CN107228906B - 利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中n,n-二异丙基乙二胺残留量的方法 - Google Patents
利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中n,n-二异丙基乙二胺残留量的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107228906B CN107228906B CN201610167810.5A CN201610167810A CN107228906B CN 107228906 B CN107228906 B CN 107228906B CN 201610167810 A CN201610167810 A CN 201610167810A CN 107228906 B CN107228906 B CN 107228906B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- temperature
- solution
- acotiamide
- sample
- diisopropylethylenediamine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本发明公开了一种利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中N,N‑二异丙基乙二胺残留量的方法，所述方法的分析条件为：采用非极性毛细管色谱柱；温度控制方式为程序升温，进样采用分流模式，载气为氮气，通过顶空进样器进样；检测器为氢火焰离子化检测器。该方法灵敏度高、准确度高、专属性强、重现性良好，操作简便，计算简单，从而可以实现阿考替胺原料药的质量控制，从而保障临床用药的安全性。
Description
技术领域
本发明涉及化学分析领域，具体而言，本发明涉及一种利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中N,N-二异丙基乙二胺残留量的方法。
背景技术
盐酸阿考替胺(Acotiamide Hydrochloride)，如式I所示，化学名为N-{2-[双(1-甲基乙基)氨基]乙基}-2-[(2-羟基-4,5-二甲氧基苯甲酰基)氨基]噻唑-4-甲酰胺盐酸盐三水合物。盐酸阿考替胺用于治疗功能性消化不良(FD)的餐后饱胀感、上腹部饱胀感、早饱感，是全球第一个功能性消化不良(FD)治疗用药。由日本安斯泰来制药公司与泽里新药株式会社联合开发，于2013年3月25被批准，2013年6月6日在日本上市。截止到2015年12月，国内尚无盐酸阿考替胺原料药和制剂被CFDA批准上市。
盐酸阿考替胺是一种新型的选择乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂。神经递质乙酰胆碱ACh是胃肠动力的一个重要调节物质，乙酰胆碱酯酶(AChE)是一种降解(通过其水解活性)ACh成为胆碱和乙酸的酶，作用为终止突触的传递。阿考替胺通过抑制乙酰胆碱酶AChE活性作用，从而抑制神经终末游离的乙酰胆碱ACh的分解，使胃部前庭部及胃体部的ACh增多而导致收缩和运动。
在盐酸阿考替胺合成的第二步工艺中，用到原料N,N-二异丙基乙二胺。虽然N,N-二异丙基乙二胺在中国药典和ICH中均未规定其限度，但在EMEA中已规定三乙胺的限度为320ppm，而N,N-二异丙基乙二胺与三乙胺属同一类型的溶剂，应该以严格的320ppm来控制。
目前检测N,N-二异丙基乙二胺的分析方法主要为酸碱滴定法，采用酸碱滴定法可以测定单纯N,N-二异丙基乙二胺的含量，但如果需要测定在其他物质中N,N-二异丙基乙二胺的残留，该方法的准确度和灵敏度比较差。另一方面，N,N-二异丙基乙二胺无紫外吸收，不适合用液相来检测。
目前，测定原料药中N,N-二异丙基乙二胺残留量的方法仍有待改进。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中N,N-二异丙基乙二胺残留量的方法，该方法灵敏度高、准确度高、专属性强、重现性良好，直接将样品溶解后用顶空气相法检测，以外标法计算，操作简便，计算简单，实现了阿考替胺的质量控制，从而保障临床用药的安全性。
本发明提供了一种利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中N,N-二异丙基乙二胺残留量的方法。根据本发明的实施例，所述方法的分析条件为：
采用非极性毛细管色谱柱；
温度控制方式为程序升温，进样采用分流模式，载气为氮气，通过顶空进样器进样；
检测器为氢火焰离子化检测器。
由此，根据本发明实施例的利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中N,N-二异丙基乙二胺残留量的方法通过采用程序升温直接进样的方式检测，可以有效避免空白峰对目标峰的干扰，从而提高检测准确度，同时采用该方法可以实现对阿考替胺原料药中的N,N-二异丙基乙二胺的残留进行快速高效的分离和含量测定，且该检测方法专属性强、精密度高、准确性强、操作方便，从而有效控制药品的质量。
