CN107903389A - E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物的合成及应用 - Google Patents

E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物的合成及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一类新型的多肽‑聚乙二醇‑喜树碱类药物三元偶联物的设计与合成，包括两种偶联方式，共三种合成路线，同时还包括偶联物在水溶液中自聚为纳米粒子的性能及表征，其初步的体外抗肿瘤活性。这些偶联物可通过E选择素肽配体主动靶向肿瘤部位血管，同时还可在水溶液中自聚为纳米粒子从而通过EPR效应被动靶向于肿瘤部位。同时E选择素肽配体可抑制肿瘤细胞与血管内皮细胞的黏附从而具有抗肿瘤转移的潜力，在抗肿瘤药物开发应用方面具有广阔的前景。

Description

E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物的合成及 应用
技术领域
本发明属于新化合物合成和药物应用领域，尤其是一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物及其合成和应用，涉及一类新型谷胱甘肽敏感的两亲性E选择素多肽配体-聚乙二醇-羟基喜树碱偶联物的合成及应用。
技术背景
E-选择素可特异性识别白细胞和肿瘤细胞表面的某些糖蛋白和糖脂分子的末端结构域，通过这种识别作用介导的E-选择素与白细胞或肿瘤细胞间的作用，可使白细胞或肿瘤细胞在内皮细胞黏附，继而随血流发生迁移，分别导致白细胞介导的促炎症反应和肿瘤细胞的扩散迁移。
E-选择素天然配体的结构特征仍未被完全阐明，有研究认为其特异性识别的天然配体可能包含糖类、肽类等多种结构类型，目前被广泛接受的E-选择素的主要天然配体结构为路易斯酸化的四聚糖结构sLex，理论上E-选择素的特异性配体可以作为靶向分子将其它抗肿瘤药物带到肿瘤部位，同时还可以发挥该配体对肿瘤细胞迁移的抑制作用，因此设计和合成E-选择素配体与抗肿瘤药物的偶联物有望达到肿瘤靶向和抑制肿瘤转移的双重作用。
纳米载体已经被广泛用于抗癌药物的转运来提高药物在水中溶解度和通过EPR效应提高肿瘤的被动靶向性，从而改善治疗效果。通常在高分子前药的制备中，常见的载体有右旋糖酐、血清蛋白、聚乙二醇等，其中聚乙二醇因其高亲水性、生物相容性好、无毒等优良特性，是FDA批准的可药用聚合物之一，它经常被应用于连接抗癌药物和治疗性蛋白，以提高药物的溶解度、生物利用度等。
发明人前期已构建合成一类聚乙二醇、E选择素肽配体、喜树碱类药物的三元偶联物并已申请专利(201610542481.8)，本发明是基于上述发明的技术背景所构建的一类新型三元偶联物，该类偶联物具有不同的偶联方式和合成方法，是一种线形偶联物。前述申请中因聚乙二醇和肽配体在同侧，因而受聚乙二醇链的干扰有可能导致肽配体不能有效与E选择素作用，从而不能有效发挥靶向作用，本发明所设计合成的该类线形偶联物，肽配体与药物分子各自在聚乙二醇两端，可有效避免上述潜在问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物及其合成和应用，具体涉及一种E选择素多肽配体-聚乙二醇—抗肿瘤药物三元线形偶联物的合成及应用，将E选择素多肽配体、聚乙二醇以及疏水抗肿瘤药物三者有机偶联起来，提供一种新型抗肿瘤药物靶向递送***，该***可通过其结构上的两亲性在水溶液中自组装为纳米胶束，从而通过EPR效应实现被动靶向于肿瘤部位，同时利用 E选择素配体将药物主动靶向于肿瘤新生血管。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
本发明的优点和积极效果如下：
1、本发明所涉及的全新偶联物作为递药***合成简便，适用于多种疏水性抗肿瘤药物。
2、本发明通过引入亲水片段PEG，不但使偶联药物在水溶液中可自组装为纳米粒子，进而通过EPR效应来被动靶向于肿瘤部位，同时有望同时提高药物溶解度、延长体内循环时间、改善生物利用度等。
