CN107446978A - 一种石斛小分子肽及其制备方法 - Google Patents
一种石斛小分子肽及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107446978A CN107446978A CN201710695843.1A CN201710695843A CN107446978A CN 107446978 A CN107446978 A CN 107446978A CN 201710695843 A CN201710695843 A CN 201710695843A CN 107446978 A CN107446978 A CN 107446978A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- stem
- preparation
- noble dendrobium
- small
- composition
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 240000004638 Dendrobium nobile Species 0.000 title claims abstract description 53
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 48
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 42
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 38
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 22
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 13
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 28
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 24
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 24
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 24
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 19
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims description 18
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 16
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 10
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 10
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 10
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 claims description 9
- 241000026010 Dendrobium candidum Species 0.000 claims description 8
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 8
- 241001523681 Dendrobium Species 0.000 claims description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 7
- ZHQQRIUYLMXDPP-SSDOTTSWSA-N Actinidine Natural products C1=NC=C(C)C2=C1[C@H](C)CC2 ZHQQRIUYLMXDPP-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims description 6
- 108090000350 actinidain Proteins 0.000 claims description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 6
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 4
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims 2
- 241000282553 Macaca Species 0.000 claims 1
- 240000006413 Prunus persica var. persica Species 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 8
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 29
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 7
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 7
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 6