根据本发明的一些实施例的利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中N,N-二异丙基乙二胺残留量的方法，还可以具有以下附加技术特征：
在本发明的一些实施例中，待测样品溶液是将所述原料药与稀释剂混合配制而成的。
在本发明的一些实施例中，对照品溶液是将N,N-二异丙基乙二胺与稀释剂混合配制而成的。
在本发明的一些实施例，所述非极性毛细管色谱柱为DB-1毛细管色谱柱。由此得到的分离效果最佳。
在本发明的一些实施例，所述程序升温为：初温30-50℃，维持约3-7min，再以10-30℃/min的速率升至220℃，维持约3-7min。
在本发明的一些实施例，所述程序升温为：在40℃保持5min后以20℃/min的速度升至220℃，保持5min。由此，可以进一步提高N,N-二异丙基乙二胺残留量测定的准确度。
在本发明的一些实施例，进样分流比为：(5:1-15:1)，优选为10:1。由此得到的分离效果最佳。
根据本发明的一些实施例，所述载气的流速为1.8-2.2ml/min，优选为2ml/min。
在本发明的一些实施例，所述顶空进样条件为：顶空平衡温度：100-120℃，定量环平衡温度：110-130℃，传输管线温度：120-140℃，顶空平衡时间：20-30min，GC循环时间：25-30min。由此，可以进一步提高分离度。
在本发明的一些实施例，所述检测器气体流速：氢气30ml/min，空气400ml/min，尾吹氮气：30ml/min。
在本发明的一些实施例，所述稀释剂为含有DMSO和碳酸钾水溶液的混合液，其中，所述碳酸钾水溶液的初始浓度为8体积％。
在本发明的一些实施例，在所述稀释剂中，所述DMSO和碳酸钾水溶液的体积比为3：2。
在本发明的一些实施例，所述待测样品溶液的浓度为100mg/ml。
在本发明的一些实施例，所述对照品溶液的浓度为0.032mg/ml。
在本发明的一些实施例，所述气相色谱仪的进样口温度为220℃。由此，可以使样品中N,N-二异丙基乙二胺完全气化，从而提高检测准确度。
在本发明的一些实施例，所述检测器的温度为280℃。由此，可以防止色谱***中的水汽冷凝及杂质附着残留在检测器中，对检测器造成损伤，从而进一步提高检测准确度。
在本发明的一些实施例，所述气相色谱仪为Agilent 7890A气相色谱仪。
在本发明的一些实施例，所述顶空进样器为Agilent 7697A顶空进样器。
根据本发明的一个具体实施例，所述测定采用30m×0.32mm×1.0μm的DB-1毛细管色谱柱，温度控制方式为：
| 升温速率/℃/min | 温度/℃ | 保持时间/min |
| / | 40 | 5 |
| 20 | 220 | 5 |
其中，所述气相色谱仪的进样口温度为220℃，所述检测器的温度为280℃，分流比10:1。
发明的目的在于通过以下技术方案来实现：阿考替胺中残留N,N-二异丙基乙二胺的测定方法，它包括以下步骤：
A：待测样品溶液的制备：取阿考替胺样品适量，用二甲基亚砜－8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)溶解并稀释成100mg/ml的溶液，作为待测样品溶液；
B：对照品贮备液的制备：取N,N-二异丙基乙二胺对照品适量，用二甲基亚砜溶解并稀释成1.6mg/ml的溶液。
对照品溶液：精密移取上述对照品贮备液1ml，置50ml量瓶中，用甲基亚砜－8体积％碳酸钾水溶液(3:2)稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液(0.032mg/ml)。
C：采用顶空气相色谱法进行检测，记录色谱图。
D：计算：按外标法计算N,N-二异丙基乙二胺的含量。
式中：C对照：对照品溶液的浓度；C待测样品：待测样品溶液的浓度；
A对照：对照品溶液的峰面积；A待测样品：待测样品溶液的峰面积；
其中所述的气相色谱条件为：
色谱柱：100％二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱(柱长30m，内径0.32mm，液膜厚度1.0um)为色谱柱；程序升温：初温30-50℃，维持约3-7min，再以10-30℃/min的速率升至220℃，维持约3-7min；进样口温度220℃，检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度为250-280℃；载气为氮气，载气流速为每分钟1.8-2.2ml。
本发明具有以下优点：本发明提供的阿考替胺中残留溶剂N,N-二异丙基乙二胺的测定方法，该方法具有准确度高，专属性强，检测灵敏度高(检测限：1ppm)，测定简单快捷的优点，可定性或定量检测出阿考替胺中残留的N,N-二异丙基乙二胺，保证了阿考替胺的质量，从而提高了临床用药的安全性。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1为实施例1中的N,N-二异丙基乙二胺的检测限色谱图；
图2为实施例1中的N,N-二异丙基乙二胺的定量限色谱图；
图3为实施例2中的加样回收溶液的色谱图；
图4为实施例3中的对照品溶液的色谱图；
图5为实施例3中的阿考替胺样品溶液1的色谱图；
图6为实施例4中的阿考替胺样品溶液2的色谱图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