3、本发明通过引入E选择素多肽配体，可使药物主动靶向于肿瘤部位新生血管，降低药物对正常组织毒性。另外，药物可同时对肿瘤新生血管及临近的肿瘤细胞发挥杀伤作用，有望获得更好地治疗效果。本发明中E选择素多肽配体除了发挥肿瘤靶向作用以外，还可以抑制肿瘤细胞与血管内皮细胞之间的黏附作用，进而抑制肿瘤细胞的转移。
4、与本发明人前期所申请内容不同，本发明利用新的偶联方式合成线形的全新三元偶联物，有望完善或发现效果更为优良的药物分子。
附图说明
图1为化合物15在氘代DMSO中的核磁氢谱图；
图2为化合物15在重水中的核磁氢谱图；
图3为化合物14的MALDI-TOF谱图；
图4为化合物15的MALDI-TOF谱图；
图5为化合物23的MALDI-TOF谱图。
具体的实施方式
为了理解本发明，下面结合实施例对本发明作进一步说明：下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物，所述三元偶联物为E选择素多肽配体-聚乙二醇-抗肿瘤药物，其中E选择素多肽配体为IELLQAR、IDLMQAR、DITWDQLWDLMK、DITWDELWKIMN、RNMSWLELWEHMK、DLWDWVVGKPAG 及其反序肽和D型肽，所述抗肿瘤药物包括：喜树碱、羟基喜树碱或SN-38，PEG-E 选择素肽配体的偶联物与喜树碱类抗肿瘤药物的偶联位点包括喜树碱类药物的10位或20位羟基。
一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物，其特征在于：结构式如下
E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物结构I中PP为E选择素多肽配体；m＝4-1200；n＝1-3。
E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物II结构中PP为E选择素多肽配体；m＝4-1200；n＝1-3。
化合物I的通用制备方法一：
化合物I的通用制备方法二：
化合物II的通用制备方法：
其中PEG分子量从300～50000。E选择素肽配体PP可为已报道的肽类配体：IELLQAR、IDLMQAR、DITWDQLWDLMK、DITWDELWKIMN、RNMSWLELWEHMK、DLWDWVVGKPAG及他们的反序肽和D型肽等，抗肿瘤药物包括：喜树碱、羟基喜树碱、SN-38等疏水性药物，R选自烷基，烷氧基，或者芳基，PEG-E选择素肽配体的偶联物与喜树碱类抗肿瘤药物的偶联位点包括喜树碱类药物的10位或20位羟基等。
本发明将E选择素多肽配体、聚乙二醇以及疏水抗肿瘤药物三者有机偶联起来，提供一种线形偶联的新型抗肿瘤药物靶向递送***，该***可通过其结构上的两亲性在水溶液中自组装为纳米胶束，从而通过EPR效应实现被动靶向于肿瘤部位，同时利用E选择素配体将药物主动靶向于肿瘤新生血管，因为E选择素特异性的高表达于肿瘤新生血管内皮细胞。另一方面偶联物到达肿瘤部位后，本发明所设计的连接桥可被肿瘤细胞微环境中高浓度的谷胱甘肽(GSH)切断，释放出原药从而杀伤肿瘤新生血管内皮细胞和临近的肿瘤细胞，而E选择素配体还可通过与肿瘤细胞竞争结合E选择素从而阻断或抑制肿瘤细胞的迁移。
一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物，所述三元偶联物为E选择素多肽配体-聚乙二醇-抗肿瘤药物的线形偶联，其中E选择素多肽配体为IELLQAR、 IDLMQAR、DITWDQLWDLMK、DITWDELWKIMN、RNMSWLELWEHMK、 DLWDWVVGKPAG及他们的反序肽、D型肽等，所述抗肿瘤药物包括：喜树碱、羟基喜树碱或SN-38，PEG-E选择素肽配体的偶联物与喜树碱类抗肿瘤药物的偶联位点包括喜树碱类药物的10位或20位羟基。
目标偶联物I的结构示意式：
在I的一些实施方式中，所述制备方法包括以下步骤：
化合物1的合成
取2,2'-二硫二吡啶9.3g(42.2mmol)溶于20ml二氯甲烷，再量取1.23ml(14.1mmol)巯基丙酸，将其溶于60ml的二氯甲烷，冰浴下(0℃)缓慢滴加到2,2'- 二硫二吡啶溶液中。滴加完后，体系用二氯甲烷稀释，加水萃取有机相8次，保留有机相，用饱和NaCl溶液洗涤一次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷，用200-300 目硅胶柱层析纯化，极性依次为石油醚：乙酸乙酯＝3：1，100％乙酸乙酯，得2.1g白色晶体，产率69％。
