CN107286216A - 具有多个烯烃甾体化合物的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及甾体药物中间体的制备方法,特别涉及以雄甾‑4‑烯‑3,17‑双酮‑9α‑羟基为底物制备一种孕甾药物中间体孕甾‑1,4,9(11),16(17)‑四烯‑3,20‑双酮、孕甾‑4,9(11)‑双烯‑3,20‑双酮‑17α‑羟基的方法。
Description
技术领域:
本发明涉及甾体药物中间体的制备方法,特别涉及一种孕甾药物中间体孕甾-1,4,9(11),16(17)-四烯-3,20-双酮、孕甾-4,9(11)-双烯-3,20-双酮-17α-羟基的制备方法。
背景技术:
糖皮质激素是肾上腺皮质分泌的类固醇化合物,其生理性作用表现在对糖、蛋白质、脂肪、水和电解质的影响。它能抑制缓激肽、***素E2、5-羟色胺、组胺等炎性介质的合成与释放,降低血管通透性、稳定溶酶体膜、抑制吞噬作用。对各种原因引起的炎症都有很强的抗炎作用,可以减轻炎症早期的渗出、水肿、毛细血管扩张、白细胞浸润及吞噬反应,可抑制炎症后期毛细血管和纤维母细胞增生,抑制免疫反应产生的病理变化,解除该疾病的症状。
孕甾-1,4,9(11),16(17)-四烯-3,20-双酮、孕甾-4,9(11)-双烯-3,20-双酮-17α-羟基是孕甾药物重要中间体,可以制备糖皮质激素,例如CN200710061254.4中就介绍了以孕甾-1,4,9(11),16(17)-四烯-3,20-双酮为底物制备倍他米松及其系列产品的方法。
为了更好地制备孕甾-1,4,9(11),16(17)-四烯-3,20-双酮,研究人员采取了多种方法。
CN201010278556.9由霉菌脱氢物制备甲基四烯物分为两步反应:第一步脱水得甲基脱水物,第二步经还原得甲基四烯物(5ST)。
CN201510090371.8公开了以雄甾-4-烯-3,17-双酮-9α-羟基为底物,经过脱水、醚化、接侧链、生物脱氢得到孕甾-1,4,9(11),16(17)-四烯-3,20-双酮。
发明内容
本发明涉及甾体药物中间体的制备方法,特别涉及一种孕甾药物中间体孕甾-1,4,9(11),16(17)-四烯-3,20-双酮、孕甾-4,9(11)-双烯-3,20-双酮-17α-羟基的制备方法。
我们经过不断的研究,惊奇地发现,通过优化反应路线,调整工艺,可以雄甾-4-烯-3,17-双酮-9α-羟基为底物,经过脱水、氰化、缩酮、格氏反应得到孕甾-4,9(11)-双烯-3,20-双酮-17α-羟基,再经过生物脱氢、脱水反应,得到孕甾-1,4,9(11),16(17)-四烯-3,20-双酮。
一种式2化合物的制备方法,其特征是:
步骤1:
将式3化合物投入到硫酸水溶液或是1-4个碳的醇、水和硫酸组成的溶液中,搅拌直至无原料,再将反应液稀释至水中,用无机碱水溶液中和至PH值中性,过滤得到式4化合物;
步骤2:
将1-4个碳的醇和无机碱水溶液搅拌均匀,将式4化合物投入到其中,搅拌均匀。再加入2倍摩尔比以上的丙酮氰醇,控制温度在25-40℃之间搅拌反应直至无原料。再将反应液稀释入水中,用无机酸中和稀释液至PH值中性;过滤得到式5化合物;
步骤3:
将式5化合物投入到乙二醇中,再依次加入对甲苯磺酸、原甲酸三乙酯,升温至30-60℃反应直至无原料,再加入适量的有机碱中和,然后将反应液稀释入水中,过滤,得到缩酮物式6化合物;
步骤4
将干燥的式6化合物和乙烯基正丁醚投入到含有甲苯磺酸的2-6个碳的醚溶液中,搅拌反应至无原料,得到反应的中间体;再滴加入格氏试剂-甲基氯化镁/四氢呋喃,滴加完成后,室温搅拌反应至无中间体。再用饱和氯化铵水溶液缓慢滴加淬灭格式试剂,然后用无机酸调反应液的PH值小于3。加热反应液至40-70℃保温2小时,后降温至5-10℃,用无机碱水溶液调pH至中性,浓缩、稀释,过滤,得到式1化合物;
步骤5
将式1化合物粉碎或以1-4个碳的醇溶解,投入已培养好简单节杆菌的发酵罐中进行生物转化,得到化合物7。
