CN106967773A - 一种应用重组氨肽酶对大米肽脱苦的方法 - Google Patents

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朱强
王开道
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Abstract

本发明公开了一种应用重组氨肽酶对大米肽脱苦的方法，属于酶制剂技术领域。该酶对蛋白和多肽末端的疏水性氨基酸的水解能力强。蛋白或多肽水解液产生苦味是由于多肽链上疏水性氨基酸引起的，利用亮氨酸氨肽酶单酶水解大米肽，其酶解液中游离的疏水性氨基酸总量是酶解前的4.39倍，酶解后分子量500‑1000Da的肽含量降低了30.63％，能很好的解决蛋白水解液苦味问题，提高其风味和品质，利用亮氨酸和脯氨酸氨肽酶协同水解大米肽，其Pro含量是单酶水解后的1.78倍，进一步强化对蛋白类水解液的脱苦能力。

Description

一种应用重组氨肽酶对大米肽脱苦的方法
技术领域
本发明涉及一种应用重组氨肽酶对大米肽脱苦的方法，属于酶制剂技术领域。
背景技术
大米肽以大米蛋白为原料，经酶解、膜分离等一系列精制处理而得到的小分子蛋白质水解产物，它主要由多种多肽分子混合物所组成，以及其它少量的游离氨基酸、糖类和无机盐等，具有易消化性和易吸收性、低过敏性、降血压、降胆固醇、促脂肪代谢及增强体能和恢复疲劳等作用。因此大米肽作为营养食品工业高档功能性蛋白添加剂，可广泛应用于保健食品、营养食品、焙烤食品、运动员食品等领域。大米肽在制备中会带有一定程度的苦味会直接影响食品的品质，一定程度上限制其在食品工业中的推广应用。因此，对于大米肽进行脱苦对于提高食品的口感和品质十分必要。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种对大米肽脱苦的方法，所述方法向大米肽中添加1600-2100U/g底物的亮氨酸氨肽酶、200-300U/g底物脯氨酸氨肽酶或其组合，对大米肽进行水解。
在本发明的一种实施方式中，所述亮氨酸氨肽酶的添加量为1800～2100U/g底物。
在本发明的一种实施方式中，所述脯氨酸氨肽酶的添加量为200-300U/g底物。
在本发明的一种实施方式中，所述大米肽浓度为50～70g/L。
在本发明的一种实施方式中，所述水解是在40～60℃下进行。
在本发明的一种实施方式中，所述水解时间为3～6h。
在本发明的一种实施方式中，所述水解是在45～55℃对大米肽酶解4～6h。
在本发明的一种实施方式中，所述脯氨酸氨肽酶是由重组枯草芽孢杆菌发酵产生的，所述重组枯草芽孢杆菌以WB600为宿主，以PMA5为载体，表达pap基因，已于公开号为105018407A的国家发明专利申请中公开。
在本发明的一种实施方式中，所述脯氨酸氨肽酶是按如下方法制备获得：将所述重组枯草芽孢杆菌发酵后的发酵液调节pH絮凝，板框过滤，20～30KDa的PES卷式膜超滤浓缩，冻干，粉碎，过筛，获得酶粉。
在本发明的一种实施方式中，所述发酵按如下步骤进行：重组枯草芽孢杆菌以2～5％(v/v，mL/100mL)的接种量接种到含发酵培养基的发酵罐中，200～450rpm，初始通气量：7.0～9.0m3/h，pH7.0，初始罐压0.0～0.08MPa，阶段控温发酵：前18h温度为35～37℃，18h后，温度控制为30～32℃；维持溶氧≥30％，培养40～45h下罐获得发酵液。
在本发明的一种实施方式中，用于发酵生产亮氨酸氨肽酶的发酵培养基成分为：淀粉20g/L，豆粕20g/L，酵母膏18g/L，磷酸氢二钾6g/L，氯化钴0.6mmol/L，甘油2mL/L，氯化钾0.1mol/L，吐温-802.4mL/L，L-谷氨酸钠6g/L，酒石酸钾7g/L。
在本发明的一种实施方式中，所述调节pH絮凝是调节发酵液的pH至8.0，加入0.15％W/V的阳离子絮凝剂，2.5％W/V的硅藻土，搅拌混匀。
在本发明的一种实施方式中，所述板框过滤是以80～100mL/min的速度过板框压滤机。
在本发明的一种实施方式中，所述超滤是用20～30KDa的PES卷式膜超滤浓缩7倍。
在本发明的一种实施方式中，所述方法是将酶粉以1800U/g比例加入大米肽溶液中，维持温度45～50℃，pH维持在8.3～8.5，酶解4h后煮沸10min,冷却至50℃，加入脯氨酸氨肽酶水解，进一步脱苦。
本发明还保护所述方法在制备含氨基酸或多肽的产品中的应用。