本发明实施例中所用的阿考替胺原料药为自制。
N,N-二异丙基乙二胺对照品：批号：L5B0N20厂家：J﹠K
实施例1检测限与定量限
1、色谱条件：色谱柱：DB-1毛细管色谱柱(30m×0.32mm×1.0um)
检测器：氢火焰离子化检测器
进样口温度：220℃
检测器温度：280℃
柱温：程序升温，在40℃保持5min后以20℃/min的速度升至220℃，保持5min
载气流速：氮气(2ml/min)
检测器气体流速：氢气：30ml/min空气：400ml/min尾吹氮气：30ml/min
分流比：10:1
运行时间：19min
顶空设置：顶空平衡温度：110℃；定量环平衡温度：120℃；传输管线温度：130℃；顶空平衡时间：20min GC循环时间：25min
2、实验方法：
对照品贮备液：称取N,N-二异丙基乙二胺对照品81.58mg，精密称定，置50ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度。
对照品溶液：精密移取上述对照品贮备液1ml，置50ml量瓶中，用二甲基亚砜-8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)稀释至刻度，即得对照品溶液。
定量限溶液：精密移取对照品溶液1ml，置100ml量瓶中，用二甲基亚砜-8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)稀释并定容至刻度，精密量取5ml，置20ml顶空瓶中，加盖密封。
检测限溶液：精密移取定量限溶液3ml，置10ml量瓶中，用二甲基亚砜-8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)稀释并定容至刻度，精密量取5ml，置20ml顶空瓶中，加盖密封。
分别取定量限溶液和检测限溶液注入气相色谱仪，记录色谱图。定量限和检测限图谱分别见图1、图2，分析结果如表1所示：
表1 分析结果
| 参数 | 浓度(μg/ml) | 百分含量(ppm) | 峰面积 | 信噪比 |
| 检测限溶液 | 0.0979 | 1 | 0.31 | 3.8 |
| 定量限溶液 | 0.3263 | 3 | 1.09 | 14.8 |
结论：N,N-二异丙基乙二胺在阿考替胺中的检测灵敏度高，检测限为1ppm，定量限为3ppm。
实施例2准确度试验
1、色谱条件：同实施例1
2、实验方法：
空白溶液：二甲基亚砜-8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)
待测样品溶液的配制：称取阿考替胺样品约500mg，精密称定，置20ml顶空瓶中，移取二甲基亚砜-8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)5ml溶解，加盖密封，每批平行配制2份。
对照品溶液的配制：精密移取实施例1中的对照品贮备液2ml，置100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，即得对照品溶液。精密量取对照品溶液5ml，置20ml顶空瓶中，加盖密封(平行移取6份)。
加样回收溶液：称取阿考替胺约500mg，精密称定，平行称取6份，分别置20ml顶空瓶中，分别移取对照品溶液5ml溶解，加盖密封。平行配制6份。
分别取空白溶液，待测样品溶液和加样回收溶液注入气相色谱仪，记录色谱图(图3)。计算N,N-二异丙基乙二胺的回收率，分析结果如表2所示。
表2 分析结果
结论：N,N-二异丙基乙二胺在阿考替胺中的回收率为84.92％，回收率高，能保证准确检测出阿考替胺中N,N-二异丙基乙二胺的残留量。
实施例3阿考替胺中残留N,N-二异丙基乙二胺的检测
A：待测样品溶液的制备：精密称取阿考替胺样品501.12mg，至20ml顶空瓶中，用二甲基亚砜-8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)5ml溶解，加盖密封。
B：对照品溶液的配制：同实施例1。
C：分别取对照品溶液和待测样品溶液注入气相色谱仪，记录色谱图。
D：计算：按外标法计算残留N,N-二异丙基乙二胺的量。
色谱条件：同实施例1
实验结果：N,N-二异丙基乙二胺对照品溶液图谱如图4所示，待测样品溶液的色谱图如图5所示，图中未检测出N,N-二异丙基乙二胺峰，经计算，阿考替胺中N,N-二异丙基乙二胺的残留量为0％。
实施例4阿考替胺中残留N,N-二异丙基乙二胺的检测
A：待测样品溶液的制备：精密称取阿考替胺样品502.58mg，至20ml顶空瓶中，用二甲基亚砜-8体积％碳酸钾水溶液(3:2)(v/v)5ml溶解，加盖密封。
B：对照品溶液的配制：同实施例1。
C：分别取对照品溶液和待测样品溶液注入气相色谱仪，记录色谱图。
D：计算：按外标法计算残留N,N-二异丙基乙二胺的量。
色谱条件：同实施例1
实验结果：待测样品溶液的色谱图如图6所示，图中未检测出N,N-二异丙基乙二胺峰，经计算，阿考替胺中N,N-二异丙基乙二胺的残留量为0％。
Claims (12)
1.一种利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中N,N-二异丙基乙二胺残留量的方法，其特征在于，所述方法的分析条件为：