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 3
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 2
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005508 Acid proteases Proteins 0.000 description 1
- 244000298715 Actinidia chinensis Species 0.000 description 1
- 235000009434 Actinidia chinensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000009436 Actinidia deliciosa Nutrition 0.000 description 1
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 101100539403 Drosophila melanogaster sgl gene Proteins 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 230000004308 accommodation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000012805 post-processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 229940034610 toothpaste Drugs 0.000 description 1
- 239000000606 toothpaste Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了石斛小分子肽的制备方法以及由此得到的石斛小分子肽，所述制备方法包括以下步骤：1)预处理；2)提取；3)酶解；4)分离纯化；5)浓缩干燥。本发明采用木聚糖酶、纤维素酶、碱性蛋白酶以及植物蛋白酶进行复合生物酶切的方式，使得酶解的时间缩短至2‑3小时，且由于在酶解时无需调节pH值，节省了工艺时间，同时省去了脱盐的工艺，提高了石斛小分子肽的生产效率。由所述制备方法得到的石斛小分子肽分子量主要集中在100‑500Da，易于人体吸收，可应用于食品领域。
Description
技术领域
本发明属于生物与新医药技术领域，涉及到一种以石斛为原料，采用复合生物酶切与生化分离工艺，提取石斛小分子肽的制备方法。此外，本发明还涉及由上述方法制备得到的石斛小分子肽及其应用。
背景技术
石斛是我国传统的名贵中药，在“神农本草经”中列为上品。石斛性味甘淡微咸，寒，归胃、肾，肺经。益胃生津，滋阴清热。
石斛主要含石斛多糖、生物碱、氨基酸、微量元素和菲类化合物等有效成分，其中氨基酸近一半为人体必需氨基酸，还含有可溶性蛋白质。现代研究表明，其具有增强机体免疫力、抗肿瘤、促进消化液分泌、抑制血小板凝集、降血脂、降血糖、抗氧化、抗衰老和退热止痛等药理作用。
据报道，2001-2011年之前，国内关于石斛的研究，主要集中在其生物碱的药理、含量等方面，2004年至今，主要集中在多糖的药理、提取工艺优化等方面，诸如一种提高石斛生物活性多糖溶出率的生物酶辅助提取方法(CN201210472158.X)；而石斛其它成分，特别是肽方面研究则更少。
不过，近年来有一些关于石斛肽方面的研究渐成热点。诸如，使用木瓜蛋白酶的石斛肽的制备方法(CN201610214799.3)、使用3种蛋白酶的铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法及应用(CN201410466768.8)、使用单一蛋白酶的一种基于纳米金棒复合原料的铁皮石斛小分子肽牙膏(CN201610207244.6)以及使用碱性中性与酸性蛋白酶的铁皮石斛小分子肽组合物其提取方法及应用(CN201610192437.9)。
在上述专利技术中，所述的单一的酶制备的肽往往产品质量不佳，使用多种酶来酶解，成本较高且工艺时间大大增加，后处理步骤繁琐，不利于批量化生产。因此，有必要开发一种新技术，确保高质量、高效率地应用于生产石斛小分子肽产品。
发明内容
为了解决上述技术问题，在保证质量的前提下，缩短酶解时间，简化整体工艺流程，提高生产效率，本发明提供了一种石斛小分子肽的制备方法以及由此得到的石斛小分子肽。
本发明石斛小分子肽制备方法的步骤为：
1)预处理：将新鲜的石斛破碎磨浆成浆液；
2)提取：将步骤1)中获得的浆液，添加质量为浆液质量3-5倍的水，加温至40-80℃，超声提取10-30分钟得到提取液；
3)酶解：将步骤2)中获得的提取液加温至50-55℃，加入组合物A和组合物B进行酶解，其中组合物A由木聚糖酶和纤维素酶构成，组合物B由碱性蛋白酶和植物蛋白酶构成；
4)分离纯化：将步骤3)中所获得的酶解液，在85-105℃进行灭菌、灭酶处理10-15分钟，静置，分离纯化得到上清液；
5)浓缩干燥：将上述分离纯化所获得的上清液，浓缩干燥获得石斛小分子肽。
根据本发明的实施方式，在步骤3)中，组合物A中木聚糖酶的质量可以为所述提取液质量的0.08％-0.15％，纤维素酶的质量可以为所述提取液质量的0.01％-0.05％；组合物B中碱性蛋白酶的质量可以为所述提取液质量的0.1％-0.2％，植物蛋白酶的质量可以为所述提取液质量的0.1％-0.25％；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成，三种酶的质量比为4:3:3。
根据本发明的实施方式，在步骤3)中，可先加入组合物A酶解0.5-1小时，再加入组合物B酶解1.5-2.5小时。
根据本发明的实施方式，在步骤3)中，可向提取液中加入组合物A与组合物B的混合物，酶解2-3小时。