本发明的有益效果：本发明提供了一种改良的重组枯草芽孢杆菌亮氨酸氨肽酶制备的工艺，絮凝阶段的氨肽酶回收率高达82.7％，超滤阶段氨肽酶回收率为78.22％，解决现有的提取工艺中处理量少、操作难度大、成本高，难以规模化应用的问题。本发明的制备工艺操作简单，易放大，适合规模化生产，可为后续氨肽酶的应用提供条件。本发明将亮氨酸氨肽酶单酶水解及与脯氨酸氨肽酶共同应用于大米肽的水解中，提供了采用两种氨肽酶协同水解大米肽的酶解工艺，酶解液中的亮氨酸、精氨酸及游离的疏水性氨基酸总量分别是酶解前的3.39倍、16.48倍、4.39倍，酶解后分子量500-1000Da的肽含量降低了30.63％，经双酶协同水解后Pro含量是单酶水解后的1.78倍。能显著性地降低多肽的苦味，提升风味和品质，相对于其他方法脱苦更加彻底安全，将是今后食品蛋白资源深加工的应用大趋势。
附图说明
图1为亮氨酸氨肽酶制备流程示意图；
图2为浓缩倍数对氨肽酶回收率和膜通量的影响；
图3为酶解前后多肽分子量的分布；
图4为单酶、双酶协同水解后疏水性氨基酸及两种碱性氨基酸含量变化；
图5亮氨酸氨肽酶的添加量对酶解前后疏水性氨基酸及两种碱性氨基酸含量变化；
图6不同加酶顺序对酶解前后疏水性氨基酸及两种碱性氨基酸含量变化；
图7不同酶解大米肽条件下疏水性氨基酸增量变化。
具体实施方式
酶活力测定(LNA法)：2mL的(Tris pH8.5)溶液，50℃预热3min,依次加入1mL的已稀释的酶液，1mL的底物，摇匀，50℃水浴10min。反应结束，立即将试管放入冰水中，于405nm下快速测定样品吸光度值，计算酶活力。计算公式：
式中：X-样品的酶活力(U/mL)；
N-于波长405nm处测得吸光度值；
Y-酶液稀释的倍数。
酶活力定义：定义一个酶活单位(U)为，在特定条件下(50℃，pH8.5)，每分钟催化分解leu-pNA产生1umoL的pNA所需要的酶量。
氨基酸及多肽分子量测定：酶解液12000rpm离心10min，取上清送样检测多肽分子量分布，取上清送样加入等体积的10％的TCA溶液，静置3h，15000rpm，离心10min，取上清送样测酶解液中游离的氨基酸含量。
实施例1重组枯草芽孢杆菌亮氨酸氨肽酶的分离工艺
发酵液：重组枯草芽孢杆菌(WB600)以2～5％(v/v)的接种量，接种到含发酵培养基(淀粉20g/L，豆粕20g/L，酵母膏18g/L，磷酸氢二钾6g/L，氯化钴0.6mmol/L，甘油0.2％，氯化钾0.1mol/L，吐温-800.24％，L-谷氨酸钠0.6％，酒石酸钾0.7％)的发酵罐中，200～450rpm，初始通气量：7.0～9.0m3/h，pH7.0，初始罐压0.06～0.08MPa，阶段控温发酵：前18h温度为35～37℃，18h后，温度控制为30～32℃；通过先升罐压，加大通气量，调转速等策略维持最低溶氧在30％，培养40～45h下罐获得含亮氨酸氨肽酶的发酵液。
(1)通过向重组枯草芽孢杆菌发酵液中加入2.5％W/V(g/100mL)的硅藻土、0.15～0.2％W/V的阳离子絮凝剂，滴加0.5mol/L的NaOH调节pH至8.0。将絮凝后的发酵液，搅拌均匀，以80～100mL/min的速度过滤，收集澄清透亮的发酵液，整个过程中亮氨酸氨肽酶的回收率为82.7％。
(2)再利用2L的FILTECH-UF101型超滤系(PES卷式膜)统进行超滤，操作压力0.25Mpa，浓缩7倍，亮氨酸氨肽酶回收率为78.22％，膜通量为11.54L/(m2·h)，最后将浓缩液冻干，粉碎，过筛获得均一的酶粉，结果见图2。
实施例2亮氨酸氨肽酶在大米肽脱苦中的应用。
准确称取大米肽2.5g，配制成浓度为50g/L大米肽溶液50mL，利用恒温磁力搅拌器维持水解温度为50℃，按亮氨酸氨肽酶与底物的用量比为1800U/g,加入0.5g酶粉(酶活力9000U/g)于大米肽溶液中，加大搅拌转速，滴加0.5mol/L的NaOH调节pH，维持在pH8.3～8.5，酶解4h，沸水浴10min，冷却一段时间，将酶解液12000rpm离心10min，取上清液2mL测酶解液的多肽分子量分布，取上清3mL加入等体积的10％的TCA溶液，静置3h，15000rpm，离心30min，取上清过0.22um的微滤膜，取400uL测酶解液的游离氨基酸含量。
多肽分子量分布(图3和图4)结果显示：小于180Da的多肽含量增加了102.04％，500-1000Da的肽含量降低了30.63％，1000-2000Da的肽含量降低了35.60％，2000-5000Da的肽含量降低了32.80％，现有技术的研究表明一般大于5000Da的肽不具苦味，而介于500-1000Da的短肽苦味最强，因此，采用亮氨酸进行酶解能够达到显著的脱苦效果。
氨基酸分析(图4)可以看出：酶解液中的亮氨酸、精氨酸含量及游离的疏水性氨基酸总量分别是酶解前的3.39倍、16.48倍、4.39倍，其他氨基酸增量如表1所示。
表1酶解前后游离的疏水性氨基酸及两种碱性氨基酸含量变化
实施例3亮氨酸和脯氨酸双酶协同在大米肽脱苦中的应用
