CN107495394A - 一种蒸汽***改性与酶解耦合提取花生膳食纤维的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了农副产品深加工领域的一种蒸汽***改性与酶解耦合提取花生膳食纤维的方法。该方法以花生皮渣为原料,经热烫、干燥、粉碎、稀酸浸泡、蒸汽***改性、除淀粉和蛋白、以及复合酶酶解等步骤,滤液和沉淀经处理后分别得到水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维。该方法将提取和改性过程结合,提高了水溶性膳食纤维的提取率,改变了膳食纤维的组成和结构,暴露更多的结合位点,提高其吸附性和分散性;不溶性膳食纤维的持水力、持油力和膨胀力增加,水溶性膳食纤维的吸附能力增强,这些增强了花生膳食纤维的功能性;以花生加工副产物的皮渣作为原料,实现了农副产品的精深加工,为花生农副产品的综合利用提供了一条新途径。
Description
技术领域
本发明属于农副产品深加工领域,具体涉及一种蒸汽***改性与酶解耦合提取花生膳食纤维的方法。
背景技术
膳食纤维(dietary fiber,DF)是指不被胃和小肠消化吸收的非淀粉多糖及木质素类高分子碳水化合物的总称。尽管膳食纤维不能为人体提供任何营养,但对人体具有重要的生理功能——膳食纤维具有预防心血管疾病、肥胖病、糖尿病、高血压、改善肠道内菌群功能、减少胃肠癌症发生、清除外源有害物质、抗氧化、清除自由基等生理效应,被称为继糖类、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质和水之后的“第七类营养素”。按膳食纤维溶解性可分为水溶性纤维和不溶性纤维两大类。水溶性膳食纤维主要指细胞壁内的储存物质和分泌物,如果胶、部分半纤维素和植物胶等;不溶性膳食纤维主要指细胞壁的组成部分,如纤维素、部分半纤维素、木质素、壳聚糖和植物蜡等。
花生,原名落花生,是我国产量丰富、食用广泛的一种坚果,具有促进生长发育、健脑益智、延缓衰老、润肺止咳、降低胆固醇、防癌等功效。花生的壳、杆和根都含有丰富的粗蛋白、粗脂肪和纤维素,还含有铁、锰和锌等元素及多种维生素,同时含有谷氨酸、甘氨酸等15种常规氨基酸。我国是世界花生生产、消费和出口大国,花生总产量和出口量均居世界前列。每年,花生产业会产生大量的副产品,如花生壳、花生杆和花生根,它们是天然膳食纤维很好的来源。
目前国内外提取膳食纤维的方法主要有化学提取法、酶提取法、化学-酶结合提取法、膜分离法和发酵法。对膳食纤维进行改性的方法有:生物技术方法(酶法和发酵法)、化学处理方法(主要有酸法和碱法)和物理方法(机械降解处理法)。这些方法都是单一、独立的,缺乏有效的结合,导致提取率低,产品活性低,或者工序过于复杂,不利于工业化生产。
国内对同时提取皮渣中水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的报道很少。公开号CN101797038A的专利公开了一种花生膳食纤维超声波或微波辅助提取及纯化方法,采取超声波或微波辅助提取,经沉淀蛋白、膜过滤浓缩、柱层析、醇沉、干燥后制备花生可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维,花生水溶性膳食纤维产品非淀粉多糖50%~90%,不溶性膳食纤维产品纯度80%~95%;公开号CN102524701A的专利公开了果渣膳食纤维及其制备方法,采用超微粉碎-酶结合法提取可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维,获得果渣不溶性膳食纤维和可溶性膳食纤维含量均≥85%;公开号CN102524803A的专利公开了高压微射流超微粉碎与酶解耦合提取果渣膳食纤维的方法,经高压微射流超微粉碎处理后,加入纤维素酶进行酶解、浓缩、醇沉、干燥后得到桃渣可溶性、不溶性膳食纤维,含量分别为20%~40%和40%~50%;公开号CN103190632A的专利公开了一种可食用沙棘膳食纤维的制备方法,经超临界二氧化碳脱脂后的沙棘籽渣与水混合后,蛋白酶和纤维素酶复合酶解、真空浓缩、醇沉、喷雾干燥获得沙棘籽渣可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维,可溶性膳食纤维得率高于30%,不溶性膳食纤维得率达50%以上。
