CN104106464B - 一种植物组织培养中外植体消毒的方法 - Google Patents

一种植物组织培养中外植体消毒的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104106464B
CN104106464B CN201410261359.4A CN201410261359A CN104106464B CN 104106464 B CN104106464 B CN 104106464B CN 201410261359 A CN201410261359 A CN 201410261359A CN 104106464 B CN104106464 B CN 104106464B
Authority
CN
China
Prior art keywords
explant
explant material
sterilization
out disinfection
carry out
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201410261359.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104106464A (zh
Inventor
张本厚
王桂兰
陈集双
胡燕花
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
INSTITUTE OF DAFENG MARINE INDUSTRY NANJING UNIVERSITY OF TECHNOLOGY
Original Assignee
INSTITUTE OF DAFENG MARINE INDUSTRY NANJING UNIVERSITY OF TECHNOLOGY
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by INSTITUTE OF DAFENG MARINE INDUSTRY NANJING UNIVERSITY OF TECHNOLOGY filed Critical INSTITUTE OF DAFENG MARINE INDUSTRY NANJING UNIVERSITY OF TECHNOLOGY
Priority to CN201410261359.4A priority Critical patent/CN104106464B/zh
Publication of CN104106464A publication Critical patent/CN104106464A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104106464B publication Critical patent/CN104106464B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明公开了一种植物组织培养中外植体消毒的方法，采用材料自来水对外植体材料进行清洗，然后采用环氧乙烷对清洗后的外植体材料进行消毒，最后采用消毒液在超声下对外植体材料进行消毒液处理，完成消毒。该方法杀菌容易、杀菌效果好，毒性小，不易损伤材料。

Description

一种植物组织培养中外植体消毒的方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种植物组织培养中外植体消毒的方法。
背景技术
植物组织培养用的外植体大部分取自田间，表面上附着大量的微生物，这是组织培养的一大障碍。因此在材料接种培养前必须要消毒处理，消毒一方面要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤组织材料而不影响其生长。因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要一环。
现有的消毒方法，消毒效果不好，材料上的微生物不能最大限度的被杀死，并且，现有的消毒方法，外植体易受到损害，大大降低了植物组织培养的成活率。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有植物组织培养中外植体消毒方法中存在的问题，提出了本发明。
因此，本发明其中目的是提供一种植物组织培养中外植体消毒的方法，该消毒方法，其消毒容易、消毒效果好，毒性小，不损伤材料。
为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，本发明提供了如下技术方案：一种植物组织培养中外植体消毒的方法，采用材料自来水对外植体材料进行清洗，然后采用环氧乙烷对清洗后的外植体材料进行消毒，最后采用消毒液在超声下对外植体材料进行消毒液处理，完成消毒。
作为本发明一个优选的实施例，所述消毒液为升汞和吐温的混合溶液。
作为本发明一个优选的实施例，其具体包括如下步骤：
步骤一：利用自来水冲洗外植体材料30~50min；
步骤二：在室温下，利用环氧乙烷对上述清洗后的外植体材料进行消毒2~4小时，完成预处理；
步骤三：将上述预处理的外植体材料浸入含有0.025~1%的升汞和0.1～0.2％吐温的混合溶液中，并用超声装置超声波震荡5～15min，然后用无菌水清洗外植体材料5~7次。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤一中，自来水冲洗外植体材料的时间为50min。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤二中，采用环氧乙烷对清洗后的外植体材料进行消毒的时间为3小时。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤三中，将预处理的外植体材料浸入含有0.025%的升汞和0.1％吐温的混合溶液中，并用的超声波震荡10min。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤三中，采用无菌水清洗外植体材料的次数为6次。
作为本发明一个优选的实施例，所述超声装置的功率为90W。
本发明提供了一种植物组织培养中外植体消毒的方法，其杀菌容易、杀菌效果好，毒性小，外植体材料不易损伤。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
本发明提供了一种植物组织培养中外植体消毒的方法，采用材料自来水对外植体材料进行清洗，然后采用环氧乙烷对清洗后的外植体材料进行消毒，最后采用消毒液在超声下对外植体材料进行消毒液处理，完成消毒。
以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
需要说明的是，本发明使用的消毒液为升汞和吐温的混合溶液。
实施例1
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：利用自来水冲洗外植体材料30min；
步骤二：在室温下，利用环氧乙烷对上述清洗后的外植体材料进行消毒2小时，完成预处理；
步骤三：将上述预处理的外植体材料浸入含有0.025%的升汞和0.1％吐温的混合溶液中，并用超声装置超声波震荡5min，然后用无菌水清洗外植体材料5次，完成消毒。
实施例2
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：利用自来水冲洗外植体材料50min；
步骤二：在室温下，利用环氧乙烷对上述清洗后的外植体材料进行消毒3小时，完成预处理；
步骤三：将上述预处理的外植体材料浸入含有0.025%的升汞和0.1％吐温的混合溶液中，并用超声装置超声波震荡10min，然后用无菌水清洗外植体材料6次，完成消毒。
实施例3
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：利用自来水冲洗外植体材料40min；
步骤二：在室温下，利用环氧乙烷对上述清洗后的外植体材料进行消毒4小时，完成预处理；
步骤三：将上述预处理的外植体材料浸入含有1%的升汞和0.2％吐温的混合溶液中，并用超声装置超声波震荡15min，然后用无菌水清洗外植体材料7次，完成消毒。
实施例4
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：利用自来水冲洗外植体材料50min；
步骤二：在室温下，利用环氧乙烷对上述清洗后的外植体材料进行消毒2小时，完成预处理；
步骤三：将上述预处理的外植体材料浸入含有0.025%的升汞和0.1％吐温的混合溶液中，并用超声装置超声波震荡10min，然后用无菌水清洗外植体材料5次，完成消毒。
灭菌效果
选用本发明实施例1~4的消毒方法和传统的灭菌方法对外植体进行组织培养实验，其无菌率对比表见表1：
表1本发明的消毒方法和传统的杀菌方法对细菌和真菌的杀灭效果
序号 杀菌难易程度 无菌率（%）
实施例1 易 96
实施例2 最易 100
实施例3 最易 100
实施例4 易 99
传统杀菌方法 不易 20.1
需要说明的是，本发明对外植体的种类和部位不做限制。
由此可见，本发明的植物组织培养中外植体消毒的方法，其杀菌容易、杀菌效果好，毒性小，不易损伤外植体材料。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (1)