步骤6:
将化合物7投入到醋酸中,再加入的盐酸氨基脲水溶液,升温反应直至无原料,降温至室温,稀释入水中,过滤,得化合物2。
式6化合物中4、5位和5、6位的虚线表示4、5位或5、6位存在双键。
一种式1化合物的制备方法,其特征是:
步骤1:
将式3化合物投入到硫酸水溶液或是1-4个碳的醇、水和硫酸组成的溶液中,搅拌直至无原料,再将反应液稀释至水中,用无机碱水溶液中和至PH值中性,过滤得到式4化合物;
步骤2:
将1-4个碳的醇和无机碱水溶液搅拌均匀,将式4化合物投入到其中,搅拌均匀。再加入2倍摩尔比以上的丙酮氰醇,控制温度在25-40℃之间搅拌反应直至无原料。再将反应液稀释入水中,用无机酸中和稀释液至PH值中性;过滤得到式5化合物;
步骤3:
将式5化合物投入到乙二醇中,再依次加入对甲苯磺酸、原甲酸三乙酯,升温至30-60℃反应直至无原料,再加入适量的有机碱中和,然后将反应液稀释入水中,过滤,得到缩酮物式6化合物;
步骤4
将干燥的式6化合物和乙烯基正丁醚投入到含有甲苯磺酸的2-6个碳的醚溶液中,搅拌反应至无原料,得到反应的中间体;再滴加入格氏试剂-甲基氯化镁/四氢呋喃,滴加完成后,室温搅拌反应至无中间体。再用饱和氯化铵水溶液缓慢滴加淬灭格式试剂,然后用无机酸调反应液的PH值小于3。加热反应液至55-65℃保温2小时,后降温至5-10℃,用无机碱水溶液调pH至中性,浓缩、稀释,过滤,得到式1化合物;
式6化合物中4、5位和5、6位的虚线表示4、5位或5、6位存在双键。
如上所述的制备方法,其特征是所述1-4个碳的醇为甲醇或乙醇。
如上所述的制备方法,其特征是所述步骤1中硫酸水溶液为15-50%硫酸水溶液
如上所述的制备方法,其特征是所述步骤1中1-4个碳的醇、水和硫酸组成的溶液中水、硫酸为15-50%硫酸水溶液。
如上所述的制备方法,其特征是所述步骤1中硫酸水溶液浓度为25-40%,无机碱为NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、KHCO3中的一种或几种。
如上所述的制备方法,其特征是所述步骤1中1-4个碳的醇、水和硫酸组成的溶液中水、硫酸为25-40%硫酸水溶液,,无机碱为NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、KHCO3中的一种或几种。
如上所述的制备方法,其特征是所述步骤2中无机碱为NaOH、KOH中的一种或几种,无机碱水溶液浓度为30-60%,式4化合物与无机碱水溶液的重量体积比为1:0.01-0.1。
如上所述的制备方法,其特征是所述步骤3中对甲苯磺酸为催化剂量,式5化合物与原甲酸三乙酯的重量体积比为1:0.7-2,有机碱未吡啶或三乙胺中的一种。
如上所述的制备方法,其特征是所述步骤4中式6化合物与乙烯基正丁醚的重量体积比为1:0.5-1,甲苯磺酸的2-6个碳的醚溶液浓度为0.01-1%,2-6个碳的醚为***、四氢呋喃、1,2-二氧六环、甲***、二甲醚,无机酸为盐酸,无机碱为NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、KHCO3中的一种或几种。
上述式2化合物的制备方法,其特征是步骤5生物转化中溶解式1化合物的溶剂选自甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、N,N-二甲基甲酰胺中的一种或几种,简单节杆菌的为AS 1.754、AS 1.94*。
上述式2化合物的制备方法,其特征是步骤5生物转化中斜面培养基采用以下配比:葡萄糖1.3%,酵母膏1.3%,琼脂2.0%,以及余量的蒸馏水,用无机碱溶液调至pH7.0-7.2,用于斜面培养。
上述式2化合物的制备方法,其特征是步骤5生物转化中斜面培养基采用以下配比:酵母膏0.5%,蛋白胨0.5%,葡萄搪1%,琼脂2%,自来水配制,用无机碱溶液调至pH至7.0-7.2,用于斜面培养。