因此,一种可以将提取与改性有效结合的膳食纤维提取方法具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提出一种蒸汽***改性与酶解耦合提取花生膳食纤维的方法,包括如下步骤:
(1)制备花生皮渣粉末;
(2)向所述花生皮渣粉末中加入无机酸浸泡,然后滤去酸解液,所得花生皮渣颗粒进行蒸汽***,得到改性物料;
(3)向所述改性物料中加入蒸馏水分散,得到分散液,调节其pH,然后分别加入耐高温α-淀粉酶和中性蛋白酶进行酶解,得到酶解液;
(4)调节所述酶解液pH,加入纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶进行酶解,灭酶处理后得到灭酶溶液;
(5)所述灭酶溶液进行离心处理,得到上清液和沉淀;
(6)水洗步骤(5)所述沉淀,离心分离,得到不溶性膳食纤维沉淀物;
(7)浓缩步骤(5)所述上清液,醇沉,离心分离,醇洗,离心分离,得到可溶性膳食纤维沉淀物;
(8)干燥步骤(6)和(7)中所述沉淀物,得到不溶性膳食纤维和水溶性膳食纤维。
步骤(1)中所述花生皮渣为花生壳、花生杆或花生根;
制备花生皮渣粉末的步骤为:清洗花生皮渣,用85℃~100℃热水热烫1~5min,然后放入50℃~80℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥24~48h,使其含水量为4%~10%,粉碎至20-100目,得到花生皮渣粉末。其中,热水热烫花生皮渣的作用是灭活多酚氧化酶(PPO),抑制酶促褐变。
步骤(2)中所述无机酸为硫酸,硫酸的加入量为(1~4)mL/g粉末,硫酸浓度为0.2%~2.0%(v/v),浸泡温度为70℃~90℃,浸泡时间为1~10min,花生皮渣颗粒的湿度为30%~70%;所述蒸汽***的压力为0.5~4.0MPa,保压时间为5~20min,温度为100℃-150℃。
蒸汽***设备在较高的温度下通过瞬间减压产生挤压力和剪切力,使纤维物料被彻底的微粒化,改善了纤维物料的口感;同时,促使连接纤维分子的化学键断裂,发生分子裂解及分子极性变化,从而导致纤维素分子经蒸汽***作用后,增加了与水分子的接触面积及亲水性,促使水不溶性膳食纤维向水溶性膳食纤维转化,进一步提高花生皮渣的附加值。
步骤(3)中所述改性物料与蒸馏水的比例为1g:(3~5)mL,用0.5mol/L NaOH溶液调节分散液pH至6.5~7.5。
步骤(3)中所述耐高温α-淀粉酶的酶活为7×104~8×104U/g,添加量为分散液质量的0.05%~0.30%,在70℃~95℃温度下搅拌酶解10~70min,得到除淀粉溶液;除淀粉溶液冷却至30℃~70℃后加入中性蛋白酶,所述中性蛋白酶的酶活为0.6~2.0AU/g,添加量为除淀粉溶液质量的0.02%~0.30%,在30℃~80℃温度下搅拌酶解10~70min。
所述耐高温α-淀粉酶的酶活定义为:1mL酶液或1g固体酶粉1min液化可溶性淀粉1mg所需的酶量称为一个酶活单位,以U/mL或U/g表示;所述中性蛋白酶的酶活定义为:以血红蛋白为底物溶液,每分钟的分解产物和福林肖卡试剂反应的能力与1mmol酪氨酸和福林肖卡试剂反应的能力相当所需的酶量,即1个Anson酶活,简称AU。
