CN107703237B - 一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法 - Google Patents

一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法 Download PDF

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Abstract

本发明具体涉及一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法。本发明研究发现，在如下条件下：以氨丙基键合硅胶为填充剂的色谱柱为色谱柱，以乙腈：水体积比为85～95：5～15的混合溶液为流动相，柱温为20～40℃，检测波长为205～215nm，流速为0.5～2.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，即可对银杏叶提取物中的红杉醇和松醇的含量实现同时测定，有利于银杏叶提取物的全面质量控制。

Description

一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法
技术领域
本发明属于药物分析领域，具体涉及一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法。
背景技术
银杏(Ginkgo biloba L.)是银杏科银杏属植物，银杏叶是银杏树的干燥叶，性平，味甘、苦、涩，归心、肺经，具有敛肺、平喘、活血化瘀、止痛的功效。以银杏叶为原料，经过提取分离纯化制成的提取物成为银杏叶提取物。研究表明，银杏叶提取物具有降血糖的作用。
红杉醇又名西曲依醇(Sequoyitol)，是肌醇的甲基衍生物中的一种，广泛分布于多种植物中，尤其在云南红豆杉、美国红豆杉、曼地亚红豆杉、以及云南穂花杉等红豆杉科植物中广泛分布。松醇是红杉醇的同分异构体。近年来的研究表明，红杉醇和松醇均有降血糖的作用。现有技术中有文献报道，银杏中含有红杉醇和松醇，如：南京中医药大学硕士学位论文《不同来源银杏叶资源化学研究》(2013年6月)从银杏叶中提取分离得到了红杉醇；Ohmoto等在银杏花粉颗粒中分离到了红杉醇、松醇等等。然而，尚没有关于银杏叶提取物中红杉醇和松醇的含量测定方法的相关报道。
尽管有文献报道：HPLC-ELSD法测定夜关门中D-松醇的含量，但是，由于夜关门和银杏叶所含化学成分的差异，松醇与银杏叶其他化学成分的分离效果较差，导致上述方法并无法用于银杏叶提取物中松醇的含量测定。尽管也有文献报道，HPLC-ELSD法测定红杉醇原料药中的红杉醇的含量，但是由于红杉醇原料药和银杏叶提取物所含化学成分的差异，导致上述方法并无法用于银杏叶提取物中松醇的含量测定。
因此，研究一种够同时测定银杏叶提取物中红杉醇和松醇的含量的方法，对于银杏叶提取物的的全面质量控制具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法。
本发明提供一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
制备银杏叶提取物溶液，作为供试品溶液；
(2)对照品溶液的制备
制备含有松醇的溶液，作为松醇对照品溶液；
制备含有红杉醇的溶液，作为红杉醇对照品溶液；
(3)色谱条件
以氨丙基键合硅胶为填充剂的色谱柱为色谱柱，以乙腈和水的混合溶液为流动相，以蒸发光散射检测器检测；
(4)测定
吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，测定。
优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，以COSMOSIL5NH2-MS为色谱柱，以乙腈:水的体积比为85～95:5～15的混合溶液为流动相。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，所述色谱条件中，流速为0.5～2.5mL/min，柱温为20～40℃，漂移管温度为100～110℃，增益值为0.5～1.5，载气压力为2.0～4.0Bar。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
取银杏叶提取物，加入适量水，制成浓度为1-10mg/mL的银杏叶提取物溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
(2)对照品溶液的制备
取松醇适量，加入适量水，制成浓度为0.5-2.0mg/mL的松醇的溶液，摇匀，滤过，作为松醇对照品溶液；
取红杉醇适量，加入适量水，制成浓度为0.5-2.0mg/mL的红杉醇的溶液，摇匀，滤过，作为红杉醇对照品溶液；
(3)色谱条件
以氨丙基键合硅胶为填充剂的色谱柱为色谱柱，以乙腈：水体积比为85～95：5～15的混合溶液为流动相，柱温为20～40℃，检测波长为205～215nm，流速为0.5～2.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，漂移管温度为100～110℃，增益值为0.5～1.5，载气压力为2.0～4.0Bar；
(4)测定