上述式2化合物的制备方法,其特征是步骤5生物转化中发酵培养基为以下配比:葡萄糖1.0,酵母膏0.16%,KH2PO4 0.25%,玉米浆0.1%,以及余量的蒸馏水,用无机碱溶液调至pH 7.0-7.2。
上述式2化合物的制备方法,其特征是步骤6中盐酸氨基脲水溶液含量为3-10%,升温反应温度为60℃以上。
在步骤5中底物式1化合物的投料浓度为≤4%(相对于发酵液容积);优选投料浓度为1%~3%,发酵温度30~34℃,优选促溶剂加入量为2~5%(v/v)。生物脱氢反应时间30~72小时。
生物脱氢反应结束后终止反应,优选采用将发酵液升温至70~90℃而使菌体灭活的方法,终止反应后用优选采用溶媒萃取发酵液的形式提取脱氢产物。所述萃取用溶媒优选乙酸乙酯。
所述生物脱氢所使用简单节杆菌(拉丁命名:Arthrobacter simplex)优选以下几种菌株:AS 1.754、AS 1.94*(均由中国科学院微生物研究所提供)。
所述的生物脱氢反应可以采用以下发酵工艺:
斜面培养—一级培养—一级培养—加入化合物(1)发酵进行生物脱氢反应—终止反应。
所述的生物发酵工艺还可采用任何公知的生物发酵工艺方法,如参考《生物合成药物学》(化学工业出版社,2000年出版,褚志义主编;666~675页)中公开的生物发酵工艺。
所述的生物脱氢所用的培养基优选采用以下配比:
斜面培养基(%):葡萄糖1.3,酵母膏1.3,琼脂2.0,以及余量的蒸馏水,pH7.0-7.2,用于斜面培养
发酵培养基(%):葡萄糖1.0,酵母膏0.16,KH2PO4 0.25,玉米浆0.1,以及余量的蒸馏水,pH 7.0-7.2,用于一级、二级培养和最终的生物脱氢反应中。
具体实施方式
HPLC:高效液相色谱
实施例1
实施例1-1
将10g式3化合物投入到50ml15%硫酸水溶液中,常温搅拌至无原料,将反应液稀释入200ml冰水中,5%NaOH水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.1g。
实施例1-2
将10g式3化合物投入到25ml25%硫酸水溶液中,常温搅拌至无原料,将反应液稀释入200ml冰水中,15%KOH水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.4g。
实施例1-3
将10g式3化合物投入到20ml40%硫酸水溶液中,在10℃搅拌至无原料,将反应液稀释入300ml冰水中,20%Na2CO3水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.3g。
实施例1-4
将10g式3化合物投入到15ml50%硫酸水溶液中,0℃搅拌至无原料,将反应液稀释入300ml冰水中,20%KHCO3水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.3g。
实施例1-5
将10g式3化合物投入到50ml甲醇、50ml15%硫酸水溶液中,常温搅拌至无原料,将反应液稀释入200ml冰水中,5%NaOH水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.1g。
实施例1-6
将10g式3化合物投入到40ml乙醇、25ml25%硫酸水溶液中,常温搅拌至无原料,将反应液稀释入200ml冰水中,15%KOH水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.4g。
实施例1-7
将10g式3化合物投入到40ml无水乙醇、20ml40%硫酸水溶液中,在10℃搅拌至无原料,将反应液稀释入300ml冰水中,20%Na2CO3水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.3g。
实施例1-8