1.一种植物组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于：采用自来水对外植体材料进行清洗，然后采用环氧乙烷对清洗后的外植体材料进行消毒，最后采用消毒液在超声下对外植体材料进行消毒液处理，完成消毒，
所述消毒液为升汞和吐温的混合溶液，
其具体包括如下步骤：
步骤一：利用自来水冲洗外植体材料30~50min；
步骤二：在室温下，利用环氧乙烷对上述清洗后的外植体材料进行消毒2~4小时，完成预处理；
步骤三：将上述预处理的外植体材料浸入含有0.025~1%的升汞和0.1～0.2％吐温的混合溶液中，并用超声装置超声波震荡5～15min，然后用无菌水清洗外植体材料5~7次，
所述超声装置的功率为90W。
CN201410261359.4A 2014-06-12 2014-06-12 一种植物组织培养中外植体消毒的方法 Expired - Fee Related CN104106464B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410261359.4A CN104106464B (zh) 2014-06-12 2014-06-12 一种植物组织培养中外植体消毒的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410261359.4A CN104106464B (zh) 2014-06-12 2014-06-12 一种植物组织培养中外植体消毒的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104106464A CN104106464A (zh) 2014-10-22
CN104106464B true CN104106464B (zh) 2016-03-30

Family

ID=51703610

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410261359.4A Expired - Fee Related CN104106464B (zh) 2014-06-12 2014-06-12 一种植物组织培养中外植体消毒的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104106464B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105850730A (zh) * 2016-04-06 2016-08-17 南京晓庄学院 植物材料的表面消毒方法
CN106613951A (zh) * 2016-10-21 2017-05-10 定州市绿谷农业科技发展有限公司 一种组织培养中外植体消毒的方法
CN106888976A (zh) * 2017-04-01 2017-06-27 中国农业科学院草原研究所 植物组织培养外植体消毒装置

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102823497A (zh) * 2012-09-19 2012-12-19 广东省林业科学研究院 枫香无性系组培繁育方法
CN103120126A (zh) * 2013-02-04 2013-05-29 南京工业大学 利用间歇浸没生物反应器进行金线莲组织培养扩繁方法
CN103125389A (zh) * 2013-03-04 2013-06-05 北京农业生物技术研究中心 一种提高结缕草高频再生系循环转化利用的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102823497A (zh) * 2012-09-19 2012-12-19 广东省林业科学研究院 枫香无性系组培繁育方法
CN103120126A (zh) * 2013-02-04 2013-05-29 南京工业大学 利用间歇浸没生物反应器进行金线莲组织培养扩繁方法
CN103125389A (zh) * 2013-03-04 2013-06-05 北京农业生物技术研究中心 一种提高结缕草高频再生系循环转化利用的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
环氧乙烷灭菌;黄靖雄;《中华医院感染学杂志》;20041231;第14卷(第12期);第1435-1439页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104106464A (zh) 2014-10-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104250616A (zh) 一种植物内生菌的分离方法
CN104106465A (zh) 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CN104106464B (zh) 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CN105532469A (zh) 一种杂交构树组织培养的方法
CN101138317B (zh) 组织内带菌外植体消毒的处理方法
CN104115744B (zh) 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CN104106466A (zh) 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CN108308025A (zh) 百合科十二卷属多肉植物启动诱导的方法及启动诱导培养基
CN103283604B (zh) 百合组织培养中脱除外植体内生菌的方法
CN104115745B (zh) 一种植物组织培养中外植体消毒的方法
CO2020001205A2 (es) Método para la desinfección de suelos u otros sustratos de cultivo agrícola
CN204093765U (zh) 一种无土栽培园艺设施的清洗消毒装置
KR200387935Y1 (ko) 미생물 배양기의 살균장치
CN106613951A (zh) 一种组织培养中外植体消毒的方法
CN204219432U (zh) 一种用于手术医疗小型器械的消毒装置
CN204191321U (zh) 一种喷淋式外植体消毒装置
CN104871752B (zh) 一种橡胶树苗木丛生芽诱导培养前的外植体预处理方法
CN106171997A (zh) 一种同时去除植物组织培养时外植体表面和内生菌的方法
CN105594342A (zh) 用于乌菜无菌苗培养的种子消毒方法
CN107711516A (zh) 一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法
CN104621188B (zh) 一种纺织废水室用处理剂的制备方法
CN105309478A (zh) 一种源于木糖的稻曲病菌抑制物
CN102405844B (zh) 东亚砂藓组织培养过程中配子体消毒方法
CN104724799B (zh) 一种纺织废水室用处理剂
CN103828645A (zh) 一种番茄溃疡病的防治方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160330

Termination date: 20160612