分别吸取供试品溶液5-10μL、松醇对照品溶液1-10μL和红杉醇对照品溶液1-10μL，注入高效液相色谱仪，测定。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，所述色谱条件中，漂移管温度为105℃，增益值为1，载气压力为3.0Bar。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，以乙腈：水体积比为90.5：9.5的混合溶液为流动相。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，柱温为30℃，流速为1.5mL/min。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，所述银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入5-15倍量的体积浓度为70-95％的乙醇水溶液提取0.5-6.0h，加热回流提取1-5次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.1～0.5倍，低温静置12-120h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入0.5-5.0倍量的水，低温静置46-50h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.1-0.5倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为85-95％的乙醇水溶液使含醇量至70-90％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行1-5次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的0.5-5倍量的水，先用阳离子交换树脂吸附处理1-5次，再用阴离子交换树脂吸附处理1-5次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，
所述阳离子交换树脂吸附处理步骤中，所述阳离子交换树脂选自732型阳离子交换树脂，所述阳离子树脂的用量为银杏叶重量的0.5-3.5倍量；
所述阴离子交换树脂吸附处理步骤中，所述阴离子交换树脂选自711型，所述阴离子树脂的用量为银杏叶重量的0.2-1.0倍量。
进一步优选地，上述同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，所述银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入10倍量的体积浓度为85％的乙醇水溶液提取3.0h，加热回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，低温静置72h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入3.0倍量的水，低温静置48h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为90％的乙醇水溶液使含醇量至80％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行3次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的3倍量的水，先用银杏叶重量的2.0倍量的732型阳离子交换树脂吸附处理3次，再用银杏叶重量的0.6倍量的711型阴离子交换树脂吸附处理3次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物。与现有技术相比，本发明的技术方案具有如下优点：
(1)本发明研究发现，在如下条件下：以氨丙基键合硅胶为填充剂的色谱柱为色谱柱，以乙腈和水的混合溶液为流动相，柱温为20～40℃，流速为0.5～2.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，即可对银杏叶提取物中的红杉醇和松醇的含量实现同时测定，有利于银杏叶提取物的全面质量控制。
(2)本发明进一步研究发现，以COSMOSIL5NH2-MS为色谱柱，以乙腈和水体积比为85～95：5～15的混合溶液为流动相，不仅使得红杉醇和松醇与银杏叶提取物中的其他化学成分可以较好的分离，而且使得红杉醇和松醇可以较好的分离，因此，红杉醇和松醇的含量测定结果更准确。
(3)本发明进一步研究发现，所述色谱条件中，漂移管温度为100～110℃，增益值为0.5～1.5，载气压力为2.0～4.0Bar，可以使得该方法的专属性较强、精密性良好、重复性良好、回收率良好，即：各方法学测试均符合规定。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中：
图1是本发明专属性实验中水的HPLC色谱图；
图2是本发明专属性实验中松醇的HPLC色谱图；
图3是本发明专属性实验中红杉醇的HPLC色谱图；
图4是本发明专属性实验中供试品溶液的HPLC色谱图。
具体实施方式
本发明以下实施例和实验例中，松醇是指D-松醇。
实施例1
本实施例中银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入10倍量的体积浓度为85％的乙醇水溶液提取3.0h，加热回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，低温静置72h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入3.0倍量的水，低温静置48h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为90％的乙醇水溶液使含醇量至80％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行3次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的3倍量的水，先用银杏叶重量的2.0倍量的732型阳离子交换树脂吸附处理3次，再用银杏叶重量的0.6倍量的711型阴离子交换树脂吸附处理3次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物。