准确称取大米肽2.5g，配制成浓度为50g/L大米肽溶液50mL，控制水解温度50℃，加入0.5g亮氨酸氨肽酶酶粉(酶活力9000U/g)于大米肽溶液中，加大搅拌转速，滴加0.5mol/L的NaOH调节pH，维持在pH8.3～8.5，酶解4h，沸水浴10min，冷却一段时间，调节pH至7.5，加入脯氨酸氨肽酶800U，维持温度50℃、控制pH7.3～7.5、精确水解3h，沸水浴10min，冷却，处理后取样测游离氨基酸和多肽分子量分布。
多肽分子量分布(图3)可以看出：双酶协同与单酶水解相比，180-500Da的肽含量增加了0.97％，分子量为500～1000Da的多肽含量减少了1.35％。氨基酸分析(图4)可以看出：经亮氨酸和脯氨酸氨肽酶协同水解后Pro含量是单酶水解后的1.78倍，其他疏水性氨基酸增幅较小，符合该酶的水解特异性，相对于单酶水解大米肽，双酶协同作用更能强化脱苦效果，进一步提升大米肽的风味和品质。
实施例4
实施方式同实施例2，其区别在于，以900U/g的添加量加入亮氨酸氨肽酶，对应的游离的疏水性氨基酸含量如图5所示，酶解液中的亮氨酸、精氨酸含量及游离的疏水性氨基酸总量均低于以1800U/g的添加量加入亮氨酸氨肽酶的水解液中多肽含量的30％～40％。
实施例5
以先加入脯氨酸氨肽酶，再加入亮氨酸氨肽酶的顺序进行酶解反应，其它条件同实施例2。对酶解前后的氨基酸含量进行检测，并与实施例2的酶解效果进行对比，结果如图6所示，先加入脯氨酸的多肽水解液中苯丙氨酸和脯氨酸均低于先加入亮氨酸氨肽酶的水解液，苯丙氨酸含量仅为0.287mg/mL，脯氨酸含量仅为7.87×10-4mg/mL
实施例6
采用不同的底物浓度、反应温度和酶解时间进行酶解反应，如图7a所示，在氨肽酶酶解前多肽中游离疏水性氨基酸总量为0.4396mg/mL，加入亮氨酸氨肽酶酶解后疏水性氨基酸有大幅度提高，以900～2100U/g的加酶量进行反应，当氨肽酶量添加量低于1800U/g或超过2100U/g时，疏水性氨基酸含量增加较慢。由图7b可知，疏水性氨基酸含量随着底物浓度的不同差异明显，在该反应中当底物浓度超过50g/L时，疏水性氨基酸增量为0.8mg/mL，而底物浓度为20g/L时，疏水性氨基酸增量仅0.7mg/mL。由图7c可知，酶解温度为45～55℃时，疏水性氨基酸含量增加非常明显，在酶解温度为50℃时，疏水性氨基酸增加量达到1.002mg/mL。从图7d可以看出，酶解时间为3～6h时，疏水性氨基酸增量均大于0.82mg/mL，在5～6h的酶解过程中，疏水性氨基酸增量大于1.1mg/mL。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.一种对大米肽脱苦的方法，其特征在于，向大米肽中添加1600-2100U/g底物的亮氨酸氨肽酶、200-300U/g底物脯氨酸氨肽酶或其组合，对大米肽进行水解。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述亮氨酸氨肽酶的添加量为1800～2100U/g底物；所述脯氨酸氨肽酶的添加量为200-300U/g底物。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大米肽浓度为50～70g/L。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水解是在40～60℃下进行。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水解时间为3～6h。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脯氨酸氨肽酶是由重组枯草芽孢杆菌发酵产生的，所述重组枯草芽孢杆菌以WB600为宿主，以PMA5为载体，表达pap基因。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述脯氨酸氨肽酶是按如下方法制备获得：将所述重组枯草芽孢杆菌发酵后的发酵液调节pH，加入絮凝剂絮凝，再进行板框过滤，20～30KDa的PES卷式膜超滤浓缩，冻干，粉碎，过筛，获得酶粉。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，调节pH至8.0，加入1.5g/L的阳离子絮凝剂，25g/L的硅藻土，搅拌混匀。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述板框过滤是用板框过滤机，以80～100mL/min的速度过滤；所述超滤是用20～30KDa的PES卷式膜超滤浓缩6～7倍。
10.权利要求1～9任一所述方法在制备含氨基酸或多肽的产品中的应用。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107400666A (zh) * 2017-09-11 2017-11-28 广东轻工职业技术学院 一种氨肽酶及其编码基因和应用
CN107760659A (zh) * 2017-11-30 2018-03-06 江南大学 一种重组脯氨酸氨肽酶发酵高产及制备脱苦大米肽的方法
CN113584005A (zh) * 2021-08-27 2021-11-02 江南大学 一种氨肽酶的制备及其在蛋白脱苦中的应用
CN114246934A (zh) * 2021-12-17 2022-03-29 吉林农业大学 一种协同增效保护神经的活性物质组合物及其应用
CN114350643A (zh) * 2022-01-24 2022-04-15 江南大学 一种产氨肽酶的重组菌株及其在高效蛋白水解中的应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102703407A (zh) * 2012-06-18 2012-10-03 江南大学 一种枯草芽孢杆菌工程菌发酵制备亮氨酸氨肽酶的方法
CN105441520A (zh) * 2015-11-23 2016-03-30 华中农业大学 一种以米渣为原料酶膜联合制备大米多肽的方法
CN105925650A (zh) * 2016-06-02 2016-09-07 江南大学 一种利用重组枯草脯氨酸氨肽酶降解酪蛋白的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102703407A (zh) * 2012-06-18 2012-10-03 江南大学 一种枯草芽孢杆菌工程菌发酵制备亮氨酸氨肽酶的方法
CN105441520A (zh) * 2015-11-23 2016-03-30 华中农业大学 一种以米渣为原料酶膜联合制备大米多肽的方法
CN105925650A (zh) * 2016-06-02 2016-09-07 江南大学 一种利用重组枯草脯氨酸氨肽酶降解酪蛋白的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
冯红霞等: "苦味肽的形成及脱苦方法的研究", 《食品科学》 *

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107400666A (zh) * 2017-09-11 2017-11-28 广东轻工职业技术学院 一种氨肽酶及其编码基因和应用
CN107400666B (zh) * 2017-09-11 2019-11-22 广东轻工职业技术学院 一种氨肽酶及其编码基因和应用
CN107760659A (zh) * 2017-11-30 2018-03-06 江南大学 一种重组脯氨酸氨肽酶发酵高产及制备脱苦大米肽的方法
WO2019104761A1 (zh) * 2017-11-30 2019-06-06 江南大学 一种重组脯氨酸氨肽酶发酵高产及制备脱苦大米肽的方法
CN107760659B (zh) * 2017-11-30 2020-08-04 江南大学 一种重组脯氨酸氨肽酶发酵高产及制备脱苦大米肽的方法
US10968440B2 (en) 2017-11-30 2021-04-06 Jiangnan University Method for high-yield fermentation of recombinant proline aminopeptidase and preparation of debittered rice peptide
CN113584005A (zh) * 2021-08-27 2021-11-02 江南大学 一种氨肽酶的制备及其在蛋白脱苦中的应用
CN113584005B (zh) * 2021-08-27 2024-03-01 江南大学 一种氨肽酶的制备及其在蛋白脱苦中的应用
CN114246934A (zh) * 2021-12-17 2022-03-29 吉林农业大学 一种协同增效保护神经的活性物质组合物及其应用
CN114246934B (zh) * 2021-12-17 2024-03-15 吉林农业大学 一种协同增效保护神经的活性物质组合物及其应用
CN114350643A (zh) * 2022-01-24 2022-04-15 江南大学 一种产氨肽酶的重组菌株及其在高效蛋白水解中的应用
CN114350643B (zh) * 2022-01-24 2023-07-25 江南大学 一种产氨肽酶的重组菌株及其在高效蛋白水解中的应用

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