CN107778353B

CN107778353B - 一种合成特利加压素的方法

Info

Publication number: CN107778353B
Application number: CN201610728835.8A
Authority: CN
Inventors: 黄璜; 郭德文; 曾德志; 文永均
Original assignee: Chengdu Shengnuo Biopharm Co ltd
Current assignee: Chengdu Shengnuo Biopharm Co ltd
Priority date: 2016-08-25
Filing date: 2016-08-25
Publication date: 2021-04-20
Anticipated expiration: 2036-08-25
Also published as: CN107778353A

Abstract

本发明涉及医药合成领域，公开了一种合成特利加压素的方法。本发明采用全新的MOBHA树脂进行特利加压素的合成，同时调整了分子内环化的时机，相比现有的Rink Amide系列树脂成本更低，获得的纯品总收率得到显著提高，并且整个方法简单易操作，条件温和，适合工业化生产。

Description

一种合成特利加压素的方法

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种合成特利加压素的方法。

背景技术

特利加压素(Terlipressin)为赖加压素衍生物，具有增加胃肠血管收缩的作用，表现为减少内脏血流，而血压和心率只有微小变化。与赖加压素相比，本品更偏重于减少内脏血流，并且作用时间更长，静脉给药后，门静脉压力降低表明了本品对肠道毛细血管床的收缩作用。

在临床应用中，一项双盲研究表明，醋酸特利加压素可明显降低输血需求量，与安慰剂相比，输血需求量比安慰剂组低约40％。在12小时内止血率为70.7％，而安慰剂组为46.5％。

醋酸特利加压素明显优于血管加压素，在一项多中心临床研究中，醋酸特利加压素70％的患者出血终止，加压素为9％，输血需求量也低于加压素组。

醋酸特利加压素也明显优于生长抑素和奥曲肽，在一项多中心临床研究中，从集中评价结果可知，与生长抑素和奥曲肽不同，醋酸特利加压素能明显降低食管静脉曲张出血的死亡率。

醋酸特利加压素联合硬化治疗优于与单独硬化治疗，在一项596例肝硬化静脉曲张出血病人的多中心临床研究中，使用联合治疗97％的患者出血终止，明显优于与单独硬化治疗，不仅能有效控制出血，而且可降低再出血的可能性。

由于醋酸特利加压素的疗效优于血管加压素、奥曲肽、生长抑素，因而在第二届Baveno国际统一会议将其作为治疗急性静脉曲张出血的首选药物。

现有专利CN105367627A公开了一种特利加压素的制备方法，其整个过程大致为，先合成3-12位的肽树脂，最后与1-2片段进行偶联，再酸解，酸解试剂为含15-20％EDT等清除剂/TFA溶液，最后进行氧化环化得到粗品。粗品经纯化转盐后获得成品，记载的总收率为71％，载体数脂为常规的Rink Amide系列树脂。但是，根据该专利实施例中记载的数据可知，投料20mmol，产品理论量应为24.5g，由于粗品中含有保护剂和清除剂，粗品理论含肽量在20-50％之间，不可能超过50％，按中间值30％计算，粗品总量应在80g左右，而该专利只得到了25.7g粗品，而25.7g粗品的最大理论产品量只有12.8g，不可能得到到17.4g产品，故根据计算得出的总收率应该无法达到70％。而根据当前已公开的一些特利加压素的专利技术，总收率基本处于50-55％。

中国专利CN105418736A公开了一种固液结合制备特利加压素的方法，其先合成4-12位的肽树脂，再进行碘氧环化，接着与液相合成的1-3片段进行偶联，最后酸解，酸解试剂为含1-5％苯甲醚等清除剂/TFA溶液，载体数脂也为常规的Rink Amide系列树脂。虽然该专利并未记载最终的总收率，但是根据其实施例公开的投料量可以计算得出，其纯化后的总收率约为55％左右，和当前整体特利加压素的总收率相当。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种合成特利加压素的方法，使得本发明所述方法具有较高的纯度和总收率。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种合成特利加压素的方法，包括以下步骤：

步骤1、在缩合试剂和活化试剂的作用下，以式1所示树脂为固相载体，按照特利加压素线性肽C端到N端的氨基酸顺序，依次将保护的Gly、保护的Lys、保护的Pro、保护的Cys、保护的Asn、保护的Gln、保护的Phe、保护的Tyr、保护的Cys逐一偶联合成肽树脂1；