实施例2
本实施例中银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入5倍量的体积浓度为95％的乙醇水溶液提取0.5h，加热回流提取5次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.1倍，低温静置120h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入0.5倍量的水，低温静置50h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.1倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为95％的乙醇水溶液使含醇量至90％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行5次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的0.5倍量的水，先用银杏叶重量的3.5倍量的732型阳离子交换树脂吸附处理1次，再用银杏叶重量的1.0倍量的711型阴离子交换树脂吸附处理1次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物。
实施例3
本实施例中银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入15倍量的体积浓度为70％的乙醇水溶液提取6.0h，加热回流提取1次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.5倍，低温静置12h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入5.0倍量的水，低温静置46h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.5倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为85％的乙醇水溶液使含醇量至90％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行1次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的5倍量的水，先用银杏叶重量的0.5倍量的732型阳离子交换树脂吸附处理5次，再用银杏叶重量的0.2倍量的711型阴离子交换树脂吸附处理5次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物。
实施例4
本实施例中银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入8倍量的体积浓度为85％的乙醇水溶液提取3.0h，加热回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，低温静置60h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入3.0倍量的水，低温静置48h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为90％的乙醇水溶液使含醇量至80％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行3次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的3.0倍量的水，先用银杏叶重量的2.5倍量的732型阳离子交换树脂吸附处理4次，再用银杏叶重量的0.5倍量的711型阴离子交换树脂吸附处理4次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物。
实施例5
本实施例同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
取银杏叶提取物，加入适量水，制成浓度为5mg/mL的银杏叶提取物溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
(2)对照品溶液的制备
取松醇适量，加入适量水，制成浓度为1.5mg/mL的松醇的溶液，摇匀，滤过，作为松醇对照品溶液；
取红杉醇适量，加入适量水，制成浓度为0.5mg/mL的红杉醇的溶液，摇匀，滤过，作为红杉醇对照品溶液；
(3)色谱条件
以C18为色谱柱，以氨丙基键合硅胶为填充剂，以COSMOSIL5NH2-MS(250mm*4.6mm)为色谱柱，以乙腈：水体积比为90.5：9.5的混合溶液为流动相，柱温为30℃，流速为1.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，漂移管温度为105℃，增益值为1，载气压力为3.0Bar；
(4)测定
分别吸取供试品溶液8μL、松醇对照品溶液3μL和红杉醇对照品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，测定。
实施例6
本实施例同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
取银杏叶提取物，加入适量水，制成浓度为10mg/mL的银杏叶提取物溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
(2)对照品溶液的制备
取松醇适量，加入适量水，制成浓度为0.5mg/mL的松醇的溶液，摇匀，滤过，作为松醇对照品溶液；