化合物2的合成
称0.756g(2mmol)10-羟基喜树碱溶于20mLN，N-二甲基甲酰胺中，依次加入 0.67g(3mmol)化合物ZTL-A149-28，0.431g(3mmol)DMAP(4-二甲氨基吡啶)， 0.904mL(5mmol)DIEA(N，N-二异丙基乙胺)，称取0.796g(4mmol)EDCI(1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)溶于20mL无水二氯甲烷中，将其冰浴下 (0℃)滴加到体系中，室温搅拌2h。二氯甲烷稀释体系，加饱和氯化铵溶液萃取3 次，收集有机相，再加饱和碳酸氢钠溶液萃取3次，收集有机相，有机相用用饱和 NaCl溶液洗涤一次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用二氯甲烷：甲醇＝90：1，200-300 目硅胶柱层析纯化，浓缩后用石油醚重结晶，得0.672g白色粉末，产率58％。
化合物3的合成
取15g(7.5mmol，1eq)PEG2000溶于50ml二氯甲烷，搅拌下加入12mL(90mmol，12eq)三乙胺，冰浴下加入7.05g(37.5mmol，5eq)对甲基苯磺酰氯，氩气保护，室温搅拌，TLC检测，5h反应完全。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，用饱和氯化铵洗涤3次，饱和氯化钠洗涤1次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷，***重结晶并反复洗涤，得化合物1白色固体粉末13g，产率75％。
化合物4的合成
将13g(5.6mmol，1eq)化合物3溶于60mLDMF(N,N-二甲基甲酰胺)中，冰浴搅拌下缓慢加入2.9g(44.8mmol，8eq)叠氮钠固体，氩气保护，将体系置于60℃油浴搅拌，24h后反应完全。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，用水洗涤3次，除去过量叠氮钠，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷，***重结晶并反复洗涤，得化合物2白色固体粉末10g，产率87％。
化合物5的合成
将10g(4.9mmol，1eq)化合物4溶于80ml THF(四氢呋喃)中，加入10mL 水，冰浴搅拌下缓慢加入5.12g(19.6mmol，4eq)三苯基膦，氩气保护，将体系置于45℃油浴，搅拌过夜(12h)。TLC检测，反应完全。加水稀释反应混合物，EA(乙酸乙酯)洗涤水相3次，再用二氯甲烷萃取水相7次，无水硫酸钠干燥有机相，减压旋干二氯甲烷，***重结晶并反复洗涤，得化合物3白色固体粉末7.8g，产率80％。
化合物6的合成
将7.8g(3.9mmol，1eq)化合物5溶于30ml二氯甲烷，搅拌下加入2.8mL (19.5mmol，5eq)三乙胺，异丙醇浴(冷阱-20℃)下，将1.137g(5.1mmol，1.3eq) 二碳酸二叔丁酯，加入到体系，氩气保护，-20℃搅拌反应，TLC检测，当15min时产物浓度达到最大，加入2.8mL二乙胺继续搅拌5min后撤去低温，室温5min，猝灭过量的二碳酸二叔丁酯。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，用饱和氯化铵洗涤3次，饱和氯化钠洗涤1次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷。用200-300目硅胶柱层析纯化，二氯甲烷：甲醇＝70：1，逐渐加大极性到10：1，除去溶剂浓缩产物，在用***重结晶，得到化合物4白色固体粉末2.5g，产率30％。
化合物7的合成
将2.5g(1.2mmol，1eq)化合物6溶于15mL无水二氯甲烷，依次加入1.059g(3.6mmol，3eq)化合物7b，146mg(1.2mmol，1eq)DAMP,0.6mL(3.6mmol， 3eq)DIEA(N,N-二异丙基乙胺)，搅拌溶解，再取0.683g(3.6mmol，3eq)EDCI 溶于10ml无水二氯甲烷，冰浴(0℃)搅拌下，将EDCI悬浊液缓慢滴入反应体系，撤去冰浴，氩气保护，室温搅拌，TLC检测，1.5h反应完全。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，用饱和氯化铵洗涤3次，饱和氯化钠洗涤1次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷，无需进一步纯化直接进行下一步。
化合物8的合成
将前一步所得的化合物7a粗品溶于10mL二氯甲烷，异丙醇浴(冷阱-20℃)下，将10ml三氟乙酸，缓慢滴入体系(50％TFA/DCM)，搅拌30min后撤去低温，继续室温搅拌，TLC检测，30min反应完全。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，并将体系转移至250ml锥形瓶，冰浴并剧烈搅拌下加入饱和碳酸氢钠溶液调节PH至中性。收集有机相，无水硫酸钠干燥，用200-300目硅胶柱层析纯化，首先用100％乙酸乙酯除去PEG以外的小分子物质，再换用二氯甲烷：甲醇体系40：1→10：1，收集产物，减压旋干，再用***重结晶，得化合物8纯品，白色固体粉末2.3g，产率84％。
化合物9的合成
将2.3g(1mmol，1eq)化合物8溶于10mL无水二氯甲烷，依次加入1.057g (3mmol，3eq)3-(三苯甲硫基)丙酸，123mg(1mmol，1eq)DAMP,0.7mL(4mmol， 4eq)DIEA(N,N-二异丙基乙胺)，搅拌溶解，再取0.581g(3mmol，3eq)EDCI溶于10mL无水二氯甲烷，冰浴(0℃)搅拌下，将EDCI悬浊液缓慢滴入反应体系，撤去冰浴，氩气保护，室温搅拌，TLC检测，1h反应完全。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，用饱和氯化铵洗涤3次，饱和氯化钠洗涤1次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷，无需进一步纯化直接进行下一步。
化合物10的合成
将前一步所得的化合物9粗品溶于14mL二氯甲烷，异丙醇浴(冷阱-20℃)下，将6ml哌啶缓慢滴入体系(30％Pip/DCM)，滴加完后，撤去低温，室温搅拌，TLC 检测，1h反应完全。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，用饱和氯化铵洗涤3次，饱和氯化钠洗涤1次，无水硫酸钠干燥有机相，减压旋干二氯甲烷，用200-300目硅胶柱层析纯化，首先用100％乙酸乙酯除去PEG以外的小分子物质，再换用二氯甲烷：甲醇体系30：1→10：1收集产物，减压旋干，再用***重结晶，得化合物8纯品，白色固体粉末1.9g，产率77％。
化合物13的合成
称取1.1g(0.45mmol)化合物10，0.172g(0.45mmol)HBTu，61mg(0.45mmol) HoBT置于反应瓶中，用4mLDMF溶解。然后称取0.82g(0.11mmol)干燥的化合物11，加入到体系中，充分摇匀。搅拌条件下，将0.1ml(0.55mmol)DIEA缓慢滴入体系，然后置33℃油浴搅拌反应3h，用茚三酮法定性检测来监测反应进程，若树脂颗粒再无蓝色出现，结束反应。依次用DMF、异丙醇、DMF洗涤，每次洗涤置摇床振摇5min，最后抽干，得到干燥的化合物14。
化合物14的合成
配制10mL裂解液，苯酚/乙二硫醇/苯甲硫醚/水/三氟乙酸(5/5/2.5/5/82.5，体积比)。将上述干燥的化合物13全部溶于10ml裂解液，然后置33℃油浴搅拌反应3h，将裂解液缓慢过滤到冷***中，见白色絮状物析出，将冷***溶液放置冰箱冷藏2h；将***溶液倒入离心管中离心，倒去上清液，沉淀用***洗涤多次，然后用氩气吹干固体，得白色粘性固体60mg，即化合物15。
化合物15的合成
