CN107118250B

CN107118250B - 一种no供体型齐墩果酸衍生物及其制备方法和用途

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Publication number: CN107118250B
Application number: CN201710403742.2A
Authority: CN
Inventors: 黄张建; 张奕华; 巩岩; 孔辉; 钱帅; 程玉生; 解卫平; 王虹
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2017-06-01
Filing date: 2017-06-01
Publication date: 2019-06-21
Anticipated expiration: 2037-06-01
Also published as: CN107118250A

Abstract

本发明涉及药物化学和药物治疗学领域，具体涉及一种NO供体型齐墩果酸衍生物，NO供体能够很有效的舒张血管，而CDDO类化合物能够抑制肺动脉血管重构，具体涉及一种NO供体舒张血管同CDDO及其衍生物抑制血管重构的联合用药策略、合成及抗肺动脉高压活性评价。该类化合物可用于肺血管阻力增大而导致的肺动脉压力升高。本发明还涉及这类化合物的制备方法以及含有它们的药物组合。

Description

一种NO供体型齐墩果酸衍生物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及药物化学和药物治疗学领域，涉及一种NO供体型齐墩果酸衍生物，具体涉及一种NO供体舒张血管同CDDO-Me抑制血管重构的联合用药策略、合成及抗肺动脉高压活性评价。该类化合物可用于肺血管阻力增大而导致的肺动脉压力升高。本发明还涉及这类化合物的制备方法以及含有它们的药物组合。

背景技术

肺动脉高压(Pulmonary arterial hypertension，PAH)是一类肺血管阻力增大，肺动脉压力升高，最终导致右心衰竭甚至死亡的恶性进展性疾病。近年来，随着对PAH发病机制的深入研究和相应的治疗药物上市，PAH患者的平均生存时间已由上世纪80年代的2.8年延长到现在的6.7年。但到目前为止PAH的治疗仍未取得突破性进展，较高的发病率和死亡率使其具有“心血管***的恶性肿瘤”之称，严重危害人类的生命和健康。

齐墩果酸(oleanolic acid，OA)及其衍生物是一类重要的五环三萜化合物，具有抗炎、抗肿瘤和抗病毒等多种生物活性。通过对OA进行结构改造，合成了A环含α-氰基-α，β-不饱和酮(α-cyano-α，β-unsaturated ketone，CUK)的衍生物CDDO、CDDO-Me以及CDDO-IM。

化合物CDDO-Me显示了极强的生物活性，是一个半合成的齐墩果酸衍生物。临床前研究发现，它通过抑制NF-κB通路不仅降低ET-1的分泌以及ETA受体表达而舒张血管，而且可促进肺动脉平滑肌细胞的凋亡，产生抑制肺动脉重构的作用；更重要的是，CDDO-Me是Nrf2的诱导剂，具有强效的抗炎、抗氧化作用，改善代谢紊乱，抑制血管增生，防止肺动脉血管重构。美国Reata Pharmaceuticals公司近期已完成了CDDO-Me治疗肺动脉高压的II期临床研究。口服CDDO-Me(2.5-10mg/天)能明显改善PAH病人症状。与安慰剂组相比，6MWD(6分钟步行距离，用于临床评价PAH病人心肺功能的经典方法)平均增加了21.4米；此外，CDDO-Me在临床试验中显示了良好的耐受性，未见其治疗糖尿病肾病III期临床试验中出现的体液潴留及其它不良反应。α，β-不饱和酮是许多活性天然产物和化学合成小分子中的药效团，可以作为迈克尔受体与体内多种生物大分子亲核性基团(如半胱氨酸残基的巯基)发生加成反应，通过共价结合，调节细胞内众多信号通路，发挥及其广泛的生物学活性及疾病治疗作用。研究表明，CDDO-Me通过激活ARE-Nrf2-Keap1信号通路产生抗炎活性，究其分子机理，主要是CDDO-Me的A环α-氰基-α，β-不饱和酮(α-cyano-α，β-unsaturated ketone，CUK)与Keap1蛋白BTB区域151位CYS的巯基发生迈克尔加成反应所致。