步骤2、在缩合试剂和活化试剂的作用下，将保护的Gly-Gly-Gly与肽树脂1偶联，获得肽树脂2；

步骤3、将肽树脂2进行分子内环化，通过二硫键连接两个Cys，获得特利加压素肽树脂；

步骤4、特利加压素树脂经酸解剂酸解后得特利加压素粗品，

步骤5、特利加压素粗品纯化转盐后得特利加压素纯品；

其中，式1左侧圆球表示聚苯乙烯树脂，属于氨基树脂。

特利加压素线性肽主链氨基酸有8个，组成如下：

Gly¹-Gly²-Gly³-[Cys⁴-Tyr⁵-Phe⁶-Gln⁷-Asn⁸-Cys]⁹-Pro¹⁰-Lys¹¹-Gly¹²-NH₂

其中，特利加压素中C端的氨基为采用酸解剂从氨基树脂上裂解下来的氨基，其并不属于氨基酸上的氨基。

传统特利加压素合成过程中，一般都是采用常规的Rink Amide系列树脂，本发明在原有的MBHA树脂上进行改进，提供出一种全新的载体树脂MOBHA树脂，即式1所示树脂，本发明经过合成特利加压素发现，该树脂不仅在成本上低于Rink Amide系列树脂，而且合成后的特利加压素纯品总收率可达到75％以上，弥补了现有合成工艺普遍在50-55％总收率的缺陷。

本发明所述式1树脂可购自西安蓝晓科技新材料股份有限公司。

MBHA树脂的结构式如下，左侧的圆球表示聚苯乙烯树脂：

本发明所述保护基是在氨基酸合成领域需要保护氨基酸主链以及侧链上氨基、羧基等干扰合成的基团的保护基团，防止氨基、羧基等在制备目标产物过程中发生反应，生成杂质，如本发明通过Boc保护基保护Lys的侧链，通过tBu保护基保护Tyr的侧链；通过Trt保护基保护Asn或Gln的侧链，通过Trt或Acm保护Cys的侧链。此外，在本发明所述方法涉及的保护的氨基酸中，N端优选通过Fmoc或Boc保护基进行保护。被保护基保护的氨基酸统称为保护的氨基酸(如保护的D-Gly等)。作为优选，作为优选，所述保护的Gly、保护的Lys、保护的Pro、保护的Cys、保护的Asn、保护的Gln、保护的Phe、保护的Tyr、保护的Gly-Gly-Gly为：

Fomc-Gly或Boc-Gly、Fmoc-Lys(Boc)、Fmoc-Pro、Fmoc-Asn(Trt)、Fmoc-Gln(Trt)、Fmoc-Phe、Fmoc-Tyr(tBu)、Fmoc-Cys(Trt)或Fmoc-Cys(Acm)、Fomc-Gly-Gly-Gly或Boc-Gly-Gly-Gly。

作为优选，上述各保护氨基酸在各自偶联到式1树脂或已合成的肽树脂上时，分别与式1树脂中氨基的摩尔比为1-6:1，更优选为2.5-3.5:1，即所述保护氨基酸的投料量与式1树脂氨基的摩尔比例关系。

作为优选，所述式1树脂的取代值为0.2-1.8mmol/g氨基树脂，更优选为0.5-1.0mmol/g氨基树脂。

作为优选，所述缩合试剂优选为N,N-二异丙基碳二亚胺(DIC)、N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)，六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基磷/有机碱(PyBOP/有机碱)、2-(7-氮杂-1H-苯并三氮唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯/有机碱(HATU/有机碱)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/有机碱(HBTU/有机碱)、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯/有机碱(TBTU/有机碱)中的一种。所述缩合试剂的摩尔用量优选为式1树脂或已合成的肽树脂中式1树脂的氨基总摩尔数的1～6倍，更优选为2.5～3.5倍。

需要说明的是，所述PyBOP/有机碱、HATU/有机碱、HBTU/有机碱、TBTU/有机碱，在本发明中属于四种双体系的缩合试剂，即PyBOP、HATU、HBTU在使用时需要分别和有机碱组合在一起成为一种缩合试剂使用，其中所述有机碱和PyBOP、HATU、HBTU、TBTU的摩尔比优选为为1.3-3.0:1，更优选为1.3-2:1。

作为优选，所述缩合试剂中的有机碱优选为N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)、三乙胺(TEA)或N-甲基***啉(NMM),更优选为DIPEA。