步骤(4)中用0.4mol/L HCl溶液调节酶解液pH至2.5~5.5;所述纤维素酶的酶活为300~400U/mL,添加量为酶解液质量的1%~8%;木聚糖酶的酶活为1000~10000U/g,添加量为酶解液质量的1%~5%;果胶酶的酶活为2×104~1×105U/g,添加量为酶解液质量的0.2%~4%;所述酶解在40℃~80℃恒温水浴摇床中进行,转速为100~200r/min,酶解时间为2~12h;灭酶处理温度为95℃,时间为3min。
所述纤维素酶的酶活定义为:1min从底物溶液中分解产生1μmol还原糖所需的酶量,即1个酶活单位,以U表示;所述木聚糖酶的酶活定义为:每分钟水解木聚糖形成1μmol木糖所需酶量为1个酶活单位,以U/g表示;所述果胶酶的酶活定义为:1g果胶酶粉或1mL果胶酶液在最适条件下分解果胶生成1μg半乳糖醛酸的酶量为1个酶活单位,以U/g表示。
纤维素酶和木聚糖酶主要作用是降解植物细胞壁中的纤维素和半纤维素,使细胞壁膨胀、转化,使纤维素类物质降解,摧毁植物细胞壁,使细胞内容物溶出以释放内养分,同时有利于促进不溶性膳食纤维向可溶性膳食纤维的转化。果胶酶主要作用是将大分子果胶物质分解为小分子物质,有利于可溶性果胶物质在肠道和血液中吸收,充分发挥改性果胶功能特性。
步骤(5)-(7)中所述离心分离的转速为4000~5000r/min,时间10~40min。
步骤(6)中水洗沉淀1~4次,沉淀与水的比例为1g:(3~15)mL,水洗温度为40℃~80℃。
步骤(7)的具体操作为:将上清液在40℃~70℃,0.08~0.1MPa的真空度下旋转蒸发浓缩至原体积的1/5~1/15,得到浓缩液;向浓缩液中添加2~9倍体积的45~95%(v/v)乙醇,于20℃~50℃温度下醇沉3h~15h,离心分离得到沉淀物;所得沉淀物用45%~95%(v/v)乙醇醇洗1~5次,醇洗温度为20℃~60℃,离心分离,得到水溶性膳食纤维。
步骤(8)中所述干燥采用真空冷冻干燥,温度为-10℃~-70℃,时间为10~30h,真空度为10~100Pa。
本发明的有益效果为:
(1)本发明采用蒸汽***改性与酶解耦合的方法提取花生皮渣中的膳食纤维,将提取过程和活化改性过程结合,提高了水溶性膳食纤维的提取率,改变了膳食纤维的组成和结构,暴露更多的结合位点,提高其吸附性和分散性;不溶性膳食纤维的持水力、持油力和膨胀力增加,水溶性膳食纤维的吸附能力增强,从而使所得的高活性膳食纤维产品在促进消化、增加排便、防治肥胖症、降低胆固醇及降血脂等方面具有更加良好的生理功效。
(2)以花生加工副产物的皮渣作为原料,充分利用和保存花生皮渣的功能性保健成分,制备高品质的花生膳食纤维,不仅实现了花生加工中的零废弃,资源得到了充分合理的利用,实现了农副产品的精深加工,保护了生态环境,而且对优化花生产业结构,增加花生加工业的附加值具有十分重要的意义。
附图说明
图1为本发明制备花生膳食纤维的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步介绍。
实施例1
(1)清洗花生皮渣,用85℃热水热烫2min,将热烫后的花生皮渣沥水后放入60℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥24h,使其含水量为8%,粉碎至60目,得到预处理的花生皮渣粉末;
(2)按照粉末与0.5%(v/v)硫酸1g:2mL的比例加入硫酸浸泡3min,浸泡温度为70℃,滤去酸解液,所得花生皮渣颗粒湿度为50%,然后在压力2.0MPa,保压时间10min,温度120℃条件下进行蒸汽***,使物料浆化,得到改性物料;
(3)按照改性物料与水1g:3mL的比例加入蒸馏水分散,得到分散液,用浓度0.5mol/L NaOH溶液调节其pH值至6.5,然后加入分散液质量0.15%的耐高温α-淀粉酶,在80℃温度下搅拌酶解30min,得到除淀粉溶液;冷却至40℃后,加入除淀粉溶液质量0.10%的中性蛋白酶,在35℃温度下搅拌酶解20min,得到酶解液;