药理研究表明，CDDO及其衍生物在pM-nM浓度下，抑制炎症因子，保护正常细胞；在100-300nM浓度下，促进前癌/癌细胞分化，抑制肿瘤细胞生长；在0.02-2μM浓度下，抑制肿瘤细胞增殖；在1-5μM浓度下，能选择性地诱导肿瘤细胞凋亡，对正常细胞无显著影响。CDDO及其衍生物通过激活Nrf2-ARE通路，对许多由炎症和氧化应激导致的疾病具有保护作用，主要包括肿瘤、阿尔兹海默病(Alzheimer's disease，AD)、帕金森病(Parkinson'sdisease，PD)、慢性梗阻性疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)、哮喘、糖尿病及其并发症、多发性硬化症(multiple sclerosis，MS)、骨关节炎以及类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)等。此外，这类化合物还对吸烟，紫外线，缺血再灌注等多种原因导致的眼部损伤具有保护作用。除了这些涵盖了主要脏器的慢/急性疾病，CDDO及其衍生物还对辐射和化学试剂造成的伤害具有保护作用，同时还对免疫和代谢***具有调节作用。

以CDDO为先导化合物，对其C28位羧基进行修饰，发现衍生物CDDO-IM抗炎活性比CDDO和CDDO-Me提高了几十乃至上百倍，化合物的临床试验主要针对胰腺癌、白血病、黑色素瘤等肿瘤疾病，以及II型糖尿病并发的慢性肾病、吸烟引起的慢性炎症疾病等。

NO气体也广泛用于PAH的治疗。吸入的NO从肺泡弥散至肺动脉平滑肌细胞，产生血管舒张作用，剩余的NO可入血被血红蛋白(Hb)快速清除。因此，吸入NO的优势在于其血管舒张活性很大程度上被限制在肺部。NO吸入法已被美国FDA以及欧洲药品管理局批准用于临床治疗新生儿持续肺动脉高压(PPNH)。此外，NO吸入法也可用于稳定心脏手术后的病人，治疗急性呼吸衰竭和慢性PAH等。但吸入NO存在一些缺陷，限制了其广泛应用。例如，NO起效快，清除率也快，需要多次吸入；过量的NO入血后可和血红蛋白反应，导致高铁血红蛋白血症。与直接吸入NO气体不同，雾化吸入的NO供体药物能够实现缓慢、平稳地释放NO，使降低肺动脉压的作用更为持久，不易产生毒副作用。扩血管药物在过去PAH治疗中发挥了主导作用，而近年来抑制肺动脉血管重构研究加深了对PAH发病机制的理解，并研发了一些相关药物进入临床研究。

有鉴于此，本发明提出具有舒张肺动脉血管和抑制肺血管重构双重作用的药物比单一作用的药物具有更好的PAH治疗效果。

发明内容

目的：本发明提供一种NO供体型齐墩果酸衍生物及其制备方法和用途，舒张血管和抑制血管重构的联合用药设计、合成及抗肺动脉高压活性评价。药理实验证明，该类化合物具有良好的抗肺动脉高压活性，因此，它们可用于预防和治疗肺动脉高压病。

技术方案：为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

本发明公开了一种NO供体型齐墩果酸衍生物，其特征在于：通式I所示的化合物或其旋光异构体，对映体、非对映体、外消旋体或外消旋混合物，或其药学上可接受的盐或酯：

其中：

R代表氢原子或C1-C10直链或支链烷基；

式I中标明的五个手性中心(分别用*1、*2、*3、*4和*5表示)为R构型或S构型。

进一步地，通式1所示的化合物，其特征在于：

R代表甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、苯基、苄基；

式I中手性中心*1为S构型，手性中心*2为R构型，手性中心*3为S构型，手性中心*4为S构型，手性中心*5为R构型；

具体来说，通式I所示化合物优选自下列化合物：

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸甲酯(化合物编号：I₁):

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸(化合物编号：I₂):

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-丙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸(化合物编号：I₃)

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3)，9(11)-双烯-28-酰基咪唑(化合物编号：I₄):

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-丙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-酰基咪唑(化合物编号：I₅)

下面药理实验中化合物的代号等同于此处代号所对应的化合物。

本发明的另一目的在于提供本发明通式I所述化合物的制备方法，其特征为在于，包括如下步骤：

CDDO-Me经DMF/碱处理，与单硝酸异山梨酯II反应得到烯醇化合物III，烯醇III与化合物IV反应得到目标化合物I；合成路线如下：

作为优选方案，所述通式I化合物的制备方法，

从化合物II制备化合物IV的反应中，溶剂选自无水乙腈，无水二氯甲烷，氯仿，乙酸乙酯，重蒸丙酮，无水四氢呋喃，无水N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜或二氧六环中的一种或多种；碱选自碳酸钾，碳酸钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，氢氧化钾，吡啶，4-甲氨基吡啶，三乙胺，N,N-二异丙基甲胺；反应温度为-20℃至加热回流；