作为优选，所述活化试剂为1-羟基苯并***(HOBt)或N-羟基-7-氮杂苯并三氮唑(HOAt)。所述活化试剂的用量优选为氨基树脂或已合成的肽树脂中氨基树脂的中氨基总摩尔数的1～6倍，更优选为2.5～3.5倍。

作为优选，合成过程中所述各反应的反应溶剂均采用DMF。

本发明所述逐一偶联是指在第一个氨基酸与式1树脂偶联后，剩余氨基酸按照特利加压素线性肽主链氨基酸的C端到N端的顺序逐个和前一个偶联的氨基酸发生缩合反应(主链氨基和羧基的缩合反应)进行偶联。本发明偶联时，每次偶联时所述保护氨基酸和对应肽树脂的摩尔比优选为1-6:1，更优选为2.5-3.5:1；所述偶联反应时间优选为60～300分钟，更优选为120～180分钟。需要说明的是，本发明所述肽树脂指任意个数氨基酸按照特利加压素线性肽主链氨基酸顺序和式1树脂相连接形成的肽树脂，这其中不仅包括肽树脂1-2还包括在合成肽树脂1过程中得到的多个肽树脂。所述对应的肽树脂是指保护的Gly和式1树脂偶联形成的肽树脂3、肽树脂3就是保护的Lys进行偶联的对应肽树脂，偶联了保护的Lys的肽树脂是保护的Pro进行延伸偶联时对应的肽树脂，以此类推、剩余保护的氨基酸分别和其上一个保护氨基酸偶联后的肽树脂形成偶联时的对应关系。

在延伸偶联中，由于每个氨基酸N端都有保护基，因此需要先脱除N端保护基再偶联，这对本领域技术人员来说是公知常识。本发明优选用PIP/DMF(哌啶/N,N-二甲基甲酰胺)混合溶液脱除N端Fomc保护基，混合溶液中含哌啶为10～30％(V)，其余为DMF。去N端保护基时间优选为10～60分钟，优选的为15～25分钟。去N端保护基试剂的用量优选为每10mL/g肽树脂；本发明优选用TFA/DCM(三氟醋酸/二氯甲烷)混合溶液脱除N端Boc保护基，混合溶液中含三氟醋酸为20～60％(V/V)，优选为25～35％(V/V)，去N端保护基时间优选为10～50分钟，优选的为25～35分钟，去N端保护基试剂的用量优选为10mL/克肽树脂。

作为优选，本发明所述分子内环化采用碘氧化法进行环化。可将5％I₂/DMF(碘/N,N-二甲基甲酰胺)溶液加入到肽树脂2中进行环化。

作为优选，所述酸解剂为溴化氢的三氟醋酸溶液，配合本发明式1树脂可提高裂解收率，促进总收率的提高。更优选地，所述溴化氢的三氟醋酸溶液中，溴化氢的质量百分比浓度优选为5～10％wt，更优选浓度为6～7％wt；所述酸解剂的用量为5～15mL酸解剂/克肽树脂，优选酸解剂的用量为7～12mL酸解剂/克肽树脂；所述酸解的时间为1～6小时，优选的为3～4小时。

作为优选，本发明所述乙酰化操作通过Ac₂O与与肽树脂1脱保护的N端氨基反应完成乙酰化。

作为优选，所述纯化转盐具体为：

特利加压素粗品，0.1％TFA/水溶液溶解，溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，纯化备用；

采用高效液相色谱法进行纯化，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，流动相***为0.1％TFA/水溶液-0.1％TFA/乙腈溶液，77mm*250mm的色谱柱流速为90mL/min，采用梯度***洗脱，循环进样纯化，取粗品溶液上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，收集主峰蒸去乙腈后，得特利加压素纯化中间体浓缩液；

取特利加压素纯化中间体浓缩液，用0.45μm滤膜滤过备用；

采用高效液相色谱法进行换盐，流动相***为1％醋酸/水溶液-乙腈，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，77mm*250mm的色谱柱流速为90mL/min，采用梯度洗脱，循环上样方法，上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，采集图谱，观测吸收度的变化，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到特利加压素醋酸水溶液，冷冻干燥，得特利加压素纯品。

由本发明所述方法合成的特利加压素经HPLC检测，粗品纯度大于85％，产品纯度大于99.5％，最大单一杂质小于0.12％，总收率大于75％。

由以上技术方案可知，本发明采用全新的MOBHA树脂进行特利加压素的合成，同时调整了分子内环化的时机，相比现有的Rink Amide系列树脂成本更低，获得的纯品总收率得到显著提高。