采用DB-1毛细管色谱柱；
温度控制方式为程序升温，进样采用分流模式，载气为氮气，通过顶空进样器进样；
检测器为氢火焰离子化检测器；
顶空进样条件为：
顶空平衡温度：100℃-120℃；
定量环平衡温度：110℃-130℃；
传输管线温度：120℃-140℃；
顶空平衡时间：20min-30min；
GC循环时间：25min-30min；
待测样品溶液是将所述原料药与稀释剂混合配制而成的，所述稀释剂为含有DMSO和碳酸钾水溶液的混合液；
程序升温程序为在40℃保持5min后以20℃/min的速度升至220℃，保持5min；
所述气相色谱仪的进样口温度为220℃，所述检测器的温度为280℃，进样分流比为10:1。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，对照品溶液是将N,N-二异丙基乙二胺与稀释剂混合配制而成的。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载气的流速为1.8-2.2ml/min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载气的流速为2ml/min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测器的气体流速：氢气30ml/min，空气400ml/min，尾吹氮气：30ml/min。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述碳酸钾水溶液的初始浓度为8体积％。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述稀释剂中，所述DMSO和所述碳酸钾水溶液的体积比为3：2。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品溶液的浓度为100mg/ml。
9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的浓度为0.032mg/ml。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述DB-1毛细管色谱柱的尺寸为30m×0.32mm×1.0μm。
11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱仪为Agilent 7890A气相色谱仪。
12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述顶空进样器为Agilent 7697A顶空进样器。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610167810.5A CN107228906B (zh) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | 利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中n,n-二异丙基乙二胺残留量的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610167810.5A CN107228906B (zh) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | 利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中n,n-二异丙基乙二胺残留量的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107228906A CN107228906A (zh) | 2017-10-03 |
| CN107228906B true CN107228906B (zh) | 2021-07-16 |
Family
ID=59932749
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610167810.5A Active CN107228906B (zh) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | 利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中n,n-二异丙基乙二胺残留量的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107228906B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111289676B (zh) * | 2020-01-20 | 2022-08-16 | 南京林业大学 | 一种检测硫酸特布他林原料药中残留叔丁胺的方法 |
| CN113640426B (zh) * | 2021-08-23 | 2023-07-14 | 宜昌人福药业有限责任公司 | 一种气相色谱法测定盐酸阿考替胺原料药中胺残留的方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8212078B2 (en) * | 2005-03-28 | 2012-07-03 | Albemarle Corporation | Diimines and secondary diamines |
