免疫的关键调节物,其具有诱导T细胞抑制和耐受性的潜力。由DC产生的IL-10在调控性T细胞的生成、扩增和维持中发挥作用。这些结果提示CC可用于离体操纵DC以用于基于DC的免疫治疗策略。
实施例25:新月柄杆菌(CC)对多能干细胞从人PBMC分化/扩增为髓性细胞的作用。
将人PBMC(4x106/孔)与CC(500x106、50x106、10x106及1x106CFU/ml)和盐水一起培养10天。针对表面标记CD34、CD45、CD11c及CD11b对PBMC进行染色。针对CD34+CD45-多能干细胞来门控细胞,由此进一步针对CD11c+和CD11b+DC和巨噬细胞进行门控,并且通过流式细胞术分析数据。所获结果提示CC可将干细胞分化为髓性细胞(图30)。髓性细胞来源于多能造血干细胞。这些细胞在先天性和适应性免疫、炎性反应、免疫体内平衡的恢复、骨重建等中发挥关键作用。因此,CC可导致髓性细胞由干细胞的分化和/或扩增以用于患者特异性免疫疗法中。
Claims (33)
1.一种免疫调节组合物,其包含:
a)活的新月柄杆菌;和
b)药学上可接受的赋形剂。
2.如权利要求1所述的组合物,其还包含抗原、自身抗原或过敏原。
3.如权利要求1或权利要求2所述的组合物,其中所述新月柄杆菌为野生型、脂多糖阴性菌株或S层阴性菌株。
4.如权利要求1-3中任一项所述的组合物,其中所述新月柄杆菌为活的、非变性的、突变的、减毒的或遗传修饰的。
5.如权利要求1-3中任一项所述的组合物,其中所述新月柄杆菌被遗传修饰以产生一种或多种异源多肽,其中异源多肽选自自身抗原、过敏原、细胞因子、共刺激或共抑制分子、趋化因子、免疫球蛋白或其抗原结合片段、抗微生物剂。
6.如权利要求1-5中任一项所述的组合物,其还包含治疗性抗体。
7.如权利要求1-6中任一项所述的组合物,其还包含益生菌病原体、共生菌病原体、***原体、或来自患者的微生物组的治疗性细菌。
8.如权利要求1-6中任一项所述的组合物,其还包含至少一种佐剂、细胞因子或选自以下的治疗剂:抗炎剂、抗增殖剂、细胞毒性剂、免疫抑制剂、免疫调控剂、免疫调节剂、抗组胺剂或抗微生物剂。
9.一种调节个体中的免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
10.如权利要求9所述的方法,其中所述免疫应答包括调节一种或多种细胞因子。
11.如权利要求9所述的方法,其中所述免疫应答为体液免疫应答、细胞免疫应答或先天性免疫应答。
12.如权利要求9所述的方法,其还包括向所述个体施用自身抗原或过敏原。
13.如权利要求9所述的方法,其还包括向所述个体施用治疗性治疗,如放射疗法、激光疗法、光动力疗法和/或手术。
14.如权利要求9所述的方法,其还包括向所述个体施用抗细菌剂、抗分枝杆菌剂、抗原生动物剂、抗疟疾剂、抗蠕虫剂、抗病毒剂、抗组胺剂、抗糖尿病剂、抗炎剂、抗增殖剂、细胞毒性剂、免疫抑制剂或免疫调节剂。
15.如权利要求9所述的方法,其还包括向所述个体施用抗体。
16.如权利要求9所述的方法,其还包括向所述个体施用细胞因子、佐剂或免疫调控剂。
17.如权利要求9所述的方法,其还包括向所述个体施用益生菌、共生菌、来自微生物组的治疗性成员或***原体。
18.如权利要求9-17中任一项所述的方法,其中所述个体为人、非人哺乳动物或非哺乳动物的动物。
19.如权利要求9-18中任一项所述的方法,其中所述组合物是经由口、鼻、皮下、肌内、静脉内、***、经皮、局部、直肠、眼或粘膜施用途径来施用。
20.一种调节树突细胞的方法,所述方法包括:
a)使从个体处获得的树突细胞(DC)与包含以下的组合物接触:i)新月柄杆菌;和/或ii)抗原,其中所述接触是在体外且其中所述接触调节所述DC上的抗原呈递,由此产生调节的DC群。
21.如权利要求20所述的方法,其还包括向所述个体施用所述调节的DC。
22.一种产生调控性淋巴细胞的方法,其中所述调控性淋巴细胞为天然杀伤(NK)细胞、NK T细胞、γδT细胞(ILC)、T细胞或B细胞,所述方法包括:使从个体获得的淋巴细胞与包含以下的组合物接触:i)新月柄杆菌;和/或ii)抗原,其中所述接触是在体外且其中所述接触产生调控性淋巴细胞群。
23.如权利要求22所述的方法,其还包括使所述调控性细胞与抗原呈递细胞(APC)接触。
24.如权利要求22所述的方法,其还包括向所述个体施用所述调控性淋巴细胞。
25.一种调控个体中的免疫应答的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物,其中调节性T细胞和/或B细胞和/或NK细胞和/或NKT细胞和/或γδ细胞、ILC和/或巨噬细胞和/或树突细胞群的数量、活性和/或效应子功能受到调节。
26.一种诱导个体中的干细胞的增殖、分化和/或调节及恢复体内平衡的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
27.一种修饰干细胞的方法,所述方法包括使所述干细胞与包含新月柄杆菌的组合物接触,其中所述接触产生扩增的、分化的和/或调节的干细胞群。
28.一种治疗个体中的不希望的炎性活性、免疫失调或自身免疫病症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
29.一种治疗个体中的代谢病症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
30.一种治疗个体中的神经病症的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
31.一种治疗个体中的过敏性疾病的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
32.一种提高个体中的治疗性治疗的功效和/或降低其毒性的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
33.一种治疗、恢复或纠正与个体中的微生物组失衡有关的疾病或医学病状的方法,所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求1-8中任一项所述的免疫调节组合物。
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