具体实施方式

本发明公开了一种合成特利加压素的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

在本发明具体实施方式中，本发明中的保护氨基酸购自于成都晖蓉生物科技有限公司，所用树脂购自于上虞普尔树脂有限公司，申请文件中所用英文缩写对应的中文含义见表1。

表1英文缩写释义

下面结合实施例，进一步阐述本发明。

实施例1：Fmoc-Gly-MOBHA树脂的合成

取0.15mol Fmoc-Gly和0.15mol HOBt，用适量DMF溶解；另取0.15mol DIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于室温环境中搅拌反应30分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液，备用。

取0.05mol的MOBHA树脂(取代值约0.6mmol/g)，DMF溶胀25分钟，洗涤过滤，加入活化后的Fmoc-Gly溶液，室温搅拌反应3小时，抽掉反应液，DMF洗涤3次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，得到Fmoc-Gly-MOBHA树脂，用20％PIP/DMF溶液去保护25分钟，洗涤过滤得到Gly-MOBHA树脂。

实施例2：Boc-Gly-MOBHA树脂的合成

取0.15mol Boc-Gly和0.15mol HOBt，用适量DMF溶解；另取0.15mol DIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于室温环境中搅拌反应30分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液，备用。

取0.05mol的MOBHA树脂(取代值约0.6mmol/g)，DMF溶胀25分钟，洗涤过滤，加入活化后的Boc-Gly溶液，室温搅拌反应3小时，抽掉反应液，DMF洗涤3次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，得到Boc-Gly-MOBHA树脂，用30％TFA/DCM溶液去保护30分钟，经DIEA/DCM溶液中和，用DMF、DCM洗涤过滤，得到Gly-MOBHA树脂。

实施例3：肽树脂1的合成

取0.15mol Fmoc-Lys(Boc)和0.15mol HOBt，用适量DMF溶解；另取0.15mol DIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于室温环境中搅拌反应30分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液。

将上述活化后的保护氨基酸溶液加入到实施例1制得的Gly-MOBHA树脂，室温搅拌反应3小时，抽掉反应液，DMF洗涤3次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，再用20％PIP/DMF溶液去保护25分钟，洗涤过滤，完成Fmoc-Lys(Boc)的接入。

同法接入Fmoc-Pro、Fmoc-Cys(Trt)、Fmoc-Asn(Trt)、Fmoc-Gln(Trt)、Fmoc-Phe、Fmoc-Tyr(tBu)和Fmoc-Cys(Trt)，再用20％PIP/DMF溶液去保护，洗涤过滤得到得肽树脂1，Cys(Trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Lys(Boc)-Gly-MOBHA树脂,。

实施例4：肽树脂1的合成

将上述活化后的保护氨基酸溶液加入到实施例2制得的Gly-MOBHA树脂，室温搅拌反应3小时，抽掉反应液，DMF洗涤3次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，再用20％PIP/DMF溶液去保护25分钟，洗涤过滤，完成Fmoc-Lys(Boc)的接入。

同法接入Fmoc-Pro、Fmoc-Cys(Trt)、Fmoc-Asn(Trt)、Fmoc-Gln(Trt)、Fmoc-Phe、Fmoc-Tyr(tBu)和Fmoc-Cys(Trt)，再用20％PIP/DMF溶液去保护，洗涤过滤得肽树脂1，Cys(Trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Lys(Boc)-Gly-MOBHA树脂。

实施例5：肽树脂2的合成

取0.15mol Fmoc-Gly-Gly-Gly和0.15mol HOBt，用适量DMF溶解；另取0.15molDIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于室温环境中搅拌反应30分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液。

将上述活化后的保护氨基酸溶液加入到实施例3制得的肽树脂1，室温搅拌反应3小时，抽掉反应液，DMF洗涤3次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，再用20％PIP/DMF溶液去保护25分钟，洗涤过滤，得肽树脂2，Gly-Gly-Gly-Cys(Trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Lys(Boc)-Gly-MOBHA树脂。

实施例6：肽树脂2的合成

取0.15mol Boc-Gly-Gly-Gly和0.15mol HOBt，用适量DMF溶解；另取0.15molDIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于室温环境中搅拌反应30分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液。

将上述活化后的保护氨基酸溶液加入到实施例4制得的肽树脂1，室温搅拌反应3小时，抽掉反应液，DMF洗涤3次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，得到得Boc保护的肽树脂2，Boc-Gly-Gly-Gly-Cys(Trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Lys(Boc)-Gly-MOBHA树脂。