从化合物IV制备化合物I的反应中，溶剂选自无水乙腈，无水二氯甲烷，氯仿，乙酸乙酯，重蒸丙酮，无水四氢呋喃，无水N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜或二氧六环中的一种或多种；碱选自碳酸钾，碳酸钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，氢氧化钾，吡啶，4-甲氨基吡啶，三乙胺，N,N-二异丙基甲胺；反应温度为-20℃至加热回流。

作为更优选，所述通式I化合物的制备方法，

从化合物II制备化合物IV的反应中，溶剂选择无水N,N-二甲基甲酰胺，碱选择碳酸钾，反应温度为室温；

从化合物IV制备化合物I的反应中，溶剂选择无水N,N-二甲基甲酰胺，碱选择碳酸钾，反应温度为室温。

这些化合物可按照常规分离技术加以纯化。

本发明的再一目的是提供本发明化合物I在制备预防或治疗肺动脉高压病中的应用。

本文采用联合用药策略，通过雾化吸入给药使其分布在肺部，在肺部赖氨酰氧化酶(LOX)或酯酶作用下释放CDDO-Me和适量NO，舒张肺动脉血管，同时抑制NF-κB通路和激活Nrf2通路，产生抗炎、抗氧化以及抑制肺动脉血管重构的作用，达到联合用药的目的。

有益效果：本发明提供NO供体型齐墩果酸衍生物联合治疗已成功应用于高血压，例如PAH这种高度复杂且进行性进展的疾病，没有一种单一药物一直被证明是有效的。为此，几种临床试验结合起来，已经显示出增加的功效和改善的结果。本发明设计、合成了NO供体型齐墩果酸衍生物，一种新一代的一氧化氮供体和二氢睾酮甲基化合物，被证明可以分解成肺组织中的CDDO类化合物和NO气体，产生双重抗炎，预防氧化应激和扩张肺血管的作用。含有目标化合物的药用组合物以及它们的医药用途，特别是在预防和治疗肺动脉高压相关的疾病中，具有良好的应用前景。

附图说明

图1：(A)为血清饥饿模型；(B)为缺氧的血清饥饿模型；

图2：CDDO-NO以及CDDO-Me对PASMCs增殖的抑制作用

图3：为平均肺动脉压的变化情况；

图4：为右心室收缩压的变化情况；

图5：为右心肥厚指数的变化情况；

图6：为HE染色的肺部纤维组织图片以及肺动脉内侧厚度(PAMT)(A)为HE染色的肺部纤维组织图片；(B)肺动脉内侧厚度。

具体实施方式

为了进一步阐明本发明，下面给出一系列实施例，这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明具体描述，不应当理解为对本发明的限制。

本发明化合物I抗肺动脉高压的药理实验方法与结果如下：

CDDO类化合物对PAEC损伤具有保护作用

研究了I₁对肺动脉内皮细胞(PAEC)损伤的保护作用。如图1A所示，在血清饥饿模型中，发现I₁浓度在≤0.5μM浓度时对血清饥饿诱导的内皮细胞损伤具有保护作用。I₁在≤0.25μM时，保护作用与药物浓度呈正相关，并在24h时保护作用最明显。在乏氧模型中(图1B)，I₁在≤0.125μM浓度时对乏氧诱导的内皮损伤细胞具有保护作用，保护作用与药物浓度呈正相关。

CDDO类化合物体外对PASMC增殖具有明显抑制作用

研究了化合物对人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响。发现I₁与CDDO-Me在>0.75μM浓度下，在24h和48h均能显著抑制PASMC的增殖(图2)。

CDDO类化合物体内抗肺动脉高压活性

实验方法：采用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(重量在200-250g之间)，MCT按60mg/kg剂量腹腔内一次性注射(模型组)，同时设立MCT的媒介(溶媒组)，及不注射任何溶剂作为空白对照组(空白组)。造模期间，间隔一日记录大鼠体重及死亡情况。I₁按低、中、高三个剂量组经雾化吸入给药，体重在250-400g之间的SD大鼠清醒状态下放入SCIREQ专用口鼻暴露限制装置桶内，大鼠可以自由呼吸。药物通过超声雾化器雾化给予，大鼠仅口鼻暴露于雾化药物中。超声雾化器雾化效率调整为60％，雾化流速调整为每分钟2L，药物雾化前使用双蒸水稀释至总体积为1mL，雾化时间15分钟。雾化给药浓度计算公式如下：雾化给药浓度＝药物母浓度×药物稀释前体积/(2L×15min)，动物吸入肺内药物剂量＝动物分钟通气量×15min×雾化给药浓度。对照组为CDDO-Me口服组，CDDO-Me雾化组，NO供体片段雾化组，CDDO-Me口服+NO供体片段雾化联合用药组，以及CDDO-Me雾化+NO供体片段雾化联合用药组。此外，还利用现有治疗PAH的一线药物如万他维等(吸入)作为阳性对照药。检测各个给药组的急性效应和慢性效应，前者主要指急性血流动力学检测，包括平均肺动脉压(mPAP)、右心室收缩压力(RVSP)、心输出量、肺血管阻力(PVR)和心率等指标。后者主要指给药后对肺动脉、心肺组织结构的影响，包括测定右心室与左心室+室间隔重量比(RV/LV+S，反应右心室肥厚程度)。

