CN106994135A - 一种具有抑制过敏功能的海葡萄萃取物，制备方法及应用 - Google Patents
一种具有抑制过敏功能的海葡萄萃取物，制备方法及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种具有抑制过敏功能的海葡萄萃取物，制备方法及应用，涉及一种海葡萄萃取物，特别涉及一种可以抑制过敏且不会引起过敏的海葡萄萃取物，制备方法及应用。本发明的海葡萄萃取物的制备方法，包括以下步骤：海葡萄和纯水以重量比为1：1～20，进行打浆并混合均匀，于温度20～100℃下搅拌30～120分钟，第一次过滤所得液体即为海葡萄萃取液，海葡萄萃取液可进一步进行第二次过滤，以EW、PW、DK薄膜过滤后经干燥得到海葡萄精萃物；本发明具有优异的抑制过敏效果，且本身不会引起过敏，可用于化妆品与食品。
Description
技术领域
本发明涉及一种海葡萄萃取物，特别涉及一种可以抑制过敏且不会引起过敏的海葡萄萃取物，制备方法及应用。
背景技术
过敏是一种因为人体免疫***失常，对环境中的物质(又称为过敏原)产生过度反应的现象，进入身体的过敏原会与IgE抗体结合。此时，便会刺激肥大细胞释放组织胺等发炎物质，使身体组织产生发炎反应，过敏症状也将因释放组织胺的身体部位而有不同，包括流鼻水、流眼泪、发痒、呼吸急促和皮肤干等症状，严重者可能休克而危及性命。过敏体质的人过敏时，通常会用抗组织胺等药物来纾缓过敏征状，过敏药物一般均具有一定副作用，因此利用天然植物或由植物中萃取出具有抑制过敏功能的成分来抑制过敏活性，也是大众关心的议题。
海葡萄属于绿藻，海葡萄不但富含海藻多醣体，而且零脂防、低热量，再加上清新爽脆的口感，有如吃鱼子酱般，是日本人和许多专家心中最佳的天然保健食品，也是日本料理店中的高级食材。而海葡萄含有大量的微量元素，具有抗衰老的功效，因此，海葡萄萃取液已经被世界化妆品协会列入合法使用的化妆品原料。
现有的海葡萄萃取技术多是以酒精或其他有机溶剂萃取，台湾专利I484966，为一种海葡萄萃取物的萃取方法，系将海葡萄粉以酒精进行粗萃，再依序以正己烷、乙酸乙酯分离其中有效物质，所述有效物质具有抑制癌症效果；韩国专利KR101252149使用水及C1-C4醇制备出海葡萄萃取物，该萃取物具有抗氧化、抗炎、保湿等效果。现有技术的海葡萄萃取物皆没有抑制过敏的效果，且以有机溶剂萃取海葡萄，即便只有残留少量有机溶剂，也可能对人体造成危害。
现有技术的海葡萄萃取技术多是利用有机溶剂，少数的有机溶剂残留即会对人体健康造成危害，因为各种溶剂的极性不同，各种溶剂的萃取能力也不同，若在不使用有机溶剂的前提下，如何萃取出具有防止过敏功效的海葡萄萃取物，即成为本发明在此欲解决的一重要课题。
发明内容
为了克服现有技术的缺陷，本案发明人提供一种海葡萄萃取物，不利用有机溶剂萃取，利用特定温度及时间以水萃取海葡萄并进一步薄膜过滤，得到海葡萄中具有抑制过敏的活性物质。
本发明提供一种海葡萄萃取物的制备方法，包含以下步骤：
步骤1：将海葡萄与纯水打浆，其中所述海葡萄与纯水的重量比为海葡萄1份：纯水1～20份，混和均匀得海葡萄浆；
步骤2：海葡萄浆继续搅拌，搅拌温度为20～100℃，搅拌时间为30～120分钟；
步骤3：进行第一次过滤，经第一次过滤得到的液体即得海葡萄萃取物。
可选的，步骤1中，所述海葡萄可为生鲜海葡萄、干燥海葡萄、或海葡萄粉。
可选的，步骤2中，所述搅拌温度为60～90℃；较佳地，所述搅拌温度为85℃；所述搅拌温时间为60～105分钟；较佳地，所述搅拌温度为90分钟。
可选的，步骤3中，所述第一次过滤的条件为5微米和1微米。
可选的，所述第一次过滤后可进一步进行第二次过滤，所述第二次过滤为薄膜过滤；所述薄膜过滤处理的第1层薄膜是GE公司EW膜、第2层薄膜是GE公司PW膜、第3层薄膜是GE公司DK膜。
本发明的另一目的为一种具有抑制过敏功能的海葡萄萃取物，系由前述海葡萄萃取物的制备方法获得。