取红杉醇适量，加入适量水，制成浓度为2.0mg/mL的红杉醇的溶液，摇匀，滤过，作为红杉醇对照品溶液；
(3)色谱条件
以C18为色谱柱，以氨丙基键合硅胶为填充剂，以COSMOSIL5NH2-MS(250mm*4.6mm)为色谱柱，以乙腈：水体积比为85：15的混合溶液为流动相，柱温为40℃，检测波长为205nm，流速为2.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，漂移管温度为100℃，增益值为1.5，载气压力为2.0Bar；
(4)测定
分别吸取供试品溶液5μL、松醇对照品溶液10μL和红杉醇对照品溶液1μL，注入高效液相色谱仪，测定。
实施例7
本实施例同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
取银杏叶提取物，加入适量水，制成浓度为2mg/mL的银杏叶提取物溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
(2)对照品溶液的制备
取松醇适量，加入适量水，制成浓度为2.0mg/mL的松醇的溶液，摇匀，滤过，作为松醇对照品溶液；
取红杉醇适量，加入适量水，制成浓度为0.5mg/mL的红杉醇的溶液，摇匀，滤过，作为红杉醇对照品溶液；
(3)色谱条件
以C18为色谱柱，以氨丙基键合硅胶为填充剂，以COSMOSIL5NH2-MS(250mm*4.6mm)为色谱柱，以乙腈：水体积比为95：5的混合溶液为流动相，柱温为20℃，检测波长为215nm，流速为0.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，漂移管温度为110℃，增益值为0.5，载气压力为4.0Bar；
(4)测定
分别吸取供试品溶液10μL、松醇对照品溶液1μL和红杉醇对照品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，测定。
实施例8
本实施例同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
取银杏叶提取物，加入适量水，制成浓度为1mg/mL的银杏叶提取物溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
(2)对照品溶液的制备
取松醇适量，加入适量水，制成浓度为1.0mg/mL的松醇的溶液，摇匀，滤过，作为松醇对照品溶液；
取红杉醇适量，加入适量水，制成浓度为1.0mg/mL的红杉醇的溶液，摇匀，滤过，作为红杉醇对照品溶液；
(3)色谱条件
以C18为色谱柱，以氨丙基键合硅胶为填充剂，以COSMOSIL5NH2-MS(250mm*4.6mm)为色谱柱，以乙腈：水体积比为90：10的混合溶液为流动相，柱温为35℃，流速为1.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，漂移管温度为105℃，增益值为1.0，载气压力为3.5Bar；
(4)测定
分别吸取供试品溶液5μL、松醇对照品溶液5μL和红杉醇对照品溶液5μL，注入高效液相色谱仪，测定。
实验例1方法学验证
1、实验目的
对实施例5的方法进行方法学验证。
2、实验方法
2.1专属性实验
分别取松醇对照品、红杉醇对照品适量，精密称定，加水分别制成每1mL中含松醇1.5mg的溶液、每1mL中含红杉醇0.5mg的溶液，摇匀，滤过，做为定位用对照品溶液。
分别精密吸取对照品溶液5μL、定位用对照品溶液5μL，供试品溶液5μL，水5μL(做为空白)注入液相色谱仪，测定。
具体实验结果如图1-4所示。由图1-4可知，供试品中的各色谱峰均完全分离，***无干扰，表明本法专属性较强。
2.2线性范围考察实验
分别精密吸取松醇对照品溶液2μL、3μL、5μL、7μL、10μL、15μL进样测定。以松醇对照品的进样质量的对数为横坐标、以峰面积对数为纵坐标，绘制松醇标准曲线。松醇标准曲线方程为lgY＝1.663lgX+2.475(R2＝0.998)，松醇进样质量在3.02-22.65μg范围内线性良好。
分别精密吸取红杉醇对照品溶液2μL、3μL、5μL、7μL、10μL、15μL进样测定。以红杉醇对照品进样质量对数为横坐标、以峰面积对数为纵坐标，绘制红杉醇标准曲线。红杉醇标准曲线方程为lgY＝1.493lgX+2.805(R2＝0.999)，红杉醇进样质量在0.788-5.91μg范围内线性良好。
2.3精密度实验
以实施例1制备的银杏叶提取物为供试品，按照实施例5的方法分别进样6次，分别记录松醇、红杉醇的峰面积，分别计算其RSD值，具体实验结果如表1-2所示。
表1松醇精密度实验结果
Figure GDA0001479435230000131
表2红杉醇精密度实验结果
Figure GDA0001479435230000132
由表1-2可知，精密度实验中，松醇的RSD为2.37％，红杉醇的RSD为1.99％，表明该方法的精密度良好。
2.4重复性实验
以实施例1制备的银杏叶提取物为供试品，按照实施例5的方法测定，计算松醇、红杉醇含量，并计算RSD值，具体实验结果如表3-4所示。
表3松醇重复性实验结果
Figure GDA0001479435230000133
表4红杉醇重复性实验结果
Figure GDA0001479435230000134
Figure GDA0001479435230000141
由表3-4可知，重复性实验中，松醇的RSD为2.27％，红杉醇的RSD为1.14％，表明该方法重复性良好。
2.5回收率实验
分别取松醇对照品4mg、杉醇对照品1.5mg置5mL量瓶中，精密称定，精密加入已知含量的实施例1制备的银杏叶提取物的注射液(松醇的含量为1.434mg/mL，红杉醇的含量为0.562g/mL)2.5mL，超声，使溶解，加水至刻度，摇匀，即得，平行制备6份。按照实施例5的方法进行含量测定，计算回收率。具体实验结果如表5-6所示。
表5松醇回收率实验结果
Figure GDA0001479435230000142
表6红杉醇回收率实验结果
Figure GDA0001479435230000143
由表5-6可知，回收率实验中，松醇的RSD为4.01％，红杉醇的RSD为4.74％，表明该方法回收率良好。
3、实验结论
通过上述方法学考察内容，其实验数据表明本发明提供的方法符合检测目的和要求，够用于银杏叶提取物及含有松醇和红杉醇的药品在生产制造过程中样品的分析检测。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (7)

1.一种同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入5-15倍量的体积浓度为70-95％的乙醇水溶液提取0.5-6.0h，加热回流提取1-5次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.1～0.5倍，低温静置12-120h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入0.5-5.0倍量的水，低温静置46-50h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.1-0.5倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为85-95％的乙醇水溶液使含醇量至70-90％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行1-5次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的0.5-5倍量的水，先用阳离子交换树脂吸附处理1-5次，再用阴离子交换树脂吸附处理1-5次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物；
取银杏叶提取物，加入适量水，制成浓度为1-10mg/mL的银杏叶提取物溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
(2)对照品溶液的制备
取松醇适量，加入适量水，制成浓度为0.5-2.0mg/mL的松醇的溶液，摇匀，滤过，作为松醇对照品溶液；
取红杉醇适量，加入适量水，制成浓度为0.5-2.0mg/mL的红杉醇的溶液，摇匀，滤过，作为红杉醇对照品溶液；
(3)色谱条件
以氨丙基键合硅胶为填充剂的色谱柱为色谱柱，以乙腈：水体积比为85～95：5～15的混合溶液为流动相，柱温为20～40℃，检测波长为205～215nm，流速为0.5～2.5mL/min，以蒸发光散射检测器检测，漂移管温度为100～110℃，增益值为0.5～1.5，载气压力为2.0～4.0Bar；
(4)测定 吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，测定。
2.根据权利要求1所述的同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，其特征在于，
在步骤（4）中，分别吸取供试品溶液5-10μL、松醇对照品溶液1-10μL和红杉醇对照品溶液1-10μL，注入高效液相色谱仪，测定。
3.根据权利要求1或2所述的同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，其特征在于，所述色谱条件中，漂移管温度为105℃，增益值为1，载气压力为3.0Bar。
4.根据权利要求1或2所述的同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，其特征在于，以乙腈：水体积比为90.5：9.5的混合溶液为流动相。
5.根据权利要求1或2所述的同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，其特征在于，柱温为30℃，流速为1.5mL/min。
6.根据权利要求1所述的同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，其特征在于，
所述阳离子交换树脂吸附处理步骤中，所述阳离子交换树脂选自732型阳离子交换树脂，所述阳离子树脂的用量为银杏叶重量的0.5-3.5倍量；
所述阴离子交换树脂吸附处理步骤中，所述阴离子交换树脂选自711型，所述阴离子树脂的用量为银杏叶重量的0.2-1.0倍量。
7.根据权利要求1或6所述的同时测定银杏叶提取物中松醇和红杉醇的含量的方法，其特征在于，所述银杏叶提取物的制备方法包括以下步骤：
醇提：取银杏叶，以银杏叶重量计，每次加入10倍量的体积浓度为85％的乙醇水溶液提取3.0h，加热回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，低温静置72h，去除上层浮油，取下层液，得溶液A；
水沉：以银杏叶重量计，向溶液A中加入3.0倍量的水，低温静置48h，过滤，滤液浓缩至银杏叶重量的0.3倍，放至室温，得溶液B；
醇沉：向溶液B中加入体积浓度为90％的乙醇水溶液使含醇量至80％，将醇沉后的溶液依次进行低温静置、过滤和滤液浓缩并重复进行3次，得溶液C；
离子交换树脂吸附：向溶液C加入银杏叶重量的3倍量的水，先用银杏叶重量的2.0倍量的732型阳离子交换树脂吸附处理3次，再用银杏叶重量的0.6倍量的711型阴离子交换树脂吸附处理3次，收集洗脱液，浓缩，得银杏叶提取物。
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