根据本发明的实施方式，步骤4)中所述分离纯化的方法为过滤器、离心机或膜过滤中的一种或几种，优选地，所述分离纯化的方法为用双联滤器进行粗滤后经陶瓷超滤膜过滤。
根据本发明的实施方式，步骤5)中所述浓缩干燥为喷雾干燥、真空带式干燥、真空微波干燥、冷冻干燥中的一种或几种。
根据本发明的实施方式，本发明使用的石斛可以是但不限于金钗石斛、铁皮石斛、紫皮石斛。
根据本发明的另一方面，本发明提供根据所述制备方法得到的石斛小分子肽。
根据本发明的再一方面，本发明提供本发明所得的石斛小分子肽在食品中的应用。
通过实施以上技术方案，本发明对比现有技术具有以下等优势：
1.缩短酶解时间：通过复配酶制剂与生化分离工艺，调节酶解参数，大大节省了酶解时间，现有文献中需9-12小时，而本技术仅需要2-3小时的酶解，时间更短，酶解则更彻底。
2.简化工艺步骤：本发明采用适宜pH为酸性的木聚糖酶和纤维素酶、偏中性的植物蛋白酶以及碱性蛋白酶，因此复合酶的pH适应范围宽，可直接对石斛提取液进行酶解，无需调节pH值，节省了工艺时间，同时减少了生产工艺当中灰分和盐分的生成，省去了生产中脱盐的工艺，诸如透析柱、离子交换色谱柱等昂贵低产能的生产工艺环节。
3.节能减排：本发明可直接采用陶瓷膜过滤对其进行分离过滤，与文献中所述的硅藻土过滤相比较，减少因硅藻土在生产中带来微生物安全风险，同时陶瓷膜易于清洗和再生，而硅藻土一次性使用带来大量的废水与废弃物，从而确保了节能减排。
4.产物具有营养价值：本发明提供石斛小分子肽组合物，其分子量主要分布在1000Da以下，这些肽为小分子肽，容易被人体吸收，具有重要的营养价值。
具体实施方式
下面结合实施例，更详细地描述本发明的具体实施方式。以下实施例仅用于说明目的而不限制本发明的范围。
本发明所用的原料、仪器设备和试剂均有商品化的产品可供选用，并可从市场上购买得到。
实施例1
石斛小分子肽的制备方法是将石斛经预处理、提取、酶解、分离纯化以及浓缩干燥精制，得到石斛小分子肽产品。
1)将新鲜的金钗石斛通过破碎磨浆，得到浆液；
2)加入质量为浆液质量5倍的水，加温至40℃，超声提取30分钟，超声功率为30kW，得到提取液；
3)将提取液加温到50℃，先加入与提取液的质量比为0.08％的木聚糖酶、0.01％的纤维素酶酶解反应1小时，后添加与提取液的质量比为0.1％的碱性蛋白酶、0.1％的植物蛋白酶进行二次酶解，酶解时间为2小时；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成，三种酶的质量比为4:3:3。
4)将酶解液升温至85℃保持15分钟进行灭菌灭酶活处理，静置30分钟后通过板框过滤器进行分离得到上清液；
5)将上清液通过真空微波干燥机进行干燥得到成品。
经测定，该产品低聚组合物呈灰褐色，口感微甜略带涩，含水量2.8％，通过液相色谱分析，产物中分子量为100-500Da的占91％。
所获得的石斛小分子肽可应用于食品领域。
实施例2
石斛小分子肽的制备方法是将金钗石斛经预处理、提取、酶解、分离纯化以及浓缩干燥精制得到石斛小分子肽产品。
1)将新鲜的金钗石斛通过破碎磨浆，得到浆液；
2)加入质量为浆液质量3倍的水，加温至60℃，超声提取20分钟，超声功率为30kW，得到提取液；
3)将提取液加温到52℃，先加入与提取液的质量比为0.1％的木聚糖酶、0.02％的纤维素酶酶解反应0.5小时，后添加与提取液的质量比为0.15％的碱性蛋白酶、0.15％的植物蛋白酶进行二次酶解，酶解时间为2.5小时；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成，三种酶的质量比为4:3:3。
4)将酶解液升温至85℃保持15分钟进行灭菌灭酶活处理，通过平板吊袋式离心机进行分离得到上清液；
5)将上清液通过真空带式干燥机进行干燥得到成品。
经测定，该产品低聚组合物呈灰褐色，口感微甜略带涩，含水量4.6％，通过液相色谱分析，产物中分子量为100-500Da的占90％。
所获得的石斛小分子肽可应用于食品领域。
实施例3
石斛小分子肽的制备方法是将金钗石斛经预处理、提取、酶解、分离纯化以及浓缩干燥精制得到石斛小分子肽产品。
1)将新鲜的金钗石斛通过破碎磨浆，得到浆液；
2)加入质量为浆液质量4倍的水，加温至80℃，超声提取10分钟，超声功率为30kW，得到提取液；
3)将提取液加温到55℃，先加入与提取液的质量比为0.12％的木聚糖酶、0.05％的纤维素酶酶解反应0.5小时，后添加与提取液的质量比为0.2％的碱性蛋白酶、0.25％的植物蛋白酶进行二次酶解，酶解时间为1.5小时；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成，三种酶的质量比为4:3:3。
4)将酶解液升温至102℃保持10分钟进行灭菌灭酶活处理后，通过双联滤器进行粗滤后经陶瓷超滤膜过滤得到上清液；
5)将上清液通过高速离心式喷雾进行干燥得到成品。
经测定，该产品低聚组合物呈深褐色，口感微甜略带涩，含水量3％，通过液相色谱分析，产物中分子量为100-500Da的占93％。
所获得的石斛小分子肽可应用于食品领域。
实施例4
石斛小分子肽的制备方法是将金钗石斛经预处理、提取、酶解、分离纯化以及浓缩干燥精制得到石斛小分子肽产品。
1)将新鲜的金钗石斛通过破碎磨浆，得到浆液；
2)加入质量为浆液质量3倍的水，加温至70℃，超声提取10分钟，超声功率为30kW，得到提取液；
3)将提取液加温到55℃，加入与提取液的质量比为0.08％的木聚糖酶、0.01％的纤维素酶、0.1％的碱性蛋白酶以及0.1％的植物蛋白酶，酶解反应3小时；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成，三种酶的质量比为4:3:3。
4)将酶解液升温至102℃保持10分钟进行灭菌灭酶活处理后，通过双联滤器进行粗滤后经陶瓷超滤膜过滤得到上清液；
5)将上清液通过高速离心式喷雾进行干燥得到成品。
经测定，该产品低聚组合物呈深褐色，口感微甜略带涩，含水量3％，通过液相色谱分析，产物中分子量为100-500Da的占92％。
所获得的石斛小分子肽可应用于食品领域。
实施例5
石斛小分子肽的制备方法是将金钗石斛经预处理、提取、酶解、分离纯化以及浓缩干燥精制得到石斛小分子肽产品。
1)将新鲜的金钗石斛通过破碎磨浆，得到浆液；
2)加入质量为浆液质量4倍的水，加温至65℃，超声提取15分钟，超声功率为30kW，得到提取液；
3)将提取液加温到55℃，加入与提取液的质量比为0.1％的木聚糖酶、0.025％的纤维素酶、0.15％的碱性蛋白酶、0.15％的植物蛋白酶酶解反应2小时；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成，三种酶的质量比为4:3:3。
4)将酶解液升温至102℃保持10分钟进行灭菌灭酶活处理后，通过双联滤器进行粗滤后经陶瓷超滤膜过滤得到上清液；
5)将上清液通过高速离心式喷雾进行干燥得到成品。
经测定，该产品低聚组合物呈深褐色，口感微甜略带涩，含水量3％，通过液相色谱分析，产物中分子量为100-500Da的占92％。
所获得的石斛小分子肽可应用于食品领域。
实施例6
石斛小分子肽的制备方法是将紫皮石斛、铁皮石斛分别经预处理、提取、酶解、分离纯化以及浓缩干燥精制得到石斛小分子肽产品。
1)将新鲜的紫皮石斛、铁皮石斛分别通过破碎磨浆，得到浆液；
2)加入质量为浆液质量5倍的水，加温至65℃，超声提取15分钟，超声功率为30kW，得到提取液；
3)将提取液加温到55℃，加入与提取液的质量比为0.15％的木聚糖酶、0.05％的纤维素酶、0.2％的碱性蛋白酶、0.25％的植物蛋白酶，酶解反应3小时；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成，三种酶的质量比为4:3:3。
4)将酶解液升温至105℃保持10分钟进行灭菌灭酶活处理后，
通过双联滤器进行粗滤后经陶瓷超滤膜过滤得到上清液。
5)将上清液通过高速离心式喷雾进行干燥得到成品。
经测定，紫皮石斛低聚组合物呈蓝紫色，口感微甜略带涩，含水量4.6％，分子量集中在1000Da以下；铁皮石斛低聚组合物呈灰色，口感较甜略带涩，含水量3.8％，通过液相色谱分析，产物中分子量为100-500Da的占93％。
所获得的石斛小分子肽可应用于食品领域。
对实施例1-6进行分析，得到石斛小分子肽制备的工艺参数和产品，如表1所示。
表1
由上表可知，通过木聚糖酶、纤维素酶、碱性蛋白酶以及植物蛋白酶进行复合生物酶切，酶解的时间可缩短至2-3小时，且酶解时无需调节pH值，节省了工艺时间，同时减少了生产工艺当中灰分和盐分的生成，省去了脱盐的工艺。最后得到的产物分子量集中在100-500Da，易于人体吸收。
至此，本领域技术人员应认识到，虽然本文已详尽示出和描述了本发明的多个示例性实施例，但是，在不脱离本发明精神和范围的情况下，仍可根据本发明公开的内容直接确定或推导出符合本发明原理的许多其他变型或修改。
Claims (10)
1.一种石斛小分子肽的制备方法，其步骤为：
1)预处理：将新鲜的石斛破碎磨浆成浆液；
2)提取：将步骤1)中获得的浆液，添加质量为浆液质量3-5倍的水，加温至40-80℃，超声提取10-30分钟得到提取液；
3)酶解：将步骤2)中获得的提取液加温至50-55℃，加入组合物A和组合物B进行酶解，其中组合物A由木聚糖酶和纤维素酶构成，组合物B由碱性蛋白酶和植物蛋白酶构成；所述植物蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶构成；
4)分离纯化：将步骤3)中所获得的酶解液，在85-105℃进行灭菌、灭酶处理10-15分钟，静置，分离纯化得到上清液；
5)浓缩干燥：将上述分离纯化所获得的上清液，浓缩干燥获得石斛小分子肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，组合物A中木聚糖酶的质量为所述提取液质量的0.08％-0.15％，纤维素酶的质量为所述提取液质量的0.01％-0.05％；组合物B中碱性蛋白酶的质量为所述提取液质量的0.1％-0.2％，植物蛋白酶的质量为所述提取液质量的0.1％-0.25％；所述植物蛋白酶中，木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和猕猴桃蛋白酶的质量比为4:3:3。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，先加入组合物A酶解0.5-1小时，再加入组合物B酶解1.5-2.5小时。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，向提取液中加入组合物A与组合物B的混合物，酶解2-3小时。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述分离纯化的方法为过滤器、离心机或膜过滤中的一种或几种。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述分离纯化的方法为用双联滤器进行粗滤后，经陶瓷超滤膜过滤。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤5)中所述的浓缩干燥为喷雾干燥、真空带式干燥、真空微波干燥或冷冻干燥中的一种或几种。
8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述的石斛是金钗石斛、铁皮石斛或紫皮石斛。
9.一种石斛小分子肽，其根据权利要求1-8中任一项所述的制备方法得到。
