CN107320446A - 一种连翘苷滴眼液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种连翘苷滴眼液及其制备方法，按其重量份包括以下组分：连翘苷1‑5份；聚卡波菲0.25‑2份；渗透压调节剂0.2‑0.9份；pH调节剂0.1‑0.3份；抑菌剂0.01‑0.03份；增稠剂0.1‑0.3份；助溶剂0.1‑2份；注射用水余量；所述连翘苷占滴眼液重量百分比为1‑5%。本发明使用聚卡波菲作为粘膜粘附性聚合物释药***，可以将水和活性分子连翘苷包埋在其中，形成稳定的水性凝胶状滴眼液，解决连翘苷在单纯水溶液中溶解性和稳定性差的问题。

Description

一种连翘苷滴眼液及其制备方法

技术领域

本发明涉及眼科制剂，尤其涉及一种连翘苷滴眼液及其制备方法。

背景技术

炎症反应是机体收到外界物、化学、生物等有害刺激造成的机体损伤反应，葡萄膜炎是一种累及葡萄膜、视网膜、视网膜血管及玻璃体的常见眼部炎症疾病，多发生于青壮年及少年儿童，在致盲眼病中有重要地位。葡萄膜炎的发病机制十分复杂，主要认为G阴性细菌感染是其发病的始动因素。内毒素(lipopolysaccharide,LPS)是G阴性细胞多糖细胞壁的主要成分，是细菌感染引起的急性炎症反应的主要元凶，LPS通过血液循环进入机体，与LPS结合蛋白LBP结合，形成二元复合物，而后LPS在CD14的帮助下与细胞膜上Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)识别并结合，通过MyD88依赖途径活化NF-κB，促进IL-6、TNF-α、MCP-1等细胞因子的释放，从而启动机体的炎症反应。

白内障是世界上首要致盲眼病，其病因尚未明确，有研究表明，氧自由基损伤是老年性白内障发生的首位危险因素。如自由基产生过多或清除过少，导致自由基聚集而产生晶体细胞、蛋白质和脂质过氧化，随之晶体发生浑浊。连翘苷具有很强的抗氧化作用，可以强有力地清除自由基，可以抑制低密度脂蛋白的氧化作用，对高密度脂蛋白的氧化也具有非常强的抑制作用。

发明内容

综上所述，本发明有必要提供一种连翘苷滴眼液，对眼部刺激性小，适用于眼部用药的。

有必要提供一种上述连翘苷滴眼液的制备方法。

一种连翘苷滴眼液，按其重量份包括以下组分：

所述连翘苷占滴眼液重量百分比为1-5％。

优选地，连翘苷滴眼液，按其重量份包括以下组分：

所述连翘苷占滴眼液重量百分比为3％。

其中，滴眼液的pH值为5.5～7.5，渗透压摩尔浓度为250～350mOsmol/kg。

其中，所述渗透压调节剂选自氯化钠、甘露醇中的一种或两种。

其中，所述pH调节剂选自为氢氧化钠、盐酸、枸橼酸钠、枸掾酸、硼酸、硼砂中的一种或多种。

其中，所述抑菌剂选自硫柳汞、季铵盐类、杜米芬、冼必泰、三氯叔丁醇、尼泊金类、三梨酸中的一种或多种。

其中，所述增稠剂选自羟丙甲纤维素、甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种。

其中，所述助溶剂为聚山梨酯-80或氢化蓖麻油。

一种制备如上所述连翘苷滴眼液的制备方法：

步骤1)、用聚卡波菲溶解连翘苷；

步骤2)、将增稠剂用部分注射用水使其分散放冷，另用部分注射用水溶解pH调节剂、渗透压调节剂、抑菌剂，搅匀过滤，合并二液；

步骤3)、加入步骤1)已溶解了连翘苷的聚卡波菲，加注射用水至全量，过滤，分装，即得滴眼液；制得的滴眼液的pH值为5.5～7.5，渗透压摩尔浓度为250～350mOsmol/kg。

目前，眼科常用的抗炎镇痛药通常为非甾体抗炎药(NSAIDs)，包括0.1％的普拉洛芬滴眼液、0.1％的双氯芬酸钠滴眼液、0.5％及0.4％的酮咯酸氨丁三醇滴眼液、0.03％的氟比洛芬钠滴眼液、1.0％的苏洛芬钠滴眼液、奈帕芬胺、溴芬酸钠、吲哚美辛等滴眼液等。NSAIDS滴眼液常见的不良反应有灼痛、刺痛、流泪、结膜水肿和充血等，其他不良反应还有角膜感觉异常、角膜上皮损伤、点状角膜炎和角膜基质浸润等。同时，角膜毒性以及眼部副作用可能与局部使用的防腐剂密切相关。另外，NSAIDS滴眼液慎用于如糖尿病、自身免疫性疾病、眼表疾病或眼部手术后早期角膜病变等。因此，临床上非常需要安全、疗效好、眼内穿透力强、性质稳定的新品种眼科外用抗炎镇痛药。

连翘苷为中药提取物，有类非甾体抗炎药(NSAIDs)的作用，有与对乙酰氨基酚类似的结构，口服后在体内代谢成trans-OH型药物，与环氧化酶结合掩盖了环氧化酶的活性中心，从而阻断了该酶催化的花生四烯酸转化为***素的代谢过程，而发挥镇痛、消炎作用，动物试验证明其对冰醋酸诱发的小鼠疼痛模型具有明显的抑制作用，能明显延长小鼠的疼痛潜伏期和减少小鼠的扭体反应次数；对甲醛诱发的小鼠疼痛模型具有明显的抑制作用，其镇痛作用是通过外周发挥的，而非中枢性镇痛。其镇痛效果均衡，口服未见非甾体类抗炎镇痛药物的不良反应，使用更安全，可长期服用，副作用小。目前连翘苷为一类新药，已获得临床批件，国内外尚未上市，在临床上拟用于解热、消炎、镇痛、抗病毒等病症。

由于血-眼屏障的原因，连翘苷的全身性用药对于眼的局部炎症没有什么效果，但副作用较低。迄今为止，还没有将连翘苷制备成眼用制剂的报道。

本发明使用聚卡波菲作为粘膜粘附性聚合物释药***，可以将水和活性分子连翘苷包埋在其中，形成稳定的水性凝胶状滴眼液，解决连翘苷在单纯水溶液中溶解性和稳定性差的问题。按本发明方法制备的连翘苷眼用制剂局部外用具有良好的眼内穿透性，眼内生物利用度较高，不良反应发生率低，提高了临床用药安全性，而且原料易得，制备工艺简单可行，产率高、成本低，可以实现工业化大规模生产，具有显著的经济效益。

具体实施方式

下面结合一些具体实施方式对本发明所述的连翘苷滴眼液及其制备方法。具体实施例为进一步详细说明本发明，非限定本发明的保护范围。

本发明所用的特征均来自市售。

对比例所用普拉洛芬滴眼液：药品准字号：H20030026

实施例1-3

首先将按表格1所示配方备料；

步骤1)、用聚卡波菲溶解连翘苷；

步骤2)、将增稠剂用部分注射用水使其分散放冷，另用部分注射用水溶解pH调节剂、渗透压调节剂、抑菌剂，搅匀过滤，合并二液；

步骤3)、加入步骤1)已溶解了连翘苷的聚卡波菲，加注射用水至全量，过滤，分装，即得滴眼液；制得的滴眼液的pH值为5.5～7.5，渗透压摩尔浓度为250～350mOsmol/kg。

表1实施例1-3滴眼液配方表

实验例1稳定性测试

加速试验：采用按本发明实施例2方法制备的3％连翘苷滴眼液在市售包装条件下，放入恒温恒湿箱，在温度40℃±2℃、相对湿度25％±5％的条件下放置，分别于第1、2、3、6个月按时取样，照质量标准草案进行测定。结果见表1：

长期试验：采用按本发明实施例2方法制备的0.005％连翘苷滴眼液在市售包装条件下，放入恒温恒湿箱，在温度25℃±2℃、相对湿度40％±5％的条件下放置，分别于第3、6、9、12、18个月按时取样，照质量标准草案进行测定。测定结果与0月测定结果比较，结果见下表。

结果表明：性状无变化，可见异物符合规定；有关物质检查中，有关物质含量无明显增长的趋势，未出现其他杂质，含量测定、pH值检查结果均无明显变化，无菌进行考察，均无菌生长，说明本发明提供的连翘苷滴眼液稳定性好。本发明其他实例产品也进行了相同的试验，并得到相同趋势的试验结果。

实验例2连翘苷滴眼液的药代动力学试验

采用按本发明实施例2方法制备的连翘苷滴眼液与普拉洛芬滴眼液对比例做眼部应用的药代动力学试验。

以健康新西兰兔(雌雄各半)为实验动物，分别在单次给药后和多次给药后进行房水检测。

单次给药：分别于给药后20、40、60、80、100、120、150、210、270、360、480min抽取房水30μl检测；

多次给药为连续给药7天，每天给药4次，每6小时一次。分别在第6天最后1次给药前、第7天第1次和第2次给药前取房水30μl检测；分别于第7天第3次给药后20、40、60、80、100、120、150、210、270、360、480min抽取房水30μl检测，房水样品经LC-MS测定。

单次给药后房水中连翘苷的C_max为35.80±9.52μg/ml；T_max为45.11±11.45min；T_1/2为80.42±14.50min；AUC_0-t为5074.11±957.11μg·min·ml^-1，AUC_0-∞为5470.11±1159.88μg·min·ml^-1；Ke为0.01±0.001min^-1。普拉洛芬滴眼液单次给药后防水中普拉洛芬的C_max为27.45±4.86μg/ml；T_max为37.52±14.76min；T_1/2为168.48±206.88min；AUC_0-t为660.45±36.08μg·min·ml^-1，AUC_0-∞为667.72±36.79μg·min·ml^-1；Ke为0.01±0.001min^-1。多剂量滴眼给药后，房水中连翘苷的T_max为56.00±14.20min；T_1/2为79.46±13.02min，K_e为0.01±0.001min^-1，AUC_0-t为6010.50±1428.11μg·min·ml^-1，AUC_0-∞为6086.50±1124.50μg·min·ml^-1，C_ss ^max为45.44±11.25μg·ml^-1，C_ss ^min为2.7±0.65μg·ml^-1，C_avg为10.74±2.54μg·ml^-1，FI(％)为95.8％±8.7％。比较多剂量与单剂量给药的药代动力学参数，Ke、T_1/2无统计学意义上的差异，表明两个剂量的连翘苷眼部给药的消除速度基本恒定，不随连续给药变化。药物的波动百分数较大、C_ss ^min很低，证明连翘苷在房水中基本不蓄积。单剂量与多剂量给药主要药代动力学参数的比较见表2。

表2单剂量与多剂量给药主要药代动力学参数

组织样本的制备：单剂量给药后用气体栓塞方法处死动物，然后用刀片刮除角膜上皮，生理盐水冲洗结膜囊，抽取房水，用棉签吸干结膜囊的水分，用显微剪取部分球结膜、角膜、虹膜、视网膜、玻璃体和巩膜，然后用生理盐水冲洗，滤纸吸干水分后放在1.5ml试管中，盖上盖子，尽快放在电子天平称重，然后转移到8ml玻璃试管中，加二氯甲烷5ml，用显微剪充分粉碎组织。用离心机离心10分钟后，取底层二氯甲烷4.5ml于另一试管中，用氮气吹干。封闭试管口，于4℃保存。对照眼用同样的方法处理。

实验表明，连翘苷广泛分布于眼内各主要组织，以结膜、角膜及虹膜中浓度最高。连翘苷滴眼液单剂量给药后眼部主要组织的分布浓度见表3。

表3连翘苷滴眼液单剂量给药后眼部主要组织的分布浓度

组织	60min	120min	240min
				结膜(μg/g)	654.20±246.11	413.52±89.46	319.11±189.27
角膜(μg/g)	613.55±210.44	506.20±187.60	287.44±50.44
				虹膜(μg/g)	287.50±116.61	110.22±34.50	107.11±87.54
视网膜(μg/g)	150.25±57.14	89.11±34.20	18.44±9.11
				玻璃体(μg/g)	4.04±2.20	3.60±2.11	2.11±1.40
巩膜(μg/g)	65.44±28.77	47.44±18.44	20.10±17.44

上表表明，应用按本发明方法制备的滴眼液单剂量和多剂量滴眼，眼内各主要组织内的连翘苷浓度都比较高，尤其以结膜、角膜及虹膜中浓度最高，说明本发明的滴眼液眼内穿透性好，浓度高，用于治疗眼内非感染性疾病完全可以达到有效的治疗浓度。

将实施例1-3制得的滴眼液按2000年药典Ⅱ附录XIJ微生物限量检查法检查细菌、霉菌、酵母菌，结果未检出。

实验例3眼部刺激性测试

眼刺激性试验取健康家兔12只，随机分为两组空白组，受试组，实验前24h检查动物双眼，选取眼部正常，无炎症、无缺陷、无陈旧性的角膜损伤家兔。两组家兔右眼分别给予生理盐水、实施例滴眼液0.1ml，左眼不作处理，作为对照。每天3次，给药3d，于末次给药后1，24，48，72h分别于裂隙灯下观察，按皮肤反应分值标准表评分并记录评分结果，见表4。

按下列公式计算每天每只动物平均积分(刺激指数)。

每天每只动物平均积分＝∑(每只动物14d的红斑和水肿总积分)/(受试动物数×14)。

表4家兔皮肤刺激性评分

组别	刺激指数
		实施例1	0
实施例2	0
		实施例3	0
对比例	5

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (9)

1.一种连翘苷滴眼液，按其重量份包括以下组分：

连翘苷 1-5份；

聚卡波菲 0.25-2份；

渗透压调节剂 0.8-0.9份；

pH调节剂 0.1-0.3份；

抑菌剂 0.01-0.03份；

增稠剂 0.1-0.3份；

助溶剂 0.1-2份；

注射用水 余量；

所述连翘苷占滴眼液重量百分比为 1-5％。

2.如权利要求1所述的连翘苷滴眼液，其特征在于按其重量份包括以下组分：

连翘苷 3份；

聚卡波菲 0.5份；

渗透压调节剂 0.85份；

pH调节剂 0.2份；

抑菌剂 0.01份；

增稠剂 0.2份；

助溶剂 2份；

注射用水 余量；

所述连翘苷占滴眼液重量百分比为 3％。

3.如权利要求1所述的连翘苷滴眼液，其特征在于：

滴眼液的pH值为5.5～7.5，渗透压摩尔浓度为250～350mOsmol/kg。

4.如权利要求1-3任一所述的连翘苷滴眼液，其特征在于：

所述渗透压调节剂选自氯化钠、甘露醇中的一种或两种。

5.如权利要求1-3任一所述的连翘苷滴眼液，其特征在于：

所述pH调节剂选自为氢氧化钠、盐酸、枸橼酸钠、枸掾酸、硼酸、硼砂中的一种或多种。

6.如权利要求1-3任一所述的连翘苷滴眼液，其特征在于：

所述抑菌剂选自硫柳汞、季铵盐类、杜米芬、冼必泰、三氯叔丁醇、尼泊金类、三梨酸中的一种或多种。

7.如权利要求1-3任一所述的连翘苷滴眼液，其特征在于：

所述增稠剂选自羟丙甲纤维素、甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种。

8.如权利要求1-3任一所述的连翘苷滴眼液，其特征在于：

所述助溶剂为聚山梨酯-80或氢化蓖麻油。

9.一种制备权利要求1-8任一项所述连翘苷滴眼液的制备方法：

步骤1)、用聚卡波菲溶解连翘苷；

步骤2)、将增稠剂用部分注射用水使其分散放冷，另用部分注射用水溶解pH调节剂、渗透压调节剂、抑菌剂，搅匀过滤，合并二液；

步骤3)、加入步骤1)已溶解了连翘苷的聚卡波菲，加注射用水至全量，过滤，分装，即得滴眼液；制得的滴眼液的pH值为5.5～7.5，渗透压摩尔浓度为250～350mOsmol/kg。