本发明提供一种组合物，包含有效量的防止过敏的海葡萄萃取物与化妆品学、食品学或药学上可接受的赋形剂，其中所述组合物为化妆品组合物、食品组合物或医药组合物。
可选的，所述海葡萄萃取物有效量为1mg/ml以上；较佳地，所述海葡萄萃取物有效量为4mg/ml。
可选的，其中所述化妆品组成物为用以下物质中的一种或多种组成的调合物：乳霜、多乳液、无水组成物、水性分散液、油、乳剂、香脂、发泡物、洗剂、凝胶、乳胶、含水乙醇溶液、含水甘醇溶液(hydroglycolic solution)、水凝胶、涂敷剂、浆液、皂类、洗发精、调理剂、清浆液、软膏、慕斯、发膏、粉剂、条剂、笔、喷剂、气溶胶、胶囊、明胶胶囊、软胶囊、硬胶囊、锭剂、糖衣锭、颗粒、咀嚼胶、溶液、悬浮液、乳液、糖浆、多醣膜、胶冻及明胶。
可选的，其中所述化妆品组成物可掺入选自眼部修饰霜、粉底、卸妆洗剂、卸妆乳、眼影、口红、唇蜜、护唇膏及蜜粉的产品中。
可选的，其中所述洗发精成分为界面活性剂10～50％、润肤剂0.3～2％、海葡萄萃取物0.01～0.1％、增稠剂0～2％、香精0.1～1％、防腐剂0.3～1％、其余为水。
附图说明
图1为过敏诱导反应，钙离子载体A23187刺激细胞去颗粒化释出β-氨基己糖苷酶，海葡萄萃取物对β-氨基己糖苷酶释出量的影响示意图；
图2为海葡萄萃取物具有抑制过敏功能的效果示意图；
图3为海葡萄萃取物具有抑制过敏功能的效果示意图。
具体实施方式
本说明书中所述的所有技术性及科学术语，除非另外有定义，皆为本领域技术人员公知常识。
本发明提供的下列实施例的作用只是为了举例说明，本发明不限于以下实施例。
实施例1
一、海葡萄萃取物制备方法(I)
取80g的海葡萄干粉和纯水1600g，使用的海葡萄为长茎葡萄蕨藻(Caulerpa lentillifera)，打浆混合均匀(温度约85℃，时间约90分钟)，之后以5μm和1μm滤网过滤，得到液体海葡萄萃取液(I)；再进行薄膜过滤，第1层薄膜是GE(General Electric，通用电气)公司EW膜，微过滤(Microfiltration)去除较大体积的杂质，第2层薄膜是GE公司PW膜，是超过滤(Ultrafiltration)去除微细体积的杂质，第3层薄膜是GE公司DK膜，纳米过滤(Nanofiltration)去除盐，薄膜过滤后以冷冻干燥，得海葡萄精萃物(I)。上文中的长茎葡萄蕨藻亦可用杉叶蕨藻(Caulerpa taxifolia)等其他品系海葡萄取代。
二、海葡萄萃取物(I)不引发过敏
细胞不使用刺激剂(A23187(-))只添加海葡萄萃取物(I)与海葡萄精萃物(I)观察过敏介质β-hexosaminidase(氨基己糖苷酶)的释出(如图1所示)，海葡萄萃取物(I)与海葡萄精萃物(I)单独使用与控制组比较，海葡萄萃取物(I)与海葡萄精萃物(I)单独使用不增加β-hexosaminidase释出，表示海葡萄萃取物(I)与海葡萄精萃物(I)本身不会激发过敏。
三、过敏诱导实验
钙离子载体A23187刺激使细胞去颗粒化释出过敏介质β-hexosaminidase(β氨基己糖苷酶)，β-hexosaminidase浓度以酵素免疫法(enzyme-linkedimmunosorbent assay，简称ELISA)方式侦测，由图1中控制组(水)的结果，可知A23187刺激可诱导β-hexosaminidase释出。
四、海葡萄萃取物(I)抑制过敏
根据图2的结果，海葡萄萃取物(I)可抑制A23187刺激(A23187(+)组)诱导的β-hexosaminidase释出，海葡萄萃取物(I)2毫克/毫升使β-hexosaminidase释出降低8％，海葡萄萃取物(I)4毫克/毫升使β-hexosaminidase释出降低25％；海葡萄精萃物(I)对β-hexosaminidase释出的抑制效果较海葡萄萃取物更明显，海葡萄精萃物(I)1毫克/毫升即抑制β-hexosaminidase释出45％，海葡萄精萃物(I)4毫克/毫升抑制β-hexosaminidase释出82％，且不影响细胞存活率(如图1所示)。
五、海葡萄精萃物(I)应用于化妆品