10.根据权利要求9所述的石斛小分子肽在食品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710695843.1A CN107446978A (zh) | 2017-08-15 | 2017-08-15 | 一种石斛小分子肽及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710695843.1A CN107446978A (zh) | 2017-08-15 | 2017-08-15 | 一种石斛小分子肽及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107446978A true CN107446978A (zh) | 2017-12-08 |
Family
ID=60492124
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710695843.1A Pending CN107446978A (zh) | 2017-08-15 | 2017-08-15 | 一种石斛小分子肽及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107446978A (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109735591A (zh) * | 2019-03-14 | 2019-05-10 | 舜甫科技(固安)有限公司 | 一种牛骨胶原蛋白肽及其生产方法 |
| CN109777850A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-05-21 | 集美大学 | 一种鲍鱼肚肽及其生产方法和应用 |
| CN109907327A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-06-21 | 集美大学 | 一种鲍鱼肽及其生产方法 |
| CN110338264A (zh) * | 2019-07-08 | 2019-10-18 | 山西原生肽科技有限公司 | 一种五谷复合多肽及其制备方法 |
| CN110856744A (zh) * | 2018-08-24 | 2020-03-03 | 北京中医药大学 | 一种石斛多肽的新用途 |
| CN112662722A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-16 | 江苏耐雀生物工程技术有限公司 | 具有防腐功效的石斛多肽提取物及其制备方法和应用 |
| CN113337566A (zh) * | 2021-06-22 | 2021-09-03 | 安徽利民生物科技股份有限公司 | 一种石斛多肽的制备方法 |
| CN117099890A (zh) * | 2023-09-28 | 2023-11-24 | 泰昊乐生物科技有限公司 | 一种促进降尿酸、降血糖血脂的无色无味低聚肽液体饮料及其加工方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104232718A (zh) * | 2014-09-12 | 2014-12-24 | 华南理工大学 | 铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法及应用 |
| CN105713944A (zh) * | 2016-03-30 | 2016-06-29 | 蔡庭守 | 铁皮石斛小分子肽组合物、其提取方法及应用 |
| CN105777926A (zh) * | 2016-03-22 | 2016-07-20 | 天津大学 | 一种从核桃中综合提取有效成分的方法 |
| CN106377567A (zh) * | 2016-10-14 | 2017-02-08 | 浙江双屿生物股份有限公司 | 一种中药材小分子活性物质的提取方法 |
| CN106636266A (zh) * | 2016-10-12 | 2017-05-10 | 马业忠 | 葵花盘小分子活性肽降尿酸陶瓷膜超滤技术 |
| CN106880764A (zh) * | 2017-03-10 | 2017-06-23 | 海南赛诚科技有限公司 | 一种铁皮石斛提取物及其制剂的制备方法 |
-
2017
- 2017-08-15 CN CN201710695843.1A patent/CN107446978A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104232718A (zh) * | 2014-09-12 | 2014-12-24 | 华南理工大学 | 铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法及应用 |
| CN105777926A (zh) * | 2016-03-22 | 2016-07-20 | 天津大学 | 一种从核桃中综合提取有效成分的方法 |
| CN105713944A (zh) * | 2016-03-30 | 2016-06-29 | 蔡庭守 | 铁皮石斛小分子肽组合物、其提取方法及应用 |
| CN106636266A (zh) * | 2016-10-12 | 2017-05-10 | 马业忠 | 葵花盘小分子活性肽降尿酸陶瓷膜超滤技术 |
| CN106377567A (zh) * | 2016-10-14 | 2017-02-08 | 浙江双屿生物股份有限公司 | 一种中药材小分子活性物质的提取方法 |
| CN106880764A (zh) * | 2017-03-10 | 2017-06-23 | 海南赛诚科技有限公司 | 一种铁皮石斛提取物及其制剂的制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| QIUPING ZHENG等: "Antiproliferative effect of Dendrobium catenatum Lindley polypeptides against human liver, gastric and breast cancer cell lines", 《FOOD & FUNCTION》 * |