| CN103018387B (zh) * | 2012-12-17 | 2016-01-27 | 四川科伦药物研究院有限公司 | 一种β-内酰胺抗生素中三乙胺残留量的检测方法 |
| CN103487541B (zh) * | 2013-09-05 | 2016-04-20 | 上海新亚药业有限公司 | 一种同时检测头孢曲松钠中多种残留溶剂的方法 |
| CN105021740A (zh) * | 2015-08-15 | 2015-11-04 | 杭州新博思生物医药有限公司 | N1,n1-二异丙基乙二胺的高效液相色谱分析方法 |
-
2016
- 2016-03-23 CN CN201610167810.5A patent/CN107228906B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107228906A (zh) | 2017-10-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108614058A (zh) | 测定甘氨酸原料药中有机溶剂残留量的顶空气相色谱法 | |
| CN112345651B (zh) | 测定水合氯醛或其制剂中卤代酸含量的方法 | |
| CN104655751A (zh) | 一种检测达泊西汀中有机溶剂残留的方法 | |
| CN103698424B (zh) | 一种测定难溶性铝盐药物中有机溶剂的检测方法 | |
| CN107228906B (zh) | 利用气相色谱仪测定阿考替胺原料药中n,n-二异丙基乙二胺残留量的方法 | |
| CN113295791B (zh) | 一种舒巴坦钠中溴乙烷的分析方法 | |
| CN111487340A (zh) | 一种奥贝胆酸原料药中有机残留溶剂的检测方法 | |
| CN112710758A (zh) | 一种盐酸他喷他多原料药中残留溶剂的检测方法 | |
| CN109085277A (zh) | 一种头孢米诺钠中残留溶剂吡啶的检测方法 | |
| CN106198819A (zh) | 顶空气相色谱法测定西格列汀原料药中残留溶剂的方法 | |
| CN107703225B (zh) | 一种测定盐酸溴己新原料中有机溶剂残留的检测方法 | |
| CN113514566A (zh) | 一种高哌嗪中潜在残留溶剂苯的检测方法 | |
| CN112710762B (zh) | 硫酸二甲酯残留量的测定方法 | |
| CN114235982A (zh) | 一种利用气相色谱分析利格列汀中四氯化碳溶剂残留的方法 | |
| CN113030323A (zh) | 一种尼洛替尼原料药中残留溶剂的检测方法 | |
| CN113533610A (zh) | 一种测定原料药中哌啶残留的检测方法 | |
| CN109633027B (zh) | 一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法 | |
| CN113640426A (zh) | 一种气相色谱法测定盐酸阿考替胺原料药中胺残留的方法 | |
| CN105403635B (zh) | 丙二醇中残留溶剂三氯乙烯的检测方法 | |
| CN111380992A (zh) | 一种检测福莫特罗原料药中有机溶剂残留量的方法 | |
| CN116500172B (zh) | 一种酸性底物中胺类溶剂的检测方法 | |
| CN112697910B (zh) | 一种顶空-气相色谱法测定异硫蓝物中乙酸的方法 | |
| CN113466367B (zh) | 乌苯美司原料药中α-苯乙胺杂质检测方法 | |
| CN112684039B (zh) | 一种伊马替尼原料药中有机溶剂残留量的检测方法 | |
| CN107796880B (zh) | 盐酸维拉佐酮中基因毒杂质的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 430075 Guanggu Biological City B3-4, 666 High-tech Avenue, Donghu New Technology Development Zone, Wuhan City, Hubei Province Applicant after: Sino US huashitong biomedical technology (Wuhan) Co.,Ltd. Address before: 430075 Guanggu Biological City B3-4, 666 High-tech Avenue, Donghu New Technology Development Zone, Wuhan City, Hubei Province Applicant before: WATERSTONE PHARMACEUTICALS(WUHAN) Co.,Ltd. |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |