CN106613951A - 一种组织培养中外植体消毒的方法 - Google Patents

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耿冠宇
张素贤
吴慧
张云龙
杨小兵
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    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

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Abstract

本发明实施例公开了一种组织培养中外植体消毒的方法，包括：清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；将所述清洗后外植体浸泡在70％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；将所述第一预处理外植体浸泡在5％‑10％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。本发明实施例达到了提高清洁效果及降低损伤率的技术目的。

Description

一种组织培养中外植体消毒的方法
技术领域
本发明涉及组织培养技术领域，更具体地说，涉及一种组织培养中外植体消毒的方法。
背景技术
植物组织培养用的外植体材料大部分取自田间，但因为在植物表面上附着大量的微生物。因此在植物材料接种前必须要进行消毒处理，目的是既要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤植物材料而不至于影响其生长。因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要的一环。
目前在组织培养中常用的外植体消毒过程中主要存在以下突出问题：外植体处理不当，导致外植体成活率低或外植体消毒不彻底，导致污染率高，影响了组培繁殖的效率和产量。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种组织培养中外植体消毒方法，该消毒方法对外植体消毒彻底，且损伤率降低。
一种组织培养中外植体消毒的方法，包括：
清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；
将所述清洗后外植体浸泡在70％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；
将所述第一预处理外植体浸泡在5％-10％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；
将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；
冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。
优选地，清洗干净外植体表面实现为：将外植体用自来水冲洗5-7次，再将所述外植体材料切成段或块或片状，自来水清洗外植体表面达到10-15min。
优选地，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间实现为：
升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡10-20s。
优选地，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间实现为：
升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡5-10min。
优选地，冲洗所述第三预处理外植体包括：利用无菌水冲洗所述第三预处理外植体材料10-15min。
从上述的技术方案可以看出，本发明实施例的组织培养中外植体消毒方法合理使用洗剂，并配合清洁/振动的技术，对外植体进行一系列消毒操作，由于时间、步骤及清洗剂配比的正确选择，外植体清洁效果显著且外植体存活率高，达到了提高清洁效果及降低损伤率的技术目的。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种组织培养中外植体消毒方法，以实现对外植体消毒彻底，且损伤率降低的技术目的。
该组织培养中外植体消毒的方法，包括：
S11:清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；
S12:将所述清洗后外植体浸泡在70％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；
S13:将所述第一预处理外植体浸泡在5％-10％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；
S14:将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；
S15:冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。
上述消毒方案，为了能够消毒达到良好效果，包含多个消毒步骤，并采用不同清洗剂，以保证消除不同微生物的目的。同时，为了不影响外植体成活率不同清洗剂采用合适的配比以保证外植体植株安全。
如下：是针对以上步骤的优选方案，需要说明的是：如下方案作为优选，实验人员可根据实际情况在合理范围内选用，并不仅仅局限于此：
S11中：清洗干净外植体表面实现为：
将外植体用自来水冲洗5-7次，再将所述外植体材料切成段或块或片状，自来水清洗外植体表面达到10-15min。
将外植体用自来水冲洗5-7次，以洗净表面的灰尘等杂质。
S12中：在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间实现为：
升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡10-20s。
S13-14中：在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间实现为：
升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡5-10min。
S15中：冲洗所述第三预处理外植体包括：利用无菌水冲洗所述第三预处理外植体材料10-15min。
综上所述：
本发明实施例的组织培养中外植体消毒方法合理使用洗剂，并配合清洁/振动的技术，对外植体进行一系列消毒操作，由于时间、步骤及清洗剂配比的正确选择，外植体清洁效果显著且外植体存活率高，达到了提高清洁效果及降低损伤率的技术目的。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明实施例的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明实施例将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (5)

1.一种组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于，包括：
清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；
将所述清洗后外植体浸泡在70％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；
将所述第一预处理外植体浸泡在5％-10％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；
将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；
冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。
2.如权利要求1所述的组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于，清洗干净外植体表面实现为：将外植体用自来水冲洗5-7次，再将所述外植体材料切成段或块或片状，自来水清洗外植体表面达到10-15min。
3.如权利要求1所述的组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于，
在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间实现为：
升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡10-20s。
4.如权利要求1所述的组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间实现为：
升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡5-10min。
5.如权利要求1所述的组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于，冲洗所述第三预处理外植体包括：利用无菌水冲洗所述第三预处理外植体材料10-15min。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107711516A (zh) * 2017-11-27 2018-02-23 佛山市恒爱网络科技有限公司 一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法
CN109588315A (zh) * 2018-12-31 2019-04-09 西南民族大学 一种苔藓植物外植体的消毒方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102326514A (zh) * 2011-11-01 2012-01-25 四川中测科技投资有限公司 茶树外植体无汞消毒剂及外植体消毒方法
CN103651144A (zh) * 2013-12-20 2014-03-26 常熟理工学院 一种杨梅快速繁殖的方法
CN104082140A (zh) * 2014-06-30 2014-10-08 苏州派腾生物医药科技有限公司 一种盒子草快速繁殖的方法
CN104106464A (zh) * 2014-06-12 2014-10-22 南京工业大学大丰海洋产业研究院 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CN104106465A (zh) * 2014-06-12 2014-10-22 南京工业大学大丰海洋产业研究院 一种植物组织培养中外植体消毒的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102326514A (zh) * 2011-11-01 2012-01-25 四川中测科技投资有限公司 茶树外植体无汞消毒剂及外植体消毒方法
CN103651144A (zh) * 2013-12-20 2014-03-26 常熟理工学院 一种杨梅快速繁殖的方法
CN104106464A (zh) * 2014-06-12 2014-10-22 南京工业大学大丰海洋产业研究院 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CN104106465A (zh) * 2014-06-12 2014-10-22 南京工业大学大丰海洋产业研究院 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CN104082140A (zh) * 2014-06-30 2014-10-08 苏州派腾生物医药科技有限公司 一种盒子草快速繁殖的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
郭勇等: "《植物细胞培养技术与应用》", 31 January 2004 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107711516A (zh) * 2017-11-27 2018-02-23 佛山市恒爱网络科技有限公司 一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法
CN109588315A (zh) * 2018-12-31 2019-04-09 西南民族大学 一种苔藓植物外植体的消毒方法
CN109588315B (zh) * 2018-12-31 2021-05-28 西南民族大学 一种苔藓植物外植体的消毒方法

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