定量纯水加热到50～60℃，依序加入界面活性剂，搅拌混合均匀。再依序加入润肤剂，搅拌混合均匀。停止加热，待温度降至30℃，加入海葡萄精萃物(I)，甜橙精油，茴香酸钠搅拌混合均匀，即可得含海葡萄精萃物(I)的慕斯洗发精，慕斯洗发精配方比例如表1所示。
表1，含海葡萄精萃物(I)的慕斯洗发精配方比例
六、海葡萄萃取物(I)制成化妆品的人体实验
委托美国食品药品管理局(Food and Drug Administration，简称FDA)认证实验室AMA Laboratories Inc.进行含海葡萄精萃物(I)的慕斯洗发精(配方比例如表1)是否产生皮肤刺激性及敏感性测试的人体实验，本次人体实验的受试者数目52人，完成研究的受试者数目为50人，受测者年龄范围20-68岁，性别、人种如表2所示。
表2、含海葡萄精萃物(I)的慕斯洗发精人体实验的受测者统计资料
人体实验步骤为，将表1所示的慕丝洗发精以水稀释10倍，取0.2ml稀释慕丝洗发精至于半封闭的低过敏贴片上，贴于受测者的肩胛骨下区皮肤的背面、中线的左边或右边，并指示受测者受测区不要弄湿或令太阳直接照射，24小时后受测者于家中将贴片撕除，重复贴附程序，直到一系列9次的接触完成，每周一、周三、周五进行，连续三周，如果发生不良反应，测定红斑和水肿的区域，结果如表3所示，完成研究的受测者50人，对海葡萄精萃物(I)的慕斯洗发精，均没有过敏反应，表示此含有海葡萄精萃物(I)的慕斯洗发精无皮肤刺激性、不会引起过敏。
表3、海葡萄精萃物(I)的慕斯洗发精人体实验的结果
其中，C:白人、H:西班牙裔、A:亚洲人、F:女性、M:男性、0:没有产生反应、Dc:中途退出实验
实施例2
取1.5公斤的生鲜海葡萄和纯水1.5公斤，使用的海葡萄为长茎葡萄蕨藻(Caulerpa lentillifera)，打浆混合均匀(温度约85℃/时间约30分钟)，之后以5μm和1μm滤网过滤，得到液体为海葡萄萃取液(II)；再进行薄膜过滤，第1层薄膜是GE公司EW膜，微过滤(Microfiltration)去除大杂质，第2层薄膜是GE公司PW膜，是超过滤(Ultrafiltration)去除微细杂质，第3层薄膜是GE公司DK膜，纳米过滤(Nanofiltration)去除盐，薄膜过滤后以冷冻干燥，得海葡萄精萃物(II)。上述长茎葡萄蕨藻亦可用杉叶蕨藻(Caulerpa taxifolia)等其他品系海葡萄取代。
根据图3中结果，海葡萄精萃物(II)可抑制A23187刺激(A23187(+)组)诱导的β-hexosaminidase释出，海葡萄精萃物(II)，于浓度1毫克/毫升可抑制β-hexosaminidase释出40％，浓度2毫克/毫升可抑制β-hexosaminidase释出60％，浓度4毫克/毫升可抑制β-hexosaminidase释出80％。
实施例3
取1.5公斤的生鲜海葡萄和纯水1.5公斤，使用的海葡萄为长茎葡萄蕨藻(Caulerpa lentillifera)，打浆混合均匀(温度约25℃/时间约60分钟)，之后以5μm及1μm滤网过滤，得到液体为海葡萄萃取液(III)；再进行薄膜过滤，第1层薄膜是GE公司EW膜，微过滤(Microfiltration)去除大杂质，第2层薄膜是GE公司PW膜，是超过滤(Ultrafiltration)去除微细杂质，第3层薄膜是GE公司DK膜，纳米过滤(Nanofiltration)去除盐，薄膜过滤后以冷冻干燥，得海葡萄精萃物(III)。上述长茎葡萄蕨藻亦可用杉叶蕨藻(Caulerpa taxifolia)等其他品系海葡萄取代。
根据第3图结果，海葡萄精萃物(III)可抑制A23187刺激(A23187(+)组)诱导的β-hexosaminidase释出；海葡萄精萃物(III)于浓度1毫克/毫升可抑制β-hexosaminidase释出33％，浓度2毫克/毫升可抑制β-hexosaminidase释出56％，浓度4毫克/毫升可抑制β-hexosaminidase释出75％。