| 丛峰松: "《神奇的小分子活性肽》", 31 May 2015, 上海：上海交通大学出版社 * |
| 郑秋平: "铁皮石斛中抗肿瘤活性物质的分离纯化", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 * |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110856744A (zh) * | 2018-08-24 | 2020-03-03 | 北京中医药大学 | 一种石斛多肽的新用途 |
| CN110856744B (zh) * | 2018-08-24 | 2022-11-01 | 北京中医药大学 | 一种石斛多肽的新用途 |
| CN109735591A (zh) * | 2019-03-14 | 2019-05-10 | 舜甫科技(固安)有限公司 | 一种牛骨胶原蛋白肽及其生产方法 |
| CN109735591B (zh) * | 2019-03-14 | 2020-11-10 | 舜甫科技(固安)有限公司 | 一种牛骨胶原蛋白肽及其生产方法 |
| CN109777850A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-05-21 | 集美大学 | 一种鲍鱼肚肽及其生产方法和应用 |
| CN109907327A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-06-21 | 集美大学 | 一种鲍鱼肽及其生产方法 |
| CN110338264A (zh) * | 2019-07-08 | 2019-10-18 | 山西原生肽科技有限公司 | 一种五谷复合多肽及其制备方法 |
| CN112662722A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-16 | 江苏耐雀生物工程技术有限公司 | 具有防腐功效的石斛多肽提取物及其制备方法和应用 |
| CN112662722B (zh) * | 2020-12-30 | 2024-01-23 | 江苏耐雀生物工程技术有限公司 | 具有防腐功效的石斛多肽提取物及其制备方法和应用 |
| CN113337566A (zh) * | 2021-06-22 | 2021-09-03 | 安徽利民生物科技股份有限公司 | 一种石斛多肽的制备方法 |
| CN117099890A (zh) * | 2023-09-28 | 2023-11-24 | 泰昊乐生物科技有限公司 | 一种促进降尿酸、降血糖血脂的无色无味低聚肽液体饮料及其加工方法 |
| CN117099890B (zh) * | 2023-09-28 | 2024-03-26 | 泰昊乐生物科技有限公司 | 一种无色无味低聚肽液体饮料及其加工方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107446978A (zh) | 一种石斛小分子肽及其制备方法 | |
| CN103598544B (zh) | 以大蒜为原料进行综合利用的提取工艺 | |
| CN101461514B (zh) | 苦瓜提取物的制备方法 | |
| CN108070629B (zh) | 一种工业化生产火麻蛋白低聚肽的方法 | |
| CN101603038B (zh) | 一种溶菌酶的制备方法 | |
| CN101288437B (zh) | 以脱脂大豆粕为原料生产大豆蛋白肽及膳食纤维的方法 | |
| CN102191306B (zh) | 海蜇降压肽的酶法制备方法 | |
| CN103109971A (zh) | 制备高精氨酸核桃肽的方法 | |
| CN101104866A (zh) | 一种豆芽提取蛋白肽、异黄酮的生产工艺 | |
| CN102286590A (zh) | 一种海蜇降压肽的制备方法 | |
| CN1896267B (zh) | 利用蚕蛹制取降血压肽的方法 | |
| CN105713944A (zh) | 铁皮石斛小分子肽组合物、其提取方法及应用 | |
| CN103571900A (zh) | 低分子量大豆肽制备及其功效 | |
| CN109439717A (zh) | 一种小分子黄精多肽的提取方法 | |
| CN103735633A (zh) | 一种速溶栀子粉的制备方法 | |
| CN108546281A (zh) | 一种人参低聚肽及其制备方法和应用 | |
| CN1957736B (zh) | Nsi值=100%的大豆蛋白（肽）粉的生产方法 | |
| CN107674905A (zh) | 螺旋藻活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN105994791A (zh) | 一种桑叶速溶茶的制备方法及应用 | |
| WO2021082311A1 (zh) | 一种具有辅助降血糖功能的豌豆肽及其制备方法 | |
| CN114517218A (zh) | 一种沙棘低聚肽粉及其制备方法和用途 | |
| CN105779540A (zh) | 蓝莓小分子肽组合物、其提取方法及应用 | |
| CN101961091B (zh) | 醇法大豆浓缩蛋白功能改进与废糖蜜深加工方法 | |
| CN108048432B (zh) | 一种生姜蛋白酶提取方法 | |
| CN103589703A (zh) | 一种以鲍鱼内脏为原料制备纤维素酶的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20171208 |