(4)用浓度为0.4mol/L的HCl溶液调节所述酶解液pH值至4.0,加入酶解液质量3%的纤维素酶、酶解液质量2%的木聚糖酶和酶解液质量0.5%的果胶酶,置于50℃恒温水浴摇床中,转速为100rpm,进行酶解7h,之后95℃灭酶处理3min,冷却至室温,得到灭酶溶液;
(5)所述灭酶溶液4500rpm离心20min,得到上清液和沉淀;
(6)按照沉淀与水1g:9mL的比例水洗步骤(5)所述沉淀2次,水洗温度为50℃,4500rpm离心20min,得到不溶性膳食纤维沉淀物;
(7)将步骤(5)所述上清液在40℃,0.08MPa的真空度下旋转蒸发浓缩至原体积的1/8,得到浓缩液;向浓缩液中添加5倍体积的75%(v/v)乙醇,于30℃温度下醇沉8h,离心分离得到沉淀物;所得沉淀物用65%(v/v)乙醇醇洗3次,醇洗温度为25℃,4500rpm离心20min,得到水溶性膳食纤维;
(8)步骤(6)和步骤(7)所得沉淀物置于真空冷冻干燥箱中干燥,真空冷冻干燥的温度为-20℃,时间30h,真空度为20Pa,即得到水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维。
所得水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的提取率分别为29.07%和50.74%,纯度分别为85.23%和71.25%。水溶性膳食纤维的胆固醇吸附能力为34.87mg/g(pH2.0)、46.98mg/g(pH7.0),胆酸钠吸附能力为527.97mg/g。不溶性膳食纤维的持水力为6.98g/g,持油力为7.03g/g,溶胀性为12.65mL/g。
实施例2
(1)清洗花生皮渣,用95℃热水热烫3min,将热烫后的花生皮渣沥水后放入70℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥36h,使其含水量为6%,粉碎至70目,得到预处理的花生皮渣粉末;
(2)按照粉末与1.0%(v/v)硫酸1g:3mL的比例加入硫酸浸泡5min,浸泡温度为80℃,滤去酸解液,所得花生皮渣颗粒湿度为60%,然后在压力3.0MPa,保压时间15min,温度130℃条件下进行蒸汽***,使物料浆化,得到改性物料;
(3)按照改性物料与水1g:4mL的比例加入蒸馏水分散,得到分散液,用浓度0.5mol/L NaOH溶液调节其pH值至7.0,然后加入分散液质量0.20%的耐高温α-淀粉酶,在85℃温度下搅拌酶解50min,得到除淀粉溶液;冷却至35℃后,加入除淀粉溶液质量0.08%的中性蛋白酶,在30℃温度下搅拌酶解40min,得到酶解液;
(4)用浓度为0.4mol/L的HCl溶液调节所述酶解液pH值至4.5,加入酶解液质量6%的纤维素酶、酶解液质量3%的木聚糖酶和酶解液质量1.0%的果胶酶,置于70℃恒温水浴摇床中,转速为200rpm,进行酶解8h,之后95℃灭酶处理3min,冷却至室温,得到灭酶溶液;
(5)所述灭酶溶液4200rpm离心25min,得到上清液和沉淀;
(6)按照沉淀与水1g:12mL的比例水洗步骤(5)所述沉淀2次,水洗温度为50℃,4200rpm离心25min,得到不溶性膳食纤维沉淀物;
(7)将步骤(5)所述上清液在60℃,0.09MPa的真空度下旋转蒸发浓缩至原体积的1/10,得到浓缩液;向浓缩液中添加8倍体积的85%(v/v)乙醇,于40℃温度下醇沉8h,离心分离得到沉淀物;所得沉淀物用75%(v/v)乙醇醇洗4次,醇洗温度为30℃,4200rpm离心25min,得到水溶性膳食纤维;
(8)步骤(6)和步骤(7)所得沉淀物置于真空冷冻干燥箱中干燥,真空冷冻干燥的温度为-40℃,时间20h,真空度为50Pa,即得到水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维。
所得水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的提取率分别为33.57%和41.76%,纯度分别为83.74%和78.42%。水溶性膳食纤维的胆固醇吸附能力为39.32mg/g(pH2.0)、48.21mg/g(pH7.0),胆酸钠吸附能力为512.64mg/g。不溶性膳食纤维的持水力为8.63g/g,持油力为8.35g/g,溶胀性为13.42mL/g。
实施例3
(1)清洗花生皮渣,用100℃热水热烫1min,将热烫后的花生皮渣沥水后放入80℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥24h,使其含水量为5%,粉碎至80目,得到预处理的花生皮渣粉末;
(2)按照粉末与0.9%(v/v)硫酸1g:4mL的比例加入硫酸浸泡5min,浸泡温度为75℃,滤去酸解液,所得花生皮渣颗粒湿度为60%,然后在压力2.0MPa,保压时间20min,温度140℃条件下进行蒸汽***,使物料浆化,得到改性物料;
(3)按照改性物料与水1g:5mL的比例加入蒸馏水分散,得到分散液,用浓度0.5mol/L NaOH溶液调节其pH值至7.5,然后加入分散液质量0.15%的耐高温α-淀粉酶,在75℃温度下搅拌酶解50min,得到除淀粉溶液;冷却至60℃后,加入除淀粉溶液质量0.10%的中性蛋白酶,在30℃温度下搅拌酶解50min,得到酶解液;
(4)用浓度为0.4mol/L的HCl溶液调节所述酶解液pH值至5.0,加入酶解液质量3%的纤维素酶、酶解液质量2.5%的木聚糖酶和酶解液质量1.5%的果胶酶,置于70℃恒温水浴摇床中,转速为150rpm,进行酶解10h,之后95℃灭酶处理3min,冷却至室温,得到灭酶溶液;
(5)所述灭酶溶液4000rpm离心30min,得到上清液和沉淀;
(6)按照沉淀与水1g:5mL的比例水洗步骤(5)所述沉淀2次,水洗温度为60℃,4000rpm离心30min,得到不溶性膳食纤维沉淀物;
(7)将步骤(5)所述上清液在45℃,0.09MPa的真空度下旋转蒸发浓缩至原体积的1/10,得到浓缩液;向浓缩液中添加4倍体积的85%(v/v)乙醇,于40℃温度下醇沉8h,离心分离得到沉淀物;所得沉淀物用65%(v/v)乙醇醇洗4次,醇洗温度为25℃,4000rpm离心30min,得到水溶性膳食纤维;
(8)步骤(6)和步骤(7)所得沉淀物置于真空冷冻干燥箱中干燥,真空冷冻干燥的温度为-60℃,时间20h,真空度为30Pa,即得到水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维。
所得水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的提取率分别为29.84%和43.75%,纯度分别为84.75%和76.24%。水溶性膳食纤维的胆固醇吸附能力为32.82mg/g(pH2.0)、37.23mg/g(pH7.0),胆酸钠吸附能力为513.93mg/g。不溶性膳食纤维的持水力为10.35g/g,持油力为9.72g/g,溶胀性为12.93mL/g。
Claims (10)
1.一种蒸汽***改性与酶解耦合提取花生膳食纤维的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)制备花生皮渣粉末;
(2)向所述花生皮渣粉末中加入无机酸浸泡,然后滤去酸解液,所得花生皮渣颗粒进行蒸汽***,得到改性物料;
(3)向所述改性物料中加入蒸馏水分散,得到分散液,调节其pH,然后分别加入耐高温α-淀粉酶和中性蛋白酶进行酶解,得到酶解液;
(4)调节所述酶解液pH,加入纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶进行酶解,灭酶处理后得到灭酶溶液;
(5)所述灭酶溶液进行离心处理,得到上清液和沉淀;
(6)水洗步骤(5)所述沉淀,离心分离,得到不溶性膳食纤维沉淀物;