应用2％戊巴比妥钠，按50mg/kg体重给药，使大鼠充分麻醉。分离右侧颈外静脉，***充满肝素生理盐水的微型导管(PE10，Becton Dickinson，USA)，在压力波形的引导下，经右侧颈外静脉、右心房、右心室至肺动脉，导管的另一端与压力传感器(TSD104A血压换能器，BIOPAC Systems，USA)相连接，应用16通道生理信号记录分析***(MP100，BIOPACSystems，USA)测定右心室收缩压(RVSP)(图3)及肺动脉压力，并计算肺动脉平均压(mPAP)(图4)。完成mPAP和RVSP测定后处死大鼠，留取血标本，分离右肺固定、制作石蜡切片待后续组织病理检查。分离左肺放入液氮中快速冷冻后放置-80℃冰箱待后续实验使用。将心脏取下，分离右心室(right ventricular，RV)和左心室和室间隔(left ventricular+septum，LV+S)，计算I₁和各对照组的右心肥厚指数(RV/LV+S)(图5)。

CDDO类化合物改善MCT诱导的肺血管重构(PVR)

肺动脉血管重构(PVR)是肺动脉高压的主要标志，其呈现肺动脉壁厚度的增加，肺部组织异常肌肉化和纤维化。与对照组比较，MCT诱导的PAH大鼠其肺动脉壁平均厚度明显增加(图6A)(p<0.01)。值得注意的是，CDDO-NO可显著减轻肺动脉高压大鼠肺中的血管周围纤维化以及异常肌肉化(图6A)(p<0.01)；类似地，CDDO-NO也能减少肺动脉高压(PAH)中的肺动脉平均厚度(PAMT)(图6B)(p<0.01)。总而言之，CDDO-NO在体内明显改善MCT诱导的肺动脉高压(PAH)中的肺动脉血管重构。

以上药理学数据显示，本发明涉及的一种有关NO供体化合物舒张血管和CDDO类化合物抑制肺血管重构的重组化合物I能够发挥显著的抗肺动脉高压作用，通过一系列体内体外的实验表明其效果比同等条件下其他对照组的效果都显著。

实施例1

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸甲酯

将CDDO-Me(100mg,0.2mmol)溶解于2.5ml的无水DMF中，加入单硝酸异山梨酯(57.3mg,0.3mmol)，K₂CO₃(41mg,0.3mmol)室温搅拌过夜，第二天早上加入化合物V(23.6mg,0.3mmol)继续搅拌6h，反应液加入适量二氯甲烷(50mL)稀释，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水各洗涤3次。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得白色固体，经快速硅胶柱层析制得白色固体I₁(35mg,35％)。

mp:247-248℃；1H NMR(300MHz,CDCl3,25℃,TMS):δ5.84(s,1H),4.69(s,1H),4.53(s,1H),4.21(d,J＝10.2Hz,2H),4.05(q,2H),3.86(d,J＝4.8Hz,2H),3.61(s,3H),2.97(d,J＝13.5Hz,1H),2.85(s,1H),2.25(s,3H),2.00(d,J＝18.3Hz,3H),1.80(d,J＝13.2Hz,3H),1.45(m,10H),1.26,1.21,1.19,1.14,1.05,0.97,0.86(s,each 3H)ppm；13CNMR(CDCl₃,25℃,TMS):δ198.7,177.8,170.7,170.6,169.9,166.6,124.4,116.1,100.8,86.8,82.5,81,80.8,80.4,78.6,72.8,68.2,59.5,51.3,49.3,46.8,45.0,43.8,41.3,39.5,35.3,34.0,32.7,32.3,31.0,30.2,30.0,29.7,29.1,27.9,26.8,23.4,22.9ppm；EIMS(70eV)m/z:739.5[M+H]⁺,761.5[M+Na]⁺；HRMS(m/z):[M+Na]⁺calculatedC₄₀H₅₄N₂O₁₁761.3728Found:761.3637,PPM error 5.0.