精确称取52mg(0.092mmol)化合物2置于反应瓶中，用1mLTHF溶解。再称取60mg(0.019mmol)化合物15溶于4mL 50％THF/MeOH，然后低温(冷阱-20℃) 搅拌下，缓慢逐滴滴入至体系，低温(冷阱-20℃)搅拌1h后，移至室温搅拌，HPLC 检测反应进程。2h后，将体系减压旋干，用乙酸乙酯将黏在瓶壁上的混合物洗至离心管，超声处理，然后离心，倒出上清液，乙酸乙酯反复洗涤10次，然后加水溶解，冻干，得固体30mg，产率44％。
15的另一条合成路线中的一些实施方式如下式：其中中间体10的制备有所不同。
试剂：(a)TsCl,TEA,DCM；(b)NaN3,DMF；(c)PPh3,H2O,THF；(d)EDCI,DMAP,DIEA,DCM； (e)Succinic anhydride,DMAP,DIEA,MeCN
化合物18的合成
称取1.439g EDCI(7.5mmol，3eq)溶于20mL二氯甲烷，冰浴下将1.654mLDIEA(10mmol，4eq)滴入体系，搅拌5min，然后依次加入0.306g DMAP(2.5mmol，1eq) 和5g化合物5(2.5mmol，1eq)，然后称取0.959g 3-(三苯甲硫基)丙酸(2.75mmol， 1.1eq)溶于20mLDCM，冰浴下将其缓慢滴入上述体系，室温搅拌，TLC检测，2h 后反应完全，DCM稀释体系，饱和氯化铵溶液洗涤有机相3次，饱和氯化钠洗涤1 次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷。用200-300目硅胶柱层析纯化，再用***重结晶，得到化合物18白色固体粉末2g，产率34％。
化合物10的合成
称取2g化合物18(0.86mmol，1eq)溶于10mLMeCN，再加入0.215g丁二酸酐(2.15mmol，2.5eq)和53mg DMAP(0.43mmol，0.5eq)，最后滴加0.43ml DIEA (2.58mmol，3eq)，将体系置于60℃油浴搅拌，2h反应完全。DCM稀释体系，饱和氯化铵溶液洗涤有机相3次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷，***重结晶，得到固体1.7g，产率76％。
在II的一些实施方式中，所述制备方法包括以下步骤：
试剂：(a)TEMO,KBr,NaClO,H2O；(b)EDCI,DMAP,DIEA,DCM；(c)TrtCl,TFA；
试剂：(a)DMF,HBTu,HoBT,DIEA；(b)TFA,Phenol,1,2-Ethanedithiol,Thioanisole,H2O； (c)DCM；
化合物19的合成
称取20g聚乙二醇2000溶于70mLH2O,置于冰浴下搅拌，精密称取0.02g TEMPO (2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物)和0.44g溴化钾依次加入体系，然后将96mL浓度8％的次氯酸钠溶液缓慢加入到体系。用0.5mol/L的氢氧化钠溶液调节体系pH到10，并在2h内适时调节pH，直至pH稳定在10左右，然后撤去低温，转至室温搅拌。TLC 检测，6h后反应完全，向体系中加入7mL乙醇猝灭反应，然后用4mol/L调节体系 pH至3。用二氯甲烷反复萃取水相8次，无水硫酸钠干燥有机相，减压旋干二氯甲烷，再用***重结晶，得到白色固体粉末17.8g，产率88％。
化合物20的合成
称取1.439g EDCI(7.5mmol，3eq)溶于10ml二氯甲烷，冰浴下将1.654mL DIEA(10mmol，4eq)滴入体系，搅拌5min，然后依次加入0.306g DMAP(2.5mmol，1eq) 和5g化合物19a(2.5mmol，1eq)，然后称取0.944g化合物19b(3mmol，1.2eq) 溶于10mL DCM，冰浴下将其缓慢滴入上述体系，滴加完毕撤去冰浴，室温搅拌。 TLC检测，2h后反应完全，DCM稀释体系，饱和氯化铵溶液洗涤有机相3次，饱和氯化钠洗涤1次，无水硫酸钠干燥，减压旋干二氯甲烷。用200-300目硅胶柱层析纯化，再用***重结晶，得到化合物4c白色固体粉末2.2g，产率38％。
化合物21的合成
称取1g(0.41mmol)化合物化合物20，0.1156g(0.41mmol)HBTu，56mg (0.41mmol)HoBT置于反应瓶中，用4mLDMF溶解。然后称取0.673g(0.11mmol) 干燥的化合物11，加入到体系中，充分摇匀。搅拌条件下，将0.07mL(0.41mmol) DIEA缓慢滴入体系，然后置33℃油浴搅拌反应3h，用茚三酮法定性检测来监测反应进程，若树脂颗粒再无蓝色出现，结束反应。依次用DMF、异丙醇、DMF洗涤，每次洗涤置摇床振摇5min，最后抽干。
化合物22的合成
配制10mL裂解液，苯酚/乙二硫醇/苯甲硫醚/水/三氟乙酸(5/5/2.5/5/82.5，体积比)。将上述干燥的化合物11全部溶于10mL裂解液，然后置33℃油浴搅拌反应3h，将裂解液缓慢过滤到冷***中，见白色絮状物析出，将冷***溶液放置冰箱冷藏2h；将***溶液倒入离心管中离心，倒去上清液，沉淀用***洗涤多次，然后用氩气吹干固体，得白色粘性固体35mg，即化合物22。
化合物23的合成
精确称取31mg(0.055mmol)化合物2置于反应瓶中，用1mLTHF溶解。再称取40mg(0.014mmol)化合物22溶于2mL 50％THF/MeOH，然后低温(冷阱-20℃) 搅拌下，缓慢逐滴滴入至体系，低温(冷阱-20℃)搅拌1h后，移至室温搅拌，HPLC 检测反应进程。4h后，将体系减压旋干，用乙酸乙酯将黏在瓶壁上的混合物洗至离心管，超声处理，然后离心，倒出上清液，乙酸乙酯反复洗涤10次，然后加水溶解，冻干，得固体30mg，产率44％。
化合物I和II的体外抗肿瘤活性结果如表1所示。
表1体外抗肿瘤活性
表1结果表明，该类偶联物具有与HCPT相当的活性，抗肿瘤效果明显。

Claims (9)

1.一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物，其特征在于：结构式如下
其中，PP为E选择素多肽配体；m＝4-1200，n＝1-3，R选自烷基，烷氧基，或者芳基。
2.一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物，其特征在于：结构式如下
其中，PP为E选择素多肽配体；m＝4-1200，n＝1-3，R选自烷基，烷氧基，或者芳基。
3.一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
其中，PP为E选择素多肽配体，R选自烷基，烷氧基，或者芳基。
4.一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物的中间体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
其中，PP为E选择素多肽配体；m＝4-1200。
5.一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物的中间体的制备，其特征在于：包括以下步骤：
其中，PP为E选择素多肽配体；m＝4-1200。
6.一种E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
其中，PP为E选择素多肽配体，m＝4-1200，n＝1-3，R选自烷基，烷氧基，或者芳基。
7.根据权利要求3-6之一所述的制备方法，其特征在于：其中PEG分子量从300～50000，所述PP可为IELLQAR、IDLMQAR、DITWDQLWDLMK、DITWDELWKIMN、RNMSWLELWEHMK、DLWDWVVGKPAG，所述抗肿瘤药物包括：喜树碱、羟基喜树碱、SN-38等疏水性药物，R选自烷基，烷氧基，或者芳基，PEG-E选择素肽配体的偶联物与喜树碱类抗肿瘤药物的偶联位点包括喜树碱类药物的10位或20位羟基等。
8.权利要求1或2所述的E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物作为靶向药物递送***的应用。
9.权利要求1或2所述的E选择素靶向的聚乙二醇两端双修饰抗肿瘤药物作为制备治疗或抑制肿瘤转移的药物的应用。
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