实施例7：特利加压素肽树脂的合成

取5％I₂/DMF溶溶液(10mL/克树脂)，加入到实施例5制得的肽树脂2，40℃搅拌反应4小时，抽掉反应液，DMF洗涤6次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，得特利加压素肽树脂，Gly-Gly-Gly-[Cys-Tyr(tBu)-Phe-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Cys]-Pro-Lys(Boc)-Gly-MOBHA树脂,。

实施例8：特利加压素肽树脂的合成

取5％I₂/DMF溶溶液(10mL/克树脂)，加入到实施例6制得的Boc保护的肽树脂2，40℃搅拌反应4小时，抽掉反应液，DMF洗涤6次后，DCM洗涤3次，每次洗涤时间为3min，得Boc保护的特利加压素肽树脂，Gly-Gly-Gly-[Cys-Tyr(tBu)-Phe-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Cys]-Pro-Lys(Boc)-Gly-MOB HA树脂。

实施例9：特利加压素粗品的制备

取实施例7制得的特利加压素肽树脂，加入8％的HBr/TFA溶液(酸解液10mL/克特利加压素树脂)，搅拌反应6小时，过滤收集滤液，树脂再用少量TFA洗涤3次，合并滤液后减压浓缩，加入无水***沉淀，再用无水***洗沉淀3次，抽干、得类白色粉末即为特利加压素粗品，粗品纯度为86.3％。

实施例10：特利加压素粗品的制备

取实施例8制得的Boc保护的特利加压素肽树脂，加入8％的HBr/TFA溶液(酸解液10mL/克特利加压素树脂)，搅拌反应6小时，过滤收集滤液，树脂再用少量TFA洗涤3次，合并滤液后减压浓缩，加入无水***沉淀，再用无水***洗沉淀3次，抽干、得类白色粉末即为特利加压素粗品，粗品纯度为87.2％。

实施例11：特利加压素粗品纯化

取实施例9所得特利加压素粗品，用20％醋酸溶液溶解，溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，纯化备用；

取特利加压素纯化中间体浓缩液，用0.45μm滤膜滤过备用；

采用高效液相色谱法进行换盐，流动相***为1％醋酸/水溶液-乙腈，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，77mm*250mm的色谱柱流速为90mL/min，采用梯度洗脱，循环上样方法，上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，采集图谱，观测吸收度的变化，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到特利加压素醋酸水溶液，冷冻干燥，得特利加压素纯品46.3g

总收率为75.3％，分子量：1228.6，纯度：99.6％，最大单一杂质0.11％。

实施例12：特利加压素粗品纯化

取实施例10所得特利加压素粗品，用纯化流动相A溶解，溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，纯化备用；

取特利加压素纯化中间体浓缩液，用0.45μm滤膜滤过备用；

采用高效液相色谱法进行换盐，流动相***为1％醋酸/水溶液-乙腈，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，77mm*250mm的色谱柱流速为90mL/min，采用梯度洗脱，循环上样方法，上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，采集图谱，观测吸收度的变化，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到特利加压素醋酸水溶液，冷冻干燥，得特利加压素纯品47.1g。

总收率为76.6％，分子量：1228.4，纯度：99.5％，最大单一杂质0.10％。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种合成特利加压素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤4、特利加压素树脂经酸解剂酸解后得特利加压素粗品，所述酸解剂为溴化氢的三氟醋酸溶液，所述溴化氢的三氟醋酸溶液中溴化氢质量百分比浓度为5-10％；

步骤5、特利加压素粗品纯化转盐后得特利加压素纯品；

其中，式1左侧圆球表示聚苯乙烯树脂。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述保护的Gly、保护的Lys、保护的Pro、保护的Cys、保护的Asn、保护的Gln、保护的Phe、保护的Tyr、保护的Gly-Gly-Gly为：

3.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述各保护的氨基酸投料量与式1所示树脂氨基的摩尔比为1-6:1。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述缩合试剂为N,N-二异丙基碳二亚胺、N,N-二环己基碳二亚胺，六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基磷/有机碱、2-(7-氮杂-1H-苯并三氮唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯/有机碱、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/有机碱、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯/有机碱中的一种。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述有机碱为N,N-二异丙基乙胺、三乙胺或N-甲基***啉。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述活化试剂为1-羟基苯并***或N-羟基-7-氮杂苯并三氮唑。