实施例2

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸

将CDDO(100mg,0.2mmol)溶解于2.5ml的无水DMF中，加入单硝酸异山梨酯(57.3mg,0.3mmol)，K₂CO₃(41mg,0.3mmol)室温搅拌过夜，第二天早上加入化合物V(23.6mg,0.3mmol)继续搅拌6h，反应液加入适量二氯甲烷(50mL)稀释，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水各洗涤3次。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得白色固体，经快速硅胶柱层析制得白色固体I₂(35mg,35％)。

实施例3

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-丙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸

将CDDO(100mg,0.2mmol)溶解于2.5ml的无水DMF中，加入单硝酸异山梨酯(57.3mg,0.3mmol)，K₂CO₃(41mg,0.3mmol)室温搅拌过夜，第二天早上加入化合物V(27.8mg,0.3mmol)继续搅拌6h，反应液加入适量二氯甲烷(50mL)稀释，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水各洗涤3次。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得白色固体，经快速硅胶柱层析制得白色固体I₃(35mg,35％)。

实施例4

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-酰基咪唑

将CDDO-IM(100mg,0.2mmol)溶解于2.5ml的无水DMF中，加入单硝酸异山梨酯(57.3mg,0.3mmol)，K₂CO₃(41mg,0.3mmol)室温搅拌过夜，第二天早上加入化合物V(23.6mg,0.3mmol)继续搅拌6h，反应液加入适量二氯甲烷(50mL)稀释，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水各洗涤3次。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得白色固体，经快速硅胶柱层析制得白色固体I₄(35mg,35％)。

实施例5

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-丙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-酰基咪唑

将CDDO-IM(100mg,0.2mmol)溶解于2.5ml的无水DMF中，加入单硝酸异山梨酯(57.3mg,0.3mmol)，K₂CO₃(41mg,0.3mmol)室温搅拌过夜，第二天早上加入化合物V(27.8mg,0.3mmol)继续搅拌6h，反应液加入适量二氯甲烷(50mL)稀释，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水各洗涤3次。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得白色固体，经快速硅胶柱层析制得白色固体I₅(35mg,35％)。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种化合物，为通式I所示的化合物或其旋光异构体、对映体、非对映体、外消旋体或外消旋混合物，或其药学上可接受的盐：

其中：R₁代表C1-C10直链或支链烷基；R₂代表烷氧基、羟基或1位咪唑基；

式I中标明的五个手性中心，分别用*1、*2、*3、*4和*5表示，手性中心为R构型或S构型。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：R₁代表甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基；R₂代表羟基、甲氧基、1位咪唑基；

式I中手性中心*1为S构型，手性中心*2为R构型，手性中心*3为S构型，手性中心*4为S构型，手性中心*5为R构型。

3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：所述化合物选自以下化合物：

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸甲酯；

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸；

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-丙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-羧酸；

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-乙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-酰基咪唑；

1-单硝酸异山梨酯-2-氰基-3-丙酰氧基-12-氧代齐墩果烷-2(3),9(11)-双烯-28-酰基咪唑。

4.权利要求1所述化合物的制备方法，包括以下步骤：

化合物II经DMF/碱处理，与单硝酸异山梨酯III反应得到烯醇化合物IV，烯醇IV与化合物V反应得到目标化合物I；合成路线如下：

5.根据权利要求4所述化合物的制备方法，其特征在于：

从化合物II制备化合物IV的反应中，溶剂选自无水乙腈，无水二氯甲烷，氯仿，乙酸乙酯，重蒸丙酮，无水四氢呋喃，无水N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜或二氧六环中的一种或多种；碱选自碳酸钾，碳酸钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，氢氧化钾，吡啶，4-甲氨基吡啶，三乙胺，N,N-二异丙基甲胺；反应温度为-20℃至加热回流；和/或，

6.根据权利要求5所述化合物的制备方法，其特征在于：

从化合物II制备化合物IV的反应中，溶剂选择无水N,N-二甲基甲酰胺，碱选择碳酸钾，反应温度为室温；和/或，

7.一种药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1所述的化合物，或其药学上可接受的盐及可药用的载体、佐剂或媒剂。

8.权利要求1-3任一项所述的化合物在制备预防或治疗肺动脉高压病的药物中的应用。