将10g式3化合物投入到50ml无水甲醇、15ml50%硫酸水溶液中,0℃搅拌至无原料,将反应液稀释入300ml冰水中,20%KHCO3水溶液中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式4化合物8.3g。
实施例2
实施例2-1
将10g式4化合物投入到30ml甲醇和1ml 60%KOH水溶液中,搅拌均匀。再加入8ml的丙酮氰醇,搅拌反应至原料点消失。再将反应液稀释入150ml水中,用稀盐酸中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式5化合物9.9g。
实施例2-2
将10g式4化合物投入到20ml甲醇和0.5ml 50%KOH水溶液中,搅拌均匀。再加入15ml的丙酮氰醇,搅拌反应至原料点消失。再将反应液稀释入300ml水中,用稀盐酸中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式5化合物10.3g。
实施例2-3
将10g式4化合物投入到15ml甲醇和0.2ml 40%氢氧化钠水溶液中,搅拌均匀。再加入20ml的丙酮氰醇,搅拌反应至原料点消失。再将反应液稀释入300ml水中,用稀盐酸中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式5化合物10.3g。
实施例2-4
将10g式4化合物投入到10ml甲醇和0.1ml 30%氢氧化钠水溶液中,搅拌均匀。再加入25ml的丙酮氰醇,搅拌反应至原料点消失。再将反应液稀释入200ml水中,用稀盐酸中和稀释液至中性。过滤,洗涤。烤干,得到式5化合物10.2g。
实施例3
实施例3-1
将10g式5化合物投入到15ml乙二醇中,再依次加入0.1g对甲苯磺酸、20ml原甲酸三乙酯,升温至55-60℃反应至原料点消失。加入适量吡啶中和。然后将反应液稀释入100ml水中,过滤,洗涤。烤干,得到式6化合物10.2g。
实施例3-2
将10g式5化合物投入到20ml乙二醇中,再依次加入0.2g对甲苯磺酸、15ml原甲酸三乙酯,升温至50-55℃反应至原料点消失。加入适量吡啶中和。然后将反应液稀释入150ml水中,过滤,洗涤。烤干,得到式6化合物10.3g。
实施例3-3
将10g式5化合物投入到25ml乙二醇中,再依次加入0.2g对甲苯磺酸、10ml原甲酸三乙酯,升温至40-45℃反应至原料点消失。加入适量吡啶中和。然后将反应液稀释入200ml水中,过滤,洗涤。烤干,得到式6化合物10.4g。
实施例3-2
将10g式5化合物投入到30ml乙二醇中,再依次加入0.3g对甲苯磺酸、20ml原甲酸三乙酯,升温至30-35℃反应至原料点消失。加入适量吡啶中和。然后将反应液稀释入200ml水中,过滤,洗涤。烤干,得到式6化合物10.3g。
实施例4
实施例4-1
将式6化合物10g和5ml的乙烯基正丁醚投入到50ml含有0.01%对甲苯磺酸的四氢呋喃溶液中,搅拌反应至无原料,得到反应的中间体。
再滴加入30ml的3M的格氏试剂甲基氯化镁/四氢呋喃中,滴加完成后,搅拌反应至无中间体。再用饱和氯化铵水溶液缓慢滴加淬灭格氏试剂,然后用浓盐酸调反应液pH至1-2。加热反应液至60-70℃保温1小时,再降温至15-20℃,用10%氢氧化钠水溶液调pH至中性,浓缩除去四氢呋喃。将浓缩残夜稀释入100ml水中。过滤,洗涤。℃烤干,得到式1化合物8.8g。
实施例4-2
将式6化合物10g和7.5ml的乙烯基正丁醚投入到40ml含有0.1%对甲苯磺酸的***溶液中,搅拌反应至无原料,得到反应的中间体。
再滴加入35ml的3M的格氏试剂甲基氯化镁/四氢呋喃中,滴加完成后,搅拌反应至无中间体。再用饱和氯化铵水溶液缓慢滴加淬灭格氏试剂,然后用浓盐酸调反应液pH至1-2。加热反应液至50-60℃保温2小时,再降温至10-15℃,用20%碳酸钾水溶液调pH至中性,浓缩除去四氢呋喃。将浓缩残夜稀释入150ml水中。过滤,洗涤。℃烤干,得到式1化合物9.0g。