上述详细说明为针对本发明的可行实施例的具体说明，而并非用于限制本发明的保护范围，所有不超出本发明技术方案的精神的做的等效的修改或替换，都应在本发明的保护范围内。
上述多种功效，充分符合专利法对新颖性和创造性的要求，依法提出申请，恳请专利局核准本发明专利申请，鼓励发明创新。
Claims (16)
1.一种海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
步骤1：将海葡萄与纯水打浆，其中所述海葡萄与纯水的重量比为海葡萄1份：纯水1～20份，混和均匀得海葡萄浆；
步骤2：所述海葡萄浆继续搅拌，搅拌温度为20～100℃，搅拌时间为30～120分钟；
步骤3：进行第一次过滤，经第一次过滤得到的液体即得海葡萄萃取物。
2.如权利要求1所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述海葡萄可为生鲜海葡萄、干燥海葡萄、或海葡萄粉。
3.如权利要求1所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，步骤2中，所述搅拌温度为60～90℃。
4.如权利要求1所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，步骤2中，所述搅拌温度为85℃。
5.如权利要求1所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，步骤2中，所述搅拌时间为60～105分钟。
6.如权利要求1所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，步骤2中，所述搅拌时间为90分钟。
7.如权利要求1所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，步骤3中，所述第一次过滤的条件为5微米和1微米。
8.如权利要求1所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，步骤3中，所述第一次过滤后可进一步进行第二次过滤；所述第二次过滤为薄膜过滤。
9.如权利要求8所述的海葡萄萃取物的制备方法，其特征在于，所述薄膜过滤处理第1层薄膜是GE公司EW膜，第2层薄膜是GE公司PW膜，第3层薄膜是GE公司DK膜。
10.一种具有抑制过敏功能的海葡萄萃取物，其特征在于，系由申请专利范围的1至9所述中任一所述的海葡萄萃取物的制备方法获得。
11.一种组合物，其特征在于，包含有效量的如权利要求10所述的抑制过敏的海葡萄萃取物与化妆品学、食品学或药学上可接受的赋形剂，其中所述组合物为化妆品组合物、食品组合物或医药组合物。
12.如权利要求11所述的组合物，其特征在于，所述海葡萄萃取物有效量为1mg/ml以上。
13.如权利要求11所述的组合物，其特征在于，所述海葡萄萃取物有效量为4mg/ml。
14.如权利要求11所述的组合物，其特征在于，其中所述化妆品组合物为用以下物质中一种或多种组成的调合物：乳霜、多乳液、无水组成物、水性分散液、油、乳剂、香脂、发泡物、洗剂、凝胶、乳胶、含水乙醇溶液、含水甘醇溶液(hydroglycolic solution)、水凝胶、涂敷剂、浆液、皂类、洗发精、调理剂、清浆液、软膏、慕斯、发膏、粉剂、条剂、笔、喷剂、气溶胶、胶囊、明胶胶囊、软胶囊、硬胶囊、锭剂、糖衣锭、颗粒、咀嚼胶、溶液、悬浮液、乳液、糖浆、多醣膜、胶冻和明胶。
15.如权利要求11所述的组合物，其特征在于，其中所述化妆品组合物可掺入下列产品中：眼部修饰霜、粉底、卸妆洗剂、卸妆乳、眼影、口红、唇蜜、护唇膏及蜜粉。
16.如权利要求15所述的组合物，其特征在于，所述洗发精成分为界面活性剂10～50％、润肤剂0.3～2％、海葡萄萃取物0.01～0.1％、增稠剂0～2％、香精0.1～1％、防腐剂0.3～1％、其余为水。
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