(7)浓缩步骤(5)所述上清液,醇沉,离心分离,醇洗,离心分离,得到可溶性膳食纤维沉淀物;
(8)干燥步骤(6)和(7)中所述沉淀物,得到不溶性膳食纤维和水溶性膳食纤维。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述花生皮渣为花生壳、花生杆或花生根;
制备花生皮渣粉末的步骤为:清洗花生皮渣,用85℃~100℃热水热烫1~5min,然后放入50℃~80℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥24~48h,使其含水量为4%~10%,粉碎至20-100目,得到花生皮渣粉末。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述无机酸为硫酸,硫酸的加入量为(1~4)mL/g粉末,硫酸浓度为0.2%~2.0%(v/v),浸泡温度为70℃~90℃,浸泡时间为1~10min,花生皮渣颗粒的湿度为30%~70%;所述蒸汽***的压力为0.5~4.0MPa,保压时间为5~20min,温度为100℃-150℃。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述改性物料与蒸馏水的比例为1g:(3~5)mL,用0.5mol/L NaOH溶液调节分散液pH至6.5~7.5。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述耐高温α-淀粉酶的酶活为7×104~8×104U/g,添加量为分散液质量的0.05%~0.30%,在70℃~95℃温度下搅拌酶解10~70min,得到除淀粉溶液;除淀粉溶液冷却至30℃~70℃后加入中性蛋白酶,所述中性蛋白酶的酶活为0.6~2.0AU/g,添加量为除淀粉溶液质量的0.02%~0.30%,在30℃~80℃温度下搅拌酶解10~70min。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中用0.4mol/L HCl溶液调节酶解液pH至2.5~5.5;所述纤维素酶的酶活为300~400U/mL,添加量为酶解液质量的1%~8%;木聚糖酶的酶活为1000~10000U/g,添加量为酶解液质量的1%~5%;果胶酶的酶活为2×104~1×105U/g,添加量为酶解液质量的0.2%~4%;所述酶解在40℃~80℃恒温水浴摇床中进行,转速为100~200r/min,酶解时间为2~12h;灭酶处理温度为95℃,时间为3min。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(5)-(7)中所述离心分离的转速为4000~5000r/min,时间10~40min。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(6)中水洗沉淀1~4次,沉淀与水的比例为1g:(3~15)mL,水洗温度为40℃~80℃。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(7)的具体操作为:将上清液在40℃~70℃,0.08~0.1MPa的真空度下旋转蒸发浓缩至原体积的1/5~1/15,得到浓缩液;向浓缩液中添加2~9倍体积的45~95%(v/v)乙醇,于20℃~50℃温度下醇沉3h~15h,离心分离得到沉淀物;所得沉淀物用45%~95%(v/v)乙醇醇洗1~5次,醇洗温度为20℃~60℃,离心分离,得到水溶性膳食纤维。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(8)中所述干燥采用真空冷冻干燥,温度为-10℃~-70℃,时间为10~30h,真空度为10~100Pa。
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