实施例4-3
将式6化合物10g和9ml的乙烯基正丁醚投入到30ml含有0.1%对甲苯磺酸的1,2-二氧六环溶液中,搅拌反应至无原料,得到反应的中间体。
再滴加入40ml的3M的格氏试剂甲基氯化镁/四氢呋喃中,滴加完成后,搅拌反应至无中间体。再用饱和氯化铵水溶液缓慢滴加淬灭格氏试剂,然后用浓盐酸调反应液pH至1-2。加热反应液至45-55℃保温4小时,再降温至15-20℃,用30%碳酸氢钠水溶液调pH至中性,浓缩除去四氢呋喃。将浓缩残夜稀释入200ml水中。过滤,洗涤。℃烤干,得到式1化合物9.1g。
实施例5
实施例5-1
将简单节杆菌(AS 1.754)依次进行斜面培养、一级培养和二级培养,培养温度为31-33℃,将20g式6化合物溶于20ml四氢呋喃投入5L发酵罐中,投料浓度为2%,反应温度为31℃。直至式6化合物剩余低于5%,反应完成后升温至70℃终止反应,采用乙酸乙酯萃取提取发酵液,将有机相浓缩,甲醇重结晶得到式7化合物17.5g。
实施例5-2
将简单节杆菌(AS 1.94*)依次进行斜面培养、一级培养和二级培养,培养温度为29-32℃,将20g式6化合物溶于30ml甲醇投入5L发酵罐中,投料浓度为3%,反应温度为32℃,直至式6化合物剩余低于5%,反应完成后升温至70℃终止反应,采用氯仿萃取提取发酵液,将有机相浓缩,甲醇重结晶得到式7化合物18.2g。
实施例5-3
将简单节杆菌(AS 1.754)依次进行斜面培养、一级培养和二级培养,培养温度为30-32℃,将20g式6化合物溶于40mlN,N-二甲基甲酰胺投入5L发酵罐中,投料浓度为4%,反应温度为32℃,直至式6化合物剩余低于5%,反应完成后升温至70℃终止反应,采用二氯甲烷萃取提取发酵液,将有机相浓缩,甲醇重结晶得到式7化合物18.6g。
实施例6
实施例6-1
将10g式7化合物投入到50ml醋酸中,再加入10%的盐酸氨基脲水溶液。将反应混合液加热至60-65℃反应至无原料点。降温至室温,稀释入200ml水中,过滤,得到8.9g式2化合物。
实施例6-2
将10g式7化合物投入到100ml醋酸中,再加入8%的盐酸氨基脲水溶液。将反应混合液加热至70-75℃反应至无原料点。降温至室温,稀释入400ml水中,过滤,得到9.1g式2化合物。
实施例6-3
将10g式7化合物投入到100ml醋酸中,再加入5%的盐酸氨基脲水溶液。将反应混合液加热至80-85℃反应至无原料点。降温至室温,稀释入400ml水中,过滤,得到9.2g式2化合物。
实施例6-4
将10g式7化合物投入到150ml醋酸中,再加入3%的盐酸氨基脲水溶液。将反应混合液加热至85-90℃反应至无原料点。降温至室温,稀释入500ml水中,过滤,得到9.2g式2化合物。
Claims (10)
1.一种式2化合物的制备方法,其特征是:
步骤1:
将式3化合物投入到硫酸水溶液或是1-4个碳的醇、水和硫酸组成的溶液中,搅拌直至无原料,再将反应液稀释至水中,用无机碱水溶液中和至PH值中性,过滤得到式4化合物;
步骤2:
将1-4个碳的醇和无机碱水溶液搅拌均匀,将式4化合物投入到其中,搅拌均匀。再加入2倍摩尔比以上的丙酮氰醇,控制温度在25-40℃之间搅拌反应直至无原料。再将反应液稀释入水中,用无机酸中和稀释液至PH值中性;过滤得到式5化合物;
步骤3:
将式5化合物投入到乙二醇中,再依次加入对甲苯磺酸、原甲酸三乙酯,升温至30-60℃反应直至无原料,再加入适量的有机碱中和,然后将反应液稀释入水中,过滤,得到缩酮物式6化合物;
步骤4
将干燥的式6化合物和乙烯基正丁醚投入到含有甲苯磺酸的2-6个碳的醚溶液中,搅拌反应至无原料,得到反应的中间体;再滴加入格氏试剂-甲基氯化镁/四氢呋喃,滴加完成后,室温搅拌反应至无中间体。再用饱和氯化铵水溶液缓慢滴加淬灭格式试剂,然后用无机酸调反应液的PH值小于3。加热反应液至40-70℃保温2小时,后降温至5-10℃,用无机碱水溶液调pH至中性,浓缩、稀释,过滤,得到式1化合物;
步骤5
将式1化合物粉碎或以1-4个碳的醇溶解,投入已培养好简单节杆菌的发酵罐中进行生物转化,得到化合物7。
步骤6:
将化合物7投入到醋酸中,再加入的盐酸氨基脲水溶液,升温反应直至无原料,降温至室温,稀释入水中,过滤,得化合物2。
式6化合物中4、5位和5、6位的虚线表示4、5位或5、6位存在双键。
2.一种式1化合物的制备方法,其特征是:
步骤1:
将式3化合物投入到硫酸水溶液或是1-4个碳的醇、水和硫酸组成的溶液中,搅拌直至无原料,再将反应液稀释至水中,用无机碱水溶液中和至PH值中性,过滤得到式4化合物;
步骤2:
将1-4个碳的醇和无机碱水溶液搅拌均匀,将式4化合物投入到其中,搅拌均匀。再加入2倍摩尔比以上的丙酮氰醇,控制温度在25-40℃之间搅拌反应直至无原料。再将反应液稀释入水中,用无机酸中和稀释液至PH值中性;过滤得到式5化合物;
步骤3:
将式5化合物投入到乙二醇中,再依次加入对甲苯磺酸、原甲酸三乙酯,升温至30-60℃反应直至无原料,再加入适量的有机碱中和,然后将反应液稀释入水中,过滤,得到缩酮物式6化合物;
步骤4
将干燥的式6化合物和乙烯基正丁醚投入到含有甲苯磺酸的2-6个碳的醚溶液中,搅拌反应至无原料,得到反应的中间体;再滴加入格氏试剂-甲基氯化镁/四氢呋喃,滴加完成后,室温搅拌反应至无中间体。再用饱和氯化铵水溶液缓慢滴加淬灭格式试剂,然后用无机酸调反应液的PH值小于3。加热反应液至55-65℃保温2小时,后降温至5-10℃,用无机碱水溶液调pH至中性,浓缩、稀释,过滤,得到式1化合物;
式6化合物中4、5位和5、6位的虚线表示4、5位或5、6位存在双键。
3.如权利要求1、2所述的制备方法,其特征是所述步骤1中硫酸水溶液为15-50%硫酸水溶液。
4.如权利要求1、2所述的制备方法,其特征是所述步骤1中所述步骤1中1-4个碳的醇、水和硫酸组成的溶液中水、硫酸为25-40%硫酸水溶液,无机碱为NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、KHCO3中的一种或几种。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征是所述步骤2中无机碱为NaOH、KOH中的一种或几种,无机碱水溶液浓度为30-60%,式4化合物与无机碱水溶液的重量体积比为1:0.01-0.1。
6.如权利要求1、2所述的制备方法,其特征是所述步骤3中对甲苯磺酸为催化剂量,式5化合物与原甲酸三乙酯的重量体积比为1:0.7-2,有机碱为吡啶或三乙胺中的一种。
7.如权利要求1、2所述的制备方法,其特征是所述步骤4中式6化合物与乙烯基正丁醚的重量体积比为1:0.5-1,甲苯磺酸的2-6个碳的醚溶液浓度为0.01-1%,2-6个碳的醚为***、四氢呋喃、1,2-二氧六环、甲***、二甲醚,无机酸为盐酸,无机碱为NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、KHCO3中的一种或几种。
8.如权利要求1所述的制备方法,其特征是步骤5生物转化中溶解式1化合物的溶剂选自甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、N,N-二甲基甲酰胺中的一种或几种,简单节杆菌的为AS 1.754、AS 1.94*。
9.如权利要求1所述的制备方法,其特征是步骤5生物转化中斜面培养基采用以下配比:葡萄糖1.3%,酵母膏1.3%,琼脂2.0%,以及余量的蒸馏水,用无机碱溶液调至pH7.0-7.2,用于斜面培养。
10.如权利要求1所述的制备方法,其特征是步骤5生物转化中发酵培养基为以下配比:葡萄糖1.0,酵母膏0.16%,KH2PO4 0.25%,玉米浆0.1%,以及余量的蒸馏水,用无机碱溶液调至pH 7.0-7.2。
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